Изобретение относится к химии гетероциклических фосфорорганически соединений, а именно к способу полу чения новых оптически активных производных оксазафосфорина общей формулыР-СИ-К Г где R - фенил; R - низший алкил или фенилзамещенный низший алкил, которые могут быть использованы в качестве полупродуктов для получения оптически активных производных цикло фосфамида, являющихся ценными терапевтичёскими средствами при лечении фолликулярной лимфоаденопатии. Известны способы получения циклических эфиров или амидов фосфорной кислоты взаимодействием диодов или диаминов с хлорокисью фосфора или ее органическими производными 1. Известно также получение цикличес ких эфироамидов фосфорной кислоты, например циклофосфана, формулы СНг-0 0 . / CHf- №Г KfcHaCHjd-b из соответствующего аминоспирта и хлорангидрида фосфорной кислоты, обладающего противоопухолевой активностью 12 . Однако оптически активные производные оксазафосфорина формулы Т и способы их получения в литературе не описаны. Цель изобретения - разработка доступного способа получения циклических эфироамидов фосфорной кислоты общей формулы I. Поста&ленная цель достигается предпаг амЕШ способом получения оптически активных производных оксазафосфорина формулы I, заключающимся в том, что оптически активный аминоспирт общей формулы к-сн-к I ЙН П
где R - фенил; R - низший алкил или фенилзамещенный низший алкил, подвергают взаимодействию с хлорокисью фосфора при температуре от минус 70 до плюс 50°С.
Процесс ведут в среде инертного органического растворителя - насыщенного углеводорода, галоидированного алифатического углеводорода, ароматического углеводорода или простого эфира, предпочтительно в присутствии основного соединения - третичного амина или неорганического основного соединения - безводного карбоната калия или натрия.
В реакции соединения общей формулы ГГ с хлорокисью фосфора соотношение обоих применяемых соединений не ограничено и может быть выбрано в широком диапазоне. Обычно применяют соотнсяяение, по меньшей мере, 1 моль последнего соединения на 3 моль первого соединения, предпочтительно 1 моль последнего на 1,5 моль первого. Реакция может быть осуществлена или в присутствии растворителя или без него. В качестве последнего может .быть применен любой известный растворитель, не оказывающий негативного действия на ход реакции, например, галогенуглеводород (метиленхлорид, хлороформ или 1,2-дихлорэтан) , ароматический углеводород, например бензол, толуол или ксилол, простой эфир, например диметиловый, диэтиловый или изопропиловый эфир, тетрагидрофуран, диоксан, 1,2-диметоксиэтан, диглим, триглим и т.п., насыщенный углеводород, например н-гептан, н-гексан, циклогексан, изооктан и т.п.
Предпочтительно реакцию осуществляют в присутствии соединения основного характера, но она может проходить и без него. В качестве основного соединения может быть применено любое из известных, не оказывающее на ход реакции негативного действия, предпочтительно третичный амин, например триэтиламин, триизопропиламин, N N-диметиланйлин, пиридин, или хинолин, неорганические соединения основного характера, на- пример безводные карбонаты калия, натрия. Количество основного соединения не ограничено и может быть выбрано в широком диапазоне. Обычно применяют 2-5 моль, предпочтительно 2-3 моль основного соединения на 1 моль соединения общей формулы 1Г. Реакцию проводят при температуре от -70 до +50°С за период от 10 мин до 10 ч.
Полученное таким образом соединение общей формулы I может быть легко выделено и очищено перекристаллизацией..
Так как в молекуле соединения общей формулы Т содержится один
асимметричный атом фосфора и один асимметричный атом углерода, то оно включает производное R,R-oKca3aфосфорина, производное R-S-оксазафосфорина, производное S-R- оксазафосфорина и производное S-S-оксазафосфорина. Символы R и S, стоящие первыми,показывают абсолютную конфигурацию асимметричного атома фосфора, а символы, стоящие на втором месте - абсолютную конфигурацию асимметричного атома углерода.
Если в качестве исходного вещества из 1соединений общей формулы: TI выбран R-аминоспирт, т© из соединеНИИ общей формулы Г могут быть получены только производные R-R-оксазафосфорина и S-R-оксазафосфорина,
, причем одно из них образуется селективно в больших количествах (в общем случае 60% или более,., обычно 80% или более), чем другое. Если же в качестве исходного вещества из соединений общей формулы II выбран Sаминоспирт, то из соединений общей i формулы I могут быть получены только производные R-S-оксазафосфорина и S-S-оксазафосфорина, причем одноиз них образуется в больших количествах (как правило, 60% или более, обычно 80% или более), чем другое. Это отражено в примерах.
