Мелиоидозный бактериофаг 1633 для идентификации возбудителей мелиоидоза и сапа Советский патент 1988 года по МПК C12N7/00 C12N1/06 

Изобретение относится к микробиологии.

Известен мелиоидозный бактериофаг № 61, используемый для типирования штаммов бактерий сапа.

Недостатком этого бактериофаза является ограниченная литическая активность по отношению к штаммам бактерий сапа и мелиоидоза.

Предлагаемый мелиоидозный бактериофаг 1633 обладает высокой специфичностью и отличается от бактериофага № 61 широким диапазоном литической активности по отношению к штаммам возбудителей мелиоидоза и сапа, а также по морфологии корпускул.

Штамм бактериофага 1633 отобран в результате изучения коллекции фагов, полученных в виде чистых линий из музейных штаммов возбудителя мелиоидоза с помощью клоновой культу1и,1 микробов сапа штамма 1754. . . Бактериофаг 1633 хранится в коллекции Ростовского-на-Дону, государственного научно-исследовательского противочумного, института под номером 1633.

Культурально-морфологические признаки.

Корпускулы фага состоят из многогранной головки, в проекции гексагональной формы, размером 555+30 А ii475±30 А, и отростка длиной 1490+70 1 и шириной 155+15 А с сокращаюпщмся чехлом. Фаг относится к V морфологической группе вирусов бактерий по А.С.Тихоненко (1968).

Физиологические признаки.

В двухслойном агаре, приготовленном по методу Грациа с индикаторной культурой, фаг образует через 1824 ч инкубации при прозрачные негативные колонии округлой формы с относительно ровным краем, размером от точечных до 2,5 мм в диаметре.

Серологические свойства.

Кроличья сыворотка, полученная против бактериофага 1633, в разведении 1:160 (титр сыворотки) нейтрализует фаговые корпускулы с константой скорости нейтрализации 118+10.

Процент адсорбции фага бактериальными клетками индикаторного штамма 25+1, латентный период 71+3 мин, урожайность 152+11 корпускул.

Бактериофаг 1633 высоко специфичен и лизирует только бактерии мелиоидоза и сапа. Он не оказывает литического действия на 431 штамм различных видов микроорганизмов, в том числе на таксономически близкородственную синегнойную папочку. Фаг лизирует 18 штаммов возбудителя мелиоидоза из 21 изученного и все 9 штаммов бактерий сапа, использованных в опытах.

В таблице представлены диапазон литической активности и специфич кость фагов 1633 и 61.

Как видно из таблицы, фаг 1633 не 35 уступает фагу 61 в специфичности, но превосходит его по диапазону литической активности.

МЕЛИОИДОЗНЫЙ БАКТЕРИОФАГ'1633 ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ МЕЛИОИДОЗА И САПА (Хранится в коллекции Ростовского-на-Дону государствен-i кого научно—исследовательского проти—I вочумного института под номером 1633).Морфологические признаки. Бактериофаг 1633 имеет многогранную головку, в проекции гексагональной формы, размером 555+30 X " 475+30 X, а отросток длиной 1490+70 X и шириной 155±15 Х с сокращающимся чехлом. Фаг относится к V морфологической группе вирусов бактерий по А.С.Тихоненко.Физиологические признаки. Формирование негативных колоний. Двухслойныймясопептонный агар (рН 6,8), приготовленный по методу Грациа с клоновой.. индикаторной культурой возбудителя сапа штамма 1754. Через 18-23 ч инкубации при 37°С колонии фага прозрачные, округлой формы с относительно ровным краем размером от точечных до 2,5 мм в диаметре.Серологические свойства. Гомологичная кроличья антифаговая сыворотка с титром 1:160. В этом разведении в мясопептонном бульоне рН 6,8, константа скорости нейтрализации фаза 118+10.Процент адсорбции фага бактериями индикаторного штамма в упомянутой жидкой питательной среде 25+1, ла- тен.тный период 71+3 мин, урожайность 152+11 корпускул.Специфичность. Из гетерологических видов мироорганизмов мелиоидоз— ньш бактериофаг 1633 лизирует лишь микробов сапа.Диапазон литической активности в пределах Гомологичного вида микробов. Фаг обладает широким диапазоном литического действия.i(ЛСлсг>&