ПРОИЗВОДНОЕ 23-ИН-ВИТАМИНА D Российский патент 2015 года по МПК C07C401/00 A61K31/593 A61P19/10 C07F7/18 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к производному витамина D₃ или его медицински приемлемому сольвату, которые применимы в качестве лекарственного средства, к терапевтическому средству с использованием их, к фармацевтической композиции, включающей их, и к промежуточному соединению для их получения. Конкретнее, настоящее изобретение относится к производному 23-ин-витамина D₃ или его медицински приемлемому сольвату, к фармацевтической композиции, включающей их, к включающему их в качестве активного ингредиента терапевтическому средству против остеопороза, злокачественной опухоли, псориаза, гиперпаратиреоза, воспалительного заболевания дыхательных путей, ревматоидного артрита, сахарного диабета, гипертензии, алопеции, акне или дерматита, и к промежуточному соединению для их получения.

Уровень техники

Активированные производные витамина D₃ регулируют ремоделирование костной ткани, состоящее из образования костной ткани и резорбции костной ткани, и показывают эффект повышения плотности костной ткани. Таким образом, они используются как ценные терапевтические средства в случае остеопороза. Однако такие активные производные витамина D₃, например, 1α,25-дигидроксивитамин D₃, не всегда показывают удовлетворительное повышение плотности минерального костного вещества. Когда дозу повышают для того, чтобы повысить плотность минерального костного вещества, происходит повышение уровня кальция в сыворотке, а не дополнительное повышение плотности минерального костного вещества, что вызывает повышение сывороточного показателя кальция в на 1 мг/л или более - величину, рассматриваемую как один из критериев, клинически нежелательных. Так, иногда имеют место случаи, когда достаточного эффекта повышения плотности минерального костного вещества не получают (международная публикация №WO 01/62723). Поэтому весьма желательно производное витамина D₃, которое проявляет сильное действие повышения плотности минерального костного вещества без возрастания показателя кальция в сыворотке. До сих пор синтезировано множество производных витамина D₃ в попытке получить такое производное, но пока еще не найдено какое-либо производное, которое имеет удовлетворительный профиль.

Раскрытие изобретения

Целью настоящего изобретения является новое производное витамина D₃ или его медицински приемлемый сольват, проявляющие желательное фармакологическое действие, отделенное от эффекта возрастания содержания кальция в крови.

Кроме того, целью настоящего изобретения является терапевтическое средство против остеопороза, злокачественной опухоли, псориаза, гиперпаратиреоза, воспалительного заболевания дыхательных путей, ревматоидного артрита, сахарного диабета, гипертензии, алопеции, акне или дерматита, включающее в качестве активного ингредиента производное витамина D₃ или его медицински приемлемый сольват.

Кроме того, целью настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, включающая производное витамина D₃ или его медицински приемлемый сольват.

И также целью настоящего изобретения является промежуточное соединение производного витамина D₃, подходящее для получения производного витамина D₃ или его медицински приемлемого сольвата.

Авторы настоящего изобретения провели кропотливое исследование для того, чтобы решить вышеуказанные проблемы, и в результате осуществили описанное далее изобретение.

Иными словами, настоящее изобретение относится к производному витамина D₃, представленному приведенной далее формулой (1), или его медицински приемлемому сольвату.

где

R₁ представляет собой атом водорода, алкильную группу с 1-6 атомами углерода, алкилкарбонилоксиалкильную группу, причем каждый алкил имеет 1-6 атомов углерода, или арилкарбонилоксиалкильную группу, причем арил имеет 6-10 атомов углерода и алкил имеет 1-6 атомов углерода; R₂ представляет собой атом водорода или алкильную группу с 1-6 атомами углерода или вместе с другим R₂ и атомом углерода, с которым они связаны, может образовывать циклическую алкильную группу с 3-6 атомами углерода; R₃ представляет собой алкильную группу с 1-6 атомами углерода или вместе с другим R₃ и атомом углерода, с которым они связаны, может образовывать циклическую алкильную группу с 3-6 атомами углерода; Х представляет собой атом кислорода или метиленовую группу; и n равен целому числу 1 или 2.

Кроме того, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей производное витамина D₃, представленное приведенной выше формулой (1), или его медицински приемлемый сольват и фармацевтически приемлемый носитель.

Кроме того, настоящее изобретение относится к терапевтическому средству против одного или нескольких заболеваний, выбранных из группы, включающей остеопороз, злокачественную опухоль, псориаз, гиперпаратиреоз, воспалительное заболевание дыхательных путей, ревматоидный артрит, сахарный диабет, гипертензию, алопецию, акне или дерматит, включающему в качестве активного ингредиента производное витамина D₃, представленное приведенной выше формулой (1), или его медицински приемлемый сольват.

И, кроме того, настоящее изобретение относится к промежуточному соединению для производного витамина D₃, представленному формулой (2)

,

где

R₂, X и n являются такими же, как в приведенной выше формуле (1); R₄ представляет собой R₁ в приведенной выше формуле (1), метоксим стильную группу, метоксиэтоксиметильную группу, тетрагидрофуранильную группу, тетрагидропиранильную группу или бензилоксиметильную группу; и R₅ представляет собой защитную группу для гидроксильной группы.

Согласно настоящему изобретению, предлагается новое производное витамина D₃ или его медицински приемлемый сольват, которые эффективны для лечения различных заболеваний, представленных остеопорозом, злокачественной опухолью, псориазом, гиперпаратиреозом, воспалительным заболеванием дыхательных путей, ревматоидным артритом, сахарным диабетом, гипертензией, алопецией, акне, дерматитом и т.п. Кроме того, получаемое промежуточное соединение, представленное приведенной выше формулой (2), применимо для получения производного витамина D₃ и т.п. по настоящему изобретению.

Осуществление изобретения

Термины, используемые в настоящем изобретении, определяются так, как описано далее.

«Алкильная группа» обозначает линейную, разветвленную или циклическую алифатическую углеводородную группу. Алкильная группа с 1-6 атомами углерода конкретно включает, например, метильную группу, этильную группу, изобутильную группу, трет-бутильную группу, пентильную группу, изопентильную группу, гексильную группу, циклопропильную группу, циклопропилметильную группу и циклогексильную группу.

«Алкилкарбонилоксиалкильная группа» конкретно включает трет-бутилкарбонилоксиметильную группу.

«Арилкарбонилоксиалкильная группа» конкретно включает фенилкарбонилоксиметильную группу.

В приведенной выше формуле (1) R₁ представляет собой атом водорода, алкильную группу с 1-6 атомами углерода, алкилкарбонилоксиалкильную группу, причем каждый алкил имеет 1-6 атомов углерода, или арилкарбонилоксиалкильную группу, причем арил имеет 6-10 атомов углерода и алкил имеет 1-6 атомов углерода. Из них предпочтительными являются атом водорода, метильная группа, этильная группа, пропильная группа, изопропильная группа или трет-бутильная группа; и особенно предпочтительны атом водорода или изопропильная группа. Как алкилкарбонилоксиалкильная группа предпочтительной является трет-бутилкарбонилоксиметильная группа. Кроме того, предпочтительной в качестве арилкарбонилоксиалкильной группы является фенилкарбонилоксиалкильная группа.

В приведенной выше формуле (1) R₂ представляет собой атом водорода или алкильную группу с 1-6 атомами углерода или вместе с другим R₂ и атомом углерода, с которым они связаны, может образовывать циклическую алкильную группу с 3-6 атомами углерода. Из них R₂ предпочтительно представляет собой атом водорода или метильную группу; или, когда R₂ вместе с другим R; и атомом углерода, с которым они связаны, образует циклоалкильную группу, предпочтительной является циклопропильная группа.

В приведенной выше формуле (1) R₃ представляет собой алкильную группу с 1-6 атомами углерода или вместе с другим R₃ и атомом углерода, с которым они связаны, может образовывать циклическую алкильную группу. В качестве алкильной группы с 1-6 атомами углерода предпочтительными являются метальная группа и этильная группа. Кроме того, когда R₃ вместе с другим R₃ и атомом углерода, с которым они связаны, образует циклоалкильную группу, предпочтительной является циклопентильная группа.

Кроме того, в приведенной выше формуле (1) Х представляет собой атом кислорода или метиленовую группу.

Кроме того, в приведенной выше формуле (1) n равен целому числу 1 или 2, где особенно предпочтительно, n равен 1.

В качестве предпочтительного конкретного примера производного витамина D₃ по настоящему изобретению, представленного формулой (1), можно упомянуть соединения, указанные в следующей далее таблице.

Таблица 1 Соединение № R₁ R₂ R₃ Х n C-1 Атом водорода Атом водорода Метальная группа Атом кислорода 1 С-2 Метальная группа Атом водорода Метальная группа Атом кислорода 1 С-3 Этильная группа Атом водорода Метальная группа Атом кислорода 1 С-4 Пропильная группа Атом водорода Метальная группа Атом кислорода 1 С-5 Изопропильная группа Атом водорода Метальная группа Атом кислорода 1 С-6 трет-Бутильная Атом водорода Метальная Атом кислорода 1

  группа   группа     C-7 трет-Бутилкарбонил-оксим стильная группа Атом водорода Метильная группа Атом кислорода 1 С-8 Фенилкарбонил-оксиметильная группа Атом водорода Метильная группа Атом кислорода 1 D-1 Атом водорода Атом водорода Метильная группа Метиленовая группа 1 D-2 Метильная группа Атом водорода Метильная группа Метиленовая группа 1 D-3 Этильная группа Атом водорода Метильная группа Метиленовая группа 1 D-4 Пропильная группа Атом водорода Метильная группа Метиленовая группа 1 D-5 Изопропильная группа Атом водорода Метильная группа Метиленовая группа 1 D-6 трет-Бутильная группа Атом водорода Метильная группа Метиленовая группа 1 Е-1 Атом водорода Циклопропил Метильная группа Атом кислорода 1 Е-2 Метильная группа Метильная группа Метильная группа Атом кислорода 1 F-1 Атом водорода Атом водорода Этильная группа Атом кислорода 1 F-2 Атом водорода Атом водорода Циклопентил Атом кислорода 1

При необходимости производное витамина Ds по настоящему изобретению можно превратить в медицински приемлемый сольват. Такой растворитель включает воду, метанол, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол, бутанол, трет-бутанол, ацетонитрил, ацетон, метилэтилкетон, хлороформ, этилацетат, диэтиловый эфир, трет-бутилметиловый эфир, бензол, толуол, ДМФА, ДМСО и подобные растворители. В особенности как предпочтительные растворители можно упомянуть воду, метанол, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол, ацетонитрил, ацетон, метилэтилкетон и этилацетат.

Кроме того, R₅ в приведенной выше формуле (2) представляет собой защитную группу для гидроксильной группы. Защитная группа для гидроксильной группы включает метоксиметильную группу, ацильную группу с 1-3 атомами углерода (указанное число атомов углерода включает углерод карбонила), триметилсилильную группу, триэтилсилильную группу, трет-бутилдиметилсилильную группу, трет-бутилдифенилсилильную группу- и подобные группы. Из них как предпочтительные примеры можно назвать триэтилсилильную группу и трет-бутилдиметилсилильную группу.

Кроме того, R₄ в приведенной выше формуле (2) представляет собой R₁ в приведенной выше формуле (1) или представляет собой метоксиметильную группу, метоксиэтоксиметильную группу, тетрагидрофуранильную группу, тетрагидропиранильную группу или бензилоксиметильную группу. Из них предпочтительными являются метильная группа, этильная группа, пропильная группа, изопропильная группа; или трет-бутильная группа, трет-бутилкарбонилоксиметильная группа, фенилкарбонилоксиалкильная группа или бензилоксиметильная группа.

