Способ определения витамина А Советский патент 1949 года по МПК G01N31/22 

Заявлено 28 апреля 1943 года в Комитет по изобретениям и открытиям лри Совете Министров СССР за f 379375

Опубликовано 31 октября 1949 года

Согласно изобретению, предлагается способ определения витамина А путем его адсорбции на бентоните из определенных растворителей.

Отличительной особенностью указанного способа является образование цветной реакции на поверхности бентонита с витамином Л.

Реакция характеризуется возникновением синей окраски на поверхности безводного бентонита при добавлении раствора витамина А в бензине, хлороформе, бензоле, дихлорэтане, четыреххлористом углероде или ксилоле. Еще более интенсивно образуется синяя окраска на бентоните, специально обработанном соляной кислотой. Интенсивность синей окраски на абсорбенте прямо пропорциональна в известных пределах концентрации витамина Л в данном растворителе.

Интенсивность окраски, возникающей ка адсорбенте, может быть измерена визуальным способом или путем сравнения с цветной серией эталонов.

Ниже приводится способ определения витамлна А с применением цветной серии эталсков.

28 Свод. Выпусл. 10, 1943 i.

I. Приготовление реактива

Бентонит белого цвета и хорошего качества размалывают в порощок. Затем на каждые 400 г воздушно-сухого бентонита добавляют, перемешивая, 1л 2 н соляной кислоты и кипятят смесь в течение одного часа с обратным охлаждением или оставляют стоять на сутки. После этого сливают отстоявшийся прозрачный слой жидкости, а бентонит промывают несколько раз водой до тех пор, пока промывные воды не перестанут давать кислую реакцию.

Отмытый материал высушивают, размалывают в порошок, просеивают через шелковое сито, снова сушат при температуре 110-115° в течение 2-3 час. и хранят в герметической таре. Такой бентонит состоит в основном из Н-монтмориллонита и обладает кислыми свойствами (реагирует со щелочью).

1). Составление цветной серии эталонов

Интенсивность синей окраски на поверхности адсорбента бентонита зависит от концентрации витамина А в данном растворителе. Если берутся разные растворители, то

33

окраска зависит также и от природы растворителя. Например, при одной и той же концентрации витамина, хлороформенные растворы дают примерно в шесть раз большую интенсивность синей окраски, чем растворы в легком бензине.

В качестве стандартов для сравнения лучше всего подходит смесь синего ультрамарина с порошком бентонита, которую готовят следующим образом: на 1 г обычного порошка бентонита, просушенного при 115° и просеянного через тонкое шелковое СИТО , берется соответственно: 7, 9, 12, 15, 18, 22, 26, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60 и 70 мг ультрамарина.

Все зт« смеси тщательно перетирают и перемешивают, а затем из них берут навески (100 мг) в небольшие пробирки одинакового диаметра. В каждую пробирку вводят 0,5 мл растворителя (погоны авиабензина с температурой кипения до 90°, петролейный эфир или хлороформ). Пробирки герметично закрывают пришлифованными пробками, и серия эталонов готова к употреблению.

Целесообразно иметь две серии пробирок: одну с бензином, а другую € хлороформом. Первая серия является более удобной для определений витамина А в более концентрированных растворах витамина в бензине и при наличии, наряду с витамином А, значительных количеств витамина Д. Вторая серия используется для сравнения возникающих на бентоните окрасок витамина А в хлороформенных растворах при меньших концентрациях витамина А.

В приводимой ниже цветной серии эталонов их окраски соответствуют окраскам, получающимся при адсорбции витамина А из растворов определенных концентраций. Поэтому эти концентрации удобнее выражать в микрограммах на миллиметр испытуемого раствора.

Концентрации витамина А определяются по следующей таблице.

111. Подготовка испытуемого раствора для определения витамина А

Для примера приводится методика подготовки испытуемого раствора для определения витамина А в рыбьих жирах и печени.

В центрифужную пробирку на 25 мл вводят 1-2 г жира или пече434

НИ « добавляют 2 мл 20%-ного раствора КОН. Смесь кипятят на водяной бане в течение 45 мин При этом выпаривается большая часть воды. Затем содержимое пробирки охлаждают до комнатной температуры, добавляют 2 мл 95%-ного этилового спирта и некоторое время хороша

пермешивают встряхиванием. После этого добавляют 2 мл легкого бензина и опять встряхивают. Бензиновый слой снимают пипеткой, а обработку содержимого пробирки бензином повторяют несколько раз.

Объединенные экстракты один или два раза промывают небольшими порциями воды в бюретке с краном на 25 мл. Затем бензиновый слой фильтруют на стеклянном фильтре через слой безводного сернокислого натрия, который после этого промывают бензином; бензин от промывания добавляют к основному раствору.

IV. проведение реакции и определение

r-ivavHKa А

В Пробирки одинакозого размера с составленной серией эталонов беРЗТ 100 мг активированного соля: Г 1 кислотой бентонита, добавляют дли смачивания 0,25 мл соответствующего растворителя, затем 0,25 мл испытуемого раствора встряхивают и

возникающую синюю окраску сравнивают с цветной серией эталонов. Подобрав путем нескольких параллельных проб соответствующую пробирку, находят по ее окраске содержание витамина А в микрограммах на 1 мл испытуемого раствора.

Помножив на общий объем испытуемого раствора, определяют содержание витамина А в навеске, а затем пересчитывают на 100 г продукта.

Для проведения реакции в хлороформе бензиновые вытяжки отгоняются досуха под вакуумом в атмосфере инертного газа. Остаток растворяют в хлороформе и определяют витамин А в хлороформенном растворе остатка, как указано выше.

Предмет изобретения ,

Применение бентонита, как реагента для качественного и количественного определения витамина А цветной реакцией.