Конфигурация асимметричного атома фосфора может быть изменена на обратную при пбмощи реакции типа SN,. ( молекулярное нуклеофильное замещение путем взаимодействия соединения . общей формулы Г с нуклеофильным реагентом (например, азид-ионом, цианидионом, п-нитрофеноксиионом, п-нитротиофеноксиионом или т.п.), который может быть легко уходящей группой в реакции по. схеме
R ca-ff
R-CH-fl
а
I уО -г
/N-P
О
0 1
Г
Ч/о
в которой NU - азидная, цианидная, п-нитрофеноксидная или п-нитротио|)еноксидная группы, а R и R имеют; дриведэнные значения.
В реакции замещения типа SN (реакция инверсии) отношение количества соединения общей формулы Г к количеству соединения нуклеофильного реагента не ограничено и может быть выбрано в широком диапазоне. Применяют 1-5 моль нуклеофильного реагента, предпочтительно 1-2 моль последнего на 1 моль соединения общей формулы I.
о Реакция замещения типа SNj может быть успешно осуществлена путем применения спирта, например метанола, этанола, пропанола, бутанола и т.п., эфирного растворителя, например.
5 диоксана,тетрагидрофурана,1,2-диометоксиэтана,диглима,триглима и т.п. апротонного полярного растворителя например диметилформамида, диметилацетамида, диметилсульфоксида, N-Me тилпирролидона, гексаметилфосфорилтриамида.и т.п.Обычно реакцию прово дят при температуре от -30 до предпочтительно от -10 до 100°С.Реакция заканчивается обычно за перио от 30 мин до приблизительно 30 ч. Производное оксазафосфорина обще формулы Г может быть введено в опти чески активный диклофосфорамид обще формулы VI, как показано в следующе реакционной схеме Р-СН-R I(У ШССНа СНг ОЯ; Щ О. г. R-СЯ-R : J. ЩСН,,СН20Л)г Г1-0 D гч/в )(.op«p;- L..4 -7- Гидрогено из 0 -iiKCHjCH as) в реакции соединения общей форму I с диэтаноламином соотношение обои применяемых соединений не ограничен и может быть выбрано в широком диап зоне. Обычно применяют 1-10 моль, предпочтительно 1-5 моль диэтанолам на на 1 моль соединения формулы 1. Реакцию осуществляют в присутствии растворителя или без него, в качест ве растворителей можно использовать воду, спирты, например метанол, этанол, пропанол, бутанол, и т.п., галогенуглёводороды, например метил хлорид, хлороформ, 1,2-дихлорэтан, и т.п., эфирные растворители, напри мер диэтиловый эфир, тетрагидрофуран, диоксан,- 1,2-диметоксиэтан, диглим, триглим, апротонные полярные растворители, например диметилформамид, диметилацетамид, диметилсульфс ксид, N-мётилпирролидон, гекса метилфосфорилтриамид, и т.п. Реакция может быть осуществлена в присутстви соединения основного характера в реакционной системе или без него. В качестве примеров соединений основного характера могут быть использованы третичные амины, например, диэтиламин или N, N-диметиланилин. Реакция может быть проведена при Температуре от комнатной до., предпочтительно - от комнатной до . Обычно реакция заканчивается за период от 30 мин до 10 ч. Хлорирование соединения общей формулы IV осуществляют при помощи обычной реакции хлорирования путем применения в качестве хлорирующих агентов тионилхлорида, трихлорида фосфора, хлорангидрида фосфорной кислоты, пентахлорида фосфора, соляной кислоты, смеси соляной кислоты и хлорида цинка, соляной кислоты, смеси соляной кислоты с ексаметилфосфорамидом, три фенилфосфорина с четыреххлористым углеродом, трифенилфосфордихлорида или рисдиметиламинфосфина с четыреххлористым углеродом. Количество применяемого хлорирующего агента может быть от 1 моль ,до избыточного; предпочтительно от 1 до 5 моль на 1 моль соединения общей формулы IV. В качестве растворителей для этой реакции могут быть применены обычные растворители, например галогенуглеводороды (хлороформ, метиленхлорид, 1,2-дихлорцетон), эфирные растворители, наприме| диэтиловый эфир, тетрагидрофуран, диоксан, 1,3-диметоксиэтан, диглим, триглим. Реакция может, быть проведена при температуре, от комнатной до , предпочтительно - от комнатной до 50°С. Реакция заканчивается за период приблизительно от 30 мин до б ч. Гидрогенолиз соединения общей формулы V осуществляют путем применения катализатора, например палладия . на угле, палладиевой черни, родиевого катализатора, никеля Ренея, и т.п. ,в условиях каталитического гидрирования, которое может быть осуществлено в растворителе, например в воде, метаноле или этаноле, при температуре от комнатной до , предпочтительно от комнатной до 60°С. Обычно реакция заканчивается за период . от 30 мин до приблизительно 30 ч, предпочтительно от 30 мин до 20 ч. Давление газообразного водорода под-. держивают обычно на уровне от атмос-; ферного до 150 атм, предпочтительно I от атмосферного до 100 атм. По окон-: чании реакции полученный таким образом циклофосфамид общей формулы VI отделяют от реакционной смеси фильтрованием для удаления нерастворимых веществ, и растворитель отгоняют с целью получения продукта и перекристаллизации его из подходящего растворителя, выбранного из группы, состоящей из эфира,смеси эфир - гексан, изопропилового эфира, смесей бензол гексан, четыреххлористый углерод гексан, бензол - изооктан и т.п. Полученный таким образом циклофосфаМИД общей формулы VI содержит (S)-{-J,-циклофосфамид и (R)-(+)-циклофосфамид.(S)-(-)-циклофосфамид известен как соединение, обладающее замечательной фармакологической активность по сравнению с (R)-(+)-циклофосфамидом.
