СПОСОБ ИНГИБИРОВАНИЯ ИЗОМЕРИЗАЦИИ ТРАНС- ДИЭТИЛСТИЛЬБЕСТРОЛА В КОРМОВЫХ СОСТАВАХ Советский патент 1973 года по МПК A23K1/165 A23K1/165 

Изобретение относится ж способу и.нгибирования изомеризации гранс-диэтилстильбестрола в гкорма.х.

Превращение г/оанс-диэтилстильбестрола в цис-мзомер в кормах можно предотвращать и иснользовать в качестве компонента корма для животных.

Предлагаемый способ отличается те,м, что г;)анс-ди:этилст,ильбест,рол смешивают с мочевиной -перед введением .в кормовые составы. Из0:ме.ри1зац.ия происходит в том случае, когда диэрилстильбестрол находится в виде распвора. В качестве раст1ворителя используют масла растительного про.исхождения, наП|римар соевое масло, и пищевые гликоли, пропиленгликоль и полиэтиленгликоль 200.

Многие из обычно -применяемых компонентов, входящих iB состав кормов для животных, «anpHiMeip, пщеничные -зе(рна, соевая мука, Я1Ч(менные зерна, гралулы из люцерны и подобные ко.м1ноненты содержат вепдества, растворяющие дизтилстильбестрол, например, жИры растительного п-роиск жденяя, ксантоф.иллы, спирты и т. л. 7уС7анс-диэтилстильбестрол является сильнодействующим эстрогеном, который поглощается кожей и слизистой оболочкой и вызывает нежелательные вторичные женские половые етризнаки у лиц мужского пола. Поэтому необходимо, чтобы были приняты чрезвычайные меры предосторожности для защиты работников даже от незначительных количеств эстрагена. Перед операц-ией сме-щи-вания диэтилстильбестрол смещивается с относительно крупными сухими немаслянистьтаи частицами. Они меньще прилИПают к одежде и коже ра-ботШ1к:ов, что эффектно снижает опасность, связанную с обработкой диэтилстильбестрола.

При осуществлен-ии предлагаемого способа с использованием моче(вины грянс-диэтилстильбестрол сначала смещивают с мочев)ной, что дает возможность получить состав, в KOTOipOM больщое количество частиц трансдиэтилстильбестрола и мочевины находятся в виде прочной смеси.

Составы, содержащие гранс-диэтилстильбестрол и мочевину, пригодны для использования, могут со-держать 0,22-95 вес. %, трансдиэтилстильбестрола н 5-99,78 вес. % мочевины.

Получение состапза, где гранс-диэтилстнльбестрол и мочбви-на почти одновременно распределяются в гранулах, частицы которых шриемле мы для введения в рацион корма л ивотных, сопровол дается диспергированием гранс-ди-этилстильбестрола в негалогенированном жидком связующем, однородны.м смещиВанием необходимого «оличестша мочевины с дисперсией, упариванием из дисперсии жидкого связую-щего и обработкой полученного

твердого состава до образования гранул с заданным размером частиц.

Жидкими связующими для трименения мочевины, по которым может быть диспергирован т/7анс-диэтилстильбестрол, являются связующие, растворяющие как грамс-диэтилстильбестрол, так и мОчевину, а та клее связующие, растворяющие только оди« из ;коМ|Г онентов.

Другие жидкие связующие включают водные дисперсии метилцеллюлозы, натриевое производное карбоксиметилцеллюлозы, омсиПрОПИЛЦеЛЛЮЛОЗу, ПОЛИВИНИЛ1ПИ ррОЛИДОН и

т. п. воду, диэтиловый эфИ(р, н-пролиловый эфир, изолролиловый эфир, бензол, .н-лентан, 2-метилбута1Н, н-гексан, 2-метилпантан, З метил-пентан (изогексан), 2,2-диметилбутан, 2,3диметилбутан, и-нептан, 2,2-диметилиентан, 2,2,3-триметил:бутан и т. п.

При осуществлений способа реко1мендуется растворить гранс-диэтилстильбестрол в метаноле, 95%-ном этаноле, н-горопаиоле, ызо-нропаноле или ацетоне нри .комнатной температуре и концентрации 5-50 г на 100 мл растворителя. Лучше растворять 30-40 г трансдиэтилстильбестрола в 100 мл 95%-(но:го этанола.

