Способ получения линкомицина Советский патент 1979 года по МПК C12D9/14 

54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИНШМИЦИНА. производительнрсти процесса из-за неполной нагрузки оборудования. Полученный вёгетативйый прйвивочнШ Siax epHaii ае enf кИм lii leifr ренрсят в боЛй11й1е ёйК(Эстй. Среда, в которой получают вегетативный прививочный материал, может быть той же, т6 и для получения линкомицина. Линкоми.цин вБщеляют из культуральной среды обычным путем - фильтрацигей и центрифугированием, затй hpo- пускают через смолу, включаюгдую неионный макропбристый сополйМер.стирола, cmrfToSfo с дивинило|ым бензолом,Линкомицин элюяруют иё смолыЬ/йомо ;адбю системырас ворителей, состоящей ий метайола и воды (95:5 по объему;};; Ёиоактивные фракций элюата ой|)еяеляют с помощью стандартнрго мик ЬбйЪ- . лcзгичeckoгo испытаний н1а йласзттинчйтом диске с применение микрдо ргй ни:з ма Sarcina Kutea. V / « VV-{ Биологически активные фракади Соединяют, концентрируют до водного растеора и замораживают в сухом виде Получеиньй материал растирают с хлоl5Mb asr метиленом. Хлористометиленовы экбтракт йонцентрйруют досуха,оста ток растирают с гщетоном. Фильтрат смешивают с эфиром, получай осадок, который отделяют. Odpafsoias шийся фильтрат смешивают с метанольвым раствором хлористого йсЩо{5оДа, побле чего осаждают беСцйетннй гидро 5Й1брйд лйикомйцина. Пример. Скошенную кул ьтуру Streptomyces espinosus NKKL 3890при меняют для инокуляции в колбе Эрленм йера на 500 мл, содержащей 100 мл ст рильной среды следующего состава, г/л: г . . , Моногидрат глюкозы 25 Хлопковая мука Pharmamedie , / 25 ёода водопроводная Остальное рН перед стерилизацией 7,2: Колбу выдерживают 3 дня при на вращающемся вибрационном столе. Прививочный материал применяют в ий куляции ферментациойныхколб ЭрлейМе йера до 500 мл, содержащих каждая ст рильную среду следующе о состава, г/л: Жирная соевая мука Kaysoy .35 Снятое молокоЮ Бульон Difco10 СаСОз3 Полиалкиленгликолевая. . антивспениваюЩая жидкость20 (мл/л) рН перед стерилизацией.7,2 рЬдержиМое каждой колбы йнокулирут прививочного материала на ГОО 1мл ферК ёнтсщионной среды. Некотоые колбы ийкубируют при , друиепри 45°С на ёращающемся вибрациHWoKi стоЛе при 250 об/мин. П5лученны й ферментационный бульон (прйблизЪгтёЙЬно 4 л) фильтруют через дйатойовую зеЫлю. Жмых промывают 1 л воды и соединяют с фильтратом. Полученный pacfl op Прозрачен. ЖМых дважды растираю с.метанолом при 700 мл. Прозрачный раствор пропускают через колонн, содержащую 250 мл Amber Cite ХАД-2 при скорости потока 25 мА/мин. ПОлу еннай жидкЬСть представляет собой одну фракцию. Затем колонну про Мывают 500 мл воды (промьйную воду отбрасывают) и элюируют 95%-ннм метанолом. Фракции по 20 мл собирают, фракции № соединяют. Растворконцентрируют досуха и получают 3,5 г ЛИНКОМИЦИНового препарата, соответственно 310 мкг линкомицина/мг. V - - Этот материал затем растирают с , Хлористым метилейом, ХЛористометиленовый экстрагст концентрируют досуха, ocTafOK растирают с ацетоном. Фильтрат смешивают с простым эфиром, получая осадок, который отделяют. Образевавшийся фильтрат сме яивают с :и Мё йЙОльным раствором хйбриё.того водорода, прёЛе чего осаждается бес- ;, цветный гидрохлорид линкомйцина. Этот осадЬк выделяют фильтрацией и кристаллизуют из водного ацетона, полу-. чая кристаллический гидр эхлорид линкомйцина. ,. : Данныео выходе лин1 омицина при . . 45 и 28°С приведены в таблий ё.

Продолясение таблицы

Предлагаемый способ позволяет iseличить линкомицина. ;,,. : формула изобретения Способ получения линкомицина liyteM выращивания штс1мма Streptomyces espi- nosus Dietz sp.n NRRL 3890, штамма NRRL 5729, штамма NRRL 5730 или штамма NRRL 5731 на питательной сред4, одержадей источйики аэйта; углерода и минеральные соли, с последуняцим выделением целевого продукта, о т л йчающийся тем, что, с целью повышения выхода лимкомиЦина, выращивание осущестйлйют Т1ри температуре 44-48 С. Источник информации, принятые во внимание при экспертизе 1, Патент Франции 7146812, кл. С- 12 D 9/00, опублик. 1972.