При правильном осуществлении реакций можно получить S-(-)-циклофосфамид из оптически активного оксазафосфорина общей формулы I. Так, S-(-)-циклофосфамид может быть получен любым из следующих способов.
1.Соединение формы S-S общей формулы Г превращают путем применени реакции типа SNj (бимолекулярное нуклеофильное замещение) в соединени общей формулы г , затем приводят
его во взаимодействие с этаноламиноф общей формулы ГГГ, с целью получения соединения формы R-S общей формулы
IV,Затем соединение формы R-S общей формулы IV хлорируют для получения соединения формы R-S общей формулы
V,после чего его подвергают гидрогенолизу для.получения 3-{-)-циклрфосфамида.
2.Соединение формы R-S общей формулы Т сначёша приводят во взаимодействие с этаноламином общей формул
1ГГ с целью получения соединения формы R-S общей формулы IV, затем его хлорируют с целью получения соединения формы R-S общей формулы V, которое гидрогенолизуют для получения S-(-)-циклофосфамида.
3.Соединение формы R-R общей формулы I приводят во взаимодействие с этаноламином общей .формулы 1ГГ с целью получения соединения формы R-R общей формулы IV, затем его хлорируют для получения соединений формы R-R общей формулы V, которое гидрогенолизуют для получения S-(-)-дикло,фосфамида.
4.Соединение формы S-R общей формулы Г превращают при помощи реакции
типaSN2 (бимолекулярное нуклеофильт вое замещение) в соединение общей формулы г , которое приводят во взаимодействие с этаноламином общей формулы Г11 с целью получения соединения формы R-R общей формулы IV, гидролизуемого затем для получения 8-(-)-циклофосфамида.
Кроме того, R-(+)-циклофосфамид может быть получен из оптически активного производного оксазафосфорина общей формулы 1, полученного по предлагаемому способу. Так, R-(+)-цrfkлoфocфaмид может быть получен по любому из способов 5 - 8.
5.Соединение формы R--R общей формулы Т превращают в соединение общей формулы г путем применения реакции типа БЫл (бимолекулярное нуклеофильное замещение), затем его приводят во взаимодействие с этаноламином общей формулы ТГГ с целью получения соединения формы S-R общей
формулы IV, потом хлорируют с целью получения соединения формы S-R общей формулы V и подвергают гидрогенолизу для получения R-(+)-циклофосфамида.
6.Соединение формы S-R общей формулы Г сначала приводят во взаимодействие с этаноламином-общей формуы III с целью получения соединения формы S-R общей формулы 1У, которое затем хлорируют для получения соединения формы S-R общей формулы V, ко-торое подвергают гидрогенолизу для получения R-(+)-циклофосфамида.
7.Соединение формы S-S общей формулы 1 приводят во взаимодействие
с этаноламином общей формулы III с целью получения соединения формы S-S общей формулы IV, которое затем хло-рируют для получения соединения формы S-S общей формулы V. Последнее соединение гидрируют для получения R-(+)-циклофосфамида.
8.Соединение формы R-S общей формулы Г превращают в соединение общей формулы г при помощи реакции типа SN (бимолекулярное нуклеофильное замещение), затем его приводят во взаимодействие с этаноламином общей формулы 111 с целью ; получения; соединения формы S-S общей формулы IV, которое гидрогенизуют для получения R-(+)-циклофосфамида.
Как указано выше, R-(+)-циклофосфамид может быть получен из любого из соединений общей формулы I.