Гранс-диэтилстильбестрол можно также смешивать в ЖИдком связующем, лалример, в виде 0,1-5%-ной вод-ной дисперсии метилцеллюлозы в воде, н-пентане и подобных растворителях 1при 1концвнтрации 5-40 г на 100 мл жидкого связующего три комнатной тем пературе. В случае, когда гранс-диэтилст.ильбестрол находится в суспензии, а не в растворе, раз:мер частиц эстрогена должеи составлять не более 44 ж/с.

Раствор или суспензия граяс-диэтилстильбестрола, полученр ые, .как описано выше, тщательно смешивают с ;мочевиной в таком количестве, чтобы соотношение т/;а«с-диэтилстильбестрола ,к мочевИЬе составляло от 1:450 до 19:1 вес. ч. Л ндь:ое связующее упаривают при температуре предпочтительно ниже 50° С, что приводит К образованию ,в остатке больщого количества частиц г/7а«с-диэтилстильбестрола и мочевииы, почти однородно распределенных И в тесном контакте друг с другом в твердом составе. Твердый состав обрабатывают таким образом, чтобы образовались частицы заданного , подходящие для введения в рацион кор-ма для животных.

Способ включает использоваиие состава, полученного разбрызгиванием раствора трансдиэтилстильбестрола в 95%-иом этаноле на частицы мочевины, пригодной для корма, при перемешивании; в этом случае некоторое количество -мочевины растворяется в 95%-iHOM этаноле, а затем отлагается совместно с трансдиэтилстильбестролом на нерастворимую мочезину, поскольку растворитель упаривается Используются частицы мочевины с размерами, ПОДХОДЯЩИМИ для введения в рацион корма для животных. Скорость разбрызгивания раствора тра«с-дйэтилстильбестрола регулируется таким образом, чтобы смешивающая способность слоя из частиц мочевины не уменьшалась и чтобы смешивание продолжалось до тех пор, пока .продукт будет содержать 1 -100 г Гуоанс-диэтилстильбестрола на 453 г с.меси мочевины и гранс-диэтилстильбестрола. Такой продукт „можно получить также путем смешивания транс-диэтилстильбестрола в 0,5%-йой водной дисперсии метилцеллюлозы и разбрызгиванием суспензии на частицы .мочевины, как описано выше (для водного раствора этанола).

По второ.му варианту гранс-диэтилстильбестрол можно диснергировать при концентрации 5-50 г на 100 мл в жидко.м связующем, в котором мочевина находится в растворе. МочевИну добавляют в жидкой дисперсии т-раНС-диэтилстильбестрола в таком количестве, чтобы соотношение гранс-диэтилстильбестрола к мочевине составляло величину в интервале от 1:450 до 19:1 -и чтобы количество мочевины составляло не менее 5% от количества гранс-диэтилстильбестрола в жидком связующем. Компоненты тщательно и одиородно смешивают и жидкое связующее упаривают при температуре не выше 50° С под вакуумОМ. Полученный твердый состав распыляют ца частицы размером, подходящим для введения в состав корма для животных.

По третьему варианту подходящий состав, содержащий транс-диэтилст1ильбестрол и мочевину, люжно получать диспергированием 0,22-22 вес. % гранс-диэтилстильбестрола с Размерам частиц 44 мк или менее в расплавленной .мочевине при температуре 135-170° С, быстрым охлаждением расплава, что приводит к застыванию при поддержании дисперсии в гомогенном состоянии, и сортировкой полученного твердого состава с образованием гранул. Приведенный интервал температур рекомендуется, так как было найдено, что некоторое количество цис-изомера образуется при плавлении гранс-диэтилстильбестрола прИ температуре при.ме|рно 171° С. Размер частиц лранул с гранспдиэтилстильбестролом предпочтительно должен составлять величину в интервале 150-850 мк. Л елательно, чтобы те 1пература снижалась до температуры застывао«1я, т. е. примерно до 133° С или ниже по возможаюсти настолько быстро, чтобы свести к минимуму образование биурета, которое происходит .медленно при нагревании мочевины выще точйи плавления. Биурет, хотя и являющийся нежелательным компонентом корма для животных, всегда присутствует в «езначительных количествах в мочевине.

Сортировка твердого состава может сопровождаться известными способа1ми, например, из;мельчением на любой мельнице с последующи.м просеиванкшм и получением частиц с размерами в нужных интервалах.

