(54) СПОСОБ РАЗДЕЛЕНИЙ КИСЛЫХ ГЛИКОЗЛМИПОГЛИКАНОВ
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| Способ электрофоретического определения гликозаминогликанов | 1973 |
|
SU500502A1 |
| Способ выявления фракции хондроитинсерных кислот | 1983 |
|
SU1158931A1 |
| Способ определения гликозаминогликанов сыворотки крови | 1983 |
|
SU1178812A1 |
| Способ электрофоретического разделения белков сыворотки крови и молока в полиакриламидном геле | 2016 |
|
RU2616906C1 |
| Способ исследования апо-В-липопротеинов в сыворотке крови | 1987 |
|
SU1603280A1 |
| Способ выявления каталазной активности в биологических объектах | 1987 |
|
SU1422121A1 |
| Способ определения гликопротеидов и белков сыворотки крови | 1990 |
|
SU1827635A1 |
| Способ подготовки пробы гемолимфы для электрофоретических исследований | 1987 |
|
SU1536312A1 |
| Способ идентификации ингибиторов L-амилаз | 1981 |
|
SU969720A1 |
| Способ идентификации В-лимфоцитов кур | 1989 |
|
SU1684673A1 |
Мзоои;; гение- относится к медицшш к может на.гтн применение для диагностики ранни5с ста/гий некоторых касяедстэекны}; заболеьаний и опрейелекия Э1|)фективностн раэпичн лх /юкарственных препаратов для их /тэченнй.
Известен, способ анализа кнсльгх гпь-;козаминогликаиов (КГАГ) в тканях и моче способом электрофореза в полнакрипа.мндном блоке горизонта/1ьног-о типа.
Однако такой способ не обеспечивает быстрого анализа и высокой четкости деления фракций КГЛГ.
С целью возможности исследований натнвиой мочи, в качестве гелеообраэующего буфера используют трис-солянокиспый с ионной силой 1-1,2 в качестве электродного трис-глицнновый буфер с ионой силой О,012-О,04.
Способ осуществляют следующим обра зом,
в качестве гепеобразуюиюго раствора используют трис-соляный бу(}юр, рИ 8,9 (48 мл 1н,НС + трнс 36,6 г) с ионной силой 1.0.
В качестве электродного раствора
HCUOJjb3y,KIT Тр1-:С-ГЛ.ЧЦИНОВЫЙ 6yits,-p , рН
8;3 (тркс о,75 г глминн ) с ионной СИЛОЙ о,о 1.
СОСТИБЬ рЙЗДе i KOiUUitiTpHpyioaiero гелн приведунь ь 1«бл.1.
столб 51-;ОЕ раэделяюшиго 10%-(iuго геля 7О мм, а концентрирующего 4%НОГО - 10-15 Х4М,
Полимеризацию гелевык столбиков )ipo водят при 28-30 С в течение 2О-30 мин, полимеризация концентрирующего гепя происходит при той же температуре в течение мни.
В качестве объекта исследования гликозамииогликанов используют нативиую мочу здоровых или больных людей. Объем анализируемой пробы должен быть не болев 0,4 мл с содержанием 5-12 мкг кислых гликозами1юг ли капов.
Электрический режим деления при диск-электрофорезе составияг - 0,2-О,5 мА на столбик в течение 1-1,5 час в начальной стадии процесса и 2-3 мА на с.олбик при электро оретическом делении.
Окрашивание полученных фракций после 8лектрофоретического, деления проводят в 1%-ном растворе альцианового синего в 3%-ной уксусной кислоте. Избыток красителя удаляют электрофбретически в 3%-ном р.чстворе уксусной кислоты.
Сравненио деления КГАГ при диск-элекВ результате проведения серии опытов по диск-электрофорезу кислых гликозаминоглкканов очи установлено, что четкое деление кислых гликозаминогликанов происходит при использовании трис-соляного буфера ионной силой 1,0 и трис-глицинового буфера с ионной силой 0,012.
Таблица 1
tpoфopeзe проводят по чисяу полученный фракций гликозаминогликанов и длине ик пробега (в мм от стартовой линии).
Результаты электрофоретического деления, полученные при использовании различных буферных, систем, представлены в табл. 2.
Таблица 2
Предмет изобретения
Способ разделения кислых глюкозаминогликанов путем диск-электрофореза в полийкриламидном геле сиспользованием гелеобразующего и электродных систем, отличающийся тем, что, с
5f
целью ноэможности нсспедования нативнойсилой 1-1,2 н в качестве э.пектрсаного
мОйи, в качестве гепеобразукалего буфератрис-глициновый буф-ер с ионной силой
использунэт трис-солянокислый с ионной0,012-О,О4.
)35
