Способ концентрирования амилазы Советский патент 1952 года по МПК C12N9/30 

Известные способы получения концентрированных препаратов ферментов из водных вытяжек культуры плесневых грибов и зерновых солодов основаны на осаждении ферментов из водных растворов пятикра1ным объемом спирта или высаливании сернокислым аммонием. Эти методы очень трудоемки, требуют большого количества растворителей-спирта, ацетона или серно-кислого аммония, вследствие чего являются экономически не выгодными.

Предлагаемый способ концентрирования амилазы плесневых грибов и зернового солода из водных вытяжек позволяет получать концентрированный препарат, свободный от присутствия других ферлментов, например декстриназы, путем адсорбции силикагелем.

Предлагаемый способ осуш,ествляется так.

Выращенную на отрубях культуру плесневого гриба взвешивают на весах и смешивают с водой в соотношении 1:4 или 1:5.

После перемешивания, отстаивания и отделения шелухи выделившийся экстракт смешивают с актнвированным углем, взятым в количестве 2/о по объему экстракта, и размешивают в течение 0,5 -1,0 часа.

Из смеси экстракта с угле. отфильтровывают чистый прозрачный экстракт, который направляют на адсорбционные колонны, загруженные гелем кре.мневой кислоты -спликагалем.

Пропущенный через абсорбент экстракт на 90-99°/о освобождается от амилазы, которая адсо)бируется на силикагеле, а фильтрат, содержащий фермент-декстриназу, последующими операциями сгущают в концентрированный раствор.

Адсорбированную на силикагеле амилазу подвергают десорбции сначала при помощи 2,5Уо-ного раствора тринатрийфосфата, а затем раствором буферного фосфата с ,5 -6,8 и 1 /о-ным раствором двууглекислого натрия.

Для удаления солей, внесенных с десорбентом, извлеченную из силикагеля концентрированную амилазу подвергают диализу, после № 94563чего, с. дальнейшего концентрирован ч саждают или высушивают. 7 . Предмет изобретения Способ концентрирования амилазы плесневых грибов и зернового 2 солода из водных вытяжек путем адсорбции, отл и ч а ю щ и и с я тем, что, с целью получения амилазы, свободной от примеси других ферментов, в качестве адсорбента применяют силикагель.