Диагностическая питательная среда для выявления энтеробактерий Советский патент 1977 года по МПК C12K1/06 

тнмальной температурой является 29-30° С. После инкубации микробов учитывают цвет скошенной поверхности и столбика, наличие газа и образование индола. Определение фермента диастазы, расщепляющего растворимый крахмал, проводят с теми микробами, для которых этоттест имеет диагностическое значение, например, вибрионы.

Предлагаемая диагностическая среда сиособна дифференцировать большее количество ргзных родов микробов.

Пример 1. С чашек со средой Плоскирева отвиты колонии микробов для дальнейшего изучения на предлагаемую среду и среду Олькеницкого. Микробы, подозреваемые как щигеллы, изменили столбик обеих сред в желтый цвет, скошенную поверхность - Б красный. На «Универсальном столбике проба с индолом была отрицательной, поэтому для установления видовой принадлежности к шигеллам данную культуру необходимо было агглютинировать только с дизентерийными сыворотками, полученными против микробов, не образующих индол со среды Олькеницкого, изучаемая культура должна была быть подвергнута в реакции агглютинации со всеми дизентерийными сывороткам1. В случае, если на обеих средах окраска столбиков изменялась в желтый цвет с наличием газа, а скошенные поверхности - в красный, то наличие положительной пробы на индол но «Универсальном скошенном столбике давало возможность исключать принадлежность культуры к газообразующему варианту щигелл Ньюкестель, в то время, как данная культура со среды Олькеницкого должна была быть проагглютинирована с сывороткой против щигелл Ньюкестель.

Пример 2. Со среды Эндо, при посеве испражнений больного острым кишечным заболеванием, были отвиты на среду Олькеницкого и «Универсальный скошенный столбик подозрительные на иерсинии энтероколитика колонии микробов. На среде Олькеницкого Цвет скошенной поверхности и столбика изменился в малиновый. Культура изучаемого микроба должна была дифференцироваться t иерсиниями псевдотуберкулеза, эитероколигика и протеем. Эта же культура на «Универсальном скошенном столбике имела характерные признаки для иерсинии энтероколитика: скошенная поверхность и столбик желтые, а по ходу прокола среды черно-бурая полоса и положительная проба на индол.

Пример 3. Со среды висмут-сульфитпого агара были сняты колонии, подозрительные на сальмонеллы. На «Универсальном скощенном столбике и на среде Олькеницкого они изменили столбик в желтый цвет, в верхней его части - в черный, без газа, скошенная поверхность была малиновой. Реакция агглютинации культур была положительной с брюшнотифозной сывороткой. Дальнейшее исследование позволило идентифицировать культуру как сальмонеллы брюшного тифа.

При исследовании испражнений больных дизентерией при помоши «Универсального скошенного столбика и среды Олькеницкого было выделено 245 культур, подозрительных на шигеллы. 218 из них были отнесены к шигеллам, 27 - эшерихиям и алкалесценс. Однако наличие на «Универсальном скощенном столбике положительной пробы на индол сократило время исследования и дало возможность сэкономить агглютинирующие сыворотки.

При помощи обеих сред было выделено 135 щтаммов псевдотуберкулезного микроба и 97 штаммов иерсинии энтероколитика. Все культуры иерсинии энтероколитика на «Универсальном скошенном столбике имели четкие отличия от иерсинии псевдотуберкулеза, в то время, как на среде Олькеницкого никаких характерных отличий не наблюдалось.

От больных изолировано 14 штаммов

сальмонелла энтеритидис Гертнера, которые на обеих средах изменяли столбик в черный цвет с газообразованием, а скошенную поверхность - в красный. При проверке изменения цвета среды на 4 музейных штаммах мышиного тифа, двух - паратифа «В, на обеих средах изменения в цвете были такими, как при росте энтеритидис Гертнера. Изменения в цвете «Универсального скошенного столбика при росте на нем иерсинии чумы были одинаковыми у двух взятых в опыт музейных штаммов.

Изучение роста холерного вибриона (пять штаммов) и листерий (два штамма) были

проведено также на музейных культурах.

Предлагаемая диагностргческая среда является универсальной, так как позволяет дифференцировать несколько видов микроорганизмов, относящихся к различным родам,

что облегчает и ускоряет дифференциацию микробов за счет увеличения выявляемы.к признаков в одной пробирке и исключает необходи.мость применения нескольких сред.

Формула изобретения

Диагностическая питательная среда для выявления энтеробактерий, содержащая питательный агар, сахарозу, лактозу, глюкозу,

мочевину, гипосульфит натрия, минеральную соль, индикатор феноловый красный, воду дистиллированную, отличающаяся тем, что, с целью дифференциации энтеробактерий от иерсинии, вибрионов, листерий, она дополнительно содержит цистин, крахмал растворимый, в качестве минеральной соли она содержнт уксуснокислый свинец при следующел количественном соотнощении компонентов

(в

Питательныйагар 3,0-3,5

Сахароза1,5-1,6

Лактоза0,3-0,4

Глюкоза0,08-0,09

Мочевина0,025-0,3

Гипосульфит натрия Уксуснокислый свинец Цистин

Крахмал растворимый Индикатор феноловый красный

Вода дистиллированная

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1.О. В. Бароян «Холера Эль-тор, М., 1971 г., стр. 165.

2.«Известия Иркутского гос. противочумного института Сибири и Дальнего Востока, т. XIV, 1956 г., стр. 46-48.