Способ получения антибиотика Советский патент 1975 года по МПК C12D9/14 

Изобретение относится к способам получения антибиотиков сельскохозяйственного назначения путем культивирования продуцентов группы Streptomyces.

Предлагается способ получения антибиотика на основе культивирования Streptomyces eburosporeus п. sp. (N:RRL 3582) в аэробных условиях на жидкой питательной среде, содержащей источники усвояемого углерода, усвояемого азота и минеральные соли, при температуре 25-29°С в течение времени, необходимого для придания культуральной среде существенной антимикробной активности.

Способ включает также выделение антибиотика и, при необходимости, его очистку.

Получаемый антибиотик предназначен в качестве добавки к корму и/или питью для домашних животных и птицы.

Антибиотик условно назван AM 374.

Морфологические свойства культуры Str. eburosporeus.

Рост на средах больщинства типов средний, значительный на картофельно-декстрозном агаре, незначительный на агаровом растворе Чапека.

Разбросанный воздушный мицелий образует длинные изогнутые и спутанные цепи эллиптических и удлиненных спор размером 0,5- 0,6X1 0-1,3 мк. Поверхность спор гладкая.

Цвет мицелия в большинстве сред беловатый, переходит в цвет слоновой кости до очень светлых оттенков в областях формирования спор.

Растворимые пигменты желтоватые в различных средах, отсутствуют в растворе Чапека, в аспарагиново-декстрозном агаре и на среде крахмал - неорганические соли - агар. Обратный цвет в большинстве сред желтоватых тонов.

Физиологические признаки. Нитраты не восстанавливает. Л елатину разжижает полностью за 7 дней. На железо-пептоновом агаре меланин не образует.

Хорошо усваивает /-арабинозу, а-фруктозу, i-инозитол, лактозу, а-маннитол, а-мелибиозу, салицин, а-треголозу, а-ксилозу; плохо усваивает или совсем не усваивает /-рамнозу, адонитол, а-мелезитозу, а-раффинозу и сахарозу.

На основании результатов исследования общих характеристик микроорганизм включен в род стрептомицетов. Сравнение культуры NRRL 3582 с известными образцами стрептомицетов показало сходство основных таксономических признаков.

Некоторые характеристики Str. allidoflavus и Str. adorifer совпали с соответствующими характеристиками культуры NRRL 3582, однако исследования показали наличие принципи

альных различий между этими культурами (см. табл. 1)

Кроме того, следует отметить, что для культуры NRRL 3582 характерно большее ограничение роста в различных средах и более разбросанный характер спорообразования.

Из табл. 1 видно, что морфология NRRL

Str. eburosporeus

Показатель NRRL 3582

Короткие, спиралеобразные

Длинные, спутанные и изогнутые Сферические

От эллиптических до удлиненных

Быстрое

Полное

елатина

В большинстве желтоватые

В большинстве желпигментытоватые

Коричневатый; воздушный

Желтоватый; воздушагиндекный мицелий беловатый, мицелий становится беловатоарередкий желты.м

3582 относится к типу Rectus-Flexibilis, в то время, как морфология двух других образцов относится к типу Spira.

Таким образом, культура NRRL 3582 настолько отличается от других стрептомицетов, что вполне может быть выделена в отдельный

