ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ АГОНИСТА КАППА-ОПИОИДНОГО РЕЦЕПТОРА Российский патент 2022 года по МПК A61K38/07 A61K47/12 A61K47/26 A61P29/00 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к области фармацевтических препаратов и относится к фармацевтической композиции агониста КОР (каппа-опиоидный рецептор) рецептора 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты, и способу ее получения.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Каппа-опиоидный рецептор присутствует в головном и спинном мозге, центральных и периферических нервных окончаниях, (соматических и висцеральных) первичных сенсорных афферентных нервных клетках и иммунных клетках. Он участвует в важных физиологических действиях, такие как восприятие боли, нейроэндокринные функции, эмоциональное поведение и познание.

Jolivalt et al. (Diabetologia 2006, 49 (11): 2775-85) сообщают об действии агониста КОР асимадолина при диабетической нейропатии грызунов. Bileviciute-Ljungar et al. (Eur. J. Pharm 2004.494: 139-46) сообщают о действии агониста КОР U-50488 в модели хронического компрессионного повреждения (CCI) у крыс с нейропатической болью и влиянии блокады опиоидного антагониста налоксона на его действие. Riviere, Br сообщает о применении агонистов КОР для лечения или профилактики висцеральной боли, включая гинекологические состояния, такие как дисменорея и эндометриоз (J. Pharmacol 2004.141: 1331-4). Эти наблюдения обосновывают применение агонистов КОР при лечении нейропатической боли, вызванной диабетом, вирусами и химиотерапией.

Раскрытые в настоящее время патентные заявки, относящиеся к агонисту КОР рецептора, включают WO2007139826, WO2008060552, WO09932510, WO2013184794, WO2014089019, WO2014184356 и WO2015065867. Кроме того, в WO2017211272 также раскрыт новый агонист КОР рецептора, то есть 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновая кислота.

Поскольку 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновая кислота имеет низкую растворимость, существует необходимость в разработке фармацевтической композиции (препарата) агониста КОР рецептора, которая могла бы облегчить ее введение, сохранить стабильность при хранении и последующем применении и показать лучшие действия.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В настоящем описании предлагается фармацевтическая композиция, содержащая активный ингредиент 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль и буферный раствор.

В альтернативных вариантах осуществления буферный раствор согласно настоящему изобретению представляет собой ацетатный буферный раствор и предпочтительно буферный раствор уксусной кислоты и ацетата натрия.

В альтернативных вариантах осуществления pH фармацевтической композиции составляет примерно от 2,0 до 6,0, может составлять примерно 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9, 3,0, 3,1, 3,2, 3,3, 3,4, 3,5, 3,6, 3,7, 3,8, 3,9, 4,0, 4,1, 4,2, 4,3, 4,4, 4,5, 4,6, 4,7, 4,8, 4,9, 5,0, 5,1, 5,2, 5,3, 5,4, 5,5, 5,6, 5,7, 5,8, 5,9 или 6,0 и предпочтительно примерно от 3,0 до 5,0.

В альтернативных вариантах осуществления концентрация буферного раствора в фармацевтической композиции составляет примерно от 1 до 150 мМ, может составлять примерно 1, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145 или 150 мМ, предпочтительно примерно от 10 до 80 мМ и наиболее предпочтительно примерно 20 мМ.

Концентрация активного ингредиента или его фармацевтически приемлемой соли в фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению составляет примерно от 0,1 до 1,0 мг/мл и может составлять примерно 0,1, 0,2 , 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9 или 1,0 мг/мл.

Кроме того, осмотическое давление фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению составляет примерно от 280 до 320 мОсмоль/кг, и неограничивающие примеры включают 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301, 302, 303, 304, 305, 306, 307, 308, 309, 310, 311, 312, 313, 314, 315, 316, 317, 318, 319 или 320 мОсмоль/кг.