S-(-)-циклофосфамид оказывает лучшее противоопухолевое действие по отношению к опухоли РСб, чем R-(+)-циклофосфамид и рацемическая форма циклофосфамида по отношению к опухолям hl210 и Р388 (у мышей). Однако при испытании противоопухолевого действия по отношению к опухоли hl210, которая является другим типом опухоли, R-(+)-циклофосфамид проявляет лучшее противоопухолевое действие, чем S-(-)-циклофосфамид и рацемическая форма циклофосфамида. Кроме того, R-(+)-циклофосфамид проявляет меньшую острую токсичность (у мышей), чем S-(-)-циклофосфамид и р&цемическая форма циклофосфамида. Эти факты показывают, что R-(+)-циклофосфамид и S-(-)-циклофосфамид обладеиот лучше ;терапевтической эффективнос- ью, чем рацемическая форма циклофосфамида (в зависимости от типа опухоли).
При введении любого из R-(+)- и S-(-)-циклофосфамида можно ожидать замечательной противоопухолевой активности с меньшими побочными явлениями, чем при применении рацемической формы циклофосфамида.
Методика определения противоопуолевой активности.
Лимфоцитно-лейкемическую опухЪль идкого типа Р388 трансплантируют (1x10 клеток) в брюшную полость
.влшей-самцов BDF живым весом около 20 г. Активность оценивают по методу IhS (увеличение продолжительности жизни).
Аналогичным образом лимфоцитнолейкемическую опухоль твердого типа Р388 трансплантируют (1x1 О клеток) подкожно в область спины мышей-самцов BDF живым весом около 22 г. Мышей убивают через 10-11 сут после трансплантации, и подавляющее действие на разрастание опухоли оценивают путем определения ее веса.
Лимфоидно-лейкемическую опухоль твердого типа 141210 трансплантируют (1x10 клеток) в подкожную область спины мышей-самцов BDF живым весом
Испытание на опухоли Ь 121-0
приблизительно 22 г. Мышей убивают через 10-11 сут после трансплантации и подавляющее действие на разрастание опухоли оценивают путем определения её веса .
,
По 5, 10, 20, 50, 100 мг ипытуемйх-соединений растворяют в физиологическом растворе хлорида натрия ,(концентрация 5 мг/кг) и вводят интраперитонально (ЭР) или орально (РО)..
0 Длясравнения применяют физлологи- . ческий раствор хлорида натрия кон- : центрацией 5 мг/кг.
Полученные результаты представлены 5 в табл. 1 и 2.
Таблица
R- ( + )-Циклофосфамид
S-(-)-Циклофосфамид
Рацемическая форма Испытание на опухоли Р388
R-(+)-ЦиклофосфамидIP50,824,3
S-(-)-ЦиклофосфамидIP26,314,6
Рацемическая форма
циклофосфамидаIP- 39,71-69
Испытание острой токсичности.
Ниже приведены значения UDjorмг/кг (BDF мыши-самцы, IP) для R-(+;-циклофосфамида, S-(-)-циклофосфамида и рацемической формы циклофосфамида. Испытуемое соединение Юдо.мг/кг
R-(+)-Циклофосфамид 550
S-(-)-Циклофосфамид 330
Рацемическая форма
циклофосфамида 440
Пример 1. 100 МП эфирного раствора, содержащего 7,8 хлорокиси фосфора, охлаждают льдом и к нему при перемешивании добавляют раствор, полученный путем растворения 8,96 г 3-(-)-Ы-(3-оксипропил)-о1-фе24 32 29
76 104
95
44 143
Таблица
5Q нилэтиламина и 10,3 г триэтиламина в 50 мл эфира. Реакцию продолжают при той же температуре в течение 1 ч, затем отделяют нерастворившийся хлористоводородный триэтиламин фильтрованием. Полученный фильтрат
55 упаривают досуха при пониженном давлении и получают 11 г смеси, состоящей из 2 (S)-3 (3)-е1-фенилэтил тетрагидро-2-хлор-2Н-1,3,2-оксазафосфорин-2-оксйда и 2 (R)-3-(3)-с1-фенил60этил тетрагидро-2-хл6р-2Н-1,3,2-оксазафосфорин-2-оксида в виде бесцветных кристаллов. При помощи ЯМРспектра установлено, что соотношение в смеси первого компонента ко