Таблица 1

Sir. allidoflavus

Str. adorlfer

Длинные, прямые, ветвящиеся; образуют спирали Сферические

Медленное

В большинстве коричневатые

От кремового до коричневого; воздушный мицелий обильный, кремового цвета

Выращивать Str. eburosporeus можно в одной из многочисленных жидких сред, которые содержат: ассимилируемый источник углерода 10 (крахмал, сахар, кормовая патока, глицерин и т. д.), ассимилируемый источник азота (протеин, гидролизат протеина, полипептиды, аминокислоты, кукурузный экстракт и т. д.), неорганические анионы и катионы (калий, натрий, 15 кальций, сульфат, фосфат, хлорид и т. д.). Следы таких элементов, как бор, молибден, медь и т. д. попадают в среду в составе примесей других камтонентов. Аэрацию в чанах и бутылях осуществляют путем принудительной подачи стерильного воздуха в среду. В случае необходимости может быть добавлен пепогаситель, например 1%-ный раствор октодекана в олеомаргарине из свиного сала. Приготовление маточной культуры. Культуру Str. eburosporeus высевают в колбы объемом 500 мл, заливая в них по 100 мл стерильной жидкой среды с соскобами или смывами спор со скощенного агара. Обычно используют среду следующего состава (г): Кормовая патока20 Глюкоза10 Бактопептон5 ВодаДо 1000 (мл). Колбы ставят на инкубацию (температура 25-29°С, преимущественно 28°С, перемешивание) на 20-48 час. Полученную культуру используют для ииокуляции среды того же состава, разлитой по 1 л и по 12 л в стеклянные ферментеры, объемом 2 и 20 л соответственно. Брожение ведут 20-48 час при интенсивной аэрации. Полученный инокулиум используют для инокуляции бродильных чанов. Для получения антибиотика используют среду следующего состава (г): 20 25 30 35 40 45 Мука соевая10 Церелоза10 Патрий хлористый5 Карбонат кальция1 Растворимые дистилляты зерна5 ВодаДо 1000 (мл). В каждый чан засевают от 3 до 10% посевnort) материала, полученного указанным выше способом. Аэрацию осуществляют из расчета 0,5-1,0 л стерильного воздуха на 1 л питательной среды в 1 час. Перемешивание среды проводят со скоростью 200-400 об/мин, температуру поддерживают в диапазоне 25-29°С, предпочтительно около 28°С. Брожение ведут в течение 65-90 час. После брожения смесь, содержащую антибиотик, фильтруют при рП для удаления мицелия. Фильтрацию можно проводить с помощью диатомовой земли или любого другого фильтрующего средства. Осадок мицелия промывают водой, а вытяжку промывной воды осуществляют вместе с фильтром. Активный антибиотик адсорбируется па Дарко G-60 или на другом подходящем виде растительного или животного угля с использованием, например, 0,5% (вес/объем) адсорбента. Активный антибиотик, оставшийся на угле, может быть элюирован путем перемешивания угля в течение мин с 40%-ным водным раствором ацетона, доведенного с помощью концентрированной серной кислоты до рП 2. Объем элюата составляет 1/4 первоначального объема. Концентрирование элюата производят при пониженном давлении; объем жидкой фазы составляет 1/20 первоначального объема. Величина рП этой фазы устанавливается 5,5с помощью гидроокиси бария, а образующийся осадок сульфата бария удаляют фильтрацией. Объем фильтрата снижают до 400-800 мл. После этого концентрат превращают в суспензию подкисленной окиси алюминия, используя 1/5 количества окиси алюминия (в граммах) но сравнению с объемом концентрата. Суспензию слнвают через подходящую колонну подкисленной окиси алюминия (с использованием примерно десятикратного количества окиси алюминия но сравнению с загрхжаемым), увлажненной метанолом. Активный антибиотик смывают с колонны водным раствором метанола (концентрация 25-50%). Соответствующие активные фракции собирают, смещивают и концентрируют в малом объеме (1 л) при пониженном давЛенин. Величину рН указанного концентрированного веи ества устанавливают 6,0-6,5 с помощью гидроокиси бария. Затем повторно удаляют путем фильтрации осадок сульфата бария, после чего лиофилизируют