Еще один вариант описываемого способа прсдуо:,;а:;р;1Г.ает стабилизацию гранс-диэтилстильбестрола в составах /корма для животпых путем введения гранс-диэтилстильбестрола в виде колшонента соста-ва, содержа:щего частицы транс-знэгил-сгильбесг,рола, :каждая из которых Независимо одна от другой окружена почти непрерывным клейким покрытием из 1мо чавины. Такой состав рекомеадуется получйаъ Введением частигд т/оа:«с-диэгнлстильбестрола диаметром 100-1000 мк в аппарат, например, в лоток для покрытий, смеситель с ленточной лопастью, кашеру с нсевдаожижениым слоем или в любое другое устройство, котО(рое можно использовать для оооб:Я1ения вра.щаю.цетося реверсивного движения слою частиц. Моче1Ш-ну растворяют в 10-50 вес. об.% подходящего расгвогг.ителя, предпочти те л ыю в воде, причем распзо ;тель должен быть таким, в котором диэтилстильбестрол лочти не растворим. Начшгается смешивание слоя, и после лридаиня ему вращательного движения, добавляют раствор мочеВины ,по частям в небольшом возрастающем количестве или непрерывно в виде распыления тонких частид с такой .скоростью, чтобы не препятствовать равномерному .напрерывному движению часшд. Растворитель упаривают диффундированием теплого воздуха над движущимся слоем и внутри него при 40- 135° С. Добавление раствора мочевилы к движущимся частища.м продолжают до тех пор, лока все частицы .с-Д)Нэтилстильбест1рола не пОКроются оплащньш клейким покрытием из мочевины. Смещ.иванйб -и диффузию теплого воздуха «ад движущимся слоем и через него Продолжают до пол/наго уиаривания растворителя.

. Покрьтия мочевИНы можно достичь также добавлением расплавленной мочевины лри 135-170° С (К движущимся частицам трансдиэтилстильбестрола. Там1пературу мочевины следует поддерживать яиже 170° С, чтобы избежать плавления гран-с-диэтилсш1льбестрола и свести к минимуму образование биурета. При использовании расплавлевной .мочевины для покрытия частид ТуС аяс-д1иэтилстильбестрола рекомендуется нагревать при 60-125° С, чтобы избежать слйщком быстрого застывания мочевины и отложения неравномерного покрытия. Ско.рость добавления расплавленной M04eiBHHbi iK движущимся частицам варьирует в зависимости от тем/паратуры расплава, тамшературы движущегося слоя и от скорости поворота частиц в слое.

В общем, количество моч-евины, необходимое для достижения почти непрерывного покрытия частиц г/5анс-диэтилстильбестрола, обрапно пропорционально равмеру частиц, т. е. меньшие ча.стицы требуют больщего .количества мочевины. Частиц вел.ичиной порядка ЮОО мк М.ОЖНО покрывать до 5 вес. % мочеВИ1НЫ в расчете на вес гранс-диэтилстильбестрола. С другой стороны, частицы диаметром порядка 100 мк требуют наличия не менее 50 вес. % мочевины для получения равномерного покрытия. Мочевина в .количестве, избыточном по отношению к количеству, необходимому для осуществления непрерывного

покрытия, не способствует стабил.чзации транс-изомера, хотя и не причиняет вреда.

Количество Гу9й«с-диэт1илстильбестрола составе может составлять I-95% без «зменеп.ия эффективности состава. В то-м случае, когда диаметры частиц грянс-диэтилстильбестрола величиной порядка 150-850 мк, интервал размера частиц, особенно подходящих для введен.ИЯ в рационы «ормов животных, о.кружают почти непрерывно покрытие.м из .мочев.ияы при соотношении гранс-диэтилстильбестрола к мочев1ине от 1:3 до 3:1.

О.пределение содержания цис и гронс-д«этилстильбестрола в различных составах, описанных , можно осуществлять газолсидкостной хроматографией производных бистриметилсилилового эфира. Образец, содержащий смесь изомеров, вступает в реакцию с избытком Н,0-б«с-(т1риметилсилил)-ацетамида в течение примерно 20 мин, я эф.ирное производное извлекают хлороформом. Хлороформенный раствор затем вводят в хроматограф. Определение проводят при 220° С. Соотношение цис- « транс-изомеров

определяют путем подсчета площади пиков соответствующих .изом&ров. В случае жидких препаратов 3 капли образца адтуоают в реакцию с 0,5 мл М,0-5ыс-(триметилсилил)-ацетамида в течение 20 мин. Реакционный раствор

затем разбавляют хлороформом до объема 5 мл « разбавленный раствор вводят в хроматограф. Твердьге образцы подвергают анализу реакцией 1 г препарата с избытком N,O-6uc(три.метилсилил)- ацета-мида, и производное

б«с-триметилсилилового эфира экстрагируют хлорофор1мом, разбавляют и выводят в хроматограф.

