СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИДРОХЛОРИДА АНТРАЦИКЛИНгЖ5^ИДА Советский патент 1981 года по МПК C07H15/252 A61K31/704 

Изобретение относится к способу получения новых соединений, обладаю toftx противоопухолевой активностью антрациклингликозидов, получаемые в виде гидррхлоридов. Цель изоЬретения - получение новых полезных соединений, расширяющих арсенал средств воздействия на живой организм. Поставленная цель достигается пу тем синтеза, основанного на известной реакции Кенигса-Кнорра 1. Предлагаемый способ получения ги рохлорида нового антрадиклингликози формулы . оя -нсг., СО оснз о где R представляет собой ; оснз тЯг заключающийся в конденсации дауноми цинона, растворенного в сухом метилендихлориде.с хлоридом 3-трифторацетамидо-2,3,6-тридеокси-4 -О.-метил-1-ликс6гексоопиранозила или с хлоридсмл 3-трифторацетамидо-2,3,6-тридеокси-4-О-метил-5й-1-арабиногексопирайозила при комнатной температуре в течение 1-2 ч в присутстаии катализатора трифторметансульфоиата серебра в эфирном растворе и дегидратирующего агента молекулярного, сита с последующим мягким щелочным гидролиаом в ацетоне полученного М-заадищенного гликозида действием 0,1 и. водной гидроокисью натрия и обработкой полученного свободного гликоэид- ного основания метанольным раствором хлористого -водорода. Изобретение иллюстрируется примерами, в которых используеиае блокированные амидодезоксигалоидсахара получают следующим обрайом. Получение в качестве промежуточного продукта З-трифторацетгилидо-2,3,6-тридезокси-4-О-метил-1-ликсогексопиранозилхлорида.. . Раствор метил-3-три(тс1рацетг№идо-2,3,6 -тридезок6и-л-1-л1« ;согексопиранозида (2,57 г, 10 ммоль) в сухом метилендихлориде (45 мл) подвергают обработке при 0°С эфиратом трехфтористого .бора (0,1 мл). В период вр емени пока температура поддерживается на уровне 0°С, добавляют диаэометан в метилендихлорид до появления устойчивой слабожелтой окраски,.Спус тя 90 мин при 0°С путем фильтрации удаляют твердое белое вещество (полиметилен) , а фильтрат последовательно промывают 10%-ным водным раствором бикарбоната натрия, а также водой и просушивают над безводным сульфатом магния. Остаток, полученный при испарении, выделяют кристаллизацией из диэтилгексанового эфира, в результа-те чего получают, чистый метил-3-трифторе1Цетамидо-2 ,3,6 -триДезокси-4-О-метил-Л-1-ликсогексопиранозид;(2,3 г, 85%); т.пл. 137-138°С,М о -150° (, в хлороформе);масс-спек рометрические данные п/е 271 (М). С.пектр парамагнитного резонанаса (соCR) имеет поглощение на 1,23 (ot, ); 3,23 и 3,40 (два S--ОСН) и 4,70S (широкое S, С-1-Н), Раствор указанного 4-О-метильного соединены (2,17 г, 8 ммоль) в уксусной кислоте (40 мл) добавляют к воде (160 мл) и разогревают до в течение 1 ч. Кристаллизация ос-- татка, полученного путем испарения из ацетонгексана дает 3-трифторацетамидо-2,3,6-трйдезокси-4-О-метил -ot-L-ликсогексопиранозу (2 г, 97%); Т.пл. 193-194°C,tot J, -130° (,97 в хлороформе) данные масс-спектромет рии п/е 257 (М) . Спектр парамагнитного резонанса (СДС R-) имеет поглощения на 1,23 (d, ), 3,50 (S, ) и 5,40 S (широкое S, С-1-Н). Раствор указанного пиранозиого соединенны (1,68 г, 6,53 ммсль) ъ безводном пиридине (48 ми) энергично перемешивают при 0°С п-нитробензолхлоридом (2,52 г). Спустя 14 ч после пребывания при комнатной темпе ратуре смесь, полученную в результате реакции, переливают в охлаждаемую льдом воду, а выпавший осадок от.филь тровывают и промывают водой до нейтральной реакции. Получающийся п-нит робензоат (смес-ьЛ- и -мономера) растворяют в хлороформе и просушивают над сульфатом магния. Остаток, получаемый в результате выпаривания, дает 2,4 г 3-трифторацетамидо-2,3,6-тpидeэoкcи-4-O-мeтил-l-O-п-нитpoбeнзoил-L-ликcoгeкcoпиpaнoзы1,92%); т,Ш1. 