ноли, ,1 чатем из днэтилового эфира с получением этилового эфира 6-хлор Л ,. 4-ЯИГИДРО-2Н-1, 4-бенэоксазин-2-карбоновой кислоты (ЗА) в виде белых кристаллов; т.пл..85,5-86,5°С.
Соединение 3 получают в виде белых пластинок; т.пл. 114-114,5°С, обработкой соединения ЗА 2-пропенамином в соответствии с методикой примера 1
П р и м е р 4. 6-Метил-3,4Дигидpo-N-(2-пропенил)-2Н-1,4-бензоксаэин-2-карбоксамид (4).
29.3г этил-2,3-дибромпропионата добавляют на протяжении десятиминутного периода к кипящей с обратным холодильником смеси 19,0 г безводного карбоната калия, 56,6 г 2-амино-п-крезола и 500 мл сухого ацетона.Добавление этил-2,3-дибромпропионата и карбоната калия повторяют трижды с доведением содержания карбоната калия до 76 г, а этил-2,3-дибромпропионатадо 118 г. Затем смесь нагревают с обратным холодильником в течение 17 ч фильтруют и из фильтрата отгоняют растворитель при пониженном давлении Жидкий остаток разбавляют добавлением 300 мл 1 н. раствора гидроокиси натрия при 5-10С, а затем экстрагируют четыре раза эфиром порциями по 300 мл. Экстракты объединяют, сушат (MgSOj{) и обрабатывают при 5-10с газообразным хлористым водородом. Образовавшееся твердое вещество отфильтровывают и экстрагируют ацетоном. Остаток перекристаллизовывают
из этанола с получением этилового эфира гидрохлорида 6-метил-3,4-диГИДРО-2Н-1,4-бензоксазин-2-карбоновой кислоты (4А)I в виде белых кристаллов; т.пл. 158-160С.
42.4г соединения 4А и 38 г 2-пропенамина смешивают в 165 мл этанола и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 90 ч. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток распределяют между эфиром и водой. Эфирный раствор сушат (MgSO), отгоняют приблизительно половину растворителя и образовавшееся твердое вещество отфильтровывают, а затем сушам при пониженном давлении с получением соединения 4 j т.пл. 113- 115°С.
Примерз. 6-Нитро-3,4-дигидpo-N-(2-пропенил)-2Н-1,4-бензоксазин-2-карбоксамид (5).
29,2 г этил-2,3-дибромпропионата каплями добавляют к кипящей с обратным холодильником смеси 19 г безводного карбоната калия, 70,9 г 4-нитро-2-аминофенола и 500 мл сухого ацетона. Добавление этил-2,3-дибромпропионата и карбоната калия повторяют трижды с доведением полного количества карбоната калия до 76 г, а этил-2,3-дибромпропионата - до 118 г. Реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение 17 ч.
затем фильтруют. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении. .Остаток промывают разбавленным раствором гидроокиси натрия, затем экстрагируют эфиром и хлористым метиленом. Растворители отгоняют. Анализ с помощью тонкослойной хроматографии показывает, что оба продукта идентичны. Их объединяют и перекристаллизовывают из эфира с получением этилового эфира 6-нитро З,4-ДИГИДРО-2Н-1,4-бензоксазин-2-карбоновой кислоты {5А) в виде твердого вещества: т.пл. 88-90с.
Смесь 10,0 г соединения (5А),9,1г 2-пропенамина и 35 мл этанола пере5мешивают при комнатной температуре в течение 3 суток. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток промывают эфиром, сушат, а затем перекристаллизовывают из этанола с получением соединения 5 в
0 виде оранжевых кристаллов; т.пл.14214 4с.
П р и м е р 6. 3,4-Дигидро-6-(метилсульфониламино)-N-{2-пропенил) -2Н-1,4-бензоксазин-2-карбокса5мид (6).
