ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ СОСТАВ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ Российский патент 2008 года по МПК A61K31/4409 A61K31/133 A61K31/732 A61K9/14 A61P31/06 

Изобретение относится к области медицины и касается фармацевтического состава, обладающего противотуберкулезной активностью, и пригодно для лечения туберкулеза.

Повсеместное ухудшение экологической обстановки и снижение социального благосостояния населения в России привело в последние 10-15 лет к росту заболеваемости туберкулезом, которая в отдельных районах начинает принимать характер эпидемии.

Основными химиотерапевтическими средствами для лечения различных форм туберкулеза являются производные изоникотиновой кислоты, прежде всего изониазид, а также лекарственные препараты, различные по химической структуре и механизмам действия, например этамбутола гидрохлорид, обладающий высокой противотуберкулезной активностью (Справочник. Видаль. Лекарственные препараты в России. Изд. 12-е переработанное, исправленное и дополненное. Астра Фарм Сервис, 2006 г. стр.1497, 1554). Изониазид по своей бактериостатической активности до сих пор остается основным препаратом для лечения туберкулеза. Однако в настоящее время отмечается, что особенностью лечения туберкулеза является лекарственная устойчивость M.tuberculita. В этом случае назначают одновременный прием нескольких туберкулостатических лекарственных средств различных химических групп и механизмов действия. Для обеспечения комфортности лечения больных целесообразно создание комплексных лекарственных средств.

Для достижения стойкого лечебного эффекта основной курс химиотерапии при различных формах туберкулеза длителен и составляет от 6 до 12 месяцев; профилактические курсы проводят 2 раза в год, и их продолжительность составляет 2-3 месяца (А.А.Визель, М.Э.Гурылева. Туберкулез. М., Медицина, 1999, стр.131-140). При пероральном приеме в виде таблеток и капсул в организм наравне с лекарственным веществом поступает значительное количество вспомогательных веществ, не всегда индифферентных, а иногда и токсичных для человека, например тальк, который вызывает раздражение слизистой желудочно-кишечного тракта.

Прототипами изобретения являются таблетки изониазида и таблетки этамбутола гидрохлорида (Справочник. Видаль. Лекарственные препараты в России. Изд. 12-е переработанное, исправленное и дополненное. Астра Фарм Сервис, 2006 г. стр.1497, 1554), а также комбинированный лекарственный препарат: таблетки, содержащие 0,15 г изониазида и 0,4 г этамбутола гидрохлорида - «Фтизоэтам» (Регистр лекарственных средств России. Энциклопедия лекарств, 2005, В.12, Инфармхим., М., ООО «РЛС-2005», стр.994). Этот лекарственный препарат применяется для лечения туберкулеза. Недостатком его является высокая токсичность, быстрое выведение из организма, высокие дозы лекарственных веществ, входящих в состав препаратов, большое количество вспомогательных веществ.

Для создания стабильной, удовлетворяющей фармакопейным требованиям твердой лекарственной формы необходимо использовать вспомогательные вещества, индифферентные для организма, в количествах, определяемых фармацевтической и терапевтической целесообразностью.

Задачей данного изобретения является создание комбинированного фармацевтического состава для лечения туберкулеза, удовлетворяющего всем требованиям к фармацевтическим средствам и устойчивого в течение достаточно длительного времени (не менее 2-х лет), который можно будет производить в условиях отечественной фармацевтической промышленности.

Обеспечение оптимальных биофармацевтических свойств ингредиентов лекарственного препарата изониазида и этамбутола гидрохлорида может быть достигнуто путем введения в качестве вспомогательного вещества пектина, который обеспечит пролонгирование действия лекарственных веществ и понизит гепатотоксичность изониазида (Л.А.Саджая. Биохимическое обоснование путей снижения гепатотоксичности изониазида на основе сочетания с полисахаридами. Дис. канд. фармац. наук. - Пятигорск, 1999. - 120 с.).

В заявляемый состав входят в качестве действующих веществ изониазид и этамбутола гидрохлорид и вспомогательные вещества, взятые в количестве от 40 до 50% от массы действующих веществ. Фармацевтический состав выполнен в виде гранул. Состав соответствует требованиям на фармацевтические средства и обладает повышенной стабильностью при хранении.

Техническим заданием предлагаемого изобретения является создание комплексного состава, обладающего туберкулостатической активностью по отношению к изониазид-устойчивым M.tuberculosis, a также усиливающим специфическое фармакологическое действие изониазида и этамбутола гидрохлорида за счет синергизма. Задание решено с помощью следующего состава гранул в граммах:

Изониазида0,3000Этамбутола гидрохлорида0,3000Пектина0,3000Спирта этилового 70%0,396

Пример 1.

Приготовление гранул осуществляется методом влажного гранулирования.

