ли в случае необходимости проводят елочной гидролиз в среде спирта или осстановительное разложение с помощью литийалюминийгидрида в среде инертного органического растворителя.
Пример 1. , 24-диоксихоекальциферол.
16 мг Ы, 3, 24-триоксихолеста-5,7-диена растворяют в 500 мл диэтилового эфира, после чего приготовленный раствор облучают.УФ-лучами в течение 2,5 мин при температуре в атмосфере аргона с применением ртутной лампы высокого давления мощностью 200 ВТ/654А-36. Часть раствора отделяют и определяют УФ-спектр. Обнаруживают повышенную интенсивность поглощения при 262 и 263 н/4, что го.ворит о присутствии Id, 24-ди6ксипрехолекальциферола. После завершения реакции серный эфир выпаривают при комнатной- температуре и пониженном давлении, К остатку прибавляют 50 мл бензола, а затем проводят изомеризацию в течение 4 ч. при кипячении бензола с обратным холодильником.
После завершения реакции бензол выпаривают при пониженном давлении, а получают 16 мг белого твердого вещества. Продукт разделяют препаративной тонкослойной хроматографической обработкой с использованием силикагелевого носителя, который содержит приблизительно 1,5% нитрата серебра, причем проявление осуществляют дважды с использованием смеси 6% метанола с хлороформом. Для этого продукта получают три полосы при облучении УФ-лучами. Из наименее полярной полосы получают 2f8 мг белого твердого продукта.Он идентифицируется как Id, 24-диоксихолекальциферол, имеет следующие свойства:
УФ-спектр:Д. 265 нд; , макс (
макс
этанол
228 нл; ЙМР-спектр макс
(С,DaО): 0,57 (бМ, d, iS-CHj); 0,86 (6Н, d, J 7 ГЦ, 26 - 27 -CHj) 0,96 (ЗН, d, J 5 ГЦ, 21-CHj); 3,19 (IH, m, 24-H) ; 4,15 (IH, m, .1 ft - H) ; 4,36 . (IH, m, 3cA -H) ; 4,85 (IH, b, S, 19-H) 5,30 1H, b, S, 19-H); 6,05 (IH, d,
;}д 11 ГЦ, 6 или 7-Н) ; 6,16 (IH, d, 11 ГЦ, 6 или 7 - H) .
Масс-спектр. 416 (M), 398, 380, 269, 251, 134.
Масс-спектр с высокой разрешающей способностью:
Найдено: 416, 32768 С„ Н„ Oj Вычислено: 416,32927 т. пл. от 84 до 8 С.
Пример 2. lei., 24 (R)-диоксихолекальциферол .
10 мг U, зр, 24(Н)-триоксихолес та-5,7-диена растворяют в 140 мл диэтилового эфира, а образовавшийся раствор подвергают облучению УФ-лучами при в течение 2 мин. Часть раствора отделяют и определяют УФ-спектр. Поглощение при 262 и 263н/ указывает на наличие исходного продукта. После завершения реакции серный эфир выпаривают при комнатной температуре и пониженном давлении К остатку прибавляют 50 мл бензола и в атмосфере аргона при кипячении бензола с обратным холодильников - проводят реакцию изомеризации в течение 4 ч.
После завершения реакции реакционную смесь обрабатывают аналогично примеру 1 с последующим выделением и очисткой путем препаративной
- |тонкослойной хроматографии. Получают 1,8 мг белого твердого продукта. . Продукт идентифицируется как let, 24(R)-диоксихолекальциферол, имеет следующие свойства.
0 ДФ -спектр:Л ° 265
на 228 ЯМР-спектр (С, ) : 0,59 (ЗН, S, 18-сНз); 0,87 (6Н, d,
J 7 ГЦ, 26-27-СНз); 3,20 (IH, m, 29-Н) ; 4,14 (IH, m, l6-H) ; 4,42 (IH, 5 m, );4,87 (IH, b, S, 19-H) ; 5,32 (IH, b, S, 19-H);6,08 (IH, d, JAB 11 гц; 6 - или - 7 H) ; 6,30 (IH, d, -11 ГЦ, 6- или 7-Н) ;.
