НОВЫЙ ИНГИБИТОР КИНАЗЫ PAN-RAF И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ Российский патент 2023 года по МПК C07D401/04 C07D413/14 A61K31/435 A61P35/00 

Область техники

В настоящем изобретении предложено соединение в качестве ингибитора киназы, фармацевтическая композиция, содержащая указанное соединение, и применение указанного соединения в терапии. В частности, в настоящем изобретении описано производное пиразолов или имидазолов, подходящее для ингибирования RAF- и/или RAS-киназы и для лечения заболевания, опосредованного RAF- и/или RAS-киназой.

Уровень техники

Семейство генов RAF включает BRAF, ARAF и CRAF. BRAF представляет собой онкоген, расположенный на длинном плече хромосомы 7 и кодирующий белок, содержащий 766 аминокислотных остатков. Этот белок представляет собой серин/треонин-специфичную киназу, которая играет роль важного фактора трансдукции в сигнальном пути RAS/RAF/MEK/ERK. Только после фосфорилирования киназой RAS белок BRAF проявляет киназную активность для активации следующего по каскаду белка МЕК, и затем белок МЕК активирует белок ERK. Белок ERK входит в ядро клетки, а затем активирует различные белки ниже по каскаду для запуска транскрипции различных генов ниже по каскаду, что приводит к пролиферации и делению клеток. Когда в BRAF происходит мутация V600E, аминокислотный остаток в положении 600 BRAF изменяется с валина на глутамат, и белок BRAF всегда находится в активированном состоянии. В опухолях, имеющих мутацию RAS, непрерывная активация белка RAS приводит к образованию гомодимера BRAF-BRAF или гетеродимера BRAF-CRAF ниже по каскаду, который передает сигнал активации ниже по каскаду и способствует злокачественной пролиферации опухолевых клеток. Следовательно, разработка низкомолекулярных таргетированных лекарственных средств, нацеленных на Pan-RAF, может одновременно ингибировать рак, вызванный мутацией V600E и мутацией RAS в BRAF.

В настоящее время в качестве ингибиторов BRAF для лечения меланомы, несущей мутацию BRAF, одобрены вемурафениб, дабрафениб и LGX818. Однако вышеуказанные препараты не действуют в опухоли, несущей мутацию RAS. Причина в основном заключается в том, что мутация RAS может приводить к образованию димера BRAF и CRAF, а ингибирование BRAF может, в свою очередь, активировать CRAF. Во-вторых, имеющиеся на рынке ингибиторы BRAF оказывают слабое ингибирующее действие на CRAF, и, таким образом, указанные ингибиторы BRAF теряют свой противораковый эффект. Поэтому исследование и разработка ингибиторов RAF были сосредоточены на создании ингибиторов Pan-RAF, которые могут одновременно воздействовать на белки BRAF и CRAF и могут эффективно ингибировать активность МЕК и ERK ниже по каскаду.

Краткое описание изобретения

В настоящем изобретении предложен селективный ингибитор киназы, содержащий соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, сольват, сложный эфир, кислоту, метаболит или пролекарство:

где

X выбран из группы, состоящей из один из Y и Z представляет собой углерод, а другой представляет собой азот, предпочтительно Y представляет собой азот, и Z представляет собой углерод;

кольцо А выбрано из группы, состоящей из предпочтительно А представляет собой, и заместители R₄ и R₅ находятся в мета- и пара-положениях бензольного кольца, соответственно;

R₁, R₂ и R₃ каждый независимо выбран из группы, состоящей из Н, циано, C_1-6 алкила, C_1-6 алкокси, C_1-6 гидроксиалкила, C_1-6 гидроксиалкокси, С_3-6 циклоалкил-C_1-6 алкокси, C_1-6 алкокси-С_1-6 алкокси, фенила, пиридила, фенил-C_1-6 алкокси, фурил-C_1-6 алкокси, гетероциклоалкила, необязательно замещенного R₆, гетероциклоалкилфенила, необязательно замещенного R₆, гетероциклоалкилкарбонила, необязательно замещенного R₆, гетероциклоалкилокси, необязательно замещенного R₆, гетероциклоалкил-C_1-6 алкокси, необязательно замещенного R₆, гетероциклоалкил-С_1-6 алканоиламино, необязательно замещенного R₆, С_3-6 циклоалкила C_1-6 алканоиламино и C_1-6 алкиламинокарбонил-C_1-6 алкокси, или R₁ совместно с R₃ образуют где R₁, R₂ и R₃ не представляют собой Н одновременно;

каждый из R₄ и R₅ независимо выбран из группы, состоящей из Н, C_1-6 алкила, C_1-6 галогеналкила, C_1-6 цианоалкила, гетероциклоалкил-С_1-6 алкила, необязательно замещенного R₆, фенила, необязательно замещенного R₆, гетероарила, необязательно замещенного R₆, и аминосульфонила или R₄ и R₅ совместно образуют и R₄ и R₅ не представляют собой Н одновременно;

R₆ независимо выбран из группы, состоящей из оксо, C_1-6 алкила, С_2-6 алканоила, C_1-6 алкилсульфонила, C_1-6 алкиламино С_2-6 алканоила и C_1-6 галогеналкила.

"Гетероциклоалкил", как описано выше, предпочтительно представляет собой 4-6-членный гетероциклоалкил, содержащий атом(а) кислорода и/или азота, такой как пирролидинил, морфолинил, пиперазинил, тетрагидропиранил, тетрагидрофуранил, оксетанил, азетидинил и тому подобное. Кроме того, атом азота или атом углерода этих гетероциклоалкилов может быть необязательно замещен группой R₆, выбранной из группы, состоящей из оксо (=О), C_1-6 алкила, С_2-6 алканоила, C_1-6 алкилсульфонила, C_1-6 алкиламино С_2-6 алканоила и C_1-6 галогеналкила.

В предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения каждый R₁, R₂ и R₃ независимо выбран из группы, состоящей из Н, циано, C_1-6 алкила (такого как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил и тому подобное), C_1-6 гидроксиалкокси (такого как гидроксиметокси, 2-гидроксиэтокси, 3-гидорксипропокси, 4-гидроксибутокси и тому подобное), С_3-6 циклоалкил-С_1-6 алкокси (такого как циклопентилметокси и тому подобное), C_1-6 алкокси-С_1-6 алкокси (такого как 2-метоксиэтокси и тому подобное), фенила, пиридила (такого как 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил), фенил-С_1-6 алкокси (такого как фенилметокси и тому подобное), фурил-С_1-6 алкокси (такого как фуран-3-илметокси и тому подобное), гетероциклоалкила, необязательно замещенного R₆ (такого как N-морфолинил, пиперазин-1-ил, 4-метил-пиперазин-1-ил и тому подобное), гетероциклоалкилфенила, необязательно замещенного R₆ (такого как 4-метилпиперазинилфенил и тому подобное), гетероциклоалкилкарбонила, необязательно замещенного R₆ (такого как 4-метилпиперизан-1-илкарбонил и тому подобное), гетероциклоалкилокси, необязательно замещенного R₆ (такого как тетрагидропиран-4-илокси, тетрагидрофуран-3-илокси, оксетан-3-илокси, азетидин-3-илокси и тому подобное), гетероциклоалкил-С_1-6-алкокси, необязательно замещенного R₆ (такого как 2-морфолиноэтокси, 3-морфолинопропокси, тетрагидрофуран-2-илметокси, тетрагидрофуран-3-илметокси, тетрагидропиран-4-илметокси, оксетан-3-илметокси, пирролидин-3-илметокси и тому подобное), гетероциклоалкил-С_1-6 алканоиламино, необязательно замещенного R₆ (такого как тетрагидропиран-4-илформиламино, тетрагидрофуран-3-илформиламино, тетрагидропиран-4-илацетиламино, тетрагидрофуран-3-илацетиламино, 3-метилоксетан-3-илформиламино, 3-оксадицикло[3.1.0]гексан-6-илформиламино и тому подобное), С_3-6 циклоалкил-С_1-6 алканоиламино (такого как циклопропилформиламино и тому подобное) и C_1-6 алкиламинокарбонил-С_1-6 алкокси (такого как диметиламинокарбонилметокси и тому подобное), или R₁ и R₃ совместно с образуют где R₁, R ₂ и R₃ не представляют собой Н одновременно;

В другом предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения предложен селективный ингибитор киназы Pan-RAF, содержащий соединение формулы (Ia) или его фармацевтически приемлемую соль, сольват, сложный эфир, кислоту, метаболит или пролекарство:

где R₁, R₂, R₃, R₄ и R₅ являются такими, как определено выше. В более предпочтительном варианте реализации изобретения

R₁ выбран из группы, состоящей из Н, пиридила, гетероциклоалкила, гетероциклоалкилфенила, необязательно замещенного C_1-6 алкилом, гетероциклоалкилокси, гетероциклоалкил-С_1-6 алкокси и C_1-6 алкиламинокарбонил-С_1-6 алкокси;

R₂ выбран из группы, состоящей из Н, C_1-6 алкила, C_1-6 гидроксиалкокси, C_1-6 алкокси-C_1-6 алкокси, гетероциклоалкилокси и гетероциклоалкил-С_1-6 алкокси;

R₃ выбран из группы, состоящей из Н и Сз_-6 циклоалкила C_1-6 алканоиламино;

где R₁, R₂ и R₃He представляют собой Н одновременно;

R₄ выбран из группы, состоящей из C_1-6 галогеналкила и C_1-6 цианоалкила;

R₅ выбран из группы, состоящей из Н, C_1-6 алкила и гетероциклоалкил-С_1-6 алкила, необязательно замещенного C_1-6 алкилом.

В особенно предпочтительном варианте реализации R₁ выбран из группы, состоящей из 3-пиридила, 4-пиридила, N-морфолинила, гетероциклоалкилокси, гетероциклоалкил-C_1-6 алкокси и C_1-6 алкиламинокарбонила-С_1-6 алкокси; R₄ выбран из группы, состоящей из C_1-6 галогеналкила и C_1-6 цианоалкила; каждый из R₂, R₃ и R₅ представляет собой Н.

В другом особенно предпочтительном варианте реализации R₂ выбран из группы, состоящей из C_1-6 гидроксиалкокси, C_1-6 алкокси-С_1-6 алкокси, гетероциклоалкилокси и гетероциклоалкил-С_1-6 алкокси; R₄ выбран из группы, состоящей из C_1-6 галогеналкила и C_1-6 цианоалкила; каждый из R₁, R₃ и R₅ представляет собой Н.

В другом варианте реализации настоящего изобретения предложен селективный ингибитор киназы Pan-RAF, содержащий соединение формулы (Ib) или его фармацевтически приемлемую соль, сольват, сложный эфир, кислоту, метаболит или пролекарство:

где

X выбран из группы, состоящей из и предпочтительно является

один из Y и Z представляет собой углерод, а другой представляет собой азот;

кольцо А выбрано из группы, состоящей из и предпочтительно является

каждый из R₄ и R₅ независимо выбран из группы, состоящей из Н, C_1-6 алкила, C_1-6 галогеналкила, C_1-6 цианоалкила, пиперазинил C_1-6 алкила, необязательно замещенного R₆, фенила, необязательно замещенного R₆, имидазолила, необязательно замещенного R₆, тиенила, необязательно замещенного R₆, пиридила, необязательно замещенного R₆, и аминосульфонила или R₄ и R₅ совместно образуют и R₄ и R₅ не представляют собой Н одновременно;

R₆ независимо выбран из группы, состоящей из C_1-6 алкила и C_1-6 галогеналкила.

В другом отношении, в настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция, содержащая ингибитор киназы, как описано в настоящем изобретении, фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество и, необязательно, другой терапевтический агент.

Настоящее изобретение также относится к применению описанного ингибитора киназы при получении лекарственного средства для ингибирования активности тирозинкиназы RAF и/или RAS, и при получении лекарственного средства для лечения, предотвращения или облегчения заболевания, расстройства или состояния, которое модулируется активностью RAF и/или RAS, или зависит от указанной активности, или вовлечено в нее.

Описание чертежей

Фиг. 1a-1b иллюстрируют ингибирующее действие исследуемых соединений на опухоль на мышиной модели с трансплантированной опухолью из клетки A375.

Фиг. 2а-2с иллюстрируют ингибирующее действие исследуемых соединений на опухоль на мышиной модели с трансплантированной опухолью Calu-6.

Фиг. 3а-3b иллюстрируют ингибирующее действие исследуемых соединений на опухоль на мышиной модели с трансплантированной опухолью из клеток НСТ116.

Фиг. 4а-4b иллюстрируют ингибирующее действие исследуемых соединений на опухоль на мышиной модели с трансплантированной опухолью клетки COLO205.

Фиг. 5а-5b иллюстрируют ингибирующее действие исследуемых соединений на опухоль на мышиной модели с трансплантированной опухолью ВхРС3.

Подробное описание изобретения

Терминология

Если не указано иное, все технические и научные термины, применяемые в настоящем описании, имеют значение, принятое специалистами в области техники, к которой относится заявленное изобретение.

Если не указано иное, в настоящем описании используют общепринятые методы масс-спектроскопии, ЯМР, ВЭЖХ, химии белков, биохимии, технологий рекомбинантной ДНК и фармакологии в пределах компетенции специалиста в данной области техники. Если конкретные определения не приведены, номенклатура, используемая в аналитической химии, синтетической органической химии и медицинской и фармацевтической химии, а также их лабораторные процедуры и методики, описанные в настоящем изобретении, являются известными в данной области техники. Как правило, вышеупомянутые методики и процедуры могут быть выполнены традиционными способами, хорошо известными в данной области техники и описанными в различных общих и более конкретных источниках, которые цитируются и рассматриваются по всему тексту настоящего описания.

Термин "алкил" относится к алифатической углеводородной группе, которая может иметь разветвленную или прямую цепь. В зависимости от структуры алкильная группа может представлять собой монорадикал или дирадикал (то есть, алкиленовую группу). В настоящем изобретении алкильная группа предпочтительно представляет собой "низший алкил", содержащий от 1 до 8 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до 6 атомов углерода и более предпочтительно от 1 до 4 атомов углерода. Типичные алкильные группы включают, но не ограничиваются ими, метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил и тому подобное. Следует понимать, что "алкил", упомянутый в настоящем изобретении, включает все возможные конфигурации и конформации алкила, которые могут присутствовать. Например, "пропил", как указано в настоящем изобретении, включает н-пропил, изопропил. «Бутил», как указано в настоящем описании, включает n-бутил, изо-бутил и трет-бутил. "Пентил", упомянутый в настоящем изобретении, включает н-пентил, изопентил, неопентил, трет-бутил и пент-3-ил.

