СРЕДСТВО ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И КУПИРОВАНИЯ ПРОЯВЛЕНИЙ ГЕРПЕСВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ НА КОЖЕ И СЛИЗИСТЫХ ОБОЛОЧКАХ Российский патент 2001 года по МПК A61K7/00 A61K7/48 

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для профилактики и купирования проявлений герпесвирусной инфекции на коже и слизистых оболочках.

Для профилактики и купирования проявлений герпесвирусной инфекции на коже и слизистых оболочках предложен ряд противовирусных препаратов широкого спектра действия. К таким препаратам, в частности, относятся мази оксолина, бонафтона, ридоксола (Д.М. Машковский. Лекарственные средства, изд. 13, т. 2, с. 94, 345- 346, 354-362, Харьков,. "Торсинп", 1997 г.; Г.Н. Першин, А.А. Ариевич и другие "Вестник дерматологии" N 2, с. 50-53, 1983 год; А.Н. Фомина, И.С. Николаева и другие "Химико-фармацевтический журнал" N 2, с. 16-17, 1986 г.). Однако, как и все противовирусные препараты широкого спектра действия эти мази малоэффективны для купирования проявлений герпесвирусной инфекции на коже и слизистых оболочках. Малоэффективны для этой цели и мази или кремы на основе растительного сырья, в частности мази алпизарина, хелепина, мегосина, госсипола, глицеризиновой кислоты (К. К. Борисенко, "Генитальный герпес" в сборнике "Неизвестная эпидемия: Герпес (патогенез, диагностика, клиника, лечение)", с. 119-129, "Фармаграфикс", Смоленск, 1997 г. , Д.М. Машковский, Лекарственные средства, изд. 13, т. 2, с. 94, 345-346, 354-362, Харьков, "Торсинг", 1997 г.; Экспресс-информация фирмы "Laboratorios Cheminova International, S.A." Epigen intimo, Madrid, Spain, 1996 г.; C.A. Вичканова, Л.Д. Шипулина, экспресс-информация "Новые лекарственные препараты" N 8, с. 1-7, 1986 г.). Следует, кроме того, отметить, что у большинства препаратов растительного происхождения имеется ряд нежелательных побочных эффектов при относительно низком индексе лечебного действия.

Прорывом в области профилактики и купирования проявлений герпесвирусной инфекции на коже и слизистых оболочках стало применение мазей и кремов на основе ацикловира и его аналогов, в частности применение препаратов "Зовиракс", "Ацикловир", "Виролекс", "Цикловир" и других (Л.Н. Хахалин, "Патогенетические обоснования и принципы профилактики и лечения герпесвирусной инфекции" в сборнике "Неизвестная эпидемия: Герпес (патогенез, диагностика, клиника, лечение)", с.32-37, "Фармаграфикс", Смоленск, 1997 г.; Ф. И. Ершов, Н.П. Чижов, "Клиническая фармакология и терапия" N 4, с. 75-78, 1995 г. ; М. Вудли, А. Уэлан "Терапевтический справочник Вашингтонского университета", перевод с англ., Москва, "Практика", с. 341, 1995 г.). Однако, несмотря на высокую терапевтическую эффективность препаратов на основе ацикловира при лечении проявлений герпесвирусной инфекции на коже и слизистых оболочках, нельзя не отметить и их недостатков. Во-первых, препараты на основе ацикловира не эффективны в случаях, когда проявление инфекции вызывается так называемыми ацикловиррезистентными штаммами вирусов простого герпеса I и II типов (по статистике количество больных, являющихся носителями таких штаммов, достигает 10% от общего количества носителей вирусов I и II антигенных типов). Во-вторых, несмотря на то, что местное применение ацикловирсодержащих препаратов, как правило, не сопровождается нежелательными побочными действиями, в ряде случаев отмечается появление кожной сыпи. Наконец, при проявлении на коже инфекции, вызываемой вирусом опоясывающего герпеса (вирус варицелла зостер), продолжительность лечения ацикловирсодержащими кремами (мазями) достигает 2-3 недель. Кроме того, препараты местного применения на основе ацикловира малоэффективны при серьезных сбоях иммунной системы больных.

Все эти недостатки устраняются при использовании для профилактики и купирования проявлений герпесвирусной инфекции на коже и слизистых оболочках кремов или мазей на основе фоскарнета натрия гексагидрата (тринатриевой соли фосфонмуравьиной кислоты шестиводной). Фоскарнет натрия гексагидрат в 1987 г. был рекомендован Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) для лечения заболеваний, вызываемых вирусами простого герпеса, цитомегаловирусом, и ВИЧ-инфицированных.