В альтернативных вариантах осуществления фармацевтическая композиция также содержит сахарид. Термин «сахарид» согласно настоящему изобретению включает обычные композиции (CH2O)_n и их производные, включая моносахарид, дисахарид, трисахарид, полисахарид, сахарный спирт, восстанавливающий сахар, невосстанавливающий сахар и тому подобное. Сахарид может быть выбран из глюкозы, сахарозы, трегалозы, лактозы, фруктозы, мальтозы, декстрана, глицерина, эритрита, глицерола, арабита, силита, сорбита, маннита, мелибиозы, мелезитозы, раффинозы, маннотриозы, стахиозы, мальтозы, лактулозы, мальтулозы, сорбита, мальтита, лактитола, изомальтулозы и т. п., и предпочтительно маннита.

В альтернативных вариантах осуществления концентрация сахарида в фармацевтической композиции составляет примерно от 2 до 100 мг/мл, и неограничивающие примеры включают 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 96, 98 или 100 мг/мл, предпочтительно примерно от 10 до 80 мг/мл и наиболее предпочтительно примерно 45 мг/мл.

В альтернативных вариантах осуществления фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению содержит:

(a) от 0,1 до 1,0 мг/мл активного ингредиента 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, и

(b) от 1 до 150 мМ ацетатного буферного раствора, и предпочтительно pH фармацевтической композиции составляет примерно от 2,0 до 6,0.

В альтернативных вариантах осуществления фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению содержит:

(a) от 0,1 до 1,0 мг/мл активного ингредиента 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, и

(b) от 1 до 150 мМ буферного раствора уксусной кислоты и ацетата натрия, и предпочтительно pH фармацевтической композиции составляет примерно от 2,0 до 6,0.

В альтернативных вариантах осуществления фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению содержит:

(a) от 0,1 до 1,0 мг/мл активного ингредиента 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли,

(b) от 1 до 150 мМ ацетатного буферного раствора, и

(c) от 2 до 100 мг/мл маннита, и предпочтительно pH фармацевтической композиции составляет примерно от 2,0 до 6,0.

В альтернативных вариантах осуществления фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению содержит:

(a) от 0,1 до 1,0 мг/мл активного ингредиента 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли,

(b) от 1 до 150 мМ буферного раствора уксусной кислоты и ацетата натрия, и

(c) от 2 до 100 мг/мл маннита, и предпочтительно pH фармацевтической композиции составляет примерно от 2,0 до 6,0.

В альтернативных вариантах осуществления фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению содержит:

(a) от 0,1 до 1,0 мг/мл активного ингредиента 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, и

(b) от 1 до 150 мМ ацетатного буферного раствора, и предпочтительно осмотическое давление фармацевтической композиции составляет примерно от 280 до 320 мОсмоль/кг.

В альтернативных вариантах осуществления фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению содержит:

(a) от 0,1 до 1,0 мг/мл активного ингредиента 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли,

(b) от 1 до 150 мМ ацетатного буферного раствора, и

(c) от 2 до 100 мг/мл сахарида, и предпочтительно осмотическое давление фармацевтической композиции составляет примерно от 280 до 320 мОсмоль/кг.

В альтернативных вариантах осуществления фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению содержит:

(a) от 0,1 до 1,0 мг/мл активного ингредиента 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли,

(b) от 1 до 150 мМ ацетатного буферного раствора, и

(c) от 2 до 100 мг/мл маннита, и предпочтительно осмотическое давление фармацевтической композиции составляет примерно от 280 до 320 мОсмоль/кг.

В альтернативных вариантах осуществления фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению содержит:

(a) от 0,1 до 1,0 мг/мл активного ингредиента 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли,

(b) от 1 до 150 мМ буферного раствора уксусной кислоты и ацетата натрия, и

(c) от 2 до 100 мг/мл маннита, и предпочтительно осмотическое давление фармацевтической композиции составляет примерно от 280 до 320 мОсмоль/кг.

В альтернативных вариантах осуществления фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению содержит:

(a) от 0,1 до 1,0 мг/мл активного ингредиента 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли,

(b) от 1 до 150 мМ буферного раствора уксусной кислоты и ацетата натрия, и предпочтительно pH фармацевтической композиции составляет примерно от 2,0 до 6,0 и

(c) от 2 до 100 мг/мл маннита, и предпочтительно осмотическое давление фармацевтической композиции составляет примерно от 280 до 320 мОсмоль/кг.

