Способ количественного определения парааминосалицилата натрия Советский патент 1980 года по МПК G01N21/24 

СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЁНЙЯ

(54) ПАРААМИНОСАЛИЦИЛАТА НАТРИЯ

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способу определения парааминосалицилата натрия, и может быть использовано при анализе лекаретвенных средств в лабораториях аптечных управлений и химико-фармацевтических заводов, а также в биохимических ла рато- риях системы здравоохранения и при ток- сикохимических исследованиях. Известен способ .количестЬенного определения параамннбсалицилата натрия путем обработки пробы анализируемого ве- щества концентрированной серной кислотой с последующим измерением интенсивности флуоресценции полученного раствора 1. Недостатками способа являются егхэ неселективность и невысокая чувствитель- ность. Этот способ позволяет обнаружигь при концентрации 50 мкг/мл в среднем только 75% препарата в моче и 71,5% - в . , крови даже в искусственных смесях. Цель изобретопця - повышение селективности и чувстпитол1,пости способа. Цель достигается тем, что по способу заключающемуся в том, что пробу анализируемого вещества обрабатывают неорга- нМёскймрШТё 1и1 Юм В после дую1д нием интенсивности флуоресценции полученного раствора в качестве неорганического реагента используютхлорид, алюминия и обработку ведут в кислой среде в присутствии бутилового спирта. . Сопутствующие ингредиенты, находящиеся в лекарственных формах, не мешают прямому определению. Линейная зависимость между интенсивностью флуоресценции образующегося внутрикомплексного соединения и концентрацией парааминосалици/пата натрия находится от 0,01 До . 5О мкг/мл . Содерлсание парааминосалицилата натрия, начиная с 0,1 мкг/мл, определяется пол- .ностью (100%) в бнологических кидко.стях (моча и кровь). Пример 1. Количественное определение парааминосалицилата натрия в лекарственных формах. Точную навеску (0,05 г, 0,1 г или 1-2 мл) исследуемых образцов перенос в мерную колбу емкостью 100 мл, прибавляют 50-60 мл этилового спирта и энергичио встряхивают 3-5 мин, долива спиртом до метки и перемешивают (рас твор А). Аликвотную часть раствора А переносят в мерную колбу, чтобы получ ся раствор с содержанием не более 200 мкг/мл (раствор Б). К 1 мл раств ра Б приливают 1 мл 1%-його раствора хлорида алюминия, 8 мл бутилового спи та, 3 капли 2.tt, спиртового раствора со ляной кислоты и измеряют интенсивност флуоресценции полученного раствора. Содержание рассчитывают по калибро вочному графику, для чего в ряд пробирок отмеривают О,1; 0,5; 1,0; 1,5; 2мл стандартного раствора в этиловом спирте с содержанием 100 мкг/мл, добавляют по 1 мл 1%-ного раствора хло да алюминия, доводят все растворы бут ловым спиртом до 1О мл, добавляют по 3 капли 2 н,спиртового раствора соляной кислоты. ФлуориметрфуКИр одноврем но U растворамиисследуемых образцов. По результатам этих измерений строят калибровЬчный график. Результаты флуориметрического определения парааминосалицилата натрия в Пасомицине приведены ниже (навеска порошка составляет 0,9194), Найдено парааминосалицилата по калибровочному из расчета на 1 графику, мкгпорошка 9,1500 0,4600 10,0000 . 0,50ОО 11,0640 0,5532 0,3723 7,4469 8,7234 0,4361 0,4468 8,9361 6,1702 О,ЗО85 7,8723 0,3936 0,4150 8,ЗООО Метрологические характеристики X 0,4317 + 0,0714 Е 0,95 ± О,О547 а 0,43Г7± 0,0547 Ниже даны результаты флуориметричес кого определения парааминосалицилата натрия в 3%-ном растворе для инъекций, Найдено параамипосалицилата натрия по калибровочномув растворе, графику, мкгг 10,43470,0344 9,78260,0322 10,21370,0337 9,56520,0315 10,03470,0331 9,13040,0301 Метрологические характеристики X 0,0325 tf + 0,ОО19V Ео,в ± 0,0019 а 0,0325 ± 0,0019 Пример 2, Определение парааминосалицилата натрия в крови, 0,1 мл крови разбавляют до 1 мл этиловым спиртом, хорошо перемешивают, ценрифугируют 3-4 мин при 3000 обмин, К 1 мл центрифугата добавляют 1 мл 1%ного спиртового раствора хлорида алюминия, 8 мл бутилового спирта и 3 капли 2 н, раствора солянбй кислоты. Измеряют интенсивноёть флуоресценции. Содержание рассчитывают по калибровочному графику, для чего в ряд пробирок отмеривают 0,1; 0,5; 1,О; 2,0; 3,0; 4,0 мл стандартного раствора с содержанием 25 мкг/мл в этиловом спирте, добавляют по 1 мл 1%-ного раствора хлорида алюминия, дово-дят объем всех пробирок до 1О мл бутиловым спиртом, добавляют по 3 капли 2И. раствора соляной кислоты, Флуориметрируют одновременно с растворами исследуемых образцов. Пример 3, Определение парааминосалицилата натрия в моче, 1 мл мочи разбавляют до 1О мл этиловым спиртом, центрифугируют 3-4 мин при ЗООО об/мин, К 1 мл данного .раствора прибавляют 1 мл 1%-ного раствора хлорида алюминия в этиловом спирте, 8 мл бутилового спирта и 3 капли 2 и. спиртового раствора соляной кислоты измеряют интенсивность флуоресценции. Содержание ПАСК рассчитывают по калибровочному графику, для чего в ряд пробирок отмеривают 0,1; 0,5; 1,0; 2,0; 3,О; 4,0 мл стандартного раствора в этиловом спирте с содержанием 25 мкг/мл, добавляют по 1 мл 1%-ного раствора хлбрида алюминия, доводят объем всех пробирок до 10 мл бутиловым спиртом, добавляют по 3 капли 2и, раствора соляной кислоты, флуориметрируют одновремен3,457 3,063 0,856 0,210 О,114 0,061 0,045 0,О35 7,844 44,6 48,1 54,7 40,2