В последние годы за рубежом и в России фоскарнет натрия гексагидрат был рекомендован, в основном, в лекарственных формах таблеток или растворов для инъекций ("Фармацевтический вестник" N 6, 16-31 марта 1998 г.).

В 1997 г. был зарегистрирован патент России N 2093140 с приоритетом от 09.03.1995 г. на лечебно-профилактическую помаду, содержащую фоскарнет натрия гексагидрат. Поскольку фоскарнет натрия гексагидрат не растворяется в жировой основе помады и плохо в ней суспендируется, у этого средства оказалась низкая биодоступность субстанции, а, кроме того, неоднородное распределение ее по высоте стержня помады. Следствием этого явилась недостаточно высокая терапевтическая эффективность помады.

Этих недостатков лишено средство местного действия на основе фоскарнета натрия (патент России N 2097016 с приоритетом от 02.11.1995 года). Это средство, принимаемое в качестве прототипа настоящему изобретению, содержит, кроме фоскарнета натрия, масляный экстракт календулы или чистотела, воски эмульсионные, моноглицериды дистиллированные, воск пчелиный, ланолин безводный, метиловый и пропиловый эфиры парагидроксибензойной кислоты, твин-80 или натрийлаурилсульфат, спирты синтетические, отдушку, герматранол и дистиллированную воду.

Однако и средству приведенного выше состава присущи существенные недостатки. Во-первых, при его использовании продолжительность лечения относительно велика. Во-вторых, в случае его хранения при комнатной температуре даже непродолжительное время фоскарнет натрия в его составе начинает разлагаться с образованием фосфористой кислоты, которая может вызывать ожоги кожи и слизистой оболочки. Наконец, в-третьих, средство состава, приведенного в патенте России N 2097016, имеет плохую коллоидную стабильность, из-за чего оно не может долго храниться.

Целью данного изобретения является устранение перечисленных недостатков, в частности ускорение процесса купирования герпесвирусной инфекции на коже и на слизистых, устранение побочного действия, обеспечение высокой коллоидной стабильности средства. Эта цель достигается тем, что средство местного действия на основе фоскарнета натрия гексагидрата, предназначенное для профилактики и купирования проявлений герпесвирусной инфекции на коже и слизистых оболочках, в которое входит ланолин безводный, метиловый и пропиловый эфиры парагидроксибензойной кислоты и дистиллированная вода, содержит также 1,4-диметил-7-изопропилазулен, 5- уреидогидантоин, имидазолидинилмочевину и дополнительно эмульгатор, в качестве которого может использоваться сплав высших жирных спиртов C₁₂-C₁₄ равным количеством натриевых солей сульфоэфиров этих же спиртов или сплав высших жирных спиртов C₁₆-C₁₈ с равным количеством калиевых солей диэфиров фосфорной кислоты и этих же спиртов, антиоксидант, в частности 2,6-ди-трет-бутил-4- метилфенол, кислоту стеариновую, глицерин и триэтаноламин при следующем соотношении ингредиентов, мас.%:
Фоскарнет натрия гексагидрат - 2,50-3,50
1,4-Диметил-7-изопропилазулен - 0,01-0,05
5-Уреидогидантоин - 0,50-0,80
Имидазолидинилмочевина - 0,20-0,60
Ланолин безводный - 2,00-5,00
Кислота стеариновая - 4,00-8,00
Глицерин дистиллированный - 1,50-2,50
Триэтаноламин - 0,70-2,00
Метиловый эфир парагидроксибензойной кислоты - 0,20-0,40
Пропиловый эфир парагидроксибензойной кислоты - 0,08-0,10
Эмульгатор - 4,00-6,00
Антиоксидант (2,6-ди-трет-бутил-4-метилфенол) - 0,10-0,40
Вода дистиллированная - До 100,00
Пример: 5000 г крема готовили по следующей рецептуре и приводимой ниже технологии.

Рецептура, г:
Фоскарнет натрия гексагидрат - 155,0
1,4-Диметил-7-изопропилазулен - 1,5
Эмульгатор (сплав высших жирных спиртов C₁₂-C₁₄ с равным количеством натриевых солей сульфоэфиров этих же спиртов) - 250,0
5-Уреидогидантоин - 32,50
Имидазолидинилмочевина - 15,0
Ланолин безводный - 150,0
Кислота стеариновая - 300,0
Глицерин дистиллированный - 100,0
Триэтаноламин - 50,0
Метиловый эфир парагидроксибензойной кислоты - 10,0
Пропиловый эфир парагидроксибензойной кислоты - 5,0
Антиоксидант (2,6-ди-трет-бутил-4- метилфенол) - 10,0
Вода дистиллированная - До 5000,0
Технология приготовления крема.

