РАНОЗАЖИВЛЯЮЩАЯ, ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНАЯ МАЗЬ НА ОСНОВЕ ЧАЙНОГО ГРИБА (MEDUSOMYCES GISEVII LINDAU) Российский патент 2018 года по МПК A61K36/06 A61K36/61 A61K36/736 A61P17/02 

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности, к лекарственным средствам на растительной основе с выраженным заживляющим, противовоспалительным действием на основе биологического сырья.

Уровень техники

При лечении ран основными требованиями к лекарственному препарату являются следующие его характеристики:

- антибактериальные свойства препарата;

- обеспечение ускорения процессов регенерации поврежденных тканей с последующей эпителизации раны;

- эффективность против воспалительных процессов, вызванных продуктами распада тканей и продуктами жизнедеятельности клеток.

В настоящее время для лечения ран используют препараты в различных лекарственных формах:

- препаратов для перорального применения;

- тампонов, салфеток, повязок, пропитанных растворами лекарственных веществ;

- в виде мазей и порошков, содержащих, в том числе и антибиотики [1-3].

Препараты для внутреннего применения как правило применяются в качестве одного из элементов при комплексной терапии, кроме того, они обладают достаточно широким спектром противопоказаний и побочных эффектов.

К недостаткам наружных ранозаживляющих препаратов относят большой расход медикаментов, ограниченность применения для патологий, требующих длительного лечения и осложненных гнойными выделениями.

Широко используются для лечения повреждений кожи различные кремы и мази, содержащие активные начала в виде витаминов, экстракты трав и т.п., жировую основу - воск, вазелин, глицерин, полиэтиленоксид и т.д., а также вспомогательные вещества, улучшающие эксплуатационные характеристики крема - отдушки, консерванты и т.д. [4-6].

Наибольшую ранозаживляющую эффективность проявляют препараты, имеющие консистенцию геля или эмульсии, поскольку они легко наносятся на ожоговую поверхность и легко впитываются. Характер консистенции обеспечивается технологией получения лекарственного средства.

Задачей настоящего изобретения является расширение ассортимента противовоспалительных и ранозаживляющих лечебных средств на основе сырья, получаемого из зооглеи чайного гриба.

При изучении доступных источников (научная литература, патенты) обнаружены сведения о множестве раневых покрытий, находящихся на различных этапах разработки, но при этом в качестве основного компонента культуральная жидкость чайного гриба не применялась. В заявляемом средстве отсутствуют токсические компоненты, но присутствуют культуральная жидкость чайного гриба (Medusomyces Gisevii Lindau), эфирное масло чайного дерева (Melaleuca alternifolia), масло миндальных орехов и ряд других компонентов.

На настоящий момент для заживления ран наиболее часто используют следующие мази и гели: левомеколь, солкосерил, актовегин.

Левомеколь - мазь белого цвета, для наружного применения, содержит в своем составе левомицетин. Препарат обладает выраженным антибактериальным эффектом, стимулирует восстановление нормальной структуры тканей ран различных форм. К недостаткам препарата можно отнести то, что его не рекомендуется применять длительное время из-за его аллергенности и токсического действия.

Солкосерил - мазь для наружного применения, обладает ранозаживляющим, регенерирующим, антигипоксическим, мембраностабилизирующим, ангиопротективным, цитопротективным действием. При этом применение Солкосерила может приводить к появлению аллергических реакций по типу крапивницы или дерматита.

Актовегин - гель для наружного применения, улучшает трофику и регенерацию тканей. Актовегин обладает значительным рядом побочных действий. В частности, в начале лечения препаратом могут быть местные болевые ощущения, связанные с отеком тканей.

Раскрытие изобретения

Задачей настоящего изобретения является расширение спектра противоожоговых средств и создание на основе растительного сырья лекарственного средства, обладающего высоким терапевтическим эффектом воздействия.

Технический результат, который может быть получен с помощью предлагаемого изобретения, сводится к повышению ранозаживляющих, противовоспалительных, регенерирующих свойств при отсутствии аллергического действия.

