Способ получения вещества,угнетающего лейкозные клетки Советский патент 1982 года по МПК A61K35/28 

извлекают селезенку. В низкотемпературной камере при +3Н4° селезенки освобождают от жира и соединительной ткани, взвешивают, заливают трехкратным объемом охлажденного до -8 -10° ацетона химически чистого и гомогенизируют в гомогенизаторе РТ-1 3 мин при 8000 об/мип. Гомогепат при постоянном помешивании

оставляют на 20 ч при +3Ь4°. Затем

фильтруют его через воронку Бюхнера под вакуумом, иромывают двумя объемами охлажденного ацетона трижды и однократно одним объемом охлажденного эфира для наркоза. Порошок высушивают на воздухе II сеят через капроновое сито. Из 1200 г ткани селезенки получают 260 г порошка,

который хранят при . Затем к 1 г

iiopoHJKa добавляют 15 мл дистиллированной воды, гомогеиизируют 5 мин (2 мни, перерыв 1 мин и затем еш,е 3 мин) в гомогенизаторе типа Поттера цри 5000 об/мип.

Суспензию оставляют при +31-4° на

18 ч при постоянном помешивании, центрифугируют 2 ч при 45.000 g на центрифуге ЦВР-1. Надосадочную жидкость подвергают диализу при +31-4° против 200 объемов воды в течение 20 ч при помешивании. Диализат центрифугируют при 30.000 g 45 мин. Надосадочную жидкость фильтруют па холоде через мембраииый фильтр с диаметром нор 0,6 мкм и лиофилизируют. Получают 0,23 г вещества из 1 г порошка. ВеniecTBO получают в виде аморфиого порошка розоватого цвета. Вещество растворяют в питательной среде 199 для культивирования клеток. Исследования с помощью радиоизотов показали, что ползченное вещество ингибирует синтез ДНК, в лейкозных клетках на 80-88% н стимулирует его в нормальных клетках па 23-67%.

Ciioi:o6 ползоляег по.ч чить BenieciBO, которое угнетает пролиферацию лейкозных клеток и не только не угнетает пролиферацию нормальных клеток, но и оказывает стимулирующее действие на иих. Это позволяет использовать его в качестве средства для избирательной ингибиции лейкозных клеток и для стимуляции нормальных . Использование стимулированной и репаративной регенерации в организме млекоиитающих селезеики, ранее не применявшейся для получения веществ, противоположно действующих на нормальные и лейкозиые клетки, открывает новый источник

для получепия биологически активных веществ, регулирующих в организме пролиферативные процессы в нормальной и лейкозной ткани.

Форму л а н 3 о б р е т е н и я

Способ получения вещества, угнетающего лейкозные клетки, путем обезвоживания, обезжиривания ткани селезенки млекопитающих с последующей экстракцией водой и лиофилизацией, отличающийся тем, что, с целью получения целевого продукта, обладающего одновременно стимулирующим хТ,ействием на нормальные клетки,

предварительно перед извлечепием селезенки в оргапизм животного вводят лекаретвеппый препарат, преимущественно циклофосфат, разрушающий ткан1 селезепкн.

И сточ н II ки и н фор м а ци и, принятые во внимание при экспертизе

1. J. С. Houck, Н., Jrauguin National Canсег Institute, Monograph, 1973, 38 с. 117- 122.