Термин "алкокси" относится к -О-алкильной группе, где алкил является таким, как определено в настоящем изобретении. Типичные алкоксигруппы включают, но не ограничиваются ими, метокси, этокси, пропокси, бутокси, пентилокси, гексилокси и тому подобное.

Термин «алкоксиалкил» относится к алкильной группе, как определено в настоящем изобретении, замещенной алкоксигруппой, как определено в настоящем изобретении.

Термин "циклоалкил" относится к моноциклическому или полициклическому радикалу, который содержит только углерод и водород. Циклоалкильные группы включают группы, содержащие от 3 до 10 кольцевых атомов. В зависимости от структуры цикло алкильная группа может представлять собой монорадикал или дирадикал (например, циклоалкиленовую группу). В настоящем изобретении циклоалкильная группа предпочтительно представляет собой циклоалкил, содержащий от 3 до 8 атомов углерода, и более предпочтительно «низший циклоалкил», содержащий от 3 до 6 атомов углерода. Типичные цикло алкильные группы включают, но не ограничиваются ими, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил, циклопентенил, циклогексенил, циклогептенил и диамантанил.

Термин «алкил(циклоалкил)» или «циклоалкилалкил» означает алкильный радикал, как определено в настоящем изобретении, замещенный циклоалкильной группой, как определено в настоящем изобретении. Неограничивающие циклоалкилалкильные группы включают циклопропилметил, циклобутилметил, циклопентилметил, циклогексилметил и тому подобное.

Термин "ароматический" относится к плоскому кольцу, имеющему делокализованную систему π-электронов, содержащую 4n+2 π электронов, где n представляет собой целое число. Ароматические кольца могут состоять из пяти, шести, семи, восьми, девяти или более чем девяти атомов. Ароматические соединения могут быть необязательно замещены. Термин "ароматический" включает как карбоциклические арильные (например, фенил), так и гетероциклические арильные (или "гетероарильные" или "гетероароматические") группы (например, пиридин). Указанный термин включает моноциклические группы или полициклические группы с конденсированными кольцами (то есть, кольцами, которые имеют общие пары смежных атомов углерода).

Используемый в настоящем изобретении термин "арил" относится к ароматическому кольцу, где каждый из атомов, образующих кольцо, представляет собой атом углерода. Арильные кольца могут состоять из пяти, шести, семи, восьми, девяти или более чем девяти атомов. Арильные группы могут быть необязательно замещены. Примеры арильных групп включают, но не ограничиваются ими, фенил, нафталенил, фенантреонил, антраценил, флуоренил и инденил. В зависимости от структуры арильная группа может представлять собой монорадикал или дирадикал (то есть, ариленовую группу).

Термин "арилокси" относится к -О-арильной группе, где арил является таким, как определено в настоящем изобретении.

Термин "гетероарил" относится к арильной группе, которая содержит один или более кольцевых гетероатомов, выбранных из азота, кислорода и серы. N-содержащий "гетероарильный" фрагмент относится к ароматической группе, в которой по меньшей мере один из атомов скелета кольца представляет собой атом азота. В зависимости от структуры гетероарильная группа может представлять собой монорадикал или дирадикал (то есть, гетероариленовую группу). Примеры гетероарильных групп включают, но не ограничиваются ими, пиридинил, имидазолил, пиримидинил, пиразолил, триазолил, пиразинил, тетразолил, фурил, тиенил, изоксазолил, тиазолил, оксазолил, изотиазолил, пирролил, хинолинил, изохинолинил, индолил, бензимидазолил, бензофуранил, индазолил, индолизинил, фталазинил, пиридазинил, изоиндолил, птеридинил, пуринил, оксадиазолил, тиадиазолил, фуразанил, бензофуразанил, бензотиофенил, бензотиазолил, бензоксазолил, хиназолинил, нафтиридинил, фуропиридинил и тому подобные.

Термин «алкил(арил)» или «аралкил» относится к алкильной группе, как определено в настоящем изобретении, замещенной арильной группой, как определено в настоящем изобретении. Неограничивающий алкил(арил) включает бензил, фенетил и тому подобное.

Термин «алкил(гетероарил)» относится к алкильной группе, как определено в настоящем изобретении, замещенной гетероарильной группой, как определено в настоящем изобретении.

Используемый в настоящем описании термин "гетероалкил" относится к алкильной группе, определенной в настоящем описании, в которой один или более атомов скелетной цепи представляют собой гетероатом, например, кислород, азот, серу, кремний, фосфор или их комбинации. Гетероатом(ы) может быть расположен в любом положении в гетероалкильной группе или в положении, в котором гетероалкильная группа присоединена к остальной части молекулы.

Используемый в настоящем описании термин "гетероциклоалкил" или "гетероциклическая группа" относится к не ароматическому кольцу, где один или более атомов, образующих кольцо, представляют собой гетероатом, выбранный из азота, кислорода и серы. Гетероциклоалкильное кольцо может представлять собой моноциклическое или полициклическое кольцо, образованное из трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти или более чем девяти атомов. Гетероциклоалкильное кольцо может быть необязательно замещено. Примеры гетероциклоалкилов включают, но не ограничиваются ими, лактамы, лактоны, циклические имиды, циклические тиоимиды, циклические карбаматы, тетрагидротиопиран, 4Н-пиран, тетрагидропиран, пиперидин, 1,3-диоксин, 1,3-диоксан, 1,4-диоксин, 1,4-диоксан, пиперазин, 1,3-оксатиан, 1,4-оксатиин, 1,4-оксатиан, тетрагидро-1,4-тиазин, 2Н-1,2-оксазин, малеимид, сукцинимид, барбитуровую кислоту, тиобарбитуровую кислоту, диоксопиперазин, гидантоин, дигидроурацил, морфолин, триоксан, гексагидро-1,3,5-триазин, тетрагидротиофен, тетрагидрофуран, пирролин, пирролидин, имидазолидин, пирролидон, пиразолин, пиразолидин, имидазолин, имидазолидин, 1,3-диоксол, 1,3-диоксолан, 1,3-дитиол, 1,3-дитиолан, изоксазолин, изоксазолидин, оксазолин, оксазолидин, оксазолидинон, тиазолин, тиазолидин и 1,3-оксатиолан. В зависимости от структуры гетероциклоалкильная группа может представлять собой монорадикал или дирадикал (то есть, гетероциклоалкиленовую группу).

Термин «алкил(гетероциклоалкил)» или «гетероциклоалкилалкил» относится к алкильной группе, как определено в настоящем изобретении, замещенной гетероциклоалкильной группой, как определено в настоящем изобретении.

Термин «алкилокси(гетероциклоалкил)» или «гетероциклоалкилалкилокси» относится к алкилоксигруппе, как определено в настоящем изобретении, замещенной гетероциклоалкильной группой, как определено в настоящем изобретении.

Термин «галоген» («halo») или «галоген» («halogen») относится к фтору, хлору, брому и йоду.

Термины "галоалкил", "галоалкокси" и "галогенгетероалкил" включают структуру алкила, алкокси или гетероалкила, в которой по меньшей мере один водород заменен на атом галогена. В некоторых вариантах реализации, если два или более атомов водорода заменены на атомы галогена, указанные атомы галогена являются одинаковыми или отличаются друг от друга.

Термин «гидрокси» относится к группе -ОН.

Термин «циано» относится к группе -CN.

Термин "сложный эфир" относится к химическому фрагменту с формулой -COOR, где R выбран из алкила, циклоалкила, арила, гетероарила (связанного через кольцевой углерод) и гетероциклической группы (связанной через кольцевой углерод).

Термин «амино» относится к группе -NH₂.

Термин «аминокарбонил» относится к группе -CO-NH₂.

Термин «алкиламинокарбонил» относится к группе -CO-NH-R, где R представляет собой алкильную группу, как определено в настоящем изобретении.

Термин "амид" или "амидо" относится к -NR-CO-R', где R и R' каждый независимо представляет собой водород или алкил.

Термин «алкиламино» относится к аминозаместителю, который дополнительно замещен одной или двумя алкильными группами, конкретно относится к группе -NRR', где R и R' каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода или низшего алкила, при условии, что -NRR' не является -NH₂. «Алкиламино» включает фрагмент соединения, где азот в -NH₂ присоединен по меньшей мере к одной алкильной группе. Примеры алкиламиногрупп включают, но не ограничиваются ими, метиламино, этиламино и тому подобное. «Диалкиламино» включает фрагмент, в котором азот в -NH₂ присоединен по меньшей мере к двум другим алкильным группам. Примеры диалкиламино группы включают, но не ограничиваются ими, диметиламино, диэтиламино и тому подобное.

Термин «алкиламиноалкил» относится к алкильной группе, как определено в настоящем изобретении, замещенной алкиламино, как определено в настоящем изобретении.

Термин «аминоалкил» относится к замещенному алкилу, который дополнительно замещен одной или более аминогруппами.

Термин «аминоалкокси» относится к алкоксизамещенному, который дополнительно замещен одной или более аминогруппами.

Термин «гидроксиалкил» или «гидроксилалкил» относится к алкильному заместителю, который дополнительно замещен одной или более гидроксильными группами.

Термин «цианоалкил» относится к алкильному заместителю, который дополнительно замещен одной или более цианогруппами.

Термин «ацил» относится к одновалентной группе, оставленной после удаления гидроксильной группы из органической или неорганической кислородной кислоты, имеющей общую формулу R-M(O)-, где М обычно представляет собой С.

Термин «карбонил» относится к органической функциональной группе (С=O), образованной атомом углерода и атомом кислорода посредством двойной связи.

Термин «алканоил» или «ал кил карбонил» относится к карбонильной группе, которая дополнительно замещена одной алкильной группой. Типичные алканоильные группы включают, но не ограничиваются ими, ацетил, пропионил, бутирил, пентаноил, гексаноил и тому подобное.

Термин «арилкарбонил» относится к карбонильной группе, как определено выше, замещенной алкилом, как определено в настоящем изобретении.

Термин «алкоксикарбонил» относится к карбонильной группе, которая дополнительно замещена одной алкоксигруппой.

Термин «гетероциклоалкилкарбонил» относится к карбонильной группе, которая дополнительно замещена одной гетероциклоалкильной группой.

Термины «алкиламинокарбонил», «циклоалкиламинокарбонил»,

«ариламинокарбонил», «аралкиламинокарбонил», «гетероариламинокарбонил» относятся к карбонилу, замещенному алкиламино, циклоалкиламино, ариламино, аралкиламино или гетероариламино, как определено в настоящем изобретении, соответственно.

Термин «алкилкарбонилалкил» или «алкилацилалкил» относится к алкильной группе, дополнительно замещенной одним ал кил карбонил ом.

Термин «алкилкарбонилалкокси» или «алкилацилалкокси» относится к алкоксигруппе, дополнительно замещенной одним алкилкарбонилом.

Термин «сульфонил» или «сульфурил» относится к функциональной группе, оставленной после удаления гидроксильной группы из сульфоновой кислоты, в частности, -S(=O)2-группы.

Термин «алкилсульфонил» или «алкилсульфурил» относится к -S(=О)₂-R, где R представляет собой алкильную группу.

Термин "необязательный" означает, что одно или более описанных далее событий могут произойти или не произойти, и включает как происходящие события, так и не происходящие события. Термин «необязательно замещенный» или «замещенный» означает, что упомянутая группа может быть замещена одной или более дополнительными группами, каждая из которых независимо выбрана из алкила, циклоалкила, арила, гетероарила, гетероциклила, гидрокси, алкокси, циано, галогена, амида, нитро, галогеналкила, амино, метил суль фонила, алкилкарбонила, алкоксикарбонила, гетероарилалкила, гетероциклоалкилалкила, аминоацила, аминозащитной группы и тому подобного. Среди прочего, аминозащитная группа предпочтительно выбрана из группы, состоящей из пивалоила, трет_-6утилоксикарбонила, бензилоксикарбонила, 9-флуоренилметоксикарбонила, бензила, п-метоксибензила, аллилоксикарбонила, трифторацетила и тому подобного.

Используемый в настоящем описании термин "тирозин-протеинкиназа" (ТПК) относится к классу киназ, которые катализируют перенос γ-фосфата из АТФ в тирозиновый остаток на белках и которые способны катализировать фосфорилирование тирозинового остатка различных белковых субстратов и, таким образом, оказывают важное влияние на рост, пролиферацию и дифференцировку клеток.

Используемые в настоящем описании термины "ингибировать", "ингибирующий" или "ингибитор", употребляемые в отношении киназы, относятся к ингибированию активности фосфотрансферазы.

"Метаболит" соединения, описанного в настоящем описании, представляет собой производное указанного соединения, которое образуется при метаболизме указанного соединения. Термин "активный метаболит" относится к биологически активному производному соединения, которое образуется при метаболизме указанного соединения. Используемый в настоящем описании термин "метаболизм" относится к сумме процессов (включая, но не ограничиваясь ими, реакции гидролиза и реакции, катализируемые ферментами, такие как реакции окисления), посредством которых конкретное вещество изменяется организмом. Таким образом, ферменты могут вызывать специфические структурные изменения. Например, цитохром Р450 катализирует различные окислительно-восстановительные реакции, в то время как дифосфатглюкуронилтрансферазы катализируют перенос активированной молекулы глюкуроновой кислоты на ароматический спирт, алифатический спирт, карбоновую кислоту, амин и свободную меркаптогруппу. Дополнительную информацию о метаболизме можно получить из The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9th Edition, McGraw-Hill (1996). Метаболиты соединений, описанных в настоящем описании, могут быть идентифицированы либо путем введения соединений хозяину и анализа образцов ткани хозяина, либо путем инкубации соединений с клетками печени in vitro и анализа полученных соединений. Оба способа хорошо известны в данной области техники. В некоторых вариантах реализации метаболиты соединения образуются в результате процессов окисления и соответствуют соответствующему гидроксисодержащему соединению. В некоторых вариантах реализации соединение метаболизируется до фармакологически активных метаболитов. Используемый в настоящем описании термин "модулировать" означает взаимодействовать с мишенью прямо или косвенно с целью изменения активности мишени, в том числе, только в качестве примера, для усиления активности мишени, ингибирования активности мишени, ограничения активности мишени или продления активности мишени.

Используемый в настоящем описании термин "целевой белок" относится к молекуле белка или части белка, способной быть связанной селективным связывающим соединением. В некоторых вариантах реализации целевой белок представляет собой тирозинкиназу RAF (дикий тип, или различные мутанты, или их комбинацию), тирозинкиназу RAS (дикий тип, или различные мутанты, или их комбинацию), BCR/ABL (дикий тип, или различные мутанты, или их комбинацию), ABL (дикий тип, или различные мутанты, или их комбинацию), KIT (дикий тип, или различные мутанты, или их комбинацию), EGFR (дикий тип, или различные мутанты, или их комбинацию), FLT3 (дикий тип, или различные мутанты, или их комбинацию), VEGFR₂ (дикий тип, или различные мутанты, или их комбинацию), RET (дикий тип, или различные мутанты, или их комбинацию), PDGFRα (дикий тип, или различные мутанты, или их комбинацию), PDGFRβ (дикий тип, или различные мутанты, или их комбинацию), FGFR1 (дикий тип, или различные мутанты, или их комбинацию), FGFR2 (дикий тип, или различные мутанты, или их комбинацию), FGFR₃ (дикий тип, или их комбинацию), FGFR4 (дикий тип, или их различные мутанты, или их комбинацию).