Кроме того, в приведенной выше формуле (2) n равен целому числу 1 или 2, при этом особенно предпочтительный n равен 1.

Синтез производного витамина D₃, представленного приведенной выше формулой (1), можно выполнить любым способом, но можно осуществить, например, так, как описано на следующей далее схеме 1. Иными словами, после того, как соединение (2) и соединение (3) подвергают реакции сочетания, группу, защищающую гидроксильную группу, удаляют, и при необходимости сложноэфирную группу гидролизуют, и получают целевой материал (1).

Схема 1

В формулах на приведенной выше схеме реакции R₁-R₅ в соединении (1) и соединении (2) являются такими же, как в приведенных выше формулах (1) и (2). Кроме того, в формулах на приведенной выше схеме реакции R₃ в соединении (3) являются такими же, как в приведенной выше формуле (1). Кроме того, OPG в соединении (3) представляет собой защищенную гидроксильную группу. Конкретно защитная группа включает триметилсилильную группу, триэтилсилильную группу и метоксиметильную группу.

Когда на приведенной выше схеме 1 R₂ представляет собой атом водорода, соединение (2) можно синтезировать из ен-инового соединения (4) согласно следующей далее схеме 2, причем ен-иновое соединение (4) описано, например, в литературе (Takayama et al., «Vitamin D Analog in Cancer Prevention and Therapy», Recent Results in Cancer Research, Vol.164, Springer, pp.289-317, 2003; и т.п.). Иными словами, путем селективного удаления защитной группы (трет-бутилдиметилсилильной группы - группы TBS) из первичной гидроксильной группы (4) получают соединение (5). Затем гидроксильную группу (5) окисляют до карбоксильной группы, которую впоследствии этерифицируют, и получают нужное соединение (2) (R₂=TBS).

Схема 2

Между тем, когда на приведенной выше схеме 1 R₃ представляет собой метальную группу, соединение (3) можно синтезировать так, как описано на следующей далее схеме 3.

Иными словами, соединение (3) можно получить бромметилированием соединения (6), причем последнее соединение описано в литературе (например, в патенте США №4804502).

Схема 3

Кроме того, из производных витамина D₃, представленных приведенной выше формулой (1), соединение, в котором R₂ представляет собой атом водорода, кроме как по описанной выше схеме 1, также можно синтезировать согласно способу, показанному на приведенной далее схеме 4. Иными словами, в соединение (5) на схеме 2 вводят защитную пивалоильную группу, и получают соединение (7), которое подвергают сочетанию с соединением (3) на схеме 1, и удаляют группу, защищающую гидроксильную группу на конце заместителя, присоединенного в положении 2 цикла А, и получают соединение (8).

Гидроксильную группу полученного соединения окисляют до карбоновой кислоты, и наконец, все группы, защищающие гидроксильные группы, удаляют и получают соединение (1) (R₂=Н).

Схема 4

Кроме того, когда на приведенной выше схеме 1 R₂ является замещенным, например, когда R₂ в соединении (2) образует циклоалкильную группу вместе с другим R₂ и атомом углерода, с которым они связаны, соединение (10) получают эпоксидированием коммерческого 4,6-O-бензилиден-α-O-метилглюкопиранозида (9), который используют в качестве исходного материала, и затем осуществляют раскрытие цикла эпоксида в щелочной среде таким же способом, как ен-инового соединения (4), описанного в литературе (Takayama et al., «Vitamin D Analog in Cancer Prevention and Therapy», Recent Results in Cancer Research, Vol. 164, Springer, pp.289-317, 2003; и т.п.). После получения соединения (11) путем защиты гидроксильных групп соединения (10), осуществляют раскрытие бензилиденового цикла и далее восстановление 1-положения глюкозы, и получают соединение (12). Затем получают эпоксид из диольной части, и получают соединение (13), после чего следует взаимодействие эпоксида с ацетиленом с образованием соединения (14), имеющего введенную тройную связь. Защищая подходящим образом гидроксильные группы, можно получить соединение (15). Путем сочетания соединения (15) и цикла CD промежуточного соединения (3), описанного на схеме 1, и селективного удаления защитной группы получают соединение (16). Далее, путем окисления первичной гидроксильной группы до карбоксильной и последующего удаления защитных групп из гидроксильных групп можно получить нужное соединение (1).

Схема 5

Терапевтическое средство против остеопороза и т.п., включающее в качестве активного ингредиента производное витамина D₃ или его медицински приемлемый сольват по настоящему изобретению, получают с использованием носителя, наполнителя и других добавок, обычно используемых в композициях лекарственных средств. Носитель и наполнитель для лекарственного препарата могут быть твердыми или жидкими и включают, например, лактозу, стеарат магния, крахмал, тальк, желатин, агар, аравийскую камедь, оливковое масло, сезамовое масло, масло какао, этиленгликоль и т.п.; и другие обычно используемые материалы. Тип введения может быть или пероральным введением посредством таблеток, пилюль, капсул, гранул, порошка, жидкостей и т.п.; или парентеральным введением посредством инъекций, таких как внутривенная инъекция, внутримышечная инъекция и т.п., суппозиториев, трансдермальных лекарственных средств и т.п.

В терапевтическом средстве по настоящему изобретению терапевтически эффективное количество активного ингредиента изменяется в зависимости от способа введения, возраста и пола пациента и степени заболевания. Однако оно, как правило, составляет примерно 0,01-10 мкг/сутки, и число введений, как правило, составляет 1-3 раз/сутки или 1-3 раз/неделя. Таким образом, предпочтительно получают композицию, удовлетворяющую таким условиям.

Примеры

Далее настоящее изобретение будет описываться подробнее с обращением к примерам. Однако следует иметь в виду, что не предполагается ограничение ими настоящего изобретения. Кроме того, в настоящем изобретении используются следующие аббревиатуры:

TBS = трет-бутилдиметилсилильная группа;

TES = триэтилсилильная группа;

TESCl = хлортриэтилсилан;

TMS = триметилсилильная группа;

TMSCl = хлортриметилсилан;

Piv = пивалоильная группа;

PivCl = пивалоилхлорид;

TBAF = фторид тетрабутиламмония;

CSA = (+/-)-камфор-10-сульфоновая кислота;

PDC = дихромат пиридиния;

TBSOTf = трет-бутилдиметилсилилтрифторметансульфонат;

DIBAL = гидрид дибутилалюминия;

ДМФА = N,N-диметилформамид;

ТГФ = тетрагидрофуран;

TsCl = п-толуолсульфонилхлорид; и

Ts = п-толуолсульфонил.

Пример 1

Получение (5Z,7Е)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-карбоксиэтокси)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триола (соединение С-1)

(1) Соединение А-1 (2,29 г, 4,11 ммоль), известное из литературы (например, из Kittaka et al., J. Org. Chem., 69, 7463-7471 (2004)), растворяют в этаноле (20 мл), к раствору при охлаждении льдом добавляют (+/-)-камфор-10-сульфоновую кислоту (954 мг, 4,11 ммоль), и смесь перемешивают при 0°C в течение 1 часа. Реакцию обрывают путем добавления насыщенного водного раствора гидрокарбоната натрия, и смесь разбавляют этилацетатом. Смесь промывают водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, и органический слой сушат над сульфатом натрия. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 9/1), и получают соединение А-2 (1,64 г, выход 90%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 5,96-5,88 (1Н, м), 5,27-5,21 (2Н, м), 4,29 (1Н, дд, J=6,8, 3,9 Гц), 3,88-3,72 (5Н, м), 3,45 (1Н, дд, J=5,4, 4,1 Гц), 3,00 (1Н, т, J=6,0 Гц), 2,50-2,46 (1Н, м), 2,38-2,33 (1Н, м), 2,01 (1Н, т, J=2,6 Гц), 1,85-1,68 (2Н, м), 0,91 (9Н, с), 0,91 (9Н, с), 0,10 (9Н, с),0,07(3Н, с).

(2) Соединение А-2 (1,0 г, 2,26 ммоль), полученное в (1), растворяют в пиридине (10 мл), и после добавления пивалоилхлорида (0,69 мл, 5,65 ммоль) при 0°C, реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре. К смеси добавляют безводный метанол (3 мл), и смесь перемешивают при комнатной температуре еще в течение 30 минут.

Добавляют толуол, и смесь концентрируют при пониженном давлении. К полученному остатку добавляют этилацетат, смесь промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 9/1), и получают соединение А-3 (1,072 г, выход 90%).

¹Н-ЯМР (CDCl) δ: 5,95 (1Н, ддд, J=17,0, 11,0, 6,0 Гц), 5,21 (1Н, ддд, J=17, 2,0,1,0 Гц), 5,14 (1Н, ддд, J=11,0, 2,0, 1,0 Гц), 4,32-4,28 (1Н, м), 4,18-4,10 (2Н, м), 3,86 (1Н, к, J=5,6 Гц), 3,81-3,74 (1Н, м), 3,68-3,60 (1Н, м), 3,39 (1Н, дд, J=5,4, 3,4 Гц), 2,49 (1Н, дк, J=17,0, 2,7 Гц), 2,35 (1Н, дк, J=16,9, 2,8 Гц), 1,96 (1Н, т, J=2,7 Гц), 1,87 (2Н, дт, J=14,0, 7,0 Гц), 1,19 (9Н, с), 0,90 (9Н, с), 0,89 (9Н, с), 0,10 (3Н, с), 0,08 (3Н, с), 0,07 (5Н, с), 0,03 (3Н, с).

(3) Бромид (брометил)трифенилфосфония (1,25 г, 2,87 ммоль) растворяют в тетрагидрофуране (7 мл), и раствор охлаждают до 0°C в атмосфере азота. К раствору добавляют бис(триметилсилил)амид натрия (1,0 М раствор в тетрагидрофуране, 2,90 мл, 2,87 ммоль), и смесь перемешивают при охлаждении льдом в течение 30 минут. Реакционную смесь охлаждают до -78°C, и к ней добавляют раствор соединения В-1 (200 мг, 0,574 ммоль), растворенное в тетрагидрофуране (1,5 мл), причем указанное соединение известно из литературы (например, из Uskokovic et al., патент США №4804502). После перемешивания при -78°C в течение 1 часа смесь еще в течение 1 часа перемешивают при 0°C. К реакционной смеси добавляют силикагель (2,5 г), и после энергичного перемешивания при комнатной температуре в течение 10 минут смесь фильтруют через целит. Полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении, остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 9/1), и получают соединение В-2 (161 мг, выход 67%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 5,65 (1Н, с), 2,90-2,86 (1Н, м), 2,28-1,24 (20Н, м), 1,08 (3Н, д, J=6,3 Гц), 0,58 (3Н, с), 0,18 (9Н, с).

(4) Соединение В-2 (1,2 г, 2,82 ммоль), полученное в (3), растворяют в тетрагидрофуране (10 мл), к раствору добавляют фторид тетрабутиламмония (1 М раствор в тетрагидрофуране, 4,23 мл, 4,23 ммоль), и смесь перемешивают при 50°c в течение 30 минут. Добавляют этилацетат, смесь промывают водой, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, и полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 19/1). Очищенный материал растворяют в безводном пиридине (10 мл), и раствор охлаждают до 0°C в атмосфере азота. К раствору добавляют хлортриэтилсилан (0,944 мл, 5,70 ммоль), и смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2,5 часов. Реакционную смесь охлаждают до 0°C, и после добавления насыщенного водного раствора хлорида аммония и воды выполняют экстракцию толуолом. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 99/1), и получают соединение В-3 (783 мг, выход 88%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 5,65 (1Н, с), 2,92-2,85 (1Н, м), 2,23 (1Н, дд, J=16,5, 3,4 Гц), 2,07-1,24 (19Н, м), 1,08 (3Н, д, J=6,6 Гц), 0,96 (9Н, т, J=7,9 Гц), 0,66 (6Н, к, J=7,9 Гц), 0,57 (3Н, с).

