Способ получения карминомицина 1 Советский патент 1976 года по МПК C12D9/14 

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КАРМИНОМИЦИНА 1

1

Изобретение относится к производству антибиотиков,

Известен способ получения карминомицина, представляющего собой ко1-;плексный препарат, заключающийся в том, что культуральную жидкость Actinomoidura carminoitot /./io 4281 фильтруют, мицелий экстрагируют органическим растворителем смешивающимся с водой, например ацетоном, органический растворитель отгоняют, водный остаток обрабатывают четыреххлористым углеродом или петролейным эфиром при рН 4,0-4,5, экстрагируют водный раствор органическим растворителем, не смешивающимся с водой, например, хлороформом, концентрируют, хроматографируют на колонке с кремниевой кислотой, осаждают неполярным органическим растворителем целевой продукт, который из осадка экстрагируют водой и лиофилизируют.

Целью изобретения является повышение выхода целевого продукта карминомицина 1однокомпонентного препарата высокой степени чистоты.

Для этого культуральную жидкость выдерживают а присутствии ацетона при рН 3,5

5,0 в течение 2-4 час, экстракцию хлорированным углеводородом осуществляют повторно с реэкстракцией кислым буферным расвором, а выделение целевого продукта проводят из органического раствора путем его подкисления.

Пример. К7ООл культуральной жидкости добавляют 70 л ацетона, доводят рН культуральной жидкости до 4,0 и оставляют при постоянном перемешивании в течение 2 час. Культуральную жидкость фильтруют (объем нативного раствора 600 л), подшелачивают нативный раствор до рН 7,5 добавлением раствора Na ОН и экстрагируют антибиотик хлороформом. Соотношение нативный раствор: хлороформ составляет 40:1. 15 л хлороформного экстракта концентрируют в вакууме до объема 1,2 л. Антибиотик переводят в фосфатно-цитратный буфер с рН 4,3. Объем буферного раствора 1,1 л. Из полученного буферного раствора антибиотик вновь переводят в хлороформ (1,5 л) при рН 7,5, а затем буферный раствор (1,3 л) при рН 4,3. Раствор подщелачивают до рН 7,5 и экстрагируют антибиотик хлороформом как указано выше. Объем хлороформного экстракта 1,2 л. Хлороформный экстракт концентрируют в вакууме до объема 60 мл и осаждают антибиотики петролейным эфиром. Полученный осадок отделя ют и сушат в вакууме при температуре не выше 40 С. Вес осадка составляет 5 г. Пр парат растворяют в 225 мл хлороформа и фильтруют, к раствору добавляют 25 мл О,3 н. раствора хлористого водорода в хлороформе и перемешивают ЗО мин. Отделяют образовавшийся осадок. Многократно промывают его небольшими порциями хлороформа до обесцвечивания промывной жидкости. Затем промывают осадок один раз бензолом (ЗО мл) и один раз гексаном (ЗО мл) и су шат порошок в вакууме при 40 С 5-6час. Вес полученного порошка 4,0 г. Препарат растворяют при нагревании в 80 мл этанола фильтруют и добавляют 50 мл бензола. Оставляют смесь на холоде на 1 сутки. Выпав ший кристаллический осадок отфильтровываю промывают последовательно двумя порциями бензола по 30 мл и одной порцией гексана (ЗО мл) и сушат в вакууме при температуре не выше 40 С 4-5 час. Вес полученного продукта 2,60 г. Препа 1,85 С, удельное врарат имеет t j, щение t о1.° + 289 (0,15% этанол), данные спектрофотометрического анализа соответствуют тактовым для карминомицина 1 гидрохлорида. Формула изобретения Способ получения карминомицина 1 с помошьюкyльтypыAcii-nomo(dura carnnnaia Sf. not/ 4281 путем экстракции целевого продукта из водного раствора хлорированным углеводородом, концентрирования экстракта, осаждения органическим растворителем, например петролейным эфиром, и вьщеления целевого продукта из образовавшегося осадка, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода и степени чистоты целевого продукта, культуральную жидкость выдерживают в присутствии ацетона при рНЗ,55,0 в течение 2-4 час, экстракцию хлорированным углеводородом осушествляют повторно с реэкстракцией кислым буферным раствором, а выделение целевого продукта проводят из органического раствора путем его подкисления.