СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РОДАМИНА СУЛБФОФТОРИДА 200 В Советский патент 1974 года по МПК C12N7/06 

Изобретение относится к области медицины, точнее к получению диагностических препаратов.

Известен способ получения родамина сульфофторида 200 В, заключаюш,ийся в том, что хлороформный раствор родамина 200 В обрабатывают при нагревании пятихлористым фосфором, осаждают образовавшийся родамин сульфохлорид бензином, растворяют осадок в хлороформе и кипятят с фтористым калием, осаждают целевой продукт петролейным эфиром.

Однако такой способ не позволяет получить химически чистый препарат красителя, а поэтому его конъюгаты с белками имеют низкие красящие титры. С целью повышения выхода и степени чистоты целевого продукта по предлагаемому способу хлороформный раствор родамина сульфохлорида промывают раствором фтористого калия, нагреванию с фтористым калием подвергают непосредственно раствор образовавшегося родамина сульфохлорида и целевой продукт повторно осаждают нетролейным эфиром.

Пример. К5г родамина 200 В добавляют 80 мл сухого перегнанного хлороформа и 8 г РСЬ, смесь нагревают при кипении хлороформа в течение 2 час, затем добавляют еше 4 г PCls и продолжают нагревание еще 2 час. Реакционную массу охлаждают, фильтруют и

промывают три раза 10%-ным раствором фтористого калия. Хлороформный слой отделяют и сушат прокаленным сернокислым натром. Высушенный раствор кипятят в течение

2 час с 5 г фтористого калия. Горячий раствор срильтруют, упаривают до 30 мл и медленно нри переменпшании выливают в 0,8 л сухого петролейного эфира. Выпавшие кристаллы отфильтровывают и сушат при 60 С. Полученный осадок еше раз очищают путем осаждения 30 мл раствора красителя в хлороформе и 1 л петролейного эфира. Выход 60-65%. Краситель хранят в запаянных ампулах под вакуумом. Перед меткой белка расчетное количество красителя переосаждают и не высушивая растворяют в сухом ацетоне.

К 5 мл 2%-ного белкового раствора иммунного глобулина в 0,1 М карбонато-бнкарбонатном буфере рН 9,0 добавляют 0,5 мл 1%-ного

раствора красителя в сухом ацетоне. Конъюгацию ведут 30 мин при комнатной темнературе. Избыток красителя удаляют на колонке с сефадексом Г-50, иснользуя тот же буфер. Коиъюгацию бычьего (лошадинного) альбумина проводят аналогично.

Предмет изобретения

Способ получения родамина сульфофторида 200 В путем обработки при нагревании хлоро34

формного раствора родамина 200 В пятихло-стоты целевого продукта, хлороформный раристым фосфором, последующего нагреванияствор родамина сульфохлорида промывают

хлороформного раствора образовавшегося ро-раствором фтористого калия, нагреванию с

дамина сульфохлорида с фтористым калием ифтористым калием подвергают непосредствепвыделения целевого продукта осаждением5 но раствор образовавшегося родамина сульпетролейным эфиром, от л н ч а ю ш.и и с я тем,фохлорида н целевой продукт повторно осажчто, с целью повышения выхода и степени чи-дают петролейным эфиром.

419555