чистый фильтрат до сырого антибиотика AM 374. После лиофилизацни материал подвергается дальнейщей очистке с помощью хроматографии на колонне с соответствующей ионообменной смолой, например, СМ Сефадекс С-25 (Н-форма). Промывку колонны осуществляют, например, разведенным раствором серной кислоты. Элюат, содержащий активный антибиотик, поглощение которого лежит в области 280 ммк, доводят до рН 6,3 с помощью гидпоокиси бария. Образующийся осадок сульфата бария удаляют фильтрованием, а фильтр-ат концентрируют в объеме 30-80 мл, рН раствора устанавливают 8,0 с помощью смолы IR45 (ОН). Затем удаляют фильтрованием. Фильтрат добавляют к больщому количеству ацетона при перемещиванин. Формируемый осадок выделяют фильтрованием, промывают ацетоном и высушивают при средней температуре и пониженном давлении до получения антибиотика AM 374 в основной форме. Микроаналитическую пробу готовят путем осаждения AM 374 из метанольного или этанольного ацетона и высущивания осадка при глубоком вакууме (10 мм) и температуре 100°С в течение двух суток. Основной антибиотик AM 374, приготовленный указанным способом, имеет следующий элементарный состав (вес. %): Углерод54,82 Кислород29,01 Азот7,60 Водород7.10 Хлор2,47. Материал не меет определенной точки плавления, постепенно разлагается при температуре, превыщающей 250°С; а о 102±2,9 (с 1,045, в воде). Максимум ультрафиолетового спектра приходится на: 282 ммк (EicM 42) в кислых растворах, 282 ммк (,5) в нейтральных растворах, 305 ммк (Е:см 51,5) в основных растворах, 260 ммк (EicM 92) в основных растворах. Спектр поглощения основного AM 374 в гранулах КВг, приготовленных стандартным способом, имеет длины волн (мк): 3,0; 3,45: 6.0: 6,20: 6,30; 6.67; 6,68; 7,05: 7,22: 7,35sh: 7,52: 7,67; 8,2; 8,65sh; 8,85; 9,45; 9,75; 9,90; 10,45sh; 11.07; 11,5; 12,0; 12,35; 13,35; 14,4. В растворптел51х (лН 6,0), указанных ниже, при использовании Вас. subtilis и,чи Согупеbacterium xerosis в качестве тест-организмов значения Rf с,1едующие: 5%-ный водный раствор хлористого алюминия (NH4C1) -0,90; система растворителей (вес. ч.); пиридин 2, Sколлидин 2, сухой бутанол 1, вода 1, - 0,20. Антибиотик АД1 374 ,тегко растворяется в воде и диметилсульфоксиде, плохо растворяется в метаноле и еще в меньщей степени в этаноле. Противомикробную активность in yiyo анибиотика AM 374 испытывают на мыщах (20 каждом варианте), которых заражают taphylococcus aureus (щтамм Смита и щтамм оуз), Streptococcus piogenes С 203 и DiploOCCUS pneumoniac SVl. Учет результатов роизводят через 14 дней после заражения. се мыши, которым вводился антибиотик AM 74, живы; из зараженных контрольных мышей, не подвергавшихся лечению, 95-100% погибли в течение 5 дней после заражения. Противомикробпую активность продукта гидролиза AM 374 in vivo испытывают на 5 мышах, которых заражают Staphylococcus aureus (штамм Смита). Учет результатов проводят через 14 дней. Всем мышам вводили продукт гидролиза AM 374, все мыши выжили. Способ получения антибиотика AM 374 осуществляют следуюшим образом. Приготавливают среду состава (г): Кормовая патока20 Глюкоза Бактопептон До 100 Смыв или соскоб с косого агара Str. eburosporeus используют для инокуляции двух колб (объем 500 мл), каждая из -которых содержит 100 мл указанной среды. Содержимое колб перемеигивают 48 час пои температуре 28°С. Полученный инокулиум переносят в стеклянный сЬерментео (объем 19 л), содержаший 12 л стерильной среды. Аэрацию стерильным воздухол проводят в течение всего периода роста ( час), после чего содержимое ферментера ИСПОЛЬЗУЮТ для засева бродильного чана (объемом 300 л). Среда для брожения содержит (г): Мука соевая 0 Перелоза10 Хлористый натрий5 Карбонат кальция1 Растворимый дистиллят зерна5 ВодыДо 1000 (мл). Приготовленную среду стерилизуют при 120С папом под давлением 6.8 кг в течение 45-60 мин. После стерилизации рН среды 6.6. Затем 300 л стерильной среды, находящейся в чане, засевают 12 л инокулиуча. полученного ранее. Брожение ПРОВОДЯТ при 28°С с использованием мясла Холаг LC-8 в качестве пеногасителя. Интенсивность аэрации 0.5 л стерильного воздуха на 1 л смеси в 1 мин. Смесь перемешивают со скоростью 300 об/мин пропеллерной мешалкой. По истечении 70 час брожение заканчивается. 