Используемый в настоящем описании термин IC₅₀ относится к количеству, концентрации или дозе конкретного исследуемого соединения, при которой достигается 50% ингибирование максимального ответа в анализе, посредством которого измеряют такой ответ.

Используемый в настоящем описании термин ЕС₅₀ относится к дозе, концентрации или количеству исследуемого соединения, которое вызывает дозозависимый ответ при 50% максимальной экспрессии конкретного ответа, который индуцируется, провоцируется или потенцируется конкретным исследуемым соединением.

Используемый в настоящем описании термин GI₅₀ относится к концентрации лекарственного средства, необходимой для 50% ингибирования роста клеток, то есть к концентрации лекарственного средства, при которой рост 50% клеток (таких как раковые клетки) может ингибироваться или контролироваться лекарственным средством.

Новый ингибитор киназы согласно настоящему изобретению

В настоящем изобретении предложен селективный ингибитор киназы Pan-RAF, содержащий соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, сольват, сложный эфир, кислоту, метаболит или пролекарство:

где

X выбран из группы, состоящей из один из Y и Z представляет собой углерод, а другой представляет собой азот;

кольцо А выбрано из группы, состоящей из

R₁, R₂ и R₃ каждый независимо выбран из группы, состоящей из Н, циано, C_1-6 алкила, C_1-6 алкокси, C_1-6 гидроксиалкила, C_1-6 гидроксиалкокси, С_3-6 циклоалкил-С_1-6 алкокси, C_1-6 алкокси-С_1-6 алкокси, фенила, пиридила, фенил-С_1-6 алкокси, фурил-С_1-6 алкокси, гетероциклоалкила, необязательно замещенного R₆, гетероциклоалкилфенила, необязательно замещенного R₆, гетероциклоалкилкарбонила, необязательно замещенного R₆, гетероциклоалкилокси, необязательно замещенного R₆, гетероциклоалкил-C_1-6 алкокси, необязательно замещенного R₆, гетероциклоалкил-С_1-6 алканоиламино, необязательно замещенного R₆, С_3-6 циклоалкил-С_1-6 алкиламино, и C_1-6 алкиламинокарбонил-С_1-6

алкокси, или R₁ и R₃ совместно образуют, где R₁, R₂ и R₃ не представляют собой Н одновременно;

каждый из R₄ и R₅ независимо выбран из группы, состоящей из Н, C_1-6 алкила, C_1-6 галогеналкила, C_1-6 цианоалкила, гетероциклоалкил-С1-6 алкила, необязательно замещенного R₆, фенила, необязательно замещенного R₆, гетероарила, необязательно замещенного R₆, и аминосульфонила или R₄ и R₅ совместно образуют и R₄ и R₅ не представляют собой Н одновременно;

R₆ независимо выбран из группы, состоящей из оксо (=)), C_1-6 алкила, С_2-6 алканоила, C_1-6 алкилсульфонила, C_1-6 алкиламино С_2-6 алканоила и C_1-6 галогеналкила.

В предпочтительном аспекте в формуле (I) Y представляет собой азот, a Z представляет собой углерод.

В другом аспекте в формуле (I) кольцо А представляет собой и заместители R₄ и R₅ находятся в мета- и пара-положениях бензольного кольца, соответственно; более предпочтительно, R₄ не представляет собой Н, и R₅ представляет собой Н.

В некоторых вариантах реализации R₂ и R₃ представляют собой Н; и R₁ выбран из группы, состоящей из фенила, пиридила, гетероциклоалкила, необязательно замещенного C_1-6 алкилом, гетероциклоалкилфенила, необязательно замещенного C_1-6 алкилом, гетероциклоалкилкарбонила, необязательно замещенного C_1-6 алкилом, гетероциклоалкилокси, гетероциклоалкил-C_1-6 алкокси и C_1-6 алкиламинокарбонила-C_1-6 алкокси.

В других вариантах реализации R₁ представляет собой Н; R₂ выбран из группы, состоящей из Н, циано, C_1-6 алкила, C_1-6 гидроксиалкокси, С_3-6 циклоалкил-C_1-6 алкокси, C_1-6 алкокси-C_1-6 алкокси, фенил-C_1-6 алкокси, фурил-C_1-6 алкокси, гетероциклоалкилокси, необязательно замещенного группой R₆, гетероциклоалкил-C_1-6 алкокси, необязательно замещенного группой R₆, гетероциклоалкил-C_1-6 алканоиламино, необязательно замещенного C_1-6 алкилом, и C_1-6 алкиламинокарбонил-C_1-6 алкокси, где R₆ независимо выбран из группы, состоящей из оксо (С=), С_2-6 алканоила, C_1-6 алкилсульфонила, С_1-6 алкиламино С_2-6 алканоила; R₃ выбран из группы, состоящей из Н и С_3-6 циклоалкил-C_1-6 алкиламино; и R₂ и R₃ не представляют собой Н одновременно.

В настоящем изобретении «гетероциклоалкил», как указано, предпочтительно представляет собой 4-6-членный гетероциклоалкил, содержащий атом(а) кислорода и/или азота, такой как пирролидинил, морфолинил, пиперазинил, тетрагидропиранил, тетрагидрофуранил, оксетанил, азетидинил и тому подобное. Кроме того, атом азота или атом углерода этих гетероциклоалкилов может быть необязательно замещен группой R₆, выбранной из группы, состоящей из оксо (=О), С_1-6 алкила, С_2-6 алканоила, С_1-6 алкилсульфонила, C_1-6 алкиламино С_2-6 алканоила и C_1-6 галогеналкила.

В предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения каждый R₁, R₂ и R₃ независимо выбран из группы, состоящей из Н, циано, О-в алкила (такого как метил, этил, н-пропил, изопропил, н_-6утил, трет_-6утил и тому подобное), С_1-6 гидроксиалкокси (такого как гидроксиметокси, 2-гидроксиэтокси, 3-гидроксипропокси, 4-гидроксибутокси или тому подобного), С_3-6 циклоалкил-С_1-6 алкокси (такого как циклопентилметокси или тому подобного), C_1-6 алкокси-С_1-6 алкокси (такого как 2-метоксиэтокси или тому подобного), фенила, пиридила (такого как 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил), фенил-С_1-6 алкокси (такого как фенилметокси или тому подобного), фурил-С_1-6 алкокси (такого как фуран-3-илметокси и тому подобное), гетероциклоалкила, необязательно замещенного R₆ (такого как N-морфолинил, пиперазин-1-ил, 4-метилпиперазин-1-ил и тому подобное), гетероциклоалкилфенила, необязательно замещенного R₆ (такого как 4-метилпиперазинилфенил и тому подобное), гетероциклоалкилкарбонил, необязательно замещенный R₆ (такого как 4-метилпиперизан-1-илкарбонил и тому подобное), гетероциклоалкилокси, необязательно замещенного R₆ (такого как тетрагидропиран-4-илокси, тетрагидрофуран-3-илокси, оксетан-3-илокси, азетидин-3-илокси и тому подобное), гетероциклоалкил-С_1-6-алкокси, необязательно замещенного R₆ (такого как 2-морфолиноэтокси, 3-морфолинопропокси, тетрагидрофуран-2-илметокси, тетрагидрофуран-3-илметокси, тетрагидропиран-4-илметокси, оксетан-3-илметокси, пирролидин-3-илметокси и тому подобное), гетероциклоалкил-С_1-6 алканоиламино, необязательно замещенного R₆ (такого как тетрагидропиран-4-илформиламино, тетрагидрофуран-3-илформиламино, тетрагидропиран-4-илацетиламино, тетрагидрофуран-3-илацетиламино, 3-метилоксетан-3-илформиламино, 3-оксадицикло[3.1.0]гексан-6-илформиламино и тому подобное), С_3-6 циклоалкил-С_1-6 алканоиламино (такого как циклопропилформиламино и тому подобное) и С_1-6 алкиламинокарбонил-C_1-6 алкокси (такого как диметиламинокарбонилметокси и тому подобное), где R₁, R₂ и R₃ не представляют собой Н одновременно.

В другом предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения предложен селективный ингибитор киназы Pan-RAF, содержащий соединение формулы (Ia) или его фармацевтически приемлемую соль, сольват, сложный эфир, кислоту, метаболит или пролекарство:

где R₁, R₂, R₃, R₄ и R₅ такие, как определено выше.

В более предпочтительном варианте реализации изобретения

R₁ выбран из группы, состоящей из Н, пиридила (такого как, 3-пиридил, 4-пиридил), гетероциклоалкила (такого как, N-морфолинил, пиперазин-1-ил), гетероциклоалкил фенила, необязательно замещенного C_1-6 алкилом (таким как, 4-метилпиперазинилфенил), гетероциклоалкилокси (такого как, тетрагидропиран-4-илокси, оксетан-3-илокси), гетероциклоалкил-С_1-6 алкокси (такого как 2-морфолиноэтокси, 3-морфолинопропокси, тетрагидрофуран-3-илметокси) и С_1-6 алкиламинокарбонила-С_1-6 алкокси (такого как диметиламинокарбонилметокси);

R₂ выбран из группы, состоящей из Н, C_1-6 алкила (такого как метил), C_1-6 гидроксиалкокси (такого как 2-гидроксиэтокси, 3-гидорксипропокси, 4-гидроксибутокси), С_1-6 алкокси-С_1-6 алкокси (такого как 2-метоксиэтокси), гетероциклоалкил оке и (такого как тетрагидропиран-4-илокси, тетрагидрофуран-3-илокси, оксетан-3-илокси, азетидин-3-илокси) и гетероциклоалкил-С_1-6 алкокси (такого как 2-морф олиноэтокси, тетрагидрофуран-2-илметокси, тетрагидрофуран-3-илметокси, тетрагидропиран-4-илметокси, оксетан-3-илметокси, пирролидин-3-илметокси);

R₃ выбран из группы, состоящей из Н и С_3-6 циклоалкила C_1-6 алканоиламино (такого как циклопропилформиламино);

где R₁, R₂ и R₃ не представляют собой Н одновременно;

R₄ выбран из группы, состоящей из C_1-6 галогеналкила (такого как, трифторметил) и C_1-6 цианоалкила (такого как, 2-циано-этил-2-ил), 2-циано-проп-2-ила);

R₅ выбран из группы, состоящей из Н, С_1-6 алкила (такого как метил) и гетероциклоалкил-С_1-6 алкила, необязательно замещенного C_1-6 алкилом (таким как 4-метил-пиперазин-1-илметил).

В особенно предпочтительном варианте реализации R₁ выбран из группы, состоящей из 3-пиридил а, 4-пиридила, N-морфолинила, гетероциклоалкил оке и (предпочтительно, оксетан-3-илокси), гетероциклоалкил-С_1-6 алкокси (предпочтительно, 3-морфолинопропокси, тетрагидрофуран-3-илметокси) и С_1-6 алкиламинокарбонила-С_1-6 алкокси (предпочтительно, диметиламинокарбонилметокси); R₄ выбран из группы, состоящей из C_1-6 галогенажила (предпочтительно, трифторметила) и C_1-6 цианоалкила (предпочтительно, 2-циано-этил-2-ила), 2-цианопроп-2-ила); каждый из R₂, R₃ и R₅ представляет собой Н.

В другом особенно предпочтительном варианте реализации R₂ выбран из группы, состоящей из C_1-6 гидроксиалкокси (предпочтительно, 3-гидорксипропокси, 4-гидроксибутокси), C_1-6 алкокси-С_1-6 алкокси (предпочтительно, 2-метоксиэтокси), гетероциклоалкилокси (предпочтительно, тетрагидропиран-4-илокси, тетрагидрофуран-3-илокси, азетидин-3-илокси) и гетероциклоалкил-С_1-6 алкокси (предпочтительно, тетрагидропиран-4-илметокси, оксетан-3-илметокси); R₄ выбран из группы, состоящей из C_1-6 галогеналкила (предпочтительно, трифторметила) и C_1-6 цианоалкила (предпочтительно, 2-цианоэтил-2-ила, 2-цианопроп-2-ила); каждый из R₁, R₃ и R₅ представляет собой Н.

В другом предпочтительном варианте реализации настоящего изобретения предложен селективный ингибитор киназы Pan-RAF, содержащий соединение формулы (Ib) или его фармацевтически приемлемую соль, сольват, сложный эфир, кислоту, метаболит или пролекарство:

где

X выбран из группы, состоящей из и предпочтительно представляет собой

один из Y и Z представляет собой углерод, а другой представляет собой азот;

кольцо А выбрано из группы, состоящей из и предпочтительно представляет собой;

R₄ и R₅ каждый независимо выбран из группы, состоящей из Н, C_1-6 алкила (такого как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил и тому подобное), C_1-6 галогеналкила (такого как трифторметил), C_1-6 цианоалкила (такого как 2-цианоэтил-2-ил, 2-цианопроп-2-ил), пиперазинил C_1-6 алкила, необязательно замещенного R₆ (такого как пиперазин-1-илметил), фенила, необязательно замещенного R₆, имидазолила, необязательно замещенного R₆, тиенила, необязательно замещенного R₆, пиридила, необязательно замещенного R₆, и аминосульфонила, или R₄ и R₅ совместно образуют и R₄ и R₅ не представляют собой Н одновременно; R₆ независимо выбран из группы, состоящей из C_1-6 алкила (такого как, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил и тому подобное) и C_1-6 галогеналкила (такого как, трифторметил).

В предпочтительном варианте реализации настоящее изобретение относится к следующему соединению или его фармацевтически приемлемой соли, сольвату, сложному эфиру, кислоте, метаболиту или пролекарству:

В настоящем документе рассматривается любая комбинация групп, описанных выше для различных переменных. Следует понимать, что заместители и схемы замещения соединений, предложенных в настоящем изобретении, могут быть выбраны специалистами в данной области техники для получения химически стабильных соединений, которые могут быть синтезированы с помощью методов, известных в данной области техники, а также методов, изложенных в настоящем описании.

В настоящем документе описан новый ингибитор киназы. Фармацевтически приемлемые соли, сольваты, сложные эфиры, кислоты, фармацевтически активные метаболиты и пролекарства указанных соединений также описаны в настоящем изобретении.