Фармацевтически приемлемая соль активного ингредиента согласно настоящему изобретению представляет собой фармацевтически приемлемую соль, выбранную из группы, состоящей из гидрохлорида, фосфата и цитрата, и предпочтительно гидрохлорида. Его неограничивающие примеры включают дигидрохлорид, тригидрохлорид и т.п.

В альтернативных вариантах осуществления фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению содержит от 0,1 до 1,0 мг/мл активного ингредиента 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты гидрохлорида, и осмотическое давление фармацевтической композиции составляет примерно от 280 до 320 мОсмоль/кг.

В альтернативных вариантах осуществления фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению содержит от 0,1 до 1,0 мг/мл активного ингредиента 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты гидрохлорида, и pH фармацевтической композиции составляет примерно от 2,0 до 6,0.

В настоящем описании также предложен способ получения указанной выше фармацевтической композиции, включающий стадию смешивания 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли и буферного раствора. Кроме того, способ также включает стадию добавления сахарида.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция стабильна при 2-8°C в течение по меньшей мере 3 месяцев, по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 9 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев или по меньшей мере 24 месяцев. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция стабильна при 25±2°C/60±5% относительной влажности (RH) в течение по меньшей мере 7 дней, по меньшей мере 14 дней, по меньшей мере 1 месяца, по меньшей мере 2 месяцев, по меньшей мере 3 месяцев или по меньшей мере 6 месяцев.

В альтернативных вариантах осуществления после хранения фармацевтической композиции при 2-8°C в течение 3 месяцев скорость роста общего содержания примесей не превышает 20 % и может составлять 20, 18, 16, 14, 12, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1 % или ниже.

В альтернативных вариантах осуществления после хранения фармацевтической композиции при 2-8°C в течение 6 месяцев скорость роста общего содержания примесей не превышает 20% и может составлять 20, 18, 16, 14, 12, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1 % или ниже. В альтернативных вариантах осуществления после хранения фармацевтической композиции при 2-8°C в течение 9 месяцев скорость роста общего содержания примесей не превышает 20 % и может составлять 20, 18, 16, 14, 12, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1 % или ниже. В альтернативных вариантах осуществления после хранения фармацевтической композиции при 25±2°C/60±5 % RH в течение 1 месяца, 2 месяцев, 3 месяцев или 6 месяцев скорость роста общего содержания примесей не превышает 20%, и может составлять 20, 18, 16, 14, 12, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1 % или ниже. В настоящем описании также предложено применение вышеуказанной фармацевтической композиции для получения лекарственного средства для лечения или профилактики заболевания или состояния, связанного с КОР рецептором, у млекопитающих, где состояние, связанное с КОР рецептором, выбрано из группы, состоящей из боли, воспаления, зуда, отека, гипонатриемии, гипокалиемии, кишечной непроходимости, кашля и глаукомы.

В неограничивающих вариантах осуществления боль согласно настоящему изобретению выбирана из, без ограничения, нейропатической боли, боли в туловище, висцеральной боли, кожной боли, боли при артрите, боли при камнях в почках, спазмов матки, дисменореи, эндометриоза, диспепсии, послеоперационной боли, боли после лечения, глазной боли, боли при отите, боли при скоротечном раке и боли, связанной с расстройством желудочно-кишечного тракта.

Термины

«Буферный раствор» относится к буферному раствору, который является устойчивым к изменениям pH за счет действия кислотно-основных сопряженных компонентов. Примеры буферного раствора, который может регулировать pH в соответствующем диапазоне, включают ацетат, сукцинат, глюконат, гистидин, оксалат, лактат, фосфат, цитрат, тартрат, фумарат, глицилглицин и другие буферные растворы органических кислот.

«Цитратный буферный раствор» представляет собой буферный раствор, содержащий цитрат-ионы. Примеры цитратного буферного раствора включают растворы лимонной кислоты и цитрата натрия, лимонной кислоты и цитрата калия, лимонной кислоты и цитрата кальция, лимонной кислоты и цитрата магния и тому подобное. Предпочтительным цитратным буферным раствором является раствор лимонной кислоты и цитрата натрия.

