ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к органическим соединениям, полезным для терапии и/или профилактики млекопитающего, и, в частности, к ингибиторам RIP1 киназы, полезным для лечения заболеваний и расстройств, ассоциированных с воспалением, гибелью клеток и другими причинами.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Киназа рецептор-взаимодействующего белка-1 ("RIP1") является серин/треониновой протеинкиназой. RIP1 представляет собой регулятор клеточного сигнального пути, который вовлечен, среди прочего, в опосредование путей программируемой клеточной смерти, например, некроптоза. Наиболее исследованная форма некроптотической гибели клеток инициируется посредством TNFα (фактора некроза опухоли), тем не менее некроптоз также может быть индуцирован другими членами семейства "лигандов смерти" TNFα (Fas и TRAIL/Apo2L (TNF-зависимый лиганд, индуцирующий апоптоз/лиганд аполипопротеина 2)), интерферонами, передачей сигнала посредством Toll-подобных рецепторов (TLR) и вирусной инфекцией через сенсор ДНК DAI (ДНК-зависимый активатор интерферон-регулирующих факторов) [1-3]. Связывание TNFα с рецептором 1 TNF (TNFR1) вызывает тримеризацию TNFR1 и образование внутриклеточного комплекса, комплекса-1. TRADD (белок, взаимодействующий с доменом смерти рецептора TNF) связывается с внутриклеточным доменом смерти TNFR1 и осуществляет рекрутмент протеинкиназы RIP1 (рецептор-взаимодействующего белка 1) через домен смерти, имеющийся в обоих белках [4]. После первоначального рекрутмента в TNFR1-ассоциированный сигнальный комплекс RIP1 перемещается во вторичный цитоплазматический комплекс, комплекс-II [5-7]. Комплекс-II образуется при участии содержащего домен смерти белка FADD (Fas-ассоциированного белка с доменом смерти), RIP1, каспазы-8 и cFLIP (клеточный ингибиторный белок интерлейкин-1-бета-превращающего фермента, подобного Fas-ассоциированному белку с доменом смерти). Если каспаза-8 активирована не полностью или ее активность блокирована, то протеинкиназа RIP3 рекрутируется в данный комплекс с образованием некросомы, что приведет к инициации некроптотической гибели клеток [8-10]. Как только некросома сформирована, RIP1 и RIP3 вовлекаются в ряд событий, связанных с ауто- и кросс-фосфорилированием, которые необходимы для некроптотической гибели клеток. Некроптоз может быть полностью блокирован либо благодаря наличию инактивирующей киназу мутации в любой из этих двух киназ, либо химическим путем с использованием ингибиторов RIP1 киназы (некростатинов) или ингибиторов RIP3 киназы [11-13]. Фосфорилирование RIP3 способствует связыванию и фосфорилированию псевдокиназы MLKL (псевдокиназы смешанного происхождения), ключевого компонента некроптотической гибели клеток [14, 15].
Некроптоз имеет решающее патофизиологическое значение при инфаркте миокарда, инсульте, атеросклерозе, ишемическом/реперфузионном повреждении, воспалительных заболеваниях кишечника, дегенеративных изменениях сетчатки и ряде других общеклинических расстройств [16]. Ввиду этого селективные ингибиторы активности RIP1 киназы желательно применять в качестве возможного средства лечения для заболеваний, опосредуемых этим путем и ассоциированных с воспалением и/или некроптотической гибелью клеток.
Ингибиторы RIP1 киназы были описаны ранее. Первым приведенным в литературных источниках ингибитором активности RIP1 киназы был некростатин 1 (Nec-1) [17]. За этим первым открытием последовала разработка модифицированных версий Nec-1 с различными способностями блокировать активность RIP1 киназы [11, 18]. Недавно были описаны другие ингибиторы RIP1 киназы, структурно отличающиеся от соединений класса некростатина [19, 20, 21].
Выше приведены ссылки, каждая из которых тем самым включена посредством ссылки во всей своей полноте:
1) Vanden Berghe, Т., Linkermann, A., Jouan-Lanhouet, S., Walczak, H. and Vandenabeele, P. (2014) Regulated necrosis: the expanding network of non-apoptotic cell death pathways. Nature reviews. Molecular cell biology. 15, 135-147.
2) Newton, K. (2015) RIPK1 and RIPK3: critical regulators of inflammation and cell death. Trends in cell biology. 25, 347-353.
3) de Almagro, M.C. and Vucic, D. (2015) Necroptosis: Pathway diversity and characteristics. Semin. Cell Dev. Biol., 39, 56-62.
4) Chen, Z.J. (2012) Ubiquitination in signaling to and activation of IKK. Immunological reviews. 246, 95-106.
5) O'Donnell, M.A., Legarda-Addison, D., Skountzos, P., Yeh, W.C. and Ting, A.T. (2007) Ubiquitination of RIP1 regulates an NF-kappaB-independent cell-death switch in TNF signaling. Curr Biol., 17, 418-424.
6) Feoktistova, M., Geserick, P., Kellert, В., Dimitrova, D.P., Langlais, C, Hupe, M., Cain, K., MacFarlane, M., Hacker, G. and Leverkus, M. (2011) clAPs block Ripoptosome formation, a RIP1/caspase-8 containing intracellular cell death complex differentially regulated by cFLIP isoforms. Molecular cell. 43, 449-463.
7) Bertrand, M.J., Milutinovic, S., Dickson, K.M., Ho, W.C., Boudreault, A., Durkin, J., Gillard, J.W., Jaquith, J.В., Morris, S.J. and Barker, P.A. (2008) clAP1 and clAP2 facilitate cancer cell survival by functioning as E3 ligases that promote RIP1 ubiquitination. Mol. Cell. 30, 689-700.
8) Wang, L., Du, F. and Wang, X. (2008) TNF-alpha induces two distinct caspase-8 activation pathways. Cell. 133, 693-703.
9) He, S., Wang, L, Miao, L, Wang, Т., Du, F., Zhao, L. and Wang, X. (2009) Receptor interacting protein kinase-3 determines cellular necrotic response to TNF-alpha. Cell. 137, 1100-1111.
10) Cho, Y.S., Challa, S., Moquin, D., Genga, R., Ray, T.D., Guildford, M. and Chan, F.K. (2009) Phosphorylation-driven assembly of the RIP1-RIP3 complex regulates programmed necrosis and virus-induced inflammation. Cell. 137, 1112-1123.
11) Degterev, A., Hitomi, J., Germscheid, M., Ch'en, I.L, Korkina, O., Teng, X., Abbott, D., Cuny, G.D., Yuan, C, Wagner, G., Hedrick, S.M., Gerber, S.A., Lugovskoy, A. and Yuan, J. (2008) Identification of RIP1 kinase as a specific cellular target of necrostatins. Nat. Chem. Biol., 4, 313-321.
12) Newton, K., Dugger, D.L, Wickliffe, K.E., Kapoor, N., de Almagro, M.C, Vucic, D., Komuves, L, Ferrando, R.E., French, D.M., Webster, J., Roose-Girma, M., Warming, S. and Dixit, V. M. (2014) Activity of protein kinase RIPK3 determines whether cells die by necroptosis or apoptosis. Science. 343, 1357-1360.
13) Kaiser, W.J., Sridharan, H., Huang, C, Mandal, P., Upton, J.W., Gough, P.J., Sehon, C.A., Marquis, R.W., Bertin, J. and Mocarski, E.S. (2013) Toll-like receptor 3-mediated necrosis via TRIF, RIP3, and MLKL. The Journal of biological chemistry. 288, 31268-31279.
14) Zhao, J., Jitkaew, S., Cai, Z., Choksi, S., Li, Q., Luo, J. and Liu, Z.G. (2012) Mixed lineage kinase domain-like is a key receptor interacting protein 3 downstream component of TNF-induced necrosis. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109, 5322-5327.
15) Sun, L., Wang, H., Wang, Z., He, S., Chen, S., Liao, D., Wang, L., Yan, J., Liu, W., Lei, X. and Wang, X. (2012) Mixed Lineage Kinase Domain-like Protein Mediates Necrosis Signaling Downstream of RIP3 Kinase. Cell. 148, 213-227.
16) Linkermann, A. and Green, D.R. (2014) Necroptosis. The New England journal of medicine. 370, 455-465.
17) Degterev, A., Huang, Z., Boyce, M., Li, Y., Jagtap, P., Mizushima, N., Cuny, G.D., Mitchison, T.J., Moskowitz, M.A. and Yuan, J. (2005) Chemical inhibitor of nonapoptotic cell death with therapeutic potential for ischemic brain injury. Nat. Chem. Biol., 1, 112-119.
18) Takahashi, N., Duprez, L, Grootjans, S., Cauwels, A., Nerinckx, W., DuHadaway, J. В., Goossens, V., Roelandt, R., Van Hauwermeiren, F., Libert, C., Declercq, W., Callewaert, N., Prendergast, G.C., Degterev, A., Yuan, J. and Vandenabeele, P. (2012) Necrostatin-1 analogues: critical issues on the specificity, activity and in vivo use in experimental disease models. Cell Death Dis., 3, e437.
19) Harris, P.A., Bandyopadhyay, D., Berger, S.В., Campobasso, N., Capriotti, C.A., Cox, J. A., Dare, L., Finger, J. N., Hoffman, S.J., Kahler, K.M., Lehr, R., Lich, J.D., Nagilla, R., Nolte, R.Т., Ouellette, M.Т., Pao, C.S., Schaeffer, M.C., Smallwood, A., Sun, H.H., Swift, B.A., Totoritis, R.D., Ward, P., Marquis, R.W., Bertin, J. and Gough, P.J. (2013) Discovery of Small Molecule RIP1 Kinase Inhibitors for the Treatment of Pathologies Associated with Necroptosis. ACS medicinal chemistry letters. 4, 1238-1243.
20) Najjar, M., Suebsuwong, C., Ray, S.S., Thapa, R.J., Maki, J.L., Nogusa, S., Shah, S., Saleh, D., Gough, P.J., Bertin, J., Yuan, J., Balachandran, S., Cuny, G.D. and Degterev, A. (2015) Structure Guided Design of Potent and Selective Ponatinib-Based Hybrid Inhibitors for RIPK1. Cell Rep.
21) Публикация международной патентной заявки №WO 2014/125444.
22) Публикация международной патентной заявки №WO 2017/004500.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Согласно данному изобретению предложены соединения формулы I:
или их фармацевтически приемлемые соли, где
R1 выбран из группы, состоящей из С1-С6алкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкила, С1-С6галогеналкокси, групп С1-С6алкил-N(RN)2, фенил, бензил, 4-8-членный гетероциклил и 5-6-членный гетероарил; при этом R1 связан с соседним карбонилом через атом углерода и при этом R1 возможно замещен одним или двумя заместителями, выбранными из группы, состоящей из F, Cl, Br, С1-С6алкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкила, С1-С6галогеналкокси, групп C1-C6алкил-N(RN)2, гидроксил, гидроксиметил, циано, цианометил, цианоэтил, С(O)С1-С6алкил, фенил, бензил, СН2-(С3-С6циклоалкил), 5-6-членный гетероарил и СН2-(5-6-членный гетероарил);
каждый RN независимо выбран из группы, состоящей из Н, С1-С6алкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси и С1-С6галогеналкила; или два RN вместе с соседним атомом N могут образовывать 4-6-членное кольцо;
кольцо А представляет собой 5-членный гетероарил, имеющий только в качестве гетероатомов либо (1) два или три атома азота, либо (2) один атом азота и один атом кислорода, либо (3) один атом азота и один атом серы; при этом кольцо А связано с соседним карбонилом через атом углерода; и
кольцо В представляет собой 4-8-членный циклоалкил или 4-8-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из атомов азота, кислорода и серы; при этом кольцо В замещено в соответствии с (а), (b) или как (а), так и (b):
(a) 1-2 заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, атома дейтерия, гидрокси, С1-С6алкила, С1-С6галогеналкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкокси, С1-С6тиоалкила, групп С1-С6алкил-N(RN)2, и циано; при этом два С1-С6алкильных заместителя вместе могут образовывать мостиковое или спироциклическое кольцо; и при этом, если атом азота в кольце В замещен, то заместитель не является галогеном, циано или С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкокси или С1-С6тиоалкилом, имеющим атом кислорода или серы, непосредственно связанный с атомом азота;
(b) 1 заместителем, выбранным из группы, состоящей из С1-С6алкила, С1-С6галогеналкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкокси, С1-С6тиоалкила, групп С1-С6алкил-N(RN)2, фенил, бензил, СН2-(С3-С6циклоалкил), СН2СН2-(С3-С6циклоалкил), СН2-(4-6-членный гетероциклил), СН2СН2-(4-6-членный гетероциклил), 5-6-членный гетероарил и СН2-(5-6-членный гетероарил); при этом в случае присутствия фенильного кольца или 5-6-членного гетероарильного кольца оно может быть замещено 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, С1-С4алкила, С1-С4галогеналкила, С1-С4алкокси, С1-С4галогеналкокси, циано и циклопропила.
Также согласно данному изобретению предложены фармацевтические композиции, содержащие соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. Конкретные воплощения включают фармацевтические композиции, подходящие для пероральной доставки.
Также согласно данному изобретению предложены пероральные композиции на основе соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли и одного или более чем одного фармацевтически приемлемого носителя или эксципиента, подходящего для пероральной доставки.
Также согласно данному изобретению предложены способы лечения заболеваний и расстройств, ассоциированных с воспалением, гибелью клеток и другими причинами, связанными с киназой RIP1, как дополнительно описано ниже.
Также согласно данному изобретению предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в качестве терапевтически активного вещества.
Также согласно данному изобретению предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для лечения заболевания или расстройства, выбранного из группы, состоящей из болезни Паркинсона, деменции с тельцами Леви, множественной системной атрофии, синдромов "паркинсонизм-плюс", таупатий, болезни Альцгеймера, лобно-височной деменции, амиотрофического бокового склероза, спинальной мышечной атрофии, первичного бокового склероза, болезни Гентингтона, ишемии, инсульта, внутричерепного кровоизлияния, внутримозгового кровоизлияния, мышечной дистрофии, прогрессирующей мышечной атрофии, псевдобульбарного паралича, прогрессирующего бульбарного паралича, спинальной мышечной атрофии, врожденной мышечной атрофии, периферических нейропатий, прогрессирующего супрануклеарного паралича, кортикобазальной дегенерации и демиелинизирующих заболеваний.
Также согласно данному изобретению предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль либо композиция на его(ее) основе по любому из воплощений, предложенных в данной заявке, для лечения заболевания или расстройства, выбранного из группы, состоящей из болезни Паркинсона, деменции с тельцами Леви, множественной системной атрофии, синдромов "паркинсонизм-плюс", таупатий, болезни Альцгеймера, лобно-височной деменции, амиотрофического бокового склероза, спинальной мышечной атрофии, первичного бокового склероза, болезни Гентингтона, ишемии, инсульта, внутричерепного кровоизлияния, внутримозгового кровоизлияния, мышечной дистрофии, прогрессирующей мышечной атрофии, псевдобульбарного паралича, прогрессирующего бульбарного паралича, спинальной мышечной атрофии, врожденной мышечной атрофии, периферических нейропатий, прогрессирующего супрануклеарного паралича, кортикобазальной дегенерации и демиелинизирующих заболеваний.
Также согласно данному изобретению предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль, для приготовления лекарственного средства для лечения заболевания или расстройства, выбранного из группы, состоящей из болезни Паркинсона, деменции с тельцами Леви, множественной системной атрофии, синдромов "паркинсонизм-плюс", таупатий, болезни Альцгеймера, лобно-височной деменции, амиотрофического бокового склероза, спинальной мышечной атрофии, первичного бокового склероза, болезни Гентингтона, ишемии, инсульта, внутричерепного кровоизлияния, внутримозгового кровоизлияния, мышечной дистрофии, прогрессирующей мышечной атрофии, псевдобульбарного паралича, прогрессирующего бульбарного паралича, спинальной мышечной атрофии, врожденной мышечной атрофии, периферических нейропатий, прогрессирующего супрануклеарного паралича, кортикобазальной дегенерации и демиелинизирующих заболеваний.