168-170°C,otl , (,45, в хлороформе). Данные масс -спектррметрического анализа: П)/е 240 (М-Р-нитробензоильный гидрокси Раствор этого п-нитробензоильног соединения (1|,05 г, 2,5 4моль) в безводном мет илендихлориде подверга ют насыщению при 0°С безводнымхлор тым водородом. Выпавшую в. осадок п-нитробензойную кислоту в безводно состоянии подвергают отфильтровываию, а фильтрат выпаривают до статка. Получающийся 3-трифторацетмидо-2,3,6-тридезокси-4-О-метил-1ликсогексопиранозилхлорид (0,69 г) спользуют для реакции сочетания без альнейшей очистки, Получение З-трифторацетамидо-2, ,6-тридезокси-4-О-метил-об-L-арабиогексопиранозилхлорида в качестве ромежуточного продукта, Обработка метил-3-трйфторацетамио 2, 3,6-тридезокси-оС-1-арабиногексоиранозида (2,57т, 10 . ммоль) в меилендихлориде с помощью диазометана эфирата трехфтористого ,бора, как казано вьаие, дает соответствующее 4-О-метилпооизводное (1,7 г, 63%); т.пл. ,( (, в хлороформе) . Данные масс-спектрометрии п/е 271 (М), Спектр парамагнитного резонанса (СДСО имеет поглощение при: 1,31 (d, СНз-С-5) , 3,30 и 3,43 (два S , ОСИ)« и 4,70, 5 (широкое S, С-1-Н). Гидролизом в кислой среде 4-О-метильного соедин.енкя (1,63г,г, 6 ммоль). получают З-трифторацетамидо-2,3,6-тридезокси-4-О-метил-1-арабйяогексопиранозу (1 51, 98%); т.пл. 201°С, ,7° (,48, в хлороформе) . Данные масс-с;пектрометрическОго анализа п/е 257 (M) . Обработка пиранозного соединения (1,41 г, 5,5 кмоль) с помсядью п-нитробензоильного хлорида в пиридине дает соответствующее 1-О-п-нитробензоильное производное (1,78 г, 80%); т.пл. 159-160®C,tot3D 33,5° (,47, в хлороформе). Данные масс-спектрального анализа, (м-п-нитробензойный гидроксид), Раствор указанного п-нитробензоильного соединения (1,6 г, 4 ммопъ) в безводном метилендихлориде подвергают насьвцению при с помощью безводного хлористого водорода. После отфильтровывания выпавшей в п-нитробензойной кислоты, раствор подвергают выпариванию до сухого остатка с получением З-трифторацетамидо-2 ,3,6-тридезокси-4-О-метил -L-apaбиногексопиранозилхлорида (1,1 г). Спектр его парамагнитного резонанса (СДС1з) имеет поглощение при 1,34 (d, СН,-С-5); 3,44 (S, CHj-O-C-H) и при 6;17 8 (широкбе S, С-1-Н). Пример 1, 4-0-Метилдауномицин (lMl-69), Раствор дауномицинона (1 г, 2,5 ммоль) в безводном метилендихлориде (100 мл) вводят в 3-трифторсщетамидо-2,3,6-тридезокси-4-6-метил-1-ликсогексопиранозилхлорид(0,69 г) и 7 г молекулярного сита (4 А) и обрабатывают с помощью (0,78 г) в безводном диэтиловом эфире при энергичном перемешивании. После 2 ч выдерживания при комнатной температуре реакционную смесь нейтрашизуют с помощью водного раств ра бикарбоната натрия и органическую фазу выделяют испарением под вакуумом. Осуществляют хроматографическую очистку получаемого осадка на колонке с окисью кремния, в качестве злюента используют смесь хлороформа с ацетоном в о,тношении 99:1, полу чают 0,9 г 4-О-метил-М-трифторацетйл даунрмицина; т.пл. 151-162°С. +250° (,06, в хлороформе). Спектр парамагнитного резонанса (СДСЦ) имеет поглощение при 1,33 (d, СН,СО-5): 2,40 (S, СНа-СО), 3,.53 (S, С-4 -0-СН) ; 4,03 (S, С-4-6-СНз), 5,20 (широкое S, С-7-Н) 5,50 (широкое S, C-l -Н), 6,43 (NH) ; 6,43 (NH); 7,16-8 (т, ароматические протоны); 16,26 и б (два S, фе нольный радикал ОН). Раствор указанного блокированного соединения (0,5 г) в ацетоне (30 мл) подвергают обработке 0,1 н. водным раствором гидроокиси натрия (30 мп) при активном перембшивании в атмосфере азота. Спустя 1 ч рН реакционной смеси доводят до 3,5 за счет добавления I н. водного раствора кло ристого водорода, затем чтобы устранить некоторые загрязняющие примеси, производят экстракцию хлороформом. .