Технический результат достигается с помощью ранозаживляющей мази, содержащей культуральную жидкость чайного гриба, желатин кристаллический пищевой, бензокаин, масло миндальных орехов, глицерин, эфирное масло чайного дерева, лецинол, мас. % (Табл. 1):

Осуществление изобретения

Предлагаемый препарат готовят следующим образом.

Для приготовления культуральной жидкости чайного гриба 10 г сухого черного чайного листа настаивалось в 1 л воды, доведенной до кипения. В дальнейшем полученный настой был отфильтрован, смешан со 100 г сахарозы, охлажден до комнатной температуры, после чего помещен в стеклянную посуду с добавлением среза зооглеи чайного гриба из расчета 10 г/л. Посуда с материалом для ферментации содержалась в воздушном термостате при температуре 27°C в течение 28 дней. По окончании ферментации полученная культуральная жидкость была отфильтрована через марлевый тампон, доведена до кипения и охлаждена при комнатной температуре.

Для приготовления водной фазы мази к 12 г кристаллического желатина было добавлено 345 мл культуральной жидкости чайного гриба. Смесь была оставлена на 30 минут при комнатной температуре, после чего помещена в термостат при температуре 60°C на 80 минут, до полного растворения желатина.

Для приготовления масляной фазы мази была приготовлена смесь 100 мл глицерина с 54 мл масла миндаля, к которой было добавлено 16 г порошка лецинола (гидрогенизированный лецитин). Смесь была помещена на лабораторное перемешивающее устройство при температуре 66°C и частоте вращения 185 об/мин на 80 минут, до полного растворения лецитина.

В дальнейшем было произведено соединение водной и масляной фаз с добавлением 2 г порошка анестезина и 1,5 мл эфирного масла чайного дерева. Полученная субстанция смешивалась посредством погружного гомогенизатора в течение 10 мин. до образования стабильной эмульсии кремового цвета, была охлаждена при комнатной температуре в течение 30 мин., а затем расфасована в герметичные контейнеры и помещена в холодильную камеру при температуре 3,1°C.

Чайный гриб (Medusomyces Gisevii Lindau) - симбиотический организм, представляющий собой микробный консорциум, состоящий из культур дрожжеподобных грибов и уксуснокислых бактерий. Культуральная жидкость формируется посредством ферментации настоя черного чая с добавлением сахара при инкубации при температуре 17-35°C в аэробных условиях. В процессе ферментации дрожжи сбраживают сахара с образованием этилового спирта и углекислоты, с дальнейшим окислением спирта бактериями до образования уксусной кислоты. Финальный продукт насыщен углекислым газом и имеет рН 2,5-4,5 [7-8].

Химический состав культуральной жидкости чайного гриба весьма сложен и включает следующие группы веществ:

1. Кислоты органические: уксусная, глюконовая, щавелевая, лимонная, яблочная, молочная, пировиноградная, койевая;

2. Спирт этиловый;

3. Витамины: аскорбиновая кислота, тиамин;

4. Ферменты: каталаза, липаза, протеаза, карбогидраза;

5. Липиды: стерины, фосфатиды, жирные кислоты;

6. Сахара: моносахариды, дисахариды;

7. Пигменты: хлорофилл, ксантофилл;

8. Пуриновые основания из чайного листа;

9. Смолы и таннины из чайного листа;

10. Антибиотические вещества [9].

Культуральная жидкость чайного гриба проявляет выраженную антимикробную активность против достаточно широкого ряда патогенных микроорганизмов, относящихся, в частности, к родам Staphylococcus, Shigella, Escherichia, Aeromonas, Pseudomonas, Enterobacter, Salmonella, Bacillus и др. Отчасти данный эффект может быть быть следствием способности уксусной кислоты ингибировать рост ряда микроорганизмов, однако антимикробная способность культуральной жидкости чайного гриба сохраняется даже при нейтральном рН и после термической денатурации [10].

Бензокаин - местный анестетик для поверхностной анестезии. Уменьшает проницаемость клеточной мембраны для Na⁺, вытесняет Са²⁺ из рецепторов, расположенных на внутренней поверхности мембраны, блокирует проведение нервных импульсов. Препятствует возникновению болевых импульсов в окончаниях чувствительных нервов и их проведению по нервным волокнам. При нанесении на поверхность слизистой оболочки полости рта действие развивается через 1 мин [11].