Также согласно данному изобретению предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для лечения заболевания или расстройства, выбранного из группы, состоящей из воспалительного заболевания кишечника, болезни Крона, язвенного колита, глаукомы, псориаза, псориатического артрита, ревматоидного артрита, спондилоартрита, ювенильного идиопатического артрита и остеоартрита.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
Все химические формулы и общие химические структуры, которые приведены в данном описании, следует интерпретировать с точки зрения обеспечения надлежащей валентности и химически стабильных связей между атомами, как они понимаются специалистом средней квалификации в данной области техники. Там, где это целесообразно, заместители могут быть связаны более чем с одним соседним атомом (например, алкил включает метилен, где присутствуют две связи).
В химических формулах, приведенных в данном описании, термин "галоген" или "атом галогена" относится к атому фтора, хлора и брома (т.е. F, Cl, Br).
Алкил, если конкретно не указано иное, относится к возможно замещенной прямой или разветвленной С1-С12алкильной группе. В некоторых воплощениях алкил относится к С1-С6алкильной группе. Типичные алкильные группы включают метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, втор-бутил, н-пентил, н-гексил, н-гептил и н-октил. Замещенные алкильные группы, приведенные в данном описании, замещены одним или более заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, циано, трифторметила, метокси, этокси, дифторметокси, трифторметокси, С3-С6циклоалкила, фенила, ОН, CO2H, групп CO2(С1-С4алкил), NH2, NH(С1-С4алкил), N(С1-С4алкил)2, NH(С=O)С1-С4алкил, (С=O)NH(С1-С4алкил), (С=O)N(С1-С4алкил)2, S(С1-С4алкил), SO(С1-С4алкил), SO2(С1-С4алкил), SO2NH(С1-С4алкил), SO2N(С1-С4алкил)2 и NHSO2(С1-С4алкил). В некоторых воплощениях замещенная алкильная группа имеет 1 или 2 заместителя. В некоторых воплощениях алкильная группа является незамещенной.
Циклоалкил, если конкретно не указано иное, относится к возможно замещенной С3-С12циклоалкильной группе и включает конденсированные, спироциклические и мостиковые бициклические группы, где заместители выбраны из группы, состоящей из галогена, циано, трифторметила, метокси, этокси, дифторметокси, трифторметокси, С3-С6циклоалкила, фенила, ОН, CO2H, групп CO2(С1-С4алкил), NH2, NH(С1-С4алкил), N(С1-С4алкил)2, NH(С=O)С1-С4алкил, (С=O)NH(С1-С4алкил), (С=O)N(С1-С4алкил)2, S(С1-С4алкил), SO(С1-С4алкил), SO2(С1-С4алкил), SO2NH(С1-С4алкил), SO2N(С1-С4алкил)2 и NHSO2(С1-С4aлкил). В некоторых воплощениях циклоалкил относится к С3-С6циклоалкильной группе. В некоторых воплощениях С3-С6циклоалкильная группа возможно замещена атомами галогена в количестве от 1 до трех. В некоторых воплощениях С3-С6циклоалкильная группа возможно замещена атомами фтора в количестве от 1 до трех. Типичные С3-С6циклоалкильные группы включают циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил. Типичные С3-С12циклоалкильные группы дополнительно включают бицикло[3.1.0]гексил, бицикло[2.1.1]гексил, циклогептил, бицикл[4.1.0]гептил, спиро[4.2]гептил, циклооктил, спиро[4.3]октил, спиро[5.2]октил, бицикло[2.2.1]гептанил, бицикл[2.2.2]октанил, адамантанил, декалинил и спиро[5.4]десанил. Там, где это целесообразно, циклоалкильные группы могут быть сконденсированы с другими группами с тем, чтобы между циклоалкильной группой и другой кольцевой системой (например, кольцом С формулы I) существовало более одной химической связи. В некоторых воплощениях циклоалкильная группа является незамещенной.
Галогеналкил, если конкретно не указано иное, относится к прямой или разветвленной С1-С12алкильной группе, где один или более атомов водорода заменены на галоген. В некоторых воплощениях галогеналкил относится к С1-С6галогеналкильной группе. В некоторых воплощениях 1-3 атома водорода в галогеналкильной группе заменены на атомы галогена. В некоторых воплощениях каждый атом водорода в галогеналкильной группе заменен на атом галогена (например, в трифторметиле). В некоторых воплощениях галогеналкил является таким, как определено в данной заявке, при этом в каждом случае атом галогена представляет собой атом фтора. Типичные галогеналкильные группы включают фторметил, дифторметил, трифторметил, трифторэтил и пентафторэтил.
Алкокси, если конкретно не указано иное, относится к прямой или разветвленной С1-С12алкильной группе, где присутствуют один или более атомов кислорода, в каждом случае между двумя атомами углерода. В некоторых воплощениях алкокси относится к группе С1-С6алкокси. В некоторых воплощениях группы С1-С6алкокси, приведенные в данном описании, имеют один атом кислорода. Типичные алкоксигруппы включают метокси, этокси, СН2ОСН3, СН2СН2ОСН3, СН2ОСН2СН3, СН2СН2ОСН2СН3, СН2ОСН2СН2СН3, СН2СН2СН2ОСН3, СН2ОСН(СН3)2, СН2ОС(СН3)3, СН(СН3)ОСН3, СН2СН(СН3)ОСН3, СН(СН3)ОСН2СН3, СН2ОСН2ОСН3, СН2СН2ОСН2СН2ОСН3 и СН2ОСН2ОСН2ОСН3.
Циклоалкокси, если конкретно не указано иное, относится к группе С4-С10- или С4-С6алкокси, как она определена выше, при этом данная группа является циклической и содержит один атом кислорода. Типичные группы циклоалкокси включают оксетанил, тетрагидрофуранил и тетрагидропиранил.
Галогеналкокси, если конкретно не указано иное, относится к С1-С6галогеналкильной группе, как она определена выше, где присутствуют один или два атома кислорода, в каждом случае между двумя атомами углерода. В некоторых воплощениях группы С1-С6галогеналкокси, приведенные в данном описании, имеют один атом кислорода. Типичные группы галогеналкокси включают OCF3, OCHF2 и CH2OCF3.
Тиоалкил, если конкретно не указано иное, относится к группе С1-С12- или С1-С6алкокси, как она определена выше, где атом кислорода заменен на атом серы. В некоторых воплощениях тиоалкильные группы могут включать атомы серы, замещенные одним или двумя атомами кислорода (т.е. в алкилсульфонах и алкилсульфоксидах). Типичными тиоалкильными группами являются группы, приведенные в качестве примеров выше в определении для алкокси, где в каждом случае каждый атом кислорода заменен на атом серы.
Тиоциклоалкил, если конкретно не указано иное, относится к С4-С10- или С4-С6-тиоалкильной группе, как она определена выше, при этом данная группа является циклической и содержит один атом серы. В некоторых воплощениях атом серы в тиоциклоалкильной группе замещен одним или двумя атомами кислорода (т.е. в циклическом сульфоне или сульфоксиде). Типичные тиоциклоалкильные группы включают тиетанил, тиоланил, тианил, 1,1-диоксотиоланил и 1,1-диоксотианил.
Гетероциклил, если конкретно не указано иное, относится к одиночному насыщенному или частично ненасыщенному 4-8-членному кольцу, имеющему по меньшей мере один атом в кольце, отличающийся от атома углерода, при этом данный атом выбран из группы, состоящей из атомов кислорода, азота и серы; термин также включает в себя системы из нескольких конденсированных колец, которые имеют по меньшей мере одно такое насыщенное или частично ненасыщенное кольцо, при этом данные системы из нескольких конденсированных колец имеют от 7 до 12 атомов и дополнительно описаны ниже. Таким образом, этом термин включает в себя одиночные насыщенные или частично ненасыщенные кольца (например, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-членные кольца), содержащие в кольце от примерно 1 до 7 атомов углерода и от примерно 1 до 4 гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из атомом кислорода, азота и серы. Кольцо может быть С-разветвленным (т.е. замещенным группой С1-С4алкил). Кольцо может быть замещено одной или более (например, 1, 2 или 3) оксогруппами, и также могут присутствовать атомы серы и азота в своих окисленных формах. Типичные гетероциклы включают, но не ограничиваются этим, азетидинил, тетрагидрофуранил и пиперидинил. Кольца в такой системе из нескольких конденсированных колец могут быть соединены друг с другом посредством связей, приводящих к получению конденсированных, спиро- и мостиковых структур, если это допускается требованиями по валентности. Следует понимать, что отдельные кольца в системе из нескольких конденсированных колец могут быть соединены в любом порядке относительно друг друга. Также следует понимать, что место присоединения в системе из нескольких конденсированных колец (как она определена выше для гетероцикла) может находиться в любом положении такой системы из нескольких конденсированных колец. Также следует понимать, что местом присоединения для гетероцикла или гетероциклической системы из нескольких конденсированных колец может быть любой подходящий атом гетероциклильной группы, включая атом углерода и атом азота. Типичные гетероциклы включают, но не ограничиваются этим, азиридинил, азетидинил, пирролидинил, пиперидинил, гомопиперидинил, морфолинил, тиоморфолинил, пиперазинил, тетрагидрофуранил, дигидрооксазолил, тетрагидропиранил, тетрагидротиопиранил, 1,2,3,4-тетрагидрохинолил, бензоксазинил, дигидрооксазолил, хроманил, 1,2-дигидропиридинил, 2,3-дигидробензофуранил, 1,3-бензодиоксолил, 1,4-бензодиоксанил, спиро[циклопропан-1,1'-изоиндолинил]-3'-он, изоиндолинил-1-он, 2-окса-6-азаспиро[3.3]гептанил, имидазолидин-2-он, N-метилпиперидин, имидазолидин, пиразолидин, бутиролактам, валеролактам, имидазолидинон, гидантоин, диоксолан, фталимиде, 1,4-диоксан, тиоморфолин, тиоморфолин-S-оксид, тиоморфолин-S,S-оксид, пиран, 3-пирролин, тиопиран, пирон, тетрагидротиофен, хинуклидин, тропан, 2-азаспиро[3.3]гептан, (1R,5S)-3-азабицикло[3.2.1]октан, (1s,4s)-2-азабицикло[2.2.2]октан, (1R,4R)-2-окса-5-азабицикло[2.2.2]октан и пирролидин-2-он.
В некоторых воплощениях гетероциклил представляет собой С4-С10гетероциклил, имеющий от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из атомов азота, кислорода и серы. В некоторых воплощениях гетероциклильная группа не является ни бициклической, ни спироциклической. В некоторых воплощениях гетероциклил представляет собой С5-С6 гетероциклил, имеющий от 1 до 3 гетероатомов, при этом по меньшей мере 2 атома представляют собой атом азота, если присутствуют 3 гетероатома.
Арил, если конкретно не указано иное, относится к одиночному состоящему только из атомов углерода ароматическому кольцу или состоящей только из атомов углерода системе из нескольких конденсированных колец, при этом по меньшей мере одно из колец является ароматическим, и при этом арильная группа имеет 6-20 атомов углерода, 6-14 атомов углерода, 6-12 атомов углерода или 6-10 атомов углерода. Арил включает фенильный радикал. Арил также включает системы из нескольких конденсированных колец (например, кольцевые системы, содержащие 2, 3 или 4 кольца), имеющие примерно 9-20 атомов углерода, в которых по меньшей мере одно кольцо является ароматическим, и при этом другие кольца могут быть ароматическими или неароматическими (т.е. карбоциклами). Такие системы из нескольких конденсированных колец возможно замещены одной или более (например, 1, 2 или 3) оксогруппами в любой карбоциклической части такой системы из нескольких конденсированных колец. Кольца в системе из нескольких конденсированных колец могут быть соединены друг с другом посредством связей, приводящих к получению конденсированных, спиро- и мостиковых структур, если это допускается требованиями по валентности. Следует понимать, что место присоединения в системе из нескольких конденсированных колец, как она определена выше, может находиться в любом положении такой кольцевой системы, включая ароматическую или карбоциклическую часть кольца. Типичные арильные группы включают фенил, инденил, нафтил, 1,2,3,4-тетрагидронафтил, антраценил и тому подобное.
Гетероарил, если конкретно не указано иное, относится к 5-6-членному ароматическому кольцу, имеющему по меньшей мере один атом в кольце, отличающийся от атома углерода, при этом данный атом выбран из группы, состоящей из атомов кислорода, азота и серы; термин "гетероарил" также включает в себя системы из нескольких конденсированных колец, имеющие 8-16 атомов, которые содержат по меньшей мере одно такое ароматическое кольцо, при этом системы из нескольких конденсированных колец дополнительно описаны ниже. Таким образом, термин "гетероарил" включает в себя одиночные ароматические кольца из примерно 1-6 атомов углерода и примерно 1-4 гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из атомов кислорода, азота и серы. Атомы серы и азота также могут находиться в окисленной форме при условии, что данное кольцо является ароматическим. Типичные гетероарильные кольцевые системы включают, но не ограничиваются этим, пиридил, пиримидинил, оксазолил или фурил. Термин "гетероарил" также включает в себя системы из нескольких конденсированных колец (например, кольцевые системы, содержащие 2 или 3 кольца), при этом гетероарильная группа, которая определена выше, сконденсирована с одним или более колец, выбранных из гетероарилов (с образованием, например, нафтиридинила, такого как 1,8-нафтиридинил), гетероциклов (с образованием, например, 1,2,3,4-тетрагидронафтиридинила, такого как 1,2,3,4-тетрагидро-1,8-нафтиридинил), карбоциклов (с образованием, например, 5,6,7,8-тетрагидрохинолила) и арилов (с образованием, например, индазолила) с образованием системы из нескольких конденсированных колец. Так, гетероарил (одиночное ароматическое кольцо или система из нескольких конденсированных колец) имеет 1-15 атомов углерода и примерно 1-6 гетероатомов в пределах гетероарильного кольца. Такие системы из нескольких конденсированных колец возможно могут быть замещены одной или более (например, 1, 2, 3 или 4) оксогруппами на карбоциклильной или гетеро цикл ильной частях конденсированного кольца. Кольца в такой системе из нескольких конденсированных колец могут быть соединены друг с другом посредством связей, приводящих к получению конденсированных, спиро- и мостиковых структур, если это допускается требованиями по валентности. Следует понимать, что отдельные кольца в системе из нескольких конденсированных колец могут быть соединены в любом порядке относительно друг друга. Также следует понимать, что место присоединения в системе из нескольких конденсированных колец (как она определена выше для гетероарила) может находиться в любом положении такой системы из нескольких конденсированных колец, включая гетероарильную, гетероциклильную, арильную или карбоциклильную часть системы из нескольких конденсированных колец. Также следует понимать, что местом присоединения для гетероарила или гетероарильной системы из нескольких конденсированных колец может быть любой подходящий атом гетероарила или гетероарильной системы из нескольких конденсированных колец, включая атом углерода и гетероатом (например, атом азота). Типичные гетероарилы включают, но не ограничиваются этим, пиридил, пирролил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, пиразолил, тиенил, индолил, имидазолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, фурил, оксадиазолил, тиадиазолил, хинолил, изохинолил, бензотиазолил, бензоксазолил, индазолил, хиноксалил, хиназолил, 5,6,7,8-тетрагидроизохинолинил, бензофуранил, бензимидазолил, тианафтенил, пирроло[2,3-b]пиридинил, хиназолинил-4(3Н)-он, триазолил, 4,5,6,7-тетрагидро-1Н-индазол и 3b,4,4а,5-тетрагидро-1Н-циклопропа[3,4]цикло-пента[1,2-с]пиразол.
