Способ получения антигенов Советский патент 1977 года по МПК A61K39/00 

1

Изобретение относится к медицине, а именно к производству антигенов.

Известен химический метод получения дифтерийных антигенов, согласно которому дезинтеграция бактерийпроизводится механическим путем с применением стеклянных бус на шуттель-аппарате,

Однако антигены, получен 1ые этим способом, с одержатмного лшгадов и неспеци.фических веществ, что исключает их широкое использование в медико-биологических исследованиях.

Известен также метод дезинтеграции бактерий ультразвуком, по которому бактерийную массу ресуспендируют в физиологическом растворе и озвучивают в течение 45-60 мин.

Получение антигенов из бактерий, содер жашнх большое количество липидов, и токт синов, в таких условиях невозможно, так как эти вещества попадают в конечный про-: дукт, снижая его специфичности...

Цель изобретения - повь1шение специфичИости и чувствительности препарата путем отделения неспеиифическихпримесей..

Это достигается тем, что бактериальные хлеткй предварительно обрабатывают ушУГразвуком при частоте 0,5-1,5 мГц, интенсивности 5-it Втусм в течение 5-1О мин И затем отделяют клетки.

Способ осуществляют следзтошим образом.

I Бактерии выращивают в течение суток в матрицах с агаром на мартеновском бульоне с добавлением 30%-ной; 6bi4foff сыворотки. Колонии микробов смьгоают физиологическим раствором при рН 7,О-7,2. Полученную суспензию центрифугируют при 5,5-6 тыс. об/мин, при 8-1О С в течение 50-60 мин.

Полученный осадок S взвешиваЮ1 и ресуск пендируют в том жефизиологическом растворе до содержания 2 г осадка на 88 мл физиологического раствора. После этого сурпензию озвучивают при режиме: частота колебаний 1 мГц, интенсивность 5-7 Вт/см температура 7-10 С Б течение 5-10 мин. Затем удаляют образовавшуюся пену с лнпигдами и токсином, центрифугированием при том же режиме. Полученный осадок|ресуспвй34Д1 уют тем же фяаиолэгическим раствором рПГА, реакции торможения пассданрйгемаг-до исходного объема. Затем суспензию де-глютадии (.РТПГА), перекрёстной РТПГА,

aHHTerpHpyiw ультразвуком при том же ре-в реакции нейтрализации антигено-антител

жиме с интенсшностью 20-25 Вт/см те-(РИА), перекрестной РИА и др.

чвиве 50-6р мки, ваовь удаляют пену цент- б этих реакциях диагностикумы показы.рифугированием. Подученный надосадок яв-вают высокую специфичность и чувствительяивтея бактериальным антигеном. Его мож-ность.

ао использовать сразу Ш1И диализовать про

ФИВ д11стиллироввнно Й воды 72 ч при 4-10 С

и лио4ш1яз1{ро0ать. Сухой антиген можно 10

хранить бхнгее трех лет в герметичных ус-Формула изобретения

л0Виах при 4-10 С. Нелиофипизированный

«iftareH KOHGepB ryioTiMepTHiwiaTOMi l.SOOO- -Способ получения антигенов путем р э1:10ООО.рушения кдеток бактерий ультразвуком и

Описайным способом можно получать ан-.щ и и с я тем, что,с целью повышения

ТИГ8НЫ из дифтерийньгх,Туберкулезных, поев-специфичности и чувствительности препа-;

дотуберкулазных к столбнячных бактерий.рата путем. отделения неспецифическнх приАнтигены используют для приготовле-месей, клетки предварительно обрабатывают

ния эритроцитарных диагностикумов, которые Оультразвуком при частоте 0,5-1,5 , инпрнменяйт для постановки реакций пассив-тенсивности 5-7 Вт/сг в течение 5-10 мин

ной гемагглютинации (РПГА), перекрестнойи затем отделяют клетки.

571271

гбрьщеления активной фракций, о т л и ч. а юц