Изониазид и этамбутола гидрохлорид предварительно высушивают в термостате при температуре 60°С до остаточной влажности 2-3%. Взвешенное сырье (количества изониазида 0,75 кг и этамбутола гидрохлорида 0,75 кг) предварительно измельчали в барабане шаровой мельницы вместе с шарами при оптимальной скорости в течение 5-8 минут. Измельченные продукты просеивали через сито-капрон №38 с диаметром отверстия 0,16±0,025 мм.

Для приготовления увлажнителя на весах отвешивали 0,655 кг спирта этилового и 0,335 кг воды и помещали их в емкость для приготовления увлажнителя. 0,75 кг пектина предварительно просеивали через сито №2. В смеситель с зеттаобразными лопастями загружали пектин, этамбутола гидрохлорид и изониазид и перемешивали 5-8 минут. Затем из емкости для приготовления увлажнителя частями добавляли увлажнитель при постоянном перемешивании. Однородность и увлажненность массы контролировали визуально.

Масса с оптимальной влажностью представляет собой влажную, компактную смесь, не прилипающую к руке, но рассыпающуюся при сдавливании на отдельные комочки. Далее осуществляли влажное гранулирование в грануляторе методом продавливания через сетку с диаметром отверстия 4 мм. Гранулят выгружали в лотки из нержавеющей стали тонким слоем 1-2 см. Сушку гранул производили в вакуум-сушильном шкафу при периодическом перемешивании при температуре 30-40°С и вакууме 0,7-0,8 кгс/см². Продолжительность сушки 30 минут до остаточной влажности 2,5-3,0%.

Затем проводили сухое гранулирование на универсальном грануляторе через сетку с диаметром отверстий 2 мм.

Гранулы представляли собой светло-желтые частички неправильной формы, обладающие необходимой механической прочностью, масса полученных гранул составляла 2,14 кг.

Установление сроков годности гранул проводили методом «ускоренного старения» в двух температурных режимах при 40 и 60°С, а также в естественных условиях («Инструкция по проведению работ с целью определения сроков годности лекарственных средств на основе метода «ускоренного старения» при повышенной температуре И 42-2-82»). В качестве опытных образцов использовали 3 серии гранул, таблетки этамбутола гидрохлорида и таблетки изониазида, таблетки «Фтизоэтама». О стабильности ингредиентов заявляемого фармацевтического состава и прототипов судили по содержанию посторонних примесей и количественному содержанию лекарственных веществ в испытуемых образцах. Контроль качества проводили через равные промежутки времени, эквивалентные 6 месяцам хранения. Для гранул срок хранения составил три года, для таблеток изониазида - три года, для таблеток этамбутола гидрохлорида - два года и восемь месяцев, для таблеток «Фтизоэтама» - два года и пять месяцев.

Для изучения специфической антимикробной активности гранул, содержащих этамбутола гидрохлорид и изониазид по отношению к изониазид-резистенным штаммам M.tuberculosis, использовали метод абсолютных концентраций на среде Левенштейна-Йенсена (приказ МЗ РФ №109 от 21.03.2003 г). Опыты проводили на трех сериях гранул в трехкратной повторности. Определение проводили на 10-ти штаммах M.tuberculosis, выделенных от больных.

Результаты представлены в табл.1.

Из данных, представленных в табл.1, следует, что по отношению к изониазид-чувствительным штаммам 4273 и 3946 проявляют активность все образцы патентуемого фармацевтического состава в виде гранул. Показано, что таблетки этамбутола гидрохлорида подавляют рост четырех штаммов микобактерий туберкулеза. Изониазид-резистентные штаммы 4251 и 3860 чувствительны к этамбутола гидрохлориду. Предлагаемый фармацевтический состав, содержащий оба противотуберкулезных лекарственных вещества, подавляет рост 8 штаммов микобактерий. Подавление роста штаммов 4251 и 3860 обусловлено присутствием этамбутола гидрохлорида в фармацевтическом составе. Чувствительность штаммов 3951, 3974, 3850 и 4167 обусловлена совместным действием изониазида и этамбутола гидрохлорида. Патентуемый фармацевтический состав в виде гранул активнее прототипов изониазида и этамбутола гидрохлорида. Следовательно, можно предложить взаимное синергическое влияние ингредиентов фармацевтического состава.

Определение острой токсичности гранул изониазида и этамбутола гидрохлорида и прототипов (таблеток изониазида и таблеток этамбутола гидрохлорида) проводили на белых беспородных мышах обоего пола массой 18±2 г. Первой группе животных перорально вводили суспензию таблеток изониазида, диспергированных в 0,9% растворе натрия хлорида; второй группе - суспензию таблеток этамбутола гидрохлорида в 0,9% растворе натрия хлорида; третьей - суспензию таблеток «Фтизоэтама» в 0,9% растворе натрия хлорида, четвертой - суспензию патентуемого фармацевтического состава гранул изониазида с этамбутола гидрохлоридом. Наблюдение за поведением и состоянием животных проводили в течение 10 дней. Далее рассчитывали величину ЛД₅₀ по методике Беренса (М.Л.Беленький. Элементы количественного учета фармакологического эффекта. СПб.: Мед. лит., 1963. - 250 с.). Результаты эксперимента представлены в табл.2.

