Спин-меченый строфантидин, как ингибитор к -аденозитрифосфатазы Советский патент 1980 года по МПК C07J17/00 A61K31/585 

Изобретение относится к новому биологически активному соединению из класса нормальных стероидов, а именно спин-меченому производному строфантидина, являюшегося агликоном сер дечного гликозида К-строфантидина-/1. Изобретение может быть использова но в фармакологии, а также для ряда медико-биологических исследований и изучения механизма действия сердечных гликозидов и их распределения в организме методом электронного парамагнитного резонанса (ЭПР). Строфантидин и гликозиды на его основе по типу действия относятся к карденолидам и широко используются в терапии сердечно-сосудистых заболеваний . В патентной и технической литера « TiГЧЧ А ,С туре известны спин-меченые производные некоторых стероидов, в частности аидростана и прогестерона. Цель изобретения - расширение ассортимента соединений обладающих парамагнетизмом и сохраняющих исходную биологическую активность строфантидина. Спин-меченый строфантидин получают конденсацией строфантидина с 1-оксил2,2,6 ,6-тетраметил-4- (/i-амино-этил) пиперидином в среде органического растворителя при нагревании с одновременной отгонкой воды и очисткой продукта колоночной хроматозграфией на силикагеле. В указанных условиях происходит конденсация амино-группы радикала (П) с альдегидной группой строфантидина (I) о СН - ,.,, с образованием азометиновой связи В качестве органического растворител может быть использована смесь диметилформамида и бензола (1:1), Выделя ющуюся воду отгоняют в виде азеотропа с бензолом. По окончании реакции растворители упаривают, вещество сушат в вакууме, а остаток растирают с гексаном. Полученное розовое кристаллическое вещество хроматографируют на колонке с силикагелем и выделяют аналитически чистый целевой продукт (га). Исследование биологической активности полученного dпинoвoгo зонда (Ш) было проведено на препарате Na, К-АТФ-азы, выделенном из мозга быка. Препарат Na, К-АТФ-азы из мозга быка имел активность 150-200 мкмол /мг,ч. Ингибирование АТФ-азы спиHOBfjM зондом Ш изучают в инкубационной смеси, содержащей MgCI, 135 мм NaCI, 5 мм KCI, 30 мм трис , HCI (рН 7,4) 2 мм АТФ; концентрацию спин зонда (Ш) варьируют от 1 1 10 моль/л, Инкубирование спин-меченого стерофантидина (111) с ферментом для ЭПР измерений осуществляют при 37° С 15 мин. Установлено, что значение концентрации соединения (И) , при котором достигается 50%-ное ингибирование АТФ-азы (JjQ ) для препарата Na, К-АТФ-азы из мозга быка, равно б, 1 10 моль/л, т.е. того же порядка что и у исходного строфантидина ( г6 ,5 10 моль/л) , Однако преимуществом вновь полученного соединения (Ш) является возможность изучения препар тов Na, К-АТФ-азы методом спинового зонда, а также исследование распределения в организме при. использовании его вместо исходного лекарственного препарата строфантидина. Соединение, получаемое согласно изобрете.нию, может явиться перспективным спи новым зондом для изучения механизма действий строфантидина. Пример. Раствор строфантидина (0,5 ммоль) и 1-ОКСИЛ-2,2,6,6,-тетраметил-4-(/ -аминозтил) пиперидина (0,75 ммоль) в 4 мл смеси диметилформамид-бензол (1:1) кипятят 11 ч под обратным холодильником с ловушкой Дина-Старка, Затем растворители упаривают в вакууме. При растирании с гексаном получают розовое кристаллическое вещество, из которого после очистки на колонке с силикагелем (Chemapol, Л 100/60, элюент-ацетон) выделяют 0,11 г (30%) (Ш) ,ИКспектр (КВч) , 1760 (, лактон); 1670 (), ЭПР-спектры (ЭТАНОЛ -вода): ,7 э, 5, спинмоль. Масс-спектр: м-е 570 () Найдено, % С 69,84;Н 9,93; N 4,72, Ci H jOfcl i Вычислено, %: С 69,49; Н 9,61; N 4,49. Формула изобретения Спин-меченый строфантидин формулы Н,С CKj У- о Q- HHrfH. «-у 1 I н.с I ингибитор Na,К-аденозинтрифосфатаэы.