Масс-спектр: 416 (М ), 398, 380, 0 269, 251.
Масс-спектр с высокойразрешающей способностью:
Найдено: 416,33084. С Вычислено 416,32927
5Пример З.Ы, 24 (S)-диоксихолекальциферол
15 мг 1 , Зб, 24(S)-триоксихолеста-5,7-диена, растворяют в 140 мл диэтилового эфира, а образовавшийся раствор облучают УФ-лучами 2 мин
при 5 С. После этого повторяют часть процесса, которая описана в примере 2, в результате цр/1учают 2,8 мг белот6 твердого продукта. Продукт идентифицир ют как Id, 24 (S)-диоксихоле кальциферол, имеет следующие свойства: УФ-спектр 265 нм;
228 ам, ЯМР-спектр п (): 0,58 (ЗН, S, 18-CHj); 0,87 0 (СИ, d, ,3 7 ГЦ, 26 - Н, 27-СНр; 3,20 (1Н, т, 24-Н); 4,14 (IH, m, if-H)- 4И2 (IH, m, 34-H) ; 4,87 (IH, b, S, 19-Ю ; 5,32 (iH, b, S, 19-Ш f -. 6,08 (IM, d, JAO 11 ГЦ, 6 - или 5 7 - H); 6,30 (IH, d; 0„ 11 гц,
6 - или 7 - H). Масс-спектр: 416(M ), 398, 380, 269, 251, 134. Масс-спектр с высокой разрешающей способностью: Найдено: 416,33096 CJT Нд С. Найдено: 60 416,32927
Пример 4. U, Зр, 24-триацетоксихолест-5,7-диен.
200 мг М, 3|J, 3f, 24-триоксихолеста-5,7-диена используют для проА5 I ведения реакции с 2 мл уксусного ангидрида и 5 мл пиридина при темпера-i туре 95°С в течение 3 ч. Реакционную смесь далее помещают в смеет воды со льдом и экстрагируют 40 мл диэтилового эфира. Эфирную фазу промывают разбавленной соляной кислотой, затем щелочью и еще раз водой, после чего сушат„ Серный эфир выпаривают, получают Id, 3, 24-триацетоксихолеста 5,7-диена в виде желтоватого маслянистого продукта,
В) 1с, 24-диацетоксихолекальциферол-3 -ацетат.
50 мг Д, 24-диацетоксихолекальциферол-3 3-ацетата растворяют в 500мл диэтилового эфира. Приготовленный раствор обЛучают УФ-лучами в атмосфере аргона при в течение 4 мин.
Часть этого раствора отделяют и определяют его УФ-спектр.
Поглощение в интервале 262 до 263 нм указывает на наличие исходного соединения. После завершения реакции серный эфир выпаривают при пониженном давлении и комнатной температуре, К остатку добавляют 100 мл бензола и в течение 2 ч в атмосфере аргона кипятят с обратным холодильником. После завершения реакции большую часть бензола выпаривают при пониженном давлении, а к остатку добавляют 2 мл 5%-ного раствора гидрата окиси калия в метаноле, 2 мл метанола и 2 мл бензола. Смесь выстаивают 1 день при комнатной температуре для завершения гидролиза. Реакционный продукт разбавляют воой и экстрагируют этилацетатом, Этилацетатную фазу несколько раз промывают водой и сушат, Этилацетат выпаривают при пониженном давлении с получением 35 мг.слабо-желтого маслянистого продукта.
Этот продукт выделяют и очищает тoнкocлoйнpй хроматографией с применением силикагелевого носителя, который содержит нитрат серебра.
Получают 5,7 мг твердого продукта. Этот продукт, полученный после изомеризации, идентифицируют как Ы, 24-диацетоксихолекальциферал-З-ацетат,
Пример 5, А) lot, 3, 24-трибензоилоксихолеста-5,7-диен,
Проводят реакцию 160 мг IdL, 3j8, 24-триоксихапеста-5,7-диена, с 41бмг бензоилхлорида и 15 мл пиридина.