Повышенная стойкость смесей (хранение при 37° С) транс-диэтилстильбестрола, полученньи описанньгм способом, приведена в таблице.

Смесь, приготов.тенная известным способом.

Пример 1. 100 г гра«с-диэтилст«льбестрола растворяют в 350 мл 95%-ного этанола

65

при 25° С. Раствор разбрызгивают на 4-5,26 частиц мочевины с величиной частиц от 20 до 60 мешей лри оеремашйвании с подходящей скоростью в невзрывоопаснам омес.ителе в месте, лркопособлелиам для ма ш1пуляции с воспламеняемыми растворителями. После завершения разбрызгивания опиртовото раствора полученный препарат лереносят «а противни для суш,ки и номепдают в вакуумную печь для удаления горючих ларов, и этанол упаривают при 50° С. Примерно через 1 час удаление спирта ззвершают. Полученный сухой препарат содержит т/7аН:С-ди1Этилстильбестрол в количестве 1 г на 453 г. -Сухой препарат гранулируют путем пропускания агло мерированного материала через машину ,для просеивания. Она имеет в верхней части сито с величиной отверстий 20 мешей, а в нижней части сито с величиной отверстий 60 мешей. Фракция гранул, Проходящая через сито с величиной отверстий 20 м9шей и не проходяшая через сито с величиной отверстий 60 мешей, пригодная для при.менения в качестве компонента «орма, содержаш,его 1 г гранс-диэтилстильбестрола на 453 г.

Добагвляют 453 г исходной смеси, содержащей 1 г гранс-диэтилстильбестрола, и смешивание продолжают .в течение 5-15 мин. Полученный полный кормовой рацион, содержащий гранс-диэтилстильбестрол, поступает на ферму для выращивания мясного крупного рогатого окота в количестве примерно 9060 г на голову, что приводит к потреблению примерно 10 мг транс-диэтилстильбестрола в день на голову круиноло рогатого скота.

Ниже приведен высококалорийный кормовой рацион для крупного рогатого скота, содержаший гронс-диэтилстильбестрол с концентрацией 0,5 мг.

Компоненты

Желтая кукуруза

Кукурузные коче1рыжки

Люцерновая ;мука, |Влажность 17%

Соевая мука после экспгирования .растворите (без 50% от1рубей)

Мочевина

Меласса тростниковая

Ди кал ьци и - ф осф а т

Карбонат кальция

Соль

Микроэле менты )

Витамин А и Да

Витамин Е

Итого: 906279,8

) Смесь микроэлементов содержит, %: 2,50 марганца Б виде окиси марганца; 0,07 йода в виде йодистого калия; 0,3 кобальта в виде карбоната кобальта; 0,5 меди в виде окиси меди и 20 цинка в виде сульфата цинка.

) Каждый фунт содержит 2000.000 ед. на 453 г витамина А и 227200 ед. на 453 г витамина Дг.

П р н м ер 2. 100 г гранс-диэтилстильбестрола с величиной частиц 44 мк или менее суспендируют в 0,5% водной дисперсии метилЦеллюлозы. Дисперсию г/ аяс-диэтилстильбестрола разбрызгивают «а 4,436 частиц мочевины, пригодной для корма, с размерами частиц 20-60 мешей при перемешивании с подходящей скоростью. После завершения разбрызгивания получ&нный препарат переносят на сушильные противни и помещают в вакуумную печь, и воду упаривают при 50° С. Примерно через 8 час вода испаряется, и полученный сухой пргпарат содержит трансдиэтилстильбестрол в количестве 10 г на 453 г. Сухой препарат превращают в гранулы, подходящие для введения в рацион корма для ЖИВОТНЫ1Х, как в примере 1.

Для получения кормовой смеси, содержащей 1 г транс-диэтилстильбестрола на 453 г 0 4077 г гранул люцерны и 453 г смеои трансдиэтилстильбестрола н мочевины загружают в смеситель, который работает в течение 5- 15 мин.