«Сукцинатный буферный раствор» представляет собой буферный раствор, содержащий сукцинат-ионы. Примеры сукцинатного буферного раствора включают раствор янтарной кислоты и сукцината натрия, янтарной кислоты и сукцината калия, янтарной кислоты и сукцината кальция и тому подобное. Предпочтительным сукцинатным буферным раствором является раствор янтарной кислоты и сукцината натрия.

«Фосфатный буферный раствор» представляет собой буферный раствор, содержащий фосфат-ионы. Примеры фосфатного буферного раствора включают растворы гидрофосфата натрия и дигидрофосфата натрия, гидрофосфата натрия и дигидрофосфата калия и т.п. Предпочтительный фосфатный буферный раствор представляет собой раствор гидрофосфата натрия и дигидрофосфата натрия.

«Ацетатный буферный раствор» представляет собой буферный раствор, содержащий ацетат-ионы. Примеры ацетатного буферного раствора включают растворы уксусной кислоты и ацетата натрия, ацетата гистидина, уксусной кислоты и ацетата калия, уксусной кислоты и ацетата кальция, уксусной кислоты и ацетата магния и т.п. Предпочтительным ацетатным буферным раствором является раствор уксусной кислоты и ацетата натрия.

«Фармацевтическая композиция» относится к смеси, содержащей одно или более соединений в соответствии с настоящим изобретением или их физиологически/фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, и другие химические компоненты, такие как физиологически/фармацевтически приемлемые носители и наполнители. Фармацевтическая композиция предназначена для поддержания стабильности активного ингредиента антитела, содействия введению в организм, облегчения абсорбции активного ингредиента и, таким образом, оказания биологического действия. Используемые здесь термины «фармацевтическая композиция» и «препарат» не исключают друг друга.

Термин «примерно», используемый в настоящем описании, относится к диапазону ошибок ±10 %.

Типичный критерий приемлемой стабильности согласно настоящему изобретению является следующим: обычно разлагается не более чем примерно 10 %, предпочтительно не более чем примерно 5% активного ингредиента, как определено с помощью ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография).

Фармацевтические наполнители и реагенты, включенные в настоящее описание, все являются коммерчески доступными. Активный ингредиент соединение A: 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновая кислота может быть получен согласно примерам в WO 2017211272.

Условия испытаний инструментов, использованных в экспериментах согласно настоящему изобретению:

Структуры соединений идентифицировали с помощью ядерного магнитного резонанса (ЯМР) и/или масс-спектрометрии (МС). Сдвиги ЯМР (δ) приведены в 10^-6 (млн^-1). ЯМР проводили на приборе Bruker AVANCE-400. Растворители для определения представляли собой дейтерированный диметилсульфоксид (ДМСО-d₆), дейтерированный хлороформ (CDCl₃) и дейтерированный метанол (CD₃OD), а внутренний стандарт представлял собой тетраметилсилан (ТМС).

МС проводили на масс-спектрометре FINNIGAN LCQAd (ESI) (производитель: Thermo, тип: Finnigan LCQ advantage MAX).

Высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) проводили на жидкостном хроматографе высокого давления Agilent 1200DAD (колонка Sunfire C18 150×4,6 мм) и жидкостном хроматографе высокого давления Waters 2695-2996 (колонка Gimini C18 150×4,6 мм).

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение будет дополнительно описано подробно со ссылкой на следующие примеры и экспериментальные примеры. Данные примеры и экспериментальные примеры предназначены только для иллюстративных целей и не должны рассматриваться как ограничивающие объем настоящего изобретения.

Пример 1: Получение ацетата соединения А

Соединение A (300 мг, 0,424 ммоль) добавляли к дихлорметану (3 мл), и смесь перемешивали, чтобы сделать ее прозрачной. Добавляли предварительно приготовленный раствор уксусной кислоты (26,7 мг, 0,445 ммоль) в дихлорметане (0,5 мл), и реакционный раствор нагревали до 50°C и перемешивали в течение 2 часов при слабом кипении. Добавляли простой изопропиловый эфир (3 мл), и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционный раствор фильтровали, осадок на фильтре промывали простым изопропиловым эфиром (5 мл×2) и сушили в вакууме с получением указанного в наименовании продукта (300 мг, выход: 92 %).

