Способ получения 9-/2-оксиэтоксиметил/-гуанинфосфатов Советский патент 1981 года по МПК C07F9/09 A61K31/675 A61P31/12 

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 9-С2-ОКСИЭТОКСИМЕТИЛ)-ГУАНИНФОСФАТОВ

Изобретение относится к области х мии фосфорорганических соединений, а именно к способу получения новых 9-(2-оксиэтоксиметил)-гуанинфосфатов общей формулы (I) 4Х (5H o-p-oz (H20( HjV где W,Z - одинаковые или разные и . представляют собой водород или фарма цевтически приемлемый катион, которы обладают противовирусной активностью и могут быть использованы для леченим вирусных заболеваний у млекопита Ж Способ получения 9- (2-оксиэтоксиметил)-гуанинфосфатов формулы (Т) в литературе не описан. - Известен способ получения фосфатов, например 2-цианэтилфосфата, путем взаимодействия хлорокисй фосфора с нитрилом гидракриловой кислоты. Реакцию проводят в среде эфира в при сутствии пиридина при охлаждении. Промежуточно образующийся продукт разлагают путем прибавления его эфирного раствора к смеси водного раствора пи ридина со льдом. Целевой продукт |2-цианэтилфосфат - выделяют в виде кристаллической бариевой соли (выход 60%) i Известен способ получения гуанозин-з-фосфата путем фосфорилирования гуанозина хлорокисью фосфора в среде пиридина при температуре от (-40)до (-10)°С 2.. Однако 9-(2-оксиэтоксиметил)-гуанинфосфаты формулы (I) указанными способами получены не были. Целью изобретения является разработка способа получения новых 9-(2-оксиэтоксиметил)-гуанинфосфатов. Поставленная цель достигается описываемым способом получений 9- (2-6кйиэтоксйметил)-гуанинфосфатов формулы (I), заключаюпщмся в том, что 2-оксйэтоксиметилгуанин подвергают взаимодействию с хлорокисью фосфора в среде триалкилфосфата при температуре от -) 30 до С+) 25° С с последующим гидролизом полученного эфирохлорангидрида фосфорной кислоты и выделением целевого продукта в виде кислоты или ее соли. Фармацевтически приемлемые соли 9-(2-оксиэтоксиметил)-гуанинфосфата получают нейтрализацией 9- (2-оксиэ токсиметил)-гуанинфосфата эквимольным количеством основания, напри мер гидроокиси, бикарбоната или карбоната, содержащего ка;тион натрия, калия, аммония, кальция, лития, магния или алюминия.Вышеуказанные соли можно также получать обменными реакциями, в которых соль 9-(2-оксиэтокс метил)-гуанинфосфата обрабатывают во ным раствором соли, содержащей необх димый катион. Предлагаемый способ позволяет получать 9- (2-оксиэтоксиметил)-гуанинфосфата с выходом до 65%. Пример, Получение 9- (2-окс этоксиметил)-гуанинфосфата. 0,76 МП хлорокиси фосфора добавля ют к перемешиваемой смеси 6,225 f 9-(2-оксиэтоксиметил)-гуанина и 5 мл триэтилфосфата, охлажденной до (-) icf Температуру реакционной смеси поднй.мают до в течение 30 мин и поддерживают в течение 2 ч. Затем полученную смесь выпивают в смесь воды и льда и рИ среды доводят до 7 2н. вод ным ра:створом гидроокиси калия. Полу ченный раЬтвор дваяоды экстрагируют хлороформом и один раз эфиром, рн оставшегося водного раствора доводят до 7,1 2н. водным раствором гидроокиси калия, затем фильтруют. Получе ное белое твердое вещество растворяю в 7 мл воды и добавляют 7 мл метанола для осаждения неорганических солей, которые затем отделяют фильтров нием. К фильтрату добавляют 70 мл ац тона, при этом выпадает в осадок белая смола. Ее растворяют в 7 мл воды добавляют 7 мл этанопа и смесь фильт руют, к фильтрату добавляют большой избыток ацетона до 70 мп, и снова смола выпадает в осадок. Эту смоЛУ растворяют в 20 мл этанола, раствори тель отгоняют и получают 2,6 г белого порошка, представляющего собой смесь неорганических солей и целевого продукта. Твердый осадок растворяют в 10 мл воды, обрабатывают на колонке С био-гелем Р-2 (200-40 0 меш 2,7x90 см) и элюируют водой. Данные тонкослойной хроматографии, на целлюлозе Истмен Хромаграм в смеси пропанола и воды (70:30 по объему ,26 для 9-{2-оксиэтоксиметил)-гуанинфосфата и Rf 0,11 для 9-(2-оксиэтоксиметил)-гуанинкалийфосфата Элюат фильтруют и получают О,28 г твердого водества, S котором по данным уФ-спектроскопии содержится 0,2г целевого продукта. Выход 65%, продукт начинает разлагаться при 210с. Элементарный анализ: Найдено, %t С 31,23; Н 3,85j N 23,00; Р 10,09, Вычислено, %: С 31,49; Н 3,96; N 22,95} Р 10,15, Пример2, Получение 9- (2-оксиэтоксиметил )-гуанинаммонийфосфата. 