В эмалированный реакционный аппарат вместимостью 5 кг, снабженный рубашкой для теплоносителя и хладагента, а также якорно-скребковой мешалкой (60 мин^-1) и быстроходной мешалкой (1500 мин^-1), заливали 3628,5 г дистиллированной воды; 100,0 г глицерина дистиллированного и 50,0 г триэтаноламина. Ингредиенты перемешивали якорно-скребковой мешалкой и одновременно нагревали с помощью теплоносителя, подаваемого в рубашку, до 75^oC. При 75^oC в полученный раствор, не прекращая перемешивания, загружали 155,0 г фоскарнета натрия гексагидрата, после чего перемешивание продолжали еще 20 мин.

Одновременно в эмалированный плавильник вместимостью 1500 г, снабженный рамной мешалкой (150 мин^-1) и рубашкой для теплоносителя, загружали 150,0 г ланолина безводного; 250,0 г смеси высших жирных спиртов C₁₂-C₁₄ с равным количеством натриевых солей сульфоэфиров этих же спиртов; 300,0 г кислоты стеариновой; 10,0 г метилового эфира парагидроксибензойной кислоты и 5,0 г пропилового эфира парагидроксибензойной кислоты. В рубашку плавильника подавали теплоноситель, нагревая содержимое плавильника до 70^oC. После полного расплавления содержимого плавильника включали мешалку и вели перемешивание до полной гомогенизации расплава. После этого пространство над расплавом заполняли газообразным азотом и под зеркало расплава при работающей мешалке в расплав вводили 1,5 г 1,4-диметил-7 изопропилазулен, 32,50 г уреидогидантоина и 10,0 г 2,6-ди-трет- бутил-4-метилфенола. После 10 мин перемешивания расплав быстро сливали в реакционный аппарат с горячим раствором водорастворимых реагентов. Смесь перемешивали якорно-скребковой мешалкой 20 мин, после чего теплоноситель в рубашке реакционного аппарата заменяли хладагентом и образовавшуюся эмульсию охлаждали до 40^oC. При 40^oC в эмульсию вводили 15,0 г имидазолидинилмочевины и на 30 мин включали быстроходную мешалку. Готовое средство вакуумировали, после чего перекачивали в тубонабивную машинку, с помощью которой средством заполняли лакированные изнутри алюминиевые тубы.

Одновременно для сравнения готовили средство-прототип по рецептуре и технологии, приведенных в описании к патенту России N 2097016. При этом концентрацию фоскарнета натрия принимали в соответствии с упомянутым патентом на максимальном уровне (3,0% мас.).

Оценку терапевтической эффективности предлагаемого средства, имеющего консистенцию средства, в сопоставлении с терапевтической эффективностью средства-прототипа производили двумя методами:
а) на классической модели генитального герпеса (морские свинки, вирус простого герпеса второго антигенного типа);
б) на людях с проявлениями на коже или слизистых герпесвирусной инфекции, вызываемой вирусами I или II антигенного типа.

Исследование на морских свинках были выполнены в научно-исследовательском институте вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН. Опыты проводили на модели герпетической инфекции гениталий у самцов морских свинок. Животные массой 250-300 г содержались в стандартных условиях вивария. Заражение производили вирусом простого герпеса второго антигенного типа, штамм ВН в виде вируссодержащей взвеси. Вируссодержащая жидкость наносилась на предварительно скарифицированную кожу пениса анестезировнных животных. Размер площади скарификации 4х7 мм. Тяжесть инфекционного процесса оценивали ежедневно перед проведением лечения и прослеживали в течение всего периода болезни по следующим признакам: площадь и степень специфических поражений; наличие отека; наличие гиперемии; наличие орхита.

Максимальную выраженность каждого признака оценивали в 4 балла. Длительность наблюдений составляла 21 день. Лечение с использованием предлагаемого средства и параллельно средства-прототипа начинали через 48 часов после инфицирования при достаточно выраженных проявлениях симптомов болезни. Средства наносили тонким слоем на очаги поражения 3 раза в сутки ежедневно в течение 7 дней. Эффективность препаратов оценивали на пике выраженности патологического процесса по степени снижения интенсивности клинических проявлений; по индексу лечебного действия (ИЛД) и по длительности заболевания. Величину ИЛД определяли как частное от деления разности между суммой баллов в контроле и суммой баллов в группе пролеченных животных на сумму баллов в контроле, умноженное на 100. В исследованиях использовали три группы животных:
1 группа. 5 морских свинок, инфицированных вирусом простого герпеса второго антигенного типа и не получивших лечение (контроль инфицирования).

