Способ получения производных соматостатина Советский патент 1977 года по МПК C07K14/655 A61K38/31 

1

Изобретение относится к улзгчшенному способу синтеза пройаводных соматостатина, физиологически активных соединений, применяемых в клинической фармакологии для лечения акромегалии и управления ювенильным диабетом.

Известны способы синтеза соматостатина с использованием твердофазного метода заключающегося в том, что исходную аминокислоту ковалентно связывают с последуюшим наращиванием пептидной цепи путем конденсации с соответствующей аминокислотой 1, 2.

Однако при таком методе конечный продукт получают недостаточно чистым, поскольку очистка возможна лишь на заключительной стадии синтеза, поэтому этот метод не может быть использован в крупномасштабном производстве пептидов, молекулы которых со размерны с могтекупами соматостатнна. Кроме того, в указанном Методе обязательна защита вторичных функциональных групп, на фимер сульфидной, аминной или гидроксяль- ной, которые являются очень стойкими группами в по, завершенни прсшесса удаляются

в жестких условиях, что также приводит к загрязнению конечного продукта.

С целью улучшения качества продукта и возможности его крупномасштабного синтеза предлагается способ получения соматостатина и его производных, обладающих активностью природного гормона, с использованием азидного метода синтеза пептидов 3

Способ получения производных соматостатина общей формулы

СЬ СН1 -дО ли-Цис-Лиз-Асн-Фен-4енчТрпчПиз-Трн-Фен-Трн-Сер-,КНСН13 -СН,,(1 где водород иди аминогруппа; К - водород вли карооксип, есль

1 -аминогруппа, R -карбоксил, то символ :Лиз в положении 4 и 9 может также представлять D -Лиз, с использованием конденсации соответствующих амнно ислот и удалением блокирующих групп, заключается в том, что проводят реакцию сочетания азидным методом гептапептиаа обшей формулы

CH5CHR -CO-Гли иc( «t )-Лиз(Бок)-Асн-Фен ен-ННННл (И),

где i - водород или БокМН, вС -Аамили Трт, с гептапептвдом формулы

Н-Трп-Лиз(Бок)-Трн( 1 )-4 ен-Трн( М-Сер( Г )- N H-CHR -CHg S -;3 (Щ), где Rимеет указанные значения; У 1Г и - водород или группа .Бут; Р - группа АЦМ или Трт,5

и полученное линейное производное общей формулы

CHjCHR -CO-TnH-UHct ot }-Лиз(Бок)-Асн-Фен-Фен-Трп-Лиз(Бок)-Трн4- Г )-Фен-Трн()-Сер( r)-NH-CHR« -CHaS- QU где R2 , R , oi ,/) , . f и f имеют указанные значения, окисляют или тиоцианогеном в соответствующее циклическое дисульфидное производное общей формулы

CHj CHR -СО-4ли-Цис-Л из (Бок) -Асн- . -Феп-Фен-Трп-Лиз(Бок)-Трн ( J )-Фен-Трн

( )-Cep(j)-HH (V)

с последующим удалением всех оставшихся блокирующих грулп в кислых УСЛОВИЯХ ивы- 28 делением производных соматостатина общей формулы ( I ).

Пример 1, Трет-бутилоксикарбонилаланилглицинметиловый эфир (Бок-Ала-ГлиОМе).,25

В охлажденный до О С раствор 14,18 г трет-бутнлоксикарбонилаланина (О,О75 моль) и 1О,1 г 1-оксибензотриазола (0,075 моль) в 15О мл диметилформамида (ДМФ) при перемешивании добавляют 18,2 г (0,088 дицикпогексилкарбодиимида (ДЦК). Затем раствор перемешивают 1 ч при О°С и 1 ч при комнатной температуре. В полученную смесь добавляют раствор 10 г (О,О798 моль) хлоргидрата глицинметилового эфира в35

4ОО мл ДМФ и 12, 8 мл этилморфолина и перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Выпавший осадок отфильтровывают, фильтрат упаривают досуха. Остаток растьоряют в этилацетате, удаляют не- 40 растворившуюся часть фильтрованием, Расгвор промывают 1О%-ным водным раствором лимонной кислоты (3x75 мл), насьш1енным раствором бикарбоната натрия (ЗхЮО мл), насьпценньпи раствором хлористого натрия 45 (2x5О мл), сушат над сульфатом магния, {эастворитель отгоняют и получают целевое соединение в виде масла,

ЯМР-спектр (CDCei);l,33( S,3H), 1,42 ( S , 9Н), 3,75 ( S , ЗН).50

Пример 2. Трет-бугилоксикарбонкпнилгпицин (Бок-А па-Гпи-ОН ).

При перемешивании к раствору 86 г трот-бутил оксикарбонил алан илглицинметилового эфира (0,33 моль), полученного в55.

примере 1, в 600 мл метоксиэтанола добавяют по каплям 35О мл 1 н, створа гидркэта окиси натрия в течение нескольких М1шут, смесь перемешивают 2 ч, охлаждают и осторожно 6О мл 50%-ной лимонной кис- 0

лоты доводят рН до 4. Растворитель отгоняют, остаток растворяют в этилацетате, нерастворившиесй компоненты удаляют фильтрованием, фильтрат сушат над сульфатом магния, растворитель отгоняют, сырой продукт перекристаллизовывают из смеси эти- лацетата с петролейным эфиром при 6080 С и получают целевое соединение. ГоС |f-9,6° (с 1,- ДМФ),-т.пл.1280С(разл)

П р и м е р 3. Трет-бутилоксикарбонилаланилглицин-2,4,5- грихлорфениловый эфир

. (Бок-Ала-Гли-ОТхп).

В охлажденный до температуры от -10 до -15°С раствор 56 п трет-бутилокси-

карбонилаланилглицина (0,227 моль), полученный в примере 2, и 58,5 г 2,4,5-трихлорфенола (0,237 моль) в сухом этилацетате (6ОО мл) по каплям при перемешивании добавляют раствор 61 г ДЦК (0,295 моль) в 10О мл этилацет та. Смес перемешивают 2 ч при , 2 ч. при О С и в течение ночи при комнатной температуре. Выпавший осадок отфильтровывают, растворитель отгоняют, остаток растворяют в этилацетате, удаляя nepacTBOpiraшиеся компоненты фильтрованием, растворитель отгоняют, остаток кристаллизуют вначале из серного эфира, затем из смеси этилацетата с петролейным эфиром и получают целевое соединение, т.пл. lO9-lll C ,

,7° (с 1; ДМФ).

П р и м е р 4. Трет-бутилоксикарбоннлфенилаланилфенилаланилметиловый эфир (Бок-Фен-Фен-ОМе).

В охлажденный до О С раствор 21,2 г (0,08 моль) трет-бутилоксикарбонилфенилаланина (Бок-Фен-ОН) и 10,8 г (0,08 моль) 1-оксибензотриазола в 120 мл ДМФ при перемешивании добавляют 18,3 г (0,О89 моль ДЦК. Смесь перемешивают при О С 2 ч и

добавляют к ней раствор 17,6 г (О,082 мся

t

хлоргидрата фенилаланинметилового эфира в 240 мл БМФ и 14 мл этилморфолина, 9 тем перемешивают в течение t. ночи при 25°С Осадок отфильтровывают, фильтршт .упаривают при пониженном давлении, остаток растворяют в этилацетате, раствор промывают 10%-ным водным раствором пимоннойкиспоты (2x160 мл), насыщенным раствором бикарбоната натрия (ЗХ20О мл) и насьпценным раствором хлорида натрия (2X120 мл), сушат над сульфатом магния, упаривают, остаток кристаллизуют из смеси этидацетата с петролейным эфиром и получают целевое соединение, т.пл. 123-124°С, loC rf-13,4° (с 1; ДМФ).