(5) Соединение В-3 (783 мг, 1,67 ммоль), полученное в (4), и соединение А-3 (733 мг, 1,39 ммоль), полученное в (2). растворяют в смеси безводный толуол/триэтиламин (1/1, 11,1 мл), к полученной смеси добавляют тетракис(трифенилфосфин)палладий (289 мг, 0,25 ммоль), и смесь перемешивают в атмосфере азота при 105°C в течение 2 часов. После охлаждения до комнатной температуры к смеси добавляют диамин-силикагель (производство Fuji Silysia Chemical Ltd., 6 г) и н-гексан (20 мл), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем смесь фильтруют с использованием этилацетата, полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении, и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 100/0 → 95/5). Полученный очищенный материал безводном тетрагидрофуране (5,5 мл) и безводном метаноле (4,6 мл), к раствору добавляют раствор метоксида натрия в метаноле (0,91 мл, 5,46 ммоль), и смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1 часа. Добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония, и смесь концентрируют при пониженном давлении. К полученному остатку добавляют этилацетат, смесь промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 100/0 → 50/50), и получают соединение АВ-1 (609 мг, выход 67%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,18 (1Н, д, J=11,2 Гц), 6,02 (1Н, д, J=11,2 Гц), 5,30 (1Н, ушс), 5,00 (1Н, ушс), 4,46 (1Н, ушс), 4,05 (1Н, м), 3,88-3,69 (4Н, м), 3,36 (1Н, ушс), 2,94 (1Н, ушс), 2,83-2,77 (1Н, м), 2,62-2,56 (1Н, м), 2,24 (1Н, дд, J=16,5, 3,4 Гц), 2,10 (1Н, дд, J=13,9, 4,4 Гц), 2,06-1,21 (21Н, м), 1,07 (3Н, д, J=6,6 Гц), 0,96 (9Н, т, J=7,9 Гц), 0,93 (9Н, с), 0,87 (9Н, с), 0,67 (6Н, к, J=7,9 Гц), 0,55 (3Н, с), 0,10 (3Н, с), 0,10 (3Н, с), 0,08 (3Н, с), 0,07 (3Н, с).

(6) Соединение АВ-1 (427 мг, 0,514 ммоль), полученное в (5), растворяют в безводном дихлорметане (5,2 мл), и раствор охлаждают до 0°C. Затем добавляют реагент Десса-Мартина (523 мг, 1,23 ммоль), и после перемешивания при охлаждении льдом в течение 2 часов смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 1 часа. К смеси добавляют насыщенный водный раствор тиосульфата натрия и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, и смесь экстрагируют дихлорметаном. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток растворяют в трет-бутаноле (21 мл), к раствору добавляют тетрагидрофуран (37 мл) и 2-метил-2-бутен (6,47 мл), и смесь охлаждают на льду. Добавляют водный раствор (7,3 мл) гипохлорита натрия (чистота 80%, 580 мг, 5,14 ммоль) и дигидрат дигидрофосфата натрия (400 мг, 2,57 ммоль), и смесь перемешивают при охлаждении льдом в течение 45 минут. К смеси добавляют насыщенный водный раствор тиосульфата натрия и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, и смесь экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушат над безводным сульфатом натрия. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 100/0 → 80/20), и получают соединение АВ-2 (341 мг, выход 78%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,22 (1Н, д, J=11,2 Гц), 6,00 (1Н, д, J=11,2 Гц), 5,27 (1Н, ушс), 4,99 (1Н, ушс), 4,45 (1Н, ушс), 4,07 (1Н, м), 3,91 (2Н, т, J=6,1 Гц), 3,36 (1Н, ушс), 2,84-2,77 (1Н, м), 2,64 (2Н, д, J=6,1, 1,5 Гц), 2,60-2,53 (1Н, м), 2,24 (1Н, дд, J=16,5, 3,4 Гц), 2,13 (1Н, дд, J=13,9, 5,4 Гц), 2,07-1,21 (19Н, м), 1,07 (3Н, д, J=6,3 Гц), 0,96 (9Н, т, J=7,9 Гц), 0,90 (9Н, с), 0,87 (9Н, с), 0,67 (6Н, к, J=7,9 Гц), 0,55 (3Н, с), 0,09 (3Н, с), 0,09 (6Н, с), 0,07 (3Н, с).

(7) Соединение АВ-2 (140 мг, 0,165 ммоль), полученное в (6), растворяют в ацетоне (1,65 мл), и раствор охлаждают до 0°C. Затем добавляют разбавленный раствор (1,65 мл) хлороводородной кислоты (6 N, 0,332 мл) в ацетоне, и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 часов. К смеси добавляют н-гексан (3,3 мл), и смесь предварительно очищают хроматографией на силикагеле (н-гексан/ацетон = 1/1) и тонкослойной хроматографией на силикагеле (н-гексан/ацетон = 4/5) и дополнительно очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (А = 0,1% муравьиной кислоты/1% метанола/4% ацетонитрила/вода; В = 0,1% муравьиной кислоты/5% воды/19% метанола/ацетонитрил; 0-2 мин: В=20%, 2-20 мин: В=20% → 98%, 20-25 мин: В=98%, 25-30 мин: В=20%), и получают соединение С-1 (34,9 мг, выход 42%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,42 (1Н, д, J=11,2 Гц), 6,00 (1Н, д, J=11,2 Гц), 5,39 (1Н, д, J=1,9 Гц), 5,09 (1Н, д, J=1,9 Гц), 4,50 (1Н, д, J=2,9 Гц), 4,36-3,58 (6Н, м), 3,35 (1Н, дд, J=8,1, 3,2 Гц), 2,86-2,79 (1Н, м), 2,72-2,57 (3Н, м), 2,29-2,19 (2Н, м), 2,04-1,20 (19Н, м), 1,06 (3Н, д, J=6,6 Гц),0,54(3Н, с).

Пример 2

Получение (5Z,7E)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-метоксикарбонилэтокси)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триола (соединение С-2)

(1) Соединение А-2 (1,45 г, 3,27 ммоль), полученное в примере 1 (1), растворяют в безводном диметилформамиде (15 мл), к раствору добавляют дихромат пиридиния (6,17 г, 16,4 ммоль), и смесь перемешивают в течение 12 часов. Добавляют воду, смесь экстрагируют этилацетатом, и полученный органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (20% этилацетата/н-гексан), и получают соединение А-4 (0,82 г, выход 55%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 5,90 (1Н, ддд, J=17,0, 6,0, 11,0 Гц), 5,30-5,20 (2Н, м), 4,33 (1Н, ддт, J=7,0, 3,0, 1,0 Гц). 3,96 (2Н, тд, J=6,0, 1,2 Гц), 3,85-3,75 (1Н, м), 3,55 (1Н, дд, J=6,3, 3,7 Гц), 2,63 (2Н, тд, J=5,9, 1,9 Гц), 2,50-2,32 (2Н, м), 2,02 (1Н, т, J=2,7 Гц), 0,91 (9Н, с), 0,90 (9Н, с), 0,11 (3Н, с), 0,10 (3Н, с), 0,09 (3Н, с), 0,08 (3Н, с).

(2) Соединение А-4 (0,82 г, 1,79 ммоль), полученное в (1), растворяют в безводном метаноле (8 мл), к раствору добавляют концентрированную серную кислоту (74 мкл, 1,5 ммоль), и смесь перемешивают в течение 2,5 часов. После охлаждения до комнатной температуры к смеси добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, и смесь экстрагируют этилацетатом. Полученный органический слой сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток растворяют в безводном дихлорметане, к раствору при охлаждении льдом добавляют 2,6-лутидин (1,01 мл, 9 ммоль) и трет-бутилдиметилсилилтрифторметансульфонат (1,65 мл, 7,2 ммоль), и затем смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Добавляют безводный метанол (1,5 мл), и смесь перемешивают при комнатной температуре еще в течение 10 минут. К смеси добавляют смесь н-гексан/этилацетат (9/1), смесь промывают водой, и полученный органический слой сушат над безводным сульфатом натрия. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (3% этилацетата/н-гексан), и получают соединение А-5 (683,4 мг, выход 81%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 5,94 (1Н, ддд, J=10,0, 17,2, 6,5 Гц), 5,21 (1Н, дт, J=17,3, 1,3 Гц), 5,14 (1Н, дт, J=10,0, 1,3 Гц), 4,30 (1Н, дд, J=6,8, 3,4 Гц), 4,00-3,97 (1Н, м), 3,88-3,82 (2Н, м), 3,68 (3Н, с), 3,40 (1Н, дд, J=5,5, 3,5 Гц), 2,57 (2Н, т, J=6,6 Гц), 2,48 (1Н, дк, J=16,8, 2,7 Гц), 2,35 (1Н, дк, J=17,0, 2,8 Гц), 1,96 (1Н, т, J=2,6 Гц), 0,90 (9Н, с), 0,89 (9Н, с), 0,09 (3Н, с), 0,08 (3Н, с), 0,07 (3Н, с), 0,03 (3Н, с).

(3) Соединение А-5 (47.0 мг, 0,1 ммоль), полученное в (2), и соединение В-2 (46,2 мг, 0,11 ммоль), полученное в примере 1 (3), растворяют в смеси толуол/триэтиламин (1/1, 2 мл), добавляют тетракис(трифенилфосфин)палладий (12,5 мг, 0,0108 ммоль), и смесь перемешивают в атмосфере азота при 110°C в течение 3 часов. Смесь охлаждают до комнатной температуры и концентрируют при пониженном давлении. Остаток предварительно очищают тонкослойной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 19/1). Полученный предварительно очищенный материал растворяют в смеси безводный дихлорметан/ацетонитрил (1/1, 1 мл), к смеси при 0°C в атмосфере азота добавляют тетрафторборат лития (78 мг, 0,8 ммоль) и серную кислоту (1 М раствор в ацетонитриле, 0,08 мл, 0,08 ммоль), и смесь перемешивают в течение 30 минут. К смеси добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, и смесь экстрагируют этилацетатом. Полученный органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушат над безводным сульфатом натрия. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток предварительно очищают тонкослойной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 1/2) и дополнительно очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (А = 95% воды/ацетонитрил; В = 0,5% воды/40% метанола/ацетонитрил; В = 75%),и получают соединение С-2 (6,8 мг, 13%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,42 (1Н, д, J=11,2 Гц), 6,03 (1Н, д, J=11,2 Гц), 5,40 (1Н, д, J=1,2 Гц), 5,09 (1Н, д, J=2,2 Гц), 4,45 (1Н, т, J=3,3 Гц), 4,06-3,79 (3Н, м), 3,73 (3Н, с), 3,36 (1Н, дд, J=7,7, 3,3 Гц), 2,85-2,60 (7Н, м), 2,24 (2Н, дт, J=18,8, 5,9 Гц), 2,02-1,96 (3Н, м), 1,89-1,82 (2Н, м), 1,72-1,54 (6Н, м), 1,51 (6Н, s), 1,47-1,24 (4H, м), 1,06 (3Н, д, J=6,3 Гц), 0,54 (3Н, с).

МС m/z 537,2 (М+23)+523.3 (М+18)+.

Пример 3 Получение (5Z,7Е)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-пропоксикарбонилэтокси)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триола (соединение С-4)

(1) С использованием в качестве исходного материала соединения А-4 (240 мг, 0,525 ммоль), полученного в примере 2 (1), и заменяя метанол пропанолом, осуществляют синтез так же, как в примере 2 (2), и получают соединение А-6 (18,5 мг, выход 27%).