Желатин - обратимо коагулирующий коллоид, получаемый из фибриллярного белка коллагена путем вываривания в воде шкур животных, костей, хрящей или сухожилий, т.е. материала, в котором содержится коллаген. Почти 20% веса желатина составляет аминокислота глицин. Получение желатина сходно с получением клея, но вываривание в процессе приготовления желатина длится не столь долго и не приводит к полной деградации коллагена до жидких конечных продуктов. Желатин способствует ускорению коллагенизации раны в процессе заживления [12].

Масло миндальных орехов активирует метаболические процессы в соединительной ткани, стимулирует выработку коллагена, ускоряя коллагенизацию раны при заживлении. Эфирное масло чайного дерева обладает антисептическим, противогрибковым, противовирусным, противовоспалительным, регенерирующим и иммуностимулирующим действием. Масло эффективно подавляет рост таких бактерий, как стафилококки, стрептококки, пневмококки, гонококки, кишечная палочка и ряда других, а также грибковой флоры. Дезинфицирующие свойства масла используются в медицине, гигиене, косметологии. Масло способствует устранению угревой сыпи, бородавок, папиллом, перхоти, грибковых поражений кожи, эффективно при укусах насекомых, ссадинах, порезах. Укрепляет волосяные фолликулы, что улучшает рост и структуру волос [13].

Глицерин способствует повышению гидратации кожи, облегчает зуд, препятствует развитию воспаления. При изготовлении средств наружного применения глицерин также используется в качестве пластификатора, способствующего сохранению однородной структуры препарата [14].

Лецинол, сохраняя все основные положительные качества натурального лецитина, обладает, к тому же, высокой стабильностью. При разведении в воде, образует стабильные липосомы, благодаря которым можно формировать устойчивые водо- и жирорастворимые субстанции. Благодаря высокой проникающей способности, способствует проникновению в кожу других активных ингредиентов, эффективно увеличивает эффективность синергичных по действию компонентов. Это значительно увеличивает увлажненность кожи и уменьшает потертости и шероховатость кожи. Кроме того, устраняет раздражения, вызванные другими компонентами.

Благодаря выбранному количественному соотношению компонентов состав имеет оптимальную для использования консистенцию, т.е. не застывает, образуя корку, и не растекается по поверхности обрабатываемой раны.

Вязкость препарата (мази) при указанных количественных соотношениях компонентов соответствует фармакологическим свойствам мазевого препарата, приготовленного на водорастворимой основе. Его лечебные функции оптимальны, медикаментозные данные соответствуют требованиям для препаратов данной группы.

Результат испытания ранозаживляющей противовоспалительной мази на белых лабораторных крысах линии Вистар в сравнительном аспекте.

Исследование влияния ранозаживляющей противовоспалительной мази по следующей методике.

Эксперимент проведен на белых крысах-самцах линии Вистар массой 200-220 г. Животные были разделены на три групп по 20 особей в каждой.

У всех крыс под ингаляционным наркозом по трафарету области спины иссекали участок кожи 400 мм² (с подкожной клетчаткой).

В I группе животных (контрольной) дефект заживал под струпом.

Во II группе животных применяли мазь «Солкосерил», выбранной в качестве препарата сравнения, в дозировке 0,5 мл с помощью шприца.

В III группе животных применяли предлагаемый мазь на основе чайного гриба, в дозировке 0,5 мл с помощью шприца.

Каждые сутки эксперимента проводили вульнографию. Для этого на образовавшуюся рану накладывали прозрачную пленку, переносили контурыран, сканировали и вычисляли их площадь при помощи программы Axio-vision 4.8.

За животными наблюдали до 15 дня, учитывая при этом внешний вид зоны повреждения

В Таблице 2 приведены данные, характеризующие ранозаживляющее действие предлагаемого средства в сравнении с контрольной группой (без лечения) и с известной мазью (Солкосерил).

Здесь и далее: * - достоверность отличий от контроля (* - р≤0,05; ** - р≤0,005; *** - р≤0,0005) по результатам расчета t-критерия Стьюдента,

- достоверность отличий между группами 1 и 2 ( - р≤0,05; - р≤0,005; - р≤0,0005)

Результаты оценки состояния раны в течение исследования представлены в Таблице 3.