Использованный в данном описании термин "хиральный" относится к молекулам, обладающим свойством не совпадать при наложении на зеркально отображаемого партнера, тогда как термин "ахиральный" относится к молекулам, которые совпадают при наложении на своего зеркально отображаемого партнера.
Использованный в данном описании термин "стереоизомеры" относится к соединениям, которые имеют идентичный химический состав, но различаются расположением атомов или групп в пространстве.
Как использовано в данном описании, волнистая линия 
которая пересекает связь в химической структуре, указывает место присоединения связи, к которой отмеченная волнистой линией связь присоединяется в этой химической структуре к остальной части молекулы.
Использованный в данном описании термин "С-связанный" означает, что группа, которую описывает этот термин, присоединена костальной части молекулы через атом углерода в кольце.
Использованный в данном описании термин "N-связанный" означает, что группа, которую описывает этот термин, присоединена костальной части молекулы через атом азота в кольце.
Термин "диастереомер" относится к стереоизомеру с двумя или более центрами хиральности, и такие молекулы не являются зеркальными отображения друг друга. Диастереомеры имеют разные физические свойства, например, точки плавления, точки кипения, спектральные свойства и реакционные способности. Смеси диастереомеров можно разделить с помощью аналитических методик высокого разрешения, таких как электрофорез и хроматография.
Термин "энантиомеры" относится к двум стереоизомерам соединения, которые не совпадают с зеркальными отображениями друг друга.
В данном описании в основном использованы стереохимические определения и правила, представленные в S.P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984), McGraw-Hill Book Company, New York; и Eliel E. and WilenS., "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley and Sons, Inc., New York, 1994. Соединения по изобретению могут содержать асимметрические или хиральные центры и ввиду этого существовать в разных стереоизомерных формах. Подразумевается, что все стереоизомерные формы соединений по изобретению, включая, но не ограничиваясь этим, диастереомеры, энантиомеры и атропоизомеры, а также их смеси, такие как рацемические смеси, составляют часть настоящего изобретения. Многие органические соединения существуют в оптически активных формах, т.е. они обладают способностью вращать плоскость плоскополяризованного света. При описании оптически активного соединения для обозначения абсолютной конфигурации молекулы относительно ее хирального(ых) центра(ов) используют префиксы D и L или R и S. Для обозначения знака направления вращения плоскополяризованного света соединением применяют префиксы d и l или (+) и (-), при этом (-) или l означает, что соединение является левовращающим. Соединение с префиксом (+) или d является правовращающим. Для данной химической структуры эти стереоизомеры являются идентичными, за исключением того, что они являются зеркальными отображениями друг друга. Конкретный стереоизомер также может быть определен как энантиомер, и смесь таких изомеров часто называют энантиомерной смесью. Смесь с соотношением энантиомеров 50:50 называется рацемической смесью или рацематом, которая может образовываться, если не соблюдалось никакой стереоселекции или стереоспецифичности в химической(ом) реакции или процессе. Термины "рацемическая смесь" и "рацемат" относятся к эквимолярной смеси двух энантиомерных разновидностей, не обладающей оптической активностью.
Если связь в формуле соединения изображена в данном описании без соответствия стереохимическим правилам (например, простой линией в плоскости чертежа), то атом, к которому присоединена эта связь, включает все стереохимически возможные варианты. Если связь в формуле соединения изображена в данном описании в соответствии с определенными стереохимическими правилами (например, жирной линией, жирным клином, штрихованной линией, заштрихованным клином), следует понимать, что соединение содержит в большем количестве атом в изображенной абсолютной стереохимической конфигурации, если не указано иное. В одном из воплощений соединение может представлять собой по меньшей мере на 51% стереоизомер в изображенной абсолютной конфигурации. В другом воплощении соединение может представлять собой по меньшей мере на 80% в изображенной абсолютной конфигурации. В другом воплощении соединение может представлять собой по меньшей мере на 90% в изображенной абсолютной конфигурации. В другом воплощении соединение может представлять собой по меньшей мере на 95% в изображенной абсолютной конфигурации. В другом воплощении соединение может представлять собой по меньшей мере на 97% в изображенной абсолютной конфигурации. В другом воплощении соединение может представлять собой по меньшей мере на 98% в изображенной абсолютной конфигурации. В другом воплощении соединение может представлять собой по меньшей мере на 99% в изображенной абсолютной конфигурации.
Использованный в данном описании термин "таутомер" или "таутомерная форма" относится к структурным изомерам, обладающим разной энергией, взаимопревращение которых протекает через низкий энергетический барьер. Например, протонные таутомеры (также известные как прототропные таутомеры) характеризуются взаимопревращениями в результате миграции протона, как например при кето-енольной и имин-енаминной изомериях. Валентные таутомеры включают взаимопревращения посредством реогранизации некоторых из связывающих электронов.
Использованный в данном описании термин "сольват" относится к ассоциату или комплексу одной или более молекул растворителя и молекулы соединения по изобретению. Примеры растворителей, которые образуют сольваты, включают, но не ограничиваются этим, воду, изопропанол, этанол, метанол, диметилсульфоксид (DMSO), этилацетат, уксусную кислоту и этаноламин. Термин "гидрат" относится к комплексу, где молекулой растворителя является молекула воды. В некоторых воплощениях в качестве гидрата соединения по данному изобретению предложен гидрат кетонов.
Использованный в данном описании термин "защитная группа" относится к заместителю, обычно применяемому для блокирования или защиты конкретной функциональной группы соединения. Например, "амино-защитная группа" представляет собой заместитель, присоединенный к аминогруппе, который блокирует или защищает функциональную аминогруппу в соединении. Подходящие амино-защитные группы включают ацетил, трифторацетил, трет-бутоксикарбонил (ВОС), бензилоксикарбонил (CBz) и 9-флуоренилметиленоксикарбонил (Fmoc). Аналогичным образом, термин "гидрокси-защитная группа" относится к заместителю группы гидрокси, который блокирует или защищает функциональную гидрокси группу. Подходящие защитные группы включают ацетил и сил ил. Термин "карбокси-защитная группа" относится к заместителю группы карбокси, который блокирует или защищает функциональную карбоксигруппу. Обычно используемые карбокси-защитные группы включают фенилсульфонилэтил, цианоэтил, 2-(триметилсилил)этил, 2-(триметилсилил)этоксиметил, 2-(п-толуолсульфонил)-этил, 2-(п-нитрофенилсульфенил)этил, 2-(дифенилфосфино)-этил, нитроэтил и тому подобное. Общее описание защитных групп и их применения см. в P.G.M. Wuts and T.W. Greene, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis, 4th edition, Wiley-Interscience, New York, 2006.
Использованный в данном описании термин "млекопитающее" включает в себя, но не ограничивается этим, людей, мышей, крыс, морских свинок, обезьян, собак, кошек, лошадей, представителей крупного рогатого скота, свиней и овец.
Подразумевается, что использованный в данном описании термин "фармацевтически приемлемые соли" включает в себя соли активных соединений, полученные с использованием относительно нетоксичных кислот или оснований, в зависимости от конкретных заместителей, имеющихся в соединениях, описанных в данной заявке. Если соединения по настоящему изобретению содержат относительно кислотные функциональные группы, то соли присоединения основания можно получить путем приведения в контакт таких соединений в нейтральной форме с достаточным количеством желаемого основания либо в чистом виде, либо в подходящем инертном растворителе. Примеры солей, происходящих из фармацевтически приемлемых неорганических оснований, включают соли алюминия, аммония, кальция, меди, трехвалентного железа, двухвалентного железа, лития, магния, трехвалентного марганца, двухвалентного марганца, калия, натрия, цинка и тому подобного. Соли, происходящие из фармацевтически приемлемых органических оснований, включают соли первичных, вторичных и третичных аминов, в том числе замещенных аминов, циклических аминов, природных аминов и тому подобных, таких как аргинин, бетаин, кофеин, холин, N,N'-дибензилэтилендиамин, диэтиламин, 2-диэтиламино-этанол, 2-диметиламиноэтанол, этаноламин, этилендиамин, N-этилморфолин, N-этилпиперидин, глюкамин, глюкозамин, гистидин, гидрабамин, изопропиламин, лизин, метилглюкамин, морфолин, пиперазин, пиперидин, полиаминные смолы, прокаин, пурины, теобромин, триэтиламин, триметиламин, трипропиламин, трометамин и тому подобное. Если соединения по настоящему изобретению содержат относительно основные функциональные группы, то соли присоединения кислоты можно получить путем приведения в контакт таких соединений в нейтральной форме с достаточным количеством желаемой кислоты, либо в чистом виде, либо в подходящем инертном растворителе. Примеры фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты включают соли, происходящие из неорганических кислот, таких как соляная, бромистоводородная, азотная, угольная для образования карбоната и гидрокарбоната, фосфорная для образования фосфата, гидрофосфата и дигидрофосфата, серная для образования сульфата и гидросульфата, йодистоводородная или фосфористая кислоты и тому подобное, а также соли, происходящие из относительно нетоксичных органических кислот, таких как уксусная, пропионовая, изомасляная, малоновая, бензойная, янтарная, субериновая, фумаровая, миндальная, фталевая, бензолсульфоновая, п-толилсульфоновая, лимонная, винная, метансульфоновая и тому подобное. Также включены соли аминокислот, такие как аргинат и тому подобное, и соли таких органических кислот, как глюкуроновая или галактуроновая кислоты и тому подобные (см., например, Berge S.M. et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1-19). Некоторые конкретные соединения по настоящему изобретению содержат как основные, так и кислотные функциональные группы, что позволяет преобразовывать эти соединения в соли присоединения либо основания, либо кислоты.
Соединения в нейтральной форме можно регенерировать путем приведения в контакт соли, образованной с основанием или кислотой, и выделения исходного соединения традиционным способом. Исходная форма соединения отличается от различных солевых форм некоторыми физическими свойствами, такими как растворимость в полярных растворителях, но в остальном эти соли эквивалентны исходной форме соединения сточки зрения задач настоящего изобретения.
Помимо солевых форм, согласно настоящему изобретению предложены соединения в форме пролекарств. Использованный в данном описании термин "пролекарство" относится к таким соединениям, которые легко претерпевают химические изменения в физиологических условиях с получением соединений по настоящему изобретению. Кроме того, пролекарства могут быть превращены в соединения по настоящему изобретению посредством химических или биохимических методов в условиях ex vivo. Например, пролекарства могут медленно превращаться в соединения по настоящему изобретению при помещении их в резервуар трансдермального пластыря вместе с подходящим ферментом или химическим реагентом.
Пролекарства по изобретению включают соединения, в которых аминокислотный остаток или полипептидная цепь из двух или более (например, двух, трех или четырех) аминокислотных остатков ковалентно присоединены посредством амидной или сложноэфирной связи к свободной амино-, гидрокси- или карбоксильной группе в соединении по настоящему изобретению. Аминокислотные остатки включают, но не ограничиваются этим, остатки 20 природных аминокислот, обычно обозначаемых трехбуквенными символами, и также включают остатки фосфосерина, фосфотреонина, фосфотирозина, 4-гидроксипролина, гидроксилизина, десмозина, изодесмозина, гамма-карбоксиглутамата, гиппуровой кислоты, октагидроиндол-2-карбоновой кислоты, статина, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновой кислоты, пеницилламина, орнитина, 3-метилгистидина, норвалина, бета-аланина, гамма-аминомасляной кислоты, цитруллина, гомоцистеина, гомосерина, метилаланина, пара-бензоилфенилаланина, фенилглицина, пропаргилглицина, саркозина, метионинсульфона и трет-бутилглицина.
Кроме этого включены дополнительные типы пролекарств. Например, соединения по изобретению могут быть модифицированы по свободной карбоксильной группе с получением амида или сложного алкилового эфира. В качестве другого примера, соединения по данному изобретению, содержащие свободные гидроксигруппы, могут быть модифицированы с получением пролекарств в результате превращения гидроксигруппы в такую группу, как, но не ограничиваясь этим, группа сложного фосфатного эфира, гемисукцинат, диметиламиноацетат или фосфорилоксиметилокси-карбонильная группа, что приведено в Fleisher D. et al., (1996) Improved oral drug delivery: solubility limitations overcome by the use of prodrugs, Advanced Drug Delivery Reviews, 19: 115. Также включены карбаматные пролекарства, полученные модификацией гидрокси- и аминогрупп, как и карбонатные пролекарства, сложные сульфонатные эфиры и сложные сульфатные эфиры, полученные модификацией гидроксигрупп. Также включены производные по гидроксигруппам в виде (ацилокси)метиловых и (ацилокси)этиловых простых эфиров, где ацильная группа может представлять собой группу сложного алкилового эфира, возможно замещенную группами, включая, но не ограничиваясь этим, функциональные группы простых эфиров, аминов и карбоновых кислот, или где ацильная группа представляет собой группу сложного эфира аминокислоты, как описано выше. Пролекарства этого типа описаны в J. Med. Chem. (1996), 39:10. Более конкретные примеры включают замену атома водорода спиртовой группы на такую группу, как (С1-6)алканоилоксиметил, 1-((С1-6)алканоилокси)этил, 1-метил-1-((С1-6)алканоилокси)этил, (С1-6)алкоксикарбонилоксиметил, N-( С1-6)алкоксикарбониламинометил, сукциноил, (С1-6)алканоил, альфа-амино(С1-4)алканоил, арилацил и альфа-аминоацил или альфа-аминоацил-альфа-аминоацил, где каждая альфа-аминоацильная группа независимо выбрана из групп природных L-аминокислот, групп -Р(O)(ОН)2, -Р(O)(O(С1-6)алкил)2 или гликозила (радикала, образующегося в результате удаления гидроксильной группы в полуацетальной форме углевода).
Для дополнительных примеров производных, представляющих собой пролекарства, см., например, a) Design of Prodrugs под редакцией Н. Bundgaard (Elsevier, 1985) и Methods in Enzymology, Vol.42, p.309-396 под редакцией K. Widder и др. (Academic Press, 1985); b) A Textbook of Drug Design and Development под редакцией Krogsgaard-Larsen и H. Bundgaard, часть 5 "Design and Application of Prodrugs", под редакцией H. Bundgaard, p.113-191 (1991); с) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8: 1-38 (1992); d) H. Bundgaard et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77: 285 (1988); и e) N. Kakeya et al., Chem. Pharm. Bull., 32: 692 (1984), при этом каждая из работ конкретно включена в данное описание посредством ссылки.
Кроме того, согласно настоящему изобретению предложены метаболиты соединений по изобретению. Использованный в данном описании термин "метаболит" относится к продукту, образуемому в процессе метаболизма конкретного соединения или его соли в организме. Такие продукты могут получаться из введенного соединения, например, в результате его окисления, восстановления, гидролиза, амидирования, дезамидирования, этерификации, деэтерификации, ферментативного расщепления и тому подобного.
Продукты метаболизма обычно идентифицируют посредством получения меченного радиоактивным (например, 14С или 3Н) изотопом соединения по изобретению, введения его парентеральным способом в детектируемой дозе (например, более чем примерно 0,5 мг/кг) животному, такому как крыса, мышь, морская свинка, обезьяна, или человеку, с обеспечением достаточного для осуществления метаболизма времени (обычно примерно от 30 секунд до 30 часов) и выделения продуктов его превращения из мочи, крови или других биологических образцов. Эти продукты легко выделить, поскольку они являются мечеными (другие выделяют посредством применения антител, способных связываться с эпитопами, сохранившимися в метаболите). Структуры метаболитов определяют традиционным образом, например, в анализе с применением масс-спектрометрии (MS), жидкостной хроматографии в сочетании с MS (LC/MS) или ядерного магнитного резонанса (ЯМР). Как правило, анализ метаболитов выполняют так же, как и традиционные исследования метаболизма лекарственных средств, хорошо известные специалистам в данной области. Продукты метаболизма, при условии, что иным образом они не обнаруживаются in vivo, полезны в диагностических анализах на предмет определения терапевтической дозы соединений по изобретению.
