Штамм @ @ СВБДО-141,используемый для изучения лизогенной конверсии у @ @ Советский патент 1985 года по МПК C12N15/00 C12N15/00 C12R1/38 

ел 1 Изобретение относится к микробио логии, в частности к генетике микроорганизмов. Известен штамм Pseudomonas pseudomallei С-141, типичный по культуральным, биохимическим и другим характеристикам для возбудителя мелиоидоза и используемый в качестве референтного (1 J. ; Однако штам); С-142 не может быть использован для изучения лизогенной конверсии, а в качестве реципиента при трансдукции на модели возбудителя мелиоидоза, поскольку существенным ёгЬ признаком является спонтанная Продукция бактериофага. Цель изобретения - создание ализ генного штамма. Цель достигается с помощью созда ния штамма Pseudomonas pseudomallei СВБДО-141. Штамм получают методом селекции из музейного штамма Ps. pseudomolle С-141. Штамм Pseudomonas pseudomallei СВБДО-141 хранится в коллекции Саратовского научно-исследовательского противочумного института Микроб и характеризуется следующими свойствами. Культурально-морфологические признаки. Клетки палочковидные. Величина бактерий 2-суточной культуры мелиоидоза, выросших на МПГА, (0,50,8) (3,0-5,0) мкм. Клетки подвижны лофотрихи, спор и капсул не образуют, грамотрицательные. На МПГА на 2-3 сут вырастают коло нии с гладкой поверхностью, ровными круглыми краями, серовггто-кремневого цвета, 3-4 мм в диаметре. В МПБ через 1-2 сут дает диффузный рост и формирует нежную пленку на поверхности, образуя придонный осадок. Физиолого-биохимические признаки Факультативный анаэроб. Оптимум рос та наблюдается при 32-34 С. На средах с глюкозой, лактозой, мальтозой и ксилозой осуществляет окисление без ферментации со сдвигом рН в кис лую сторону. Лизин не декарбоксилир ет. Аргинин декарбоксилирует через 24 ч со сдвигом рН в щелочную сторо ну, Гидролизует желатин. Индол и се водород не образует. Гемолизирует эритроциты барана. Ализогеиен. Не дает стоптанной фагопродукции и чувствителен к гомо 242 логичному бактериофагу исходного штамма С-141. Шта.мм СВБДО-141 используют следующим образом. Пример. Получение искусственно лизогенного варианта. Штамм Р.pseudomallei СВБДО-141ализогенный обрабатывают фагом 1, вьщеленным из известного Р.pseudomallei С-142 R, S (ф 1, Ф 2), в соотношении 0,1:1 (фаговые корпускулы: микробные клетки). Смесь фаг/бактерии инкубируют в течение 2 ч при 32 С, а затем после обработки антифаговой сЬшороткой (-АФС) для нейтрализации фаговых частиц высевают на плотную питательную среду (L агар) с целью получения изолированных колоний. В последующем отбирают клон, дающий спонтанную фагопродукцию, и обозначают Р. pseudomallei СВБДО-141 (Ф1). Пример 2. Проверка ализогенных свойств штамма СВБДО-141. После предварительного вьфащивания культур PS. pseudomallei СВБДО-141 и исходного С-141 в мясо-пептонном бульоне в течение 48 ч при и получения из них хлороформных лизатов проведена проверка спонтанной фагопродукции культур Р. pseudomallei СВБДО-141 и С-141 и чувствительности их к гомологичному фагу. Для этого используют двуслойный метод Gratia, В качестве индикаторных культур используют Psimallei Иванович,P.pseudomallei С-141 и С-ВБДО-141. Спонтанная фагопродукция штаммов Р.pseudomallei и чувствительность их к гомологичному фагу представлены в табл. 1. Результаты проведенных исследований подтверждают отсутствие спонтанной фагопродукдии у предлагаемого штамма в отличие от исходного штамма Р.pseudomallei С-141, наличие чувствительности штамма Р.pseudomallei С-ВБДО-141 к гомологичному фагу. Различия вирулентных свойств этих же штаммов Р.pseudomallei для белых мьш1ей и золотистых хомячков представлены в табл. 2. Использование штамма благодаря его ализогенпости дает возможность использовать его для изучения феномена лизогенной конверсии у Ps. pseudomallei.

Штамм Pseudomonas pseudomallei СВБДО-141 (коллекция Саратовского научно-исследовательского противочумного института Микроб), используемый для изучения лизогенной конверсии у Pseudomonas pseudomallei.