СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ КОМПЛЕКСА БАЦИТРАЦИНА Советский патент 1973 года по МПК C12P21/04 

Изобретение относится к способам выделения антибиотика бацитрацина, синтезируемого микроорганизмами Вас. subtilis и Вас. lichenformis, в особеиности к способам, при которых комплекс бацитрацина выделяют путем осаждения. Известен способ выделения комплекса бацитрацина из фильтрата культуральной жидкости бактерии-продуцента, при котором комплекс бацитрацина осаждают алкил- или арилсульфонатом или диизоиафтилсульфонатом. При этом получают продукт с содерл анием бацитрацива от 14 до ,20%. Кроме того, для выделения бацитрацина требуется применить всиомогательное фильтрующее вещесгво. Для повышеиия выхода бацитрацина по предлагаемому способу осаждение производят воднорастворимой солью конденсата формальдегиднафтилинсульфокислоты, причем, при значении рН от 2 до 9 - предпочтительно ее щелочной солью, а при значеиии рН от 5,5 до 9 --в присутствии солей двухвалентных металлов. Бацитрацин, легко растворимый в воде, с конденсатами формальдегиднафталинсульфокислоты образует в кислой водной среде нерастворимый комплекс, и этот комплекс в присутствии двухвалентных солей металлов также нерастворим в водной среде. Выгоднее выделять бацитрацин из водных растворов, чем известн1ымн средствами осаждения. Для этого образуют с конденсатами формальдегиднафталннсульфокислоты трудно растворимый, но легко осаждаемый осадок с содержанием бацитрацпна значительно большим, чем в известных осадках. В качестве осадителя берут смесь конденсатов формальдегнднафталинсульфокислоты с различным числом звеньев. причем, степень конденсации находится в интервале числа звеньев от 2 до 9. Большим преимуществом изобретения является образование осадка без добавления двухвалентного металла в кислой среде в иитервале значений рН от 2 до 5,5. Можно также конденсат формальдегиднафталинсульфокислоты и соль двухвалентного металла одновремепно вводить в раствор бацитрацина. В этом случае лучше устанавливать значение рН выше 5,5, нредночтительио между 7 и 8. Выпавший осадок отделяют фильтрованием и высушивают. Содержание бацитрацина в полученном таким снособо.м продукте почти совпадает с количеством бацитрацина, находившимся в фильтрате. Этот продукт можно непосредственно использовать для кормления животных.

Пример 1. В 500 мл фильтрата, содержащего 232 ед./мл бацитрацина со значением рН 3,5, вводят 6 мл 33%-ного водного раствора конденсата формальдегиднафталинсульфокислоты (тамол N.N.O.) и 1 г сульфата цинка. При помощи 40%-него раствора едкого натра рН раствора доводят до 7,5 .Смесь, содержащую осадок, перемешивают 30 мин и фильтруют. Осадок сущат в вакуумсушильном шкафу при . Получают 5,3 г продукта, содержащего 41,8% бацитрацина, что составляет 95,7% содержания бацитрацин а в исходном фильтрате.

Пример 2. В 500 мл фильтрата, содержащего 321 ед/мл бацитрацина со значение.м рН 3,5, добавляют 6 мл 33%-ного водного раствора конденсата формальдегиднафталинсульфокислоты (кортамол N.N.O.) и 1 г сульфата цинка. При помощи 40%-ного раствора едкого натра устанавливают значение рП раствора на уровне 7,6. После 30 мин переме щивания осадок отфильтровывают и сущат в вакуумсушильном шкафу при 45°С. В результате получают 7 г продукта, содержащего 47% бацитрацина. Этот продукт сохраняет 100% активность исходного фильтрата.

Пример 3. В 500 мл фильтрата, содержащего 321 ед./мл бацитрацина, полученного ферментацией (рН 6), добавляют 6 мл 33%ного водного раствора конденсата формальдегиднафталинсульфокислоты (кутамол N.N.O.) и 1 г сульфата цинка. Затем при помощи 40%ного раствора едкого натра рН раствора доводят до 7,7 и после 30 мин перемещивания отфильтровывают осадок. Осадок сушат в вакуумсушилке при 45°С. Получают 7,75 г продукта, содержащего 41% бацитрацина, что составляет 98,7% бацитрацина, содержащегося в исходном фильтрате.

П р и м е р 4. В 500 мл фильтрата, содержащего 321 ед./мл бацитрацина, имеющего ферментационное происхождение, добавляют 6 мл 33%-ного водного раствора конденсата формальдегиднафталинсульфокислоты (кутамол N.N.O.). Затем при помощи 25%-ного раствора серной кислоты рН доводят до 3. Выпавший осадок фильтруют и затем сушат в вакуумсушилке при 45°С. Получают 7,55 г продукта, содержащего 42% бацитрацина. В этом продукте содержится 98,7% бацитрацина исходного раствора.

Пример 5. В 2500 мл раствора, содержащего 157 ед./мл бацитрацина, имеющего ферментационное происхождение, добавляют 43 мл 33%-ного водного раствора конденсата формальдегиднафталинсульфокислоты (тамол N.N.O.). Затем при помощи 10%-ной соляной кислоты рП доводят до 3,5 и отфильтровывают осадок. Получают 22,2 г продукта, содержащего 35,3% бацитрацина. В этом продукте содержится 100% бацитрацин-а, содержавшегося в исходном растворе.

Предмет изобретения

Способ выделения комплекса бацитрацина из фильтрата культуральной жидкости бактерии-продуцента путем осаждения, отличающийся тем, что, с целью получения более высокого выхода бацитрацина, осаждение осуществляют солью конденсата формальдегиднафталинсульфокислоты, причем в интервале рП от 2 до 9 - предпочтительно ее щелочной солью, а в интервале рН от 5,5 до 9 - в присутствии солей двухвалентных металлов.