(2) С использованием в качестве исходных материалов соединения А-6 (40,5 мг, 0,081 ммоль), полученного в (1), и соединения В-2 (47 мг, 0,11 ммоль), полученного в примере 1 (3), осуществляют синтез так же, как в примере 2 (3), и получают соединение С-4 (6,8 мг, выход 15%).

1Н-ЯМР (CDCl3) δ: 6,42 (1Н, д, J=11,2 Гц), 6,03 (1Н, д, J=11,2 Гц), 5,39 (1Н, д, J=1,2 Гц), 5,09 (1Н, д, J=2,2 Гц), 4,45 (1Н, т, J=3,5 Гц), 4,08 (2Н, т, J=6,7 Гц), 4,06-3,95 (2Н, м), 3,85-3,77 (1Н, м), 3,36 (1Н, дд, J=7,8, 3,2 Гц), 2,85-2,82 (1Н, м), 2,79 (1Н, д, J=4,1 Гц), 2,70-2,62 (4Н, м), 2,26-2,22 (2Н, м), 2,03-1,98 (3Н, м), 1,90-1,80 (3Н, м), 1,70-1,64 (7Н, м), 1,58-1,53 (4Н, м), 1,51 (6Н, с),1,48-1,45 (2Н, м), 1,40-1,20 (4Н, м), 1,06 (3Н, д, J=6,6 Гц), 0,94 (4Н, т, J=7,4 Hz), 0,54 (3Н, с).

(1) С использованием в качестве исходного материала соединения А-4 (240 мг, 0,525 ммоль), полученного в примере 2 (1), и заменяя метанол изопропанолом, осуществляют синтез так же, как в примере 2 (2), и получают соединение А-7 (157,4 мг, выход 60%).

(2) С использованием в качестве исходных материалов соединения А-7 (35 мг, 0,07 ммоль), полученного в (1), и соединения В-2 (44 мг, 0,11 ммоль), полученного в примере 1 (3), осуществляют синтез так же, как в примере 2 (3), и получают соединение С-5 (6,8 мг, выход 17%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,42 (1Н, д, J=11,0 Гц), 6,03 (1Н, д, J=11,5 Гц), 5,39 (1Н, д, J=1,5 Гц), 5,09-5,02 (2Н, м), 4,45 (1Н, т, J=3,5 Гц), 4,05-3,78 (3Н, м), 3,35 (1Н, дд, J=7,7, 3,3 Гц), 2,85-2,58 (6Н, м), 2,28-1,53 (18Н, м), 1,51 (6Н, с), 1,46-1,30 (5Н, м), 1,26 (3Н, д, J=1,7 Гц), 1,24 (3Н, д, J=1,5 Гц), 1,06 (3Н, д, J=6,3 Гц), 0,54 (3Н, с).

Пример 5

Получение (5Z,7Е)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-карбоксипропил)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триола (соединение D-1)

(1) Соединение А-8 (0,72 г, 1,69 ммоль), полученное таким же способом, как в примере 1 (1) из (3R,4R,5S)-3,5-бис[(трет-бутилдиметилсилил)окси]-4-[3-{(трет-бутилдиметилсилил)окси}пропил]окт-1-ен-7-ина - соединения, известного из литературы (например, из Saito, et al., Tetrahedron, 60, 7951-7961 (2004)), растворяют в дихлорметане (6,8 мл). К раствору при 0°C добавляют триэтиламин (0,47 мл, 3,37 ммоль), гидрохлорид триметиламина (16 мг, 0,169 ммоль) и п-толуолсульфонилхлорид (0,48 г, 2,53 ммоль), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. К смеси добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, смесь экстрагируют этилацетатом, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, и полученный остаток растворяют в диметилформамиде (3 мл). К раствору добавляют цианид натрия (199 мг, 4,06 ммоль) и иодид натрия (380 мг, 2,53 ммоль), и смесь перемешивают при 50°C в течение 2 часов. Добавляют воду, и смесь экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом магния, концентрируют при пониженном давлении, и получают сырое соединение А-9. Его растворяют в тетрагидрофуране (5 мл), к раствору добавляют фторид тетрабутиламмония (1 М раствор в тетрагидрофуране, 5,07 мл, 5,07 ммоль), и смесь перемешивают при 60°C в течение 1 часа. Добавляют этилацетат, смесь промывают водой, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток растворяют в диметилформамиде (5 мл), к раствору при 0°C добавляют имидазол (460 мг, 6,76 ммоль), диметиламинопиридин (21 мг, 0,169 ммоль) и хлортриэтилсилан (0,851 мл, 5,07 ммоль), и смесь перемешивают при 50°C в течение 40 минут. К смеси добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, смесь экстрагируют этилацетатом, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (1% этилацетата/н-гексан → 2% этилацетата/н-гексан → 5% этилацетата/н-гексан → 10% этилацетата/н-гексан), и получают соединение А-10 (531,3 мг, выход 72%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 5,82 (1Н, ддд, J=17,0, 10,0, 7,0 Гц), 5,17 (1Н, дд, J=17,2, 1,1 Гц), 5,11 (1Н, ддд, J=10,0, 2,0, 1,0 Гц), 4,00-3,95 (1Н, м), 2,42-2,37 (2Н, м), 2,32 (2Н, т, J=7,8 Гц), 1,97 (1Н, т, J=2,6 Гц), 1,85-1,65 (3Н, м), 1,43-1,29 (2Н, м), 1,26 (2Н, т, J=7,2 Гц), 0,89 (19Н, с), 0,09 (3Н, с), 0,06 (3Н, с), 0,06 (3Н, с), 0,03 (3Н, с).

(2) Соединение А-10 (449,4 мг, 1,03 ммоль), полученное в (1), растворяют в дихлорметане (5 мл), к раствору при охлаждении при -78°C добавляют гидрид диизобутилалюминия (1 М раствор в толуоле, 2,08 мл, 2,08 ммоль), и смесь перемешивают при -78°C в течение 50 минут. Добавляют безводный метанол (0,3 мл), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 минут. Далее добавляют насыщенный водный раствор натрикалийтартрата, и смесь перемешивают в течение 10 минут. Добавляют этилацетат, смесь промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток растворяют в тетрагидрофуране (6,9 мл), к раствору добавляют трет-бутанол (6,9 мл) и 2-метил-2-бутен (4,5 г), и смесь охлаждают на льду. К смеси добавляют водный раствор (6,9 мл) гипохлорита натрия (931 мг, 10,3 ммоль) и дигидрофосфат натрия (803 мг, 5,15 ммоль), и смесь перемешивают в течение 1 часа. Затем следует добавление насыщенного водного раствора тиосульфата натрия и затем добавление насыщенного водного раствора гидрокарбоната натрия, и смесь экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток очищают хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 100/1 → 50/1 → 20/1 → 10/1 → 5/1 → 2/1), и получают соединение А-11 (220 мг, выход 47%).

¹H-NMR (CDCl₃) δ: 5,82 (1Н, ддд, J=17,0, 10,0, 7,0 Гц), 5,17 (1Н, дд, J=17,2, 1,1 Гц), 5,11 (1Н, ддд, J=10,0, 2,0, 1,0 Гц), 4,00-3,95 (1Н, м), 2,42-2,37 (2Н, м), 2,32 (2Н, т, J=7,8 Гц), 1,97 (1Н, т, J=2,6 Гц), 1,85-1,65 (3Н, м), 1,43-1,29 (2Н, м), 1,26 (2Н, т, J=7,2 Гц), 0,89 (19Н, с), 0,09 (3Н, с), 0,06 (3Н, с), 0,06 (3Н, с), 0,03 (3Н, с).

(3) Соединение А-11 (126,6 мг, 0,278 ммоль), полученное в (2), растворяют в диметилформамиде (1,2 мл), к раствору при охлаждении при 0°C добавляют триэтиламин (0,126 мл, 0,9 ммоль), и смесь перемешивают в течение 40 минут. К смеси добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, и смесь экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток очищают хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 95/5), и получают соединение А-12 (126,5 мг, выход 79%).

¹H-NMR (CDCl₃) δ: 5,82 (1Н, ддд, J=17,0, 10,0, 7,0 Гц), 5,17 (1Н, дд, J=17,2, 1,1 Гц), 5,11 (1Н, ддд, J=10,0, 2,0, 1,0 Гц), 4,00-3,95 (1Н, м), 2,42-2,37 (2Н, м), 2,32 (2Н, т, J=7,8 Гц), 1,97 (1Н, т, J=2,6 Гц), 1,85-1,65 (3Н, м), 1,43-1,29 (2Н, м), 1,26 (2Н, т, J=7,2 Гц), 0,89 (19Н, с), 0,09 (3Н, с), 0,06 (3Н, с), 0,06 (3Н, с), 0,03 (3Н, с).

(4) Соединение А-12 (46 мг, 0,08 ммоль), полученное выше в (3), и соединение В-2 (47 мг, 0,1 ммоль), полученное в примере 1 (3), растворяют в смеси толуол/триэтиламин (1/1, 0,2 мл), к раствору добавляют тетракис(трифенилфосфин)палладий (12 мг, 0,01 ммоль), и смесь перемешивают в атмосфере азота при 110°С в течение 3 часов. Смесь охлаждают до комнатной температуры и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток предварительно очищают тонкослойной колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 19/1). Полученный предварительно очищенный материал растворяют в ацетоне, добавляют к раствору соляную кислоту (6 N, 0,1 мл, 0,6 ммоль), и смесь перемешивают при 0°C в течение 50 минут. Добавляют еще соляную кислоту (6 N, 0,2 мл, 1,2 ммоль), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 40 минут. К смеси добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, и смесь экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, концентрируют при пониженном давлении, и полученный остаток предварительно очищают на установке Bond Elut SI (производство Varian, Inc.; н-гексан/этилацетат = 1/2 → этилацетат → этилацетат/уксусная кислота = 99/1). Предварительно очищенный материал дополнительно очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (А=95% воды/ацетонитрил; В=0,5% уксусной кислоты/5% воды /ацетонитрил; В=65%), и получают соединение D-1 (14,6 мг, 36%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,40 (1Н, д, J=11,5 Гц), 6,00 (1Н, д, J=11,2 Гц), 5,27 (1Н, д, J=1,5 Гц), 4,99 (1Н, д, J=2,0 Гц), 4,39 (1Н, т, J=4,0 Гц), 3,92-3,84 (1Н, м), 2,86-2,79 (1Н, м), 2,65 (1Н, дд, J=13,3, 4,3 Гц), 2,30-2,20 (4Н, м), 2,05-1,96 (3Н, м), 1,88 (2Н, т, J=10,0 Гц), 1,81-1,64 (8Н, м), 1,56 (6Н, дт, J=15,3, 4,5 Гц), 1,51 (6Н, с), 1,49-1,46 (3Н, м), 1,45 (9Н, с), 1,40-1,24 (5Н, м), 1,06 (3Н, д, J=6,6 Гц), 0,54 (3Н, с), 0,54 (3Н, с).