П р и м е р 5. Трифторацетат фениланилфенилаланинметилового эфира (Н-Фен-Фен-ОМе CFjCOOH). 25 р {О,О58 моль) трет-бутилоксикарб Н№1фенипаланш1фенш1алавинметш1ового эфира полученного в примере 4, растворяют в хо лодной трифторуксусной кислоте при О Ci раствор перемешивают 1,5 ч, кислоту отго няют при пониженном давлении, к остатку добавляют 1-5 мл метанола, продукт осаж дают эфиром, отфильтровывают, промывают эфиром и пол.учают целевое соединение, г. пп. 25(JC (разп; метаноп-изопропиповый спирт),,6 (с 1; ДМФ). П р и м е р 6. Трет-бутилоксикарбониласпарагинипфенилаланилфенилаланин метиловый эфир (Бок-Асн-Фен- ен-ОМе). К раствору 23,7 г (0,054 моль) Н-фен-Фен-ОМе.С 5-СООН, полученного в примере 5, в 1ОО мл ДМФ добавляют 7,84 мл .Н -этнлморфолина и 22,6 г (О,О55 моль) трет-бутилоксикарбониласпарагинтрМхпорфенилового эфира. Смесь вьше жйвают при 3,5 дня, растворитель отг остатку добавляют эфир и растираю в порошок, который отфильтровывают. Пере кристаллизацией из метанола получают целе вое соединение, г. пл. 194-195сДЫ -34,0| (с 1,- ДМФ). П р и м е р 7. Бензилоксикарбонил- Л -трер-бутилоксикарбониллнзиласпарагинилфенилаланнлфенилаланинметилоБый эфир 3-Лиз-(Бок)-Асн-Фен-Фен-рМе. 22,5 г (О,0417 моль) Бок-Асн-Фен-Фен-ОМе, полученного в примере 6, растворяют в холодной трифторуксусной кислоте (150 мл), перемешивают при О С 1 ч, растворитель отгоняют, остаток растворяют в метаноле и эфиром осаждают соединение .формулы Н-Асн-Фен-Фен-ОМе-бк еООН, в охлажденный до О С раствор ©,5 г (0,0172 моль) которого в 70 мл ДМФ пр перемешиваний добавляют 2,4 мл N-этипморфолвна и раствор 10 г соединения форм лы 3-Лиз-(Бок)-ОК р (О,02 моль) в 5Ом ДМФ. Смесь выдерживают при О С 2 дня, растворитель отгоняют при пониженном дав лении, остаток перекристалл из овывают из ме танола я получают целевое соединение, т.пл выше 2ОО С. Вычислено,%: С 63,79; Н 6,66; N 10,8 Найдено,%: С Н 6,71; Н 10,49. П р и м е р 8. Дициклогексиламинова1Я соль К-( оС -(|юнил-5-хлор-2-оксибеязш1иден)- 1§ -ацетамидометилцистеина СЬЬ-ЦИС(АЦМ)- ОН-НН (CgH, ). К раствору 19,6 г (О,О85 моль) хлоргидрата 8 -ацетамнаометилцнстеина « l9,7 г (J,УЬff моль) 5-хлор-2-оксибензофенона в растворю гидрата окиси тет- раметиламм-ония в метаноле (340 мл, О,5 ммопь) аобавпяют бггидратирован{Гого апюмосшшката щелочного металла (молекулярные сита ЗА), смесь перемешивают 1 день при комнатной температуре. Твердые продукты отфильтровывают, фильтрат упаривают досуха, остаток растворяют в 800 мл смеси со льдом и непрореагировавший кетон отфильтривывают. Маточник охлаждают, подкисляют твердой лимонной кислотой до рН 4 и экстрагируют эти- лацетатом (ЗХ2ОО мл). Экстракт промывают холодной водой, сушат над сульфатом магния, сульфат магния отфильтровывают, к фильтрату добавляют раствор 15,5 г .(О,085 моль) дициклогекскламина в 5О мл этипаиетата и получают целевое соединение в виде кристаллов, т.пл. 161-163 С. П р и м е р 9. Гидрат - К - ( ct -фенил-5-хл op-2-оксибензилиаен)- S -ацетами- дометилцистеиннл- Н -трет-бутилоксикарбониллизиласпарагинилфенилаланилфенилаланинметиловый эфир С &-Цис(Ацм)-Лиз{Бок)-Асн-Фен- Фен-ОМе-Н ОЗ. Дициклогексиламиновую соль Н-(С фенш1-5-хлор-2-оксибензилиден)- S -ацетамидометилцистеина (12,0 г; 2О,4 ммопь) суспендируют в 2ОО мл воды, 55 мл iO%ной пимонной кислоты доводят рН суспензии до 4. Свободную кислоту экстрагируют этилацетатом, экстракт промывают водой и сушат в течение ночи над безводным, сульфатом маг НИН при О-10 С (при комнатной температуре: происходит разложение). Растворитель отгоняют, остаток растворяют в 15О мл ДМФ и получают раствор свободного цистеинового производного. Раствор 11,7 г .(р,0152мопь) гетрапептида с блокированными группами формулы 3-Лиз(Бок)-Асн-Фен-Фен-ОМе, полученного в примере 7, в 21О мл сухого дистиллированного ДМФ и 21О мл ледяной уксусной кислот, гидрогенизируют в присутствии 1,7 г катализатора (5% Pd/С) (восстановление .-завершаетсяг в течение 2 ч). Катализатор I отфильтровывают, растворитель о-ргоняют, остаток растворяют в метаноле, осаждают серным эфиром и получают тетрапеп- тид, не содержащий блокирующих групп, формулы Н-Лиз(БоЕ)-Асн-Фен-4)ен-ОМе. В полученный раствор цистеинового производного с блокированными группами в ДМФ .прибавляют .2,7г (О,О2мопь) : 1-окси. бензотриазола, затем в охлажденную до -Юс смесь при перемешивании добавляют 4.1r(O,O2MDnb)f - ДЦК и выдерживают при -1О С ЗО мин, при О С 1 ч и при комнатной температуре 1 ч. Раствор тетрадека - пептида, не содержащего блокирзгющих групп, в 200 мл ДМФ и 2,6 мл 14-этилморфолина добавляют в охлажденную до О С смесь и непрерывно перемешивают в течение ночи комнатной температуре. Выпавший фильтровывают, фильтрат упаривают досуха остаток растворяют в метаноле, осаждают эфиром и продукт кристаллизуют из смеси метанола с водой, получая целевое соедине ние, ,3°{с 1; ДМФ), ЯМР-спектр (CDClj), 5:i,35 (S, 98 1,8( S ,ЗН), 3,55 (j, ЗН), 1,0-1,6 { ni , 6Н). Пример 10. Трет-бутилоксикарбонилаланилглииил- S -аиетамидометилцистеинил- JC -трет-бутипоксикарбоншшизип- аспяг агинш1фенилаланш1фенилаланинметипо- вый эфир tБoк-Aлa-Гли-Циc{AIш)-Лиз(Бoк Лсн-Фен-Фен-ОМе 13,8 г (О,0127 моль)-пентапепгида с блокированными группами формулы СКЬ -Цис ( АЦМ ) -Л из (Бок) -Асн-Фен-Фен-jOMe, полученного в примере 9, растворяют в 50О мл 80%-ного раствора уксусной кисло ты, раствор перемешивают 20 ч, растворитель отгоняют при пониженном давлении, остаток растворяют в метаноле и осаждают эфиром, получая соединение формулы Н-|1ис- ( АЦМ)-Лиз( Бок) -Асн-Фен-Фен-ОМе W f-19,1 (с 1; ДМФ), . в холодный раствор которого в 185 мл ДМФ при О С добавляют 2 мл N -этилморфолина (рН раствора 8) и, продолжая охлаждение, раствор трет-бутил оксикарбонилаланилглицин-2,4,5-трихлорфенилового эфира (7,5 rj 0,0176 моль). Полученный раствор выдерживают в ледяной бане 2 дня, растворитель отгоняют, остаток растворяют в этаноле, осаждают эфиром и перекристаллизовывают из метанола, получая .целевое соединение, М|,-30,9°(с 1; ДМФ). ЯМР-спектр (CDClj), О:/1,38: ,ЗН), 7,25 (Ш, ( S , 18Н), 3,58), (S ЮН). Аминокислотный анализ : Ала l,05j Асп 1,16; Цис 0,174; Гли 1,ОО; Лнз 1,2 Фен 1,86. Пример. Трет-бутилоксикарбонилаланилглицил- К -аиетамидометилкисте- инил- N -трет- бутнлоксикарбоииллизила- спарагинипфенипапанипфенипапанингидразиа Бс(к-Ала-Гли-Цис (Ацм) -Лиз(Бок)-Асн-Фе| -Фен N-H К Hj. В раствор 2,О г fl,87 ммольТ гептапептидного эфира формулы Бок-Ала-Гли-Цис ( АЦМ ) -Лиз (Бок) -Асн-Фен-4 еи-ОМе, полученного в примере 0, в 8 мл днметв сульфоксида (ДМСО), добавляют 2 мл (41,3 ммоль) гидразингиарата. Полученную смесь перемешивают 8 ч, ос1 Ькдают мл воды, фильтруют, сушат и получают целевое соединение. Аминокислотный анализ: Лиз О,98; Асп 1,04; Гли 1,0; Ала 1,О1; 1/2 Цис 0,37; Фен 2,12. Пример 12. К,5-дигригипцистеиниг1X - трет-бутилоксикарбониллизиааспарагинилфенилаланилфенилаланинметиловыйэфир Трт-Цис (Трт) -Л из {Бок )-Асн-Фен Фен-ОМё. К охлажденной до О С смеси 100 мл этилацетата с 400 мл 5%-норо водного pacTBOpia лимонной кислоты при перемешивании добавляют 15,82 г (0,О23 моль) N , S -дитритилцистеиндиэтипаминовой сопИя перемешивают при О С 30 мин, расслаивая смесь. Водный слой отделяют, экстрагируют этилацетатом, объединенную органическую фазу промывают холодной 2,5%-ной лимонной кислотой и насьпденным р)аствором хлористого натрия. Органическую фазу . сушат над безводным сульфатом магния, растворитель отгоняют и получают N, S -дитри- тилцистеин, в раствор которого (0,О23 моль) в 10О мл ДМФ добавляют 3,75 г (О,О278 моль) ,1-оксибензотриазола, охлаждают до О С и при перемешевании вносят4,81 г (О,233мопь) ДЦК, затем перемешивают еще при О С 2 ч и при комнатной температуре 1 ч. Раствор вновь охлаждают до О С и, перемешивая, добавляют раствор 14 г (О,О175 моль) сое динения формулы Н-Лиз(Бок)-Асн-Фен-Фен-ОМе в 254 мл ДМФ и 2,43 мл N-этилморфолина. Полученную смесь перемешивают 6 ч при 25 С, растворитель отгоняют до .ОО мл, выпавший осадок отфильтровывают, фильтрат упаривают досуха, остаток растворяют в 400 мл этилацетата, фильтруют, фильтрат промывают 2,5%-ным водным раствором лимонной кислоты ( мл), 7%-ным раствором бикарбоната натрия (3X100 мл) и насьпценным раствором хлористого натрия (2x50 мл), раствор сушат над безводным супьфагоммагния и расгворитепь отгоняюг., Остаток перекристаппизовывают из смеси петроле.йным эфиром, получая этилацетата с соединение, т.пл. 180-181°С , целевое 17,9 (с 1; ДМФ). П р им ер 13. Трвт-бутилрксикарбониаланилггшцип-; S -тритилцистеинил- Н ет-бутилоксикарбониллизиласпарагинилфенилаланилфенилаланинметиловый эфир Бок-Ала-Гл и-Цис (Трт)-Л из (Бок)-Асн ен-Фен-ОМе. Б раствор 13,5 г (10,7 ммоль) соединения формулы Трт-Цис(Трт)-Лнз(Бок)-Асн-Фен-Фен Ме, подученного в примере 12, в 80О мл ледяной уксусной кислоты по каплям при комнатной температуре добавляют 200 мл воды. Полученный раствор перемешивают 45 С 2 ч, затем разбавляют 1 мл воды, выпавший осадок отфильтроБывают,. фильтрат упаривают дсюуха, остаток растворяют в метаноле, осаждают эфиром и получают Н-Цис(Трт)-Лиз(Бок)-Фен- ен-ОМе, в раствор 1О,2 г (9,48 ммоль) которого в 79 мл ДМФ, охлажденный доj

О°С, добавляют 1,5 мл N -этилморфолина, раствор 5,64 г (13,3 моль)трет-бутилоксикарбонш1аланклглицин-2,4|5-трнхлорфенняового эфира, полученного в примере 3, в 25 мл ШАФ и 0,5 г 1-оксибензотриазала. ю Подученный раствор выдерживают 3 дня при О С, растворитель отгоншот, остаток растворяют в метаноле и осаждают эфиром. Перекристаллизацией полученного продукта из метанола получают целевое соединение, W г 15 20,7° (с 1; ДМФ).

Аминокислотный анализ : Лиз 0,95, Асп 0,94; Гли 1,0; Ала 0,98; Цис 0,52; Фен 1,92.

Пример 14. Трет-бутилоксикарбони- зо лапанилглицил- S -тритилцистеиния- К трвт-бутилоксикарбониллизиласпарагинилфенипапанилфенипапанингидразид fБок-Ала-Гли-Цис (Трт) из (Бок)-Асн-Фен-ФентН-Н N Hjl..25

В раствор 6,5 г (5,25 ммоль) сложного метилового эфира гептапептида формулы Бок-Ала-Гли-Ц НС (Трт)-Л из (Бок)-Асн-Фен-Фен-ОМе, полученного в примере 13, в |410 мл метанола, охлажденного в ледяной зо бане, по каплям добавляют 8,8 мл (0,179 моль) пщразингидрата. Смесь перемешивают при О С 20 мин, затем при комнатной темперзатуре 4 дня. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают холодным метанолом, су- 35 шат и получают целевое соединение.

АМ1ШОКИСЛОТНЫЙ анализ: Лиз 0,95; Асп 1,0; Гли 1,0; Ала 0,98; Цис 0,90; Фен 2,ОЗ.40

Пример 15. Бензилрксикарбонилтреоншюеринметиловый эфир (3-Трй-Сер-ОМе).

Раствор 3,22 г (6,43 ммоль) бензилоксикарбонилтреонинпентахлорфеиилового эфи- 45

ра в 2О МП ДМФ добавляют в раствор 1,0 г (6,43 ммоль) хлоргидрата метило- : вого эфира серина в 15 мл ДМФ и О,95 мл триэтиламина при О С. Полученную смесь перемешивают 2О ч при комнатной температу-50 ре, осадок отфильтровывают, фильтрат кон центрируют при пониженном давлении, остаток растирают в порошок в смеси эфира с петролейным эфиром (1:1) до полного удаления пентахпорфенола. Нерастворившийся ОС- S5 таток крисгаллизуют из смеси этилааетата с изопропиловым Эфиром и получают целевое соединение, т.пл. 133-135 С.ЯМР-сйектр ( CDCfj ),«У : 3,75 (ЗН),

5,1 (2Н) и 7,3 (5Н).60

А. Бензил6ксикарбонил-О-трет-бутил)треонш1-(О-трет-бутил) -серинметиловый эфир 3-Три(буг)1-Сер(Бут)-ОМе.

К смеси 13,3 г (43 ммоль) метилового эфира О-трет-бутилсерина с 14,4 г (46,8 ммоль) бензилоксикарбонила-(0трет-бутш1)-траонина и 5,33 мл (43 ммоль) К -этилморфолина в 100 мл сухого тетрагидрофурана (ТТФ), охлажденной до О G, добавляют по каплям охлажденный раствор 9,3 г (45,1 ммоль) ДЦК в 25 мл ТГФ, перемешивают 45 мин при 0°С и 90 мин при 25 С. Осадок отфильтровывают, ТГФ отгоняют при пониженном давлении при 25 С, остаток растворяют: в эфире, фильтруют, фильтрат экстрагируют последовательно насыщенным раствором бикарбоната натрия, на г сыщенным раствором хлористого натрия, ох- лажденнной льдом 1 н. лимонной кислотой, водой, насыщенным раствором бикарбоната натрия, водой и насыщенным раствором хлористого натрия. Органический экстракт сущат над сульфатом магния и упаривают при пониженном давлении. Остаток чистят хроматографией на нейтральной окиси алюм1шия, элюируют бензолом, упаривают и получают целевое соединение в виде масла.

ЯМР-спектр (CDCtj ),:i,2 ( m,21H) 3,74( S , ЗН), 5,15 ( 5 , 2Н), 7,35 ( S . 5Н).

Пример 16. Метиповый эфир бензоилксикарбонипфенипагшниптреонипсернна3-Фен-Три-Сер-ОМе).

Смесь 1,72 г (4,86 ммоль) метилового эфира бензилоксикарбонилтреонилсерина, поученного в примере 15, в 15 мл 15 о-ной укусной кислоты с 15 мл метанола, 5,34мл (5,34 ммоль) 1 н. соляной кислоты и 0,15 г катализатора (5% Pot/С) перемешивают в атмосфере водорода 2О ч. Смесь фильтруют через диатомовую землю (целит) фильтрат упаривают досуха и получают хлоргидрат метилового эфира треонилсерина (НТри-Cep-OMefHCt ), в раствор 1,24 г (4,86 ммоль) которого в 15 мл ДМФ и 0,623 мл триэтиламина при О С добавляют раствор 2,32 г (4,86 ммоль) бензилоксикарбонилфенилаланин-2,4,5-трихлорфенилово- го эфира в ЗО мл ДМФ. Смесь перемешивают 2О ч, фильтруют, фильтрат, концентрируют при пониженном давлении, остаток растир;ают в порошок в смеси эфира с гёксаном о полного удаления трихлорфенола. Остаток кристаллизуют из смеси этилацетата с зопропиловым эфрфом и получают целевое соединение, т.пл. 167-171 С.

ЯМР-спектр (CDCtj ) : 3,7 (ЗН), 5,03 (2Н), 7,2 и 7,3 (ЮН).