Реакционную смесь разбавляют воой и экстрагируют 40 ,мл диэтилового эфира. Эфирную фазу промывают разбавленной соляной кислотой, за- тем щелочью и наконец водой с последующей сушкой,
Серный эфир выпаривают с получением let, 3, 24-трибензоилоксихолеста-5,7-диена ; в виде белого аморфного продукта.
B), 24-дибензоилоксихолекальдиферол-З -бензоат.
30 мг , 3j3, 24-трибензоилоксихолеста-5,7-диена растворяют в 500мл бензола и приготовленный раствор облучают УФ-лучами в атмосфере аргона при 2 мин. После завершения реакции в течение 2 ч, в атмосфере аргона и при кипячении бензола с обратным холодильником проводят реакцию изомеризации. После завершения реакции большую часть бензола выпаривают при пониженном давлении и
0 к остатку добавляют 2 мл 5%-ного раствора гидрата окиси калия в метаноле и 2 мл бензола. Смесь вьщерживают при комнатной температуре в течение 28 ч. в атмосфере аргона,
5 осуществляют гидролиз. Затем реакционный продукт разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Этилацетатн-ый слой несколько раз промывают водой и сушат. Этилацетат выпа0ривают при пониженном давлении. Остаток разделяют и очищают получаю 1,9 мг lot, 24-диоксихолекальциферола, свойства которого идентичны свойствам продукта, полученного по примеру 4 .
Получают продукт, который после проведения реакции изомеризации.идентифицируют как Idv, 24-дибензоилхолекальциферол-3-бензоат,
0 Пример 6. А) ldk-окси-З, 24-дибензоилоксихолеста-5,7-диен,
250 мг Id,, 3jS, 24-триоксихолеста-5,7-диена смешивают с 210 мг хлористого бензоила и 5 мл пиридина,
5 после чего смесь выстаивают при 23 С один день. Затем смесь обрабатывают, аналогично примеру 5, .получают 1Л-ок.си-3 ft, 24-дибензоилоксихолеста-5,7-диен.
В) 1(окси-24 -бензоилоксихолекаль0циферол-3/З-бензоат,
20 мг 1А-окси-ЗД 24-дибензоилоксихолеста-5,7-диена растворяют в 500 мл диэтилового эфира. Раствор облучают УФ-лучами, проводят реак5цию изомеризации и гидролиза аналогично примеру 5В,получают 1,9 мг IK, 24-диоксихолекальциферола, который характеризуется теми же свойствами, что и продукт, полученный по
0 примеру 4,
Продукт, полученный после реакции изомеризации, представляет собой 11 -окси-24-бензоилхолекальциферол-3 )5-бензо 1Т,
5
Пример 7, 1Л. 24 (Ю-диацетоксихолекальциферол-Зр-ацетат,
lek., 3jJ, 24 (R)-триоксихолеста-5,7-диен, подвергают ацетилироваиию аналогично примеру 4В, получают 1Л, 0 3(R)-тиоксихапеста-5,7-диен, 2Ь мг продукта обрабатывают аналогично .примеру 4В, облучают УФ-лучами 2 мин, Получают 3,4 мг продукта, свойства которого соответствуют свойствам I, 24 (R)-диc9 cиxoлeк lЛЬЦИфepoлa. Продукт, полученный после проведения реакции изомеризации, представ ляет собой Ick, 24 (R)-диацетоксихолекальциферал-3| -ацетат. Пример 8. Ы, 24 СН)-ДИбензоилоксихолекальциферол- 3/3-бензоат. Idkf 3|3, 24 (R)-триоксихолеста-5, 7-диен подвергают бензоилированию аналогично примеру 5А, получают 1Д, 3 р, 24(R)-трибензоилоксихолеста-5,7-диен, Продукт подвергают обработке аналогично примеру 5В, за. исключением того, что в данном случае используют 30 мг этого продукта, а операцию облучения УФ-лучами проводят при температуре 2.мин Получают 3,4 мг продукта, свойства которого соответствуют свойствам Ы, 24 (R)-диоксихолекальциферола. Таким образом, продукт полученный после реакции изомеризации, идентифицируют так ip, 24{К)-дибензоилоксихолекальциферол-3 р-бензоат. Пример 9. 