Питательная среда для культивирования балантидий свиней Советский патент 1979 года по МПК C12K1/06 

(54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЫИВИЮВАНИЯ БАЛАНТИДИЙ

СВИНЕЙ

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к средствам для культивирования паразитических инфузорий и может быть использована в работе диагностических лабораторий. Известна среда для культивирования амеб, которая приспособлена для выращивания балантидий, выделенных от человека, содержащая хлористый натрий, двузамещенный фосфорнокислы натрий, однозамещенный фосфорнокислый калий, лошадиную сыворотку, крахмал и воду 1. Однако на этой среде хорошо культивируются балантидии, выделенные от человека. Балантидии свиней на этой среде могут лишь жить в течение 1-2 суток, но не происходит их рост и размножение. Целью изобретения является приготовление среды, позволяющей не только культивировать балаитидии свиней, но и проводить накопление достаточного количества паразитов. Это достигается тем, что среда дополнительно содержит лизат слизистой оболочки кишечника свиней, при следующем содержании компонентов, г/л: Натрий хлористый6,8 -8,0 Натрий фосфорнокислый двузамещенный0,6 -2,0 Калий фосфорнокислый однозамещенный0,3 -0,6 Лизат слизистой оболочки кищечника свиней12,0-25,0 Крахмал.6,25-10,0 Водадо 1 л Питательную среду приготавливают следующим образом. Отвещивают 7,0 г хлористого натрия, 1,0 г натрия фосфорнокислого двузамещенного, 0,4 г кали фосфорнокислого однозамещенного, растворяют их в 1 л дистиллированной воды и в течение 15 мин стерилизуют кипячением. ТТосле стерилизации удаляют осадок путем двукратного фильтрован ня через фильтровальную бумагу и доводят объем дистиллированной водой до первоначального. Измеряют рН среды и доводят ее 10%-ным раствором питьевой соды до 7,0-8,6. Среду разливают в пробирки по 8 мл и стерилизуют в автоклаве при 1 атм, 120°С в течение 30 мин. После остывания добавляют на кончике скальпеля рисовый крахмал и оставляют ее до полного проснетления. Перед посевом балантвдий в каждую пробирку добавляют лизат слизистой оболочки слепой и ободочной кипюк свиней в дозе 0,1-0,2 г. Лизат готовят но следующей мето дике: от убитых здоровых свиней берут слепую и ободочную кшлки, удаляют содержимо а затем промывают 2-3 раза теплым (37|40 С) физиологи1еским раствором. Подготовленные отрезки кии)ечника разрезают вдоль по одной из тений и соскабливают ножом слизистую оболочку. Полученный соскоб смешивают с физиологическим раствором в соотношении 1:5 и гомогенизируют в размельчителе РТ-1 при 80QO об/мин, в течение 30 мин. Затем гомогенизат подвергают обработке путем многократного (не менее 10 раз) замораживания в жидком азоте, с последующим оттаиванием в водяной бане (37-60°С). Центрифугируют при 3000 об/мин в 20 мин и на досшточную Ж1адкость используют как компонент среды. Предлагаемая среда пригодна как для выде лелия балантидий из фекалий, так и для дальHeftiuero их пассирования и накопления. Размножение простейидих наблюдается уже через 24 часа после посева, но максимум роста достигает на 48-72 часу. Плотность паразитов - 2,5-3 тыс. в 1 мл среды. Переживаемость балантидий в предлагаемой среде - до 6 суток Среду используют в диагностических .цепях. 4 при этом балантндии обнаруживают в тех случаях, когда микроскопические исследования не . дают положительных результатов. Формула изобретения Питательная среда для культивирования балантидий свиней, содержащая натрий хлористый, натрий фосфорнокислый двузамещенный, калий фосфорнокислый однозамешенный, крахмал и воду, отличающаяся тем, что, с целью создания устойчивого роста и размножения балантидий, среда дополнительно содержит лизат слизистой оболочки кишечника свиней, при следующем содержании компонентов, г/л; Натрий хлористый6,8 -8..0 Натрий фосфорнокислый двузамещенный0,6 -2,0 Калий фосфорнокислый однозамещенный0.3 -0,6 Лизат слизистой оболочки кишечника свиней12,0-25,0 Крахмал6,25-10,0 Водадо 1 л Источники информации, принятые во внимание при экспертизе I. Лабораторные методы исследования патогенных простейших. Под ред. Засухина Д. Н. М. Медгиз, 1957, с. 259-260.