Питательная среда для культивирования балантидий Советский патент 1988 года по МПК C12N1/10 

1

о

О)

ел

4

Изобретение относится к биологии, а именно к рецептурам питательных сред, и может быть использовано для культивирования инфузорий.

Целью изобретения является улучшение свойств среды.

Среда позволяет без пересевов дли т.епьно культивировать балантидий свиней и получать интенсивное накоплени биомассы простейших.

Питательную среду приготавливают следующим образом.

Пример . Взвешивают оптимальные количества компонентов: 6,8 хлористого натрия, 1,2 г фосфорно- ки слого двузамещенного натрия, 0,5 г хлористого калия и растворяют их в 1000 МП дистиллированной воды. В течение 5 мин раствор стерилизируют ки пячением. После стерилизации солевой раствор двукратно фильтруют через фильтровальную бумагу и доводят объе дистиллированной водой до первона чального. Измеряют рН среды и тит- руют ее до 7,2-8,0. Среду разливают в пробирки по 9 МП и стерилизуют в автоклаве. После остывания в каждую пробирку со средой добавляют на кончике скальпеля рисовый крахмал и оставляют ее до полного просветления. Хранят среду в бытовом холодильнике до 45 дней.

Перед посевом балантидий в каждую пробирку добавляют ФиБС по 1 мп.

В полученную питательную среду .высевают испьп-уемьй материал, со- держаш51й трофозоиты балантидий в количестве 300 - 900 экземпляров в 1 г фекальных масс. Б качестве контроля используют известную среду. Результаты представлены в таблице.

Количество трофозоитов балантидий в 1 мл среды, тыс.

Предлагаемая

Известная

1,8 2,2-3,1

1,5 2,0-2,5

Продолжение таблицы

5

0

5

Размножение простейших на предлагаемой среде наблюдается уже к 18-му часу после посева. Плотность паразитов достигает 1800 в 1 мл, а на известной среде - 1500.

Пример 2. Взвешивают оптимальные количества компонентов: 6,6 г хлористого натрия, 0,6 г диаммония фосфата, 0,5 г фосфорно-кислого одно- замещенного калия и растворяют их в 1000 мл дистиллированной воды. Раствор стерилизуют кипячением в течение 5 миНо После стерилизации солевой раствор двукратно фильтруют через фильтровальную бумагу и доводят объем дистиллированной водой до 1 л. Измеряют рН среды и титруют его до 7,2- 8,0. Среду разливают в пробирки по

9 мл и стерилизуют в автоклаве. После остывания в каждую пробирку со средой добавляют на кончике скальпеля рисовый крахмал и оставляют ее до полного просветления. Хранят среду в бытовом холодильнике до 50 дней.

Перед посевом балантидий в каждую пробирку добавляют ФиБС по 1 мл.

В полученную питательную среду вы- севают материал, содержащий трофозои- ты балантидий в количестве 300 - 900 экземпляров в 1 г фекальных масс. В качестве контроля используют известную среду.

Размножение простейших на предлагаемой среде отмечают уже к 12-му часу после посева. Плотность паразитов достигает 2000 в 1 мл. Максимум роста наблюдается к 72-120 часам (до 9000 трофозоитов)-, в то время как на ко.нтрольной среде было максимально 5000 инфузорий в 1 мл.

Первый пересев производят через 24 ч. Последующие пересевы осуществ- ляют через каждые 120 ч. При этом из одинакового количества питательной среды получают биомассы простейших почти в 2 раза больше, чем в контроле. Переживаемость балантидий на полученной среде достигает 336 ч. Среда пригодна как для вьзделения балантидий из фекалий, так и для дальнейшего их пассирования и накопления.

Формула изобретения

Питательная среда для культивирования балантидий, содер жащая минеральную добавку, биогенный стимулятор ФиБС, крахмал и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с целью улучшения свойств среды, в качестве минеральной добавки содержит хлористый натрий, фосфорно-кислый двузамещенный натрий или фосфорнокислый двузамещенный аммоний, хлористый калий или фосфорно-кислый одноза- мещенный калий при следующем количе ственном соотношении компонентов, г/л:.

Хлористый натрий Фосфор но-кислый

6,5-8,5

двузамещенный аммоний

или

Фосфорно-кислый

двузамещенный натрий

Фосфорно-кисльй однозамещенный калий

или

Хлористый калий

Биогенный стимулятор

ФиБС

Крахмал

Дистиллированная

вода

Изобретение относится к биологии, а именно к рецептурам питательных сред, и может быть использовано для культивирования паразитических инфузорий. Целью изобретения является улучшение свойств среды. Для получения среды взвешивают 6,5-8,5 г натрия хлористого, 0,35-0,68 г диаммония фосфата или 1,0-2,0 г натрия фосфор- но-кислого двузамещенного и 0,3-0,7 г калия фосфорно-кислого однозамещен- ного или калия хлористого. Навески растворяют в 1000 мл дистиллированной воды. Раствор стерилизуют. Затем добавляют рисовый крахмал. Хранят среду в бытовом холодильнике до 50 дней. Перед посевом балантидий в среду добавляют биогенный стимулятор ФиБС в количестве 80-150 г/л. Размножение простейших на среде наблвдают уже на 12-м часу после посева. Максимум роста достигает к 72- 120 часам. Плотность паразитов 7,8- 9,0 тысяч в 1 мл средьЛ Переживае- мость балантидий в предлагаемой среде достигает 14 суток. Среду используют в диагностических целях и для накопления биомассы возбудителя. 1 табл. с (Л