Пример 6

Получение (5Z,7Е)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-(1,1-диметил)этоксикарбонилпропил)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триола (соединение D-6)

(1) Соединение А-9 (565 мг, 1,29 ммоль), полученное в примере 5 (1), растворяют в дихлорметане, к раствору при охлаждении при -78°C добавляют гидрид диизобутилалюминия (1 М раствор в толуоле, 2 мл, 2 ммоль), и смесь перемешивают при -78°C в течение 2 часов. Добавляют безводный метанол (1 мл), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 минут. Далее добавляют насыщенный водный раствор натрикалийтартрата, и смесь перемешивают в течение 10 минут. Добавляют этилацетат, смесь промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток растворяют в тетрагидрофуране (18,3 мл), к раствору добавляют трет-бутанол (18,3 мл) и 2-метил-2-бутен (6 мл), и смесь охлаждают на льду. К смеси добавляют водный раствор (5 мл) гипохлорита натрия (1,47 г, 13 ммоль) и дигидрофосфат натрия (1,01 г, 6,5 ммоль), и смесь перемешивают в течение 1 часа. К смеси добавляют насыщенный водный раствор тиосульфата натрия и затем насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, и смесь экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток очищают хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 9/1 → 7/1 → 5/1), и получают соединение А-13 (233,7 мг, выход 38%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 5,82 (1Н, ддд, J=17,0, 10,0, 7,0 Гц), 5,17 (1Н, дд, J=17,2, 1,1 Гц), 5,11 (1Н, ддд, J=10,0, 2,0, 1,0 Гц), 4,00-3,95 (1Н, м), 2,42-2,37 (2Н, м), 2,32 (2Н, т, J=7,8 Гц), 1,97 (1Н, т, J=2,6 Гц), 1,85-1,65 (3Н, м), 1,43-1,29 (2Н, м), 1,26 (2Н, т, J=7,2 Гц), 0,89 (19Н, с), 0,09 (3Н, с), 0,06 (3Н, с), 0,06 (3Н, с), 0,03 (3Н, с).

(2) К соединению А-13 (228,4 мг, 0,5 ммоль), полученному в (1), добавляют толуол (5 мл) и ди-трет-бутилацеталь N,N-диметилформамида (1,1 мл, 4 ммоль), и смесь перемешивают при 80°C в течение 1 часа. К смеси добавляют этилацетат, смесь промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают хроматографией на силикагеле (3% этилацетата/н-гексан), и получают соединение А-14 (118,5 мг, выход 46%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 5,83 (1Н, ддд, J=17,0, 10,0, 7,0 Гц), 5,15 (1Н, дк, J=17,2, 1,0 Гц), 5,10 (1Н, дк, J=10,0, 1,0 Гц), 4,12 (1Н, дд, J=8,0, 5,0 Гц), 4,00 (1Н, тд, J=6,2, 3,8 Гц), 2,39 (2Н, дд, J=6,1,2,7 Гц), 2,17 (2Н, т, J=8,0 Гц), 1,79-1,63 (3Н, м), 1,44 (9Н, с), 1,40-1,20 (4Н, м), 0,89 (18Н, с), 0.09 (3Н, с), 0,06 (3Н, с), 0,05 (3Н, с), 0,03 (3Н, с).

(3) Соединение А-14 (59,6 мг, 0,12 ммоль), полученное в (2), и соединение В-2 (60 мг, 0,14 ммоль), полученное в примере 1 (3), растворяют в смеси толуол/триэтиламин (1/1, 2 мл), к раствору добавляют тетракис(трифенилфосфин)палладий (17 мг, 0,0147 ммоль), и смесь перемешивают в атмосфере азота при 110°C в течение 3,5 часов. Смесь охлаждают до комнатной температуры и концентрируют при пониженном давлении. Остаток предварительно очищают тонкослойной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 19/1). Полученный предварительно очищенный материал растворяют в тетрагидрофуране, добавляют к раствору фторид тетрабутиламмония (1 М раствор в тетрагидрофуране, 0,84 мл, 0,84 ммоль), и смесь перемешивают при 60°C в течение 2 часов. Добавляют этилацетат, смесь промывают водой, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, и полученный остаток предварительно очищают тонкослойной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 1/1) и дополнительно очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (А = 95% воды/ацетонитрил; В = 0,5% воды/40% метанола/ацетонитрил; В = 85%), и получают соединение D-6 (5,0 мг, выход 7%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,40 (1Н, д, J=11,5 Гц), 6,00 (1Н, д, J=11,2 Гц), 5,27 (1Н, д, J=1,5 Гц), 4,99 (1Н, д, J=2,0 Гц), 4,39 (1Н, т, J=4,0 Гц), 3,92-3,84 (1Н, м), 2,86-2,79 (1Н, м), 2,65 (1Н, дд, J=13,3, 4,3 Гц), 2,30-2,20 (4Н, м), 2,05-1,96 (3Н, м), 1,88 (2Н, т, J=10,0 Гц), 1,81-1,64 (8Н, м), 1,56 (6Н, дт, J=15,3, 4,5 Гц), 1,51 (6Н, с), 1,49-1,46 (3Н, м), 1,45 (9Н, с), 1,40-1,24 (5Н, м), 1,06 (3Н, д, J=6,6 Гц), 0,54 (3Н, с), 0,54 (3Н, с).

Пример 7

Получение (5Z,7E)-(1R,2S,3R,20R)-2-((трет-бутилкарбонилокси)метоксикарбонилэтокси)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триола (соединение С-7)

(1) Соединение А-4 (164,3 мг, 0,360 ммоль), полученное в примере 2 (1), растворяют в безводном N,N-диметилформамиде (1,2 мл), и раствор охлаждают до 0°C. К раствору добавляют триэтиламин (0,15 мл, 1,08 ммоль) и пивалоилоксиметилхлорид (0,104 мл, 0,719 ммоль), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Через 1 час добавляют иодид натрия (150 мг, 1,008 ммоль) и карбонат калия (140 мг, 1,008 ммоль), и смесь перемешивают при нагревании при 50°C еще в течение 30 минут.

Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, и после разбавления водой полученную смесь экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 5/1), и получают соединение А-15 (158,0 мг, выход 77%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 5,98-5,90 (1Н, м), 5,76 (2Н, с), 5,21 (1Н, дт, J=17,32, 1,46 Гц), 5,14 (1Н, дт, J=10,37, 1,10 Гц), 4,30 (1Н, дд, J=8,00, 3,00 Гц), 4,02-3,82 (3Н, м), 3,42 (1Н, дд, J=5,61, 3,41 Гц), 2,62 (2Н, т, J=6,71 Гц), 2,47 (1Н, ддд, J=16,83, 2,68, 5,50 Гц), 2,34 (1Н, ддд, J=16,83, 2,76, 5,50 Гц), 1,96 (1Н, т, J=2,68 Гц), 1,21 (9Н, с), 0,90 (9Н, с), 0,89 (9Н, с), 0,09 (3Н, с), 0,08 (3Н, с), 0,07 (3Н, с), 0,03 (3Н, с).

(2) С использованием в качестве исходных материалов соединения А-15 (40 мг, 0,07 ммоль), полученного в (1), и соединения В-2 (36 мг, 0,085 ммоль), полученного в примере 1 (3), выполняют синтез так же, как в примере 2 (3), и получают соединение С-7 (7,8 мг, выход 18%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,42 (1Н, д, J=11.47 Гц), 6,02 (1Н, д, J=11,22 Гц), 5,81-5,76 (2Н, м), 5,39 (1Н, д, J=1,46 Гц), 5,09 (1Н, д, J=2,20 Гц), 4,44 (1Н, с), 4,04-3,95 (2Н, м), 3,85-3,80 (1Н, м), 3,36 (1Н, дд, J=7,56, 3,17 Гц), 2,85-2,57 (6Н, м), 2,28-1,81 (8Н, м), 1,59-1,24 (16Н, м), 1,23 (9Н, с), 1,06 (3Н, д, J=6,59 Гц), 0,54 (3Н, с).

Пример 8

Получение (5Z,7E)-(1R,2S,3R,20R)-2-((фенилкарбонилокси)метоксикарбонилэтокси)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триола (соединение C-8)

С использованием в качестве исходного материала соединения А-4 (175 мг, 0,383 ммоль), полученного в примере 2 (1), и заменяя пивалоилоксиметилхлорид на бензоилоксиметилхлорид, выполняют синтез так же, как в примере 7 (1), и получают соединение А-16. Затем с использованием в качестве исходных материалов соединения А-16 (41,3 мг, 0,07 ммоль) и соединения В-2 (34 мг, 0,08 ммоль), полученного в примере 1 (3), выполняют синтез так же, как в примере 7 (2), и получают соединение С-8 (4,9 мг, выход 11%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,09-8,07 (2Н, м), 7,62-7,44 (3Н, м), 6,41 (1Н, д, J=10,98 Гц), 6,05-6,01 (3Н, м), 5,38 (1Н, д, J=1,46 Гц), 5,07 (1Н, д, J=1,95 Гц), 4,44 (1Н, д, J=2,93 Гц), 4,05-3,97 (2Н, м), 3,87-3,82 (1Н, м), 3,36 (1Н, дд, J=7,56, 3,17 Гц), 2,85-2,64 (4Н, м), 2,32-2,18 (2Н, м), 2,05-1,53 (9Н, м), 1,49-1,24 (4Н, м), 1,06 (3Н, д, J=6,34 Гц), 0,55 (3Н, с).

Пример 9

Получение (5Z,7Е)-(1R,2S,3R,20R)-2-((2-карбокси-2,2-этано)этокси)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триола (соединение Е-1)

(1) Соединение А-17 (6,03 г, 22,8 ммоль), описанное в литературе (например, в Kittaka et al., J. Org. Chem., 69, 7463-7471 (2004)), растворяют в N-метилпирролидоне (60 мл), к раствору добавляют трет-бутоксид калия (11,88 г, 114 ммоль), и смесь перемешивают при нагревании при 130°C в течение 4 часов. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, добавляют к ней воду (240 мл) и затем DIAION HP-20SS (производство Mitsubishi Chemical Corporation, 30 г (сухая масса)), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь фильтруют, твердый материал промывают насыщенным водным раствором хлорида аммония (100 мл) и водой (200 мл), и экстрагируют ацетоном (500 мл). Экстракт концентрируют при пониженном давлении и разбавляют этилацетатом. Смесь промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 1/4), и получают соединение А-18 (1,78 г, выход 21%).

¹Н ЯМР(CDCl₃) δ: 7,51-7,36 (5Н, м), 5,54 (1Н, с), 4,61 (1Н, с), 4,40-4,29 (2Н, м), 4,08 (1Н, т, J=4,27 Гц), 4,01 (1Н, дд, J=9,27, 2,68 Гц), 3,93 (1Н, ушс), 3,83-3,75 (3Н, м), 3,60-3,50 (3Н, м), 3,41 (3Н, с), 0,59-0,41 (3Н, м).

(2) Соединение А-18 (2,97 г, 8,10 ммоль), полученное в (1), растворяют в безводном пиридине (30 мл), и раствор охлаждают до 0°C. К раствору добавляют пивалоилхлорид (1,15 мл, 9,32 ммоль), и смесь перемешивают при той же температуре в течение 1 часа. К смеси добавляют безводный метанол (3 мл), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 минут и концентрируют при пониженном давлении. Остаток растворяют в толуоле, раствор промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, и затем органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении и сушат. Полученный сырой материал растворяют в безводном дихлорметане (20 мл), раствор охлаждают до 0°C, и после добавления 2,6-лутидина (1,3 мл, 11,6 ммоль) и трет-бутилдиметилсилилтрифторметансульфоната (2,14 мл, 9,32 ммоль) смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Добавляют безводный метанол (5 мл), и смесь концентрируют при пониженном давлении. Остаток растворяют в толуоле, раствор промывают водой, и органический слой сушат над безводным сульфатом натрия. Раствор концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (5% этилацетата/н-гексан → 10% этилацетата/н-гексан), и получают соединение А-19 (3,19 г, выход 69%).