К 10 г соединения 5А в 700 мл этанола добавляют две однограммовые порции катализатора 10% палладия на угле. Смесь подвергают гидрогенизации при избыточном давлении 3,52 ати в течение 2 ч. Добавляют свежий катализатор и смесь гидрогенизируют вновь. Эту процедуру повторяют четыре раза и последующий анализ с помощью тон5кослойной хроматографии показывает, что нитрогруппа полностью восстанавливается в аминогруппу . Реакционную смесь фильтруют и фильтрат концентрируют с получением аминопроизводного 6А в виде коричневой жидкости.
Смесь 14,7 г соединения 6А и 7,3 г триэтиламина в 200 мл метилеихлорида обрабатывают 8,3 г метансульфонилхлорида при температуре О-5°С.Смесь затем перешивают в течение 2 ч, про5мывают водой, сушат, фильтруют и отгоняют растворитель. Остаток промывают Небольшим количеством этанола, фильтруют и перекристаллизовывают из этанола с получением метилсульфо0ниламинопроизводного 6Б в виде твердого вещества -, т.пл. 149-151 с.
Смесь 7,3 г соединения 6Б, 20 мл 2-пропенамина и 10 мл этанола перемешивают при комнатной температуре в течение 20 ч. Отфильтровывают твер5дый продукт, сушат и перекристаллизовывают из этанола-ацетона(6/1 по объему) с получением соединения 6 в виде белых кристаллов; т.пл. 178180°С.
0
П р и м е р 7. 6-Трифторметил-3,4-дигидро-N-(2-пропенил)-2Н-1,4-бензоксазин-2-карбоксамид (7)87,6 г тонкопомолотой гидроокиси натрия добавляют порциями на протя5
жении 8 ч к перемешиваемому рас;твору 164,0 г 2-нитро-4-(трифторметил)-хлорбензола в 220 мл диметилсульфоксида при комнатной температуре. Смеси дают возможность стоять на протяжении ночи, а затем выливают в 1,5 л холодной воды. Результирующую смесь подкисляют до рН 1 добавлением концентрированной соляной кислоты. Получают маслоподобный продукт; его отделяют и растворяют в эфире. Раствор сушат (MgSO) и растворитель отгоняют при пониженном давлении, Остаток смешивают с холодным раствором гидро киси натрия и смесь экстрагируют петролейным эфиром. Водный слой подкисляют концентрированной соляной кислотой. Полученное масло отделяют и растворяют в эфире. Раствор сушат (MgSOj}.) и растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток смешивают с холодным раствором гидроокиси натрия и смесь экстрагируют петролейным эфиром. Водный слой подкисляют концентрированной соляной кислотой. Результирующее масло отделяют и растворяют в эфире. Раствор сушат (Мд504.)и растворитель отгоняют с получением 2-нитро-4-1трифторметил)-фенола {7А).
82,2 г соединения 7А растворяют в 300 мл этанола. Добавляют 0,5 г платиноокисного катализатора и смесь гйдрогенизируют при избыточном давлении 3,52 ати. Периодически добавляют свежие порции катализатора.Реакционную смесь фильтруют и фильтрат концентрируют.Остаток кристаллизуют из воды с получением 2-амино-4-(трифторметил) -фенола (7Б).
11,4 г карбоната калия добавляют к 48,7 соединения 7Б в 320 мл ацетона. Затем к кипящей с обратным холодильником смеси каплями добавляют 18,2 г этил-2,3-дибромпропионата.Добавление этил-2,З-дибромпропионата и карбоната калия повторяют трижды с доведением полного количества карбоната калия до 45,6 г и этил-2,3-дибромпропионата - до 72,8 г. Затем реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение 17 часов и фильтруют, и фильтрат подвергают отгонке растворителя при пониженном давлении. Остаток растворяют в эфире; раствор промывают разбавленным раствором гидроокиси натрия , затем сушат (MgSO) и растворитель отгоняют. Остаток промывают петролейным эфиром, сушат и растворяют в эфире. Эфирный раствор частично компенсируют и охлаждают. Полученные кристаллы отфильтровывают и перекристаллизовывают из эфира с получением этилового эфира б-трифторметил-3,4-ДИГидро-2Н-1,4-бензоксазин-2-карбоновой кислоты(7В); т.пл.105107 С.
