(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АДЕНИНА И ГУАНИНА
1
Изобретение относится к улучшенному способу получения аденина и гуанина, широко используемых в медицине, микробиологии и органическом синтезе.
Известен целый ряд способов получения и гуанина путем многостадийного Х11мического синтеза JL.
Однако указанные способы, в том числе и каталитическое гидр1гоование производных фенилазомалоновой Ю1слоты в формамиде в присутствии аммиака 2, приводят к продукту содержащему примеси исходных веществ. Указанные примеси мешают медицинскому использованию такого продукта и требуют сложной очистки.
Известен способ получения аденина и гуанина гидролизом рибонуклезшовой кислоты З.
Недостатком способа является необходимость использования солей серебра для Бьщеления целевых продуктов.
Наиболее простым является способ получения адешша и гуанина путем пвдролиза рибонуклеиновой кислоты соляной кислотой при 89-90°С и выделения на ионообменных смолах. Это вьщеление включает фильтрашио гддролизата, пропускание его через катнонит в Н форме промывку катионита водой, элюирование 6н. соляной кислотой, нейтрализацию гидролизата, упаривание его и разделение аденина и гуанина . кристаллизацией 4. .
Недостатком этого способа является сложность выделения целевых продуктов, связанная с малой производительностью и трудоемкостью операций регенерации и подготовки активных форм смол, длительностью элюирования и упаривания разбавленных растворов.
Цель изобретения - утфощение способа получения аденина и гуанина.
Поставленная цель достигается способом получения аденина и гуанина путем Гидролиза рибонуклеиновой кислоты хлористым тионилом в метаноле при весовом соотношении рибонуклеиновая кислота: хлористый тионил: метанол 1:, (1,7-2.7): (4,8-5,6) при 20-4O t.
Пример 1.В колбу помещают 1ОО г рибонуклеиновой кислоты (чистота 88%)i 520 г метилового спирта и. при перемешивании при 20 С добавляют 259 г тионила хлористого (весовые соотношения рибонуклеиновая кислота: тионнл хлористый; метиловый спирт I: 2,69:5,2) в-течение 1,5 ч.
Выпавший осадок фильтруют, промывают 2О мл метилового спирта и сушат. Осадок растворяют в горячей воде и нейтрализуют аммиачной водой до рН 2-3Выпавший гуаннн отделяпот фильтрацией горячего раствора. Фильтрат нейтрализуют до рН 6,5-7 и охлаждают. Осадок аденина фильтруют. Аденин и гуанин кристаллизуют из воды.
Выход, г: аденин 9,1; гуанин 8,5.
Чистота,% : аденин 98; гуанин 97,5.
П р и м е р 2. В колбу помещают 1ОО г рибонуклеиновой кислоты (чистота 88%), 52О г метилового спирта, при перемешивашо при ЗО°С добавляют 215 тиойЕла хлористого (весовые соотношения рибону1 леиновая кислота: тионил хлористый: метиловый спирт 1:2,15:5,2) в течение 1 ч. Раствор охлаждают до 2OTI выпавший осадок фильтруют, промывают 2О мл метилового спирта и сушат.
Осадок растворяют в горячей воде и нейтрализуют аммиачной водой до рН 2-3 Вьшавший гуанин отделяют фильтрацией горячего раствора. Фильтрат нейтрализуют до рН 6,5-7 и охлаждают. Осадок аденина фильтруют. Аденин и гуанин кристаллизуют из воды.
Выход г 5 аденин 9,1; гуанин 8,5.
Чистота, % : адешш 97; гуанин 97.
Пример 3. В колбу помецают 100 г рибонуклеиновой кислоты (чистота 88%), 52О г метилового спирта и при перемешивании при добавляют 179 г тионила хлористого (весовые соотношения рибонуклеиновая кислота: тионил хлористый : метиловый спирт 1:1,79:5,2) в течение 1,5 ч. Раствор охлаждают до . Выпавший осадок фильтруют, промывают 20 мл метилового сп1фта и сушат..
Осадок растворшот в горячей воде и нейтрализуют аммиачной водой до рН 2-3. Вьтавший гуанин отделяют фильтрацией горячего раствора. Фильтрат нейтрализуют до рН 6,5-7 и охлаждают. Осадок аденина фильтруют. Аденян и гуанин кристаллизуют из воды.