Полный кормавой рацион, содержащий 5 0,5 мг гранс-диэтилстильбестрола, получают из исходной люцерновой смеси по методике, описанной в npiHMeipe 1.

Пример 3. 100 г гракс-диэтилстильбестрола и 2,168 кг мочевины раство.ряют в 6 у; изопропилового эфира при 25° С. Изопропиловый эфир отгоняют под вакуумо.М, в остатке остается сухой препарат, содержа щий гранс-диэтилстильбестрол в 1количестве 20 г на 453 г. Полученный сухой препарат измель5 чают на мельнице небольшой (мощности, работающей со скоростью примерно 4000обЛ1Шн, что приводит к образованию граагул размером, пригодных для введения в кор:мовой рацион животных. Кормовую смесь, содержа0 щую 1 г грансндиэтилстильбестрола на 453 г, получают путем загрузки 8607 г соавой крупы, экстрагированной растворителем, и 453 г смеси тракс-диэтилстильбестрола и мочевины, полученной, как описано выше, в смесителе 5 с ленточной лопастью, где осуществляют перемещивание в течение 5-15 мин.

Полный кормовой рацион, содержащий 0,5 мг гранс-диэтилстильбестрола, получают из исходной соевой смеси по методике, опи0 санной в примере 1.

П р и.м е р 4. 100 г. трансчдиэтилстильбестрола с раз1мерО:М частиц 44 мк или менее диспергируют при тщательном перемешивани.н в 353,6 кг расплавленной (МОчевиньппрИ 150° С. 5 После добавления BiCero гранс-диэтилстильбестрола перемещивание продолжают еще npMMeipHo 5 мин. Охлаждают, перемещи;вание продолжают до тех пор, нока тампаратура расплава не достигнет примерно 135° С, после 60 чего из расцлава убирают мещалку. Застывание расплава происходит при тем.паратуре ниже 133° С. Полученный таким образом твердый препарат содержит гранс-диэтилстильбестрол в количестве 100 г на 450 г. Твердый 65 препарат измельчают на .мельнице небольшой

мощ.нооти, работающей со скоростью примерно 4000 об/мин, с образованлем гранул, имеющих величину, пригодную для введения в кормовой рацион животных. Кормовую смесь, содержащую 44847 г кукурузной муки и 453 г гранс-диэтйлстильбестрола, полученную, как описано выше, в смеситель с листовой лопастью, и смешивание продолжают в течение мин.

Полный кар:мовой ращ.ион, содержащий 0,5 мг грйнс-диэтилстильбестрола, .получают из смеси, содержащей кукурузную муку, по методике, описаниой в лримере 1.

Пример 5. 100 г г/оанс-диэтилстильбестрола с размерами частиц мк загружают в камеру с псавдосжиженным слоем, и слоя частиц псевдосжижа-ют продуванием теплого воздуха через слои снизу. В 25 мл воды растворяют 15 г мочевины. Раствор мочеви1ны тОНко распыляют в псевдосжиженный слой частиц г/оанс-диэтилстильбестрола через форсунку, расположенную в камере на дне слоя. Через слои противоточно расныле-нию раствора мочеВ|И«ы продувают теллый воздух при 50 С или ниже. Нанесение раствора мочевины регулируют таким образом, чтобы

происходило упаривание воды теплым воздухом, циркулирующим через слой. Распыление продолл ают до тех пор, пока не будет нанесен весь раствор мочев1илы, поэтод1у циркуляция теплого воздуха через слои продолжается еще 20 .чин после лрекращения распыления до полного удаления воды. В полученном составе 90% частиц г/5анслдиэтилстильбестрола или более окружены почти непрерывным

клейким покрытием из мочевины. Продукт содержит иримерно 87% г/ анс-днэтилстильбестрола. Кормовую смесь, содержащую 1 г г/7анс-|Диэтилстильбестрола на 453 г, получают загрузкой 44781 г пшеничных от.рубей и 499 г

смеси г/;акс-диэтилстильбестрола и мочевины, получе:Н ;ой, как описано выше, в смеситель с ледточной лопастью и перемешиванием 3 течение 5-15 мин.

П .р е д м е т изобретения

20

Способ ингибирования изо.меризад 1и трансдиэтилстильбестрола в кормовых составах для животных, отличающийся , что, транс-л этилстильбестрол смешивают с мочевиной перед введением в кормовые составы.