Некоторые соединения по настоящему изобретению могут существовать в несольватированных формах, равно как и в сольватированных формах, в том числе гидратированных формах. Как правило, сольватированные формы эквивалентны несольватированным формам, и подразумевается, что они включены в объем настоящего изобретения. Некоторые соединения по настоящему изобретению могут существовать во множественных кристаллических или аморфных формах. Как правило, все физические формы эквиваленты с точки зрения применений, предусмотренных настоящим изобретением, и подразумевается, что они включены в объем настоящего изобретения.
Некоторые соединения по настоящему изобретению содержат асимметрические атомы углерода (оптические центры) или двойные связи; подразумевается, что все рацематы, диастереомеры, геометрические изомеры, региоизомеры и индивидуальные изомеры (например, отдельные энантиомеры) включены в объем настоящего изобретения.
Подразумевается, что термин "композиция", использованный в данном описании, охватывает продукт, содержащий конкретные ингредиенты в конкретных количествах, а также любой продукт, который получается в результате объединения, напрямую или опосредованно, этих конкретных ингредиентов в конкретных количествах. Под "фармацевтически приемлемым" понимают, что носитель, разбавитель или эксципиент должен быть совместим с другими ингредиентами композиции и не оказывать вредного действия на реципиента, которому его вводят.
Термины "лечить" и "лечение" относятся как к терапевтическому лечению и/или профилактическому лечению, так и к превентивным мерам, при которых у объекта должно быть предотвращено или ослаблено (облегчено) нежелательное физиологическое изменение или расстройство, такое как, например, развитие или распространение рака. Для задач данного изобретения полезные или желаемые клинические результаты включают, но не ограничиваются этим, облегчение симптомов, снижение степени заболевания или расстройства, стабилизированное (т.е. без ухудшения) состояние заболевания или расстройства, задержку или замедление прогрессирования заболевания, уменьшение интенсивности симптомов или временное облегчение болезненного состояния или расстройства и ремиссию (будь то частичную или полную), как детектируемую, так и недетектируемую. "Лечение" также может означать продление выживаемости по сравнению с ожидаемой выживаемостью в отсутствие получения лечения. Нуждающиеся в таком лечении включают субъектов, уже имеющих данное заболевание или расстройство, а также тех, кто предрасположен к данному заболеванию или расстройству, или тех, у которых данное заболевание или расстройство должно быть предотвращено.
Фраза "терапевтически эффективное количество" или "эффективное количество" означает количество соединения по настоящему изобретению, которое (1) лечит или предотвращает конкретное заболевание, состояние или расстройство, (2) ослабляет, уменьшает интенсивность симптомов или устраняет один или более симптомов конкретного заболевания, состояния или расстройства, либо (3) предотвращает или задерживает начало развития одного или более симптомов конкретного заболевания, состояния или расстройства, изложенного в данном описании. В случае терапии рака эффективность можно измерить, например, оценивая время до прогрессирования заболевания (ТТР) или определяя коэффициент ответа (RR).
Термин "биодоступность" относится к системной доступности (т.е. уровням в крови/плазме крови) заданного количества лекарственного средства, введенного пациенту. Биодоступность представляет собой абсолютный термин, который указывает на измерение как времени (скорости), так и общего количества (уровня) лекарственного средства, достигающего системный кровоток, в зависимости от введенной лекарственной формы.
ИНГИБИТОРЫ RIP1 КИНАЗЫ
Согласно настоящему изобретению предложены новые соединения, имеющие общую формулу I:
или их фармацевтически приемлемые соли, где
R1 выбран из группы, состоящей из С1-6алкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкила, С1-С6галогеналкокси, групп С1-С6aлкил-N(RN)2, фенил, бензил, 4-8-членный гетероциклил и 5-6-членный гетероарил; при этом R1 связан с соседним карбонилом через атом углерода и при этом R1 возможно замещен одним или двумя заместителями, выбранными из группы, состоящей из F, Cl, Br, С1-С6алкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкила, С1-С6галогеналкокси, групп С1-С6aлкил-N(RN)2, гидроксил, гидроксиметил, циано, цианометил, цианоэтил, С(O) С1-С6алкил, фенил, бензил, СН2-(С3-С6циклоалкил), 5-6-членный гетероарил и СН2-(5-6-членный гетероарил);
каждый RN независимо выбран из группы, состоящей из Н, С1-С6алкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси и С1-С6галогеналкила; или два RN вместе с соседним атомом N могут образовывать 4-6-членное кольцо;
кольцо А представляет собой 5-членный гетероарил, имеющий только в качестве гетероатомов либо (1) два или три атома азота, либо (2) один атом азота и один атом кислорода, либо (3) один атом азота и один атом серы; при этом кольцо А связано с соседним карбонилом через атом углерода; и
кольцо В представляет собой 4-8-членный циклоалкил или 4-8-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из атомов азота, кислорода и серы; при этом кольцо В замещено в соответствии с (а), (b) или как (а), так и (b):
(a) 1-2 заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, дейтерия, гидрокси, С1-С6алкила, С1-С6галогеналкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкокси, С1-С6тиоалкила, групп С1-С6алкил-N(RN)2 и циано; при этом два С1-С6алкильных заместителя вместе могут образовывать мостиковое или спироциклическое кольцо; и при этом, если атом азота в кольце В замещен, то заместитель не является галогеном, циано или С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкокси или С1-С6тиоалкилом, имеющим атом кислорода или серы, непосредственно связанный с атомом азота;
(b) 1 заместителем, выбранным из группы, состоящей из С1-С6алкила, С1-С6галогеналкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкокси, С1-С6тиоалкила, групп С1-С6алкил-N(RN)2, фенил, бензил, СН2-(С3-С6циклоалкил), СН2СН2-(С3-С6циклоалкил), СН2-(4-6-членный гетероциклил), СН2СН2-(4-6-членный гетероциклил), 5-6-членный гетероарил и СН2-(5-6-членный гетероарил); при этом в случае присутствия фенильного кольца или 5-6-членного гетероарильного кольца оно может быть замещено 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, С1-С4алкила, С1-С4алогеналкила, С1-С4алкокси, С1-С4галогеналкокси и циано.
В другом воплощении данного изобретения предложены соединения формулы I:
или их фармацевтически приемлемые соли, где
R1 выбран из группы, состоящей из С1-С6алкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкила, С1-С6галогеналкокси, групп С1-С6алкил-N(RN)2, фенил, бензил, 4-6-членный гетероциклил и 5-6-членный гетероарил; при этом R1 связан с соседним карбонилом через атом углерода и при этом R1 возможно замещен одним или двумя заместителями, выбранными из группы, состоящей из F, Cl, метила, этила, гидроксила, гидроксиметила, метоксиметила, циано, трифторметила, дифторметокси и трифторметокси;
каждый RN независимо выбран из группы, состоящей из Н, С1-С6алкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси и С1-С6галогеналкила; или два RN вместе с соседним атомом N могут образовывать 4-6-членное кольцо;
кольцо А представляет собой 5-членный гетероарил, имеющий только в качестве гетероатомов либо (1) два или три атома азота, либо (2) один атом азота и один атом кислорода, либо (3) один атом азота и один атом серы; при этом кольцо А связано с соседним карбонилом через атом углерода; и
кольцо В представляет собой 4-8-членный циклоалкил или 4-8-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из атомов азота, кислорода и серы; при этом кольцо В замещено в соответствии с (а), (b) или как (а), так и (b):
(a) 1-2 заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, С1-С6алкила, С1-С6галогеналкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкокси, С1-С6тиоалкила, групп С1-С6алкил-N(RN)2 и циано; при этом два С1-С6алкильных заместителя вместе могут образовывать мостиковое или спироциклическое кольцо; и при этом, если атом азота в кольце В замещен, то заместитель не является галогеном, циано или С1-С алкокси, С1-С6галогеналкокси или С1-С6тиоалкилом, имеющим атом кислорода или серы, непосредственно связанный с атомом азота;
(b) 1 заместителем, выбранным из группы, состоящей из С1-С6алкила, С1-С6галогеналкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкокси, С1-С6тиоалкила, групп С1-С6алкил-N(RN)2, фенил, бензил, СН2-(С3-С6циклоалкил), СН2СН2-(С3-С6циклоалкил), СН2-(4-6-членный гетероциклил), СН2СН2-(4-6-членный гетероциклил), 5-6-членный гетероарил и СН2-(5-6-членный гетероарил); при этом в случае присутствия фенильного кольца оно может быть замещено 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, С1-С4алкила, С1-С4галогеналкила, С1-С4алкокси, С1-С4галогеналкокси, циано и циклопропила.
В некоторых воплощениях R1 выбран из группы, состоящей из С1-С6алкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6галогеналкила, фенила, бензила, оксетанила, оксабицикло[3.1.0]гексан-6-ила, тиенила и пиразолила; при этом R1 возможно замещен: (1) одним заместителем, выбранным из группы, состоящей из F, Cl, метила, гидроксила, гидроксиметила, циано и трифторметила, или (2) двумя заместителями F. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R1 представляет собой С1-С6алкил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой С1-С4алкил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой С3-С5циклоалкил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой С3-С4циклоалкил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой метил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой этил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой CF3CH2. В некоторых воплощениях R1 представляет собой 2-пропил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой трет-бутил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой (2-гидрокси)-2-пропил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой (2-циано)-2-пропил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой С1-С6галогеналкил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой С1-С4галогеналкил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой циклопропил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой моно- или ди-фторциклопропил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой 1-фторциклопропил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой 2-фторциклопропил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой 2,2-дифторциклопропил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой 1-(трифторметил)циклопропил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой 1-метилциклопропил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой 1-(гидроксиметил)циклопропил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой циклобутил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой циклопентил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой фенил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой бензил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой оксетан-3-ил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой 3-метилоксетан-3-ил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой оксабицикло[3.1.0]гексан-6-ил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой 2-пиридил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой 1-метилпиразол-4-ил. В некоторых воплощениях R1 представляет собой 2-тиенил.
В некоторых воплощениях каждый RN независимо выбран из группы, 5 состоящей из Н и С1-С6алкила. В некоторых воплощениях каждый RN представляет собой С1-С4алкил. В некоторых воплощениях каждый RN представляет собой метил.
В некоторых воплощениях формулы (I) R1 является таким, как определено выше, и кольцо А и кольцо В совместно выбраны из группы, состоящей из:
где
R2 выбран из группы, состоящей из Н, С1-С6алкила, С1-С6галогеналкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкокси, С1-С6тиоалкила, фенила, бензила, групп СН2-(С3-С6циклоалкил), СН2СН2-(С3-С6циклоалкил), СН2-(4-6-членный гетероциклил), СН2СН2-(4-6-членный гетероциклил), 5-6-членный гетероарил и СН2-(5-6-членный гетероарил); при этом в случае присутствия фенильного кольца оно может быть замещено 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, С1-С4алкила, С1-С4галогеналкила, С1-С4алкокси, С1-С4галогеналкокси и циано; и
R3a и R3b выбраны следующим образом:
(1) один из R3a и R3b представляет собой Н, а другой выбран из группы, состоящей из D, F, Cl, ОН, CN, С1-С4алкила, С1-С4галогеналкила, циклопропила, С1-С4алкокси и С1-С4галогеналкокси;
(2) каждый из R3a и R3b выбран из группы, состоящей из D, F, Cl, ОН, CN и метила, при условии, что R3a и R3b оба не могут представлять собой ОН или CN; или
(3) R3a и R3b совместно образуют циклопропил.
В некоторых воплощениях формулы (I) R1 является таким, как определено выше, и кольцо А и кольцо В совместно выбраны из группы, состоящей из:
где
R3a и R3b выбраны следующим образом:
(1) один из R3a и R3b представляет собой Н, а другой выбран из группы, состоящей из D, F, Cl, ОН, CN, С1-С4алкила, С1-С4галогеналкила, циклопропила, С1-С4алкокси и С1-С4галогеналкокси;
(2) каждый из R3a и R3b выбран из группы, состоящей из D, F, Cl, ОН, CN и метила, при условии, что R3a и R3b оба не могут представлять собой ОН или CN; или
(3) R3a и R3b совместно образуют циклопропил;
каждый R5 выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, С1-С6алкила, С1-С6галогеналкила, С1-С6алкокси и С1-Сгалогеналкокси; и
m равно 1, 2 или 3.
В некоторых воплощениях формулы (I) R1 является таким, как определено выше, и кольцо А и кольцо В совместно представляют собой:
где
каждый R5 выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, С1-С6алкила, С1-С6галогеналкила, С1-С6алкокси и С1-С6галогеналкокси; и
m равно 1, 2 или 3.
В некоторых воплощениях формулы (I) R1 является таким, как определено выше, и кольцо А и кольцо В совместно выбраны из группы, состоящей из:
где
R2 выбран из группы, состоящей из Н, С1-С6алкила, С1-С6галогеналкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкокси, С1-С6тиоалкила, фенила, бензила, групп СН2-(С3-С6циклоалкил), СН2СН2-(С3-С6циклоалкил), СН2-(4-6-членный гетероциклил), СН2СН2-(4-6-членный гетероциклил), 5-6-членный гетероарил и СН2-(5-6-членный гетероарил); при этом в случае присутствия фенильного кольца оно может быть замещено 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, С1-С4алкила, С1-С4галогеналкила, С1-С4алкокси, С1-С4галогеналкокси и циано;
R4a и R4b выбраны следующим образом:
(1) один из R4a и R4b представляет собой Н, а другой выбран из группы, состоящей из D, F, Cl, ОН, CN, С1-С4алкила, С1-С4галогеналкила, циклопропила, С1-С4алкокси и С1-С4галогеналкокси; или
(2) каждый из R4a и R4b выбран из группы, состоящей из D, F, Cl и метила; и
каждый R5 выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, С1-С6алкила, С1-С6галогеналкила, С1-С6алкокси и С1-С6галогеналкокси.
В некоторых воплощениях формулы (I) R1 является таким, как определено выше, и кольцо А и кольцо В совместно выбраны из группы, состоящей из:
где
R4a и R4b выбраны следующим образом:
(1) один из R4a и R4b представляет собой Н, а другой выбран из группы, состоящей из D, F, Cl, ОН, CN, С1-С4алкила, С1-С4галогеналкила, циклопропила, С1-С4алкокси и С1-С4галогеналкокси; или
(2) каждый из R4a и R4b выбран из группы, состоящей из D, F, Cl и метила;
каждый R5 выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, С1-С6алкила, С1-С4галогеналкила, С1-С4алкокси и С1-С4галогеналкокси; и
m равно 1, 2 или 3.
В некоторых из вышеупомянутых воплощений R2 представляет собой фенил. В некоторых воплощениях R2 представляет собой моно- или дифторфенил. В некоторых воплощениях R2 представляет собой моно- или дихлорфенил. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R2 представляет собой пиридинил. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R2 представляет собой хлор-замещенный пиридинил. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R2 представляет собой фтор-замещенный пиридинил. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R2 представляет собой пиразолил. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R2 представляет собой 1-метил-1Н-пиразол-4-ил. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R2 представляет собой 4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-3-ил.
В некоторых из вышеупомянутых воплощений R3a и R3b каждый представляет собой Н. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R3a представляет собой Н, a R3b представляет собой F. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R3a представляет собой Н, a R3b представляет собой Cl. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R3a и R3b каждый представляет собой F. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R3a и R3b каждый представляет собой Cl. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R3a и R3b каждый представляет собой метил. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R3a представляет собой метил, a R3b представляет собой F. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R3a представляет собой метил, a R3b представляет собой Cl. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R3a представляет собой метил, a R3b представляет собой ОН. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R3a представляет собой метил, a R3b представляет собой CN. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R3a и R3b каждый представляет собой D. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R3a представляет собой Н, a R3b представляет собой D. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R3a представляет собой D, a R3b представляет собой F. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R3a представляет собой D, a R3b представляет собой Cl. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R3a представляет собой D, a R3b представляет собой метил.