А. Метиповый эфир бензилоксикапбонялфенилаланил-(О-трвт-бутил) - греонил-( Отрвт-бутю)-серина f 3-Фен-Три(Бут)-Сер {Бут)-ОМе . 14,4 г (ЗО,8 ммоль) соединения Форму лы 3-Три(Бут)-Сер(Бут)-ОМе, полученного в примере 15 А, растворенного в 120 мл мегано 1а, совместное (ЗО,8ммопь)ч пиридинхпоргидрата гидрогениэируют в присутствии 7ОО г катализатора (5% Pd /С) и получают соединение формулы Н-Трн(Бут) -Сер-(Бут)-ОМе, которое и 14,7 г (30,8мол 3-4ен-ОТцп растворяют в 15О мл этилацетата, охлаждают до О, С и затем к ох1;аж денному раствору добавляют 3,96 мл (30,8 ммоль) Н-этилморфолина. Смесь вы держиваютпри 5 С 3 дня, осадок отфильтро вывают, фильтратэкстрагируют аналогично примеру 15А. Промытый экстракт сушат и упаривают при пониженном давлении. Остаток чистят хроматографией на силикагеле (1 кг), вымывая 20%-ным раствором этилаиетата в бензоле Элюат упаривают, остаток кристаплизуют из смеси эфира с гексаном и попучаюг целевое соединение, т. пл. 101-103°С ,4°(с1,ДМФ). При м е PI 17. Метиловый эфир бенбензоилкарбонилтреонилфенилаланилтреонилсерина (3-Трн-фен-Трн-Сер-ОМе). Смесь 1,7 г метилового эфира бензилок сикарбонилфенилаланилтреонилсерина, полученного в примере 16, в 15 мл 15%-ной уксусной кислоты и 15 мл метанола совместно с 0,15 г катализатора (5% Pd /С) быстро перемешивают в атмосфере водорода 4 ч. Смесь фильтруют через диатомовую землю (целит), фильтрат концентрируют досуха и получают соединение Н-Фен-Трн-Сер-ОМе в форме кислого аддукта с уксусной кислотой, к раствору 1,4 г (3,4 моль) которого в 2О мл ДМФ и 0,48 мл триэтаноламина при О С добавляют раствор 1,71 г (3,4 ммоль) бензилоксикарбонилтреонинпентахпорфенилового эфира в 150мл ДМФ. Полученный раствор перемешивают 20 ч при комнатной температуре, затем растворитель отгоняют, остаток растирают в пэрошок в эфире до полного удаления пен тахлорфенола. Осадок кристаллизуют из сме си этилацетата с изопропиловым эфиром и получают целевое соединение в виде его моногидрата, т.пл. 195-197 С. Вычислено,%: С 56,12; Н 6,49; К 9,02 C«H58N40,o-HaO Найдено,%: С 56,06,: Н 6,29; К 8,84. А. Метиловый эфир бензилоксикарбонил-{ О-трвт-бут1ш)-троонилфенилаланил-(О-трвт-бутил)-треонил-(О-трет-бутил)-серина Сз-Три(Бут)-Фен-Трн(Бут)-Сер(Бут)-ОМе1. 10,5 г (17,1 ммоль) соединения формулы 3-Фен-Трн( Бут)-Сер( Бут)-ОМеЗ гидрогенизируют в ледяной уксусной кислоте (100 мл) в присутствии катализатора (5% Pet/С), После завершения реакции (контроль по тех) катализатор отфильтровывают и фильтрат концентрируют досуха при пониженном давлении. Остаток Н--ФенТрн{Бут)-Сер(Бут)-ОМе растворяют в бензоле и раствор упаривают при пониженном давлении (дважды) с последующей сушкой гидрата окиси калия также при пониженном давлении. Б 100 мл сухого ТГФ растворяют 5,3 г (17,1 ммоль) соединения формулы 3-Трн(Бут)-ОН и 4,61 г (34,2 ммоль) 1-оксибензотриазсша, Затем при перемешивании при О С по каплям в полученный раствор добавляют 3,52 г (17,1 ммоль) ДЦК в виде охлажденного раствора в ЗО мл ТГФ, Перемешивают еще 1 ч при О С и 1 ч при 25 С. Полученный продукт гидрогенолиза растворяют в 35 мл ТГФ, который содержит 2,19 мл (17,1 ммоль). М-этилморфолина. Затем этот раствор добавляют в раствор активированного сложного эфира. Смесь перемешивают при -25 С 1 ч, фильтруют, фильтрат упаривают при пониженном давлении, остаток растворяют в серном эфире, фильтруют и фильтрэат экстрагируют холодной 1 Н. лимонной кислотой, водой, насыщенным раствором бикарбоната натрия и насышенным раствором хлористого натрия. Остаток, полученный после сушки и отгонки эфира, хроматографируют на силикагеле (1 кг), вымывая 20%-ным раствором этилацетата в бензоле. Элюат упаривают, остаток кристаллизуют из смеси эфира с гексаном и получают целевое сое 1инение, т.пл. 110ИЗ°С, ,5° (с 1; ДМФ). П р и м е р 18. Метиловый эфир бензил оксикарбонил- N -трет-бутилоксикарбониллизилтреонилфенилаланилтреонилсерина 3-Л из (Бок) -Трн-Фен-Три-Сер-ОМе. Смесь 1,3 г осоединения формулы 3-Трн- Феи-Трн-Сер-ОМе, полученного в примере 17, в ЗО мл метанола с 0,15 г- катализатора (5% Pd/C) быстро перемешивают в атмосфере водорода 2О ч. Затем фильтруют через диатомовую землю и концентрируют до сухого состояния, получая соединения формулы Н-Тре-Фен-Тре-Сер-ОМе, в раствор 1,О г (2,18 ммоль) которогр в 15 мл ДМФ и 0,1 мл триэтиламина при 6 С добавляют «раствор бензилоксикарбонил- Я -трвт-бутилоксикарбониллизин-jt -нитрофенилового эфира в 150 мл ДМФ и перемешивают еще 20 ч. Растворитель отгоняют при пониженном давлении, остаток растворяют в 3 мл метанола и к раствору осторожно добавляют 1ОО мл эфира. Выпавший осадок собирают и кристаллизуют из метанола, попучая цепе- вое соединение, т.пл. 16У-171 С. ЯМР-спектр ( DMSO-dfl ), 1,36 {9Н), 3,65 (3), 5,05 (2Н), 7.3(iOH). А. Метиловый бензилоксикарбонил -К -бупшоксикарбониллизил- {О-трет-буTJin )-треонилфенилаланил-(О-трет-бутил)- ™.треонил-{О-трет-бутил)-серина З-Лиз(Бок -Трн(Бут)-Фен-Трн(Бут)-Сер(Бут)-ОМе. 8,52 г (11,О5 ммоль) соединения фор мулы (Буг)-Фен-Трн(Буг)-Сер(Буг)- -Оме, полученного в примере 17А, подвер- гают гидрогенолизу в уксусной кислоте, за тем обрабатывают аналогично примеру 17А Полученный трипентид формулы Н-Трн(Бут) -4 ен-Трн(Бут)-ОМе растворяют в 50 мл ДМФ и добавляют к раствору 1,14 г (11,О5 ммоль) Н -этилморфолина. Раствор охлаждают до , добавляют 5,54 г (11,06 ммоль) соединения формулы 3-лЛиз (Бок) и выдерживают при 5 С 70 ч. Затем при пониженном давлении и 2О-30 С отгоняют ДМФ, остаток хроматографируют на сияикагеле (1 кг), вымывая хлороформом, содержащим 2% метанола. Элюат упаривают и получают целевое соеди нение, т.пл. 81-85 С (серный эфир-пет- ролейный эфир), ЯМР (,). S 0.99 1,43 (т 3,71 ( S , ЗН). 5,13 ( S ,2Н), 7,22 и 7,33 (2х S , ЮН). Пример 19. Метиловый эфир « -диметил- 3,5-диметоксибензш1оксикар- боннлтриптофлл- N -трет-бутилоксикарбониллизилтреонилфенилаланилтреонилсеринаГДдз-Трп-Лиз(Бок)-Трн-Фен-Трн-Сер-Ом4 Смесь 1,61 г соединения формулы ,, 3-Лнз(Бок)-Трн-Фен-Три-Сер-ОМе, попучен ного в примере 18, в 15 мл 15%-ной уксусной КИС/1ОТЫ и 15 мл метанола совмест ное 0,15 Ъ кагапизагора (5% Р d. /С) быстро перемешивают в атмосфере водорода 2О ч. Смесь фильтруют через диатомову землю, фильтрат упаривают досуха и получают соединение формулы 11-Лиз(Бок)-ТрнФен-Трн-Сер-ОМе. Затем раствор 0,653 г ( 1,53 ммоль) dL , cf. - диметил - 3,5 -диметоксибензилоксикарбонилтриптофена, 0,345 г (3,О ммоль) К -оксисукцинимнца и 0,315 г (1,53 ммоль) ДЦК в 13 п сухого ТГФ перемешивают 1 ч при О С и 1 ч при 25 С. В раствор добавляют; попу- ченный ранее раствор 1,159 г (1,53 ммол соединения формулы Н-Лиз(Бок)-Трн-ФенТри-Сер-ОМе с 0,22 мл триэтиламина в 1О мл ТГФ, перемешивают при 25 С 3 ч, фильтруют, фильтрат упаривают, остаток хроматографируют на силикагеле (100 г), вымывая смесью хлороформ-меганоп-пиридиц (90;1О:1), элюат упаривают и получают целевое соединение Лнакс метаноле). нм;289 ( е 5,31О), 282 ( 6- 7,410), 274 ( е 7,070), 219 ( 43,700). ЯМР-спектр (CDCtj). S 1,40 (9Н), 3,74 (9Н). А. Метиловый эфир /. , об -диметил3,5-диметоксибензилоксикарбонилтриптофилЫ -бут1шоксикарбониллизил-(О-трет-бутил)треонилфенилаланид -(О-трет-бутил)-треонилО-трет-бутил)-серина Даз-Трп-Лиз(Бок)Трн (Бут)-Фен-Трн (Бут)-Сер (Бут)-ОМеД, Раствор 7,3 г (7,3 1моль) соединения ффмупыЗ-Лиз(Бок)-Трн(Бут)-Фен-Трн(Бут)Сер(Бут)--ОМе, полученного в примере 18А, в уксусной кислоте гидрогенизируют и обрабатывают аналогично примеру 17А. Полученный остаток Н-Л из (Бок)-Т рн( Бут)-Фен- Трн(Бут)-Сер(Бут)-ОМеЗ растворяют в 20 мл ТГФ и добавляют 0,935 мл ( 7,3 ммоль) К -этилморфолина (смесь 1 ). 3,11 г (7,3 ммоль) соедршения формулы Ддз-Трп-ОН растворяют в 55 мл сухого ТГФ, добавляют 1,97 г (14,6 ммоль) 1-оксибензотрназола, раствор охлаждают до О С и по каплям добавляют охлажденный раствор 1,5 г ДЦК (7,3 ммоль) в 15 мл ТГФ. Смесь перемешивают 1 ч при О С и 1 ч при 20-25 С (смесь 2). Затем смесь 1 добавляют при перемешивании к смеси 2, перемешивают еще 1ч при 20-25 С, охла щают до О С, фильтруют и фильтрат уп4ривают досуха. Остаток растворяют в этилацетате, раствор промывают последователь но насыщенным раствором .бикарбоната натрия, насыщенным раствором хлористого натрия, сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют Остаток хроматографируют на силикагеле (1 кг), элюат упаривают и получают целевое соединение, т.пл. 112114°С (серный эфир- петролейный эфир), Tot If 10,1 (с 1; ДМФ). Пример 20. оС, «С -Диметил3,5-диметоксибензилоксикарбонилтриптоф|1лN -Tpeт-бyт moкcикapбoн шлизилтpeoн шфeнилaлaнилтpeoншlcep fflг щpaзид { ДдзТрп-Лиз(Бок)-Трн-Фен-Трн-Сер- N HHHgl. Раствор 1,О5 г (0,95 ммоль) соединения формулы Ддз-Трн- П из(Бок)-Трн-ФенТрн-Сер-ОМе, полученного в примере 19, и 1,2 мл г ид раз ИНГ ид ра та в 50 мл метанола теремешивают при О С 2 дня. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают метанолом и получают целевой продукт, т.пл. 2ОЗ206°С. А. ai , -Диметил-3,5-диметоксибензипоксикарбониптрипт-Офии ,- IFl -бутилокеикарбониллизш - (О-трет-бутил)-треонилфенилапанип- (О- рет-бутил)-греонил-(О- / Трвт-бутил/-серингдцразин Щдз-Трн-Л из (Бок) Трн-(Бут)-Фен-Трн(Бут)-Сер(Буг)-ННМН}1. Раствор 3,71 г (29,1 ммоль)соед1шения формулы Ддз-Трн-Лиз(Бок)-Трн{Бут)-Фен-Трн(Бут)-Сер{Бут)-ОМ8, полученного в примере 19А, в 25 т ДМФ смешивают с 5 мл гвдразшпчздрата, смесь вьщерживаю не перемешивая, 3 дня при комнатной температуре, добавляют воду, выпавший осадок отделяют, «Перекристалл из овывают из ;, метанола н получают целевое соединение, Т.ПЛ. 189-191°С. TI р и м е р 21. oL, о(. -Диметил 3,5-диметш1оксибензилоксикарбонилтрипти фил- Ы -трет-бутилоксикарбониллизилтре-оннпфенипапанилгреонипсерил :- S -ацета- мвдометилцистеин ГДДз-ТрП-Лиз(Бок)- -Трн-Фен-Трн-Сер-Цис(Ацм)-ОН . В раствор OJ8OO г (0,724 ммоль) сое динения формулы Ддз-Трп-Лиз(Бок)-Трн- -фен-Трн-Сер- НН И Н , полученного в примере 2О, в ЗО мл ДМФ при -2О С добавляют О,824 мл (1,81 ммоль) 2,2 н раствора безводной соляной кислоты в этил цетате и 0,125 мл (1,68 ммоль) трет-бутилнитрила и перемешивают при -15 С 15 мин. Затем по каплям при q -15 С к раствору добавляют смесь 0,165 г (О,724ммопь) $-ацетамидомегилцисгеина и 0,354 мл (2,53 ммоль) триэтилам1ша в 15 мл ДМФ. Затем раствор перемеш1тают . при -15°С 1 ч и 2О ч при 5 С. При г пониженном давлении отгоняют растворител Остаток растворяют в 5 мл метанола и осторожно вводят в 400 мл серного эфира. Выпавший осадок отфильтровывают, растворяют в 5 мл метанола и ocтopoжIio добавляют в 1ОО мл охлаященного О,5 М раствора лимонной кислоты. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают водой (2x20 м 1 осадок кристаллизуют из смеси метанолэтилацетат-изопропиловый эфир и получают целевое соединение, т.пл. 139-142 С. ЯМР-спектр ( DMSO;::cig.), :; 1,35 (9Н), 1,55 (6Н), 1,83 (ЗН), 3,70(6Н). А. oi,oi- -Диметил- 3,5-диметоксибен зилоксикарбоншттриптофил- Ы -трет-бути- локсикарбониллизилтреонилфенилаланилтреонилсерил- S -тритилцистеин Ддз-Трп- -Л из (Бок )-Трн-Фен-Трн-Сер-Цис( Трт) -OHJ. К раствору 1,6 г (1,45 ммоль) соединения формулы Ддз-Трп-Л из (Бок) Трн-Фен-Трн-Сер-ННННд , полученного в примере 20, в 5О мл ДМФ при -20 С добавляют 1,62 мл (2,26 ммоль) 2,24н. безводного раствора соляной кислоты в этилацетате, затем 0,253 мл (2,18 цмо}1ъ грет-бугил-нигрита, смесь перемешивают при j -l5®C15 мин. В полученный расгвор п -15 С ао каппям добавляют расгвор О,527г (1,45 ммопь) S -тритипцистеияай О,72мг1 (5,О7 ммочь) гриэтн 1амацав8Омп ДМФ, затем смесь перемешивают при-15С 1 ч и 2Оч при 5t, растворигепьудагтяюг при пони- и енномдавг1ении, остаток кристаллизуют из метанола и получают целевое соединение, т. пп.205-208С. ЯМР-спектр (ШЗО-d) : 1,40.- (9Н). 