СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНГИБИТОРА АМИЛАЗЫ Советский патент 1972 года по МПК A61K38/56 A61K35/78 

Изобретение отиосится к биохимии и касается способов получения ингибитора амилазы.

Известеи способ получения ингибитора амилазы путем экстракции пшеипчной муки спиртом с последующим выделепием целевого продукта.

Указаппый способ ие обеспечивает тюлучепия достаточно чистого препарата с удовлетворительным выходом.

Целью изобретения является повышение выхода и степени чистоты целевого продукта.

Эта цель достигается тем, что исходпое сырье экстрагируют 10-90%-ным водным раствором 1изших сииртов (Ci-Сз) или водными электролита.ми при рН 1-7. В качестве сырья можно использовать муку грубого иомола или пшеничную клейковину (глютен).

Пример 1. I кг ишеничной муки гомогенизируют п 2 л 66%-ного этанола, доводят значение рП до 3-3,5 добавлением соляной кислоты, иеремешивают 30 мин Ири комнатной температуре и центрнфугируют 10 мин при 6000 об/мин. Падосадочную жидкость отделяют, а осадок повторно экстрагируют при тех же условиях. Объедиие1п-1ый экстракт нейтрализуют аммиаком, отделяют выпавший осадок балластных белков центрифугированием, а раствор уиаривают до 300 мл при остаточном давлении 20 мм рт. ст. и температуре

40-SO C. Остаток вновь центрифугируют и после диализа в течение 8 час подвергают лиофилизацпи. Получают 10 г препарата, содержащего 140.000 ед/г иигибитора панкреатической амилазы.

Пример 2. 1 /vv пшеничной муки гомогеiui3npyioT 13 2 А 30%-ного этанола, доводят рН до 3-3,5 соляной кислотой, перемешивают в течение 1 lac при комнатной температуре и центрифугируют 10 лг«н при 6000 об/мин. Надосадочную жидкость отделяют, нейтрализуют аммиаком до рП 6,8 н отделяют осадок балластных белков центрифугированием. Прозрачный раствор выдерживают в течение ночи при темиературе минус 15°С, прозрачный раствор декантнруют, а осадок центрифугируют ири минус в течение 10 мин при 6000 об/мин. К остатку добавляют охлажденHbiii абсолютный этанол и сушат в вакуум сушильном илкафу. Получают 10 г препарата, содержащего 160.000 ед1г ангибитора амилазы.

П Р и м е Р 3. 200 г пшеничной муки гомогенизируют в 800 мл воды, доводят рН до 3,3, неременшвают 30 .iin при комнатной темИерат) ре и центриф тируют 30 мин. Падосадочную жидкость нейтрализуют аммиаком, снова центрифугируют и добавляют к раствору ПО л/л абсолютиого этаиола. Смесь .фНТьтруют и осаждают целевой продукт из раствора добавлением 5 л абсолютного этанола. Осадок промывают абсолютным этанолом и сушат в вакууме. Получают 1,5 г препарата, содержащего 90.000 ингибитора амилазы. Пример 4. 500 г пшеничной муки гомогенизнруют в 2 уг 75%-ного метанола, перемешивают в течение 1 час и фильтруют. Фильтрат по каплям добавляют в 6,4 л ацетона, отделяют вынави1нй осадок декантацией и промывают его абсолютным этанолом. После высушивания в вакууме получают 12 г препарата, содержащего 40.000 edj& ингибитора амилазы. Пример 5. 10 кг пшеничной клейковины нри перемешивании добавляют к 50 л 30%-иого метанола, доводят рН соляной кислотой до 3,5, перемешивают 45 мин и нейтрализуют аммиаком. Осадок отделяют центрифугнро.ваннем в течение 10 мин при 2000 об/ишя, а падосадочпую Лчидкость оставля-ют на ночь при температуре мн}1ус 10°С. Выпавший осадок отделяют декантированием, затем центрифугируют при минус 5°С, промывают спиртом и эфиром и сушат в вакууме. Получают 180 г препарата, содержащего 775.000 ед1г ингибитора амилазы. П р е д м е т и 3 о б р е т е н и я 1.Способ получеиия иигибитора амилазы путем экстракции ишеничиой муки спиртом с последующим выделением известными приемами, отличающийся тем, что, с целью повышепия выхода и степени чистоты целевого продукта, исходное сырье экстрагируют 10-90%ным водным раствором низших спиртов (Ci-Сз) или водиыми электролитами при рН 1-7. 2.Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве исходного сырья используют пшеничную муку грубого помола. 3.Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве исходного сырья используют ншеиичиую клейковииу (глютен).