Способ диагностики криза отторжения при аллотрансплонтации Советский патент 1977 года по МПК A61B10/00 

I

Изобретение отиосится к области медицины и касается диагностики кризов отторжения при трансплантации почек.

Известен способ диагностики криза отторжения при аллотрансплантащни почек путем исследования сыворотки крови в послеоперационном периоде l.

Однако такой способ является трудоемким, требует много времени и дифицитного оборудования, что снижает достоверность диагностики криза отторжения при гшлотрансплантации почек. , .

Целые изобретения является повынение дос;Тове$ но ;1й диагностики и упрощение способа.

Это достигается ISM, что определяют активность глицинамияииотрансферазы путем инкубации сыворотки крови с буферио-ч убстратноя смесью, осаждения белков, центрифугирования, добав ления к недостаточнойжидкости цветного реактива для выявления образовавшегося аргинина и фотометрлрования.

Способ осуществляется следующим образом.

У больного берут 2 мл венозной крови в центрифужную пробирку, оставляют на 30 мин при комнатной темпера2

туре, отделяют сгусток стеклянной па.лочкой и центрифугируют для получении сыворотки при 200 в течение 10 мин. К 0,7 мл буферно-субстратной ,смеси (2,45 мкмоля Л-канавалина и 2,45 мкмоля л-орнитина рН 7,5) добавляют 0,2 мл сыворотки (опытная проба), инкубируют при в течение 15 мин. К О,5 мл наяосадочной жидкости добавляют 2,5 мл дистиллированной воды и для выявления образовавшегося аргинина 2 мл 0,02%-ного щелочного раствора гипобромата натрия. Через 10 мин фотометрируют на фотоэлектрометре ФЭК-56 М при длине волны 490 нм.

В контрольной пробе к О,7 мл буферно-субстратной смеси сначала добавляют 0,1 мл 30%-ного раствору трихлоруксусной кислоты, а затем Оу2 мл сыворотки и дальше поступают такув-, как с с опытной пробоя.

Активность глицин-а ндинотрансферазы выргикают в единицах (Е мкмоль/ ЛО мл/час), которые вычисляют по калибровочной кривой с Л-аргинином.

При повьллении активности глицин-амидинотрансферазы в два и более раз по сравнению с исходным уровнем, исследуемым ежесуточно в различные сроки после операции, диагностируют криз

бтторяеняя почечного аллотрансплантата аа 2-3 суток до развития клинической картины отторжения.

Предлагаемый способ позволяет достоверно диагностировать криз отторжения почечного аллотрансплантата за . 2-4 суток дЬ ||(яинкчески проявлений.

Формула изобретения

Способ диагностики криза оттор ения при аллотрансплантации почек пу тем исследования сыворотки крови в послеоперационном периоде, о т л ичан)щийся тем, что, с целью повьшения достоверности диагиостики .и упрощения способа, определяют активность глицинамидинотрансфераэы путем инкубации сыворотки крчви с буферносубстратн й смесью, осаждения белков, центрифугирования, добавления к иадосадочной жидкости цветного реакти- ва для веМбЛёния.образовавшегося арч гинийа и фотометрчройания,

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Мостофи Ф.К. и др. Почки, .M,j Медицина, 1972/ с.391-399.