Результаты ¹H-ЯМР полученного продукта показаны ниже, и данные ЯМР показывают, что в полученной соли молярное отношение основного ингредиента к уксусной кислоте составляет 1:1.

¹H-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ7,40-7,12 (m, 10H), 4,88-4,80 (m, 1H), 4,61 (dd, 1H), 4,39 (dd, 1H), 3,97-3,69(m, 4H), 3,23-3,06 (m, 3H), 2,98-2,73 (m, 4 H), 2,61 (dd, 1H), 2,53 (dd, 1H), 2,20 (d, 2H), 1,91 (с, 3H), 1,87-1,74 (m, 2H), 1,74-1,51 (m, 7H), 1,44 (d, 2H), 1,19 (d, 3H), 1,01-0,87 (m, 6H).

Пример 2.

Соединение A (300 мг, 0,42 ммоль) и дихлорметан (3 мл) добавляли в реакционную колбу и перемешивали до полного растворения соединения A. По каплям добавляли предварительно приготовленный раствор уксусной кислоты (76,3 мг, 1,27 ммоль) в дихлорметане (0,5 мл), и реакционный раствор нагревали до 50 °C и перемешивали в течение 2 часов. Добавляли простой изопропиловый эфир (3 мл), и реакционный раствор медленно охлаждали до комнатной температуры и перемешивали при комнатной температуре в течение 72 часов. Реакционный раствор фильтровали и осадок на фильтре промывали простым изопропиловым эфиром (5 мл×2) и сушили в вакууме с получением указанного в наименовании продукта (300 мг, выход: 92%).

Результаты ¹H-ЯМР полученного продукта показаны ниже, и данные ЯМР показывают, что в полученной соли молярное отношение основного ингредиента к уксусной кислоте составляет 1:2.

¹H-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 7,39-7,13 (m, 10H),4,83 (m, 1H), 4,61 (dd, 1H), 4,39 (dd, 1H),3,94-3,65 (m, 4H), 3,27- 3,12 (m, 3H ), 2,95-2,79 (m,4 H), 2,70-2,52(m, 2H), 2,20 (dd, 2H) , 1,93 (с, 6H) , 1,84-1,55 (m, 9H), 1,51 -1,40 (d, 2H ), 1,20 (d, 3H ), 1,01-0,87 (m, 6H).

Пример 3: Получение гидрохлорида соединения А.

Соединение A (4,08 г, неочищенное) добавляли к соляной кислоте (40 мл, 4M) при 0°C и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток очищали препаративной хроматографией с получением указанного в заголовке продукта (710 мг, выход: 17 %).

Результаты высокоэффективной ионной хроматографии (HPIC) полученного продукта показали содержание хлорид-иона 12,38%, что указывает на то, что в полученной соли молярное отношение основного ингредиента к соляной кислоте составляет 1:3.

Пример 4: Получение цитрата

Соединение A (300 мг, 0,423 ммоль) растворяли в изопропаноле (5 мл). Добавляли моногидрат лимонной кислоты (356,2 мг, 1,69 ммоль), и реакционный раствор нагревали до 60°C и перемешивали в течение 2 часов. Реакционный раствор медленно охлаждали до комнатной температуры и фильтровали, и осадок на фильтре собирали и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке продукта (260 мг, выход: 66 %).

Результаты ¹H-ЯМР полученного продукта показаны ниже и данные ЯМР показывают, что в полученной соли молярное отношение основного ингредиента к лимонной кислоте составляет 1:3.

¹H-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ 7,39-7,32 (m, 2H), 7,32-7,19 (m, 7H), 7,15 (t, 1H), 4,89-4,84 (m, 1H), 4,75-4,57 (m, 1H), 4,40-4,30 (m, 1H), 3,98-3,78 (m, 5H), 3,76-3,58 (m, 2H), 3,25-3,00 (m, 4H), 2,98-2,88 (m, 3H), 2,85(dd, 5H), 2,77 (c, 3H), 2,73 (c, 3H), 2,32-2,06 (m, 2H), 1,87-1,65 (m, 7H), 1,65-1,47 (m, 2H), 1,43 (m, 2H), 1,35-1,26 (m, 3H), 1,01-0,81 (m, 6H).

