ДИМЕТИЛОВЫЙ ЭФИР 2-[(2-МЕТИЛФЕНИЛ) ИМИНО]-9-ОКСО-7-ФЕНИЛ-8-(3-ФЕНИЛ-2-ХИНОКСАЛИНИЛ)-1,6-ДИОКСАСПИРО[4.4]-НОН-3,7-ДИЕН-3,4-ДИКАРБОНОВОЙ КИСЛОТЫ, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ АНТИНОЦИЦЕПТИВНУЮ АКТИВНОСТЬ, И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 2015 года по МПК C07D493/10 A61K31/343 A61P29/00 

Изобретение относится к области органической химии, к разработке метода синтеза труднодоступных замещенных диметиловых эфиров 9-оксо-1,6-диоксаспиро[4.4]нон-3,7-диен-3,4-дикарбоновых кислот, а именно к диметиловому эфиру 2-[(2-метилфенил)имино]-9-оксо-7-фенил-8-(3-фенил-2-хиноксалинил)-1,6-диоксаспиро[4.4]нон-3,7-диен-3,4-дикарбоновой кислоты формулы (1)

проявляющему антиноцицептивную активность, который может найти применение в медицине в качестве лекарственного препарата. В качестве эталона сравнения биологической активности был взят метамизол натрия [М.Д. Машковский. Лекарственные средства. - М.: Новая волна, 2010. - С.164].

Известен структурный аналог заявляемым соединениям - диметиловый эфир 5'-(циклогексилимино)-4,6-диметил-3-оксоспиро[бензофуран-2(3H), 2'(5'H)фуран]-3',4,-дикарбоновой кислоты (2), получаемый трехкомпонентным синтезом 4,6-диметилбензофуран-2,3-диона, циклогексилизоцианида и диметилового эфира ацетилендикарбоновой кислоты [Esmaeili A.A., Vesalipoor H. Reaction of Isocyanides, Diakyl Acetylenedicarboxylates, and α-KetoLactones: Unexpected Participation of an Esters Carbonyl Group in the Isocyanide-Based Three-Component Reaction / Synthesis, 2009. №10. P.1635-1638]. Биологическая активность структурного аналога неизвестна.

Синтез структурного аналога осуществляется по следующей схеме:

К недостаткам данного способа-прототипа относится невозможность получения диметилового эфира 2-[(2-метилфенил)имино]-9-оксо-7-фенил-8-(3-фенил-2-хиноксалинил)-1,6-диоксаспиро[4.4]нон-3,7-диен-3,4-дикарбоновой кислоты.

Задачей данного изобретения является разработка метода синтеза неописанного ранее диметилового эфира 2-[(2-метилфенил)имино]-9-оксо-7-фенил-8-(3-фенил-2-хиноксалинил)-1,6-диоксаспиро[4.4]нон-3,7-диен-3,4-дикарбоновой кислоты (1), проявляющего антиноцицептивное действие и обладающего более низкой токсичностью, чем известные лекарственные средства.

Поставленная задача осуществляется путем трехкомпонентного синтеза 4-(3-фенилхноксалин-2-ил)-5-фенилфуран-2,3диона, диметилового эфира ацетилендикарбоновой кислоты и о-метилфенилизонитрила по схеме

Технический результат - расширение арсенала средств воздействия на живой организм.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Получение соединения (1). Раствор 1,1 ммоль о-метилфенил изоцианида в 10 мл абсолютного 1,2-дихлорэтана охлаждали до -10°C, прикапывали раствор 1 ммоль 4-(3-фенилхиноксалин-2-ил)-5-фенилфуран-2,3-диона и 1,1 ммоль диметилового эфира ацетилендикарбоновой кислоты в 10 мл абсолютного 1,2-дихлорэтана, охлажденный до -10°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Растворитель удаляли, остаток затирали из этилового спирта, перекристаллизовывали из этилового спирта. Выход 0,54 г (84%). Т_пл=145-147°C. Найдено, %: C 71.50; H 4.35; N 6.66. C₃₈H₂₇N₃O₇. Вычислено, %: C 71.58; H 4.27; N 6.59. ИК спектр (ФСМ 1201, вазелиновое масло, ν, см^-1): 1752 (CO₂Me), 1736 (CO₂Me), 1723 (C=O), 1687 (C=N). Спектр ЯМР ¹H (Varian Mercury 300 (300 MHz), ДМСО-d₆, ГМДС, δ, м.д.): 2.13 с (3H, CH₃), 3.85 с (3H, CH₃O), 3.99 с (3H, CH₃O), 7.05-8.22 м (18H, 2C₆H₄+2C₆H₅). Масс-спектр, m/z (I_отн., %): 637 (100) [M]⁺.

Полученное соединение (1) представляет собой желтое кристаллическое вещество нерастворимое в воде, гексане, труднорастворимое в этиловом спирте, легкорастворимое в ДМСО и хлороформе.

Пример 2. Острая токсичность соединения (1). Острую токсичность (ЛД₅₀, мг/мл) соединения (1) изучали на белых мышах (самках) массой 16-18 г при однократном внутрибрюшинном введении. За животными вели наблюдение в течение 10 суток, фиксируя поведение, интенсивность и характер двигательной активности, наличие и характер судорог, координацию движений, тонус скелетной мускулатуры, реакции на тактильные, звуковые и световые раздражители, частоту и глубину дыхательных движений, ритм сердечных сокращений, состояние волосяного и кожного покрова, окраску видимых слизистых оболочек, потребление воды и пищи, изменение массы тела.