2 группа. 5 морских свинок, инфицированных вирусом простого герпеса второго антигенного типа и пролеченных предлагаемым средством.

3 группа. 5 морских свинок, инфицированных вирусом простого герпеса второго антигенного типа и пролеченных средством-прототипом.

Для изучения побочного действия обоих препаратов 8 морских свинок были выделены в две отдельные группы (по 4 животных). Животные этих групп инфицированию не подвергались, а оба средства наносили на кожу пениса по приведенной выше схеме. Результаты эксперимента представлены в таблице 1.

Как следует из таблицы 1, продолжительность заболевания при использовании предлагаемого средства сокращается в 2,1 раза по сравнению с контролем и в 1,4 раза по сравнению со средством-прототипом. ИЛД предлагаемого средства на 6% выше, чем у средства-прототипа.

В ходе экспериментов отмечено, что у всех незараженных животных при обработке предлагаемым средством не наблюдалось никаких побочных явлений. При обработке незараженных животных средством-прототипом у 50% морских свинок этой группы наблюдались отек и легкая гиперемия кожи.

Исследования терапевтической эффективности на людях.

Исследования предлагаемого средства и параллельно средства-прототипа были проведены на клинической базе Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова. Для исследований были отобраны две группы больных с проявлениями герпесвирусной инфекции на коже и слизистых оболочках, вызванной вирусами простого герпеса первого или второго антигенного типа. Первая группа больных, состоявшая из 45 человек (30 женщин и 15 мужчин в возрасте от 25 до 50 лет), получала для лечения предлагаемое средство; вторая группа больных, состоящая из 37 человек (25 женщин и 12 мужчин в возрасте от 20 до 60 лет), получала для лечения средство-прототип. В обеих группах были больные с разной локализацией проявлений герпесвирусной инфекции, а также на двух стадиях развития болезни: начальной - продромальной, характеризующейся субъективными ощущениями зуда, чувством покалывания, легким жжением, а также легкой гиперемией и отеком в очаге поражения, и стадией развернутых клинических симптомов, характеризующейся появлением множественных сгруппированных везикулярных пузырьков на фоне нарастающих гиперемии и отека с последующим вскрытием везикул и образованием эрозией. Соответственно в каждой из двух групп больные были, в свою очередь, разбиты на две подгруппы в зависимости от стадии развития болезни. Всем больным ежесуточно (5 раз в день) назначалось смазывание областей поражения тонким слоем предлагаемого средства (в 1-ой группе) или средства-прототипа (во 2-ой группе). Оценку эффективности (с момента начала лечения) оценивали тремя показателями: а) очень высокая эффективность (купирование субъективных ощущений и абортирование высыпаний в течение 1-2 суток); б ) хорошая эффективность (сокращение продолжительности заболевания вдвое по сравнению со среднестатистической длительностью заболевания без лечения); в) отсутствие лечебного действия. Одновременно фиксировали отсутствие или наличие побочного действия.

Результаты исследований представлены в таблице 2. Как видно из таблицы 2, при начале лечения предлагаемым средством на 1-ой стадии заболевания очень высокая эффективность отмечена у 17 человек из 21 (81%) и хорошая эффективность - у 4 из 21 (19%).

При начале лечения средством-прототипом на 1-ой стадии заболевания очень высокая эффективность отмечена у 7 больных из 19 (37%), а хорошая - у 12 из 19 (63%).

При начале лечения на второй стадии болезни предлагаемым средством очень высокая эффективность отмечена для 16 больных из 24 (67%) и хорошая - для 8 из 24 (33%). При начале лечения на 2-ой стадии заболевания средством-прототипом ни у одного из 18 больных не отмечена очень хорошая эффективность препарата; хорошая эффективность зафиксирована у 15 из 18 больных. Для 3 больных из 18 (17%) средство-прототип оказалось не эффективным.

Побочное действие при лечении предлагаемым средством не отмечено ни у одного из больных; при лечении средством-прототипом у 11 больных из 37 (29%) наблюдалась гиперемия кожи разной степени.