1.60 (6Н), 3,75 (6Н), 7,40 (20Н). Б. t)t, оС -Диметил-3,5-диметоксибензипрксикарбониптриптофип- -трет-бутилоксикарбониллизил-(О-трет-бутил)-треонилфенилаланил- (О-трет-бутил)-треонш1-(Отрет-бутил)-серил- S -ацетомидомегилцистеин Ддз-Трп-Лиз(Бок)-Трн(Бут)-ФенТрн(Бут)-Сер(Бут)-Цис(Ацм)-ОН, 1,27 г (1 ммоль) Соединения формулы Ддз-Трп-Лиз(Бок)-Тре(Бут)-Фен-Трн(Бут)-. Сер(Бут)-71Н Ы Н, полученного в примере 20А, растворяют в 25 мл сухого дистиллированного ДМФ, раствор охлаждают до -20 С и прибавляют 2,5 мл 1 н. раствора соляной кислоты в этилацетате, затем 0,138 мл (1,2 ммоль) трет-бутилнитрита и перемешивают 15 М1Ш при -15 С. Раствор 228мг (1 ммоль) хлоргидрата S -ацетамидометют цисгеина в 20 мп ДМФ и 0,49мл (3.5 ммопь) триэтиламина охлаждают до -15 С и добавляют в полученную реакционную смесь, затем перемешивают при -15 С 1 ч при комнатной температуре в течение ночи. Выпарпвают при пониженном давлении, остаток растирают в порошок в воде, осадок собирают, промывают водой и cjoiiaT, получая целевое соединение. ЯМР-спектр (CpCtj),:, 1,12, 1,20 и 1,27 (27Н), 1,45 (9Н), 1,63 (бН) , 1,95 (ЗН), 3,68 (6Н). Амшюкислотный анализ: Лиз 1,0, Три 2,0, Сер 0,76; Цис 0,6, Фен 1,0. Во оС, оС -Диметил- 3,5-диметоксибензршокспкарбонилтриптофил- N -трет-бутилоксикарбониллизил-(О-трет-бутил)-треонилфенипаланил- (О-трет-бутил)-треонш1-(Отрат-бутил)-серил- S -тритилцистеин /ii3-Tpn-Jin3 (Бок)-Трн (Бут) -Фен-Трн (Бут)-Сер(Бут)-Цис(Трт)-ОН1 , 1,27 г (1 ммоль) соединен1ш формулы Ддз-Трп-Л из (Бок)-Трн (Бут)-Фен-Трн (Бут )Сер(Бут)- KHRHg , полученного в примере 2ОА, растворяют в 20 мл сухого перегнанного ДМФ, раствор охла)адают до -2О С и прибавляют 1,25 мл 2н. раствора соляной кислоты в этилацетате, затем 0,137 мл (1,2 ммоль) трет-бутилнитрита и перемешивают 15 мин .при -15 С. Раствор 0,363 г (1 ммоль) соединения формулы НЦис(Трт)-ОН в 35 мл ДМФ и О,49 мл (3,5 ммоль) триэтшшмина охлаждают до -15 С и добавляют в полученную реакцион ную смесь, затем перемешивают при -15 С 1 ч и при 20-25 С в течение ночи. Растьэиит-ель при пониженном давлеHJUi (0,2 мм рт.ст.) и 35 С, остаток расти рают в порошок в охлажденном льдом 1 н. jacTBope лимонной кислоты, фильтруют, проMhiFv.jK)T водой, сушат, сухой продукт растирают 3 порошок в гексане, отфильтровывают и вновь сушат. Получают целевое соединение, ЯМР-спектр (CDCtj)S: 1,13, 1,17 и 1,23 (27Н), 1,47 (9Н), 1,74 (6Н), 3,78 (6Н). Пример 22. Триптофил- Н -трет«бутилоксикарбониллизилтреонилфенилаланилтреонилсерил- S -ацетамиаометилцистеинацетата СН-Трп-Лиз(Бок)-Трн-Фен-Трн-€ер-Цис(Ацм)-ОН AcOf-Q . F acTBOp 0,465 г (0,367 ммоль) соединеЕ1ия формулы Ддэ-Трп-Лиз (Бок)-Трн-. -фен-Трн-Сер-1Дис{Ацм)-ОН , полученного в примере 21, в 25 мл 80%-ной уксусной кислоты перемешивают при комнатной температуре 27 ч, растворитель отгоняют при пониженном давлении, остаток растворяют в 3 мл уксусной и осторожно вносят в 300 мл серного эфира. Осадок собирают, сушат 1 получают целевое соединение. ЯМР-спектр (DMSO-dfe ), 1,34 (9Н 1,90 (ЗН). А. Триптофил- Н -трет-бутилоксикарбониллизилтреопилфенилаланилтреонил- S -тр гипцисгеинацета т H-TpnWl из (Бок) -ТрнФен-Трн-Сер-Цис( 1рт)-ОН-АсОН. Раствор 1,О2 г (0,710 ммоль) соединения формулы Ддз-Трп-Лиз(Бок)-Твн-ФенТрн-Сер-Цис(Трт)-ОН, хголученного в приме ре 21А, в 50 мл 8О%-ной уксусной кислоты перемешивают при комнатной температуре 27 ч, добавляют 100 мл воды, выпавши осадок соби.5ают, промывают серным эфиром, cyuiaT и получают полевое соединение. ЯА1Р спектр ( DMSO-ds), S: 1,40 (9Н 7,35 (20П). Б. Г шптофил- N -бутилоксикарбонилли- зш1-(О-трет-бутш1 )-треонилфенилаланил- (О -трет-бутил)-треонил (О-трвт-бутил)-серил- S ацета)идометштцнстеин К-Трп-лПиз ( Бок)-Г)н (Бут)-(1зен-Три (Бут)-Сер (Бут)-Цис(Аим)-ОН , 1,50 г (1,045 NiNSonb) соединения fUi3-Tf(n-JIиз(Бок)-Грп(Бут)-Фен-Трн ( Вут)-Сер( Бут)-Цнс(Ацм)-ОН, полученного в П1жмере 21, {-«створяют в 12 мл ох1 ажденпой смеси уксусная кислота-муравьи пая кислота-вода (7:1:2), раствор перемеплюают в течение ночи при комнатной темпе мтуре. Г астворитель отгоняют, осгагок рас воряют в метаноле и концентрированным раствором окиси аммон1Ю доводят рП :icTBOfKi до 6,.5. Затем добаЕШЯЮТ воду, осаиддая продукт, который отделяют, сушат. растворяют в метаноле и осаждают олодным серным эфиром. Получают целевое оединение. ЯМР-спектр (CDCtj), S: 1,17, ,20 и 1,27 (27Н), 1,41 (9Н), 1,91 (ЗН). Аминокислотный анализ: Лиз 1,О; ри 2,2; Сер 0,65; 1/2 Цис 0,69,- Фен 1,1. В. Триптофил- Л -трет-бутилоксикар- онилл из ил-(0-трет-буткл)-треонил фенил алаил-(О-трет-бутил )-треонил-( О-трет-бутил) - -серил- S -тритшщистеин | Н-Трп-Лиз(Бок)Трн(Бут)-Фен-Трн(Бут)-Сер(Бут)-Цис(Трт)ОН . 5,13 г (3,2 ммоль) соединения формулы Ддз-Трп-Лиз(Бок)-Трн(Бут)-Фен-Трн (Бут)-Сер(Бут)-Цис(Трт)-ОН, полученного в примере 21В, растворяют в смеси (56 мл) уксусная кислота- муравы-шая кислота- вода (7:1:2), полученный раствор перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, растворитель отгоняют, остаток растворяют в 26 мл метанола, концентрированным раствором аммиака доводят рН ,5. Полученный раствор по каплям добавляют к холодной воде, выпавший осадок собирают, сушат в эксикаторе над пятиокисью фосфора. Твердый материал застирают в порошок несколько раз в петролейном эфире и вновь сушат, поучая целевое соед1шенпе. Аминокислотный анализ: Лиз 1,0; Трн 2,12; Сер 0,67; Цис 0,16; Фен 1,12. П р и м е р 23. Трет-бутилоксикарбо-, нилалан1щгл1щил- S -ацетамидометшшистеЕнил- К -трет-бутилоксикарбон1ьчлизиласпарагинилфенш1аланилфенилаланилтриптоф шК -трет-бутилоксикарбониллизилтреонилфенилалан 1ттреонплсерш1- S -ацетамидометилцистеин Бок-Ала-Гли-Цис(Ацм)-Лиз (Бок)Асн-Феп-Фен-Трц-Лиз(Бок)-Трн-(| ен-ТриСер-Цис(Ацм)-ОП . В раствор 0,327 г (0,305 ммоль) первого гептапептида формулы Бок-Ала-Гли-Цис(Ацм)-Лиз(Бок)-Асн-Фен-Фен-К 1 МНз, получе1П1Ого в примере 11, в 1О мп ДМСО и 10 мл ДМФ при -15 С добавляют 0,39 мл (0,763 ммоль) 1,92 н, раство безводного хлористого водорода в этилацетате, затем 0,043 мл (0,397 ммоль) трет-бутилнитрита, перемешивают при 15 мин, добавляют 0,105 мл (0,76 ммоль) триэгипамина и к полученной смеси прибавляют при -15 С раствор 0,337 г (0,305 ммоль) второго гептапептида формулы Н-Трп-л/1из( Бок)-Трн-Фен-Трн-Сер11ис(Ацм)-ОМ, полученного в приме 5е 22, в 5 МП ДМСО, 5 МП ДМФ и 0,О39 мп гриэгияамипа.-У аствор перемешивают при-15 С1ч при О С ЗО мшг, затем при 25 С 3 ч. Растворитель отгоняют при пониженном давлении, остаток постепенно вводят в 1ОО мл серного эфира. В осадок выпадает целавой тетрад е капептид, Аминокислотный Лиз 2,09j Асп 1,О4; Три 2,О8; Сер 0,86; Гли 1,00; Ала 1,05; Цис О,54; Фен 2,89. , Л. Трет-бyтип;oкcикapбoнйгIaпaниIlгпицил- - S -тритилцистеин- Н - ет-бутапоксикарбониллиз1шаспарагинилфенилаланилфенилаланилтриптрфил- N -трет-бутилоксикарбоН1шлизилтреон1шфен шаланнлтреонилсерил-S -тритилцистеин Бок-Ала-Гли-Цис(Трт)Л из (Бок) -А сн-Феы-Фен-Трп-Л из (Бок) -Три- фен-Трн-Сер-Цис(Трт)-ОнЗ . Аналогично принтеру 23, но в качестве первого гептапептияа берут соединение формулы Бок-Ала-Глн-Цис (Трт)-Личэ{ Бoк)-Acн-Фeн-4 eн-HH }i Н, полученное в примере 14, а в качестве . торого гептапептида берут соединение формулы Н-Tpп-Лиз(Бoк) Tpн-Фeн-Tpн-Cep-Циc {Трт) -ОН, пол ученное в примере 22 А, получают целевой Л1шейны тетрадекапептид. . Аминокислотный анализ: Лиз 2,О1; Асп 1,О2; Трн 1,92; Сер 1,О1| Гли 1,О; Ала 0,99; Цис-О,61; Фен 3,ОЗ. Б.Трвт-бутил оксикарб онилалшишглицнл- S -ацетаыидометилцистеинйл-Н -трет- оксикарбон шлизиласпарагин1Ш1фенилаланилфенилаланилтриптофил- Н -тр&т-бути- л оксикарбонил-( О-трет-бутил) -треонияфенниа ланил- (О-трет-бутил )-треонил-( О-третбутил}-се рил- S -ацетамидометилцистеин Бок-Ала-Гли-Цис (Ацм) из (Бок) -Асп-Фен,фен-Трп-Лиэ(Бок)-Трн(Бут)-Ф0н-Трн , (Бут)-Сер(Бут)-Цис(Ацм)-ОНЗ. Аналогично примеру 23В с использованием первого гептапептида, а в качестве вт рого берут соединение формулы Н-Трп-Лиз (Бок)-Трн(Бут)-Фен-Трн(Бут)-Сер(Бут)-Цис(Ацм)-ОН, полученное в примере 22 Б, получают целевой линейный тетрадекапептид который выделяют из реакционной смеси, уп р1юая растворитель, растирая в порошок остаток в воде. Осадок отфильтровывают, су шат и перекристаллизовывают из метанола, Полученный продукт используют на последую щей стадии без дальнейшей очистки. Аминокислотный анализ: ,. Лиз Is98, Асп 1,О2; Трн 1,82; Сер 0,93; Гпи 1,0; Ала 0,97; Цис 0,25; Фен 3,02. В, Трвт-бутилоксикарбонилаланилглицил S -тритилцистеин- Н -трет-бутилоксикар бониллизиласпарагинилфенилаланилфенилапанипгриптсфип- 1Г-трет-бугилоксикарбпнип- лизил- (О-трвт-бутил)-треон1шфен1шаланил(О-трвт-бутил)-треонш1-(О-трет-бутил)-серил- S -тритилцистеин {Бок-Ала-Гли-Цис{Трт)-Лиа(Бок)-Асн-4 ен-Фен-Трп-Лиз(Бок) -Трн(Бут)-Фен-Трн{Бут)-Сер(Еут)-Цис(Трт) Аналогично примеру 23, но в качестве первого гептапептида берут соедш1ение формулы Бок-Ала-Гли-Цис( Трт)-Л из (Бок)-АснФен-Фен- ЫН JtHg, полученное в примере 14, а в качестве второго гептапептида берут соединение.формулы Н-Трп-Лиз(Бок)-Трн (Бут)-Фен-Трн(Бут)-Сер(Бут)-Цис(Трт)ОН, описанное в примере 22В, получают целевой линейный тетрадекапептид. Реакционную смесь упаривают, остаток растворяют в метаноле, полученный раствор добавляют по каплям в 5%-ный водный раствор лимонной кислоты, выпавший осадок отфильт тровывают, сушат. Продукт используют в след тошей стадии. Аминокислотный анализ: Лиз 2,03; Асп 1,18; Трн 1,37; Сер 0,54; Гли 1,О; Ала 1,0; Цис 0,15; Фен 2,96. Пример 24. Циклический дисульфидтрет-бутилоксикарбонилаланилглицилцистеи-кия- Н -трет-бупшоксикарбониллизиласпарагинилфенилаланилфенилаланилтриптофилН -трет-бут1шоксикарбонш1лизилтреонилфенилаланилтреонилсерилцистеина Бок-АлаГпи-Шс-Лиз{Бок)-Асн-Фен-Фен-Трн-Лиэ (Бок)Трн-Фен-Трн-Сер-Цис-ОН. Раствор 0,635 г (0,305 ммоль) соединения формулы Бок-Ала-4 ли-Цис (Ацм)Л из (Бок) -Асн-Фен-Фен-Трп-Л из (Бок) -ТрнФен-Трн-Сер-Цис(Ацм)-ОН , полученного в примере 23, в 70О мп метанола добавляют в течение 1 ч в раствор 0,778 г (3,05 ммоль) йода в 156 мл метанола при комнатной температуре и перемешивают при этой температуре 45 мин. Полученный раствор охлалщают до О С и постепенно в него добавляют раствор 1,34 г (6,1 ммоль) тиосуль(})ата натрия в 25 мл воды. Конечный раствор упаривают почти досуха, к остатку добавляют 100 мл воды, осадок отфильтровывают, промывают водой, сушат и получают целевое соединение. Целевое соединение получают способом, описанным в данном примере, но в качестве исходного соединения берут эквивалентное количество соедш1ения, полученного в примере ЙЗА, В этом случае растворителем является смесь метанол-бензол (3:1). Таким же образом переводят соединения, по/ ученные впримерах23и 23А, в целевое соедш1ение но методу Хиски и Смита. At Циклическийдисульфид трет-бутнлоксикарбонипапанипгаицилцистеинип- -трет-бутипоксикарбонилпизиласаарагинипфениааланилфенилаланилтринтофил- К -трет-бутилоксикарбониллизил- (О-трет-бутилтреонш1фенилаланил- (О-трет-бутил)-трео|1Ш1- (О-трет-бутил)-серилцистеина БокАла-Гли-Цис-Л из (Бок)-Асн-Фен-Фен-Трп21-Лиз(Бок)-Трн(Бут)-Фен-Трн(Бут)-Сер{Бут Цис-ОН . : 1,О г (0,445 ммоль) линейного тетрадекапептида формулы Бок-Ала-Гли-Цис(Ацм -Л из (Бок) -Асн-Фен-Фен-Трн-Л из (Бок) -Трн (Бут)-Фен-Трн(Бут)-Сер(Бут)-Цис(Ацм)ОН, полученного в примере 23, растворяют в 9ОО мл горячего метанола. Раствор филь руют, удаляя нерастворимую часть продукта охлаждают до комнатной температуры и по -каплям добавляют раствор 1,13 г( 4,45 ммодь йода в 500 мл метанола в течение 1 ч. Смесь перемешивают еще 1 ч, охлаждают до 0°С и добавляют раствор 2,2 г (8,9 ммояь) тиосульфата натрия в 20 мл воды. Растворитель упаривают, остаток ра тирают в порошок в 2ОО мл воды, осадок отфильтровывают, промывают и сушат. Сырой продукт растворяют в 15 мл метанола. Нерастворившиеся компоненты отфильтровывают, фильтрат упаривают досуха, полученный продукт может быть использован без дополнительной очистки в последуюшей стадии. Часть продукта чистят фильтрованием через адсорбент, приготовленный на основе поперечно защитного декстрана (сефадекс Н-20), получают очищенную фракцию целевого соединения. Ам1шокислотный анализ: Лиз 2,2; Асп 1,0; Сер 0,98; Цис 1,1; Трн 2,0 Гли 1,0,- Фен 3,5. Целевое соединение можно получить путем повторения процесса данного примера, но в качества исходного соединения берут эквивалентное количество соединения,полученного в примере 23В, а в качестве раст ворителя - смесь метанол-бензол (4:1). Таким же образом проводят конверсию линейного тетрадекапептидного соединения примеров 23 и 23В в целевое соед1шение по методу Хиски и Смита. Пример25. Соматостатин, циклический дисульф1щ аланилглицилцистеинлизиласпа рапшип фенил аланил фен илаланилтриптофиллизилтреонилфенилаланилтреонилсерилцистеш1а Н-Ала-Гли-Цис-Лиз-Асн-Фен-Фен -Трп-Л из-Трн-Фен-Трн-Сер-Цир-ОН. Раствор 0,368 г (0,19 ммоль) БокАла-4 ли-Цис 1из Бок)-Асн-Фен- ен-Трп. Лиз(Бок)-Трн-Фен-Трн-Сер-Цис-ОН, полученного в примере 24, в 16,4 мл концент рированной соляной кислоты перемешивают в атмосфере азота 8 мин при О С, затем добавляют 164 мл ледяной уксусной кисло ты и сушат вымораживанием. Остаток раст воряют в 6О мл воды и вновь сушат вымо раживанием. Конечный остаток растворяют в 50 мл воды, пропускают через .колонку (2x20 см), заполненную карбоксиметилцел