300 л смеси после брожения фильтрутот через фильтр 2% (вес/объем) с диатомовой землей, предварительно доведя рН до б.О с помощью ГИДРООКИСИ натрия. Активный антибиотик в вытяжке фильтрата и ПРОМЫВНУЮ воду адсорбируют на 900 г Дарко G-fiO: из слспензии УГ.ПЯ лдаляют пветньте включения путем переметивят-тия с 30л 40%-ного водного раствора ацетона. Актнвттую часть отделяют от угля, перемешивая с 75 л 40%-ного водного раствора ацетона. .т;ове1енного с помощью концентрированной серной кислоты до рН 2,0. Суспензию фильтруют, смыв концентрируют до объема 4 л, рН доводят до 5,2 гидроокисью бария. Осадок сульфата бария отфильтровывают, фильтрат концентрируют до объема 700 мл. Из этого концентрата приготовляют суспензию со 100 г подкисленной окиси алюминия, которую затем сливают на колонну, содержащую 1 кг подкисленной окиси алюминия в метаноле. Подкисленную окись алюминия приготовляют путем окисления водной суспензии глинозема Мерка концентрированной серной кислотой до получения постоянного значения рН 3,0, фильтрования, промывки водой и метанолом и воздушной сушки. Затем колонну последовательно промывают 5 л метанола, 60 л 50%-цогэ водного ра€твора метанола, 10 л 25%-.кого водного раствора метанола. Соответст1вуюшие фракции, содержащие антибиотик AM 374 и определенные пробой на С. xerosis, смешивают и концентрируют при пониженном давлении до объема 500 мл, после чего доводят рН до 6,2 с помощью гидроокиси бария. Осадок сульфата бария отфильтровывают. Затем лиофилизируют фильтрат для получения 5,1 г сьшого антибиотика AM 374 (при чистоте от .20 до 50%). Полученные таким образам 51 г антибиотика AM 374 растворяют в 30 мл воды и используют в колонне с СМ Сефадексом С-25 (форма Н+). Из 250 г Сефадекса приготовляют суспензию в л воды с доведением рН до 2,0 концентрированной серной кислотой. Избыточную воду сцеживают, а смолу несколько раз промьгвают водой. Суспензию сливают в колонну (внутренний диаметр 7,6 см) и дополнительно промывают 5 л воды для удаления избыточной кислоты. Koлoннv промывают 5 л воды, затем 4 л воды с рП 1,4, а затем дополнительно- 4 л воды с рН, доведенным до 1,4 концентрированной серной кислотой. Фракции (00 мл каждая) со|б:Ирают, лосле чего измеряют биологическую активность (С. xerosis) и поглощение ультрафиолетовых лучей (280 ммк) при разведении этих фракций от I до 100. Фракции 58-80, содержащие ббльщую часть антибиотика, объединяют. Величину рН этой вытяжки доводят до 6,3 с помощью гидроокиси бария, осадок сульфата бария отфильтровывают с помощью диатомовой земли. Объем фильтрата доводят до 200 мл, затем его лиофилизпруют и получают 1,5 г сырого антибиотика. Сырой антибиотик растворяют в 50 мл воаы, и доводят рН раствора до 8.2 с помощью IR45 (ОН-форма). Суспензию фильтруют, фильтрат ляофилиируют. Полученный мятепиал пягтво яют в 40 мл воды, после чего осаждают антибиотик 00 мл ацетона. Кристаллический осадок отильтровывают и растворяют в Малом коли естве метанола. Добавляют ацетон, и в осаок выпадает очищенный янтибиоти-х AM 374, который фильтрованием собирают Выход 1,18 г. Микроаналитическую пробу приготовляют путем осаждения AM 374, полученного указанным выше способом, из этанольного ацетона и высушивания осадка в глубоком вакууме (10-3 jyjji рт стр) при температуре 100°С в течение двух дней. Преобразование основного AM 374 в сульфат AM 374. 