Смесь 20,6 г соединения 7В, 25,7 2-пропенамина и 34 мл этанола перемешивают при комнатной температуре в течение 36 часов. Избыток амина и растворитель отгоняют при пониженном давлении. Твердый остаток смешивают со 150 мл эфира, и нерастворившийся твердый материал отфильтровывают,. Фильтрат добавляют к петролейному эфиру и охлаждают.Полученный вязкий материал фильтруют.Фильтрат отгоняют и осадок растирают с петролейным эфиром с получением несовсем белого порошка, который очищают хроматографией на колонке(силикагель)с использованием эфира в качестве элюента.Полосу с более высоким R собирают и экстрагируют эфиром, растворитель отгоняют и твердый остаток перекристаллизовывают из зфира - гексана (4/5 по объему).Тонкослойная хроматография показывает, что присутствуют два компонента. Продукт очищают хроматографическим разделением на колонке (силикагель) с использованием в качаетве злюента смеси петролейного эфира и диэтилового эфира (1:4 по ) (колонка предварительно заполнена элюентом). Растворитель отгоняют и остаток перекристаллизовывают из эфира-гексана (75:100 по объему) с получением соединения 7 в виде твердого вещества; т. ил. 95-97°С.
Эффект ингибирования липогенеза, характерный для соединений, полученных в примерах 1-7, выявляли погружением препаратов свиной жировой ткани в жидкую среду, содержащую радиоактивную глюкозу и испытываемое химическое вещество, на некоторое время с последующим выделением липидов из обработанной ткани и определением отбора радиоактивного углерода с применением метода сцинтилляционного счета. Эти испытания проводили на СВИНОЙ жировой ткани, поскольку у свиней основным центром липогенеза, т,е, синтеза жирных кислот, является жировая ткань.
Испытания проводили в соответствии с нижеследующей общей методикой,
Срезы свиной жировой ткани по 150 мг инкубировали при 37°С в течение 2 часбв при встряхивании в 3 мл бикарбонатного раствора КребсаРингера, содержащего половину нормальной концентрации ионов кальция, 60 микромолей.глюкозы, 0,5 микрокюри глюкозы - (, и 300 микроединиц инсулина, а также 5% диметилсульфоксида (ДМСО). Испытываемые соединения добавляли в виде раствора или суспензии в ДМСО и присутствовали в концентрации 100мкг/мл инку бационной смеси.
Инкубацию прекращали добавлением 0,25 мл I н, серной кислоты. Результирующую смесь экстрагировали хлороформом - метанолом (2:1 по объему) в общем количестве 25 мл. Экстракты промывали по методу Фолча, подвергали воздушной сушке и производили счет с использованием жидкостного сцинтилляционного счетчика с 15 мл счетной текучей среды (2 части толуола, содержащего 0,4 вес/объем % продукта Omniflйог фирмы New England Nuclear,на 1 часть тритона Х-100) . Испытания проводили с тройным дублированием и сопровождали контрольными испытаниями, в которых все ингредиенты, пропорции и усИнгибированиё липогенеза соединениями общей формулы I
ловия были теми же, за исключением того, что отсутствовало испытываемое соединение. На основании полученных данных рассчитывали процент ингибирования синтеза липидов, характерный для испытываемых соединений в кёикдом случае. Полученные на основании испытаний данные приведены в нижеследующей таблице в виде процента ингибирования липогенеза в сопоставлении с результатами, полученными в
0 контрольных испытаниях, где испытываемые соединения отсутствовали.
формула изобретения
Способ получения бензоксазинкарбоксамидов общей формулы
о
С-ТШ- СНг- СН CHj
или 1;
R - атом хлора, нитрогруппа, метилсульфоииламиногруппа или трифто1)метильная груп- па
R - атом водорода или метильная группа,
отличающаяся тем, что соединение общей формулы
О
где п, R и R имеют вышеуказанные
значения,
Y -алкильная группа, подверггиот взаимодействию с четырехшестикратным МОЛЬНЕ М избытком 2-пропенамина в присутствии растворителя.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