65 второму составляет 8:1. Указанную смесь перекристаллизовывают из смейи эфир - гексан и получают 8 г 2(3)-3-Пз)-А-фенилэтил тетрагидро-2-хлор-2Н-1,3,2-оксазафосфорин-2-оксида в виде бесцветных игярподобных кристаллов. Т.пл. П5 WD + 51,5(с 8,2, этанол). Элементный анализ: Найдено,%: С 51,08; Н 5,80; N 5,18; се 13,72; Р 11,85. C H 5-CENO/j.P Вычислено, %: С 50,88-; Н 5,82; N 5,40; СР 13,65; Р 11,93. Маточный pacTBOD, полученный упомянутой перекристаллизации упаривают и перекристаллизовывают из изопропилового эфира. Получают 1,2 2 (R)-3- (S)-с(.-фенилэтил -тётрагидр -2-ХЛОР-2Н-1,3,2-оксазафосфорин-2-оксида в виде бесцветных призмати ческих кристаллов. Т.пл. 69-71 С. Mj, - 61,4 (с 3,01у этанол) . Элементный анализ: Найдено,%: С 51,00; Н 5,72; N 5,38; СЕ 13,68;. 11,90. (устодр Вычислено,%: С 50,88; Н 5,82; N 5,40; се 13,65; Р 11,93. Пример 2. 8,96 г (R)-(+)-N- (3-оксипропил)-с1л-фенил-1Ь- (4-мети фенил)-этиламина, 7,8 г хлорокиси фосфора и 10,3 г триэтиламина прим няют по методике, описанной в прим ре 1, и получают 7,9 г 2(R)-3- Г(К -с1--фенилэтил тетрагидро-2-хлор-2Н-1,3,2-оксазафосфорин-2-оксида в виде бесцветных игольчатых кристал лов . Т.пл. 71-73°С. rd: - 51,6 (с 8,5, этанол). Элементный анализ: Найдено,%: С 50,98; Н 5,76; .N 5,45; се 13,68; Р 11,95. 5-CENOiP Вычислено,%: С 50,88; Н 5,82; N 5,-40; сг 13,65; Р11,93. По методике описанной в примере 1, получают i,,4 г 2 (S)-3- Г(К)-Л-фе нилэтил тетрагидро-2-хлор-2Н-1,3,2 -оксазафосфорин-2-оксида в виде бе цветных призматических кристаллов из маточного раствора, полученного п6ал е перекристаллизации.Т.пл.69-7 + 61,6 (с 6,83, этанол) . Элементный анализ: Найдено,%: С 51,01; Н 5,75; N 5,36; СВ 13,69; Р 11,91. I &1числено,%: С 50,88; Н 5,82; N 5,40; се 13,65; Р 11,93. Пример 3. 20 мл раствора хлористого метилена, содержащего 1,6 г хлорокиси фосфора, охлаждают льдом и при перемешивании к нему, прибавляют раствор, приготовленный путем растворения 1,8 г (S)-(-)-N- (3-оксипропил) -oL-фенилэтиламина и 2,1 г триэтиламина в 10 мл хлорист го метилена. Реакцию ведут в течение 30 мин при 40-50с, после чего удаляют гидрохлорид триэтиламина путем отфильтровывания. Полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении, упаривая его досуха, для получения 2,1 г смеси, состоящей из 2(S)-3- (S)-oL-фeнилэтилJ-тeтpaгидро-2-хлЬр-2Н-1,3,2-оксазафосфорин-2-оксида и 2(R)-3- (5)-(1--фенилэтил)-тетрагидро-2-хлор-2Н-1,3,2-оксазафосфорин-2-оксида в форме бесцветных кристаллов. Полученную смесь определяют при помощи спектра ЯМР и устанавливают, что отношение первого соединения ко второму составляет 8:2. Указанную смесь перекристаллизовывают из простого гексанового эфира для получения 1,5 г 2-оксида-2- (S) -З-Л-фенилэтил -тетрагидро-2-ХЛОР-2Н-1, 3,,2-оксазафосфорина в форме бесцветных игольчатых кристаллов. Т.пл. 71 - 73°С. rci.|f 51,7 (с 9,1, этанол) . Маточный раствор, полученный при перекристаллизации, после этого концентрируют и перекристаллизовывают из изопропилового простого эфира для получения 0,1 г 2-оксида-2-(R)-3- Г(3) -с(.-фенилэтилЗ -тетрагидро-2-хлор-2Н-1,3,2-оксазафосфорина в форме бесцветных призматических кристаллов. Т.пл. 69 - . - 61,2 (с 3,1, этанол). Пример 4. 50 мл раствора в циклогексане, содержащем 3,9 г хлорокиси фосфора, охлаждают льдом, к нему при перемешивании прибавляют раствор, приготовленный, растворением 4,5 г (S)-{-)-N-3-(3-оксипропил)-(i.-фенилэтиламина и 10,3 г триэтиламина в 25 мл циклогексана. Реакцию продолжают вести при той же температуре в течение 1 ч..