Пример 5: Получение фосфата

Соединение A (308 мг, 0,436 ммоль) растворяли в изопропаноле (5 мл). Добавляли фосфорную кислоту (200 мг, 1,73 ммоль, чистота: 85%), и реакционный раствор нагревали до 60°C и перемешивали в течение 2 часов. Реакционный раствор медленно охлаждали до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 часов. Реакционный раствор фильтровали, и собирали осадок на фильтре и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке продукта (520 мг, выход: 51,9 %).

Результаты высокоэффективной ионной хроматографии (HPIC) полученного продукта показали содержание фосфат-иона 31,43 %, что указывает на то, что в полученной соли молярное отношение основного ингредиента к фосфорной кислоте составляет 1:3.

Пример 6: Исследование стабильности

Образцы ацетата, гидрохлорида, цитрата и фосфата соединения A распределяли на плоской поверхности на воздухе, соответственно, для проверки стабильности в условиях комнатной температуры, нагревания (40°C и 60°C), освещения (4500 люкс) и высокой влажности (RH 75 % и 90 %). Срок исследования составил 20 дней.

Ацетат (1:1) Ацетат (1:2) Гидрохлорид (1:3) Цитрат (1:3) Фосфат (1:3) Состояние Время/сутки Чистота % Чистота % Чистота % Чистота % Чистота % 4500 люкс 0 97,65 97,70 96,50 97,39 96,32 5 96,99 95,83 95,57 97,29 96,07 10 96,68 94,91 94,27 97,28 95,62 20 96,72 92,17 94,24 97,28 95,76 40 °C 5 96,23 86,31 96,54 97,10 96,12 10 96,30 81,31 96,42 97,00 96,17 20 95,70 66,14 96,41 97,00 96,19 60 °С 5 96,11 79,36 96,42 91,27 95,89 10 95,73 71,68 96,43 89.97 95,66 20 94,97 56,02 96,41 83,88 95,82

Результаты показали, что ацетат (1:1 или 1:2) распадается в различной степени в условиях освещения, 40°C и 60°C, что указывает на плохую стабильность. После завершения 20-дневного эксперимента результаты ионной хроматографии образца в условиях высокой температуры показали сильное снижение содержания ацетата. Напротив, фосфат, гидрохлорид и цитрат обладали хорошей стабильностью и подходили для дальнейшей разработки фармацевтической композиции (препарата) соединения A, которая облегчает введение.

Пример 7:

4-Амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты гидрохлорид (1:3) был приготовлен в буферном растворе в соответствии с предписанным количеством в Таблице 1. После тщательного перемешивания и корректировки pH раствор был готов к использованию. Исследовали стабильность при 25°C и 40°C, соответственно. Данные представлены в Таблице 2:

Таблица 1

Рецепт/количество 1 2 3 Гидрохлорид соединения А (1:3) 0,5 мг/мл Буферная система Раствор лимонной кислоты и цитрата натрия Раствор уксусной кислоты и ацетата натрия Раствор гидрофосфата натрия и дигидрофосфата натрия Концентрация буферной соли pH 4,5 4,5 7,0

Таблица 2

Исследуемый параметр Буферная система 0 день 40°C 25°C 7 дней 14 дней 1 месяц Всего примесей, % Раствор лимонной кислоты и цитрата натрия 0,0 0,2 0,4 0,0 Раствор уксусной кислоты и ацетата натрия 0,1 0,0 0,0 0,1 Раствор гидрофосфата натрия и дигидрофосфата натрия 0,1 0,6 0,6 0,4

Вывод: в системе раствора содержание родственного вещества соединения А значительно увеличилось. Например, в буферной системе динатрий гидрофосфата и дигидрофосфата натрия содержание родственного вещества увеличилось до 0,4 % после хранения при 25 °C в течение одного месяца, что указывает на то, что фармацевтическая композиция имеет плохую стабильность и не подходит для длительного хранения. Напротив, в буферной системе раствора уксусной кислоты и ацетата натрия соединение A показало хорошую стабильность после хранения при 25°C в течение одного месяца или после хранения при 40°C в течение 7 дней.