d ± 0,774

0 7,844 i 0,815

При изучении оптимальных условий про-j40,0 мкг/мл, прямолинейная от 0,01 до

ведения флуоресцентной реакции на пар.,0 мкг/мл. аминосалидилат натрия установлено, что .

прямая зависимость интенсивности флуорес- Зависимость интенсивности флуоресценценции от концентрации парааминоса- 25чии.от концентрации парааминосалицилата

лиципата натрия лежит от 0,01 .аркатрия приведена в табл. 1,

Чувствительность реакции достаточно высокая (о,01 мкг/мл), что позволяет проводить определения препарата в лекарственных формах (0,01 мкг/мл) и биологических жидкостях (0,1 мкг/мл) без отделения от сопутствующих компонентов.

Определения проводились на электронном флуориметре ЭФ-ЗМА.

Концентрация раствора хлористого алю717635

Т а б л и ц а 1

миния, используемого для обработки анализируемой пробы, составляет от OjOOOOOl до 0,1 г/мл. Оптимальные значения этого интервала от 0,01 до О,03 г/мло

Ниже приведена зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации хлорида алюминия 1 но с растворами исследуемых образцов. Результаты определения представлены. Результаты флуориметрическогб определения парааминосалицилата натрия в крови и моче при назначении по 9,0 г в виде таблеток (5. из 10 больных) даны ниже.

ресценции 92 100

Состав внутрикомплексного соединения парааминосалицилата натрия с хлоридом алюмршия, методом изомолярных серий

4i :J-j6S 2 :-

Исследовали состав полученного внутрикомплексного соединения методом изо- молярных серий (см. табя. 2).

Т а б л и U а

717631

9

Формула изобретения jo

Способ количественного определения парааминосалиципата натрия путем обработки пробы анализируемого вещества неорганическим реагентом с последующим 25 измерением интенсивности флуоресценции полученного раствора, отличающийся тем, что с целью повышения чувствительности способа и его селектив-

Продолжение табл. 2

ности, Б качестве неорганического реагента используют хлорид алюминия и обработку ведут в кислой среде в присутствии бутилового спирта.

Истонники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Сенов П. Л., Павлюченкова Л. П. Флуориметрическое определение натрия парааминосалииилата. Фармация, 1973, № 5, с. 32-34 (прютотип).