1с ч-окси-24 (R)-бе зоилоксихолекальциферол-3-бензоат. loL, ЗЙ, 24 (R)-триоксихолеста-5, 7 -диен подвергают бензоилированию аналогично изложенному в примере 6А, получают 1с1ч-окси, 1, 24 (R дибензоилоксихолеста-5,7-диен. 10 мг продукта обрабатьшают аналогично примеру 6В, получают 1,2 мг продукта, свойства которого соответствуют свойствам Ы, 24 (R)-диокс холекальциферола. Таким образом, продукт, полученшый после реакции изомеризации пред ставляет собой 1о1.-окси-24 (R)-бензои оксихолекальциферол-3 й-бензоат. Пример 10. 1л, 24(3)- диацетоксихолекальциферол-3 ацетат. idv, 3, 24 (S)-триоксихолеста-5, 7 -диен, подвергают ацетилированию аналогично примеру 4А, получают Id 38, 24(S)-триоксихолеста-5,7-диен. 20 мг продукта подвергают обработке аналогично примеру 7, получа ют 3,1 мг продукта, свойства котор го соответствуют свойствам id, 24(S -диоксихолекальциферола. После реакции изомеризации получ продукт,который представляет собой 24(S)-диацетоксихолекальциферол-Зя -ацетат. Пример 11. 1т1.-окси-24 (S)-бен зоилоксйхол ёкал ьцифер6л-,3|3-бен зоат. Id., 3, 24 (S)-триоксихолеста-5, -диен,подвергают бензоилированию аналогично примеру ОА, вследствие го получают 1с -окси-3 8, 24{3)-дибе зоилоксихолеста-5,7-диен. 15 мг пр дукта, оорабатывают, аналогично пр меру 9, получают продукт, свойства которого соответствуют свойствам l 24(S)-диоксихолекальциферола. Продукт, полученный после прове дения реакции изомеризации, предтавляет собой - окси-24 (S)-бензолоксихолекальциферол-З -бензоат, Пример 12. 1Ы-ацетокси-, 24(S)-бензоилоксихолекальциферол3-бензоат, 1Л-окси-3|(5, 24 (S) -дибензоилоксиолеста-5,7-диен, полученный аналоично примеру 11, подвергают ацилироанию, получают 1(А.-ацетокси-3|(, 4(S)-дибензоилоксихолеста-5,7-диен. 15 мг продукта подвергают обраотке аналогично примеру 10, облуают УФ-лучами при 1 мин. Полуают 1,5 мг продукта, свойства котоого соответствуют свойствам 1Л, 24(S)-диоксихолекальциферола. Про- , укт, полученный после проведения еакции изомеризации, представляет обой М-аце т окси-24 (S) -бензоилоксиолекальциферол-3 8-бензоат. Пример 13. Idk, 24-диоксиолекальциферол. 10 мг смеси Id., 3, 2,4-триоксихолеста-5,7-диена с 1(Х, 3 р, 24-триоксихолеста-4 , 6-диена в молярном соотношении 3:1, растворяют в 500 мп диэтилового эфира, после чего раствор облучают УО-лучами при 5 С 2 мин. После завершения реакции диэтиловый эфир осторожно выпаривают при пониженном давлении. К остатку прибавляют 50 мл бензола и в атмосфере аргона Н в течение 2 ч. кипятят с .обратным холодильником. После завершения реакции бензол выпаривают, получают 10 мг коричневого маслянистого продукта. Получают УФ-спектр продукта. Полоса поглощения при 265 нм, характерная для lot,, 24-диоксихолекальциферола, отсутствует. Сравнение продукта реакции с образцом КЛ, 24-диоксихолекальциферолом методом тонкослойной хроматографии на силикагеле указывают на отсутствие Id, 24-диоксихолекальциферола. Таким образом, в том случае, когда степень чистоты Idv, зЗ, 24-триоксихолеста-5,7-диена оказывается низкой, в ходе проведения реакции изомеризации с использованием УФ-облучения 14, 3, 24-триоксихолекальциферол не образуется вообще. Пример 14. , 24-диацетоксихолек альциферол-3й-ацетат. 