22 юлозой (Уaт.aн СМ-23) и элюируют 0,1ОО моляльным буферным раствором ацетата аммония.. Очйще21ное соединение в количестве О,065 г диофилизируют из воды и получают белый твердый продукт в виде его кислого аддукта с уксусной кислотой, Анонсе. (в метаноле), нм: 274 ( 5,730) 281 ( 8 6,060), 289 (65,410). Аминокислотный анализ: Лиз 2,24; Три 2,31; Сер 1,О; Гли 1,0; Асп 0,95; Ала 0,95; Цис 1,11; Фен 3,17; уксусная кислота 3,09 экв. Лиофилизация полученного продукта из разбавленной соляной кислоты дает соответствующий кислый аддукт с соляной кислотой: Лиз 2,16; Трн 2,О9| Сер 0,96; Гли 1,О; Асп 1,О5; Ала 1,0; сер 1,06; Цис 0,81) Фен 2,9. Целевое соединение (соматостатин) получают также путем повторения процесса данного примера, но в качестве исходного циклического дисульфида берут эквивалентное количество циклического дисульфида, полученного в примере 24А. Пример 26. Аланилглицилцистеинилл из иласпарагин илфен илалан илфен илалан илтриптофиллизилтреонилфенигааланилтреонилсерилцистеин СН-Ала-Гли-Цис-Лиз-Асн-Фен-ФенТрп- из-Трн-Фен-Трн-Сер-Цис-ОЬО. Аналогично примеру 25, но в качестве циклического дисульфида берут эквивалентное количество соединения формулы БокАла-Гл и-Цис (Трт)-Л из (Бок)-Асн-4ен-Фен-Трп-Л из (Бок) -Трн- Фен-Трн-Сер-Цис (Трт )ОН, описанного в примере 23, получают целевое соединение. Аминокислотный анализ: Лиз 1,83; Асп О,91; Трн 2,31; Сер 1.08; Гли 1,0; Ала 0,86; Цис 0,38; Фен 2,64. Аналогично получают целевое соединение, применяя продукт, полученный в примере 23В.. ; Пример27. Г1ропионилглицин-2,4 5-трихлорфениловый эфир (СНдСН -СО-ГлиОтцп). В раствор 5,24 г (4О ммоль) пропионилглицина Б 50 мл ДМФ добавляют 8 г (41 ммоль) 2,4,5-трихлорфенола. Раствор охлаждают в ледяной бане и добавляют 8,2 г (41 ммоль) ДЦК. Смесь перемешивaюt при О°С 1 ч и при 25 С 18 ч. Осадок удаляют фильтрованием, растворитель упаривают, остаток кристаллизуют из этипаполучают целевое соединение, цетата и 171-17з с. ЯМР-спектр: (DMCO-el ) ; 1.05 (t,3H) 2,27 ( J , 2Н), 4,46 ( et .2Н) 7,81 и 8.1 ( i . 2Н). , rj р и мер 28. Пропионипгяицил- S- ритилцистеинил- К -трет-бутилоксикарбониллизиласпарагкаилфенилаланилфениладаикнметиловый эфир fCHsCH -CO-PjH-llHCЧ Трт) -Л из (Бок) -Асн-Фен-Фен-ОМе, В раствор 4,3 г (4 ммоль) соединения Н-Цис(Трт)-Лиз(Бок}-Асн ен-4 ен-ОМе, полученного в примере 13, и 0,56 мл Кэтилморфолина в 20 мл ДМФ при О С добавпяюгхоподныйрасгвф 1,5 г (4,85 ммоль) соединения формулы СНзСНг-СО-Гли-Отцп, полученного в примере 27, и 2ОО мг 1- окси6ензотриаэопа в 15 мл ДМФ, раствор вьшерживают в бане со льдом 3 дня. Растворитель упаривают, остаток растворяют в м таноле и продукт осаждают серным эфиром. Осадок отделяют фильтрованием и кристалли зуют из смеси метанола с изопропиловым эфиром, получая целевое соединение, т.пл. 210-213°С. 22,9° (с 1; ДМФ). Пример29. Пропионил- i$ -тритилцистеинил- Й- -трет-бутилоксикарбониллизиласпарагинилфенилаланилфенилаланингид-развд ССНзСН2.-СО-Гли-Цис (Трг)-Лиз(Бок)Асн-Фен-Ф ен- NH Н Н j, В раствор 4,1 г (3,6 ммоль) соединения формулы СН5СН; -СО-Гли-Цис(Трт)-Лиз(Бок Асн-Фен-Фен-ОМе, по/сученного в примере 28, в ЗОО мл метанола добавляют 6,4 мл (0,13 моль) гидраэингидрата, смесь перемешивают 2 дня при комнатной температуре выпавший осадок отфильтровывают, промывают холодным метанолом и кристаллизуют целевое соединение, из метанола, получая tot|J 26,l° (с 1; ДМФ г. пп, 218 С (разп.), Пример ЗО. Пропионилглицил- S -тритилцистеинил- К -трет утилоксикарбониллизиласпарагинилфенилаланилфенилаланилтриптофил- Н -трвт бутшшксикарбонилли3 ил-(О-7т вт-бутил)-тре онил фен илаланил(О-Трет-бутил) -треонил- (О-трвг-бутил) -серил- S -тритилцистеин СН |СН2.-СО-ГлиЦис (Трт)-Л из (Б DK)-Асн-Фен-Фен-Трп W1 из (Бок)-Трн(Буг)-Фен(-Трн(Буг)-Сер(Вуг)11ис-(Трт)-С5нЗ. К расгвор 0,564 г (О,5 ммопь) соединения формулы СНзСН -СО-Гли-ЦисСГрт)Лиз(Бок)-Асн-Фен-4 ен- NHNHj,, полученного в примере 29, в 6 мл ДМФ при -1ОС И перемешивании добавпяют 0,56 мл , (1,28 ммоль) 2,3 н. раствора хлористого этилацетате, смесь охлаждают водорода в о„ -15 С и добавляют к ней 0,07 мл ДО (0,6 ммоль) трвт-бутнл-нитрита, переме-10°С 15 мин, охлаждают до шивают при -15С и прибавляютО,166мл (0.97ммоль). N-этилпиизопропиламияа и раствор О.ЗООм (О,67 ммопь) соединения формулы Н-Трп-Ли (Бок)-Трн-{Бут)-Фен-Трин(Бут)-Сер(Бут)-Цис(Трт)-ОН, полученного в примере 22, и О,О98мл (ЗО,57ммоль)Н -этипдиизопропил амина а 5 мл ДМФ. Погогченную смесь переме 58 -10°С, 1 ч при 0°С и шивают 1 ч при 25 С. Растворитель упазатем 18 ч при ривают, остаток суспендируют в метаноле, суспензию по каплям добавляют в 5%-ный водный раствор лимонной кислоты. Остаток фильтруют, сушат, раст11 | 1ют в порошок в метаноле, сушат и получают целевое соединение. Аминокислотный анализ (окисление надмуравьиной кислотой): Лиз 2,37; Сер 0,82; Асп 0,98; Гли 1,0; Три 2,06; Фен 3,24; Цис 2,24. Примерз 1. Циклический дис.ульфвд.пропионипглиципцисгеиниллизипаспарагинипфеНИЛаланилфенилаланилтриптофиллизилтроенилфенилаланшттреонилсерилцистен fCH CHg-CO- Тли-Цис-Лиз-Асн-4 ен-Фен-Трп-Лиз-ТрнФен-Трн-Сер-Цис-ОН. 0,800 г (0,32 ммоль) линейного тетрадекапептида формулы СНзСН -СО-Гли-Цис (Трт)-Лиз(Бок)-Асн-4 ен-Фен-Трп-Лиз(Бок)Трн(Буг)-Фен-ТрнГБут)(Бут)-Цис (Трт)-ОН, полученного в примере 30, растворяют в 90О мл горячего метанола, затем раствор охлаждают до комнатной температуры и вносят его по каплям в 150 мл (ЗО ммоль) 0,5%-ного раствора йода в метаноле, смесь перемешивают 1 ч, затем перемешивают еще 45 мин, охлаждают в ледяной бане и для устранения избытка йода добавляют 6 мл 1 н. раство} тиосульфата натрия в воде. Растворитель отгоняют, остаток расти(;)ают в порошок в изопропиловом эфире и получают циклический дисульфид тетрадекапептид формулы СН i,CHj -CO-Гли-Циc-Лиз(Бgк)rAcн-Фeн-Фeя-Tpп-Лиз(БoкгTpн(Бyт)-Фeн-Tpи(Бyт)-Cep(Бyт), к 0,400 г (0,2 ммоль) которого в атмосфере азота при интенсивном перемешивании прибавляют 16 мл холодной концентрированной соляной кислоты, смесь охлаждают в бане с ледяной водой, затем перемешивают .10 мш, добавляют 16О мл ледяной уксусной Кислоты и раствор лиофилизируют. Остаток растворяют в воде и вновь лиофилизируют. Сухой остаток растворяют в 50 мл воды, пропускают раствор через колонку (2,5x30 см), заполненную карбсксиметилцеллюлозой (Уатман СМ-23) и элюируют продукт 0,ОЗ моляльным буферным раствором аммонийацетата. Очищенный материал сушат лиофилйзацией и получают целевое соединение в виде белого твердого продукта в форме его кислого аддукга с уксусной кислотой, (в метаноле); 2S3 нм ( € 6,702), 289 нм ( С ,6,350). Повторной лиофилйзацией водного раствора продукта получают целевое соединение в форме свободного пептидного производного. Аминокислотный анализ: Лиз 2,07, Асп 0.96; Три 2,07; Сер О,93; Фен 3,14. Таким же образом, но f использованием вместо йода тирциавогена в соответствии с методом Хискв и Смита, можно ;получить I целевое соединение. Пример 32. /, oL -Диметил--3,5-диметоксибензилоксвкарбонвдтриптофнл- N -.трвт-бутвпоксикарбоншшизЕл- (О-трет-буткп)-треонипфенилаланип- (О-9рвт-бутнл) треонил- (О-треч -бутш1)-серин-2-{тритилтио)-этиламид Ддз-Трп из(Бок)-Трн(Бут) -Фен-Трн(Бут)-Сер(Бут)- НСН СН2$-ТртХ , 0|64 г (1 ммЬль) соединения формулы Ддз-Трп-Лиз( Бок)Трн( Бут) -Фен-Т|эн( Бут) -1 -Сер(Бут)- NH NHg, полученного в примере 20А, растворяют в 10 мл сухого перегнанного ДМФ, охлаждают до -20 С. В полученный раствор вносят 0,6 25 ммоля 2 н. раствора хлористого водорода в этилацетате, затем 0,069 мл (О,6 ммоль) трет-бутил нитрата и перемешивают еще 15 мин при -15 С. Раствор 159 мг (0,5 ммоль) 2тритилтиоэтиламина в 10 мл ДМФ и 0,212 мл (1,25 ммоль) Н -этилдиизопро-15 С и по каплям пиламина охлажаают до вводят в полученную реакционную смесь, затем перемешивают при -15 С 1 ч и при 25 С в течение ночи. Смесь упаривают при пониженном давлении, остаток растирают в порошок в охлажденном льдом 1 н. растворе лимонной кислоты, фильтруют, промывают во дои и сушат. Остаток хроматографируют на силикагеле (75 г), элюируя.хлороформом, содержащим 3% метилового спирта, и вьшеляют хроматографичёски чистый продукт, который далее кристаллизуют из смеси метило вого спирта с изопропиловым эфиром, полу. чая целевое соединение, т. пл, 138-14О С, о.3 р +10,8 (с 1; ДМФ). Пример 33. Триптофил-, N -трвт-бутилоксикарбониллиз1Ш-(О-трвг-бутил)-трео цилфенилаланил-( О-трет-бутил) -треонил-(О-трет-бутил) -серин-2 (тритилтиЪ} -эт памид . Н-Трп-Л из (Бок) -Трн (Бут) -Фен-Трн( Бут) -Сер(Бут)- Н HCHgCHgS-rTpT. 4ОО мг (0,256 ммоль) соединения формулы Ддз-Трт-Лиз(Бок)-Трн(Бут)-фен-Трн (Бут)-Сер(Бут)-,МНСН,СН28-Трт, полученного в примере 32, растворяют в 3,5 м холодной смеси уксусная-муравьиная кислоты-вода (7:1:2) и перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Растворитель упаривают, остаток растворяют в 15 м метанола. Концентрированным раствором гид рата окиси аммония доводят рН смеси до 15, растворитель отгоняют, остаток лнофиизируют и получают целевое соединение в виде твердого продукта. Аминокислотный анализ: Лиз 1,06; Сер О,75; Трн 1,86; Фен 1,00. Пример 34. Тр т-бутш1оксикарбонилаланилглицил- % -тритилцистеинил- Н ррет утилоксикарбонш1лизиласпарагинилфенилаланилфенилаланилтриптофил- К - ретбутил оксикарбон илл изил- (О-трёт-бутил) -тре онилфенилапанил-(О-1Т вт-бутш1 )-треонил{0-трвт-бутш1)-серин-2-(тритилтио)-этилаМВД Бок-Ала-Глн-Цис{Трт)-Лиз(Бок)-АснФен-фен-Трп-Л из (Бок) -Трн( Бут) тФен-Трн (Бут)-Сер(Бут)- HHCHj CH S-TpTj 0,400 г (0,320 ммоль) соединения формулы Бок-Ала-Гли-Цис(Трт)-Лиз(Бок)-АснФен-Фен-.