Анализ полученных данных свидетельствует о том, что токсичность изониазида с этамбутола гидрохлоридом, введенных животным в виде гранул патентуемого фармацевтического состава, ниже в 2,1 раза по сравнению с токсичностью прототипов, а именно изониазида и этамбутола гидрохлорида в таблетках, а также в 2 раза ниже по сравнению с токсичностью таблеток «Фтизоэтама».

Для объективной оценки биодоступности и фармакологического действия предлагаемого фармацевтического состава в соответствии с требованиями «Руководства по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» (Москва, 2000. МЗ РФ, 680 с.) Было проведено сравнительное изучение фармакокинетики гранул изониазида и этамбутола гидрохлорида и прототипов (таблеток изониазида и таблеток этамбутола гидрохлорида). Определение проводили на белых крысах обоего пола с массой тела 200-300 г. Перед опытом животных не кормили в течение суток. Испытуемые вещества вводили перорально в виде суспензии в 0,9% растворе натрия хлорида, в дозах 40 мг/кг таблеток изониазида в пересчете на изониазид (первая группа), 40 мг/кг таблеток этамбутола гидрохлорида в пересчете на действующее вещество (вторая группа), 147 мг/кг таблеток «Фтизоэтама», содержащих по 40 мг/кг изониазида и этамбутола гидрохлорида (третья группа), 120 мг/кг гранул, содержащих по 40 мг/кг изониазида и этамбутола гидрохлорида (четвертая группа). Через 0,5; 1; 2; 3; 6; 9; 12; 24 часов после введения животных декапитировали, кровь собирали, центрифугировали и в полученной сыворотке определяли содержание изониазида и этамбутола гидрохлорида. Количество изониазида определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Содержание этамбутола гидрохлорида определяли методом экстракционной фотометрии по реакции с бромкрезоловым зеленым. В табл.3 представлены результаты количественного определения содержания изониазида и этамбутола гидрохлорида в крови крыс (средние результаты из шести параллельных определений).

По полученным данным построили фармакокинетические кривые и рассчитали следующие фармакокинетические характеристики: кажущийся объем распределения (V, мл), константа элиминации (K_el, ч^-1), общий клиренс (Cl, мл/ч), период полувыведения (Т1/2, ч), площадь под фармакокинетической кривой (AUC∞, мг·ч/мл), относительная биологическая доступность. Расчеты проводили по формулам, приведенным в литературе (Соколов В.И., Фирсов А.А.. Филов В.А. Фармакокинетика. - М.: Медицина, 1980. - 422 с.). Результаты представлены в табл.4. Анализ полученных данных свидетельствует о том, что из гранул в системном кровотоке как изониазид, так и этамбутол находятся в бактериостатической концентрации на 19 и 12 часов дольше, чем прототипы (соответственно).

Константы элиминации изониазида и этамбутола из гранул в 4,75; 3,75; 2,6 и 2,0 раза меньше, чем у прототипов (соответственно). Период полувыведения изониазида и этамбутола гидрохлорида из гранул в 45,75; 2,44 (изониазид из таблеток изониазида и «Фтизоэтама») и 3,8; 1,57 (этамбутола гидрохлорид из таблеток этамбутола и «Фтизоэтама») раза больше, чем прототипов (соответственно). Следовательно, заявляемый фармацевтический состав обеспечивает пролонгированное нахождение изониазида и этамбутола в крови.

Увеличение площадей под фармакокинетическими кривыми изониазида и этамбутола гидрохлорида в гранулах в 5,3 и 1,6 раза (соответственно) по сравнению с прототипами может свидетельствовать о повышении терапевтической эффективности как изониазида, так и этамбутола гидрохлорида в заявляемом фармацевтическом составе.

Применение предлагаемого фармацевтического состава, обладающего высокой туберкулостатической активностью, позволит уменьшить токсичность, а следовательно, и побочные эффекты входящих в него ингредиентов: изониазида и этамбутола гидрохлорида. Кроме того, применение предлагаемого фармацевтического состава обеспечит пролонгирование действия изониазида и этамбутола гидрохлорида в организме.