В некоторых из вышеупомянутых воплощений R4a и R4b каждый представляет собой Н. В некоторых из вышеупомянутых воплощений один из R4a представляет собой Н, a R4b представляет собой F. В некоторых из вышеупомянутых воплощений один из R4a представляет собой Н, a R4b представляет собой метил. В некоторых из вышеупомянутых воплощений один из R4a представляет собой Н, a R4b представляет собой Cl. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R4a и R4b каждый представляет собой F. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R4a и R4b каждый представляет собой D. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R4a представляет собой Н, a R4b представляет собой D. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R4a представляет собой D, a R4b представляет собой F. В некоторых из вышеупомянутых воплощений R4a представляет собой D, a R4b представляет собой Cl.
В некоторых из вышеупомянутых воплощений R5 выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, СН3, СН2СН3, ОСН3, CF3, OCF3, CF2H и OCF2H.
В некоторых из вышеупомянутых воплощений m равно 0. В некоторых воплощениях m равно 1. В некоторых воплощениях m равно 2.
В другом воплощении данного изобретения предложены соединение, выбранное из соединений приведенной ниже Таблицы 1, или его фармацевтически приемлемая соль. В другом воплощении данного изобретения предложено соединение из Таблицы 1, имеющее Ki меньше 100 нМ в биохимическом анализе киназы RIP1 (RIP1K) или анализе с применением клеток, в том числе таком, который описан в данной заявке. В другом воплощении соединение из Таблицы 1 имеет Ki меньше 50 нМ биохимическом анализе RIP1K или анализе с применением клеток, в том числе таком, который описан в данной заявке. В еще одном воплощении соединение из Таблицы 1 имеет Ki меньше 25 нМ биохимическом анализе RIP1K или анализе с применением клеток, в том числе таком, который описан в данной заявке. В еще одном воплощении соединение из Таблицы 1 имеет Ki меньше 10 нМ биохимическом анализе RIP1K или анализе с применением клеток, в том числе таком, который описан в данной заявке.
В другом воплощении данного изобретения предложены соединение, выбранное из соединений приведенной ниже Таблицы 2, или его фармацевтически приемлемая соль. В другом воплощении данного изобретения предложено соединение из Таблицы 2, имеющее Ki меньше 100 нМ биохимическом анализе RIP1K или анализе с применением клеток, в том числе таком, который описан в данной заявке. В другом воплощении соединение из Таблицы 2 имеет Ki меньше 50 нМ биохимическом анализе RIP1K или анализе с применением клеток, в том числе таком, который описан в данной заявке. В еще одном воплощении соединение из Таблицы 2 имеет Ki меньше 25 нМ биохимическом анализе RIP1K или анализе с применением клеток, в том числе таком, который описан в данной заявке. В еще одном воплощении соединение из Таблицы 2 имеет Ki меньше 10 нМ биохимическом анализе RIP1K или анализе с применением клеток, в том числе таком, который описан в данной заявке.
В некоторых воплощениях данного изобретения предложен индивидуальный стереоизомер соединения из Таблицы 1 или Таблицы 2, охарактеризованный со ссылкой на разделение и его выделение с использованием хиральной хроматографии (например, описанной в примерах хиральной сверхкритической жидкостной хроматографией (SFC)).
В некоторых воплощениях данного изобретения предложены фармацевтические композиции, содержащие соединение формулы I, описанное в любом из вышеупомянутых воплощений, или его фармацевтически приемлемую соль и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. Конкретные воплощения включают фармацевтические композиции, подходящие для пероральной доставки.
Также согласно данному изобретению предложены пероральные композиции на основе соединения формулы I, описанного в любом из указанных выше воплощений, или его фармацевтически приемлемой соли и одного или более чем одного фармацевтически приемлемого носителя или эксципиента, подходящего для пероральной доставки.
В некоторых воплощениях данного изобретения предложены применения соединения формулы I, описанного в любом из указанных выше воплощений, или его фармацевтически приемлемой соли для лечения нейродегенеративных заболеваний и расстройств. В некоторых воплощениях подлежащими лечению заболеваниями и расстройствами являются синуклеопатии, такие как болезнь Паркинсона, деменция с тельцами Леви, множественная системная атрофия, синдромы "паркинсонизм-плюс". В некоторых воплощениях подлежащими лечению заболеваниями и расстройствами являются таупатии, такие как болезнь Альцгеймера и лобно-височная деменция. В некоторых воплощениях подлежащими лечению заболеваниями и расстройствами являются демиелинизирующие заболевания, такие как рассеянный склероз.
В некоторых воплощениях подлежащими лечению заболеваниями и расстройствами являются другие нейродегенеративные заболевания, такие как амиотрофический боковой склероз, спинальная мышечная атрофия, первичный боковой склероз, болезнь Гентингтона, ишемия и инсульт. Дополнительные типичные подлежащие лечению нейродегенеративные заболевания, приведенные в данном описании, включают, но не ограничиваются этим, внутричерепное кровоизлияние, внутримозговое кровоизлияние, мышечную дистрофию, прогрессирующую мышечную атрофию, псевдобульбарный паралич, прогрессирующий бульбарный паралич, спинальную мышечную атрофию, врожденную мышечную атрофию, периферические нейропатии, прогрессирующий супрануклеарный паралич, кортикобазальную дегенерацию и демиелинизирующие заболевания.
В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является болезнь Альцгеймера. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является болезнь Паркинсона. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является болезнь Гентингтона. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является рассеянный склероз. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является амиотрофический боковой склероз (ALS). В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является спинальная мышечная атрофия (SMA).
В некоторых воплощениях данного изобретения предложены применения соединения формулы I, описанного в любом из указанных выше воплощений, или его фармацевтически приемлемой соли для лечения воспалительных заболеваний и расстройств. В некоторых воплощениях подлежащее лечению заболевание или расстройство выбрано из группы, состоящей из воспалительных заболеваний кишечника (включая болезнь Крона и язвенный колит), псориаза, отслоения сетчатки, пигментного ретинита, макулярной дегенерации, панкреатита, атопического дерматита, артрита (в том числе ревматоидного артрита, остеоартрита, спондилоартрита, подагры, ювенильного идиопатического артрита с системным началом (SoJIA), псориатического артрита), системной красной волчанки (SLE), синдрома Шегрена, системной склеродермии, антифосфолипидного синдрома (APS), васкулита, поражений/заболеваний печени (в результате неалкогольного стеато гепатита, алкогольного стеатогепатита, аутоиммунного гепатита, аутоиммунных заболеваний печени и желчевыводящих путей, первичного склерозирующего холангита (PSC), интоксикации ацетаминофеном, из-за гепатотоксичности), поражения/повреждения почек (в результате нефрита, трансплантации почки, хирургического вмешательства, введения нефротоксичных лекарственных средств, например, цисплатина, острого поражения почек (AKI), глютеновой болезни, аутоиммунной идиопатической тромбоцитопенической пурпуры, отторжения трансплантата, ишемического/реперфузионного повреждения цельных органов, сепсиса, синдрома системной воспалительной реакции (SIRS), нарушения мозгового кровообращения (CVA, инсульта), инфаркта миокарда (MI), атеросклероза, болезни Гентингтона, болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, амиотрофического бокового склероза (ALS), спинальной мышечной атрофии (SMA), аллергических заболеваний (в том числе астмы и атопического дерматита), рассеянного склероза, диабета I типа, гранулематоза Вегенера, легочного саркоидоза, болезни Бехчета, ассоциированного с интерлейкин-1-превращающим ферментом (ICE, также известным как каспаза-1) лихорадочного синдрома, хронической обструктивной болезни легких (COPD), ассоциированного с рецептором фактора некроза опухоли периодического синдрома (TRAPS), периодонтита, синдрома дефицита гена NEMO (синдрома дефицита гена эссенциального модулятора NF-каппа-В (также известного как IKK-гамма или IKKG)), дефицита HOIL-1 (дефицита убиквитин-лигазы 1, распознающей гем-окисленный IRP2 (белок 2, регулирующий обмен железа) (также известный как RBCK1)), синдрома дефицита комплекса сборки линейных цепей убиквитина (LUBAC), гематологических злокачественных новообразований и злокачественных новообразований цельных органов, бактериальных инфекций и вирусных инфекций (таких как туберкулез и грипп) и лизосомных болезней накопления (в частности, болезни Гоше и в том числе GM2-ганглиозидоза, альфа-маннозидоза, аспартилглюкозаминурии, болезни накопления эфиров холестерина, хронической недостаточности гексозаминидазы А, цистиноза, болезни Данона, болезни Фабри, болезни Фарбера, фукозидоза, галактосиалидоза, GM1-ганглиозидоза, муколипидоза, болезни накопления свободных сиаловых кислот у детей, ювенильной формы недостаточности гексозаминидазы А, болезни Краббе, дефицита лизосомной кислой липазы, метахроматической лейкодистрофии, мукополисахаридоза, множественной сульфатазной недостаточности, болезни Ниманна-Пика, нейронального цероидного липофусциноза, болезни Помпе, пикнодизостоза, болезни Сандхоффа, болезни Шиндлера, болезни накопления сиаловых кислот, болезни Тея-Сакса и Вольмана).
В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является воспалительное заболевание кишечника. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является болезнь Крона. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является язвенный колит. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является глаукома. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является псориаз. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является ревматоидный артрит. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является спондилоартрит. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является ювенильный идиопатический артрит. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является остеоартрит.
В некоторых воплощениях данного изобретения предложены способы лечения или предупреждения заболевания или расстройства терапевтически эффективным количеством соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, при этом заболевание или расстройство ассоциировано с воспалением и/или некроптозом. В некоторых воплощениях указанное заболевание или расстройство выбрано из конкретных заболеваний и расстройств, упомянутых в данном описании.
В некоторых воплощениях данного изобретения предложены способы ингибирования активности киназы RIP1 путем приведения в контакт клетки с соединением формулы I или его фармацевтически приемлемой солью.
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ И ВВЕДЕНИЕ
Согласно данному изобретению предложены фармацевтические композиции или лекарственные средства, содержащие соединения по изобретению (или стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры, сольваты, метаболиты, изотопы, их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства) и терапевтически инертный носитель, разбавитель или эксципиент, а также способы применения соединений по изобретению для приготовления таких композиций и лекарственных средств. В одном из примеров на основе соединений формулы I могут быть приготовлены композиции путем смешивания при температуре окружающей среды при соответствующем рН и желаемой степени чистоты с физиологически приемлемыми носителями, т.е. носителями, которые являются нетоксичными для реципиентов, в дозировках и концентрациях, применяемых в форме галенова препарата для введения. Значение рН композиции зависит главным образом от конкретного применения и концентрации соединения, но предпочтительно везде изменяется в диапазоне от примерно 3 до примерно 8. В одном из примеров готовят композицию на основе соединения формулы I в ацетатном буфере, при рН 5. В другом воплощении соединения формулы I являются стерильными. Соединение можно хранить, например, в виде твердой или аморфной композиции, в виде лиофилизированной композиции или в виде водного раствора.
Композиции готовят, дозируют и вводят способом, соответствующим надлежащей медицинской практике. Факторы, рассматриваемые в этом контексте, включают конкретное подвергаемое лечению расстройство, конкретное подвергаемое лечению млекопитающее, клиническое состояние отдельного пациента, причину расстройства, место доставки агента, способ введения, схему введения и другие факторы, известные врачам. В некоторых воплощениях "эффективное количество" подлежащего введению соединения будет обусловлено такого рода соображениями и составляет минимальное количество, которое необходимо для ингибирования активности киназы RIP1 с целью оказания терапевтического эффекта на подвергаемого лечению млекопитающего. К тому же, такое эффективное количество может быть ниже количества, являющегося токсичным по отношению к нормальным клеткам или организму млекопитающего в целом.
В одном из примеров фармацевтически эффективное количество соединения по изобретению, вводимого внутривенно или парентерально, будет находиться в диапазоне доз примерно от 0,1 до 100 мг/кг, альтернативно примерно от 0,1 до 20 мг/кг массы тела пациента в сутки или альтернативно примерно от 0,3 до 15 мг/кг/сутки.
В другом воплощении пероральные стандартные лекарственные формы, такие как таблетки и капсулы, предпочтительно содержат от примерно 1 до примерно 1000 мг (например, 1 мг; 5 мг; 10 мг; 15 мг; 20 мг; 25 мг; 30 мг; 40 мг; 50 мг; 100 мг; 200 мг; 250 мг; 400 мг; 500 мг; 600 мг; 700 мг; 800 мг; 900 мг; или 1000 мг) соединения по изобретению. В некоторых воплощениях суточную дозу принимают в виде разовой суточной дозы или в дозах, разделенных для приема от двух до шести раз в сутки, или в форме с длительным высвобождением. В случае взрослого человека массой 70 кг общая суточная доза обычно будет составлять от примерно 7 мг до примерно 1400 мг. Этот режим введения может быть скорректирован для получения оптимального терапевтического ответа. Соединения можно вводить по схеме от 1 до 4 раз в сутки, предпочтительно один или два раза в сутки.
В некоторых воплощениях низкую дозу соединения по изобретению вводят для того, чтобы обеспечить терапевтическую пользу при одновременном сведении к минимуму или предупреждении неблагоприятных эффектов.
Соединения по изобретению можно вводить любым подходящим способом, включая пероральное, местное (в том числе трансбуккальное и сублингвальное), ректальное, вагинальное, трансдермальное, парентеральное, подкожное, внутрибрюшинное, внутрилегочное, интрадермальное, интратекальное, эпидуральное и интраназальное введение, и, если необходимо для местного лечения, введение в область поражения. Парентеральные инфузии включают внутримышечное, внутривенное, интраартериальное, внутрибрюшинное или подкожное введение. В конкретных воплощениях соединение формулы I вводят перорально. В других конкретных воплощениях соединение формулы I вводят внутривенно.
Соединения по настоящему изобретению можно вводить в любой удобной для введения форме, например, в таблетках, порошках, капсулах, растворах, дисперсиях, суспензиях, сиропах, спреях, суппозиториях, гелях, эмульсиях, пластырях и так далее. Такие композиции могут содержать компоненты, традиционно используемые в фармацевтических препаратах, например, разбавители, носители, модификаторы рН, подсластители, объемообразующие агенты и другие активные агенты.
Типичную композицию готовят путем смешивания соединения по настоящему изобретению и носителя или эксципиента. Подходящие носители и эксципиенты хорошо известны специалистам в данной области техники и описаны подробно, например, в Ansel, Howard С., et al., Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems. Philadelphia: Lippincott, Williams and Wilkins, 2004; Gennaro, Alfonso R., et al. Remington: The Science and Practice of Pharmacy. Philadelphia: Lippincott, Williams and Wilkins, 2000; и Rowe, Raymond C. Handbook of Pharmaceutical Excipients. Chicago, Pharmaceutical Press, 2005. Композиции также могут включать в себя одно или более чем одно из следующего: буферы, стабилизирующие агенты, поверхностно-активные вещества, увлажняющие агенты, смазывающие вещества, эмульгаторы, суспендирующие агенты, консерванты, антиоксиданты, придающие непрозрачность агенты, глиданты, технологические добавки, красители, подсластители, отдушки, корригенты, разбавители и другие известные вспомогательные вещества для обеспечения наилучшей презентации лекарственного средства (т.е. соединения по настоящему изобретению или фармацевтической композиции на его основе) или содействия производству фармацевтического продукта (т.е. лекарственного средства).
