Штамм SснWаNNIомYсеS aLLUVIUS-1167 - продуцент @ -галактозидазы Советский патент 1989 года по МПК C12N9/40 C12N15/00 

396

ласти, 3 июля 19б1г„ Вьщеленный штамм имеет следующие характеристики: Рост на жидком сУсле: после трех дней культивирования при комнатной .температуре клетки округлые, до овальных (4,0-8,8) х (5,3-11,0), в основном в коротких цепочках или клетках, слабое кольцо и осадок.

Рост на сусло - агаре; после месяца культивирования штрих светло-кремовый с мягкой, блестящей поверх- . ностью, текстура пастообразная,слабо выпуклый, край ровныйо Псевдомицелий отсутствуете Хорошо спорулирует после 5-7 дней роста на агаризованном дрожжевом автолизare с 2% глюкозы. Спор 1-2 в аске, круглые,бородавчатые, с ободком по экватору (как грецкий орех)о Брожение: глюкоза (+), галактоза (+), сахароза (+), мальтоза (« медло),мелибиоза (- или + очень медло), рафиноза (+), инулин (+), Ассимиляция углеводов: усваивает глюкозу, галактозу, Ъ-сорбозу, сахарозу, мальтозу, целлобиозу трегалозу, мелибиозу, рафинозу,мелицитову, инулин D-ксилозу L-арабинозу (слабо),В-Маннит, В-глюцитол,ойметил, D-глюкозид, раствор краэсмал, этанол, глицерол, яблочную кислоту, лимонную кислоту (медпв).

Не усваивает D-рабинозу, инозит, лактозу, L-рамнозу, эритрит, гапактинол, молочную кислоту.

Нитраты и нитриты не усваивает,На безвитаминной среде не растет. Желатину не разжижает о

Данная среды обеспечивает высокий уровень биосинтеза - галактозидазы в культуральной жидкости. За рубежом для сходных целей в составе питательных сред используют дорогостоящие пептон и мясной экстракт

79

Пример Посевтлм материалом служила трехсуточная культура дрожжей в количестве 4% Культуру выращивают при 28С на питательной среде следующего состава, г /л :

Сухая сыворотка молока

85,6 (NH4)2HP04 11,5 0,24

MnSO.

Дрожжевой экстракт 0,3 Вода дистиллированная Остальное Среду стерилизуют при 0,7 атм, 40 мин.

Дальнейшее глубинное культивирование осуществляют в течение 48 ч„ Культуральную жидкость отделяют центрифугированием при 8с000 об/мин 10 мин. Активность определяют, используя в качестве субстрата п-нитрофеншт-об-П-галактопиранозиДо Активность достигает 0,7 ед./мл. Единица активности рассчитывалась на молекулу образующего п-нитрофенола при 37°С за 1 мино

Таким образом, культивирование выявленного дрожжевого штамма Schwanniomyces allunius 1167 на более простой и дешевой питательной среде дает возможность получить высокоактивную ei-гапактозидазу за 48 ч при слабой инвертазной активности, которая участвует в расщеплении таких трудноусвояемых углеводов, как стахиоза и 5 рафиноза, присутствующих в сложных по составу естественных кормаХоПредварительная обработка соевых продуктов препаратом об -галактозидазы не только способствует увеличению использования соевого белка, но и 5гменьшает активное газообразование в пищеварительном тракте, которое является недостатком в использовании подобного типа кормов.

Штамм дрожжей Schwanniomyces alluvius 1167 (коллекция культур промышленных микроорганизмов института ВНИИгенети1 а, коллекционный номер ЦМПМ У-298), продуцент oi-галактозидазы S.(Л Для получения данного штамма были исследованы дрожжевые культуры из коллекции Института микробиологии АН СССР и кафедры биологии почв .факультета почвоведения МГУ им. М.В.Ломоносова В результате исследований 05 был выявлен род, обладающий .способностью к синтезу с6-галактозидазы 00 Schvanniomyces, и наиболее перспек тивным штаммом признан Schw alluvius - 1167, Культура хранится в коллекции лаборатории ферментных препаратов Института биохимии иМоА.Н.Баха АН СССР под номером 1167 ив коллекции института ВНИИгенетика под номером ЦМПМ У-298о Данный штамм имеет следующие морфологическую и физиологическую характеристики: Schwannion ces alluvius, Phaff, Miller et Cooke Schwanniomyces alluvius-1 167 - выделен из дерноволуговой пойменной почвы в Тульской об