1
изобретение относится к способу получения нового вещества - меченно- . го тритием в поло лении 2,8 инозина С(2,8-Hj)-инозин, который находит применение в биохимии, молекулярной биологии и медицине.
Известен (8-Зп)-инозин, который получают путем дезаминирования (8-н)-аденозина нитритом натрия в уксусной кислоте при молярно;- соотношении компонентов 1:7-7:14, реакционная смесь выдерживается в течение суток при комнатной температуре. Целевой продукт из реакционной смеси выделяют путем его ацилирования уксуснЕлм ангидридом в пиридине, экстракцией ацетильного производного хлороформом, перекристаллизацией ацетильного производного из этанола в присутствии угля, снятием ацетильной защиты метанольным раствором аммиака и перекристаллизацией из водного спирта. Получают ()-инозин с удельной активностью 0,483 Ки/ммоль, выход 42% 1.
Недостатками известного способа являются невысокая удельная активность получаемого меченного инозина, ограничивающая сферу его применения, относительно низкий выход целевсэго
продукта и длительность проведения процесса. Основной причинои низкого выхода реакции является неполнота превращения исходного реагента,обусловленная указанньм выбором соотношения исходных компонентов.
Цель изобретения - получение нового вещества - 2 , 8-Н2 Инозина с высокой удельной активностью
10 (40 Ки/гшоль) и выходом, достигающим около 90%.
Поставленная цель достигается способом получения 2,8- Н2 -инозина,заключающимся в том, что 2,8-Н2 15 -аденозин подвергают действию нитрита натрия, и уксусной кислоты при молярном соотношении 2,8-Н2 -аденозин. - нитрит натрия - уксусная кислота, равном 1: (100-110): (125-135), и
20 выделение целевого продукта осуществляют колоночной хроматографией на ионообменном сорбенте в Н -форме при элюировании водой.
25 П р и м е р. 35 ил раствора
2,8- Нд -аденозина с удельной активностью 43 Ки/мг эль в 50%-ном (по объему) водном этаноле с радиоактивной концентрацией 4,9 мКи/мл упаривают досуха в вакууме ротационного испарителя при 30-40С. Остаток 170 мКи, 4,1 мкмоль, 1,1 мг) 2,8-Н2 -аденозина растворяют в 0,2 мл поды, добавляют 0,03 мл (j30 мкмоль) ледяной уксусной кислоты, а затем вносят в один прием 30 мг (430 мкмоль) нитрита натрия.Ре акционную смесь (молярное соотношение 1:105:130) перемешивают, оставля ют на 24 ч при комнатной температуре далее добавляют 1 мл воды. Для отделения от непрореагировавшего 2 , З- Н З-аденозина и солей реак ционную смесь наносят на колонку мм с сефадексом SE С 25 в Н -форме и элюируют водой со скоростью 30-40 лл/ч. После выхода соле (фракция 6-12 г-ш) элюируется f 2, 8- Hj -инозин (фракция 14-25 мл.). Выход 2,8- Н2J-инозина составляет 90%, считая на исходный 12,, -аденозин. Удельная активность полученного , -ннозина соответствует удельной активности исходного f 2, 8-ИдЗ-аденозина. Характеристика УФ-споктра поглощения при рН 7 (HjO) ; Я макс 248 нм; 1,69/ 02во/ 26о 0,26; при рН 12 kO,01 H.NaOH) Д,д,д(, 253 нм; 02во/02(.о 1,08; 0200/0260 0,18. .I jBecTHue данные: при рП 7 Л- мак:с 1,7з; о 248 нм; О. 0,24/ при рН 12 Лулакс 253 им; °2Уа/2бо IOS; 1)гво/02бо 0,18. -Для хранения элюат, содержащий , 8--Нг.З-иноэин, разбавляют 50%-ным (по объему) водным этанолом до радиоактивной концентрации 1-5 мКи/мп. Радиохимическая чистота препарата не ниже 95%. Хроматогрзфированиё проводилось на бумаге Ватман 3 в сис.теме иэопропиловый спирт-вода-аммиак (75:25:5) Формула изобретения Способ получения Г2,8- Н2 2-ино.5ина, отличающийся тем, что 2, .3-аденозин подвергают действию нитрита натрия и уксусной кислоты при молярном соотношении f2,В--Н23-аденозин - нитрит натрия уксусная кислота, равном 1:(100110):(125-135), с последующим выделением целевого продукта колоночной хроматографией на ионообменном сорбенте в Н -форме при элюировании водой. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Вдовенко В.М. Боброва В.Н. и Айрапетянц Э.Г. Синтез меченных тритием биологически активных соединений. Л. , 1966.
