СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-ЛИЗИНА Советский патент 1972 года по МПК C12P13/08 

Изобретение относится к микробиологии.

Известен .снособ получения L-лизина путем глубинного выращивания его продуцента Brevibacterium sp. 22 на питательной среде, содержащей сахар, азотные, фосфорные соли и стимуляторы роста, стабилизации культуральиой жидкости нетоксичной кислотой, например серной или соляной, упаривания стабилизированной жидкости и высушивания до порошкообразного состояния.

Полученный концентрат лизина содержит 12-20% кристаллической аминокислоты.

Однако кормовой концентрат лизина, полученный по известному способу, гигроскопичен, что затрудняет его дозирование.

Основной причиной гигроскопичности концентрата являются остаточные сахара, где концентрация достигает 5-10%.

Прн обезвоживании, а также в сухом кормовом концентрате лизина происходят сахаро-аминные реакции, которые снижают концентрацию лизина и других аминокислот, присутствующих в небольших количествах.

Цель изобретения - интенсификация процесса биосиитеза, снижение гигроскопичности полученного концентрата лизина, а также снижение потерь лизина в процессе выращивания после ассимиляции продуцентом Сахаров до получения остаточной концентрации их, преимущественно равной 3%.

Это достигается тем, что в культуральную жидкость вводят в стерильных условиях культуру микроорганизмов Trichosporon М-19, не ассимилирующую лизин, в количестве 4-12% по объему культуральной жидкости.

Далее проводят совместное культивирование этих культур до полного усвоения ими остаточных Сахаров.

Совместное культивирование Trichosporon cutaneum М-19 и Brevibacterium .sp. 22 производится до полного исчезновения в культуральной жидкости остаточных Сахаров.

Для повышения выхода и концентрации

L-лпзина в пичательиую среду можно добавить а- -диаминопимелиновую кислоту. Полученную на этой среде культуральную жидкость, содержащую Z-лизин, стабилизируют нетоксичной кислотой, например соляной или

серной. Кроме того, в нее вводят соли сернистой кислоты, например бисульфат натрия (0,1-0,2% от всего количества жидкости).

После этого стабилизированную жидкость (рН 3-5) упаривают в выпарной установке

до содержания сухих веществ 30-40%, а затем высушивают па распылительпой сушилке до порошкообразного состояния или после добавления наполнителя (пшеничных отрубей) на конвективных сушилках, например

Высушенный последним способом материал измельчают на микромельнице и расфасовывают в герметичную упаковку, например в полиэтиленовые мешки.

Для получения кристаллического Z-лизина, пригодного для пищевых и лечебных целей, культуральную жидкость центрифугируют и фильтруют. После этого ее обрабатывают на колонке монообмениыми смолами, например сульфокатиониюм СДВ-3 или КУ-2 Е-, аммонийной форме при рН культуральной жидкости 7.

Для удаления неадсорбированных аминокислот и примесей среды колонку после адсорбции промывают водой, L-лизин элюируют 2N раствором аммиака .Затем элюат упаривают в вакууме до сиропообразного состояния и нейтрализуют соляной кислотой до рН 4,9.

Полученный L-лизин-соляную кислоту кристаллизируют из раствора при добавлении трех объемо1В спирта. После этого L-лизин-соляную кислоту отделяют от маточника, перерастворяют в малом объеме воды, обрабатывают небольшим количеством угля и перекристаллизовывают. Кормовой концентрат лизина, полученный предлагаемым способом содержит L-лизина 16-22%, причем его гигроскопичность уменьшилась более чем в два раза по

сравнению с концентратом, полученным известным способом.

Предмет изобретения

1.Способ получения L-дизина путем глубинного выращивания его продуцента Вгеvibacterium sp. 22 на питательной среде, содержащей сахар, азотные, фосфорные соли и стимуляторы роста, стабилизации культуральной жидкости нетоксичной кислотой, например серной, соляной, упаривания стабилизированной жидкости и высушивания до порошкообразного состояния, отличающийся тем, что, с

целью интенсификации процесса биосинтеза, снижения гигроскопичности полученного концентрата лизина, а также снижения потерь лизина в процессе выращивания после ассимиляции продуцентом Сахаров до получения остаточной концентрации их, преимущественно равной 3%, в культуральную жидкость вводят в стерильных условиях культуру микроорганизма, не ассимилирующую лизин, и проводят совместное культивирование этих культур до

полного усвоения ими остаточных Сахаров.

2.Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве культуры микроорганизмов, не ассимилирующей лизин, применяют Trichosporon cutaneum М-19 в количестве 4-12% по объему

культуральной жидкости.