Рассчитывали острую токсичность, соблюдая рекомендации государственного фармакологического комитета по изучению общетоксического действия биологически активных веществ [Методические рекомендации по изучению общетоксического действия фармакологических средств. Утв. 25.12.97./ Вестн. фармакоп. комитета. - 1998. - №1. - С.27-32.].

Для исследуемого соединения (1) ЛД₅₀ составляет >1500 мг/кг. Согласно классификации токсичности препаратов соединение (1) относятся к V классу практически нетоксичных препаратов [Измеров Н.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов. - М.: Медицина, 1977. - С.196], тогда как у метамизола натрия

Пример 3. Антиноцицептивная активность соединения (1)

Оценку антиноцицептивной (анальгетической) активности соединения 1 изучали на беспородных мышах массой 18-22 грамм методом «уксусные корчи». Исследуемые вещества вводили в дозе 25 мг/кг, в/б в виде взвеси в 2% крахмальной слизи за 30 минут до в/б введения 0,75% раствора уксусной кислоты (0,1 мл/10 грамм массы тела). В течение последующих 15 минут после инъекции подсчитывали количество корчей для каждого животного. Уменьшение количества корчей у животных по сравнению с контрольной группой являлось показателем анальгетической активности веществ. Антиноцицептивную активность выражали в процентах снижения числа уксусных корчей у опытных животных по сравнению с контрольными группами. Каждое соединение исследовали на 6 животных.

Статистическую обработку экспериментального материала проводили с использованием t критерия Стьюдента [Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - 2-е изд. - Л., 1963. - С.152]. Эффект считали достоверным при p<0,05.

Пример 4. Антиноцицептивная активность соединения (1).

Антиноцицептивную активность соединения (1) изучали на беспородных мышах массой 18-22 г с помощью теста «горячая пластинка» [Radell Z.O., Selitto J.J. A method for measurement of analgesic activity on inflamed tissue. // Arch. Intermat. Pharmacodun. Et ther. 1957. - Vol.11. - №4 - S.409-419].

Исследуемое соединение вводили внутрибрюшинно в виде 2% крахмальной слизи в дозе 50 мг/кг за 0,5 ч до помещения животных на нагретую до 53,5°C металлическую пластинку. Показателем болевой чувствительности служила длительность пребывания животного на горячей пластинке до момента облизывания задних лапок, измеряемая в секундах. В качестве этанола сравнения анальгетической активности взят метамизол натрия [М.Д. Машковский. Лекарственные средства.- М.: Новая волна, 2010. - С.164]. Результаты испытаний представлены в таблице.

Таблица 1 Антиноцицептивная активность соединения (1) по методам «горячая пластинка» и «уксусные корчи» № п/п Шифр соединения Доза мг/кг, путь введения в/б «Горячая пластинка» «Уксусные корчи» Время оборонительного рефлекса через 120 мин. Количество корчей % уменьшения корчей к контролю Активность % 1 Контроль 2% крахм., слизь 50 10,10±1,32       25   25,20±2,32 100   2 Метамизол натрия 93 (ЕД₅₀) 16,33±3,02 p<0,1       55   10,06±1,38 42,6 57,9 3 1 50 31,00±3,36 p<0,05       25   11,60±1,50 46,03 53,97

Как видно из таблицы, заявляемое соединение (1) проявляет выраженную антиноцицептивную активность, практически не токсично. Следовательно, заявляемое соединение (1) может найти применение в медицинской практике в качестве анальгетического лекарственного средства.

Изобретение относится к новому соединению, а именно диметиловому эфиру 2-[(2-метилфенил)имино]-9-оксо-7-фенил-8-(3-фенил-2-хиноксалинил)-1,6-диоксаспиро[4.4]нон-3,7-диен-3,4-дикарбоновой кислоты формулы (1),

обладающему антиноцицептивной активностью, и способу его получения,

заключающемуся в трехкомпонентном синтезе 4-(3-фенилхиноксалин-2-ил)-5-фенилфуран-2,3-диона, диметилового эфира ацетилендикарбоновой кислоты и o-метилфенилизонитрила. 2 н.п. ф-лы, 1 табл., 4 пр.

1. Диметиловый эфир 2-[(2-метилфенил)имино]-9-оксо-7-фенил-8-(3-фенил-2-хиноксалинил)-1,6-диоксаспиро[4.4]нон-3,7-диен-3,4-дикарбоновой кислоты формулы (1)

обладающий антиноцицептивной активностью.

2. Способ получения диметилового эфира 2-[(2-метилфенил)имино]-9-оксо-7-фенил-8-(3-фенил-2-хиноксалинил)-1,6-диоксаспиро[4.4]нон-3,7-диен-3,4-дикарбоновой кислоты (1)

характеризущийся тем, что осуществляют трехкомпонентный синтез 4-(3-фенилхиноксалин-2-ил)-5-фенилфуран-2,3-диона, диметилового эфира ацетилендикарбоновой кислоты и о-метилфенилизонитрила.