150 мг основного антибиотика AM 374 растворяют IB 70 мл подогретого метанола, к которому добавляют одну каплю смеси метанол+концентрированная серная кислота (1:1). РН водного раствора AM 374 6,3. Осадок отфильтровывают и промывают метанолом и ацетоном и получают 98 мг сульфата AM 374. Микроаналитическую пробу готовят, как указано выше. Сульфат AM 374 имеет следуюш;ий элементарный состав (вес. %): Углерод52,68 Водород5,85 Кислород30,35 Азот7,32 Сера1,45 Хлор2,35. a,f l04±2,8° (с 1,075, в воде). Максимум ультрафиолетового спектра приходится на: 282 ммк (Eict, 44) в кислых растворах, (EicM 43) в нейтральных раст282 ммк ворах, (EtcM 48) в основных растворах. 305 ммк Sh 260 ммк () в основных растворах. Спектр поглощения AM 374 инфракрасного излучения в гранулах КВг, приготовленных стандартным способом, имеет следующие длины волн (мк): 3,0: 3.45: 5.75 sh: 5.90 sh: 5.99: 6.03: 6.20: 6,32: 6,67: 6,78 sh; 6,87: 7.05: 7,20: 7,53: 7.65: 8.25: 8,65 sh: 8,87: 9,45: 9,73: 9,88 sh: 10,45: 11,05: 12,0; 12,35: 13.3: 14,4. Преобразование основного AM 364 в хлорид AM 374. 20 г. базового антибиотика AM 374 растворяют в 10 мл 0,1 н. соляной кислоты, концентрируют раствор до объема мл при пониженном давлении. В процессе концентрации формируется микрокристаллический осадок, который после фильтрования повторно растворяют в минимальном количестве волы и снова переводят в осадсж с помощью ацетона. После фильтрования осадок промывают дополнительным количеством ацетона и получают 116 мг хлорида AM 374. МиКПОЧНЯЛИТТЧеСКУЮ .тсг-от путем осаждения из водного раствора ацетона и высушивания осадка в глубоком вакууме (10-3 j5j рт. ст.) при 100°С в течение двух суток. Приготовленный таким способом хлорид AM 374 имеет следуюш,ий элементарный состав (вес. %): Углерод Кислород Волород .fD 106±2.8°-(,057, в воде). Максимум ультрафиолетового спектра приходится на: 282 ммк (EjcM 42) в кислых растворах, (ElcM 39,5) в нейтральных раст282 ммк ворах, 305 ммк (EicM 52) в основных растворах, sh 260 ммк (EicM 92) в основных растворах. Спектр поглощения хлоридом AM 374 инфракрасного излучения IB гранулах КВг, приготовленных стандартным методом, имеет следующие длины волн (мк): 3,0: 3,27: 3.40: 5.75sh: 5,90 sh: 5.98: 6.15: 6.28: 6.65: 6.82 sh: 7.03: 7.15: 7.50: 7.65: 8.25: 8.60: 8.83: 9,42: 9.70: 9.88: 10.45 sh: 11.05: 11.9: 12.3: 13,3: 14.. Продукт гидролиза основного AM 374 в кислой среде. 1 г базового антибиотика AM 374 раствоояют в 7.5 мл кипящей воды, и п раствоп добавляют 1.25 мл 5 н. соляной кислоты. Полученный раствор кипятят 2-3 мин, затем добавляют 2 мл 3 н. соляной кислоты. После охлаждения раствор фильтруют и промывают осадок 3 мл 5 н. соляной кислоты. Далее осадок снова растворяют в 1золс и концентрируют до остатка. Эту операцию осуществляют еще дваж.ты. после чего остаток осаждают тт водого оаствооа апетона. и получают мг продукта гидполияа AM 374 в кпслой спсде. Микроаналитическую пробу готовят, как укатано выше. Полученный продукт гидполиза AM 374 меет следующий элементарный состав (вес. %): Углерод52,50 Кислород25,48 Азот8.32 Хлор7,10 Водород6,60. af ,6° (с 0,839, в воде). Макимум ультрафиолетового спектра приходится а: 280 ммк (ElcM 46) в кислых растворах, 280 ммк (ElcM 51,5) в нейтральных расторах. 86) в основных растворах, 300 ммк sh 260 ммк (Fj(.., 143) в оснопных расторах. Спектр поглощения продуктом гидролиза M 374 инфракрасного излучения в гранулах KBr, приготовленных стандартным сиособг;м, iniecT слрл ющие длины лолн (-ix): 3,0; З.гО sh; 3,43; 5,75 sh; 5,92 sh: 5.0; 6,15 sh; 6,25; 6,48 sh; 5,68; 6,85; 7.03; 7,18; 7,5; 7,67; 7,95 sh; 8,30; 8,55sh; 8,86; 9,15; 9,45; 9,9; 10,45 sh; 5 11,1; 11,55 sh; 11,9; 13,3; 14,4, Предлагаемый антибнотнк предназначен в качестве добавки к корму или питью для домашннх животных и птицы. Пример 1, OcHOBHofi рацион домашней 10 гтицы включает следующие компоненты (г/кг живого веса): Кукурузное зерно восковой спелости514 Масло соевое (44%) с мукой 300 Клейковина зерна с мукой50 Рыбная мука Менхадена (60%) 50 (NRG-50)40 Об п-пжспиая люнепновая мука (17%)2020 Известь (33% кальция)5 Дикальцийфосфат12 Х,тористый натрий3 Минеральные примеси1 Витамины5,25