В других вариантах реализации соединения, описанные в настоящем изобретении, метаболизируются при введении в организм, нуждающийся в этом, с получением метаболита, который затем применяют для получения желаемого эффекта, включая желаемый терапевтический эффект.

Описанные в настоящем изобретении соединения могут быть образованы и/или применены в виде фармацевтически приемлемых солей. Типы фармацевтически приемлемых солей включают, но не ограничиваются ими: (1) соли присоединения кислоты, образованные взаимодействием соединения в форме свободного основания с фармацевтически приемлемой неорганической кислотой, такой как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота, метафосфорная кислота и тому подобное; или с органической кислотой, такой как уксусная кислота, пропионовая кислота, гексановая кислота, циклопентанпропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, молочная кислота, малоновая кислота, яблочная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота, малеиновая кислота, винная кислота, фумаровая кислота, трифторуксусная кислота, бензойная кислота, 3-(4-гидроксибензоил)бензойная кислота, коричная кислота, манделиновая кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, 1,2-этандисульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, толуолсульфоновая кислота, 4-метилбицикло-[2.2.2] окт-2-ен-1-карбоновая кислота, 2-нафталинсульфоновая кислота, трет_-6утилуксусная кислота, глюкогептоновая кислота, 4,4'-метиленбис-(3-гидрокси-2-ен-1-карбоновая кислота), 3-фенилпропионовая кислота, триметилауксусная кислота, лаурилсерная кислота, глюконовая кислота, глутаминовая кислота, салициловая кислота, гидроксинафтойная кислота, стеариновая кислота, муконовая кислота и тому подобное; (2) соли присоединения основания, образованные таким образом, что протон кислоты, присутствующий на родительском соединении либо замещается ионом металла, таким как ион щелочного металла (такого как литий, натрий, калий), щелочно-земельного металла (такого как магний или кальций) или ион алюминия; или координируется с органическим основанием или неорганическим основанием. Приемлемые органические основания включают этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, триметиламин, N-метилглюкамин и тому подобное. Приемлемые неорганические основания включают гидроксид алюминия, гидроксид кальция, гидроксид калия, карбонат натрия, гидроксид натрия и тому подобное.

Соответствующие противоионы фармацевтически приемлемых солей могут быть проанализированы и идентифицированы с применением различных методов, включая, но не ограничиваясь ими, ионообменную хроматографию, ионную хроматографию, капиллярный электрофорез, индуктивно связанную плазму, атомно-абсорбционную спектроскопию, масс-спектрометрию или любую их комбинацию.

Соли выделяют с применением по меньшей мере одного из следующих методов: фильтрация, осаждение осадителем с последующей фильтрацией, выпаривание растворителя или, в случае водных растворов, лиофилизация.

Скрининг и определение характеристик фармацевтически приемлемых солей, полиморфов и/или сольватов могут быть осуществлены с применением различных методов, включая, но не ограничиваясь ими, термический анализ, рентгеновскую дифракцию, спектроскопию, микроскопию и элементный анализ. Различные применяемые спектроскопические методы включают, но не ограничиваются ими, рамановскую спектроскопию, FTIR, UVIS и ЯМР (в жидком и твердом состоянии). Различные методы микроскопии включают, но не ограничиваются ими, ИК-микроскопию и рамановскую микроскопию.

Фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению

В настоящем изобретении также предложена фармацевтическая композиция, содержащая по меньшей мере одно соединение формулы (I) или (Ia) или фармацевтически приемлемую соль, сольват, сложный эфир, кислоту, фармацевтически активный метаболит или пролекарство соединения и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество и необязательно другие терапевтические агенты.

Во время лечения ее можно применять отдельно или в комбинации с одним или более другими терапевтическими агентами. Лекарственное средство, содержащее соединение согласно настоящему изобретению, может быть введено пациенту посредством по меньшей мере одного способа, выбранного из инъекции, перорального введения, ингаляции, ректального и трансдермального введения. Другие терапевтические агенты могут быть выбраны из следующих: иммунодепрессанты (такие как такролимус, циклоспорин, рапамицин, метотрексат, циклофосфамид, азатиоприн, меркаптопурин, микофенолат или FTY720), глюкокортикоиды (такие как преднизон, кортизона ацетат, преднизолон, метилпреднизолон, дексаметазон, бетаметазон, триамцинолон, гидрогидроксипреднизолон, беклометазон, флуогидрокортизона ацетат, дезоксикортикостерона ацетат, альдостерон), нестероидные противовоспалительные лекарственные средства (такие как, салицилаты, арилалкановые кислоты, 2-арилпропионовые кислоты, N-арилантраниловые кислоты, оксикамы, коксибы или сульфонанилиды), аллерговакцины, антигамисты, антилейкотриены, (3-агонисты, теофиллин, антихолинергические средства или другие селективные ингибиторы киназы (такие как mTOR, ингибиторы c-Met) или средства с антителами к her2. Кроме того, другие терапевтические агенты также могут представлять собой рапамицин, кризотиниб, тамоксифен, ралоксифен, анастрозол, эксеместан, летрозол, Герцептин™ (трастузумаб), Гливекμ (иматиниб), Таксол™ (паклитаксел), циклофосфамид, ловастатин, минозин, цитарабин, 5-фторурацил (5-ФУ), метотрексат (МТТ), Таксотер™ (доцетаксел), Золадекс™ (гозерелин), винкристин, винбластин, нокодазол, тенипозид, этопозид, Гемзар™ (гемцитабин), эпотилон, навельбин, камптотецин, даунонибицин, д актином ицин, моксантрон, амакрин, доксорубицин (адриамицин), эпирубицин или идарубицин. В качестве альтернативы другие терапевтические агенты могут представлять собой, например, но не ограничиваясь ими, цитокины, такие как G-CSF (гранулоцитарный колонне стимулирующий фактор). В качестве альтернативы другие терапевтические агенты могут представлять собой, например, CMF (циклофосфамид, метотрексат и 5-фторурацил), CAF (циклофосфамид, адриамицин и 5-фторурацил), АС (адриамицин и циклофосфамид), FEC (5-фторурацил, эпирубицин и циклофосфамид), ACT или АТС (адриамицин, циклофосфамид и паклитаксел) или CMFP (циклофосфамид, метотрексат, 5-фторурацил и преднизон).

В различных вариантах реализации настоящего изобретения при лечении пациента в соответствии с настоящим изобретением количество данного агента будет варьироваться в зависимости от таких факторов, как конкретный режим дозирования, тип заболевания или состояния и его тяжесть, отличительные черты (например, масса) субъекта или хозяина, нуждающегося в лечении, но может быть легко определено способом, известным в данной области техники, в соответствии с конкретными обстоятельствами, связанными с данным случаем, включая, например, конкретный вводимый агент, способ введения, подвергаемое лечению состояние и подвергаемого лечению субъекта или хозяина. В целом дозы, используемые для лечения взрослых людей, обычно находятся в диапазоне 0,02-5000 мг в день, например примерно 1-1500 мг в день. Необходимая доза может быть удобным образом представлена в виде разовой дозы или отдельных доз, вводимых одновременно (или в течение короткого периода времени) или с соответствующими интервалами, например, в виде двух, трех, четырех или более субдоз в день. Специалистам в данной области техники будет понятно, что, хотя приведены вышеупомянутые диапазоны доз, конкретные эффективные количества могут быть соответствующим образом скорректированы в зависимости от состояния пациента и суждения практикующего врача.

Применение лекарственных средств согласно настоящему изобретению

Соединение согласно настоящему изобретению, включая его фармацевтически приемлемую соль, сольват, сложный эфир, кислоту, метаболит или пролекарство, или фармацевтическую композицию можно применять для ингибирования активности тирозинкиназы RAF (дикого типа или различных мутантов или их комбинации) и/или RAS (дикого типа или различных мутантов или их комбинации). Соединение по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль, сольват, сложный эфир, кислота, метаболит или пролекарство или фармацевтическая композиция могут быть использованы для лечения, предотвращения или облегчения одного или более заболеваний, выбранных из группы, состоящей из: солидных опухолей (включая доброкачественные или особенно злокачественные типы), особенно саркомы, гастроинтестинальных стромальных опухолей (ГИСО), колоректального рака, острого миелобластного лейкоза (ОМЛ), хронического миелолейкоза (ХМЛ), неоплазии, карциномы щитовидной железы, системного мастоцитоза, синдрома эозинофилии, фиброза, красной волчанки, болезни «трансплантат против хозяина», нейрофиброматоза, легочной гипертензии, болезни Альцгеймера, семиномы, дизгерминомы, тучноклеточных опухолей, рака легкого, бронхиальной карциномы, внутриэпителиальной неоплазии яичек, меланомы, рака молочной железы, нейробластомы, папиллярной/фолликулярной карциномы щитовидной железы, злокачественной лимфомы, неходжскинской лимфомы, множественной эндокринной неоплазии 2 типа, феохромоцитомы, карциномы щитовидной железы, гиперплазии/аденомы паращитовидных желез, рака толстой кишки, колоректальной аденомы, рака яичников, рака предстательной железы, глиобластомы, опухоли головного мозга, злокачественной глиомы, рака поджелудочной железы, злокачественной эндотелиомы плевры, гемангиобластомы, гемангиомы, рака почки, рака печени, карциномы надпочечников, рака мочевого пузыря, рака желудка, рака прямой кишки, рака влагалища, рака шейки матки, рака эндометрия, множественной миеломы, опухоли шеи и головы, а также других пролиферативных состояний и т.п., или их комбинации. Особенно предпочтительно для лечения рака головы и шеи, карциномы щитовидной железы, меланомы, колоректального рака, рака легкого, рака молочной железы, рака поджелудочной железы, рака пищевода, рака печени, лейкоза, неоплазии или тому подобного или их комбинации.

Получение соединения

Соединение по настоящему изобретению может быть синтезировано с применением стандартных способов синтеза, известных специалистам в данной области техники, или с применением способов, известных в данной области техники, в комбинации со способами, описанными в настоящем изобретении. Кроме того, растворители, температуры и другие условия реакций, представленные в настоящем изобретении, могут варьироваться в зависимости от способов в данной области техники. В качестве дополнительного руководства также могут быть применены следующие способы синтеза.

Реакции могут быть применены последовательно для получения соединений, описанных в настоящем изобретении, или они могут быть применены для синтеза строительных блоков, которые впоследствии соединяют способами, описанными в настоящем изобретении и/или известными в данной области техники.

В некоторых вариантах реализации в настоящем изобретении предложены способы получения и способы применения соединений-ингибиторов тирозинкиназы, описанных в настоящем изобретении. В определенных вариантах реализации соединения, описанные в настоящем изобретении, можно синтезировать с помощью следующих схем синтеза. Соединения могут быть синтезированы с применением методик, аналогичных описанным ниже, с применением соответствующих альтернативных исходных материалов.

Исходные материалы, применяемые для синтеза соединений, описанных в настоящем изобретении, могут быть синтезированы или могут быть получены на коммерческой основе. Соединения, описанные в настоящем изобретении, и другие родственные соединения, имеющие отличающиеся заместители, могут быть синтезированы с применением методов и материалов, известных специалистам в данной области техники. Общие способы получения соединений, описанных в настоящем изобретении, могут быть получены на основе известных реакций в данной области, и реакции могут быть модифицированы с применением соответствующих реагентов и условий, которые будут очевидны специалисту в данной области техники, для введения различных фрагментов в молекулы, предложенные в настоящем изобретении.

Продукты реакции могут быть выделены и очищены при необходимости с применением традиционных методов, включая, но не ограничиваясь ими, фильтрацию, дистилляцию, кристаллизацию, хроматографию и тому подобное. Характеристики таких продуктов могут быть определены с применением традиционных средств, включая физические константы и спектральные данные.

Пример 1: N-(3-(4-([3,3'-бипиридил]-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-4-метил-3-(трифторметил)бензамид 1

Стадия 1. Синтез 4-бром-1-(2-метил-5-нитрофенил)-1Н-пиразола а:

Соединения 4-бромпиразол (5 г, 1 экв.), 2-фтор-1-метил-4-нитробензол (5,5 г, 1,05 экв.) и карбонат калия (13,1, 3 экв.) смешивали в ДМ ФА (50 мл). Смесь перемешивали в течение ночи при 120°С в атмосфере азота, затем охлаждали и концентрировали. В концентрат добавляли этилацетат (200 мл). Затем полученную смесь последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали, и затем разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением желтого продукта а (5,2 г).

Стадия 2. Синтез 1-(2-метил-5-нитрофенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола b:

Соединение а (5 г, 1 экв.), бис(пинаколато)диборон (5,8 г, 1,3 экв.), ацетат калия (3,5 г, 2 экв.) и [1,1-бис(дифенилфосфино)ферроцен] дихлорид палладия (0,72 г, 0,05 экв.) смешивали в 1,4-диоксане (50 мл). Смесь перемешивали в течение ночи при 100°С в атмосфере азота и затем концентрировали. Концентрат отделяли с применением колоночной хроматографии с получением желтого продукта b (4,0 г).

Стадия 3. Синтез 5-(1-(2-метил-5-нитрофенил)-1Н-пиразол-4-ил)-3,3'-бипиридила с:

Соединение b (4,0 г, 1,1 экв.), 5-бром-3,3'-бипиридил (2,6 г, 1 экв.), карбонат калия (3,0 г, 2 экв.) и тетракис(трифенилфосфин)палладий (0,6 г, 0,05 экв.) смешивали в 1,4-диоксане (40 мл) и воде (4 мл). Смесь перемешивали в течение ночи при 90°С в атмосфере азота и затем концентрировали. Концентрат отделяли с применением колоночной хроматографии с получением желтого продукта с (2,8 г).

Стадия 4. Синтез 3-(4-([3,3'-бипиридил]-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метиланилина d:

Соединение с (2,8 г, 1 экв.) и палладий на угле (0,5 г) смешивали в метаноле (30 мл). Смесь перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре в атмосфере водорода. Затем добавляли дихлорметан (100 мл) для разбавления смеси. Полученную смесь фильтровали и концентрировали с получением бледно-зеленого продукта d (2,1 г).

Стадия 5. Синтез N-(3-(4-([3,3'-бипиридил]-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-4-метил-3-(трифторметил)бензамида 1:

Соединение d (0,05 г, 1 экв.), 4-метил-3-(трифторметил)бензойную кислоту (0,031 г, 1 экв.), HATU (0,064, 1,1 экв.) и диизопропилэтиламин (0,020 г, 1 экв.) смешивали в ДМФА (2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 часа. Затем добавляли этилацетат (50 мл) для разбавления смеси. Смесь последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали и разделяли с помощью ВЭЖХ с получением продукта 1 (0,07 г). Точная масса (расчетная): 513,17; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 514,17.

Пример 2: N-(3-(4-([3,3'-бипиридил]-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(трифторметил)бензамид 2

Соединение 2 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 499,16; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 500,16.

