(5) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ НИКОТИНАМИДАДЕНИНДИНУКЛЕОТИДА
,.. ..V . ; Изобретение относится к усовершенIcTBoeaиному способу получения 1никотинамидадениндинуклеотида (НАД), который используют в биохимии.
Известен способ получения НАД пу.тем электролиза восстановленного никотинамидадениндинуклеотида (НАДН2} в 0,01-0,1 М фосфатном буфере при рН 6-8 на электродах из углеродистых или платиновых, материалах при потенциале 1,2 В fпотенциал полуволны 0,620,72 В) нормального водородного потен. циала при концентрациях НАДНо 10 мкмоль 10.
Недостатком известного способа получения НАД является то, что электролиз протекает при значительном перенапряжении, достигающем 1 В, В результате этого в системах конверсии энергии имеют место значительные потери энергии.
Целью изобретения является упрощение процесса ,заключающееся в уменьшении перенапряжения электролиза НАДН.
Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения НАД, . заключающемуся в электролизе НАДН в 0,01-0,1 М -фосфатоном буфере при рИ 6-8 на комплексе Н-метилфеназиния и анион-радикала 7,7,8,8-тетрациан-п-хинодиметана при потенциале 0,2-0,4 В
10 относительно нормального водородного электрода и концентрации НАДН20,5 1 мкмоль. .
Пример. Электролиз 1 мл рас
15 твора НАДН, концентрация которого 0,5 мкмоль в 0,01-0,1 М фосфатном буфере (рН 7,0) проводят при температуре 20°С в анаэробной среде при постоянном потенциале 0,4 В (потенцйостат
20 П5827М). Через определенное время электролиза (табл. 1) спектрофотометрическим способом в растворе определяют количество образовавшегося НАД
3968038
с использованием алькогольдегидрогеназы.
В табл. 1 представлены результаты электролиза предлагаемого спосЬба.
Таблица 15
Таблица 2,|
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| Способ получения ферментных электродов чувствительных к метаболитам | 1979 |
|
SU891774A1 |
| Способ электрохимической регенерации никотинамидадениндинуклеотида или никотинамидадениндинуклеотидфосфата | 1987 |
|
SU1497186A1 |
| Способ определения активности холинэстеразы | 1990 |
|
SU1728770A1 |
| Способ электрохимического определения глюкозы и электрод для его осуществления | 1984 |
|
SU1180771A1 |
| Способ определения тиолов | 1990 |
|
SU1728771A1 |
| Способ определения глюкозы | 1982 |
|
SU1032401A1 |
| Способ определения концентрации лактата | 1984 |
|
SU1242803A1 |
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОКАЗАТЕЛЯ СУММАРНОЙ АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ МЕТОДОМ КАТОДНОЙ ВОЛЬТАМПЕРОМЕТРИИ | 2010 |
|
RU2449275C2 |
| Способ получения электропроводных фермент-ковакторных систем | 1975 |
|
SU593439A1 |
| Способ определения активности никотинамидных дегидрогеназ | 1984 |
|
SU1255934A1 |
о .- Из табл. видно; что при продолжительном электролизе выход коферментн го актирного НАД составляет 98 по о ношению к количеству электролизуемого НАДНг-- . П р им е р. 2. Электролиз 1 мл раствораНАДН2, концентрация которог 1 мкмольв 0,1 М фосфатном буфере (рН 7,0)при температуре 20°С и потенциале0,2 В проводят аналогичным путем.. Результаты электролиза известного способа приведены в табл. 2. По сравнению с известным способом в предлагаемом способе электролиз протекает при значительно уменьшенном потенциале (0,2-0,41). Формула изобретения Способ полумения никотинамидадениндинуклеотида путем электролиза восстановленного никотинамидадениндинуклеотида в 0,01-0,1 М фосфатном буфере при рН 6-8, отличающийся тем, что, с целью; .упрощения процесса, электролиз проводят на комплексе N-метилфеназиния и анион-радикала 7,7,8,8-тетрациан-п-хинодиметана при потенциале Q,2-Q,k В относительно нормального водородного электрода и концентрации восстановленного никотинамидадениндинуклеотида 0, мкмоль. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. W.I. Blaedel ала Roger А. lenkins Изучение электрохимического окисления восстановленного никотинамидаде.ниндинуклеотидов, - Anal. Giem. А7, № 8, 1975, с. 1.337 (прототип).