Для изучения динамики процессов репаративной регенерации в поврежденной ткани оценивались также гематологические показатели.

Из результатов гематологического анализа следует, что в период после нанесения раны у животных происходит постепенная нормализация исследованных гематологических параметров (количества эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина крови), но в группе животных, где применялось заявляемое ранозаживляющее средство, этот процесс протекает более интенсивно, и нормализация гематологических показателей завершается к 10-м суткам наблюдения, в то время как в контроле и в группе, в которой применялся Солкосерил - к 15 суткам (Таблица 4).

Предлагаемое изобретение за счет своего состава имеет следующие преимущества по сравнению с другими известными техническими решениями:

- повышение противовоспалительных, регенерирующих, антиоксидантных и антимикробных свойств;

- отсутствие аллергического действия;

- является экологически чистым препаратом.

Источники информации

1. Машковский М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский, М.: Медицина, 2012, 1216 с.

2. Коган Г.Я. Технология лекарственных форм / Г.Я. Коган, М.: Медгиз, 1992, 383 с.

3. Пат. РФ 2044541, 1995, кл. А61K 9/52.

4. Пат. США 5034228, кл. А61K 87/22, 1991.

5. Пат. США 4816271, кл. А61K 7/40, 1989.

6. Пат. Фр. 2668366, кл. А61K 7/48, 1992.

7. Пат. RU 2153816. кл. A25L 2/00, 2000.

8. Пат. RU 2480519. кл. C12G 3/02, 4.2013.

9. Sreeramulu, G. Kombucha fermentation and its antimicrobial activity / G. Sreeramulu, Y. Zhu, W. Knol // J Agric Food Chem. - 2000. - Vol. 48. - №6. - P. 2589-2594.

10. Даниелян, Л.Т. Чайный гриб и его биологические особенности / Л.Т. Даниелян. - М.: «Медицина», 2005. - 83 с.

11. Araujo De, D.R. Bioadhesive films containing benzocaine: correlation between in vitro permeation and in vivo local anesthetic effect / D.R. de Araujo, C. Padula, C.M. Cereda, G.R. Tofoli, R.B. Brito Jr, E. de Paula et al. // Pharmaceutical research. - 2010. - Vol. 27. - №8. - P. 1677-1686.

12. Morimoto, N. Exploratory clinical trial of combination wound therapy with a gelatin sheet and platelet-rich plasma in patients with chronic skin ulcers: study protocol / N. Morimoto, N. Kakudo, M. Matsui, T. Ogura, Т. Hara, K. Suzuki et al. / BMJ Open. - 2015. - Vol. 5. - №5. - e007733.

13. Ahmad, Z. The uses and properties of almond oil / Z. Ahmad // Complementary therapies in clinical practice. - 2010. - Vol. 16. - №1. - P. 10-12.

14. Aramwit, P. Improvement of physical and wound adhesion properties of silk sericin and polyvinyl alcohol dressing using glycerin / P. Aramwit, J. Ratanav-araporn, T. Siritientong // Advances in Skin & Wound Care. - 2015. - Vol. 28. - №8 - P. 358-367.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к лекарственным средствам на растительной основе с выраженным заживляющим, противовоспалительным действием. Ранозаживляющая противовоспалительная мазь, содержащая следующее соотношение компонентов, мас. %: культуральная жидкость чайного гриба - 66,71; желатин кристаллический - 2,15; бензокаин - 0,36; масло миндальных орехов - 5,14; глицерин - 22,54, эфирное масло чайного дерева - 0,24; лецинол - 2,86. Вышеописанная мазь обладает выраженным ранозаживляющим, противовоспалительным, регенерирующим действием при отсутствии аллергической реакции. 4 табл.

Ранозаживляющая противовоспалительная мазь, содержащая следующее соотношение компонентов, мас. %: культуральная жидкость чайного гриба - 66,71; желатин кристаллический - 2,15; бензокаин - 0,36; масло миндальных орехов - 5,14; глицерин - 22,54, эфирное масло чайного дерева - 0,24; лецинол - 2,86.