¹Н ЯМР(CDCl₃) δ: 7,49-7,34 (5Н, м), 5,56 (1Н, с), 4,45 (1Н, с), 4,29-4,25 (2Н, м), 4,18 (1Н, д, J=11,22 Гц), 3,98-3,92 (3Н, м), 3,75 (1Н, т, J=12,08 Гц), 3,65 (1Н, т, J=2,68 Гц), 3,56 (2Н, дд, J=29,76, 9,51 Гц), 3,35 (3Н, с), 1,19 (9Н, с), 0,91 (9Н, с), 0,61-0,51 (4Н, м), 0,10(3Н, с),0,10(3Н, с).

(3) Соединение А-19 (3,17 г, 5,61 ммоль), полученное в (2), растворяют в циклогексане (63 мл), к раствору добавляют карбонат бария (775 мг, 3,92 ммоль), пероксид бензоила (136 мг, 0,56 ммоль) и N-бромсукцинимид (1,21 г, 6,73 ммоль), и смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1 часа. После охлаждения смесь фильтруют через целит, и органический слой промывают в указанном порядке насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Затем органический слой сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении, и получают сырой материал (4,0 г). Полученный сырой материал растворяют в смешанном растворителе из 1-пропанола (36 мл) и воды (4 мл), к раствору добавляют активированный цинк (7,38 г, 112,2 ммоль) и цианоборогидрид натрия (1,42 г, 22,4 ммоль), и смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1 часа. После охлаждения смесь фильтруют через целит, твердое вещество промывают 1-пропанолом, и затем жидкость концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток разбавляют этилацетатом, промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан/этилацетат = 90/10 → 80/20), и получают соединение А-20 (1,50 г, выход 50%).

¹Н ЯМР(CDCl₃) δ: 8,05-8,02 (2Н, м), 7,59-7,43 (3Н, м), 6,11 (1Н, ддд, J=11,00, 17,32, 6,00 Гц), 5,78-5,75 (1Н, м), 5,41 (1Н, дт, J=17,32, 1,34 Гц), 5,30 (1Н, дт, J=10,49, 1,22 Гц), 4,17 (1Н, д, J=11,47 Гц), 3,96-3,93 (2Н, м), 3,81 (1Н, дд, J=11,47, 5,12 Гц), 3,73-3,68 (2Н, м), 3,64 (1Н, д, J=9,76 Гц), 3,50 (1Н, д, J=9,76 Гц), 1,18 (9Н, с), 0,90 (9Н, с), 0,55 (4Н, т, J=1,95 Гц), 0,09 (3Н, с), 0,07 (3Н, с).

(4) Соединение А-20 (2,41 г, 4,5 ммоль), полученное в (3), растворяют в ацетонитриле (25 мл), к раствору добавляют триэтиламин (1,26 мл, 9 ммоль), гидрохлорид триметиламина (86 мг, 0,9 ммоль) и п-толуолсульфонилхлорид (1,30 г, 6,8 ммоль) в указанном порядке, и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, и смесь концентрируют при пониженном давлении. Остаток разбавляют этилацетатом, и смесь промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Сырой материал (3,31 г) растворяют в тетрагидрофуране (18 мл), к раствору добавляют фторид тетрабутиламмония (1 М раствор в тетрагидрофуране, 13,5 мл, 13,5 ммоль), и смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1,5 часов. После охлаждения смесь концентрируют при пониженном давлении, и остаток разбавляют толуолом. Смесь промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении.

Полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан/этилацетат = 90/10), и получают соединение А-21 (851 мг, выход 47%).

¹Н ЯМР(CDCl₃) δ: 8,06-8,02 (2Н, м), 7,61-7,44 (3Н, м), 6,10-6,01 (1Н, м), 5,67-5,64 (1Н, м), 5,42 (1Н, дт.J=17,24, 1,34 Гц), 5,32 (1Н, дт, J=10,57, 1,22 Гц), 4,04 (2Н, дд, J=27,32, 11,22 Гц), 3,65 (1Н, д, J=10,24 Гц), 3,53 (1Н, д, J=10,24 Гц), 3,17 (1Н, дд, J=7,32, 5,37 Гц), 3,10-3,06 (1Н, м), 2,75 (1Н, т, J=4,39 Гц), 2,60 (1Н, дд, J=4,88, 2,93 Гц), 1,19 (9Н, с),0,55(4Н, с).

(5) Раствор триметилсилилацетилена (1,62 мл, 11,5 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл) помещают в атмосферу азота и охлаждают смесью сухой лед-ацетон. К раствору добавляют раствор н-бутиллития в гексане (2,64 М, 3,97 мл, 10,5 ммоль), и смесь перемешивают в течение 45 минут. К полученной смеси добавляют раствор соединения А-21 (846 мг, 2,1 ммоль), полученного в (4), в тетрагидрофуране (6 мл) и комплекс трифторборан-диэтиловый эфир (0,343 мл, 2,73 ммоль), и смесь перемешивают в течение 2 часов при охлаждении смесью сухой лед-ацетон и затем перемешивают в течение 1 часа при 0°C. К смеси добавляют насыщенный водным раствором хлорид аммония, смесь приводят к комнатной температуре и разбавляют этилацетатом. Раствор последовательно промывают насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток растворяют в безводном метаноле (10 мл), добавляют к раствору метоксид натрия (870 мг, 6,3 ммоль), и смесь перемешивают при нагревании при 50°C в течение 1 часа. После охлаждения смесь концентрируют при пониженном давлении. Остаток разбавляют этилацетатом, затем смесь промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, и органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан/этилацетат = 60/40 → 50/50 → 35/65), и получают соединение А-22 (311,5 мг, выход 62%).

¹Н ЯМР(CDCl₃) δ: 5,57 (1Н, ддд, J=17,00, 11,00, 6,00 Гц), 4,88 (1Н, дт, J=17,00, 1,70 Гц), 4,73 (1Н, дт, J=11,00, 1,70 Гц), 3,85-3,81 (1Н, м), 3,51 (1Н, ддд, J=8,42, 5,73, 2,07 Гц), 3,16 (1Н, д, J=9,50 Гц), 3,05 (1Н, д, J=9,50 Гц), 2,85 (2Н, дд, J=4,63, 2,20 Гц), 2,12-1,92 (2Н, м), 1,85 (1Н, т, J=2,68 Гц).

(6) Соединение А-22 (534,4 мг, 2,26 ммоль), полученное в (5), растворяют в безводном пиридине (7,5 мл), и после добавления при 0°C пивалоилхлорида (0,276 мл, 2,26 ммоль) смесь перемешивают при той же температуре в течение 45 минут. К смеси добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Смесь разбавляют толуолом и промывают рассолом. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния и упаривают, и получают остаток. Остаток разбавляют сухим дихлорметаном (10 мл), и к раствору при 0°C добавляют 2,6-лутидин (1,1 мл, 9,22 ммоль) и трет-бутилдиметилсилилтрифторметансульфонат (1,7 мл, 7,55 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при той же температуре в течение 1,5 часов. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом, и органический слой промывают рассолом, сушат над безводным сульфатом магния и упаривают. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (гексан/этилацетат = 99/1 → 85/15), и получают соединение А-23 (1,08 г, выход 91%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,00-5,91 (1Н, м), 5,21 (1Н, д, J=17,32 Гц), 5,13 (1Н, д, J=11,00 Гц), 4,32 (1Н, дд, J=7,07, 3,90 Гц), 4,03 (2Н, дд, J=19,03, 11,22 Гц), 3,94 (1Н, дд, J=10,73, 5,85 Гц), 3,64 (1Н, д, J=9,76 Гц), 3,45 (1Н, д, J=9,76 Гц), 3,39 (1Н, т, J=4,27 Гц), 2,51 (1Н, ддд, J=16,83, 6,00, 3,00 Гц), 2,36 (1Н, ддд, J=16,71, 6,10, 2,56 Гц), 1,95 (1Н, т, J=2,56 Гц), 1,19 (9Н, с), 0,90 (9Н, с), 0,88 (9Н, с), 0,55-0,48 (3Н, м), 0,11 (3Н, с), 0,09 (3Н, с), 0,06 (3Н, с), 0,03 (3Н, с).

(7) С использованием в качестве исходных материалов соединения А-23 (70 мг, 0,15 ммоль), полученного в (6), и соединения В-3 (69 мг, 0,16 ммоль), полученного в примере 1 (4), выполняют синтез так же, как в примере 1 (5), и получают соединение АВ-3 (48,1 мг, 37,4%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,18 (1Н, д, J=10,98 Гц), 6,02 (1Н, д, J=11,47 Гц), 5,32 (1Н, с), 5,01 (1Н, с), 4,47 (1Н, с), 4,03 (1Н, к, J=4,15 Гц), 3,91 (1Н, д, J=9,03 Гц), 3,58 (1Н, дд, J=11,10, 4,03 Гц), 3,46-3,39 (2Н, м), 3,32 (1Н, д, J=9,51 Гц), 3,21 (1Н, ушс), 2,80 (1Н, т, J=7,81 Гц), 2,61 (1Н, д, J=13,42 Гц), 2,24 (1Н, дд, J=16,34, 3,42 Гц), 2,10 (1Н, дд, J=13,66, 4,15 Гц), 2,05-1,84 (4Н, м), 1,66-1,49 (12Н, м), 1,43-1,30 (4Н, м), 1,07 (4Н, д, J=6,59 Гц), 0,98-0,83 (36Н, м), 0,82-0,81 (2Н, м), 0,70-0,64 (9Н, м), 0,57-0,54 (6Н, м), 0,51-0,36 (6Н, м), 0,11 (3Н, с), 0,10 (3Н, с), 0,08 (3Н, с), 0,07 (3Н, с).

(8) С использованием в качестве исходного материала соединения АВ-3 (48,1 мг, 0,056 ммоль), полученного в (7), осуществляют такую же обработку, как в примере 1 (6). Продукт реакции (28,5 мг, 0,0327 ммоль) растворяют в смешанном растворителе безводный дихлорметан/ацетонитрил (1/1, 1 мл), и раствор охлаждают до 0°C. Затем добавляют моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (31 мг, 0,163 ммоль) и тетрафторборат лития (30 мг, 0,327 ммоль), и смесь перемешивают при той же температуре в течение 30 минут. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, и смесь экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении.

Полученный остаток предварительно очищают тонкослойной хроматографией на силикагеле (этилацетат/ацетон = 9/1+0,5% уксусной кислоты) и дополнительно очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (А = 95% воды/ацетонитрил; В = 0,5% воды/40% метанола/ацетонитрил; В = 85%), и получают соединение Е-1 (4,9 мг, выход 16,6%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,41 (1Н, д, J=11,22 Гц), 6,01 (1Н, д, J=10,98 Гц), 5,37 (1Н, с), 5,08 (1Н, д, J=1.46 Гц), 4,48 (1Н, д, J=2,68 Гц), 4,06-3,82 (2Н, м), 3,55-3,25 (2Н, м), 2,88-2,60 (2Н, м), 2,28-1,54 (13Н, м), 1,42-1,20 (10Н, м), 1,10-1,08 (1Н, м), 1,06 (3Н, д, J=6,59 Гц), 0,91 (3Н, д, J=4,88 Гц), 0,54 (3Н, с).