Оценка побочного действия при использовании предлагаемого средства и средства-прототипа была выполнена в Научно-исследовательском центре токсикологии и гигиенической регламентации биопрепаратов Минздрава России. Исследование, выполненное на четырех видах животных, содержавшихся в виварии в стандартных условиях, показало, что оба средства (предлагаемое и прототип) не обладают аллергизирующим действием. Установлено также, что предлагаемое средство при однократном и многократном нанесении на кожу не вызывает раздражающего действия.

Средство-прототип при многократном нанесении на кожу вызывает раздражающее действие, проявляющееся в форме гиперемии.

Коллоидную стабильность предлагаемого средства и средства-прототипа оценивали стандартным методом - путем центрифугирования. Одновременно по две пробы предлагаемого средства и средства-прототипа помещали в центрифужные пробирки и центрифугировали 6 мин при скорости вращения ротора центрифуги 6000 мин^-1. Визуальный осмотр центрифужных пробирок с пробами обоих средств после центрифугирования показал, что предлагаемое средство после центрифугирования не расслаивается, в то время как средство-прототип в обоих пробирках расслаивается. При этом в верхний слой выделяется кольцо желтоватой жировой фазы (10-15% от общей высоты средства). В нижний слой (20-25% от общей высоты крема) выделяется прозрачный бесцветный водный раствор. Промежуточный слой по внешнему виду не отличается от исходного средства. Полученный результат свидетельствует о том, что предлагаемое средство обладает высокой стабильностью; средство-прототип не обладает коллоидной стабильностью.

Средство может быть использовано в медицине и косметологии для профилактики и купирования проявлений герпесвирусной инфекции. Средство содержит следующие ингредиенты, мас.%: фоскарнет натрия гексагидрат 2,50-3,50; 1,4-диметил-7-изопропилазулен 0,01-0,05; 5-уреидогидантоин 0,50-0,80; имидазолидинилмочевина 0,20-0,60; ланолин безводный 2,00-5,00; кислота стеариновая 1,50-3,50; глицерин дистиллированный 1,50-2,50; триэтаноламин 0,70-2,00; метиловый эфир парагидроксибензойной кислоты 0,20-0,40; пропиловый эфир парагидроксибензойной кислоты 0,08-0,10; эмульгатор 4,00-6,00; антиоксидант 0,10-0,40; вода дистиллированная остальное. Причем в качестве эмульгатора средство содержит сплав высших жирных спиртов C₁₂-C₁₄ с равным количеством натриевых солей сульфоэфиров этих же спиртов или сплав высших жирных спиртов С₁₆-С₁₈ с равным количеством калиевых солей диэфиров фосфорной кислоты и этих же спиртов. А в качестве антиоксиданта используют 2,6-ди-трет-бутил-4-метилфенол. Средство ускоряет процесс купирования проявлений герпесвирусной инфекции на коже и слизистых оболочках. 2 з.п. ф-лы, 2 табл.

1. Средство для профилактики и купирования проявлений герпесвирусной инфекции на коже и слизистых оболочках, содержащее в качестве действующего вещества фоскарнет натрия гексагидрат и в качестве вспомогательных ингредиентов ланолин безводный, метиловый и пропиловый эфиры парагидроксибензойной кислоты и воду дистиллированную, отличающееся тем, что в его состав входит 1,4-диметил-7-изопропилазулен, 5-уреидогидантоин, имидазолидинилмочевина и дополнительно эмульгатор, антиоксидант, кислота стеариновая, глицерин и триэтаноламин при следующем соотношении ингредиентов, мас.%:
Фоскарнет натрия гексагидрат - 2,50-3,50
1,4-Диметил-7-изопропилазулен - 0,01-0,05
5-Уреидогидантоин - 0,50-0,80
Имидазолидинилмочевина - 0,20-0,60
Ланолин безводный - 2,00-5,00
Кислота стеариновая - 1,50-3,50
Глицерин дистиллированный - 1,50-2,50
Триэтаноламин - 0,70-2,00
Метиловый эфир парагидроксибензойной кислоты - 0,20-0,40
Пропиловый эфир парагидроксибензойной кислоты - 0,08-0,10
Эмульгатор - 4,00-6,00
Антиоксидант - 0,10-0,40
Вода дистиллированная - Остальное
2. Средство по п.1, отличающееся тем, что в качестве эмульгатора используют сплав высших жирных спиртов C₁₂-C₁₄ с равным количеством натриевых солей сульфоэфиров этих же спиртов или сплав высших жирных спиртов С₁₆-С₁₈ с равным количеством калиевых солей диэфиров фосфорной кислоты и этих же спиртов. 3. Средство по п.1, отличающееся тем, что в качестве антиоксиданта используют 2,6-ди-трет-бутил-4-метилфенол.