0,28 г 9-{2-оксиэтоксиметил)-гуанинфосфата растворяют в 30 мл воды и рН раствора доводят до 6 с помощью 6 г водного раствора соляной кисоты. Продукт сорбируют 14 мл уплотненного угля (Фишер 5-69ОВ, 5000 меш, кислотой и дезактивированный толуолом). Уголь промывают водой и элюируют 70 мл 50%-ного водного этанола, содержащего 2% концентрированного раствора гидроокиси аммония. Растворитель отгоняют при пониженном давлении и получают 0,048 г 9- {2-оксиэтоксиметил)-гуанинаммонийфосфата; ,30 на целлюлозе Истмена в смеси пропанола и воды (70:30 по объему) , выход 15%; продукт начинает разлагаться при 210С, Пример 3. Получают таблетки следующего состава, мг: 9- (2-Оксиметоксиметил)-гуаниннатрийфосфат100ЛакТоза200 Крахмал50 Поливинилпирролидон, 5 Стеарат магния .4 П Р и м е Р 4. Готовят офтальмологический раствор следующего состава: 9- (2-Оксиэтоксиметил)гуаниннатрийфосфат1,0 г Хлористый натрий (аналитический).0,9 г Тимеросал0,001 г Дистиллированная вода До 100 мл рН5,5-7,5 Примере. Готовят раствор дпя инъекций следующего состава, 9-(2-оксиэтоксиметил)-гуаниннатрийфосфат0,775 г Стерильный, не содержащий пирогенов, фосфат-ный буфер с .рН 7До 25 мл При мер 6. Получение 9-{2-оксиэтоксиметил )-гу аниндинатрийфосфата. 54 мл хлорокиси фосфора добавляют в течение 3ч к перемешиваемой охлажденной от {-30)°С до (-20) С смеси 25 г 9- (2-оксиэтоксиметил)-гуанина и 250 мя т иэтилфосфаТа. Температуру реакционной смеси поднимают до 0°С в течение 45 мин и смесь поддерживают при этой температуре еще 45 мин, затем рН смеси доводят до 1 2н. водным раствором гидроокиси натрия. Полученный раствор экстрагируют один раз хлороформом и сщин раз эфиром. рН оставшегося водного раствора доВОдят до 6,8 2н. годным раствором t гидроокиси натрия, затем - до 7,3 .Юн. водным раствором гидроокиси натрия, Конечный объем смеси 2,5 л. Нейтрализованный раствор вносят в колонку с 2000 г Довекс Ix 8/уравновешенной 50 KHCO-J, Элюирование ведут при линейном градиенте 30 л 50-500 ммоль KHCOj с побледующей промывкой 30 л 500 ммоль KHCOj. Фракции, содержащие целевой продукт, объединяют, бол1Л1ую часть КНСО УДаляют добавлением Довекс 50-Н и удалением CO,j в вакууме. Объем уменьшают до 2 л в вакууме и продукт высажи вают при доба.влением 10 л ацетона . Засушенный осадок в количестве 55 г вносят в колонку био-гель Р-2 10x110 см и элюируют водой. Получают 22 г твердого вещества. Вещество перекристаллизовывают при в виде кислой сади из раствора с рН 3. Боль шую часть вещества получают из маточ ного раствора кристаллизацией из 20%-ного этанола при рН 3. Кислую соль.растворяют в минимальном объеме воды с рН 8,5 (за счет добавления гидроокиси натрия) и осаиодают 2 объемамиэтанола при 4°С. Полученный осадок растворяют в 100 мл воды, осаждают 9 объемами этанола при 4°С и получают 15,1 г дигидрата 9- (2-оксиэтоксиметил)-гуаниндинатрийфосфата, Чистоту продукта подтверждают эле ментарным анализом, жидкостной хроматографией под давлением и ультрафиолетовым спектром. Найдено %:с 25,20-, Н 3,63; N 18,10; Р 7,89. CaH, UNa-lHaO. вычислено, %: С 24,949 j Н 3,66;. 18,19) Р 8,04. УФ-спектр: СредаЛ 12970 225 272 0,1 М НС1 254 14060 219 266 209 11760 228 255-264 0,1 М NaOH По жидкостной хроматографии под давлением чистота 99%. Отношение основания к фосфату 1,00:1,01. Выход 35%, размягчение продукта наблюдают вблизи с постепенным разложением и потемнени 4 при температуре вьпяе 250С. Формула изобретения Способ получения.9-(2-оксиэтоксиметил}-гуанинфосфатов общей формулы«Н20СДг(Н,0-р-02 где W и Z - одинаковые или разные И представляют собой водород или фармацевтически приемлемый катион, заключающийся в том, что 2-оксиэтоксиметилгуанин подвергают взаимодействию с хлорокисью фосфора в среде триалкилфосфата прн температуЬе от (-) 30 до (+) 25°С с последующим гидролизом полученного эфирохлора.нгидрида фосфорной кислоты и выделением целевого продукта в виде кислоты или ее сопи. Источники информацииI принятые во вниман иё при экспертизе 1.Пурдела Д., Вылчану Р. Химия органических соединений фосфора. Химия, М., 1972, с. 407. 2.Michelson A.M., Todd . Mondnucleotides derived from Adenesin, Guanoslne, Cyt{cline and Urldine. L. Chem Soc. 1949, 2476-2486.