Пример 3: N-(3-(4-([3,3'-бипиридил]-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(2-цианопроп-2-ил)бензамид 3

Соединение 3 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 498,21; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 499,21.

Пример 4: N-(3-(4-([3,3'-бипиридил]-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-5-(трет_-6утил)изоксазол-3-карбоксамид 4

Соединение 4 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 478,21; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 479,21.

Пример 5: N-(3-(4-([3,4'-бипиридил]-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(2-цианопроп-2-ил)бензамид 5

Соединение 5 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 498,21; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 499,21.

Пример 6: N-(3-(4-([3,4'-бипиридил]-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(1-цианоэтил)бензамид 6

Соединение 6 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 484,20; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 484,20.

Пример 7: N-(3-(4-([3,4'-бипиридил]-5-ил)-1H-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-4-метил-3-(трифторметил)бензамид 7

Соединение 7 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 513,17; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 514,17.

Пример 8: N-(3-(4-([3,4'-бипиридил]-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-4-((4-метилпиперазин-1-ил)метил)-3-(трифторметил)бензамид 8

Соединение 8 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 611,26; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 612,26.

Пример 9: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(5-морфолинопирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 9

Соединение 9 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 506,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 507,24.

Пример 10: 3-(1-цианоэтил)-N-(4-метил-3-(4-(5-морфолинопирид-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 10

Соединение 10 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 492,22 МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 493,22.

Пример 11: 4-метил-N-(4-метил-3-(4-(5-морфолинопирид-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифтор метил)бензамид 11

Соединение 11 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 521,20; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 522,20.

Пример 12: N-(4-метил-3-(4-(5-морфолинопирид-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)фенил)-4-((4-метилпиперазин-1-ил)метил)-3-(трифторметил)бензамид 12

Соединение 12 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 619,28; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 620,28.

Пример 13: N-(3-(4-([3,4'-бипиридил]-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(трифторметил)бензамид 13

Соединение 13 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 499,16; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 500,16.

Пример 14: N-(3-(4-([3,4'-бипиридил]-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-5-(трет-бутил)изоксазол-3-карбоксамид 14

Соединение 14 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 478,21; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 479,21.

Пример 15: 1-(3-(4-([3,4'-бипиридил]-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(5-(трет-бутил)изоксазол-3-ил)мочевина 15

Стадия 1. Синтез фенил (5-(трет_-6утил)изоксазол-3-ил)карбамата е

5-(трет-бутил) изоксазол-3-амин(5 г, 1 экв.), DIPEA (5,1 г, 1,1 экв.) и ТГФ (20 мл) смешивали при 0°С в атмосфере азота. К смеси добавляли фенилхлорформиат (5,9 г, 1,05 экв.). Реакцию проводили в течение 0,5 часа при данной температуре. Затем реакционную смесь разбавляли этилацетатом (120 мл), последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, и концентрировали. Полученное твердое вещество промывали н-гексаном и фильтровали с получением белого твердого вещества е (7g).

Стадия 2. Синтез 1-(3-(4-([3,4'-бипиридил]-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(5-(трет-бутил)изоксазол-3-ил)мочевины 15:

Соединение f синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Смешивали соединение е (0,05 г, 1 экв.), соединение f (0,055 г, 1 экв.) и ДМСО (2 мл). Смесь перемешивали в течение 4 часов при 80°С.Затем добавляли этилацетат (50 мл). Полученную смесь последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Концентрат отделяли с помощью ВЭЖХ с получением Соединения 12 (0,06 г). Точная масса (расчетная): 493,22; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 494,22.

Пример 16: N-(4-метил-3-(4-(5-морфолинопирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 16

Соединение 16 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 507,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 508,18.

Пример 17: 5-(трет-бутил)-N-(4-метил-3-(4-(5-морфолинопирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)изоксазол-3-карбоксамид 17

Соединение 17 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 486,23; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 487,23.

Пример 18: 1-(5-(трет-бутил)изоксазол-3-ил)-3-(4-метил-3-(4-(5-морфолинопирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)мочевина 18

Соединение 18 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 15. Точная масса (расчетная): 501,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 502,24.

Пример 19: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-карбонил)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 19

Соединение 19 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 547,26; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 548,26.

Пример 20: 3-(1-цианоэтил)-N-(4-метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-карбонил)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 20

Соединение 20 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 533,25; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 534,25.

Пример 21: N-(4-метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-карбонил)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 21

Соединение 21 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 548,21; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 549,21.

Пример 22: 5-(трет-бутил)-N-(4-метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-карбонил)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)изоксазол-3-карбоксамид 22

Пример 22 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в Примере 1. Точная масса (расчетная): 527,26; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 528,26.

Пример 23: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 23

Соединение 23 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 519,27; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 520,27.

Пример 24: 3-(1-цианоэтил)-N-(4-метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 24

Соединение 24 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 505,26; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 506,27.

Пример 25: N-(4-метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пирид-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 25

Соединение 25 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 520,21; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 521,21.

Пример 26: 5-(трет-бутил)-N-(4-метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1 -ил)фенил)изоксазол-3-карбоксамид 26

Соединение 26 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 499,26; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 500,26.

Пример 27: 1-(5-(трет-бутил)изоксазол-3-ил)-3-(4-метил-3-(4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)мочевина 27

Соединение 27 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 15. Точная масса (расчетная): 514,28; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 515,28.

Пример 28: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(5-фенилпирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 28

Соединение 28 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в Примере 1. Точная масса (расчетная): 497,22; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 498,22.

Пример 29: N-(4-метил-3-(4-(5-фенилпирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 29

Соединение 29 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 498,16; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 499,16.

Пример 30: N-(4-метил-3-(4-(5-(4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(2-цианопроп-2-ил)бензамид 30

Соединение 30 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 595,31; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 596,31

Пример 31: N-(4-метил-3-(4-(5-(4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 31

Соединение 31 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 596,25; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 597,26.

Пример 32: N-(4-метил-3-(4-(5-(4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 32

Соединение 32 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 610,26; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 611,26.

Пример 33: 5-(трет-бутил)-N-(4-метил-3-(4-(5-(4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)изоксазол-3-карбоксамид 33

Соединение 33 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 575,30; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 576,30.

Пример 34: N-(4-метил-3-(4-(5-морфолинопирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 54

Соединение 34 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 521,20; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 522,20.

Пример 35: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(3-(4-(6-(циклопропилформиламино)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)бензамид 35

Соединение 35 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 504,22; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 505,22.

Пример 36: N-(3-(4-(6-(циклопропилформиламино)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(трифторметил)бензамид 3 6

Соединение 36 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 505,17; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 506,17.

Пример 37: N-(5-(1-(2-метил-5-(2-(3-(трифторметил)фенил)ацетиламино)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-2-ил) циклопропанкарбоксамид 37

Соединение 37 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 519,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 520,18.

Пример 38: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(3-(4-(6-(циклопропилформиламино)-4-метилпирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)бензамид 38

Соединение 38 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 518,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 519,24.

Пример 39: N-(3-(4-(6-(циклопропилформиламино)-4-метилпирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(трифторметил)бензамид 39

Соединение 39 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 519,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 520,18.

Пример 40: N-(4-метил-5-(1-(2-метил-5-(2-(3-(трифторметил)фенил)ацетиламино)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-2-ил) циклопропанкарбоксамид 40

Соединение 40 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 533,20; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 534,20.

Пример 41: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(5-(2-морфолино этокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 41

Стадия 1. Синтез 4-(2-((5-бромпирид-3-ил)окси)этил) морфолина g Смешивали 2-морфолиноэтанол (3 г, 1 экв), DIPEA (3,2 г, 1,1 экв.) и ТГФ (15 мл). К смеси по каплям добавляли метилсуфонилхлорид (2,7 г, 1,1 экв.) при 0°С. Полученную смесь перемешивали при температуре в течение 6 часов. Реакционный раствор концентрировали, элюировали этилацетатом (100 мл), последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением продукта 2-морфолиноэтилметансульфоната (3,8 г, 1 экв.). Продукт смешивали с 5_-6ромпирид-3-олом (2,8 г, 0,9 экв.), карбонатом калия (3,7 г, 2 экв.). Смесь перемешивали в ДМФА (30 мл) при 70°С в течение 5 часов. Затем полученную смесь концентрировали, элюировали этилацетатом (150 мл), последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением продукта 4-(2-((5-бромпирид-3-ил)окси)этил)морфолина g (3,2 г).

Стадия 2. Соединение 41 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 550,26; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 551,26.

Пример 42: N-(4-метил-3-(4-(5-(2-морфолиноэтокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 42

Соединение 42 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 551,21. МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 552,21.

Пример 43: N-(4-метил-3-(4-(5-(2-морфолиноэтокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид43

Соединение 43 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 565,23; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 566,23.

Пример 44: N-(3-(4-(4-циано-6-(циклопропилформиламино)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(2-цианопроп-2-ил)бензамид 44

Соединение 44 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 529,22; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 530,22.

Пример 45: N-(3-(4-(4-циано-6-(циклопропилформиламино)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(трифторметил)бензамид 45

Соединение 45 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 530,16; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 531,16.

Пример 46: N-(4-циано-5-(1-(2-метил-5-(2-(3-(трифторметил)фенил)ацетиламино)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-2-ил) циклопропанкарбоксамид46

Соединение 46 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 544,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 545,18.

Пример 47: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(5-(3-морфолино пропокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 47

Соединение 47 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 564,28. МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 565,28.

Пример 48: N-(4-метил-3-(4-(5-(3-морфолино пропокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 48

Соединение 48 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 565,23; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 566,23.

Пример 49: N-(4-метил-3-(4-(5-(3-морфолино пропокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 49

Соединение 49 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 579,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 580,24.

Пример 50: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(5-((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)окси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 50

Соединение 50 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 521,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 522,24.

Пример 51: N-(4-метил-3-(4-(5-((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)окси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 51

Соединение 51 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в Примере 41. Точная масса (расчетная): 522,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 523,18.

Пример 52: N-(4-метил-3-(4-(5-((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)окси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 52

Соединение 52 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 536,20; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 537,20.

Пример 53: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(3-(4-(5-(2-(диметиламино)-2-оксоэтокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)бензамид 53

Соединение 53 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 522,23; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 523,23.

Пример 54: N-(3-(4-(5-(2-(диметиламино)-2-оксоэтокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(трифторметил)бензамид 54

Соединение 54 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 523,18. МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 524,18.

Пример 55: N,N-диметил-2-((5-(1-(2-метил-5-(2-(3-(трифторметил)фенил)ацетиламино)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-3-ил)окси)ацетамид 55

Соединение 55 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 537,19; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 538,19.

Пример 56: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)окси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 56

Соединение 56 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 521,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 522,24.

Пример 57: N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)окси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 57

Соединение 57 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 522,19; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 523,20.

Пример 58: N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)окси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 58

Соединение 58 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 536,20; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 537,20.

Пример 59: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(3-(4-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)бензамид 59

Соединение 59 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 522,23; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 523,23.

Пример 60: N-(3-(4-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтокси)пирид-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(трифторметил)бензамид 60

Соединение 60 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 522,23; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 523,23.

Пример 61: N,N-диметил-2-((3-(1-(2-метил-5-(2-(3-(трифторметил)фенил)ацетиламино)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)окси)ацетамид 61

Соединение 61 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в Примере 61. Точная масса (расчетная): 537,19; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 538,19.

Пример 62: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-3-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 62

Соединение 62 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 521,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 522,24. Пример 63: N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-3-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 63

Соединение 63 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 522,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 523,18.

Пример 64: N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-3-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 64

Соединение 64 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 536,20; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 537,20.

Пример 65: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(5-((тетрагидрофуран-3-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 65

Соединение 65 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 521,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 522,24.

Пример 66: N-(4-метил-3-(4-(5-((тетрагидрофуран-3-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 66

Соединение 66 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 522,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 523,18.

Пример 67: N-(4-метил-3-(4-(5-((тетрагидрофуран-3-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 67

Соединение 67 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 536,20; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 537,20.

Пример 68: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)пирид-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 68

Соединение 68 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 507,22; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 508,22.

Пример 69: N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 69

Соединение 69 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 508,17; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 509,17.

Пример 70: N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 70

Соединение 70 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 522,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 523,18.

Пример 71: N-(3-(4-([3,4'-бипирид]-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 71

Соединение 71 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в Примере 1. Точная масса (расчетная): 513,17; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 514,17.

Пример 72: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 72

Соединение 72 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 535,25; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 536,25.

Пример 73: 3-(1-цианоэтил)-N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 73

Соединение 73 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 521,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 522,25.

Пример 74: N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 74

Соединение 74 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 536,20; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 537,20.

Пример 75: N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 75

Соединение 75 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 550,21; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 551,21.

Пример 76: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(4-(2-морфолиноэтокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 76

Соединение 76 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 550,26; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 551,26.

Пример 77: 3-(1-цианоэтил)-N-(4-метил-3-(4-(4-(2-морфолиноэтокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 77

Соединение 77 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 536,25; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 537,25.

Пример 78: N-(4-метил-3-(4-(4-(2-морфолино этокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид78

Соединение 78 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 565,23; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 566,23.

Пример 79: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(4-(оксетан-3-илокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 79

Соединение 79 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 493,21; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 494,21.

Пример 80: 3-(1-цианоэтил)-N-(4-метил-3-(4-(4-(оксетан-3-илокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 80

Соединение 80 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 479,19; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 480,19.

Пример 81: N-(4-метил-3-(4-(4-(2-морфолиноэтокси)пирид-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 81

Соединение 81 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 521,21; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 522,22.

Пример 82: N-(4-метил-3-(4-(4-(оксетан-3-илокси)пирид-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 82

Соединение 82 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 494,15; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 495,15.

Пример 83: N-(4-метил-3-(4-(4-(оксетан-3-илокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 83

Соединение 83 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 508,17; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 509,18.

Пример 84: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(5-(оксетан-3-илокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 84

Соединение 84 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 493,21; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 494,21.

Пример 85: 3-(1-цианоэтил)-N-(4-метил-3-(4-(5-(оксетан-3-илокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 85

Соединение 85 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 479,19; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 480,19. Пример 86: N-(4-метил-3-(4-(5-(оксетан-3-илокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 86

Соединение 86 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 508,17; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 509,17.

Пример 87: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(4-(оксетан-3-илметокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 87

Соединение 87 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 507,22; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 508,22.

Пример 88: 3-(1-цианоэтил)-N-(4-метил-3-(4-(4-(оксетан-3-илметокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 88

Соединение 88 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 493,21; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 494,21.

Пример 89: N-(4-метил-3-(4-(4-(оксетан-3-илметокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 89

Соединение 89 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 508,17; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 509,17.

