Мелиоидозный бактериофаг 1617-пр для индентификации возбудителей мелиоидоза и сапа Советский патент 1988 года по МПК C12N7/00 C12N1/06 

Изобретение относится к микробиологии.

Известен мелиоидозный бактериофаг № 61, используемый для типирования штаммов бактерий сапа.

Недостатком такого бактериофага является ограниченная литическая активность по отношению к штаммам бак-7 терий сапа и мелиоидоза.

Предлагаемый мелиоидозный бактериофаг 1617-пр обладает высокой специфичностью и отличается от бактериофага № 61 широким диапазоном литической активности по отношению к штаммам возбудителей мелиоидоза и сапа.

Штамм фага 1617-пр отобран из коллекции фагов, полученных в виде чистых линий из музейных штаммов возбудителей мелиоидозов с помощью клоповой культуры микробов сапа штамма 1754.

Бактериофаг 1617-пр хранится в коллекции Ростовского-на-Дону государственного противочумного института под номером 1617.

Культурально-морфологические признаки.

Полученный мелиоидозный бактериофаг 1617-пр имеет следующую морфологическую и физиологическую характеристику Корпускулы фага состоят из многогранкой головки, в проекции гексагональной Формы, размером 6204+64 А X 550+48 А, и отростка длиной 1б50+205 X. и шириной 85±17 А. Фаг откосится к IV морфологической группе бактериальных вирусов по .Тихоненко.

Физиологические признаки

В двухслойной агаре, приготовленном по методу Грациа с индикаторной культурой, фаг образует через 18- 24 ч инкубации при 37 С прозрачные негативные колонии округлой формы, размером 0,5-3,5 мм в диаметре. Вторичный рост отсутствует или выражен слабо. Иногда вокруг колоний фага наблюдается умеренно выраженная зона частичного просветления культуры

Серологические свойства

Кроличья сыворотка, полученная против бактериофага 1617-пр, взятая в разведении 1:320 (титр сыворотки) нейтрализует фаговые корпускулы с константной скорости нейтрализации 294.

Процент адсорбции фага бактериальными клетками индикаторного штамма 35+3, латентный период 60+1 мин, урожайность 54±3 корпускулы.

Бактериофаг 1617-пр высоко специфичен и лизирует только бактерии мелиоидоза и сапа. Он не оказывает литического действия на 431 штамм различных видов микроорганизмов, в том числе на таксономически близкородственную синегнойную палочку. В концентрации 10 корпускул в 1 мл фаг лизирует 21 штамм возбудителя мелиоидоза из 21 изученного, а в концентрации 10 корпускул в 1 мл - 19 штаммов, В обоих концентрациях фаг лизирует все 9 изученных штаммов бактерий сапа.

В таблице представлены диапазон литической активности и специфичность 1617-пр и 61.

Количество штаммов, лизировавшихся бактериофагами (числитель) из числа изученных (знаменатель)

Как видно из таблицы, фаг 1617-пр не уступает фагу ff 61 в специфичности, но превосходит его по диапазону литической активности.

МЕЛИОИДОЗНЫЙ БАКТЕРИОФАГ 1617-ПР ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ ВОЗБУДИТЕ-- ЛЕЙ МЕЛИОВДОЗА И САПА. Хранится в коллекции Ростовского-на-Дону государственного научно-исследовательского противочумного института под номером 1617.Морфологические признаки. Бактериофаг 1617-пр имеет многогранную головку, в проекции гексагональной^ формы, размером 620+64 А х 550+48 А, и отросток длиной 1650i;205 А и шириной 85+17 А. Фаг относится в IV морфологической, группе вирусов бактерий по А.С.Тихоненко.Физиологические признаки. Формирование негативных колоний. Двухслойный мясо-пептонный агар (рН 6,8), приготовленный по методу Грациа с клоновой индикаторной культурой возбудителя сапа штамма 1754. Через 18- 24 ч инкубации при 37°С колонии фага прозрачные, округлой формы с относительно ровным краем, размером 0,5—3,5 мм в диаметре.Серологические свойства. Гомологичная кроличья антифаговая сыворотка с титром 1:320. В этом разведении в мясо-пептонном бульоне рН 6,8. константа скорости нейтрализации фага, 294.' Процент адсорбции фага бактериями индикаторного штамма в упомянутой' жидкой питательной среде 35±3, латентный период 60+1 мин, урожайность 54+3 корпускулы.Специфичность. Из гетерологичных видов микроорганизмов бактериофаг 1617-пр лизирует лишь микробов сапа.Диапазон литической активности в пределах гомологичного вида микробов. Фаг обладает широким диапазоном литического действия по отношению к различным штаммам возбудителя мелиоидоза.СОСлОд00сосо