Подходящие носители, разбавители и эксципиенты хорошо известны специалистам в данной области техники и включают такие вещества, как углеводы, воски, растворимые и/или набухаемые в воде полимеры, гидрофильные или гидрофобные вещества, желатин, масла, растворители, воду и тому подобное. Выбор конкретного используемого носителя, разбавителя или эксципиента будет зависеть от средства и назначения, по которому соединение по настоящему изобретению будет применяться. Как правило, растворители выбирают из растворителей, признанных специалистами в данной области техники безвредными (GRAS) для введения млекопитающему. В общем случае, безвредными растворителями являются нетоксичные водные растворители, такие как вода и другие нетоксичные растворители, которые растворяются в воде или смешиваются с водой. Подходящие водные растворители включают воду, этанол, пропиленгликоль, полиэтиленгликоли (например, ПЭГ400, ПЭГ300) и т.д. и их смеси. Композиции также могут включать в себя одно или более чем одно из следующего: буферы, стабилизирующие агенты, поверхностно-активные вещества, увлажняющие агенты, смазывающие вещества, эмульгаторы, суспендирующие агенты, консерванты, антиоксиданты, придающие непрозрачность агенты, глиданты, технологические добавки, красители, подсластители, отдушки, корригенты и другие известные вспомогательные вещества для обеспечения наилучшей презентации лекарственного средства (т.е. соединения по настоящему изобретению или фармацевтической композиции на его основе) или содействия производству фармацевтического продукта (т.е. лекарственного средства).
Приемлемые разбавители, носители, эксципиенты и стабилизаторы нетоксичны для реципиентов в применяемых дозировках и концентрациях и включают буферы, как например, на основе фосфата, цитрата и других органических кислот; антиоксиданты, в том числе аскорбиновую кислоту и метионин; консерванты (такие как октадецилдиметилбензилхлорид аммония; гексаметония хлорид; бензалкония хлорид, бензетония хлорид; фенол, бутиловый или бензиловый спирт; алкилпарабены, такие как метил- или пропилпарабен; катехол; резорцин; циклогексанол; 3-пентанол и м-крезол); низкомолекулярные (менее чем примерно 10 остатков) полипептиды; белки, такие как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон; аминокислоты, такие как глицин, глутамин, аспарагин, гистидин, аргинин или лизин; моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включая глюкозу, маннозу или декстрины; хелатирующие агенты, такие как этилендиаминтетрауксусная кислота (EDTA); сахара, такие как сахароза, маннит, трегалоза или сорбит; солеобразующие противоионы, такие как натрий; комплексы с металлами (например, комплексы Zn-белок) и/или неионные поверхностно-активные вещества, такие как TWEEN™, PLURONICS™ или полиэтиленгликоль (ПЭГ). Кроме того, активный фармацевтический ингредиент по изобретению (например, соединение формулы I или его воплощение) может быть заключен в микрокапсулы, приготовленные, например, с использованием методов коацервации или путем межфазной полимеризации, например, в микрокапсулы из гидроксиметилцеллюлозы или желатина и микрокапсулы из поли-(метилметакрилата), соответственно, в коллоидные системы лекарственной доставки (например, липосомы, микросферы из альбумина, микроэмульсии, наночастицы и нанокапсулы) или в макроэмульсии. Такие методы описаны в Remington: The Science and Practice of Pharmacy: Remington the Science and Practice of Pharmacy (2005) 21st Edition, Lippincott Williams and Wilkins, Philidelphia, PA.
На основе соединения по изобретению (например, соединения формулы I или его воплощения) можно приготовить препараты с длительным высвобождением. Подходящие примеры препаратов с длительным высвобождением включают полупроницаемые матрицы из гидрофобных полимеров в твердой форме, содержащих соединение формулы I или его любое воплощение, причем эти матрицы существуют в форме штампованных изделий, например, пленок или микрокапсул. Примеры матриц с длительным высвобождением включают сложные полиэфиры, гидрогели (например, поли(2-гидроксиэтил-метакрилат) или поли(виниловый спирт)), полилактиды (патент США №3773919), сополимеры L-глутаминовой кислоты и гамма-этил-L-глутамата (Sidman et al., Biopolymers, 22: 547, 1983), неразлагаемый этилен-винилацетат (Langer et al., J. Biomed. Mater. Res., 15: 167, 1981), разлагаемые сополимеры молочной кислоты и гликолевой кислоты, такие как LUPRON DEPOT™ (инъецируемые микросферы, состоящие из сополимера молочной кислоты и гликолевой кислоты и ацетата лейпролида), и поли-D-(-)-3-гидроксимасляную кислоту (ЕР 133988А). Композиции с длительным высвобождением также включают заключенные в липосомы соединения, которые можно приготовить способами, известными per se (Epstein et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82: 3688, 1985; Hwang et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77: 4030, 1980; патенты США №№4485045 и 4544545; и ЕР 102324А). Как правило, липосомы представляют собой небольшие (примерно 200-800 ангстрем) везикулы однослойного типа, липидный состав которых характеризуется наличием более чем примерно 30 моль% холестерина, при этом данную выбираемую пропорцию корректируют для достижения оптимальной терапии.
В одном из примеров на основе соединений формулы I или их воплощения могут быть приготовлены композиции путем смешивания при температуре окружающей среды при соответствующем рН и желаемой степени чистоты с физиологически приемлемыми носителями, т.е. носителями, которые являются нетоксичными для реципиентов, в дозировках и концентрациях, применяемых в форме галенова препарата для введения. Значение рН композиции зависит главным образом от конкретного применения и концентрации соединения, но предпочтительно везде изменяется в диапазоне от примерно 3 до примерно 8. В одном из примеров готовят композицию на основе соединения формулы I (или его воплощения) в ацетатном буфере, при рН 5. В другом воплощении соединения формулы I или их воплощения являются стерильными. Соединение можно хранить, например, в виде твердой или аморфной композиции, в виде лиофилизированной композиции или в виде водного раствора.
В качестве примера подходящей для перорального введения лекарственной формы по данному изобретению предложена таблетка, содержащая от приблизительно 1 до приблизительно 500 мг (например, приблизительно 1 мг, 5 мг, 10 мг, 25 мг, 30 мг, 50 мг, 80 мг, 100 мг, 150 мг, 250 мг, 300 мг и 500 мг) соединения по изобретению в смеси с подходящими количествами безводной лактозы, натриевой соли кроскармелозы, поливинил пиррол идона (PVP) K30 и стеарата магния. Сначала смешивают вместе измельченные ингредиенты и затем перемешивают с раствором PVP. Полученную композицию можно сушить, подвергать гранулированию, смешивать со стеаратом магния и подвергать прессованию в форму таблетки, используя традиционное оборудование.
Композиции на основе соединения по изобретению (например, соединения формулы I или его воплощения) могут быть в форме стерильного препарата для инъекций, такого как стерильная водная или масляная суспензия для инъекций. Эта суспензия может быть приготовлена согласно известным в данном области способам с использованием таких подходящих диспергирующих или увлажняющих агентов и суспендирующих агентов, которые упомянуты выше. Стерильный препарат для инъекций также может представлять собой стерильный(ую) инъецируемый(ую) раствор или суспензию в нетоксичном приемлемом для парентерального введения разбавителе или растворителе, как например, раствор в 1,3-бутандиоле, или может быть приготовлен из лиофилизированного порошка. Среди приемлемых разбавителей и растворителей, которые могут быть использованы, находится вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Помимо этого, в качестве растворителя или суспендирующей среды традиционно можно использовать стерильные нелетучие масла. Для этой цели может быть использовано любое маловязкое нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. В дополнение к этому, для приготовления инъецируемых средств таким же образом могут быть использованы жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.
Количество активного ингредиента, которое можно комбинировать с веществом-носителем для приготовления разовой лекарственной формы, будет варьировать в зависимости от подвергаемого лечению реципиента и конкретного способа введения. Например, композиция с замедленным высвобождением, предназначенная для перорального введения людям, может содержать приблизительно 1-1000 мг активного вещества в смеси с соответствующим и подходящим количеством вещества-носителя, которое может варьировать от примерно 5 до примерно 95% от массы всей композиции (масса:масса). Фармацевтическая композиция может быть приготовлена таким образом, чтобы беспрепятственно обеспечить введение измеряемого количества. Например, водный раствор, предназначенный для внутривенной инфузии, может содержать от примерно 3 до 500 мкг активного ингредиента на один миллилитр раствора с тем, чтобы можно было осуществлять инфузию подходящего объема со скоростью примерно 30 мл/ч.
Композиции, подходящие для парентерального введения, включают водные и неводные стерильные растворы для инъекций, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостатические средства и растворенные вещества, делающие композицию изотоничной крови предполагаемого реципиента; и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут включать суспендирующие агенты и загустители.
Композиции могут быть упакованы в однодозовые или многодозовые контейнеры, например, герметично закрытые ампулы и флаконы, и их можно хранить в высушенном сублимационной сушкой (лиофилизированном) состоянии, требующем только добавления стерильного жидкого носителя, например воды, для инъекций непосредственно перед применением. Экстемпоральные растворы и суспензии для инъекций готовят из стерильных порошков, гранул и таблеток описанного ранее вида.
Таким образом, одно из воплощений включает фармацевтическую композицию, содержащую соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль. Следующее воплощение включает фармацевтическую композицию, содержащую соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль вместе с фармацевтически приемлемым носителем или эксципиентом.
Если мишень для связывания расположена в головном мозге, то предусмотрены некоторые воплощения изобретения для прохождения соединения формулы I (или его воплощения) через гематоэнцефалический барьер. В этих воплощениях соединения, предложенные в данном изобретении, демонстрируют достаточную степень проникновения в головной мозг в качестве возможных терапевтических средств при неврологических заболеваниях. В некоторых воплощениях степень проникновения в головной мозг определяют, оценивая соотношение содержания свободного соединения в головном мозге/плазме крови (Bu/Pu) по результатам измерений в фармакокинетических исследованиях in vivo на грызунах или другими известными специалистам в данной области техники методами (см., например, Liu, X. et al., J. Pharmacol. Exp. Therap., 325: 349-56, 2008).
Некоторые неврологические заболевания связаны с повышением проницаемости гематоэнцефалического барьера, поэтому соединение формулы I (или его воплощение) может легко проникать в головной мозг. Для случая, когда гематоэнцефалический барьер сохраняется интактным, существует несколько известных в данной области техники подходов для транспортировки через него молекул, включая, но не ограничиваясь этим, физические способы, основанные на применении липидов способы и способы, обусловленные рецепторами и каналами. Физические способы транспортировки соединения формулы I (или его воплощения) через гематоэнцефалический барьер включают, но не ограничиваются этим, проникновение всецело в обход гематоэнцефалического барьера или проникновение путем создания отверстий в гематоэнцефалическом барьере.
Обходные способы включают, но не ограничиваются этим, прямую инъекцию в головной мозг (см., например, Papanastassiou et al., Gene Therapy, 9: 398-406, 2002), доставку посредством инфузии в интерстициальное пространство/конвекционную доставку (см., например, Bobo et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91: 2076-2080, 1994) и имплантацию устройства доставки в головной мозг (см., например, Gill et al., Nature Med., 9: 589-595, 2003; и Gliadel Wafers™, Guildford).
Способы создания отверстий в данном барьере включают, но не ограничиваются этим, применение ультразвуковой обработки (см., например, публикацию заявки на патент США №2002/0038086), осмотического давления (например, путем введения гипертонического раствора маннита (Neuwelt, Е.А., Implication of the Blood-Brain Barrier and its Manipulation, Volumes 1 and 2, N.Y., 1989)) и пермеабилизации под действием, например, брадикинина или пермеабилизатора А-7 (см., например, патенты США №№5112596, 5268164, 5506206 и 5686416).
Основанные на применении липидов способы транспортировки соединения формулы I (или его воплощения) через гематоэнцефалический барьер включают, но не ограничиваются этим, инкапсулирование соединения формулы I или I-I (или его воплощения) в липосомы, соединенные со связывающими фрагментами антитела, которые связываются с рецепторами на эндотелии сосудов гематоэнцефалического барьера (см., например, публикацию заявки на патент США №20020025313), и нанесение соединения формулы I (или его воплощения) на частицы липопротеина низкой плотности (см., например, публикацию заявки на патент США №2004/0204354) или на аролипопротеин Е (см., например, публикацию заявки на патент США №2004/0131692).
Обусловленные рецепторами и каналами способы транспортировки соединения формулы I (или его воплощения) через гематоэнцефалический барьер включают, но не ограничиваются этим, применение блокаторов рецепторов глюкокортикоидов для повышения проницаемости гематоэнцефалического барьера (см., например, публикацию заявок на патент США №№2002/0065259, 2003/0162695 и 2005/0124533); активацию калиевых каналов (см., например, публикацию заявки на патент США №2005/0089473), ингибирование АТФ-связывающих кассетных (ABC) транспортеров лекарственных средств (см., например, публикацию заявки на патент США №2003/0073713); нанесение соединения формулы I или I-I (или его воплощения) с трансферрином и модулирование активности одного или более рецепторов трансферина (см., например, публикацию заявки на патент США №2003/0129186) и катионизацию антител (см., например, патент США №5004697).
Что касается интрацеребрального применения, то в некоторых воплощениях соединения можно вводить непрерывно путем инфузии в содержащие жидкости полости центральной нервной системы (ЦНС), хотя может быть приемлемой и болюсная инъекция. Ингибиторы можно вводить в желудочки головного мозга или иным образом вводить в жидкость полостей ЦНС или цереброспинальную жидкость. Введение может быть осуществлено путем применения вживленного катетера и такого средства для непрерывного введения, как насос, или введение может быть осуществлено посредством имплантации, например, интрацеребральной имплантации в наполнителе с длительным высвобождением. Более конкретно, ингибиторы можно вводить инъекцией через имплантированные на длительный срок канюли или постоянно инфузировать с помощью осмотических мининасосов. В продаже имеются насосы для подкожного введения, с помощью которых белки доставляют через небольшие подводящие трубки в желудочки головного мозга. В новых современных насосах можно осуществлять повторное заполнение через кожу и устанавливать скорость доставки с их помощью без хирургического вмешательства. Примерами подходящих протоколов введения и систем доставки с вовлечением накачивающего устройства, применяемого для подкожного введения, или непрерывной интрацеребровентрикулярной инфузии через полностью имплантированную систему доставки лекарственных средств являются такие, которые используются для введения дофамина, агонистов дофаминовых рецепторов и холинергических агонистов пациентам с болезнью Альцгеймера и животным, являющимся моделями болезни Паркинсона, как описано в Harbaugh, J. Neural. Transm. Suppl., 24: 271, 1987; и DeYebenes et al., Mov. Disord., 2: 143, 1987.
ПОКАЗАНИЯ И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ
Соединения по изобретению ингибируют активность киназы RIP1. Соответственно, соединения по изобретению полезны для лечения заболеваний и расстройств, опосредуемых этим путем и ассоциированных с воспалением и/или некроптотической гибелью клеток.
В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является нейродегенеративное заболевание или расстройство. В некоторых воплощениях подлежащими лечению заболеваниями и расстройствами являются синуклеопатии, такие как болезнь Паркинсона, деменция с тельцами Леви, множественная системная атрофия, синдромы "паркинсонизм-плюс". В некоторых воплощениях подлежащими лечению заболеваниями и расстройствами являются таупатии, такие как болезнь Альцгеймера и лобно-височная деменция. В некоторых воплощениях подлежащими лечению заболеваниями и расстройствами являются демиелинизирующие заболевания, такие как рассеянный склероз.
В некоторых воплощениях подлежащими лечению заболеваниями и расстройствами являются другие нейродегенеративные заболевания, такие как амиотрофический боковой склероз, спинальная мышечная атрофия, первичный боковой склероз, болезнь Гентингтона, ишемия и инсульт. Дополнительные типичные нейродегенеративные заболевания, подлежащие лечению, которые приведены в данном описании, включают, но не ограничиваются этим, внутричерепное кровоизлияние, внутримозговое кровоизлияние, мышечную дистрофию, прогрессирующую мышечную атрофию, псевдобульбарный паралич, прогрессирующий бульбарный паралич, спинальную мышечную атрофию, врожденную мышечную атрофию, периферические нейропатии, прогрессирующий супрануклеарный паралич, кортикобазальную дегенерацию и демиелинизирующие заболевания.