Пример 2. Опыт проводятаналогично примеру 1. Рацион цыилят содержит (%): ЗерНО кукурузное восковой

спелостн51,4

Масло соевое (44%) с мукой30,0

Клейковина зерна с мукой5,0 Рыбная мука Менхадена (60%) 5,0

(NRG-50)4,0 Обезвоженная люцерновая

мука (17%)2,0

Известь (33% кальция)0,5

Дикальцийфосфат1,2

Хлористый натрий0,3

Минеральные нрнмеси0,1

Витамины0,5.

В состав минеральных прнмесей входят (%)); кальций 25,5, марганец 6,0, железо 2,0, цинк 2,0, йод 0,12, кобальт 0,2,

Используют комплекс витаминов в следующих количествах (на 1 кг корма); витамин А 3300 ед.; вита.мин Дз 1100 ед.; витамин Е 2,2 ед.; хлористый холин 500 мг; DL-метионин 500мг; этоксикин 125 г; мгиниацин 27,5 г; пантотеновая кислота 8,7 мг; рибофлавин 4,4 мг; фолиевая кислота 1,43 мг; менадион 1,1 мг; витамин В;2 0,011 мг. 15

Результаты ириведепы в табл. 4.

Антибиотик AM 374 удобно применять в виде стандартных фармацевтическихтаблеток, каждая из которых содержит (мг):

AM 37450

Лактоза225 Кукурузный крахмал

(для смеси)50 Кукурузный крахмал

(для пасты)25

Стеарат магния5

355

Для приготовления, пасты 100 г кукурузного крахмала суспендируют в 800 мл воды, после чего нагревают с перемешиванием. Пасту применяют для гранулирования смешанного порошка. При необходимости используют дополнительное количество воды. Влажные гранулы пропускают через экран № 8 и высушивают цри 120°С, Сухие гранулы пропускают через экран № 16 и смазывают стеаратом магния. Затем гранулированный материал прессуют в таблетки весом 355 мг на соответствуюш,ей таблеточной машине. В состав минеральных примесей входя1 %): : гапганец 6,0, йод 0,12, железо 2,0, медь ( 0,2, 11ИПК 2,0, кобальт 0,02 и кальций 25,5. Смесь витаминов содержит на 1 кг кор.ма: 125 мг бутилированного гндрокснтолуола; 50 мг DL-метионина; 3300 ед, витамина А; 1100 ед. витамнна Дз; 2,2 ед, витамина Е; П мт- в тям1 п-1 4,4 мг рибофмавпна; 27,6 мгниацпна; 8,8 мг пантотеновой кислоты; 50 мг хлорил.а холипа; 1,43 мг фолиевой к.слоты: 1,1 г ;риадиоца бисульфита натрия- из 5 г зерна кукурузы. Суточных дынлят (6 самцов и 6 самок) помеи;ают в обогреваемые брудеры в номещеиии, в кото-ром поддерживается температура , Цыплят взвешивают иеред началом эксперимента и по истечении 20 суток. Корм и воду подают adlibitum. Контрольная группа птиц получает лишь указанный выше корм, а остальные помимо него получают антибиотик AM 374 (Н-форма) в различной дозе. Результаты приведены в табл. 3 Таблица 3 Примечание.

Активный ингредиент - AM 374 - может быть расфасован и в капсулы с Т1вердой оболочкой. Оптимальный состав ингредиентов в капсуле следующий (мг):

AM 37450

Лактоза90

Стеарат магния1

141

Пример 3. Для приготовления раствора, содержащего AM 374, используют следующие компоненты, %:

AM 374

1,00

Гель магний-алюминиевого

0,50

силиката Сахароза 60,00 Метилпарабен 0,80 Пропилпарабен 0,02 Вкусовая добавка По мере надобности

Дистиллированная вода

До 100.

Из приведенных примеров видно, что получаемый по предложенному способу антибиотик является ценной дооавкои к корму или питью для домашних животных и птицы.

Предмет изобретения

Способ получения антибиотика на осноее культивирования продуцента из группы Streptomyces в аэробных условиях на жидкой питательной среде, содержащей источники усвояемого углерода, усвояемого азота и минеральные соли, при температуре 25-29°С в течение времени, необходимого для придания

среде существенной антимикробной активности, включающий выделение автибиотика и при необходимости его очистку, отличающийся тем, что, с целью получения антибиотика, иредназначенпого в качестве добавки

к корму и/или питью для домашних животных или птицы, в качестве продуцента используют Streptomyces eburosporeus п. sp, (NRRL3582). Увеличение привеса в процентах рассчитызают следующим оэразом: Отношение веса корма к привесу в процентах рассчитывают аналогично;