КННН , полученного в примере 14, растворяют в 6,25 мл сухого перегнанного ДМФ, раствор охлаждают до -20 С и прибавляют 0,40 мл {0,80 ммоль) 2 н. раствора хлористого водорода в этилацетате и О,44 мл (0,384 ммоль) трет-бутилнитрига,смесь перемешивают-15мин ори-15 С. Раствор 0,492 г (О,32О ммоль) соедине-л ния формулы Н-Трп-Лиз(Бок)-Трн{Бут)Фен-Трн (Бут)-Сер (Бут)-J&iCH CHjS-Трт, полученное в примере 33, в 4,7 мл ДМФ и 0,136 мл (0,8 ммоль) ВТ-этилдиизопропнламина охлаждают до -15 С и по каплям добавляют в полученную смесь, перемешивают 1 ч при -15 С и 18 ч при 25 С. упаривают досуха при пониженном давлении, остаток растирают в порошок в охлажденном льдом 2 н. растворе лимонной кислоты, фильтруют и промывают водой, затем вновь /растирают в порошок, четыре раза промывают метанолом и сушат, получая целевое соединение. АМИНОКИСЛОТНЫЙ анализ: Лиз 2,24; Сер 0,53; Асп 1,04; Гли 1,00; Трн 1,9О; Ала 1,02; Фен 3,16. П р и м е р 35. Циклический дисульфид апанилгпиципцисгеиниппизяласпарагинипфенилаланилифенилаланилтриптоффиллизтреонилфенилрнилсерин-2-меркаптоэтиламид (Н-Ала-4лнЦис-Лиз-Асн-Фен-Фен-Трп-Лиз-Трн-Фен-ТрнСер- HHCHaCHg S). Раствор О,611г (O,24lD ммоль) соединения формулы Бок-Ала-Глн-Цис-(Трт)-Лиз (Бок) -Асн-Фен-Фен-Трп-Л из Бок) -Трн (Бут) Фен-Трн(Бут)-Сер(Бут)- Н HCH CHgS-TpT, полученного в примере 34, в 30 мл сухого перегнанного ДМФ медленно добавляют в перемешиваемый раствор 0,625 г (2,46 моль) йода в 122 мл метанола при комнатной темРаствор перемешивают еще при „. . пературе 25 °С 1 ч, охлаждают до 0°С и для устранения избытка йода в него вводят осторожно 1 н. раствор тиосульфата натрия в воде. Растворитель упаривают практически до cv- хого состояния, остаток растворяют в 10 м метанола и добавляют 40 мл воды Выпавший остаток отделяют, промывают водой, над пятиокисью фосфора и попучают цикли ед ий пептип гЬопмулы Бок-ДлаГди-Цис-Лиз(Бок)-Асн-Фен-Фен-Трп-Лиз(Бо Трн(Бут)-фен-Трн{Бут)-Сер(Бут)-ННСН2С раствор которого в 19,4 мл концнетрирован ной соляной кислоты охлаждают до О С и интенсивно перемешивают в атмосфере азота 1О М1Ш, затем прибавляют 195 мл ледя ной уксусной кислоты и лиофилизируют. Остаток растворяют в 40 мл воды и вновь ли фшшзируют. Сухой продукт растворяют в О,О1 моляльном растворе ацетата аммония, центрифугируют, собирают мутную надосадоч ную жидкость, которую пропускают через, колонку (2,1x35 см) с карбоксиметилцеллюлозой (Уатман СМ-23), элюируя О,О6 м ляльным буферным раствором ацетата аммо ния. Элюат лиофилизируют и получают целевое соединение в виде твердого продукта в фирме его кислого аддукта с уксусной кис(в метаноле), нм; 273 ( g 4620), 282 ( 4770), 289 ( . 4301). Повторной лиофилизацией вод ного раствора этого продукта получают целевое соединение в форме свободного пептидного производного. Аминокислотный анализ: Лиз 1,96; Сер 0,69; Асп 0,92; Гли 1,00; Три l,83j Фен 3,03. Таким же образом, но с ncnonb30BaHHjeM вместо йода тиоцианогена в соответствии с методом Хиски и Смита, можно получить также целевое соединение. Пример 36. Пропионилглицил- S -тритилцистеинш1- Н -1 рет-бутилоксикарбонилЛизиласпарагинилфенилаланилфенилаланилтриптофил- К -трет-бутилоксикарбониллизил- (О-трвт-бутил)-тpeoнилфeнилaлaнил- - (О-трет-бутил) -треон шт - (0-трвт-бутил) серин-2-(тритилтио)-этиламид СН5СН2-СО-Гли-Цис(Трт)-Лиз{Бок)-Асн-Фен-фен-Трп-Лиз(Бок)-Трн(Бут)-Фен-Трн(Бут)-Сер(Бут)- NHCHj CHgS -Трт. 0,564 г (0,5 ммоль) гексапептида формулы СНзСН2,-СО-Гли-Цис(Трт)-Лиз-(Бок)Асн-Фен-Фен- КН N Н , полученного в примере 29, растворяют в 6 мл сухого перегнанного ДМФ. Раствор охлаждают до -2ос и добавляют к нему раствор 0,66м (1,25 ммоль) 1,9 и. хлористого водорода вэгит1ацетате,затемО,О685мп (О.бОммопь) трвт-бутилнитрита. Смесь перемешивают 15 мин при -15 С и прибавляют к ней раствор О,67О г (0,50 ммоль) соединения формулы Н.-Трп-,Лиз(Бок)-Трн(Бут)-ФенТрн(Бут)-Сер(Бут)- NHCHzCH S-TpT, полученного в примере 33,.в 5 мл ДМФ и Н -этилдиизопро0,214 мл (1,25 ммоль) смесь перемешивают при -15 С пиламина. 1 ч и при 25 С 18 ч, растворитель отгоняют при пониженном давлении, остаток растирают а порошок в метаноле, затем в охлажденном льдом 1,н. растворю лимонной кислоты, фильтруют и промывают водой. Твердый остаток вновь растирают четыре раза Б метаноле, сушат и получают целевое соединение. ЯМР-спектр (DM SO - d ) ; 1.05 и 1,13 (18Н), 1,38 (27Н), 7,37 (ЗОН). Аминокислотный анализ: Лиз 2,20; Асп 0,98; Трн 1,73; Сер 0,50; Гли 1,ОО; фен 2,96. Пример 37. Циклический дисульф1щ пропионилглиципцистеинниппизипаспарагинипфе;нилаланилаланилтриптофиллизилтреонилфенилаланилтреонш1серин-2-меркаптоэтиламидСНзСН -СО-Гли-Цис-Лиз-Асн-Фен-ФенТрн-Лиз-Трн-Фен-Трн-Сер-ННСНгСНаЗ. Раствор 0,803 г (0,325 ммоль) соеинения СНзСН2-СО-Гли-Цис(Трт)-Лиз(Бок)сн-Фен-Фен-Трп-Л из (Бок) -Трн (Бут) -фенТрн(Бут)-Сер-(Бут)- NHCHgCHiS -Трг, полученное в примере 36, в 50 мл ДМФ постепенно добавляют в перемешиваемый раствор 0,823 г (3,25 ммоль) йода в 163 мл метанола при 25 С. Раствор пере мешивают еше при 25 С 1 ч, охлаждают до О С и постепенно добавляют 1 н. раствор тиосульфата натрия для удаления избыт ка.йода. Растворитель отгоняют, остаток растворяют в 1О мл метанола и вводят в холодную воду. Выпавший осадок отфильтровывают, суш:ат над пятиокисью фосфора и получают циклический тетрадекапептид формулы СН 3 CHg-СО-Гли-йис-Л из(Бок)-Асн-Фенфен-Трп-Л из( Бок )-Трн (Бут) -Фен-Трн (Бут)Сер(Бут)- S . раствор которого в 25 мл концентрированной соляной кислоты в атмосферу азота, охлажденный до О С интенсивно перемешивают 1О мин, затем добавляют 250 мл ледяной уксусной кислоты и раствор лиофипизируют. Остаток растворяют в воде и вновь лиофилизируют. 6ОО мг остатка растворяют в 0,01 моляльном растворе ацетата аммония, центрифугируют, мутную надосадочную жидкость собирают и пропускают через колонку (2,1x35 см), запсшненную карбоксиметилцеппюлозой (Уатман- СМ.-23) вымывая О,О4 мопяпьными О,О5 моаяпьным буферным раствором ацетата аммония. Элюат ниофипизуют и получают целевое соединение ввипебелого твердого продукта вформе кислого аояукга с уксусной кислотой Лкакс (в метаноле),нм: 289 ( 428О), 283 ( 468О), 267 (1462О). Повторной пиофилизацией водного раствора этого продукта попучают целевое соединение в формесво- бодного пепшдного производного. Аминокислотный анализ: Лиз 1., Сер 0.77; Асп 1,О1; Гли 1,ОО; Три 1,7 Фен 2,90. Таким же образом, ио с использованием вместо йода тиоцианогена, в соответствии с методом Хиски и Смита, можно также по лучить целевое соедшшние. Пример 38. Бензилоксикарбонил-W- Трет-бутилокснкарбониллизиласпарагинилфс-иилаланилфенилаланинметиловый Лиз(Бок)-Асн-Фен-Фен-ОМеЗ . К раствору 4,6 г ( 0,0089 ммоль) сое динения формулы Н-Асн-Фен-Фен-ОМеК XCHjCOOH, полученного в примере 7, в 40 ДМФ, охлажденному до О С, при интенсивном перемешивании добавляют 1,15 мл Н-этилморфолина и раствор 4,5 г ( Mo соединения формулы 3- р-Лиз(Бок)-ОН р в 20 мл ДМФ. Реакционную смесь выдержи вают при О С 3 дня, растворитель при пониженном давлении выпаривают, остаток кр таллизуют из метанола и получ§ют целевое соединение, т. пл. 198-199 С. Вычислено,%: С 63,79; Н 6.66; N 10,8 Найдено,%: С 62,56; Н 6.72; К10,39. Пример 39. Н, S -Дитритилцисте иниа-К-трет бутипоксикарбониплизиласпарагинилфенилаланнлфенилаланинметиловыйэфир Трт-Цис (Трт)-Л из (Бок)-Асн-Фен-Фен ОМе. Раствор 4,5 г (О,ОО58 моль) тетрапеп тида с блокированными группами формулы 3- D -Лиз(Бок)-Асн-Фен-Фен-ОМе, получен ного в примере 38, в 8О мл сухого перегнанного ДМФ и 80 мл ледяной уксусноК кис лоты гидрогенизируют в присутствии 0.6 г катализатора (5% Pd /С) в течение 3 ч. Катализатор отфильтровывают, растворитель отгоняют, остаток растворяют в метаноле, осаждают серным эфиром и получают тетрапептид без блокирующих групп формулы Н-D -Лиз(Бок)-Асн Фен-Фен-ОМе, в охлажде ный доО С раствор 4.1 г (0,0056 моль) которого и 0,87 мл Н-этилморфолина в 30 мл ДМФ при перемешивании добавляют раствор 5,3 г (О.ОО68 моль) К, S -дитритилцистеин- X - оксисукциимрщного эфи- . Смесь перемешивают 4 дня при О С растворитель отгоняют, остаток растворяют в 4ОО мл этилацетата, фильтруют и фильтрат промывают 5%-ным водным раствором лимонной кислоты (3x100 мл), 7%-ным раствором бикарбоната натрия (3x100 мл) и насыщенным раствором хлористого натрия (2x50 мл). Раствор сушат над безводным сульфатом магния, растворитель отгоняют, остаток кристаллизуют из смеси этиацетата с петролейным эфиром и получают соединение, т.пл. 169 С разл. ) ел(.вое 9.9° (с 1; ДМФ). to if Пример 4О. Трет-бутилокснкарбоилланшилицил- S -тритилцистеикнл- Н -- трвт-бутилоксикарбонил- D -лизнласпа агинилфенилаланилфенилаланинметплэвый зфжр Бок-Ала-Гл11-Цис(Трт)-1) - вз Бэ ; ;-Асв Фeн-Фeн-OЛ e}. В раствор 2,6 г (2.07 ) соединения формулы Трт-Цис(Трт)- У) -Лиз(Бок)сн-Фен-Фен-О/Ме. полученного в примере 9. в 160 МП ледяной уксусной кисяэгы по каплям при комнатной температуре добавляют 30мл воды. Раствор nepeMeiuHB.ysoT при 45 С 2 ч, {зазбавляют 2ОО мл воды, выпавший осадок отфильтровывают, фи.ьтраг упаривают досуха, остаток растворяют в метаноле, осаждают серным эфиром и получают (Трт)- J)Лиз(Бок)-Асн-Фен-Фен-Оме, в охлажденный раствор 1.6 г (1,49 ммоль) которого в 20 мл ДМФ при О С добавляют 0,24 мл К -этилморх})олина, раствор 0,79 г (1,86 ммоль) трет-бутилоксикарбонилаланилглицш1-2.4,5-трихлорфенилового эфира, полученного в примере 3, в 7 мл ДМФ и каталитическое количество (0,1О г) 1-оксибензотриазола. Раствор выдерживают при О С 3 дня, растворитель отгоняют, остаток растворяют в метаноле, осаждают серным эфиром и кристаллизацией осадка из метанола получают целевое соединение, т.пл. 232°С (разл.), ,6° (с 1; ДМФ). Аминокислотный анализ: Лиз 1,02; Асп 1.ОЗ; Гли 1,ОО, Ала 1,00; Цис О,40; Фен 2,11. Пример41. Трвт-бутилоксикарбонилаланилглицил- 3 -тритшшистеинил- К рет-бутилоксикарбонил- D -лизиласпарагинилфенилаланилфенилаланингвдраз1ш БокАла-Гли-Цис(Трт)- 2) -Лиэ(Бок)-Асн-ФенФен-ННМНа. Б раствор 0,95 г (0,76 ммоль) метилового эфира гепгапептида. формулы Бок-Ала.