Пример 90: N-(4-метил-3-(4-(4-(оксетан-3-илметокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 90

Соединение 90 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 522,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 523,18.

Пример 91: N-(3-(4-(4-(бензилокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(2-цианопроп-2-ил)бензамид 91

Соединение 91 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 527,23; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 528,24.

Пример 92: N-(3-(4-(4-(бензилокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(трифторметил)бензамид 92

Соединение 92 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 528,17; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 529,17.

Пример 93: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-2-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 93

Соединение 93 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 521,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 522,24.

Пример 94: 3-(1-цианоэтил)-N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-2-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 94

Соединение 94 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 507,22; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 508,22.

Пример 95: N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-2-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 95

Соединение 95 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 522,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 523,18.

Пример 96: N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-2-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 96

Соединение 96 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 536,20; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 537,20.

Пример 97: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(3-(4-(4-(циклопентилметокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)бензамид 97

Соединение 97 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 519,26; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 520,26.

Пример 98: 3-(1-цианоэтил)-N-(3-(4-(4-(циклопентилметокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)бензамид 98

Соединение 98 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 505,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 506,24.

Пример 99: N-(3-(4-(4-(циклопентилметокси)пирид-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(трифторметил)бензамид 99

Соединение 99 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 520,20; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 521,20.

Пример 100: N-(3-(4-(4-(циклопентилметокси)пирид-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 100

Соединение 100 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 534,22; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 535,22.

Пример 101: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(3-(4-(4-(фуран-3-илметокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)бензамид 101

Соединение 101 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 517,21; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 518,21.

Пример 102: 3-(1-цианоэтил)-N-(3-(4-(4-(фуран-3-илметокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)бензамид 102

Соединение 102 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 503,19; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 504,19.

Пример 103: N-(3-(4-(4-(фуран-3-илметокси)пирид-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(трифторметил)бензамид 103

Соединение 103 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 518,15; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 519,15.

Пример 104: N-(3-(4-(4-(фуран-3-илметокси)пирид-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 104

Соединение 104 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 532,17; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 533,17.

Пример 105: (S)-3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 105

Соединение 105 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 507,22; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 508,22.

Пример 106: (R)-3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 106

Соединение 106 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 507,22; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 508,22.

Пример 107: (S)-N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 107

Соединение 107 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в Примере 41. Точная масса (расчетная): 508,17; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 509,17.

Пример 108: (R)-N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 108

Соединение 108 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 508,17; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 509,17.

Пример 109: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(5-морфолино пирид-3-ил)-1Н-имидазол-1-ил)фенил)бензамид 109

Соединение 109 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 506,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 507,24.

Пример 110: N-(4-метил-3-(4-(5-(оксетан-3-илокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 110

Соединение 110 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 506,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 507,24.

Пример 111: N-(4-метил-3-(4-(5-морфолинопирид-3-ил)-1Н-имидазол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 111

Соединение 111 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 507,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 508,18.

Пример 112: (S)-3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-3-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 112

Соединение 112 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 521,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 522,24.

Пример 113: (R)-3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-3-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 113

Соединение 113 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 521,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 522,24.

Пример 114: (S)-N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-3-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 114

Соединение 114 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 522,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 523,18.

Пример 115: (R)-N-(4-метил-3-(4-(4-((тетрагидрофуран-3-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 115

Соединение 115 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 522,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 523,18.

Пример 116: N-(3-(4-(4-((1-ацетилпирролидин-3-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(2-цианопроп-2-ил)бензамид 116

Соединение 116 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 562,26; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 563,26.

Пример 117: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(4-((1-(метилсульфонил)пирролидин-3-ил)метокси)пирид-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 117

Соединение 117 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 598,23; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 599,23.

Пример 118: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(3-(4-(4-((1-(2-(диметиламино)ацетил)пирролидин-3-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1 -ил)-4-метилфенил)бензамид 118

Соединение 118 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 605,31; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 606,31.

Пример 119: N-(3-(4-(4-((1-ацетилпирролидин-3-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(трифторметил)бензамид 119

Соединение 119 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 563,21; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 564,21.

Пример 120: N-(4-метил-3-(4-(4-((1-(метилсульфонил)пирролидин-3-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 120

Соединение 120 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 599,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 600,18.

Пример 121: N-(3-(4-(4-((1-(2-(диметиламино)ацетил)пирролидин-3-ил)метокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(трифторметил)бензамид 121

Соединение 121 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 606,25; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 607,25.

Пример 122: (8)-3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(4-((5-оксотетрагидрофуран-2-ил)метокси)пирид-3-ил)-Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 122

Соединение 122 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 535,22. МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 536,22.

Пример 123: N-(3-(4-(4-((1 -ацетилазетидин-3-ил)окси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил))-3-(трифторметил)бензамид 123

Соединение 123 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 535,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 536,18.

Пример 124: N-(4-метил-3-(4-(4-((1-(метилсульфонил)азетидин-3-ил)окси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 124

Соединение 124 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 571,15; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 572,15.

Пример 125: N-(3-(1-(5-(3-(2-цианопроп-2-ил)бензоиламино)-2-метилфенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)тетрагидро-2Н-пиран-4-карбоксамид 125

Стадия 1. Синтез N-(3-бромпирид-4-ил)тетрагидро-2Н-пиран-4-карбоксамида h

3-бромпирид-4-иламин (1,0 г, 1 экв.), тетрагидро-2Н-пиран-4-карбоновую кислоту (0,75 г, 1 экв.), HATU (2,4 г, 1,1 экв.), DIPEA (0,75) и DMF (5 мл) смешивали и перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 часа. Затем полученную смесь элюировали этилацетатом (150 мл), последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением продукта h (1,3 г), который непосредственно применяли на следующей стадии.

Стадия 2. Конечный продукт Соединение 125 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в Примере 1. Точная масса (расчетная): 548,25; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 549,25.

Пример 126: N-(3-(1-(2-метил-5-(3-(трифторметил)бензоиламино)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)тетрагидро-2Н-пиран-4-карбоксамид 126

Соединение 126 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 549,19; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 550,19.

Пример 127: N-(3-(1-(2-метил-5-(2-(3-(трифторметил)фенил)ацетиламино)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)тетрагидро-2Н-пиран-4-карбоксамид 127

Соединение 127 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 563,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 564,24.

Пример 128: N-(3-(1-(2-метил-5-(3-(3-(трифторметил)фенил)уреидо)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)тетрагидро-2Н-пиран-4-карбоксамид 128

Соединение 128 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1, 125 и 15. Точная масса (расчетная): 564,20. МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 565,20.

Пример 129: N-(3-(1-(5-(3-(5-(трет_-6утил)изоксазол-3-ил)уреидо)-2-метилфенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)тетрагидро-2Н-пиран-4-карбоксамид 129

Соединение 129 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1, 125 и 15. Точная масса (расчетная): 543,25; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 544,25.

Пример 130: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(4-(2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)ацетиламино)пирид-3-ил)-1H-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 130

Соединение 130 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 562,26; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 563,26.

Пример 131: N-(4-метил-3-(4-(4-(2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)ацетиламино)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 131

Соединение 131 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 563,21; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 564,21.

Пример 132: N-(4-метил-3-(4-(4-(2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)ацетиламино)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 132

Соединение 132 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 577,23; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 578,23.

Пример 133: N-(3-(1-(2-метил-5-(3-(3-(трифторметил)фенил)уреидо)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)ацетамид 133

Соединение 133 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1, 125 и 15. Точная масса (расчетная): 578,22; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 579,22.

Пример 134: N-(3-(1-(5-(3-(5-(трет-бутил)изоксазол-3-ил)уреидо)-2-метилфенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)ацетамид 134

Соединение 134 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1, 125 и 15. Точная масса (расчетная): 557,27; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 558,27.

Пример 135: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(4-(2-(тетрагидрофуран-3-ил)ацетил амино)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид135

Соединение 135 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 548,25; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 549,25.

Пример 136: N-(4-метил-3-(4-(4-(2-(тетрагидрофуран-3-ил)ацетиламино)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 136

Соединение 136 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 549,19; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 550,19.

Пример 137: N-(4-метил-3-(4-(4-(2-(тетрагидрофуран-3-ил)ацетиламино)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-2-(3-(трифторметил)фенил)ацетамид 137

Соединение 137 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 563,21; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 564,21.

Пример 138: N-(3-(1-(2-метил-5-(3-(3-(трифторметил)фенил)уреидо)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)-2-(тетрагидрофуран-3-ил)ацетамид138

Соединение 138 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1, 125 и 15. Точная масса (расчетная): 564,20. МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 565,20.

Пример 139: N-(3-(1-(5-(3-(5-(трет-бутил)изоксазол-3-ил)уреидо)-2-метилфенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)-2-(тетрагидрофуран-3-ил)ацетамид 139

Соединение 139 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1, 125 и 15. Точная масса (расчетная): 543,25; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 544,25.

Пример 140: N-(3-(1-(5-(3-(2-цианопроп-2-ил)бензоиламино)-2-метилфенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)тетрагидрофуран-3-карбоксамид 140

Соединение 140 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 534,23; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 535,23.

Пример 141: N-(3-(1-(2-метил-5-(3-(трифторметил)бензоиламино)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)тетрагидрофуран-3-карбоксамид 141

Соединение 141 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 535,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 536,18.

Пример 142: N-(3-(1-(2-метил-5-(2-(3-(трифторметил)фенил)ацетиламино)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)тетрагидрофуран-3-карбоксамид 142

Соединение 142 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 549,19; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 550,19.

Пример 143: N-(3-(1-(2-метил-5-(3-(3-(трифторметил)фенил)уреидо)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)-3-тетрагидрофуранкарбоксамид 143

Соединение 143 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1, 125 и 15. Точная масса (расчетная): 550,19; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 551,19.

Пример 144: N-(3-(1-(5-(3-(5-(трет-бутил)изоксазол-3-ил)уреидо)-2-метилфенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)тетрагидрофуран-3-карбоксамид 144

Соединение 144 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1, 125 и 15. Точная масса (расчетная): 529,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 530,24.

Пример 145: N-(3-(1-(5-(3-(2-цианопроп-2-ил)бензоиламино)-2-метилфенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)-3-метилоксетан-3-карбоксамид 145

Соединение 145 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 534,23; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 535,23.

Пример 146: 3-метил-N-(3-(1-(2-метил-5-(3-(трифторметил)бензоиламино)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил) оксетан-3-карбоксамид 146

Соединение 146 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 535,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 536,18.

Пример 147: 3-метил-N-(3-(1-(2-метил-5-(2-(3-(трифторметил)фенил)ацетиламино)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)оксетан-3-карбоксамид 147

Соединение 147 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 549,19; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 550,19.

Пример 148: 3-метил-N-(3-(1-(2-метил-5-(3-(3-(трифторметил)фенил)уреидо)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)оксетан-3-карбоксамид 148

Соединение 148 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1, 125 и 15. Точная масса (расчетная): 550,19; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 551,19.

Пример 149: N-(3-(1-(5-(3-(5-(трет_-6утил)изоксазол-3-ил)уреидо)-2-метилфенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)-3-метилоксетан-3-карбоксамид 149

Соединение 149 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1, 125 и 15. Точная масса (расчетная): 529,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 530,24.

Пример 150: N-(3-(1-(5-(3-(2-цианопроп-2-ил)бензоиламино)-2-метилфенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)-3-оксадицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксамид 150

Соединение 150 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 546,23; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 547,23.

Пример 151: N-(3-(1-(2-метил-5-(3-(трифторметил)бензоиламино)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)-3-оксадицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксамид 151

Соединение 151 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 547,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 548,18.

Пример 152: N-(3-(1-(2-метил-5-(2-(3-(трифторметил)фенил)ацетиламино)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)-3-оксадицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксамид 152

Соединение 152 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 561,19; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 562,19.

Пример 153: N-(3-(1-(2-метил-5-(3-(3-(трифторметил)фенил)уреидо)фенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)-3-оксадицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксамид 153

Соединение 153 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1, 125 и 15. Точная масса (расчетная): 562,19; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 563,19.

Пример 154: N-(3-(1-(5-(3-(5-(трет_-6утил)изоксазол-3-ил)уреидо)2-метилфенил)-1Н-пиразол-4-ил)пирид-4-ил)-3-оксадицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксамид 154

Соединение 154 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1, 125 и 15. Точная масса (расчетная): 541,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 542,24.

Пример 155: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(3-(4-(4-(2-гидроксиэтокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)бензамид 155

Соединение 155 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 125. Точная масса (расчетная): 481,21; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 482,21.

Пример 156: N-(3-(4-(4-(2-гидроксиэтокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(трифторметил)бензамид 156

Соединение 156 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 482,15; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 483,15.

Пример 157: 1-(5-(трет-бутил)изоксазол-3-ил)-3-(3-(4-(4-(2-гидроксиэтокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)мочевина 157

Соединение 157 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 1 и 41. Точная масса (расчетная): 476,21; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 477,21.

Пример 158: 1-(3-(4-(4-(2-гидроксиэтокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(3-(трифторметил)фенил)мочевина 158

Соединение 158 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 497,16; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 498,16.

Пример 159: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(3-(4-(4-(2-метоксиэтокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)бензамид 159

Соединение 159 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 495,22; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 496,22.

Пример 160: N-(3-(4-(4-(2-метоксиэтокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(трифторметил)бензамид 160

Соединение 160 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 496,17; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 497,17.

Пример 161: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(3-(4-(4-(3-гидорксипропокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)бензамид 161

Соединение 161 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 495,22; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 496,22.

Пример 162: N-(3-(4-(4-(3-гидроксипропокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(трифторметил)бензамид 162

Соединение 162 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 496,17; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 497,17.

Пример 163: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(4-метил-3-(4-(5-(пиперизан-1-ил)пирид-3-ил)1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид 163

Соединение 163 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 505,25; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 506,25.

Пример 164: N-(4-метил-3-(4-(5-(пиперизан-1-ил)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)-3-(трифторметил)бензамид 164

Соединение 164 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 506,20; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 507,20.

Пример 165: 3-(2-цианопроп-2-ил)-N-(3-(4-(4-(4-гидроксибутокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)бензамид 165

Соединение 165 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 509,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 510,24.

Пример 166: N-(3-(4-(4-(4-гидроксибутокси)пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(трифторметил)бензамид 166

Соединение 166 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 41. Точная масса (расчетная): 510,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 511,18.

Пример 167: N-(3-(4-(1Н-пирроло[2,3-b]пирид-5-ил)-1H-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(4-метил-1H-имидазол-1-ил)-5-(трифторметил)бензамид 167

Стадия 1. Синтез 4-бром-1-(2-метил-5-нитрофенил)-1Н-пиразола i:

4-бромпиразол (5 г, 1 экв.), 2-фтор-1-метил-4-нитробензол (5,5 г, 1,05 экв.), карбонат калия (13,1, 3 экв.) смешивали в ДМФА (50 мл) и перемешивали в течение ночи при 100°С в атмосфере азота, и затем охлаждали и концентрировали. К концентрату добавляли этилацетат (200 мл). Полученную смесь последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали, и затем разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением желтого продукта i (5,2 г).