Пример 8: Скрининг концентрации ацетата

Рецептурный препарат 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты гидрохлорида (1:3) был приготовлен в соответствии с Таблицей 3. Исследовали стабильность при 25°C и 40°C, соответственно. Данные представлены в Таблице 4:

Таблица 3

Рецепт/количество 1 2 3 4 Гидрохлорид соединения А (1:3) 0,5 мг/мл Концентрация раствора уксусной кислоты и ацетата натрия pH 4,5

Таблица 4

Исследуемый параметр Концентрация ацетата, мМ 0 день 40°C 40°C 25°C 7 дней 14 дней 1 месяц Всего примесей, % 10 0,2 0,0 0,0 0,0 20 0,0 0,0 0,2 0,0 40 0,1 0,0 0,0 0,1 80 0,0 0,2 0,3 0,3 Содержание, % 10 100,9 101,8 101,8 101,3 20 100,1 100,0 99,5 101,8 40 104,8 104,7 105,2 105,2 80 104,7 103,6 104,0 105,0 pH 10 4,50 4,76 4,78 4,78 20 4,51 4,76 4,77 4,80 40 4,50 4,55 4,55 4,56 80 4,51 4,60 4,61 4,64

Из результатов испытаний видно, что соединение A может сохранять хорошую стабильность при различных концентрациях ацетатного буферного раствора.

Пример 9:

Рецептурный препарат 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты гидрохлорида (1:3) был приготовлен в соответствии с таблицей 5. Исследовали стабильность при 25°C и 40°C, соответственно.

Таблица 5

Ингредиент/количество 1 2 3 Гидрохлорид соединения А (1:3) 0,5 мг/мл Концентрация ацетата pH 4,5 Маннит 45 мг/мл НД НД Натрий хлорид НД 7 мг/мл НД

Таблица 6

Исследуемый параметр Регулятор осмотического давления 0 день 40 °C 25 °C 7 дней 14 дней 1 месяц Всего примесей, % Нет 0,1 0,0 0,0 0,1 Маннит 0,0 0,2 0,3 0,2 Натрий хлорид 0,0 0,0 0,0 0,0 Содержание, % Нет 104,8 104,7 105,2 105,2 Маннит 100,2 99,6 99,1 100,6 Натрий хлорид 101,9 101,4 101,8 102,7 Осмотическое давление,
мОсмоль/кг Нет 49 НД НД НД Маннит 297 НД НД НД Натрий хлорид 289 НД НД НД

Из результатов испытаний видно, что фармацевтическая композиция обладает хорошей стабильностью с добавлением регулятора осмотического давления или без него, но для того, чтобы избежать или уменьшить раздражение при введении, необходимо добавить регулятор осмотического давления для поддержания изотоничности фармацевтической композиции, между тем, учитывая проблему содержания натрия в крови пациента во время клинического применения, маннит является предпочтительным в качестве регулятора осмотического давления.

Пример 10:

Гидрохлорид соединения А 0,5 мг/мл Концентрация буферной соли Маннит 54 мг/мл pH 4,7

Раствор 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты гидрохлорида (1:3) был приготовлен в соответствии с указанным выше количеством, а затем стерилизован и упакован. Раствор хранили в условиях 25±2°C, влажности 65±5 % (условия ускоренных испытаний) или от 2 до 8°C соответственно для исследования стабильности. Конкретные данные представлены в таблице 7.

Таблица 7

Исследуемый параметр 0 день 25±2°C/65±5 % RH 2-8°C 1 месяц 2 месяца 3 месяца 6 месяцев 3 месяца 6 месяцев 9 месяцев pH 4,7 4,7 4,5 4,7 4,7 4,7 4,7 4,7 Всего примесей, % 0,7 0,7 0,9 0,9 0,8 1,0 0,8 0,9

Группа изобретений относится к области химии и фармацевтики. 1 объект представляет собой фармацевтическую композицию, содержащую от 0,1 до 1,0 мг/мл активного ингредиента 4-амино-N-[N^2-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, и 1-150 мМ буферный раствор, который представляет собой ацетатный буферный раствор, причем pH фармацевтической композиции составляет от 2,0 до 6,0. 2 объект – фармацевтическую композицию, содержащую от 0,1 до 1,0 мг/мл указанного активного ингредиента и 1-150 мМ буферный раствор уксусной кислоты и ацетата натрия. 3 объект – способ получения указанных фармацевтических композиций. 4 объект – применение указанных фармацевтических композиций для получения лекарственного средства для лечения или профилактики заболевания или состояния, связанного с КОР (каппа-опиоидный рецептор) рецептором, у млекопитающих. Технический результат заключается в стабильности при хранении фармацевтической композиции, содержащей 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновую кислоту или ее соль. 4 н. и 16 з.п. ф-лы, 8 табл., 10 пр.