10 мг смеси, которая содержит , 3, 24-триацетоксихолеста-5,7-диен и Ц, 3j8, 24-триацетокси-4,б-диен в молярном соотношении 3:1, растворяют в 500 мл диэтилового эфира и раствор подвергают облучению УФ-лучами при 5°С 2 мин. окраска реакционной смеси становится желтовато-коричневой. После завершения реакции диэтиловый эфир осторожно зыпаривают при пониженном давлении. К остатку добавляют 50 мл бензола и в течение 2 ч. в атмосфере аргона кипятят с обратным холодильником, проводят реакцию HsoiviepHsaib.H. Посл завершения реакции большую часть бензола выпаривают при пониженном давлении. В остаток добавляют 1 мл 5%-ного раствора гидрата окиси кали в метаноле и смесь оставляют стоять при комнатной температуре в течение 24 ч. в атмосфере аргона для проведения гидролиза. После завершения реакциибензол выпаривают. Пример 15, 60 мг 1А, 3j3, 24(R)-триацетоксихолеста-5,7-диена растворяют в 500 мл дизтилового эфи ра. Полученный раствор подвергают УФ-облучению в атмосфере аргона при температуре 5 С 5 мин, после завершения реакции, эфир выпаривают при комнатной температуре и пониженном давлении, в остаток добавляют 150мл бензола и осуществляют изомеризацию в течение 2. ч, в атмосфере аргона при температуре дефлегмирования бен зола. После завершения реакции, бен зол испаряют при пониженном давлении, а в остаток добавляют 20 мл су хого диэтилового эфира и 50 мг LiASHx. Реакционную смесь перемешивают 2 ч при температуре дефлегмиро вания диэтилового эфира до восстанов ления . Реакционный продукт разбавляют (диэтиловым эфиром, насыщенньм водой и экстрагируют. Фазу эфира промьшают последовательно водой и сушат над NajSO4. Диэтиловый эфир испаряют .при пониженном давлении в результате образуется 38 мг светло-желтого маслянистого продукта, Продукт выделяют, очищают при помощи тонкослойной хроматографии с использованием в качестве носителя силикагеля, содержащего нитрат сереб ра. Спектры и другие характеристики этого продукта полностью соответствуют Ids, 24(R)- диоксихолекальциферо лу. Аналогичным образом, из let. Эр, 24(S)-триацетоксихолеста-5,7-диен получают IdL, 24 (S)-диоксихолекёшьциферол. Формула изобретения / 1, Способ получения lA, 24(S)-диоксихолекальциферола или Idk, 24 (R)-диоксихопекальциферола или их производн(к общей формулы где R, Rj, Rj - одинаковые или различные, водород или защитная группа, которая представляет собой остаток алифатической или.ароматической карбоновой.кислоты, такой, как ацетил или бензоил, отличающийся тем,- что id., Зр, 24 (S)-тригидроксихолеста-5,7-диен или lo, 3, 24 (R)-тригидроксихолеста-5,7-диен или их производные общей формулы где R, Rj и Rj имеют выиеуказанные значения, подвергают ультрафиолетовому облучению с длиной волны в области 200-600 н в среде инертного органического растворителя с после- . дующей изомеризсщией полученного продукта, который или выделяют, или в случае необходимости проводят щелочной гидролиз в среде спирта или восстановительное разложение с помощью литийалюминийгидрида в среде инертного органического растворите2. Способ по п,1, отличающий с я тем, что применяют ультрафиолетовое излучение в области 260-310 н/. Приоритет по признакам 09,12,74 при R-1, Rj. Rj водород;27,12.74 при R, R,, Rj - ацетил, ёнзоилгруппа. Источники информации, принятые во нимание при экспертизе 1. Hess А. F. Weinstock М.З . . Bioe, ChemT 64, 181, 193, (1925),