Стадия 2. Синтез 1-(2-метил-5-нитрофенил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола j:

Соединение i (5 г, 1 экв.), бис(пинаколато)диборон (5,8 г, 1,3 экв.), ацетат калия (3,5 г, 2 экв.) и [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен] дихлорид палладия (0,72 г, 0,05 экв.) смешивали в 1,4-диоксане (50 мл). Смесь перемешивали в течение ночи при 100°С в атмосфере азота и затем концентрировали. Концентрат отделяли с применением колоночной хроматографии с получением желтого продукта j (4,0 г).

Стадия 3. 5-(1-(2-метил-5-нитрофенил)-1Н-пиразол-4-ил)1Н-пирроло[2,3-b]пиридин k:

Соединение j (4,0 г, 1,1 экв.), 5-бром-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин (2,2 г, 1 экв.), карбонат калия (3,0 г, 2 экв.) и тетракис(трифенилфосфин)палладий (0,6 г, 0,05 экв.) смешивали в 1,4-диоксане (40 мл) и воде (4 мл). Смесь перемешивали в течение ночи при 90°С в атмосфере азота и затем концентрировали. Концентрат отделяли с применением колоночной хроматографии с получением желтого продукта к (2,8 г).

Стадия 4. Синтез 3-(4-(1Н-пирроло[2,3-b]пирид-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метиланилина l:

Соединение к (2,8 г, 1 экв.) и палладий на угле (0,5 г) смешивали в метаноле (30 мл). Смесь перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре в атмосфере водорода. Затем добавляли дихлорметан (100 мл) для разбавления смеси. Полученную смесь фильтровали, и концентрировали с получением бледно-зеленого продукта 1 (2,1 г).

Стадия 5. Синтез N-(3-(4-(1Н-пирроло[2,3-b] пирид-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(4-метил-1Н-имидазол-1-ил)-5-(трифторметил)бензамида 167:

Соединение 1 (0,05 г, 1 экв.), 3-(4-метил-1Н-имидазол-1-ил)-5-(трифторметил) бензойную кислоту (0,46 г, 1 экв.), HATU (0,072, 1,1 экв.) и диизопропилэтилендиамин (0,22 г, 1 экв.) смешивали в ДМФА (2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем добавляли этилацетат (50 мл) для разбавления смеси. Смесь последовательно промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали и разделяли с помощью ВЭЖХ с получением Соединения 167 (0,07 г). Точная масса (расчетная): 541,18; MC(H3P)m/z(M+1)+: 542,19.

Пример 168: N-(3-(4-(1Н-пирроло[2,3-b]пирид-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-4-((4-метилпиперазин-1-ил)метил)-3-(трифторметил)бензамид 168

Соединение 168 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 167. Точная масса (расчетная): 573,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 574,25.

Пример 169: N-(3-(4-(1Н-пирроло [2,3-b]пирид-5-ил)-1H-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-4- метил-3-(трифтор метил)бензамид 169

Соединение 169 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 167. Точная масса (расчетная): 475,16; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 476,16.

Пример 170: N-(3-(4-(1H-пирроло [2,3-b]пирид-5-ил)-1H-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3- (трифторметил)бензамид 170

Соединение 170 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 167. Точная масса (расчетная): 461,14; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 462,14.

Пример 171: N-(3-(4-(1Н-пирроло[2,3-b]пирид-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(2-цианопроп-2-ил)бензамид 171

Соединение 171 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 167. Точная масса (расчетная): 460,20; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 461,20.

Пример 172: N-(3-(4-(1H-пирроло [2,3-b]пирид-5-ил)-1H-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-5-(трет-бутил)изоксазол-3-карбоксамид 172

Соединение 172 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 167. Точная масса (расчетная): 440,19; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 441,19.

Пример 173: 1-(3-(4-(1Н-пирроло [2,3-b]пирид-5-ил)-1H-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(5-(трет-бутил)изоксазол-3-ил)мочевина 173

Соединение 173 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примерах 15 и 167. Точная масса (расчетная): 455,20; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 456,20.

Пример 174: N-(3-(4-(1Н-пирроло[2,3-b]пирид-5-ил)-1Н-имидазол-1-ил)-4-метилфенил)-4-((4-метилпиперазин-1-ил)метил)-3-(трифторметил)бензамид 174

Соединение 174 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 167. Точная масса (расчетная): 573,24; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 574,24.

Пример 175: N-(3-(4-(1Н-пирроло[2,3-b]пирид-5-ил)-1Н-имидазол-1-ил)-4-метилфенил)-4-метил-3-(трифторметил)бензамид 175

Соединение 175 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 167. Точная масса (расчетная): 475,16; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 476,16.

Пример 176: N-(3-(4-(1Н-пирроло[2,3-b]пирид-5-ил)-1Н-имидазол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(2-цианопроп-2-ил)бензамид 176

Соединение 176 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 167. Точная масса (расчетная): 460,20; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 461,20.

Пример 177: N-(3-(4-(1Н-пирроло[2,3-b]пирид-5-ил)-1Н-имидазол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(трифторметил)бензамид 177

Соединение 177 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 167. Точная масса (расчетная): 461,14; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 462,14.

Пример 178: N-(3-(4-(1Н-пирроло[2,3-b]пирид-5-ил)-1Н-имидазол-1-ил)-4-метилфенил)-5-(трет-бутил)изоксазол-3-карбоксамид 178

Соединение 178 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 167. Точная масса (расчетная): 440,19; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 441,19.

Пример 179: N-(3-(4-(1Н-пирроло [2,3-b]пирид-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(1-цианоэтил)бензамид 179

Соединение 179 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 167. Точная масса (расчетная): 466,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 467,18.

Пример 180: N-(3-(4-(1Н-пирроло [2,3-b]пирид-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(4-трифторметилфенил)бензамид 180

Соединение 180 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 167. Точная масса (расчетная): 537,17; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 538,17.

Пример 181: N-(3-(4-(1Н-пирроло[2,3-b]пирид-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-аминосульфонилбензамид 181

Соединение 181 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 167. Точная масса (расчетная): 472,13; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 473,13.

Пример 182: N-(3-(4-(1Н-пирроло[2,3-b]пирид-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)хинолин-7-карбоксамид 182

Соединение 182 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 167. Точная масса (расчетная): 444,16; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 445,16.

Пример 183: N-(3-(4-(1Н-пирроло[2,3-b]пирид-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(тиен-3-ил)бензамид 183

Соединение 183 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 167. Точная масса (расчетная): 475,14; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 476,14.

Пример 184: N-(3-(4-(1Н-пирроло [2,3-b]пирид-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-3-(пирид-2-ил)бензамид 184

Соединение 184 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 167. Точная масса (расчетная): 470,18; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 471,18.

Пример 185: N-(3-(4-(1Н-пирроло[2,3-b]пирид-5-ил)-1Н-пиразол-1-ил)-4-метилфенил)-[1,1'-дифенил]-3-карбоксамид 185

Соединение 185 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 167. Точная масса (расчетная): 469,19; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 470,19.

Сравнительный пример 1: 3-трифторметил-N-(4-метил-3-(4-(пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид

Сравнительное соединение 1 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 422,14; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 423,14.

Сравнительный пример 2: 3-хлор-N-(4-метил-3-(4-(пирид-3-ил)-1Н-пиразол-1-ил)фенил)бензамид

Сравнительное соединение 2 синтезировали с применением стадий, аналогичных описанным в примере 1. Точная масса (расчетная): 388,11; МС(ИЭР) m/z(M+1)+: 389,12.

Пример 186: Влияние на пролиферацию раковых клеток

Соединения согласно настоящему изобретению тестировали на их влияние на рост раковых клеток (таблица 2), чтобы дополнительно оценить соединения согласно настоящему изобретению на их ингибирующее воздействие на пролиферацию раковых клеток и их селективность в ингибировании пролиферации раковых клеток.

В настоящем примере использовали первичную В-клетку мыши BaF3 (приобретенную у АТСС), клетку мыши BaF3-FL-BRAF-V600E (стабильно экспрессирующую полноразмерную мутантную киназу BRAF-V600E), клетку меланомы А375 (экспрессирующую мутантную киназу BRAF-V600E, приобретенную у Cobioer Biosciences Co., Ltd., Нанкин, Китай), клетку колоректального рака COLO205 (экспрессирующую мутантную киназу BRAF-V600E, приобретенную в АТСС, США), клетку острого лейкоза человека OC_1-AML-3 (экспрессирующую мутантную киназу NRAS-Q61L, приобретенную у Cobioer Biosciences Co., Ltd., Нанкин, Китай) и клетку острого лейкоза человека NB4 (экспрессирующую мутантную киназу KRAS-A18D, приобретенную в АТСС, США). Вышеупомянутую линию мутантных клеток BaF3-FL-BRAF-V600E получали следующим способом. Последовательность полноразмерной области мутантной киназы BRAF-V600E человека амплифицировали с помощью ПЦР, включали в вектор MSCV-Puro (приобретенный у Clontech) и стабильно трансфицировали в клетки BaF3 мыши с помощью ретровирусного способа, а фактор роста IL-3 удаляли. В конечном итоге была получена клеточная линия, зависимая от полноразмерного белка BRAF-V600E, имеющего различные перенесенные мутации.

В указанном примере к вышеуказанным клеткам соответственно добавляли растворы тестируемого соединения в ДМСО в различных концентрациях (0,000508 мкМ, 0,00152 мкМ, 0,00457 мкМ, 0,0137 мкМ, 0,0411 мкМ, 0,123 мкМ, 0,370 мкМ, 1,11 мкМ, 3,33 мкМ, 10 мкМ). Клетки инкубировали в течение 72 часов. Количество жизнеспособных клеток определяли с помощью набора для определения жизнеспособности клеток Cell Titer-Glo (Promega, США) путем количественного определения АТФ в жизнеспособных клетках. Определяли значения Gbo (единицы) соединений согласно настоящему изобретению относительно каждой из тестируемых клеток. Результаты экспериментов показаны в таблице 2.

Экспериментальным путем было показано, что соединения согласно настоящему изобретению могут обладать сравнимой или даже более высокой ингибирующей активностью в отношении клеточных линий BaF3-FL-BRAF-V600E, А375 и COLO205, экспрессирующих BRAF-V600E, по сравнению со сравнительным соединением 1 или обладают даже более высокой ингибирующей активностью по сравнению с сравнительным соединением 2. В клетках OC_1-AML-3 и NB4, экспрессирующих мутацию NRAS или мутацию KRAS, соединения согласно настоящему изобретению также демонстрировали сравнимую или лучшую ингибирующую активность по сравнению с сравнительным соединением 1 и сравнительным соединением 2.

Пример 187: Анализ протеазной активности

Активность Соединения 16 и контрольного соединения PLX4032 (MedChem ExpR₆ss, Китай) в отношении целевых сайтов BRAF, BRAF V599E и RAF1 (cRAF) Y340 тестировали с помощью Invitrogen (Carlsbad, США).

Данные свидетельствуют о том, что Соединение 16 согласно настоящему изобретению обладало сильным ингибирующим действием в отношении каждого из белка BRAF, белка BRAF-V600E и белка Y340D RAF1 (CRAF) in vitro, превзошедшим контрольное соединение PLX4032.

Пример 188: Исследование фармакокинетических параметров у крыс

В примере использовались крысы SD (180-220 г, самцы) (приобретены в Центре экспериментальных животных Медицинского университета Аньхой, Китай). Животных содержали в клетках, проветриваемых независимо, по 6 крыс на клетку. Кормление проводили при температуре 20~26°С и влажности 35-75%. Освещенность составляла 12 часов освещения / 12 часов темноты. Подстилку из кукурузного початка обновляли раз в неделю. Крысы получали пищу и питьевую воду ad libitum. Крысы были помечены цифрой на хвостах. В ходе эксперимента, разведение и использование животных строго следуют регламенту Ассоциации по оценке и аккредитации лаборатории Animal Care International.

Растворы Соединения 16 и Сравнительного соединения 1 получали следующим образом. 10 мг тестируемого соединения точно взвешивали в стерильном флаконе и растворяли в небольшом количестве ДМСО, а затем доводили до постоянного объема 5 мл 5%-ным раствором глюкозы с получением испытуемого раствора через зонд в концентрации 2 мг/мл. Точно отбирали 0,5 мл вышеуказанного испытуемого раствора через зонд в концентрации 2 мг/мл и доводили до постоянного объема 5 мл 4,5 мл 5% раствора глюкозы для внутривенного введения испытуемого раствора в концентрации 0,2 мг/мл. Раствор готовили непосредственно перед использованием в эксперименте.

6 крыс SD были случайным образом разделены на две группы, и синтезированные соединения вводили путем инъекции через желудочный зонд и хвостовую вену, соответственно. Примерно 0,3 мл образцов крови собирали из ретроорбитального венозного сплетения через 0 ч перед введением и через 5 мин, 15 мин, 30 мин, 1 ч, 1,5 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 9 ч, 12 ч, 24 ч после введения для группы зонда; и через 0 ч перед введением и через 2 мин, 5 мин, 15 мин, 30 мин, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 9 ч и 12 ч после введения для группы хвостовой вены. Каждый из собранных образцов крови помещали в 1,5 мл центрифужную пробирку с гепарином (Sigma, США). Образец центрифугировали при 6000 об/мин в течение 3 мин для отделения плазмы. 100 мкл плазмы в верхнем слое помещали в новую центрифужную пробирку емкостью 1,5 мл и хранили при температуре -80°С для определения.

10 мг стандарта тестируемого соединения точно взвешивали в мерной колбе емкостью 10 мл и растворяли путем добавления метанола для получения постоянного объема и равномерно перемешивали с получением 1 мг/мл исходного раствора. Затем исходный раствор постепенно разбавляли метанолом с получением серии рабочих растворов в концентрациях 0,01, 0,02, 0,05, 0,1, 0,2, 0,5, 1, 2, 5, 10, 20 мкг/мл. Рабочие растворы помещали в холодильник при 4°С для последующего использования.

