Способ определения пригодности материалов для аллопластики Советский патент 1982 года по МПК A61B10/00 

(5 СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРИГОДНОСТИ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ АЛЛОПЛАСТИКИ

1

Изобретение относится к медицине и может быть использовано при отборе материалов, предназначенных для изготовления протезов кровеносных сосудов, протезов клапанов сердца, внут- , рисосудистых катетеров.

Известен способ определения пригодности материалов для аллопластики путем взаимодействия исследуемого материала с кровью с последующим иссле- д дованием тромбоцитов .

Однако известный способ не обеспечивает высокой точности.

Цель изобретения - повышение точности способа.15

Поставленная цель достигается тем, что при определении пригодности материалов для аллопластики путем взаимодействия исследуемого материала с кровью с последующим исследованием 20 тромбоцитов дополнительно исследуют цитратную бестромбоцитарную плазму, определяют в ней БАЭЭ-эстеразную (бензоиларгинина этиловый эфир) активность, затем в тромбоцитах определяют 5-нуклеотидазную активность и по величине этих активностей определяют пригодность материалов для аллопластики.

П D и м е р 1. Для определения БАЭЭ-эстеразной активности калликреина во фторопластовую пробирку при помещают 0,5 мл плазмы и испытуемый материал. Через 3 мин добавляют 1 мл раствора, содержащего 20 мМ М-бензоил- -аргинин этилового эфира и 1 мл вероналового буфера (рН 7,8) и инкубируют 1 ч при 37 С. Затем добавляют 1,5 мл 10 -ного раствора трихлоруксусной кислоты и смесь центрифугируют при 2500 об/миН в течение 10 мин. К 2 мл супернатанта приливают 2 мл щелочного гидроксиламина, 1 мл раствора соляной кислоты, 2 мл 10%-ного раствора хлорного железа в 0,1 н. растворе соляной кислоты и через 15 мин раствор фотометрируют на спектрофотометре при нм. 39t Количество гидролизованного БАЭЭ определяют по градуировочному графику, построенному по известным концентрациям БАЭЭ в координатах: оптическая плотность - концентрация БАЭЭ Активность выражают в микромолях гидролизованного БАЭЭ в течение 1 мин 1 л плазмы для поверхности в 1 см . Пример 2. Для определения 5-нуклеотидазной активности исследуемые материалы (такой же площади, ка в примере 1) инкубируют с 1,5 мл цельной крови во фторопластовой пробирке 15 мин, отмывают физиологическим раствором для удаления нёадге зированных на поверхности форменных элементов крови. Затем добавляют следующие реактивы: 0,1 мл (20 мМ) раствора сернокислого марганца + + 1,5 мл CtO мМ) вероналового буфера рН 7,5 + 0,2 мл (10 мМ) раствора аденозин-5-монофосфата, выдерживают 30 мин при , добавляют 2 мл охлажденного до 4°С 10%-ного раствора трихлоруксусной кислоты, инкубируют 15 мин, центрифугируют 20 мин при 5000 об/мин. Для определения неорганического фосфора к 2 мл супернатанта добавляют 0,6 мл 2,5%ного раствора молибденовокислого аммония в 3 н. серной кислоте + О,А мл 0,5 -ного раствора амидола в растворе сульфата натрия + 0,5 мл бидистиллированной воды. Через 15 ми раствор фотометрируют на спектрофотометре при 660 нм. Активность выражают в микромолях субстрата, гид ролизованного в течение 1 мин 1 л исследуемого раствора- для поверхности в } см ,. В таблице представлена тромбоген ная активность исследуемых материалов.

0,043

6,5

о, 709

11,7 0,035 1,5

Формула изобретения

Способ определения пригодности материалов для аллопластики путем взаимодействия исследуемого материала с кровью с последующим исследованием тромбоцитов, отличающий с я .тем, что, с целью повышения точности способа, дополнительно исследуют цитратную бестромбоцитарную плазму, определяют в ней БАЭЭ-эсПродолжение табл. Как видно из данных таблицы, по пособности активировать контактную азу свертывания крови наименьшей ромбогенностью обладает фторопласт (1,5), наибольшей - стекло (22,8). аименьшая тромбогенность по способности взаимодействовать с тромбоцитами у фторопласта ( 0,035),а наибольшая - у поливинилхлорида(0,709). Эти результаты совпадают с известной низкой тромбогенностью фторопласта, ввиду чего он используется в сердечно-сосудистой хирургии для изготовления клапанов сердца, и высокой тромбогенностью стекла, ввиду чего этот материал для предотвращения свертывания крови в гематологии в необходимых случаях покрывается кремнийорганической пленкой (силиконируется). Для оценки пригодности материала для аллопластики учитываются одновременно 2 показателя: способность материалов расщеплять БАЭЭ и 5-нуклеотидазная активность на их поверхности. Наименьшие показатели (ниже .-1,5 для БАЭЭ-эстеразной активности и 0,035 для 5 нуклеотидазной активности) являются показателями низкой тромбогенной активности материалов и пригодности их для аллопластики. Предлагаемый способ позволяет быстрой точно определить в течение 2-3 ч пригодность материалов для аллопластики.

59«269t«

тераэную активность, затем в тронбо-Источники информации,

цитах определяют 5 нуклеотидазнуюпринятые во внимание при экспертизе

активность и по величине этих Доброва Н.Б. и др. Актуальные

тивностей определяют пригодность ма-проблемы гемостазиологии. М.,Наука,

териалов для аллопластики.s ISZit