Гли-Цис(Трт)- В -Лиз(Бок)-Асн-Фен-Фен)Ме, полученный в примере 40, в 12 мл ДМФ. охлажденный в бане со льдом, добавляют по каплям 1.5 мл (О,ОЗО5 мопь) гвдразингидрата. Смесь перемешивают при 25 С 20 ч, растворитель отгоняют, остаток растирают в порошок в воде и метаноле, фильтруют, сушат и получают целевое соединение. Аминокислотный анализ: Лиз 1,07,Аса 1,04; Гли l,OOj Ала 1,00; Цис следы; Фен 2,18. Пример 42. Трвт-бутилоксикарбонилаланнлглицил- S -тритилцистеинил- N Трет-бутилоксикарбонил- D -лизиласпарагинилфенилаланилфенилаланилтриптофил-Трст-оутилоксикарбиН1 Ллизш1- (О-трет-бутил ч;ерил- S -тритилцистеин Бок-А,;а-Гли-Цис- J) -Лиз(Бок.)-Асн-Фен-Фен-Трп-Лиз (Бок)-Трн{Бут)-Фен-Трн(Бут)-Сер(Бут)Цис{Трт)-ОЬО. Аналогично примеру 23, но в качестве первого гелтапептида берут соединение формулы Бок-Ала-Гли-Цис(Трт)- D -Лиз(Бок)-Асн-Фен-Фен-}lHIiH2 , полученное в примере 41, а в качестве второго гептапептида берут соединение формулы Н-Трп-Лиз(Бок)-Три (Бут )-Фен-Трн (Бут )-Сер( Бут)-Цис (Трт) -ОН, полученное в примере 22В, синтезируют целевой тетрацекапептид,который вьвдепякэт из реакционной смеси, выпаривая растворитель, растворяя остаток в метаноле, повторно осаждая по каплям (добавляя метанольный раствор в 5%-ный водный раствор лимон ной кислоты), отделяя осадок и высушивая конечный продукт. Продукт может быть использован для дальнейшей работы. /См1ш о кислотный анализ- Лиз 2,14; Асп 1,О9; Трн 2,13; Сер О,71; Гли 1,ОО; Ала 1,ОО; Цис 0,12; Фен 3,08. Пример 43. Циклический дисульфид трвг-бyтилoкcикapбoнилaлaнилглицилдиcтeинил - N -трет-бутилкарбонил- D -лизиласпарагинилфенилаланилфенилаланилтриптофил-N -трвт-бутилоксикарбониллизил-(О-1рет-бутил) -треонилфенилаланил-(О-трвт-бутил)-треонил-(О-трет-бутил )-серш1цистеин .ГБок-Ала-Гли-Цис-Л из (Бок) -Асн-Фен-Фен-Трп-Л из (Бок) -Трн(Бут)-Фен-Трн(Бут)-Сер(Бут)-Цис-ОН. 0,65 г (0,25 ммоль) пинейного тетрадекапептида формулы Бок-Ала-Гли-Цис(Трт) .-ф -Л из(Бок)-Асн-Фен-Ф н-Трп-Лиз (Бок)-Трн-(бут) -Фен-Трн(Бут) Сер(Бут)-Цис(Трт -ОН, полученного в примере 42, растворяют в Ю мл теплого ДМФ, раствор разбавляют 122 МП бенаогю и 490 мп метанола. ченный раствор добавляют по каплям в 122 мл (2,5 ммоль) О,5%-ного раствора йода в метаноле в течение 1 ч, смесь перемешивают еще 1 ч, охлаждают до О С и для компенсации избытка йода добавляют 1 н. водный раствор тиосульфата натрия. Растворитель отгоняют, остаток растворяют в метаноле, метанол . упаривают, остаток растирают в порошок в воде, сушат, растирают в диизопропиловом эфире и сушат, получая целевое соединение. АМИНОКИСЛОТНЫЙ анализ: Лиз 2,21; Асп 1,02; Сер О,93; Цис 1,08; Трн 2,28; Тли 1,ОО; Фен 3,30; Ала 1,ОО. Пример 44 (D -Лиз)-Соматостати Цикпический дисульфид апанипгпиципгпиципцис- геинип - 1 -пизипаспарагинипфенипаланипфени япанип-трипгофиппиэиптреонипфенйпапавииnipe ннпсерипцистеин JH-Апа-Гпи-Цис- р - Лиэ-Асн -Фен-Трп-Лиз-Трн-фен-Трн-Сер-Цйс-ОН , Аналогично примеру 25, но в качестве циклического дисульфида примера берут эквивалентное количество соединения формулы Бок-Ала-Гли-Цис- D -Лиз(Бок)-Асн-Фенен-Трп-,Лиз(Бок)-Трн(Бут)-Фен-Трн(Бут)Сер(Бут)-Цис-ОН, получают целевое соединение, Д иске. (в метапаче): 29О нм ( 6940), 283 нм ( 8 688О). Аминокислотный анализ: Лиз 1,97; Асп 0,98; Трн 1,87; Сер 0,86; Гли 1,ОО} Ала 0,98; Цис 0,87; Фен 3,03. Пример 45. БензилоксикарбонилК -бутилоксикарбонил- Ъ пизип-(О-трвгбутил)-тре он илфенш1аланил-( О-трет-бутил)треонип-(О-трвт-бутип)-серинметнповый эфир Э- ( Бок )-Трн (Бу т)-Фен-Трн (Бу т)-Сер (Бут)-ОМе1. Аналогично примеру 18А, проводят конденсацию соединения 3-D -Лиз(Бок)-ОНр, полученного в пример 38, и Н-Трн(Бут)фен-Трн(Бут)-Сер(Бут)-ОМе с последующим хроматографичесКИМ разделением, получая целевое соединение в виде пенообразного продукта. ),S: 1,3 ( Л1 ,42Н), ЯМР-спектр (CDCtj 3,75 ( S ,ЗН), 5,17 ( S ), 7,3 и 7,38 ( S . ЮН). Пример 46. о(. ai -ДиметилЗ,5-диметоксибензилоксикарбонилтриптофилN-ч-реТ-бутилоксикарбонил- J) г1изип-(С трет-бутил)-треонш1фенш1аланил- (О-третбутил-тре онил-( О-трет-бутил )-серинметш10вый эфир Ддз-Трп- D -Л из (Бок)-Трн (Бут) Фен-Трн(Бут)-Сер(Бут)-ОМеЗ. Соединение 3- D Лиз(Бок)-Трн(Бут)Фен-Трн(Бут)-Сер(Бут)-ОМе, полученное в примере 45, гидрогенизируют аналогично примеру 19А, и проводят конденсацию полученного продукта с соединением Ддз-ТрпОН. После хроматографической очистки и и кристаллизации из смеси серного эфира с петролейнымполучают целевое соединение, т.пл. 106-130. Cotj2/5,4 (с 1} ДМФ). Бычислено,%: С 63,19; Н 7,92;. N 8,79. Найдено,%: С 63,09, И 7,92, N 8,78. Пример 47, о . об -Диметил3,5-Диметоксибензилоксикарбонилтриптофенил- Н -трет-бутилоксикарбонил- D -лизилСО-трет бутип)-тpeoнипфeнипaпaни/l-(O-тpQт-бyтил)-тpeoни№-(O-Jpвт-бyтип)cepингидpaзид Ддз-Трп- 15 -Л из (Бок)-Трн (Бут)-Фен-Трн (Бу т)-Сер№ут)-Н И N И а. Раствор 5Д4 г (4,04 ммоль) соединения формулы Ддз-Трп-)-,Лиз(Бoк)-Tpн(Бyт)Фeн-Tpн(Бyт)-OMe, полученное в примере 46, в 23 мл ДМФ смешивают с 7,53 мл гидразингидратаи оставляют на 21 ч при комнатной температуре. При добавлении к рекционной смеси воды выпадает осадок, который отделяют и кристаллизуют из смеси MeTaJiona с диизопропиловым эфиром, ncwiyчая целевое соединение, т.пл. 115-130 С, 0 9,2 (с li ДМФ)о Пример 48. ot , об -Диметил-3,5-Диметоксибензилоксикарбонилтриптофил -М -трет-бутилоксикарбонил- D -лизил-(О-Трет-бутил}-треонилфенилаланш1- (О-тр бутш1)-треонил(О-трат-бутил)-серил- S -тритилцистеин ХДдз-Трп- D -Л из (Бок)-Трн{Бут)-фен-Трн{Бут)-Сер(Бут)-Цис{Тр 2,15г {1,69ммоль) соединения Ддз-1рп-В -Лиз{Бок)-Трн{Бут)-Фе1 -Трн{Бут)-Сер (ByT)-NHNHg,полученного в примере 47, растворяют в 35 МП сухого перегнанного ЛМ охлаждают до -2О С и прибавляют в нему 2,11 МП 2 н. раствора соляной кислоты в эти,лацетате, .затем 0,233 мл (2,02 ммоль трет-бутилнитрита и перемешивают 15 мин при ; -15 С, рзаствор 0,615 г (1,69 ммол .соединения формупы Н-Цис-(Трт)-ОН в 58 (5,92 ммоль) о ДМФ, содер)сащий 1,01 мл охлаяадают до -15 С диизопропилэтиламила и вводят в полученную реакционную смесь, затем перемешивают еще при -15 С 1 ч и при 20-25 С в течение ночи,смесь упа ривают при пониженном давлении (0,2 мм рт.ст) при 35 С, остаток растирают в поро шок с охлажденным льдом 1 н. раствором лимонной кислоты, фильтруют, промывают водой, сушат и получают целевое соединение. ЯМР-спектр (CDCtj ),§;, 13 и 1,2 (27Н), 1,47 (9Н), 1,7 (бН) 3,78 (6 6,3-7,5 (29Н), Пример49. Триптофил- К -трет -бутилокси1шрбонш1- J - пизил(О-трет- -бутил)-треонилфенилаланил- (О-тре -бутил) треонил--(О-Трет-бутил)серил- S -григип- цистеш и -Л из (Бок).-Три(Бут)-Фен-Трн (Бут)-Сер (Бут)-Цис (Трт)- ОН Л . 2,18 г (1,36 ммоль) соед1шения формулы Ддз-Трп- J) -Лиз(Бок)-Трн(Бут)-Фен-Трн(Бут)-Сер(Бут)Цис(Трт)нОН„ полученное в примере 48, растворяют в 18 м смеси уксусной, кислот и воды (7:1:2), перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, растворитель отгоняют,-остаток растворяют в 15 мл метанола и концентрированным раствором аммиака до водят рН доV6,5. Полученный раствор добавляют по каплям в холодную воду, осадок отделяют и сушат в эксикаторе над пятиокисью фосфора. Твердый продукт растирают в порошок несколько раз в смеси серного эфира с петроленным (1:1) и вновь сушат, получая целевой продукт. Аминокислотный анализ: Лиз l.O; Три 1,94; Сер 0,58; Цис О,115.Фен 0,96. 58 П р и м е р 50. Трет-бутилоксикарбоншшланилглидил- $ -тритилцистеин-, ti трет бутилоксикарбоиидпизиласпарагинип-фенипаланипфенилаланилтриптофил-Д ет- бутилоксикарбонип-Р-лизил-(О-трет-бутил)-треонилфенипаланил-(О-трет-бутил)-треонил-(О-трет-бутил)-сериг1- З-григилцисгеин Бoк-Aлa-Гли-Цкc(Tpr)-Лиз(Бoк(-Acн-Фeн-Tpп-p-Лиз(Бoк)-Tpн(бyr)-Фeн-Tpн(Бyт)-Cep (Бу т)-Цис (Трг )-OHj. А1 алогично примеру 23, но в качестве первого гептапептида берут соединение фор-, мулы Бок-Ала-Гли-Цис (Трт) -Л из (Бок)-Аснфен-Фен- ) N Hj , полученное в примере 14, в качестве второго гепгапепгида берут соединение Н-T)ri- D -Лиз(Бок)-Трн (Бут)-Фен-Трн (Бут)-Сер (Бут)-Цис (Трт)ЭН, полученное в примере 49, получают целевой линейный тетрадеклпептид, которьсй выделяют из реакционной смеси путем выцаривания растворителя, растирания в порошок остатка последовательно в метаноле, охлажденном льдом 1 н. растворе лимонной кислоты, воде, к етанола и сушат. Этот продукт испопьзуюг на последующих стадиях без дополнительной очистки. Аминокислотный анализ: Лиз 2,01; Асп l,00i Три 1,79; Сер 0,52; Гли 1,00; Ала 1,О1-5 Цис 0,12; Фен 2,93. П р и м е р 5 1. Циклический дисул1фщ трет-бутипоксикарбонилалавилглиципцистеи 1К -трет-бутилоксикарбониллизаласпарагенилфенилаланилфенилаланилтрилтофил- Ы -трет- бутоксикарбонил- 5 -л113ил-(О-трет-бутил)- треонилфенилаланил - (О-трет-бутил)-тpeoнил- (O тpeт-бyтил )-сершп1Истеин , Бок-Ала-ГлиЦис-Л из (Бок)-Асн-Фен-фен-Трп-Л из (Бо к)Трн (Бут)-Фен-Трн (Бут) -Сер(Бут)-Цис-О1 Ij . Аналогично примеру 43 линейный тетрадекапецтид формулы Бок-Ала-Гл1Г-Цис(Трт)Лиз(Бок)-Асл-Фен-Фен-Тр1т- J) (Бок)Трн(Бут)-Фен-Трн(Бут)-Сер(Бут)-Цис ОН, полученный в примере 5О, в растворе смеси ДМФ-метанол обрабатывают йодом, получая целевой циклический дисульф1щный гетрадекапептид. Пример 52. ( Ъ -Лиз)-Соматостатин. Циклический дисульфид аланилглицилстеиниллизиласпарапшилфенилаланилфенилаланилтриптофил- D -лизилтреонилфенилаланилтреонилсерилцистеин И-Ала-Гли-Цис-Лиз) -Л из-Трн -Фен -Т рнАсн-Фен-фен ТрпСер-Цис-OnJ . Аналогично примеру.25, но в качестве циклического дисульфида берут эквивалентное количество циклического jlиcyльфидa формулы Бок-Ала-Гли-Цис-Л из (Бок )-Асн-Фен-ФенТрп -Лиз(Бок)-Трн(Бут)(Бут)1;ер(Бут)-Цис-ОН, получают целевое соедино.;ие, , i :.;.-; ;.1:;ли): 289 .;л ( е 4420),282 HVi ( В 475О).