Экстракцию проводят из водной фазы после установления рН 8,5 хлорофо мом (порциями 50 и 30 мл). Органичес кую экстрагированную часть просушива ют над безводным сульфатом натрия, концентрируют до небольшого объема и подвергают окислению при рН 4,5 с помощью 0,5 н. метаиольного раствора хлористого водорода. Добавление избытка диэтилэфира дает в осадке 4-О-метилдауномицин в виде гидрохлори да (0,4 г, 90%); т.пл. (с разложением), о +210° (,04,. в метиловом спирте), тонкослойная хроматография на пластине марки Кизельгур с использованием смеси раст ворителей хлороформ-метанол -вода дае RJ 0,40 (дауномицин R 0,25). Пример 2. 4-Эпи-4-О-4-О-метилдауномицин (1М1 - 74). Для синтеза препарата, имекжцего данное наименование, в качестве исходного соединения берут дауномицин и З-трифторацетамидо-2,3,6-тридезокси-4-О-метил-в(-1-арабиногексопиранозилхлорид и осуществляют этот синтез в соответствии с процедурой примера 1. 4-Эпи-4-О-метилдауномицин получа-ют в виде гидрохлорида в форме оранжево-красных кристаллов; т.пл. 192°с (с разложением); oil +270° (С 0,047, в метаноле). , Соединения 4-О-метилдауномицин, 4-О-метилёщриамицин, и 4-зпи-.4-О-метилдауномицин и 41-эпи- 4-О-метиладриамиции, проявляя антимототичёскую активность, являются полезными терапев.тическими средствами при лечении экспериментсшьных туморов у животных. Соединения подвергают испытанию на машах BOEJ {С57 BL/6-flBA)J, которым делают инъекции iп р. (в пахо-. вую область) дозы 10 клеток на млкь „„ асцетической лейкемии Р 388. Лечение начато в виде инъекций в таховую область спустя 1 день после появления прививки новообразования, лекарственные препараты растворены в дистил- лированной воде в вяде гидрохлрридов. Даун 4ицин и производные дауномицина исгнлтаны в отношении их действия ttpOTHB лейкемии Р 388, которая очень чувствительн к антитуморному воздействию антрациклинов. Данные, приведенные в табл. 1, показывапот, что 4-О-метилдауномицин, при дозе 4,4 мг/кг имеет большую ак- , т-ивиость, чем дауномицин 4-эпи-4-0-метилдауномицин при целом ряде доэяровок (от 4,4 до 20 мг/кг) прояв яет активность и имеет меньшую токсичность, чем дауномицин., . При-оптимальных нетоксичных дозах Дауномицин (2,9 мг/кг) и 41-эпи-4-Ометялдауиомнцин (20 мг/кг) имеют одинаковую антитуморную активность. : Представленные результаты показыв т, что замена гидроксильной груп таг в положении 4 аминосахара на етоксиальную группу обеспечивает величение антитуморной активности, ридан ие эпикоифигураций замецаю му радикалу в положение 4; приводи i обцему уменьшению токсичности, как ° заключить на основе наблюеннй за tfoaeam с привитыми ново9базоааинями. В табл. 1 приведена акивность против лейкемии Р 388. В табя. 2 приведена активность проив лейкемии С 1210.

Таблица 1

Примечание.

0 О

Средиее время выживания мышей, подвергнутых лечению, по сравнению со средним временем выживания контрольных мааеЯ, умноженное на 100. i

Таблиц

дауномицинон, растворенный в сухст метилендихлориде, подвергают взаимодействию с хлоридом 3-трифторацетами9 82695610

до-2,3,6-тридеокси-4-О-метил-1-лик-гликозида дсйстаи 0,2 н. водной

согексопираноэила или с хлоридомгидроокисью натрия и обработкой

3-трифторацетамидо-2,3,6-тридеокеи-полученного свободного глйкозидного

-4-О-метил-о,-1-арабиногексопирано-основания метанольным раствором

зила при комнатной температуре в. те-хлористого водорода.

чение 1-2 ч в присутствии катализа-с

тора трифторметансульфоната серебра Источники инфсч мацик,

в эфирном растворе и дегидратирующегопринятые во внимание-при экспертизе

агента молекулярного сита с последую-1. Физер Л., Физер И. Реагента

щим мягким щелочным гидролизом вДля органического синтеза. М., Мир ,

ацетоне полученного N-защищенного 1970, с. 187 (прототип).