После завершения реакции растворитель удаляют из реакционной Смеси путем отгонки при пониженном давлении, доводя смесь досуха. Полученный при этом остаток растворяют в 100 мл диэтилового эфира и эфирный слой промывают водой, сушат при помощи безводного сульфата натрия и фильтруют. Полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении досуха и получают 5,1 г смеси, состоящей из 2 (S)- (S)-oL-фeнилэтил -тeтpaгидpo-2-xлop-2H-l,3,2-oкcaзaфocфopин-2-oкcидa и .2 (R)-3-(S)-(i-фeнил)-тетрагидро-2-хлор-2Н-1, 3,2-оксазафосфорин-2-оксида в форме бесцветных кристаллов. Полученную.смесь определяют по спектру ЯМР и узнают, что отношение первого соединения ко второму.составляет 8:1. Указанную смесь перекристаллиэовывают из простого гексанового эфира для получения 3,7 г 2-оксида 2(8)- -3- Г(5)-с1-фенйлэтил}тетрагидро-2-ХЛОР-2Н-1,3,2-оксазафосфорина в форме бесцветных игольчатых кристал лов. Т. пл. 71 - . Cd-J + 51, (с 8,5, этанол). Полученный маточный раствор посл проведения перекристаллизации концентрируют и перекристаллизовывают из простого изопропилового эфира для получения 0,5 г 2-оксида-2-(R)-3- Г(3)-а1-фенилэтил -2-ХЛОР-2Н-1,3,2-оксазафосфорина в форме бесцветных призматических кристаллов. Т. пл. 69 - 71°С Го1 - 61,6 ( с 3,2, этанол) Пример 5. 50NUi раствора в диэтиловом эфире, содержащем 3/9 г хлорокиси фосфора, охлаждают льдом и при перемешивании к нему прибавляют pacfBOp, приготовленный растворением 4,5 г (S)-(-)-N-(3 -оксипропил)-i-фенилэтиламина и 9,3 пиридина в 25 мл простого диэтилово го эфира. Реакцию продолжают вести при той же температуре в течение 1 после чего нерастворимый, гидрохлорид пиридина отфильтровывают. Полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении досуха для полу ения 5,7 г смеси, состоящей из 2 (S)-3- HS) -d-фенилэтил -тетрагидр -2-ХЛОР-2Н-1, 3,2-оксазафосфорин-2-оксида и 2(R)-3-C(S) «i- -фенил-г этил -тетрагидро-2-хлор-2Н-1,3,2-оксазафосфорин-2-оксида в форме бесцветных кристаллов. Полученную смесь определяют методом ЯМР и уста навливают, что отношение первого соединения ко второму составляет 8 Указанную смесь перекристаллизов вают из простого гексаного эфира для получения 3,8 г 2-оксида-2(S)-3 - C(S) -о(,-фенилэтил -тетрагидро-2-хло -2Н-1,3,2-оксазафосфорина в формебесцветных игольчатых кристаллов. Т.пл. 71-73°С. + 51,7 (с 8,5, этанол). Полученный при описанной перекри таллизации маточный раствор концент рируют и перекристаллизовывают из простого изопропилового эфира для п лучения 0,5 г 2-оксида-2-(К)-3- (S) -о1.-фенилэтил -тетрагидро-2-хлор-2Н-1,3,2-оксазафосфорина в форме бесцветных призматических кристаллов. Т. пл. 69 - 71° С. С«А. - 61,8° (с 3,0, эт,анол) Пример 6. 100 мл раствора в диэтиловом эфире, содержащего 3,9 хлорокиси фосфора, охлаждают льдом и прч-. перемешивании к нему прибавляю .раствор, приготовленный растворением 4,5 г (8)-(-)-ы-(3-оксипропил)-с1-фенилэтиламина и 5,4 г безводного карбоната калия. Реакцию продолжают вести при той же температуре в течение 1. ч, после чего нерастворимые ве щества удаляют отфильтровыванием. Полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении досуха для получения 5,3 г смеси, состоящей из 2 (S)-3- (8)- 1-фенилэтил} -тетрагидро-2-ХЛОР-2Н-1, 3,2-оксазафосфор;ин-2-оксида и 2 (R)-3-(S)- i-фeнилэтилJ-тeтpaгидpo-2-xлop-2H-l , 3,2-оксазафосфорин-2-оксида, в форме бесцветных кристаллов. ЯМР-спектр полученной смеси показывает, что отношение первого соединения ко второму составляет 8:1. Указанную смесь перекристаллизовывают из простого гексанового эфира для получения 3,8 г 2-оксида-2(S)-3-(8)Ы-фенилэтил -тетрагидро-2-хлор-2Н-1,3,2-оксазафосфорина в форме бесцветных игольчатых кристаллов. Т. пл. 71 - 73С. UoL +51, 4° (с 8,1, этанол) . . Полученный при перекристаллизации маточный раствор после этого концентрируют и перекристаллизовывают из простого изопропилового эфира для получения 0,5 г 2-оксида-2 (R)-3-(S)-dL-фeнилэтилJтeтpaгидpo-2-xлop-2H-l, 3,2-оксазафосфорина в форме бесцветных призматических кристаллов. Т.