Способ индикации менингококков Советский патент 1982 года по МПК C12N1/00 

(5) СПОСОБ ИНДИКАЦИИ МЕНИНГОКОККОВ

1

Изобретение относится к медицине, а именно микробидпогической диагностике инфекционных заболеваний.

Известен способ индикации менингококков путем посева исследуемого ликвора на питательную среду, инкубирования посевов и определения сахаролитических свойств менингококков tl.

Однако этот способ длителен и трудоемок .

Цель изобретения - ускорение и упрощение способа.

Эта цель достигается тем, что согласно способу индикации менингококков осуществляемого путем посева исследуемого ликвора на питательную среду, инкубирования посевов и определения сахаролитических свойств менингококков, ликвор наслаивают на поверхность столбика среды Хью-Лейфсона и после инкубирования сахаролитическиё свойства определяют непосредственно на данной среде.

Способ осуществляют следующим образом .

Исследуемый ликвор в количестве 0,1-0,5 мл вливают в бактериологические пробирки. Состав индикаторной среды, : агар-агар 0,; тестуглевод 0,5; пептон 0,5; хлористый натрий 0,5. А также индикатор рН, например, 0,002% розоловой кислоты ,Q с 0,008% водного голубого.

Пробирки ставят в термостат при Зб-38 С. Учет (эезультатов производят на другой день, .а при отсутствии изменений - последующие 1-2 дня.

15

Если для определения сахаролитических свойств нужно использовать лишь небольшое количество ликвора, то перед посевом его разводят физиологическим раствором, например зали20вают в проби{}ки по 0,,5 л лИквора, разведенного в 10-50 раз.Разводить ликвор целесообразно также во всех случаях, когда он содержит

достаточно большое количество менингококков.

Пример 1. Индикаторные среды разливают по 2- мл в пробирки, предпочтительно, агглютинаЦионные. Состав сред, %: на 100 мл дистиллированной воды агар-агар 0,4; пептон 0,5; хлористый, натрий 0,5 тест-уг|левод 0,5j розоловая кислота 0,002; 1ВОДНЫЙ голубой 0,008. Можно использовать и сухие индикаторные среды с углеводами: 2,0% такой среды берут на 100 мл дистиллированной воды.По 0,1-0,5 мл исследуемого ликаора вливают в пробирки на застывшую среду и ставят их в термостат при 36ЗЗ С.

Исследование ликвора начинают с приготовления из него мазка и изучения под микроскопом характера содержащейся в ликворе флоры.

Результат посева в пробирки (наличие роста, изменение окраски) учитывают на следующий день, а при отсутствии изменений - в последующие 1-2 дня.

Пример 2. Пробирки с индикаторными средами готовят, как в примере 1.

Исследуемый ликвор перед посевом разводят в 10-50 раз, например, 0, раствором хлористого натрия.

Посев и учет результат.ов осуществляют как в примере 1. Посевную дозу берут 0,3-0,5 мл.

П р и м е р 3. Пробирки с индикаторными средами готовят, как в примере 1, но перед тем, как разлить среду по пробиркам, к ней добавляют ристомицин из расчета 100 ЕД на 1 мл среды.

Посев и учет результатов осуществляют как в примере 1 и 2.

Параллельно со средами с ристомицином ликвор сеют на обычные среды.

Способ был применен на 18 культурах: предлагаемый способ - посев цельного ликвора или его разведений на простые сахара, а известный способ - посев выделенной культуры на сывороточные сахара.

Ни на сывороточных средах, ни на простых средах - в предлагаемом cnov собе - не наблюдалось неспецифических результатов: изменений окраски в пробирках с сахарозой, маннитом, лактозой, то есть с углеводами, которые менингококк не сбраживает.

Чувствительность среды по предложенному способу выше.

Все 18 образцов ликвора сбраживают глюкозу до кислоты. В пробирках с мальтозой получено 17 положительных результатов, 1 отрицательный. На сывороточных средах изменениё окраски в пробирках и глюкозой зарегистрировано в 7 случаях из 13 (5), с мальтозой положительный результат отмечен еще реже. Изменение окраски в предложенном способе (на

простых средах) более выраженный, чем а известном.

Предложенный способ позволяет получить результаты на 1-3 дня быстрее, при этом экономится время,необ(Ходимое для выделения чистой культуры, упрощаются условия индикации менингококков, исключается необходимость добавления к индикаторной среде дефицитногд ингредиента - сыворот

Формула изобретения

Способ индикации менингококков путем посева исследуемого ликвора на питательную среду, инкубирования посевов и определения сахаролитических свойств менингококков, отличающийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, ликвор наслаивают на поверхность столбика среды Хью-Лейфсона и после инкубирования сахаролитические свойства определяют непосредственно на данной среде.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Руководство по микробиологической диагностике инфекционных болезней. Под ред. К.И.Матвеева. М., Медицина, 1973, с. 326-332.