Пример 10

Получение (5Z,7Е)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-карбоксиэтокси)-26,27-диметил-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триола (соединение F-1)

(1) Триметилсилилацетилен (1,84 мл, 13,0 ммоль) растворяют в 1,4-диоксане (15 мл), и к раствору в атмосфере аргона и при охлаждении на ледяной бане добавляют по каплям в течение 10 минут 1,59 М раствор н-бутиллития в гексане (8,18 мл, 13,0 ммоль). К полученной смеси добавляют соединение В-4 (1,91 г, 4,33 ммоль), растворенное в 1,4-диоксане (10 мл), причем соединение В-4 синтезируют согласно способу Tanaka et al. (международная публикация №WO 98/58909), и смесь кипятят с обратным холодильником при 110°C в течение 24 часов. После охлаждения до комнатной температуры к смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония и затем перемешивают. Затем смесь экстрагируют н-гексаном, и полученный органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток растворяют в смеси тетрагидрофуран-метанол (1:1, 20 мл), к раствору добавляют карбонат калия (718 мг, 5,20 ммоль), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. К реакционной смеси добавляют воду, и затем смесь экстрагируют н-гексаном. Полученный органический слой промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом натрия. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан), и получают соединение В-5 (1,14 г, выход 89%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 5,65 (1Н, с), 2,90-2,86 (1Н, м), 2,25 (1Н, дт, J=16,6, 3,0 Гц), 2,10-1,88 (5Н, м), 1,72-1,25 (9Н, м), 1,11 (3Н, д, J=6,6 Гц), 0,58 (3Н, с).

(2) Соединение В-5 (301 мг, 1,02 ммоль), полученное в (1), растворяют в тетрагидрофуране (10 мл), к раствору в атмосфере аргона и при охлаждении до -78°C добавляют по каплям 1,59 М раствор н-бутиллития в н-гексане (0,673 мл, 1,02 ммоль), и смесь перемешивают в течение 30 минут. К смеси добавляют 3-пентанон (0,216 мл, 2,04 ммоль), и смесь перемешивают в течение 1 часа, поддерживая температуру -78°C. К реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония, и смесь нагревают до комнатной температуры. Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом, и полученный органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушат над безводным сульфатом натрия. Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 9/1), и получают соединение В-6 (205 мг, выход 53%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,42 (1Н, д, J=11,2 Гц), 6,02 (1Н, д, J=11,2 Гц), 5,39 (1Н, с), 5,10 (1Н, с), 4,44 (1Н, т, J=3,9 Гц), 4,11-4,07 (1Н, м), 3,84-3,81 (1Н, м), 3,75-3,68 (2Н, м), 3,39 (1Н, дд, J=7,4, 3,3 Гц), 2,84-2,81 (1Н, м), 2,68 (1Н, дд, J=13,7, 4,4 Гц), 2,52 (2Н, т, J=6,8 Гц), 2,29-2,20 (3Н, м), 2,15-1,83 (6Н, м), 1,70-1,22 (14Н, м), 1,08-1,01 (9Н, м), 0,55 (3Н, с) м.д.

(3) Соединение В-6 (396 мг, 1,04 ммоль), полученное в (2), растворяют в безводном N,N-диметилформамиде (4 мл), к раствору добавляют хлортриэтилсилан (0,283 мл, 1,68 ммоль), имидазол (152 мг, 2,23 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (27 мг, 0,22 ммоль), и смесь перемешивают при нагревании при 50°C в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, добавляют к ней безводный метанол (1 мл), и смесь перемешивают в течение 30 минут. Смесь разбавляют толуолом и промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия. Затем органический слой сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 90/10), и получают соединение В-7 (454,8 мг, выход 88%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 5,65 (1H, с), 2,91-2,85 (1Н, м), 2,24 (1Н, дд, J=16,46, 3,54 Гц), 2,10 (1Н, дд, J=16,58, 6,83 Гц), 2,02-1,88 (4Н, м), 1,71-1,58 (9Н, м), 1,54-1,24 (7Н, м), 1,08 (3Н, д, J=8,00 Гц), 0,98-0,91 (22Н, м), 0,73-0,64 (9Н, м), 0,58 (3Н, с), 0,52 (2Н, к, J=7,97 Гц).

(4) Соединение А-4 (457 мг, 1 ммоль), полученное в примере 2 (1), растворяют в безводном N,N-диметилформамиде (5 мл), к раствору добавляют триэтиламин (0,421 мл, 3 ммоль) и хлорметилбензиловый эфир (0,276 мл, 2 ммоль), и смесь перемешивают при 0°C в течение 1 часа 45 минут. К смеси добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, и смесь экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан/этилацетат = 95/5), и получают соединение А-24 (485 мг, выход 84%).

(5) С использованием в качестве исходных материалов соединения В-7 (44 мг, 0,09 ммоль), полученного в (3), и соединения А-24 (43 мг, 0,075 ммоль), полученного в (4), выполняют реакцию сочетания и реакцию удаления защитной группы так же, как в примере 5 (4). Полученный сырой продукт реакции предварительно очищают тонкослойной хроматографией на силикагеле (этилацетат/ацетон = 4/1 + уксусная кислота (1,5%, об./об.) и дополнительно очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (А = 95% воды/ацетонитрил; В = 0,5% воды/40% метанола/ацетонитрил; В = 75%), и получают соединение F-1 (4,7 мг, выход 12%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,42 (1Н, д, J=10,98 Гц), 6,00 (1Н, д, J=10,98 Гц), 5,37 (1Н, д, J=1,46 Гц), 5,08 (1Н, д, J=1,95 Гц), 4,47 (1Н, д, J=2,93 Гц), 4,08-3,94 (2Н, м), 3,82-3,74 (1Н, м), 3,33 (1Н, дд, J=8,17, 3,05 Гц), 2,83 (1Н, д, J=12,20 Гц), 2,69-2,60 (3Н, м), 2,30-2,20 (2Н, м), 1.98 (2Н, д, J=11,71 Гц), 1,91-1,80 (1Н, м), 1,72-1,24 (16Н, м), 1,07 (3Н, д, J=6,34 Гц), 1,03 (8Н, т, J=7,44 Гц), 0,54 (3Н, с).

Пример 11

Получение (5Z,7Е)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-карбоксиэтокси)-26,27-нор-25-циклопентил-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триола (соединение F-2)

(1) С использованием в качестве исходного материала соединения В-5 (442 мг, 1,5 ммоль), полученного в пример 10 (1), выполняют синтез так же, как примере 10 (2), и получают смесь (427,2 мг) соединения В-8 и циклопентанона. С использованием в качестве исходного материала полученного сырого материала и использованием безводного N,N-диметилформамида (4,5 мл), хлортриэтилсилана (0,283 мл, 1,68 ммоль), имидазола (152 мг, 2,23 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (27 мг, 0,22 ммоль) выполняют синтез так же, как в примере 10 (3), и получают соединение В-9 (506 мг, выход 68%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 5,65 (1Н, с), 2,92-2,85 (1Н, м), 2,24 (1Н, дд, J=16,46, 3,29 Гц), 2,08 (1Н, дд, J=16,10, 6,83 Гц), 2,02-1,57 (19Н, м), 1,54-1,26 (7Н, м), 1,07 (4Н, д, J=7,56 Гц), 0,98-0,91 (15Н, м), 0,73-0,63 (8Н, м), 0,57 (3Н, с), 0,52 (3Н, к, J=7,97 Гц).

(2) С использованием в качестве исходных материалов соединения В-9 (44 мг, 0,09 ммоль), полученного в (1), и соединения А-24 (43 мг, 0,075 ммоль), полученного в примере 10 (4), выполняют синтез так же, как в примере 10 (5), и получают соединение F-2 (2,0 мг, выход 5%).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 6,41 (1Н, д, J=10,98 Гц), 6,00 (1Н, д, J=10,98 Гц), 5,36 (1Н, с), 5,07 (1Н, с), 4,46 (1Н, с), 4,10-3,93 (2Н, м), 3,78 (1Н, ушс), 3,30 (1Н, д, J=6,59 Гц), 3,07-2,62 (9Н, м), 2,30-2,19 (2Н, м), 2,05-1,24 (25Н, м), 1,06 (3Н, д, J=6,59 Гц), 0,54 (3Н, с).

Пример 12

Оценка аффинности к VDR

VDR оценивают с использованием коммерческого инструмента и набора для оценки, например, «PolarScreen Vitamin D Receptor Competitor Assay, Red, Cat. No. PV4569», продавемого Invitrogen Corporation, согласно следующей процедуре.

Растворы соединений добавляют в каждые две лунки 384-луночного планшета с лунками с темным дном аликвотами по 10 мкл. В каждую лунку аликвотами по 10 мкл добавляют комплекс VDR/Fluoromone VDR, включенный в набор, и оставляют взаимодействовать при комнатной температуре на 2 часа. Через 2 часа измеряют поляризацию флуоресценции, и оценивают аффинность к VDR. Кроме того, оценивают аффинность в относительных величинах (1/Х) в сравнении с аффиностью к 1,25-(ОН)2-витамину D₃, принятую за 1.

Таблица 2 Название соединения Аффинность к VDR (1/Х) 1,25-(ОН)2-витамин D₃ 1/1 Соединение С-1 1/0,52 Соединение D-1 1/0,92 Соединение Е-1 1/2,39 Соединение F-1 1/1,23 Соединение F-2 1/1,61

Подтверждается, что соединения, полученные согласно настоящему изобретению, имеют сильную аффинность к VDR. Обнаруживают, что очень сильную аффинность к VDR имеют, в частности, соединение С-1 и соединение D-1.

Пример 13

Транскрипционная активность VDR в остеобласте человека (клетки HOS)

(1) Конструируют репортерный вектор, встраивая последовательность промоторного участка гена остокальцина человека выше гена люциферазы с использованием вектора pGL3 (Promega Corporation), при этом промоторный участок гена остокальцина человека клонируют с использованием кДНК, полученной из клеток HOS (закупают из АТСС), способом, известным из литературы (Ozono et al., The Journal of Biological Chemistry, 265, 21881-21888 (1990)). Экспрессирующий вектор конструируют, встраивая последовательность ДНК, которая кодирует VDR человека и RXR человека, в вектор pcDNA3 (Invitrogen Corporation). Клетки HOS инкубируют в среде DMEM, содержащей 10% FBS, в условиях: 37°C и 5% CO₂, и субкультивируют каждые 2 или 3 дня.

(2) Клетки, которые субкультивированы, извлекают центрифугированием и суспендируют в среде DMEM без сыворотки и фенолового красного при плотности 4×10⁵ клеток/мл. Такую суспензию высевают в 96-луночный планщет в количестве 0,1 мл/лунку. К такой системе добавляют различные векторы, описанные в (1), в количестве 0,05 мл на лунку с использованием липофектамина 2000 (Invitrogen Corporation). После инкубации при 37°C в течение 3 часов в каждую лунку добавляют 2 мкл каждого из этанольных растворов испытываемых соединений различной концентрации или этанол в качестве контроля. После инкубации при 37°C в течение 24 часов среду удаляют, клетки промывают один раз PBS(-), и затем измеряют люциферазную активность с использованием люминометра (Berthold Technologies GmbH & Со. KG) и использованием набора для анализа люциферазы Dual-Glo (Promega Corporation).

В результате обнаруживают, что все соединения по настоящему изобретению имеют транскрипционную активность с величинами ЕС₅₀ 20 нМ или меньше. Кроме того, обнаружено, что соединения С-1, С-2, D-1, E-1, F-1 и F-2 обладают транскрипционной активностью с величинами ЕС₅₀ 0,2 нМ или меньше. Обнаружено, что в частности соединения D-1, E-1, F-1 и F-2 обладают транскрипционной активностью с величинами EC₅₀ 0,02 нМ или меньше.