пл. 69 - 71°С. а. - 61,6 (с 3,4, этанол). Пример 7. 7,7 г хлорокиси фосфора растворяют в 100 мл толуола и охлаждают льдом, после чего к этому раствору прибавляют при перемешивании по каплям раствор 27 г R-(+)-N-(3-оксипропил) -(1-фенилэтиламина в 100 МП толуола. Реакцию продолжают вести при той же температуре в течение 30 мин . Реакционную смесь после Ьтого промывают 10%-ной соляной кислотой, затем водой и сушат над безводным сульфатом магния. Толуол удаляют из полученной реакционной смеси путем отгонки при пониженном давлении для получения 6,4 г смеси, состоящей из 2(R)-3-QR) -с1-фенилэтил -тетрагидро-2-хлор-2Н-1,3,2-оксазафосфорин-2-оксида и 2 (S) -3- KR) -с1-фенилэтил -тетрагидро-2-хлор-2Н-1,3,2-оксазафосфорин-2-оксида. Полученную смесь перекристаллизовывают из диэтилгексанового простого эфира для получения 5,1 г первого соединения в форме бесцветных игольчатых кристаллов. Т.пл. 71-73°С. , - 51,5° (с 8,0, этанол). Маточный раствор, полученный после перекристаллизации, очищают колоночной хроматографией на силикагеле. В качестве элюента используют смесь бензол - хлоро форм - ацетон 50:5:1). Получают 200 мг кристаллов первого и 700 мг второго соединения в,форме призматических кристаллов. Т. пл. 69 - 71°С. Гс). + (с 6,51, этанол). Пример 8. 18,3 г хлорокиси фосфораохлаждают примерно до -40 в бане со смесью сухой лед ацетон, после чего на затвердевшую хлорокись фосфора льют- по каплям пр перемешивании стеклянной палочкой раствор 26,9 г R-(+)-N - (3-оксипро пил)- 1-фенилэтиламина в 56 мл триэтиламина. Полученную смолообразную смесь перемешивают при 5 - в течение 30 мин, после чего к смеси прибавляют 200 мл воды для разло жения непрореагировавшей хлорокиси фосфора и экстрагируют толуолом. То луольный слой промывают 10%-ной соляной кислотой (водный раствор), во дой, насьпценным водным раствором бикарбоната натрия в указанной посл довательности, затем его отделяют и сушат над безводным сульфатом маг ния.. После этого толуол удаляют отгонкой и получают 36 г темно-пурпур но-коричневогд маслянистого продукта, который очищают колЬнрчной хроматографией на силикагеле. В качест ве элюента используют смесь бензол хлороформ - ацетон (50:5:1). Получаю 2,7 г 2гоксида-2 (S)-3- (R)-aL-фенилэтилЗ-тетрагидр6-2-хлор-2Н-1,3,2-оксазафосфорина в форме бесцветных призматических кристаллов. Т.пл. 69 - 71°С. + 61,5° (с 8,7, этанол). Затем выделяют 18,9 г 2-оксида-2 (R) -3- C(R) -Н1 Фенилэтил -тетрагидРО-2-ХЛОР-2Н-1,3,2-оксазафосфорина в форме бесцветных игольчатых кристаллов. Т. пл. 71 - 73°С. - 51,7 (с 8,5, этанол). Элементный анализ: Найдено,%: С 51,01; Н 5,75; |N 5,36; се 13,69; Р 11,91. C.HijCENOjP Вычислено, %: С 50,88; Н 5,82.;. N 5,40; се 13,65; Р 11,93. Пример 9. Получение циклофосфамида. . . а) 3,5 г 2 (S)-3- Г(S)-aL-фGнилэтилJ тeтpaгидpo-2-xлop-2.Ч-l , 3,2-оксазафосфорин 2-оксида растворяют в 35 мл диоксана. Затем добавляют 3 г диэтаноламина и нагревают с обратным холодильником в течение 2,5 ч. После отгонки диоксана при пониженном давлении полученный остаток растворяют в метиленхлориде и раствор, промывают 15%-ным водным раствором соляной кислоты в насьпденйом водном растворе хлорида натрия. Органический слой отделяют, сушат над безводным сульфатом магния и фильтруют. Полученный образом фильтрат выпаривают досуха при пониженном давлении. Полученные кристаллы кристаллизуют из этилацетата и получают 3,2. г 2(5)-Z-fSwe (2-оксиэтил) (S)-A-фенилэтил тетрагидро-2Н-1,3,2-оксазафосфорин-2-оксида в виде бесцветных пластинчатых кристаллов. Т.