В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является болезнь Альцгеймера. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является болезнь Паркинсона. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является болезнь Гентингтона. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является рассеянный склероз. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является амиотрофический боковой склероз (ALS). В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является спинальная мышечная атрофия (SMA).
В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является воспалительное заболевание или расстройство. В некоторых воплощениях подлежащее лечению заболевание или расстройство выбрано из группы, состоящей из воспалительных заболеваний кишечника (включая болезнь Крона и язвенный колит), псориаза, отслоения сетчатки, пигментного ретинита, макулярной дегенерации, панкреатита, атопического дерматита, артрита (включая ревматоидный артрит, остеоартрит, спондилоартрит, подагры, ювенильного идиопатического артрита с системным началом (SoJIA), псориатический артрит), системной красной волчанки (SLE), синдрома Шегрена, системной склеродермии, антифосфолипидного синдрома (APS), васкулита, поражений/заболеваний печени (в результате неалкогольного стеатогепатита, алкогольного стеатогепатита, аутоиммунного гепатита, аутоиммунных заболеваний печени и желчевыводящих путей, первичного склерозирующего холангита (PSC), интоксикации ацетаминофеном, из-за гепатотоксичности), поражения/повреждения почек (в результате нефрита, трансплантации почки, хирургического вмешательства, введения нефротоксичных лекарственных средств, например, цисплатина, острого поражения почек (AKI)), глютеновой болезни, аутоиммунной идиопатической тромбоцитопенической пурпуры, отторжения трансплантата, ишемического/реперфузионного повреждения цельных органов, сепсиса, синдрома системной воспалительной реакции (SIRS), нарушения мозгового кровообращения (CVA, инсульта), инфаркта миокарда (MI), атеросклероза, болезни Гентингтона, болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, амиотрофического бокового склероза (ALS), спинальной мышечной атрофии (SMA), аллергических заболеваний (включая астму и атопический дерматит), рассеянного склероза, диабета I типа, гранулематоза Вегенера, легочного саркоидоза, болезни Бехчета, ассоциированного с интерлейкин-1-превращающим ферментом (ICE, также известным как каспаза-1) лихорадочного синдрома, хронической обструктивной болезни легких (COPD), ассоциированного с рецептором фактора некроза опухоли периодического синдрома (TRAPS), периодонтита, синдрома дефицита гена NEMO (синдрома дефицита гена эссенциального модулятора NF-каппа-В (также известного как IKK-гамма или IKKG)), дефицита HOIL-1 (дефицита убиквитин-лигазы 1, распознающей гем-окисленный IRP2 (также известный как RBCK1)), синдрома дефицита комплекса сборки линейных цепей убиквитина (LUBAC), гематологических злокачественных новообразований и злокачественных новообразований цельных органов, бактериальных инфекций и вирусных инфекций (таких как туберкулез и грипп) и лизосомных болезней накопления (в частности, болезни Гоше и в том числе GM2-ганглиозидоза, альфа-маннозидоза, аспартилглюкозаминурии, болезни накопления эфиров холестерина, хронической недостаточности гексозаминидазы А, цистиноза, болезни Данона, болезни Фабри, болезни Фарбера, фукозидоза, галактосиалидоза, GM1-ганглиозидоза, муколипидоза, болезни накопления свободных сиаловых кислот у детей, ювенильной формы недостаточности гексозаминидазы А, болезни Краббе, дефицита лизосомной кислой липазы, метахроматической лейкодистрофии, мукополисахаридоза, множественной сульфатазной недостаточности, болезни Ниманна-Пика, нейронального цероидного липофусциноза, болезни Помпе, пикнодизостоза, болезни Сандхоффа, болезни Шиндлера, болезни накопления сиаловых кислот, болезни Тея-Сакса и Вольмана).
В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является воспалительное заболевание кишечника. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является болезнь Крона. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является язвенный колит. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является глаукома. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является псориаз. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является ревматоидный артрит. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является спондилоартрит. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является ювенильный идиопатический артрит. В некоторых воплощениях подлежащим лечению заболеванием или расстройством является остеоартрит.
В некоторых воплощениях предложен способ лечения по данному изобретению для лечения одного или более симптомов заболевания или расстройства из приведенного выше списка.
Также согласно данному изобретению предложено применение соединения по изобретению в терапии. В некоторых воплощениях данного изобретения предложено применение соединения по изобретению для лечения или предупреждения вышеупомянутых заболеваний и расстройств. Также согласно данному изобретению предложено применение соединения по изобретению для приготовления лекарственного средства для лечения или предупреждения вышеупомянутых заболеваний и расстройств.
Также согласно данному изобретению предложен способ лечения заболевания или расстройства, указанного выше, у млекопитающего, нуждающегося в таком лечении, при этом данный способ включает введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. В некоторых воплощениях млекопитающим является человек.
Также согласно данному изобретению предложен способ лечения симптома заболевания или расстройства у млекопитающего, нуждающегося в таком лечении, причем указанное заболевание или расстройство выбрано из группы, состоящей из воспалительных расстройств кишечника (IBD), синдрома раздраженного кишечника (IBS), болезни Крона, язвенного колита, инфаркта миокарда, инсульта, травматического повреждения головного мозга, атеросклероза, ишемического/реперфузионного повреждения почек, печени и легких, цисплатин-индуцированного повреждения почек, сепсиса, синдрома системной воспалительной реакции (SIRS), панкреатита, псориаза, пигментного ретинита, дегенеративных изменений сетчатки, хронического заболевания почек, острого респираторного дистресс-синдрома (ARDS) и хронической обструктивной болезни легких (COPD), при этом способ включает введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.
Также согласно данному изобретению предложен способ лечения заболевания или расстройства у пациента-человека, нуждающегося в таком лечении, причем указанное заболевание или расстройство выбрано из заболеваний или расстройств, приведенных выше, при этом способ включает пероральное введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, в качестве перорально приемлемой фармацевтической композиции.
КОМБИНИРОВАННАЯ ТЕРАПИЯ
Соединения по изобретению можно комбинировать с одним или более чем одним другим соединением по изобретению либо с одним или более чем одним другим терапевтическим агентом в виде любой их комбинации при лечении заболеваний и расстройств, приведенных в данном описании. Например, соединение по изобретению можно вводить совместно, последовательно или раздельно в комбинации с другими терапевтическими агентами, которые, как известно, полезны для лечения заболевания или расстройства, выбранного из перечисленных выше.
Использованный в данном описании термин "комбинация" относится к любой смеси либо любому сочетанию одного или более соединений по изобретению и одного или более чем одного другого соединения по изобретению либо одного или более чем одного дополнительного терапевтического агента. Если из контекста не следует иное, термин "комбинация" может относиться к одновременной или последовательной доставке соединения по изобретению вместе с одним или более чем одним терапевтическим агентом. Если из контекста не следует иное, "комбинация" может включать лекарственные формы на основе соединения по изобретению с другим терапевтическим агентом. Если из контекста не следует иное, "комбинация" может относиться к путям введения соединения по изобретению с другим терапевтическим агентом. Если из контекста не следует иное, "комбинация" может включать композиции на основе соединения по изобретению вместе с другим терапевтическим агентом. Лекарственные формы, пути введения и фармацевтические композиции включают, но не ограничиваются этим, все вышеперечисленное, как это изложено в данном описании.
В некоторых воплощениях соединение, предложенное в данном изобретении, может быть скомбинировано с другим терапевтически активным агентом, упомянутым в заявке WO 2016/027253, содержание которой тем самым включено посредством ссылки во всей своей полноте. В таких воплощениях соединение, которое ингибирует киназу RIP1, в комбинациях, упомянутых в заявке WO 2016/027253, заменяют на соединение формулы I по настоящему изобретению.
В некоторых воплощениях соединение, предложенное в данном изобретении, может быть скомбинировано с ингибитором DLK (киназа с двойной лейциновой застежкой) для лечения нейродегенеративных заболеваний и расстройств, таких как перечисленные где-либо еще в данном описании, и включая, но не ограничиваясь этим следующие: болезнь Паркинсона, деменцию с тельцами Леви, множественную системную атрофию, синдромы "паркинсонизм-плюс", болезнь Альцгеймера, лобно-височную деменцию, демиелинизирующие заболевания, такие как рассеянный склероз, амиотрофический боковой склероз, спинальную мышечную атрофию, первичный боковой склероз, болезнь Гентингтона, ишемию и инсульт, внутричерепное кровоизлияние, внутримозговое кровоизлияние, мышечную дистрофию, прогрессирующую мышечную атрофию, псевдобульбарный паралич, прогрессирующий бульбарный паралич, спинальную мышечную атрофию, врожденную мышечную атрофию, периферические нейропатии, прогрессирующий супрануклеарный паралич и кортикобазальную дегенерацию. Ингибиторы DLK описаны, например, в WO 2013/174780, WO 2014/177524, WO 2014/177060, WO 2014/111496, WO 2015/091889 и WO 2016/142310.
ПРИМЕРЫ
Данное изобретение будет более понятно со ссылкой на следующие далее примеры. Их не следует, однако, истолковывать в качестве ограничения объема данного изобретения.
Эти примеры служат руководством для специалиста в данной области для получения и применения соединений, композиций и способов по изобретению. Несмотря на то, что описаны конкретные воплощения настоящего изобретения, специалисту в данной области техники будет очевидно, что могут быть выполнены различные изменения и модификации без отклонения от сущности и объема данного изобретения.
Описанные в примерах химические реакции легко могут быть адаптированы для получения ряда других соединений по изобретению, и считается, что альтернативные способы получения соединений по изобретению входят в объем данного изобретения. Например, синтез не проиллюстрированных примерами соединений по изобретению может быть успешно осуществлен с использованием модификаций, очевидных специалистам в данной области техники, например, путем введения соответствующей защиты на мешающую взаимодействию группу посредством использования других подходящих реагентов, известных в данной области техники, например, путем введения соответствующей защиты на мешающую взаимодействию группу посредством использования других подходящих реагентов, известных в данной области техники, но отличающихся от описанных, и/или путем выполнения обычных модификаций реакционных условий.
В приведенных ниже примерах, если не указано иное, все значения температуры даны в градусах по шкале Цельсия. Имеющиеся в продаже реагенты приобретали у таких коммерческих поставщиков, как Aldrich Chemical Company, Lancaster, TCI или Maybridge, и использовали без дополнительной очистки, если не указано иное. Приведенные ниже реакции обычно проводили при положительном давлении азота или аргона либо с использованием сушильной трубки (если не указано иное) в безводных растворителях, и реакционные колбы обычно оснащали резиновыми прокладками для введения субстратов и реагентов с использованием шприца. Стеклянную посуду сушили в сушильном шкафу и/или сушили с применением нагревания. Спектры 1Н ЯМР получали для растворов в дейтерированных растворителях CDCl3, d6-DMSO, CH3OD или d6-ацетоне (приводили в млн-1), используя в качестве референсного стандарта пики либо тетраметилсилана (TMS), либо остаточного недейтерированного растворителя. Если имеется сообщение о мультиплетностях пиков, то используют следующие аббревиатуры: s (синглет), d (дублет), t (триплет), q (квартет), m (мультиплет), br (уширенный), dd (дублет дублетов), dt (дублет триплетов). Константы спин-спинового взаимодействия, если они указаны, приводят в герцах (Гц).
Подразумевается, что все сокращения, использованные для описания реагентов, реакционных условий или оборудования, соответствуют определениям, приведенным в следующем далее списке сокращений. Химические названия отдельных соединений по изобретению обычно получали, используя программу для присвоения названий ChemDraw с возможностью определения названий структур.
Сокращения
ACN - ацетонитрил,
Boc - трет-бутоксикарбонил,
DAST - трифторид диэтиламиносеры,
DCE - 1,2-дихлорэтан,
DCM - дихлорметан,
DMF - N,N-диметилформамид,
DMSO - диметилсульфоксид,
DPPH - 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил,
HPLC - жидкостная хроматография высокого давления,
LCMS - жидкостная хроматография/масс-спектрометрия,
РСС - хлорхромат пиридиния,
RP - обращенная фаза,
RT или RT - время удерживания,
SEM - 2-(триметилсилил)этоксиметил,
SFC - сверхкритическая жидкостная хроматография,
TFA - трифторуксусная кислота,
THF - тетрагидрофуран.
Схемы синтеза
Помимо конкретных способов синтеза, изложенных ниже в примерах, другие соединения по настоящему изобретению могут быть получены, например, согласно приведенным ниже схемам синтеза.
После выполнения стадий 1-5 указанного ниже способа 9 осуществляют получение гем-дифтор-содержащих группировок согласно схеме 1.
Схема 1
Схему 2 используют для получения дополнительных соединений формулы I с разнообразием в кольце В, применяя ряд нуклеофилов, в том числе, но не ограничиваясь этим, источники галогенидов и цианидов.
Схема 2
Схему 3 используют для получения соединений формулы I, замещенных по гем-диметил-содержащему кольцу В.
Схема 3
Следующие далее промежуточные соединения, использованные в приведенных ниже примерах, получали в соответствии с методиками, описанными в заявке WO 2017/004500 (полное содержание которой включено в данное описание посредством ссылки):
Если не указано в конкретном способе, то любой применяемый N-метокси-N-метил-алкил-, -арил-, -гетероарил-содержащий или гетероциклический карбоксамид получали аналогично получению цис-2-фтор-N-метокси-N-метилциклопропанкарбоксамида, описанному ниже в способе 5.
Способ 1: примеры 1 и 2 соединений
[(1S,2S)-2-Фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и [(1R,2R)-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К охлажденному (-70°С) раствору (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (150 мг; 0,53 ммоль) и цис-2-фтор-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (157 мг; 1,06 ммоль) в тетрагидрофуране (12 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,64 мл; 1,60 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -70°С в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали посредством RP-HPLC (обращенно-фазовая HPLC) (ацетонитрила 20-45%/0,225% HCl в воде). Рацемический продукт далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
[(1S,2S)-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 3,635 мин) (4,0 мг; 2,5%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.44-7.39 (m, 3Н), 7.30-7.28 (m, 2Н), 6.20-6.18 (m, 0,5Н), 6.06-6.04 (m, 0,5Н), 5.65-5.64 (m, 1Н), 5.04-5.02 (m, 0,5Н), 4.90-4.87 (m, 0,5Н), 3.80-3.74 (m, 1Н), 3.25-3.21 (m, 1Н), 2.88-2.81 (m, 1Н), 2.03-1.96 (m, 1Н), 1.34-1.28 (m, 1Н). LCMS: RT = 1,662 мин, m/z = 290,1 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 1,662 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 290,1;
[(1R,2R)-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 2, время удерживания = 3,995 мин) (15,9 мг; 10%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.44-7.38 (m, 3Н), 7.30-7.28 (m, 2Н), 6.21-6.18 (m, 0,5Н), 6.06-6.05 (m, 0,5Н), 5.66-5.65 (m, 1Н), 5.05-5.04 (m, 0,5Н), 4.90-4.87 (m, 0,5Н), 3.82-3.74 (m, 1Н), 3.23-3.20 (m, 1Н), 2.88-2.82 (m, 1Н), 2.02-1.96 (m, 1Н), 1.34-1.30 (m, 1Н). LCMS: RT = 1,654 мин, m/z = 290,1 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 1,654 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 290,1.
Условия SFC: колонка: Chiralcel OD-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: изопропанол (с 0,05% DEA (диэтиламин)); градиент: от 5% до 40% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% В в течение 2,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки 35°С.