Пример 14

Эффект повышения плотности минерального вещества на крысиной модели (овариэктомия) остеопороза (сравнительное испытание)

Двенадцатинедельных самок крыс рода SD (Charles River Japan, Inc.) подвергают билатеральной овариэктомии, и после 4-недельного покоя им вводят соединения по настоящему изобретению и 2α-(3-гидроксипропил)окси-1α,25-дигидроксивитамин D₃, описанный в международной публикации WO 01/62723, каждое 5 раз в неделю в течение 4 недель. Через 24 часа после последнего введения спускают кровь под эфирным наркозом, и крыс усыпляют. Под наркозом измеряют плотность костного минерального вещества четвертого и пятого поясничных позвонков с использованием двухлучевого рентгеновского анализатора костного минерального вещества (QDR-2000; Hologic, Inc.). Для сравнения в группе с псевдооперацией (псевдо) (выполняют абдоминальную операцию, но яичники не удаляют; испытываемые соединения не вводят) и группе с овариэктомией (OVX) (подвергают овариэктомии, но испытываемые соединения не вводят) также проводят измерения плотности костного минерального вещества четвертого и пятого поясничных позвонков во время рассечения. Кроме того, в каждой группе также выполняют измерение концентрации кальция в сыворотке.

Таблица 3 Испытание 1 Группа Доза (нг/кг) Плотность минерального костного вещества (г/см³) Уровень кальция в сыворотке (мг/дл) Псевдо - 0,2303±0,0185 9,61±0,16 OVX - 0,2048±0,0139 9,64±0,22 Соединение С-1 4 0,2223±0,0118 10,40±1,00 10 0,2400±0,0065 10,30±0,20 Испытание 2 Группа Доза (нг/кг) Плотность минерального костного вещества (г/см³) Уровень кальция в сыворотке (мг/дл) Псевдо - 0,2242±0,0121 10,14±0,17 OVX - 0,2152±0,0166 9,73±0,15 Соединение С-2 6 0,2196±0,0177 9,83±0,37 13 0,2308±0,0081 10,19±0,36 Испытание 3 Группа Доза (нг/кг) Плотность минерального костного вещества (г/см³) Уровень кальция в сыворотке (мг/дл) Псевдо - 0,2338±0,0120 9,71±0,27 OVX - 0,2194±0,0100 9,25±0,11 Соединение С-5 17 0,2316±0,0134 9,60±0,15 50 0,2354±0,0126 10,10±0,21 Испытание 4 Группа Доза (нг/кг) Плотность минерального костного вещества (г/см³) Уровень кальция в сыворотке (мг/дл) Псевдо - 0,2422±0,0130 10,01±0,04 OVX - 0,2163±0,0100 9,58±0,18 Соединение С-7 6 0,2322±0,0092 9,83±0,22 13 0,2548±0,0143 10,07±0,22 Испытание 5 Группа Доза (нг/кг) Плотность минерального костного вещества (г/см³) Уровень кальция в сыворотке (мг/дл) Псевдо - 0,2252±0,0080 9,82±0,22 OVX - 0,2115±0,0110 9,53±0,28 Соединение D-1 6 0,2211±0,0175 9,75±0,10 13 0,2360±0,0143 10,23±0,26 Испытание 6 Группа Доза (нг/кг) Плотность минерального костного вещества (г/см³) Уровень кальция в сыворотке (мг/дл) Псевдо - 0,2302±0,0110 9,61±0,16 OVX - 0,2042±0,0070 9,64±0,22 Соединение D-6 50 0,2365±0,0204 9,76±0,29

Таблица 4 Испытание 7 Группа Доза (нг/кг) Плотность минерального костного вещества (г/см³) Уровень кальция в сыворотке (мг/дл) Псевдо - 0,2252±0,0080 9,82±0,22 OVX - 0,2115±0,0110 9,53±0,28 Соединение F-1 6 0,2366±0,0139 10,12±0,59 Сравнительное испытание Группа Доза (нг/кг) Плотность минерального костного вещества (г/см³) Уровень кальция в сыворотке (мг/дл) Псевдо - 0,2451±0,0251 10,50±0,83 OVX - 0,2167±0,0126 9,60±0,23 2α-(3-Гидроксипропил) окси-1α,25-дигидрокси-витамин D₃ 10 0,2269±0,0161 10,30±0,37

В группе OVX подтверждается падение плотности костного минерального вещества по сравнению с группой с псевдооперацией (псевдо). Также подтверждается, что плотность костного минерального вещества восстанавливается при введении производных витамина D₃. Однако группа, которой вводили 2α-(3-гидроксипропил)окси-1α,25-дигидроксивитамин D₃, описанный в международной публикации WO 01/62723, показывает повышение уровня кальция в сыворотке с возрастанием плотности костного минерального вещества, и обнаружено, что при дозе (25 нг/кг), необходимой для того, чтобы плотность костного минерального вещества стала равной или превысила плотность в группе псевдо, возрастание существенно - на 1 мг/дл или более. С другой стороны, обнаружено, что соединения по настоящему изобретению повышают плотность костного минерального вещества до величины, эквивалентной или большей, чем величина в группе псевдо, хотя находят повышение уровня кальция в сыворотке при сравнении с группой OVX в интервале не более 1 мг/дл.

Из результатов, описанных выше, находят, что производные витамина D₃ или их медицински приемлемые сольваты по настоящему изобретению оказывают действие на костную ткань более превосходное, чем предшествующие описанные производные витамина D₃.

Производные витамина D₃ или их медицински приемлемые сольваты по настоящему изобретению могут применяться в качестве лекарственных средств.

Изобретение относится к новому производному витамина D₃, применимому в качестве терапевтического средства против остеопороза, которое представлено формулой (1), где R₁ представляет собой атом водорода, алкильную группу с 1-6 атомами углерода, алкилкарбонилоксиалкильную группу, причем каждый алкил имеет 1-6 атомов углерода, или арилкарбонилоксиалкильную группу, причем арил имеет 6-10 атомов углерода и алкил имеет 1-6 атомов углерода; R₂ представляет собой атом водорода или алкильную группу с 1-6 атомами углерода или вместе с другим R₂ и атомом углерода, с которым они связаны, может образовывать циклическую алкильную группу с 3-6 атомами углерода; R₃ представляет собой алкильную группу с 1-6 атомами углерода или вместе с другим R₃ и атомом углерода, с которым они связаны, может образовывать циклическую алкильную группу с 3-6 атомами углерода; X представляет собой атом кислорода или метиленовую группу; и n равен целому числу 1 или 2. Изобретение также относится к фармацевтической композиции, обладающей аффинностью к рецептору витамина D (VDR), содержащей соединение формулы (1); а также относится к промежуточному соединению, представленному формулой (2), в которой R₂, X и n являются такими же, как указано выше, R₄ представляет собой R₁ в формуле (1), метоксиметильную группу, метоксиэтоксиметильную группу, тетрагидрофуранильную группу, тетрагидропиранильную группу или бензилоксиметильную группу; и R₅ представляет собой защитную группу для гидроксильной группы, выбранную из группы, включающей метоксиметильную группу, ацильную группу с 1-3 атомами углерода (указанное число атомов углерода включает углерод карбонила), триметилсилильную группу, триэтилсилильную группу, трет-бутилдиметилсилильную группу и трет-бутилдифенилсилильную группу. 5 н. и 7 з.п. ф-лы, 4 табл., 14 пр.

1. Производное витамина D₃, представленное следующей формулой (1):

где
R₁ представляет собой атом водорода, алкильную группу с 1-6 атомами углерода, алкилкарбонилоксиалкильную группу, причем каждый алкил имеет 1-6 атомов углерода, или арилкарбонилоксиалкильную группу, причем арил имеет 6-10 атомов углерода и алкил имеет 1-6 атомов углерода; R₂ представляет собой атом водорода или алкильную группу с 1-6 атомами углерода или вместе с другим R₂ и атомом углерода, с которым они связаны, может образовывать циклическую алкильную группу с 3-6 атомами углерода; R₃ представляет собой алкильную группу с 1-6 атомами углерода или вместе с другим R₃ и атомом углерода, с которым они связаны, может образовывать циклическую алкильную группу с 3-6 атомами углерода; X представляет собой атом кислорода или метиленовую группу; и n равен целому числу 1 или 2.

2. Производное витамина D₃ по п. 1, где X представляет собой атом кислорода.

3. Производное витамина D₃ по п. 1, где X представляет собой метиленовую группу.

4. Производное витамина D₃ по любому из пп. 1-3, где n равен 1.

5. Производное витамина D₃ по любому из пп. 1-4, где R₂ представляет собой атом водорода.

6. Производное витамина D₃ по любому из пп. 1-5, где R₁ представляет собой атом водорода, метильную группу, этильную группу, пропильную группу, изопропильную группу, трет-бутильную группу, трет-бутилкарбонилоксиметильную группу или фенилкарбонилоксиметильную группу.

7. Производное витамина D₃ по любому из пп. 1-6, где R₂ представляет собой атом водорода и n равен 1.

8. Производное витамина D₃ по п. 1, где R₁ представляет собой атом водорода, метильную группу, этильную группу, пропильную группу, изопропильную группу, трет-бутильную группу, трет-бутилкарбонилоксиметильную группу или фенилкарбонилоксиметильную группу; R₂ представляет собой атом водорода или вместе с другим R₂ и атомом углерода, с которым они связаны, образует циклопропильную группу; R₃ представляет собой метильную группу или этильную группу или вместе с другим R₃ и атомом углерода, с которым они связаны, образует циклопропильную группу; X представляет собой атом кислорода или метиленовую группу; и n равен 1.

9. Производное витамина D₃, выбранное из группы, включающей
(5Z,7E)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-карбоксиэтокси)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триол;
(5Z,7E)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-метоксикарбонилэтокси)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триол;
(5Z,7E)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-пропоксикарбонилэтокси)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триол;
(5Z,7E)-(lR,2S,3R,20R)-2-(2-(1-метил)этоксикарбонилэтокси)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триол;
(5Z,7E)-(1R,2S,3R,20R)-2-((трет-бутилкарбонилокси)метоксикарбонилэтокси)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триол;
(5Z,7E)-(1R,2S,3R,20R)-2-((фенилкарбонилокси)метоксикарбонилэтокси)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триол;
(5Z,7E)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-карбоксипропил)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триол;
(5Z,7E)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-(1,1-диметил)этоксикарбонилпропил)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триол;
(5Z,7E)-(1R,2S,3R,20R)-2-((2-карбокси-2,2-этано)этокси)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триол;
(5Z,7E)-(1R,2S,3R,20R)-2-((2-метоксикарбонил-2,2-диметил)этокси)-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триол;
(5Z,7E)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-карбоксиэтокси)-26,27-диметил-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триол и
(5Z,7E)-(1R,2S,3R,20R)-2-(2-карбоксиэтокси)-26,27-нор-25-циклопентил-23-ин-9,10-секо-5,7,10(19)-холестатриен-1,3,25-триол.

10. Фармацевтическая композиция, обладающая аффинностью к рецептору витамина D (VDR), содержащая терапевтически эффективное количество производного витамина D₃ по любому из пп. 1-9 и фармацевтически приемлемый носитель.

11. Терапевтическое средство против остеопороза, содержащее в качестве активного ингредиента терапевтически эффективное количество производного витамина D₃ по любому из пп. 1-9.

12. Соединение, представленное следующей формулой (2)

где
R₂, X и n являются такими же, как в формуле (1);
R₄ представляет собой R₁ в формуле (1), метоксиметильную группу, метоксиэтоксиметильную группу, тетрагидрофуранильную группу, тетрагидропиранильную группу или бензилоксиметильную группу; и
R₅ представляет собой защитную группу для гидроксильной группы, выбранную из группы, включающей метоксиметильную группу, ацильную группу с 1-3 атомами углерода (указанное число атомов углерода включает углерод карбонила), триметилсилильную группу, триэтилсилильную группу, трет-бутилдиметилсилильную группу и трет-бутилдифенилсилильную группу.