пл. 104 - ЮбС. Гв13| - 55,2° (с 6,54, этанол). Элементный анализ: Найдено,%: С 55,18; Н 7,53; N 8,42; Р 9,38. Вычислено,%: С 54,87; Н 7,67; N 8,53; Р 9,41. в) 3 г тионилхлорида растворяют в 10 мл хлороформа и добавляют по каплям раствор, содержащий 3 г 2(3)-2-Г5ис - (2-оксиэтиламин) -3- Г(8)-ot-фенилэтил Гтетрагидро-2н-1,3,2-оксазафосфорин-2-оксида, полученного выше, при перемешивании при комнатной температуре, затем нагревают с обратным холодильником в течение 1 ч. После охлаждения реакционной смеси хлороформный слой промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и водой. Затем хлороформный слой сушат над безводным сульфатом магния и фильтруют. Полученный фильтрат упаривают при пониженном давлении и получают 3,1 г 2-.(S) (2-хлорэтил) aминJ-3 (3)-й1-фенилэтил}тетраГИДРО-2Н-1,3,2-оксазафосфорин-2-оксида в виде бесцветного маслянистого вещества. tcL - 62,4° (с 5,7, бензол). с) -7,3 г 2 (8)-2-Г5иь (2-хлорэтил)-амин -3- (S)-с -фенилэтил2тетрагидро2Н-1, 3,2-оксазафосфорин-2-оксида растворяют в 100 мл этанола и каталитически восстанавливают в присутствии 800 мг 10%-ного палладия на угле при давлении водорода 20 атм и температуре 40-45°С. По окончании реакции нерастворимые вещества отделяют фильтрованием, фильтрат упаривают при пониженном давлении и получают 4,6 г неочищенных кристашлов R-(+)-циклофосфамида. Для получения очищенного вещества его перекристаллизуют из смеси бензол - гексан. 1 + 2, (с 12,5, метанол). ИК-спектр и ЯМР-спектр этого соединения совершенно такие же, как у образцов, полученных ранее. При испытании смешанного образца понижение точки плавления не наблюдается . Примерю. а) 3,5 г 2(R)-3- (R)- i-фeнилэтил тетрагидро-2-хлор-2Н-1,3,2-оксазафосфорин-2-оксида, полученного в примере 9, подвергают взаимодействию с диэтаноламином, как описано в примере 9, и получают 3,1 г 2 (К)-2-Г5ис (2-оксиэтил) (R)-eL-фенилэтил (тетрагидро-2Н-1, 3,2-оксазафосфорин-2-оксида в виде бесцветных пластинчатых кристаллов. Т. пл. 104 - 106С. Го.: + 56,1 (с 6,23, этанол). Элементный анализ: Найдено,%: С 55,15; Н 7,56; N 8,43; Р 9,39. C 5Ha5Na04P Вычислено,: С 54,87; Н 7,67; 8,53; Р 9,41. .
в) 3,0 г 2(R) (2-оксиэтил)-амин -3- (Е)-с1-фенилэтил тетра-J ГИДРО-2Н-1,3,2-оксазафосфорин-2-оксида, полученного в примере 9 а, приводят во взаимодействие с 3 г тионилхлорида по способу, описанному в примере 9 в, и .получают 3,2 г 2 (К)-2-Г5ис (2-хлорэтил) амик -3- QR)фенилэтил-3-тетрагидро-2Н-1,3,2-оксаэафосфорин-2-оксида в виде маслянистого вещества.
U3|5 + 63,4 ° (с 5,6 бензол) .
с) 7,3 г 2(К)-2-Г5мс(2-хлорэтил)амин -3-t(R)-(i-фeнилэтилJтeтpa.2H-l, 3,2-оксазафосфорин-2-оксида, полученного в примере 9 в, каталитически восстанавливают по способу, описанному в примере 9 с, и получают 4,5 г (8)-циклофосфамида в виде бесцветных призматических кристаллов Т .пл. 65-66,..
ГАЗ -2,08 (,5, бензол).
ИК-спектр и ЯМР-спек,тр этого соединения совершенно такие же, как у образца, полученного ранее. При испытании смешанного образца понижения температуры плавления не наблюдалось Формула изобретения
flf-СН-R ,х«.
N,
где к - фенил; R - низший ал кил или фенилзамещенный низший алкил, заключающийся в том, что оптически активный аминоспирт общей формулы 11
-СНR
R
I .
да
хЛН
где R и R имеют указанные значения, подвергают взаимодействию с хлор,окисью фосфора при температуре от минус 70 до плюс .
5
Источники информации, 0; принятые во внимание при экспертизе
