Способ выделения кислой фосфатазы Советский патент 1976 года по МПК C12D13/10 C07G7/28 

(54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ КИСЛОЙ ФОСФАТАЗЫ

ют. SivCTipaKHHio проводят при 5° с в течааие 1 часв. 0,1 М фосфатном буфере (,рН 7,8). -Твердую фазу отделяют, -и белок осаждают насыщенным раствором до 80% сернокислым аммонием. Диализи1руют и лиоф.илизируют.

Выход - 0,20 г, активность - 3,6 ед/мг npenaipaTB, 6,5 ед/мг бел«а.

П р и м е р 4. 0,5 кг 8-дневного мнцелкя отделяют от культуральной жидкости к размельчают. Экстрагируют гари 5° С 1 час в фосфатном буфере (1 М), рН 7,5 и осаждают белок этиловым опи1ртом - 50% -к 80%. Ос а док л и оф и л и 3 и р у ю т.

:Выхоа - 0,2 г, активность -1,9 ед1мг препарата, 3,0 ед/мг белка.

Пример 5. 0,6 кг 4-днев ного -мицелия отделяют от питательной среды, промывают дза раза водой, а затем деми1нерализоза 1ной водой и гомогенизируют. Экстракция происходит при 5° С в течение 1 час в воде, подК1ислен ной до рН 2,5, и осаждение беЛ1ка ведут пр-и насыщении сернакислым аммоние1м до 50% и 80%. Диализируют и лиофилизируют.

Выход - 0,25 г, а.ктдв1Н.асть-1,5 ед/мг препарата, 2,5 ед/мг белка.

Пр.И|Мер 6. 0,5 кг Ю-днев ного мицелия отделяют от питательной среды « гомогенизируют. Экстракцию проводят в деминерализованной зоде при рН 6,0 и 5° С в течение 1 час. После экстракции доводят рН экстракта до 5,0 11Н NaOH. Белок осаждают до 80% насыщения сухим сернокислым аммонием.

Диализируют и лиофил.изируют. Выход -0,15 г, а,кти В1Ность - 2,4 ед/мг

.препарата, 4,0 ед/мг белка.

Ф О р .М у Л а и 3 о i6 р е т е 1Н и я

1.Способ выделения «ислой фосфатазы из м.ицелия плесневых грибов Aspergiilus путем экстракции и осаж1дения фер.мбнта из полученного экстракта, о т л и ч а ю щ и и с я тем, что, с целью расщирания сырьевой базы, .выделение фоофатазы осуществляют из плеаневых грибов, относящихся к виду Aspergiilus terneus.

2.Способ поп. 1, о т л и ч а ю щ и и с я тем, что КЗ .плесневых грибов -вида Aspergiilus terreus используют .продуценты итаконовой кислоты.