Аминокислотный анализ: Лиз 1,94; Асп 0,77; Трн 1,84, 1/2 Цис 1,36; Сер 0,86; Гли 1,ОО; Ала 0,97, Фен 2,97.

Формула изобретения

Способ получения производных самотоста- Q тина общей фopмyлыICHJCHR -CO-Гли-ЦиcЛиз-Лен-Фен-Фен-Трп 1из-Трн-Фен-ТрнСер- NHCHiV где -водород или аминогруппа;

водород или карбоксил, если R is аминогруппа, R -1шрбоксил, то символ Лиз Б положении 4,9 может также представлять D -Лиз, с использованием конденса-. ции соответствующих аминокислот и удалением блокирующих групп, отличающий- 20 с я тем, что, с целью повышения качества продукта, проводят реакцию сочетания азидным методом гептапепт1ша общей формулыII

СНзСНК -СО-Гли-Цис( cpl )-Лиз(Бок)Асн-Фен-Фен- RilKHj}

где 1 -водород или Бок NH, ot -Ацм ши Трт с гептапептидом общей формулы ill

Н-Трп-Лиз(Бок)-Трн( f )-Фен-Трн( ))ер()-Ш1 -CHR -CMoS S

3fi

де к имеет указанные значения;

Г (Г -водород или группа Бут; ув - группа Ацм шш Трт,

и :К)лзче11аое липейное тетрадехапелткцное 11роиз1зод11ое обихей формулы /

СНдСНН -СО-Гли-ЦисС оС )-Лиз(Бак) -Асн-с{)он-Фен-Тр(-Лиз{Бок)-Трп{ J )фе1ь-Три( )-Cep( JA2 ) JJ j-j CHR2 -CHgS/S где R, R, Ы , , J- , (f H f2 ,1мею указанные значения, окисляют йодом илп тиоцианогеном в соответствующее циЛткческ дисульфвдное производное обшей формулы

СН J СНЫ -СО-Гли-Цис-Лиз(Бок)-Асн Фен-Фен-Трп-Лиз(Бок)-Трн ( )-Фен-Трн С -)-Сер( |-2) ЦП cHR с последующим удапением всех оставшихся блокирующих групп в кислых условиях и выделением производных соматостатина общей формулы J.

Источники инфомациии, пршштые зо вянмааие при экспертизе:

1.Стюард Дж,, Янг Дж. Твердофазный синтез пептидов, i,, щ:, , с. 77.

2.Rtvie:i Zleon Е. F. Somatostatin. TotaE phase smthesls.. Amer. СКелт, Soc. ДЭ74, 96(9), 2486-2492.

3.Шредер Э. , /Гюбке К, Пептиды,М. , , 1969, т. Т, с, 116-190.

Приоритет по призпакам: , от 10.12. 73 - R -аминогруппа;

R карбоксильная группа, ,

от Q 1.08.74 - R - водогюд,

дород, R -Н, R -СООН; R - MH.

R-H; R KHg R -COOfi; Лиз (,ли -Лиз.