Использовали 11 центрифужных пробирок. 10 мкл вышеуказанных рабочих растворов соответственно добавляли в каждую из центрифужных пробирок, и затем 90 мкл холостой плазмы крыс соответственно добавляли в каждую из центрифужных пробирок. Смеси перемешивали равномерно, так что концентрация соединения в плазме крыс составляла 1, 2, 5, 10, 20, 50, 100, 200, 500, 1000, 2000 нг/мл. Затем в него добавляли 20 мкл раствора кофеина в качестве внутреннего стандарта (200 нг/мл) (National Institutes for Food and Drug Control, China), и полученные смеси перемешивали на вортексе в течение 10 с. Затем добавляли 400 мкл метанола. Полученные смеси перемешивали на вортексе в течение 10 мин и центрифугировали при 16000 об/мин в течение 5 мин. После этого 70 мкл надосадочной жидкости помещали во вставляемую трубку пробоотборной бутылки. 5 мкл образца вводили для анализа ЖХ-МС/МС. Стандартная кривая соединения в плазме крыс была получена с помощью линейной регрессии, проведенной путем принятия отношения площади пика образца к площади пика внутреннего стандарта As/Ais в качестве вертикальной ординаты, принимая концентрацию С (мкг/мл) в качестве горизонтальной ординаты и принимая 1/С² в качестве весового коэффициента.

К 100 мкл исследуемой плазмы крыс, хранившейся при -80°С, добавляли 20 мкл раствора кофеина (200 нг/мл) в качестве внутреннего стандарта. Полученную смесь перемешивали на вортексе в течение 10 с. Затем добавляли 400 мкл метанола. Полученную смесь перемешивали на вортексе в течение 10 мин, и центрифугировали при 16000 об/мин в течение 5 мин. Затем 70 мкл надосадочной жидкости помещали во вставную трубку пробоотборной бутылки. Для анализа ЖХ-МС/МС вводили 5 мкл образца.

Анализ ЖХ-МС/МС проводили следующим образом. Экспериментальный прибор представлял собой детектор API 4000 Triple Quad (АВ SCIEX, США); рабочее программное обеспечение представляло собой Analyst 1.5.1 (Applied Biosystems Co., Ltd., США); использовались жидкостный насос Shimadzu LC-30AD, блок дегазации Shimadzu DGU-20A, печь с колонкой Shimadzu СТО-30А и автоматический пробоотборник SIL-30АС (Shimadzu Corporation, Япония). Условия хроматографирования были следующими. Хроматографическая колонка представляла собой Hanbon Hedera ODS-2 (Jiangsu Hanbon Science & Technology Co., Ltd., Китай), размер (мм): 150×2,1, Pro. №: H18100205.15; Серийный №: C981210513; температура колонки составляла 40°С; подвижная фаза А представляла собой водную фазу (содержащую 0,1% муравьиной кислоты), а подвижная фаза В представляла собой метанол для градиентного элюирования: 0-0,5 мин, В 10%; 0,5-1,0 мин, В 90%; 1,0-5,0 мин, В 90%; 5,0-5,5 мин, В 10%; 5,5-7 мин, В 10%. Скорость потока составляла 0,3 мл/мин. Объем вводимой пробы составлял 5 мкл. Условия масс-спектрометрии были следующими. Источником ионов был источник Turbo Spray; CAD составлял 10; газ завесы (CUR) составлял 25; температура нагрева составляла 500°С; газ источника ионов GS1 составлял 45; газ источника ионов GS2 составлял 45; напряжение распыления составляло 5500 В; и температура источника составляла 500°С.

Результаты показаны в таблице 4-7 ниже. Результаты показали, что самая высокая концентрация Cmax Соединения 16 в крови была выше, чем у сравнительного Соединения 1, будь то введение путем внутривенной инъекции или введение через желудочный зонд. При введении через желудочный зонд максимальная абсорбция Соединения 16 in vivo у крыс составляла 1482 нг/мл, кумулятивная концентрация лекарственного средства в AUC_0-t in vivo составляла 10930 ч*нг/мл, и пероральная биодоступность F% составляла 144,1%. С другой стороны, максимальная абсорбция лекарственного средства сравнительного соединения 1 in vivo у крыс составляла 575,7 нг/мл, кумулятивная концентрация лекарственного средства в AUC_0-t in vivo составляла 1012 ч*нг/мл, и пероральная биодоступность F% составляла 110,7%. Таким образом, путем введения замещающей группы в пиридильную группу соединение согласно настоящему изобретению может иметь значительно улучшенную абсорбцию у крыс и значительно улучшенную пероральную биодоступность.

Пример 189: Эксперимент по оценке эффективности препарата на животных

В настоящем примере приведены результаты экспериментов для соединения 16, сравнительного соединения 1 и контрольных соединений LY30019120 (приобретенного в MedChemExpress, Китай), PLX4032 (приобретенного в MedChemExpress, Китай), RAF709 (приобретенного в MedChemExpress, Китай), RAF265 (приобретенного в MedChemExpress, Китай) и PLX8394 (приобретенных у MedChemExpress, Китай) на мышиных моделях дегенеративного рака легких Calu-6 (экспрессирующих мутантную киназу KRAS Q61K, приобретенных в Cobioer Biosciences Co., Ltd., Наньцзин, Китай), клетках меланомы А375 (экспрессирующих мутантную киназу BRAF-V600E, приобретенных в Cobioer Biosciences Co., Ltd., Наньцзин, Китай), клетках рака поджелудочной железы ВхРС3 (экспрессирующих дикий тип KRAS, BRAF V487-P492> А-делетированную мутантную киназу, приобретенных в Cobios Biosciences Co., Ltd., Нанцзянь, Китай), клетках колоректального рака НСТ116 (экспрессирующих мутантную киназу KRAS G13D, приобретенных в АТСС, США), клетках колоректального рака COLO205 (экспрессирующих мутантную киназу BRAF-V600E, приобретенную в АТСС, США).

Этапы экспериментов были следующими:

(1) Самок мышей SCID в возрасте 4-6 недель (A375/COLO205) и голых мышей (HCT116/Calu-6/BxPC3), приобретенных у Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd., выращивали на уровне SPF в лаборатории. Питьевую воду и подстилку стерилизовали в автоклаве. Все операции на мышах проводили в асептических условиях.

(2) В день 0 около 5×10⁶ клеток немелкоклеточного рака легкого Calu-6, колоректального рака НСТ116, колоректального рака COLO205, меланомы А375 и рака поджелудочной железы ВхРС3 вводили подкожно в левую часть спины мыши.

(3) Начиная с 14-го дня соответствующим мышам перорально вводили растворитель касторового масла : этанол : вода (1:1:6) каждый день (5 мышей); Соединение 16 в дозе 50 мг/кг, 100 мг/кг и PLX4032 в дозе 100 г/кг для трансплантированной опухоли А375; Соединение 16 в дозе 50 мг/кг, 100 мг/кг и 200 мг/кг, RAF709 в дозе 100 г/кг, LY30019120 в дозе 60 мг/кг и Сравнительное соединение 1 в дозе 100 мг/кг для трансплантированной опухоли Calu-6; Соединение 16 в дозе 50 мг/кг, 100 мг/кг, RAF709 в дозе 100 мг/кг и LY30019120 в дозе 60 мг/кг для трансплантированной опухоли НСТ116; Соединение 16 в дозе 25 мг/кг, 50 мг/кг, 100 мг/кг, PLX4032 в дозе 100 мг/кг для трансплантированной опухоли COLO205; Соединение 16 в дозе 50 мг/кг, 200 мг/кг, LY3009120 в дозе 100 мг/кг, RAF265 в дозе 100 мг/кг и 100 мг/кг в дозе 100 мг/кг для трансплантированной опухоли ВхРС3. Начиная со дня 15, соответствующим мышам вводили перорально с растворителем касторового масла : этанол : вода (1:1:6) каждый день.

(4) Начиная с 15-го дня каждый день измеряли длину/ширину подкожных опухолей с помощью штангенциркуля, и каждый день регистрировали массу мыши, чтобы определить эффект Соединения 16 на массу мыши.

(5) Для каждой из модельных групп мышей умерщвляли на 36-й день, 42-й день, 26-й день, 35-й день или 42-й день.

(6) Тенденцию роста субэндотелиальных опухолей анализировали статистически. Объем опухоли рассчитывали следующим образом: длина × ширина × ширина / 2 мм³.

Экспериментально продемонстрировано, что Соединение 16 согласно настоящему изобретению обладало ингибирующим действием, превосходящим контрольные соединения в мышиных трансплантированных опухолевых моделях различных раковых клеток, экспрессирующих мутации KRAS, BRAF или NRAS. По сравнению с сравнительным соединением 1, в модели опухоли, трансплантированной клеткой calu6, сравнительное соединение 1 имело очень сильную токсичность, поскольку все мыши умирали на 8 день, в то время как соединение 16 не проявляло никакой токсичности. Также было доказано, что соединение согласно настоящему изобретению, введенное в качестве морфолинильного заместителя, будет оказывать неожиданное фармацевтическое воздействие in vivo на мышей, не вызывая значительной токсичности.

Промышленная применимость

В настоящем изобретении предложен новый ингибитор киназы Pan-RAF, содержащий соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, сольват, сложный эфир, кислоту, метаболит или пролекарство. Настоящее изобретение также относится к применению соединения формулы (I) для лечения или предотвращения расстройства, связанного с активностью RAF и/или киназы RAS. Таким образом, указанный ингибитор может быть получен в виде соответствующего лекарственного средства и имеет промышленную применимость.

Несмотря на то, что изобретение было подробно описано в настоящем документе, изобретение не ограничивается описанием, и специалисты в данной области техники могут вносить модификации на основе принципов изобретения, и, таким образом, следует понимать, что все модификации в соответствии с принципами изобретения находятся в рамках объема охраны изобретения.

Изобретение относится к ингибитору киназы pan-RAF, представляющему собой соединение формулы (Ia) или его фармацевтически приемлемую соль, а также к фармацевтической композиции на его основе. Технический результат: обеспечение нового селективного ингибитора киназы pan-RAF, который можно применять для лечения заболеваний, опосредованных киназами RAF и/или RAS. В общей формуле (Ia) R₁ выбран из группы, состоящей из H, пиридила, морфолинила, пиперазинила, 4-метил-пиперазин-1-илфенила, оксетан-3-илокси, 2-морфолиноэтокси, 3-морфолинопропокси и тетрагидрофуран-3-илметокси; R₂ выбран из группы, состоящей из H, C_1-6 гидроксиалкокси, C_1-6 алкокси-C_1-6 алкокси, тетрагидропиран-4-илокси, тетрагидрофуран-3-илокси, оксетан-3-илокси, тетрагидрофуран-3-илметокси, тетрагидропиран-4-илметокси и оксетан-3-илметокси; R₃ представляет собой H; где R₁, R₂ и R₃ не представляют собой H одновременно; R₄ выбран из группы, состоящей из C_1-6 галогеналкила и C_1-6 цианоалкила; R₅ выбран из группы, состоящей из H, C_1-6 алкила и 4-метил-пиперазин-1-илметила. 2 н. и 6 з.п. ф-лы, 5 ил., 7 табл., 189 пр.

(Ia)

1. Ингибитор киназы pan-RAF, представляющий собой соединение формулы (Ia) или его фармацевтически приемлемую соль:

Формула (Ia),

где

R₁ выбран из группы, состоящей из H, пиридила, морфолинила, пиперазинила, 4-метил-пиперазин-1-илфенила, оксетан-3-илокси, 2-морфолиноэтокси, 3-морфолинопропокси и тетрагидрофуран-3-илметокси;

R₂ выбран из группы, состоящей из H, C_1-6 гидроксиалкокси, C_1-6 алкокси-C_1-6 алкокси, тетрагидропиран-4-илокси, тетрагидрофуран-3-илокси, оксетан-3-илокси, тетрагидрофуран-3-илметокси, тетрагидропиран-4-илметокси и оксетан-3-илметокси;

R₃ представляет собой H;

где R₁, R₂ и R₃ не представляют собой H одновременно;

R₄ выбран из группы, состоящей из C_1-6 галогеналкила и C_1-6 цианоалкила;

R₅ выбран из группы, состоящей из H, C_1-6 алкила и 4-метил-пиперазин-1-илметила.

2. Ингибитор киназы pan-RAF по п. 1, отличающийся тем, что

R₁ выбран из группы, состоящей из H, 3-пиридила, 4-пиридила, N-морфолинила, пиперазин-1-ила, 4-метил-пиперазин-1-илфенила, оксетан-3-илокси, 3-морфолинопропокси и тетрагидрофуран-3-илметокси;

R₂ выбран из группы, состоящей из H, 2-гидроксиэтокси, 3-гидроксипропокси, 4-гидроксибутокси, 2-метоксиэтокси, тетрагидропиран-4-илокси, тетрагидрофуран-3-илокси, оксетан-3-илокси, тетрагидропиран-4-илметокси и оксетан-3-илметокси;

где R₁, R₂ и R₃ не представляют собой H одновременно;

R₄ выбран из группы, состоящей из трифторметила, 2-цианоэтан-2-ила и 2-цианопроп-2-ила;

R₅ выбран из группы, состоящей из H, метила и 4-метил-пиперазин-1-илметила.

3. Ингибитор киназы pan-RAF по п. 1, отличающийся тем, что R₁ выбран из группы, состоящей из N-морфолинила и пиперазин-1-ила; R₄ выбран из группы, состоящей из C_1-6 галогеналкила и C_1-6 цианоалкила; каждый из R₂, R₃ и R₅ представляет собой H.

4. Ингибитор киназы pan-RAF по п. 1, отличающийся тем, что R₂ выбран из группы, состоящей из C_1-6 гидроксиалкокси и C_1-6 алкокси-C_1-6 алкокси; R₄ выбран из группы, состоящей из C_1-6 галогеналкила и C_1-6 цианоалкила; каждый из R₁, R₃ и R₅ представляет собой H.

5. Ингибитор киназы pan-RAF по п. 1, выбранный из группы, состоящей из следующих соединений или их фармацевтически приемлемых солей:

№ Структура № Структура 1 2 3 5 6 7 8 9 10 11 12 13 16 30 31 41 42 47 48 50 51 52 53 54 56 57 65 66 68 69 72 73 74 79 80 82 84 85 87 88 89 93 94 95 105 106 107 108 110 112 113 114 115 155 156 159 160 161 162 163 164 165 166

6. Фармацевтическая композиция для ингибирования активности тирозинкиназы RAF и/или RAS, содержащая эффективное количество ингибитора киназы pan-RAF по любому из пп. 1-5 и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество.

7. Ингибитор киназы pan-RAF по любому из пп. 1-5 для применения для ингибирования активности тирозинкиназы RAF и/или RAS.

8. Ингибитор киназы pan-RAF по любому из пп. 1-5 для применения для лечения, предотвращения или облегчения заболевания, расстройства или состояния, которое модулируется активностью тирозинкиназы RAF и/или RAS, или зависит от указанной активности, или вовлечено в нее, где указанное заболевание, расстройство или состояние представляет собой пролиферативное заболевание, выбранное из группы, состоящей из рака легких, меланомы, рака поджелудочной железы и колоректального рака.