1. Фармацевтическая композиция, содержащая от 0,1 до 1,0 мг/мл активного ингредиента 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли и 1-150 мМ буферный раствор, который представляет собой ацетатный буферный раствор, причем pH фармацевтической композиции составляет от 2,0 до 6,0.

2. Фармацевтическая композиция по п. 1, где буферный раствор представляет собой раствор уксусной кислоты и ацетата натрия.

3. Фармацевтическая композиция по п. 1, где pH фармацевтической композиции составляет от 3,0 до 5,0.

4. Фармацевтическая композиция по п. 1, где концентрация буферного раствора составляет от 10 до 80 мМ.

5. Фармацевтическая композиция по п. 1, где концентрация буферного раствора составляет 20 мМ.

6. Фармацевтическая композиция по п. 1, где осмотическое давление фармацевтической композиции составляет от 280 до 320 мОсмоль/кг.

7. Фармацевтическая композиция по п. 1, дополнительно содержащая сахарид.

8. Фармацевтическая композиция по п. 7, где сахарид представляет собой маннит.

9. Фармацевтическая композиция по п. 7, где концентрация сахарида составляет от 2 до 100 мг/мл.

10. Фармацевтическая композиция по п. 7, где концентрация сахарида составляет от 10 до 80 мг/мл.

11. Фармацевтическая композиция по п. 7, где концентрация сахарида составляет 45 мг/мл.

12. Фармацевтическая композиция по п. 1, содержащая:

(a) от 0,1 до 1,0 мг/мл активного ингредиента 4-амино-N-[N^2-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли,

(b) 1-150 мМ буферный раствор уксусной кислоты и ацетата натрия и

(c) от 2 до 100 мг/мл маннита.

13. Фармацевтическая композиция по п. 12, где pH указанной фармацевтической композиции составляет от 2,0 до 6,0.

14. Фармацевтическая композиция, содержащая:

(a) от 0,1 до 1,0 мг/мл активного ингредиента 4-амино-N-[N^2-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли и

(b) 1-150 мМ буферный раствор уксусной кислоты и ацетата натрия.

15. Фармацевтическая композиция по п. 1, где фармацевтически приемлемая соль активного ингредиента выбрана из группы, состоящей из гидрохлорида, фосфата и цитрата.

16. Фармацевтическая композиция по п. 1, где фармацевтическая приемлемая соль активного ингредиента представляет собой гидрохлорид.

17. Способ получения фармацевтической композиции по любому из пп. 1-16, включающий стадию смешивания 4-амино-N-[N²-[N-[N-[N-((R)-2-фенилпропил)глицил]-D-фенилаланил]-D-лейцил]-D-лизил]пиперидин-4-карбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли и буферного раствора.

18. Применение фармацевтической композиции по любому из пп. 1-16 или фармацевтической композиции, полученной способом по п. 17, для получения лекарственного средства для лечения или профилактики заболевания или состояния, связанного с КОР (каппа-опиоидный рецептор) рецептором, у млекопитающих.

19. Применение по п. 18, где состояние, связанное с КОР рецептором, выбрано из группы, состоящей из боли, воспаления, зуда, отека, гипонатриемии, гипокалиемии, кишечной непроходимости, кашля и глаукомы.

20. Применение по п. 19, где боль выбрана из группы, состоящей из нейропатической боли, боли в туловище, висцеральной боли, кожной боли, боли при артрите, боли при камнях в почках, спазмов матки, дисменореи, эндометриоза, диспепсии, послеоперационной боли, боли после лечения, глазной боли, боли при отите, боли при скоротечном раке и боли, связанной с расстройством желудочно-кишечного тракта.