Таблица 1
Сравнительная оценка антимикробной активности таблеток изониазида, таблеток этамбутола гидрохлорида, таблеток «Фтизоэтам», гранул изониазида с этамбутола гидрохлоридомНомер штаммаОпределяемое вещество, концентрацияКонтрольТаблетки изониазида, 1 мкг/млТаблетки этамбутола, гидрохлорида 1 мкг/млТаблетки «Фтизоэтам», 1 мкг/млГранулы изониазида, 1 мкг/мл, этамбутола гидрохлорида, 1 мкг/мл4273----+3946----+3951+++-+4251+-+-+4106+++++3860+-+-+3974++--+3850++--+4167+++-+4054+++++«-» - отсутствие роста свидетельствует о чувствительности к лекарственному препарату;
«+» - роста на среде свидетельствует об устойчивости к лекарственному препарату.

Таблица 2
Определение острой токсичности известных прототипов (изониазида в таблетках, этамбутола гидрохлорида в таблетках, таблеток «Фтизоэтам») и предлагаемого фармацевтического состава в виде гранул изониазида и этамбутола гидрохлоридаДозы мг/кг*Число павших/Число выжившихНакопительные частотыСмертность, в % Таблетки изониазида3000/100/20-d=503506/46/1037,5A=350 мг/кг4008/214/670,0В=400 мг/кг4508/222/4-а-37,5%5008/230/2-b=70,0%Таблетки этамбутола гидрохлорида30000/10 0 40000/10 0 50000/10 0 Таблетки «Фтизоэтам»3623/76/14-d=403856/412/839,1A=385 мг/кг4008/214/670,2В=400 мг/кг    а=39,1%    b=70,2%Гранулы изониазида 0,15 и этамбутола гидрохлорида 0,157252/82/16-d=407674/66/842,9А=767 мг/кг8008/214/287,5В=800 мг/кг    а=42,9%    b=87,5%* - в таблице приведены дозы лекарственных препаратов в пересчете на действующее вещество

Таблица 3
Результаты определения содержания лекарственных веществ в крови крысОпределяемое лекарственное веществоСодержание действующих веществ в крови (мкг/кг) через, (час)0,5123691224Изониазид в таблетках190,4±0,17139,7±0,14121,7±0,19109,5±0,230,60±0,05---Этамбутола гидрохлорид в таблетках81,5±0,66130,5±0,53140,92±0,68154,1±0,40128,0±0,62116,6±0,5138,4±0,56-Изониазид в таблетках «Фтизоэтам»120,3±0,15140,8±0,10110,8±0,2085,9±0,900,52±0,14---Этамбутола гидрохлорид в таблетках «Фтизоэтам»70,8±0,30110,2±0,14135,9±0,40120,4±0,53108,0±0,7080,9±0,4544,5±0,30-Изониазид в гранулах100,8±0,28123,7±0,30156,1±0,41131,3±0,32114,2±0,2980,6±0,1766,7±0,141,78±0,21Этамбутола гидрохлорид в гранулах75,4±0,4988,3±0,65109,4±0,69118,9±0,37124,7±0,66130,9±0,5177,5±0,3258,1±0,54

Таблица 4
Фармакокинетические характеристики лекарственных веществ после однократного перорального введенияОпределяемое лекарственное веществоФармакокинетические параметрыV, млK_el, ч^-1Cl, мл/чТ1/2, чAUC∞, мг·ч/млF, %Изониазид в таблетках637,50,95605,60,7338,86100,0Изониазид в таблетках «Фтизоэтам»630,90,75428,81,4288,52102,0Изониазид в гранулах628,40,20125,73,47206,10105,0Этамбутола гидрохлорид в таблетках254,00,1333,025,3391,12100,0Этамбутола гидрохлорид в таблетках «Фтизоэтам»390,40,1029,712,8105,14101,4Этамбутола гидрохлорид в гранулах402,40,0518,2720,12146,45104,6

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и медицины и касается фармацевтического состава, обладающего противотуберкулезной активностью и пригодного для лечения туберкулеза. Состав обладает туберкулостатической активностью по отношению к изониазид-устойчивым М.tuberculosis, а также усиливает специфическое фармакологическое действие изониазида и этамбутола гидрохлорида за счет синергизма. Состав выполнен в виде гранул, содержащих компоненты в следующих количествах в граммах: изониазид 0,3000, этамбутол гидрохлорид 0,3000, пектин 0,3000. Состав обладает высокой туберкулостатической активностью, гораздо более низкой токсичностью и уменьшенными побочными эффектами входящих в него ингредиентов: изониазида и этамбутола гидрохлорида. 1 з.п. ф-лы, 4 табл.

1. Комбинированный фармацевтический состав, содержащий в качестве действующих веществ противотуберкулезные средства изониазид и этамбутола гидрохлорид, отличающийся тем, что вспомогательным веществом является пектин, снижающий токсичность композиции, и обеспечивает пролонгированный эффект лекарственных веществ, входящих в него в следующих соотношениях, г:

Изониазида0,30Этамбутола гидрохлорида0,30Пектина0,30