Питательная среда для выращиваниячуМНОгО МиКРОбА Советский патент 1981 года по МПК C12K1/06 

Изобретение относится к области медицины, а именно к микробиологии. Известна питательная среда для выращивания чумного микроба, содерж щая агар-агар, гидролиэат казеина, стимулятор роста, углевод, минерашь ные соли и воду Ц. однако известная среда не обеспе чивает высокого выхода биомассы, со держащей F1-, V- и W-антигены. . Целью изобретения является повышение выхода биомассы, содержащей FI-, V- и W-антигены. Это достигается тем, что среда дополнительно содержит бульон Хотти гера, в качестве стимулятора роста она содержит дрожжевой экстракт, в качестве углевода - маннит, в кач стве минеральных солей - NaC, MgS04.-7Hj,0, MnS04-5H20, FeSO -7Hj1B при следующем количественном соотно шении компонентов, г/л воды: 17,0-18,0 Агар-агар Гидролизат ка700,0-800, зеина Бульон Хоттин200,0-300, гера Дрожжевой экст2,0-4,0 ракт 0,5-0,7 Маннит 4,0-6,0 NaCI 0,5-0,7 0,001-0,003 MnS04 SHgO 0,005-0,02 FeS04 7H20 Пример. Для приготовления среды казеин желтый или белый в количестве 400 г замачивают в 2200 мл дисти.гшированной воды в течение 2 суток на холоду, гидролизуют 19%-ной серной кислотой в течение 22 ч при медленном кипячении. Затем гидролизат нейтрализуют сухим ВаСО. до рН 4,7 и осветляют 1% активированного угля. Полученный гидролизат с аминным азотом 600-800 г% разводят до величины аминного азота 150 мг%. Основной раствор Хоттингера, приготовленный по общеизвестной методике, разводят так, чтобы содержание аминного азота также составляло 150 мг%. Смешивают 700-800 г гидролизата казеина и 200-300 г бульона Хоттингера, добавляют 2-4 г дрожжевого экстракта, 0,5-0,7 г маннита, Л-6 г хлористого натрия, 0,5-0,7 г семиводного сернокислого магния, 0,005-0,02 г семиводного сернокислого же.):еза и 0,001-0,003 г пятиводного сернокислого марганца. Доводят рН раствора до 7,6-7,8 с помощью 10%-ного NaOH, вносят агар-агар и расплавляют в автоклаве при . После расплавления рН среды составляет 7,1-7,2. Горячую агаровую среду разливают в чашки Петри или матрицы и стерилизуют в автоклаве в течение часа при .

Выход бактериальной массы эталонного штагФ1а J.pestis EV НИИЭГ состаляет 5,6-6,5 млрд о микробных клеток с 1 МП при посевной дозе 20 млн. М кробных клеток на 1 мл среды,

Полученная бактериальная масса обладает полноценным антигенным составом, показывая при реакции преципитации 21-22 зоны преципитации. При культивировании на среде при 37°с хорошо синтезируются F1-, V- и Ы-антигены, а также мышинный токсин, обладающий высокой степенью токсичности.

Использование изобретения позволит получить биомассу чумного микроба, содержащую определенный набор антигенов, необходимых для создания вакцин.

Формула изобретения

Питательная среда для выращивани чумпого икpoбa, содержащая агарагар, гидролизат. казеина, стимулято роста, углевод, минеральные cojtjf и воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения выхода биомассы, содержащей F(-, V- и W-антигены, среда дополнительно содержит бульон Хоттингера, в качестве стимулятора роста она содержит дрожжевой экстракт, в качестве углевода маннит, в качестве минеральных NaCl, MgSO 7H20, MnSO SHgO, 7Hi20 при следующем количественном соотношении компонентов; г/л

ВОДЫ.

17,0-18,0 ка700,0-800,, О

ин200,0-300,0

кст2,0-4,0 0,5-0,7 4,0-6,0 0,5-0,7 0,001-0,003 0,005-0,02

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Профилактика, особо опасных инфекций.-Вып. 1, Саратов, 1976, с. 113-115.