Выход, г: аденин 9,0; гуанин 8,6. Чистота, %: аденин 98,2; гуанин 98. Пример 5. В колбу помещают 100 г рибонуклеиновой кислоты (частота .88%), 46О г метилового спирта и при перемешивании при добавляют 165г тионила хлористого (весовые соотношения рибонуклеиновая кислота: тионил хлористы метиловый спирт 1:1,65:4,6) в течение 1 ч
Раствор охлаждают до 2ОЯз. Осзадок фильтруют, промывают 2О мл метилового спирта и сушат. Осадок растворяют в горячей воде и нейтрализуют аммиачной водой до рН 2-3. Гуанин в осадок не выпадает. Раствор нейтрализуют до рН 6,5-7 и охлаждают. Аденин в осадок не выпадает. Раствор содержит частично гидролизованнуго рибонуклеиновую кислоту (хроматографический анализ).
П р и м е р 6. В колбу помещают 1ОО г рибонуклеиновой кислоты ( 88%), 488 г метилового спирта и при перемешивании при добавляют 25О г тионила хлористого (весовые соотношения рибонуклеиновая кислота; тионил хлористый; метиловый спирт 1:2,5:4,88) в течение 1 ч. Раствор охлаждают до 2ОС. Выпавший осадок фильтруют, промывают 20 мл метилового спирта и сушат.. Осадок растворяют в горячей воде и нейтрализуют аммиачной, водой до рН 2-3. Вьшавший гуанин отделяют фильтрацией горячего раствора. Фильтрат нейтрализуют до рН 6,5-7 и охлаждают. Осадок аденина фильтруют. Аденин и гуанин кристаллизуют из воды.
Выход, г: аденин 9,2; гуанин 8,7. ЧистотаД:; аденин 98,5; гуанин 97,1. При мер 7. В колбу помещают 100 г рибонуклеиновой кислоты (чистота 88%), 6ОО г метилового спирта и при перемешивании при З5с добавляют 248 г тноннла хлористого (весовые соотношения рибонуклеиновая кислота; тионил хлористый: метиловый спирт 1:2,48:6) в течение 2 ч. Раствор охлаждают до 20С. Вьшавший осадок фильтруют, промывают 20 мл метилового спирта и сушат. Осадок растворяют в горячей воде и нейтрализуют аммиачной водой до рН 2-3.
Вьгаавший гуанин отделяют фильтрацией горячего раствора. Фильтрат нейтрализуют до рН 6,5-7 и охлаждают. Осадок адешша фильтруют. Аденин и гуанин кристаллизуют из воды. . Выход, г: аденин 8,4; гуанин 8,2. Чистота, %: аденин 97,7; гуанин 96,9Примере, в колбу помещают 10О г рибонуклеиновой кислоты (чистота &8% 688 г метилового спирта и при перемешивании при 2О°С добавл$пот ЗЗО тионила хлористого (весовые соотношени рибонуклеиновая кислота: тионил хлористый: метиловый спирт 1:3,3:6,88) в течение 1 ч, Вьшавший осадок фильтруют, промывают 20 мл метилового спирта и сушат. Осадок растворяют в горячей воде и нейтрализуют аммиачной водой до рН 2-3. Выпавший гуанин отделяют фильтрацией горячего раствора. Фильтрат нейтра лизуют до рН 6,5-7 и охлаждают. Осадок аденина фильтруют. Аденин и гуанин кристаллизуют из воды. Выход, г: аденин 7,0; гуанин 8,1. Чистота, %: адешш 97,5; гуанин 96% Предложенный способ позволяет сократить время гидролиза, упростить выде ление целевых продуктов за счет исключения длительных и трудоемких оптации связанньгх с использованием ионнообменных смол, и позволяет получать аденин и гуанин высокой степени чистоты (97-98%). Формула изобретения Способ получения аденина и гуанина путем кислотного гвдролиза рибонуклеино 44V -6 вой кислоты при повышенной температуре, выделения смесл хпоргидратов аденина и гуанина нейтрализацией и разделения кристаллизацией, отлнчающнйс я тем, что, с целью упрощения процесса, гидролиз проводят хлористым пюняп(л в метаноле при весовом соотношения рибонуклеиновая кислота: хлористый тионнл: метанол 1:(1,7-2,7):(4,8-5,б) пря 2О-4О С. Источники шгформации, принятые во вниманне при экспертизе 1. Гетероциклические соединения. Год. ред. Р. Эльдерфильд т.8, М., Мир, 1969, с. 155. 25Se)ctyaM. et aZ. One Step Syntha.s«s AdenmSj Vanthine and Clupinine, rom he y6a omatonic- Acid iDepivaiives.Chem.Phartn.Buee 1976, 24(б), p. 1331. ,3, Lormg M.S. et a&. Sp&o uQphotometric method fcyhtiHe onaBysis of the Oiid pyrimidinB cotripone-nts o Hbonuu.eic, acid..BioB.Chem. 1952, 197(2), p. 8O9. v4. Заявка Японии № 48698, кл. 16 E 611.2, опублик. 1976 (прототип).