Способ 2: примеры 3 и 4 соединений
[(1S,2S)-2-Фторциклопропил]-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и [(1R,2R)-2-фторциклопропил]-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К охлажденному (-70°С) раствору (5R,7R)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (150 мг; 0,53 ммоль) и цис-2-фтор-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (156,5 мг; 1,06 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,64 мл; 1,60 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -70°С в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (30 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 35-65%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая [цис-2-фторциклопропил]-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (35 мг; 22,5%) в виде розового твердого вещества. Рацемический продукт разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
[(1S,2S)-2-фторциклопропил]-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 4,787 мин) (5,9 мг; 17%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.44-7.39 (m, 3Н), 7.28-7.27 (m, 2Н), 6.13-6.11 (m, 1Н), 5.99-5.97 (m, 1Н), 5.53-5.49 (m, 1Н), 3.69-3.61 (m, 1Н), 3.27-3.24 (m, 1Н), 3.03-2.96 (m, 1Н), 2.23-2.15 (m, 1Н), 1.29-1.24 (m, 1Н). LC-MS: RT = 0,846 мин, m/z = 289,9 (М+Н)+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,846 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 289,9;
[(1R,2R)-2-фторциклопропил]-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 2, время удерживания = 5,711 мин) (11,7 мг; 33%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.44-7.37 (m, 3Н), 7.28-7.27 (m, 2Н), 6.13-6.11 (m, 1Н), 5.99-5.97 (m, 1Н), 5.53-5.50 (m, 1Н), 3.69-3.63 (m, 1Н), 3.27-3.23 (m, 1Н), 3.03-2.96 (m, 1Н), 2.23-2.16 (m, 1Н), 1.29-1.24 (m, 1Н). LC-MS: RT = 0,849 мин, m/z = 289,9 (М+Н)+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,849 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 289,9.
Условия SFC: колонка: Chiralcel OD-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: изопропанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% В в течение 2,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 35°С.
Условия очистки посредством хиральной SFC и условия анализа
В методах, представленных в следующей далее таблице, растворителем А является двуокись углерода, а растворителем В является 0,1%-ный раствор NH4(водн.) в СН3ОН.
Метод SP 5
2-Гидрокси-2-метил-1-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он
Для условно обозначенного как 2-гидрокси-2-метил-1-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он (10,94 мг; выход 43%): 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.50-7.33 (m, 2Н), 7.29-7.14 (m, 2Н), 6.40-6.05 (m, 1Н), 5.81-5.63 (m, 1Н), 5.23 (s, 1Н), 2.98-2.56 (m, 1Н), 1.51 (s, 3Н), 1.48 (s, 3Н). LC-MS: RT = 4,029 мин, m/z = 290,1 (М+Н)+.
Метод SP 6
2-Гидрокси-2-метил-1-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он
Для условно обозначенного как 2-гидрокси-2-метил-1-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он (11,1 мг; выход 43%): 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.47-7.31 (m, 3Н), 7.30-7.12 (m, 2Н), 6.37-6.01 (m, 1Н), 5.82-5.53 (m, 1Н), 5.23 (s, 1Н), 2.85-2.59 (m, 1Н), 1.52-1.47 (m, 6Н). LC-MS: RT = 4,029 мин, m/z = 290,1 (М+Н)+.
Метод SP 37
2,2-Диметил-1-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он
Для условно обозначенного как 2,2-диметил-1-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он (2,84 мг; выход 48%): LC-MS: RT = 5,26 мин, m/z = 288,1 (М+Н)+.
Метод SP 38
2,2-Диметил-1-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он
Для условно обозначенного как 2,2-диметил-1-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он (4,2 мг; выход 77%): LC-MS: RT = 5,26 мин, m/z = 288,1 (М+Н)+.
Метод SP 39
(1-Метилпиразол-4-ил)-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Для условно обозначенного как (1-метилпиразол-4-ил)-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (19,23 мг; выход 77%): 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8.69 (s, 1Н), 8.18 (d, J=0,7 Гц, 1Н), 7.48-7.34 (m, 3Н), 7.30-7.22 (m, 2Н), 6.43-6.09 (m, 1Н), 5.88-5.62 (m, 1Н), 3.93 (s, 3Н), 3.87-3.58 (m, 1Н). LC-MS: RT = 3,99 мин, m/z = 312,1 (М+Н)+.
Метод SP 40
(1-Метилпиразол-4-ил)-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Для условно обозначенного как (1-метилпиразол-4-ил)-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (20,4 мг; 82% выход): 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8.68 (s, 1Н), 8.18 (s, 1Н), 7.48-7.33 (m, 3Н), 7.32-7.06 (m, 2Н), 6.43-6.08 (m, 1Н), 5.92-5.62 (m, 1Н), 3.93 (s, 3Н), 2.96-2.57 (m, 1Н). LC-MS: RT = 3,99 мин, m/z = 312,1 (М+Н)+.
Способ 3
2-Фенил-1-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]этанон
К раствору этил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (100 мг; 0,363 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл) добавляли бензилмагния хлорид (2 М раствор в тетрагидрофуране; 0,20 мл; 0,400 ммоль) при -78°С в атмосфере азота. По окончании добавления реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (1 мл). Смесь экстрагировали изопропилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали досуха при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 100% изопропилацетата в гептане), получая 2-фенил-1-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]этанон в виде белого твердого вещества (80 мг; выход 69%). LCMS: RT = 5,24 мин, m/z = 322,1 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 10 мин): время удерживания 5,24 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 322,1.
Способ 4
[(1S,2R)-2-Фторциклопропил]-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и [(1R,2S)-2-фторциклопропил]-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К охлажденному (-70°С) раствору (5R,7R)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (150 мг; 0,53 ммоль) и транс-фтор-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (156 мг; 1,06 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,64 мл; 1,60 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -70°С в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (30 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 35-65%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая [транс-2-фторциклопропил]-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (35 мг; 23%) в виде розового твердого вещества. Этот рацемический продукт далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
[(1S,2R)-2-фторциклопропил]-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 2,836 мин) (14,3 мг; 40%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.43-7.39 (m, 3Н), 7.28-7.27 (m, 2Н), 6.13-5.97 (m, 1Н), 5.54-5.51 (m, 1Н), 5.02-4.84 (m, 1Н), 3.69-3.53 (m, 2Н), 3.03-2.97 (m, 1Н), 1.70-1.63 (m, 2Н). LC-MS: RT = 0,866 мин, m/z = 289,9 (М+Н)+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,866 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 289,9;
[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 2, время удерживания = 3,725 мин) (11,3 мг; 32%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.43-7.39 (m, 3Н), 7.28-7.27 (m, 2Н), 6.12-5.97 (m, 1Н), 5.54-5.50 (m, 1Н), 5.03-4.87 (m, 1Н), 3.69-3.51 (m, 2Н), 3.04-2.97 (m, 1Н), 1.70-1.62 (m, 2Н). LC-MS: RT = 0,865 мин, m/z = 289,9 (М+Н)+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,865 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 289,9.
Условия SFC: колонка: Chiralpak AD-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: метанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% В в течение 2,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин.
Способ 5
(рац-(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-[рац-(1S,2S)-2-фторциклопропил]метанон
Стадия 1: цис-2-фтор-N-метокси-N-метилциклопропанкарбоксамид
Смесь цис-2-фторциклопропанкарбоновой кислоты (500 мг; 4,80 ммоль), N,О-диметилгидроксиламина гидрохлорида (610 мг; 6,25 ммоль), 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфата (2375 мг; 6,25 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (1552 мг; 12,0 ммоль) в N,N-диметилформамиде (15 мл) перемешивали при 25°С в течение 12 ч. Смесь выливали в воду (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2×10 мл), рассолом (20 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая цис-2-фтор-N-метокси-N-метилциклопропанкарбоксамид (420 мг; 59%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4.87-4.67 (m, 1Н), 3.78 (s, 3Н), 3.26 (s, 3Н), 2.35-2.33 (m, 1Н), 1.94-1.86 (m, 1Н), 1.11-1.05 (m, 1Н).
Стадия 2: (рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-[рац-(1S,2S)-2-фторциклопропил]метанон
К охлажденному (-78°С) раствору цис-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (50 мг; 0,18 ммоль) и цис-2-фтор-N-метокси-N-метилциклопропанкарбоксамида (52 мг; 0,35 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,21 мл; 0,53 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 30-60%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая (рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-[рац-(1S,2S)-2-фторциклопропил]метанон (2,0 мг; 4%) в виде светло-желтого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.44-7.37 (m, 3Н), 7.29-7.27 (m, 2Н), 6.19-6.18 (m, 0,5Н), 6.04-6.03 (m, 0,5Н), 5.67-5.61 (m, 1Н), 5.08-4.89 (m, 1Н), 3.81-3.70 (m, 1Н), 3.26-3.16 (m, 1Н), 2.91-2.75 (m, 1Н), 2.07-1.90 (m, 1Н), 1.36-1.29 (m, 1Н). LCMS: RT = 1,038 мин, m/z = 290,1 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 1,038 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 290,1.
Способ 6
(2,2-Дифторциклопропил)-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Стадия 1: 2,2-дифтор-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамид
Смесь 2,2-дифторциклопропанкарбоновой кислоты (300 мг; 2,46 ммоль), N,О-диметилгидроксиламина гидрохлорида (312 мг; 3,19 ммоль), 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфата (1214 мг; 3,19 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (794 мг; 6,14 ммоль) в N,N-диметилформамиде (15 мл) перемешивали при 25°С в течение 12 ч. Смесь выливали в воду (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2×10 мл), рассолом (20 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая 2,2-дифтор-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамид (200 мг; 49%) в виде бесцветного масла. LCMS: RT = 0,427 мин, m/z = 166,1 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,427 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 166,1.
Стадия 2: (2,2-дифторциклопропил)-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
К охлажденному (-70°С) раствору цис-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (50 мг; 0,18 ммоль) и 2,2-дифтор-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (59 мг; 0,35 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл) добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,25 мл; 0,62 ммоль) в атмосфере азота. По окончании добавления смесь перемешивали при -70°С в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 35-65%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая (2,2-дифторциклопропил)-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (10,6 мг; 19%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.44-7.39 (m, 3Н), 7.30-7.29 (m, 2Н), 6.21-6.05 (m, 1Н), 5.69-5.64 (m, 1Н), 3.84-3.74 (m, 2Н), 2.90-2.82 (m, 1Н), 2.32-2.27 (m, 1Н), 1.97-1.90 (m, 1Н). LCMS: RT = 0,875 мин, m/z = 307,9 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,875 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 307,9.
Способ 7
Фенил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Фенил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон получали из этил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата и фенилмагния согласно способу 3. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 100% изопропилацетата в гептане), получая конечный продукт (17 мг; 30%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8.20-8.12 (m, 2Н), 7.74-7.65 (m, 1Н), 7.61-7.52 (m, 2Н), 7.48-7.33 (m, 3Н), 7.32-7.24 (m, 2Н), 6.28 (ddd, J=56,4; 7,2; 1,9 Гц, 1Н), 5.78 (ddd, J=8,5; 6,5; 3,1 Гц, 1Н), 3.78 (dddd, J=25,8; 15,4; 8,5; 7,1 Гц, 1Н), 2.74 (dddd, J=26,7; 15,2; 3,2; 2,0 Гц, 1Н). LC-MS: RT = 5,04 мин, m/z = 308,1 (М+Н)+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 10 мин): время удерживания 5,04 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 308,1.
Способ 8
Стадия 1: (Е)-бензальдегида оксим
К раствору бензальдегида (45,0 г; 424,1 ммоль) в этаноле (100 мл) добавляли карбонат натрия (112,3 г; 1060,1 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорид (35,3 г; 508,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 3 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток разбавляли водой (50 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×150 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (60 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный (Е)-бензальдегида оксим в виде бесцветного масла (51,0 г; 99%), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 2: метил-3-фенил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат
К раствору (Е)-бензальдегида оксима (20,0 г; 165,1 ммоль) в 1,4-диоксане (500 мл) добавляли метилакрилат (14,2 г; 165,1 ммоль), иодид натрия (24,7 г; 165,1 ммоль), 2,6-лутидин (17,6 г; 165,1 ммоль) и трет-бутиловый эфир хлорноватистой кислоты (17,9 г; 165,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 24 ч и далее концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая метил-3-фенил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат в виде желтого твердого вещества (25,0 г; 74%). LCMS: RT = 0,871 мин, m/z = 206,2 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2,0 мин): время удерживания 0,871 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 206,2.
Стадия 3: 3-гидрокси-5-фенил-пирролидин-2-он
Смесь метил-3-фенил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилата (25,0 г; 121,8 ммоль) и палладия (10%-ного на угле; 2,5 г) в этаноле (800 мл) гидрировали (50 ф/кв. дюйм (344,7 кПа)) при 25°С в течение 2 ч, затем фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 3-гидрокси-5-фенил-пирролидин-2-он в виде желтого твердого вещества (18,0 г; 83%), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS: RT = 0,270 мин, m/z = 177,8 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,270 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 177,8.
Стадия 4: цис-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-пирролидин-2-он и транс-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-пирролидин-2-он
К раствору 3-гидрокси-5-фенил-пирролидин-2-она (15,0 г; 84,6 ммоль) в дихлорметане (300 мл) добавляли трет-бутилдиметилхлорсилан (19,1 г; 126,9 ммоль) и имидазол (11,5 г; 169,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая:
цис-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-пирролидин-2-он в виде бесцветного масла (12,4 г; 51%). 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.37-7.25 (m, 5Н), 4.88-4.53 (m, 1Н), 4.54-4.46 (m, 1Н), 2.89-2.79 (m, 1Н), 1.80-1.71 (m, 1Н), 0.93-0.90 (m, 9Н), 0.19-0.12 (m, 6Н); и
транс-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-пирролидин-2-он в виде бесцветного масла (9,3 г; 38%). 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.44-7.34 (m, 2Н), 7.29-7.24 (m, 3Н), 4.87-4.80 (m, 1Н), 4.44-4.41 (m, 1Н), 2.45-2.37 (m, 1Н), 2.27-2.22 (m, 1Н), 0.93-0.90 (m, 9Н), 0.16-0.13 (m, 6Н).
Стадия 5: цис-1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-пирролидин-2-он
К раствору цис-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-пирролидин-2-она (12,4 г; 42,8 ммоль) в N,N-диметилформамиде (400 мл) медленно добавляли гидрид натрия (60%-ный; 2,6 г; 64,1 ммоль) при 0°С. По окончании добавления смесь перемешивали при 0°С в течение 20 мин и затем добавляли О-(дифенилфосфорил)гидроксиламин (14,9 г; 64,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный цис-1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-пирролидин-2-он в виде желтого масла (9,5 г; 73%), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS: RT = 0,877 мин, m/z = 307,0 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,877 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 307,0.
Стадия 6: этил-2-[[цис-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-2-оксо-5-фенил-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетат
К раствору цис-1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-пирролидин-2-она (9,5 г; 31,0 ммоль) в этаноле (250 мл) добавляли этил-2-этокси-2-имино-ацетат (6,7 г; 46,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 6 ч и затем концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-2-[[цис-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-2-оксо-5-фенил-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетат в виде желтого масла (10,6 г; 84%), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS: RT = 2,106 мин, m/z = 406,2 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,1% водного аммиака в течение 3,0 мин): время удерживания 2,106 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 406,2.
Стадия 7: этил-цис-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору этил-2-[[цис-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-2-оксо-5-фенил-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетата (10,6 г; 26,1 ммоль) в толуоле (200 мл) добавляли п-толуолсульфоновую кислоту (4,5 г; 26,1 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 120°С в течение 24 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 80% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-цис-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат в виде белого твердого вещества (6,5 г; 64%), которое использовали в таком виде на следующей стадии.
Стадия 8: этил-цис-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
Смесь этил-2-[[цис-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-2-оксо-5-фенил-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетата (3,1 г; 7,6 ммоль) и фторида трет-бутиламмония (1,0 М раствора в THF; 7,6 мл; 7,6 ммоль) в тетрагидрофуране (60 мл) нагревали при 60°С в течение 18 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 100% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-цис-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат в виде белого твердого вещества (1,4 г; 69%). 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.39-7.32 (m, 5Н), 5.73 (d, J=3,5 Гц, 1H), 5.50(m, 1Н), 4.41 (q, J=7,1 Гц, 2H), 3.73-3.65 (m, 1 Н), 2.76 (td, J=4,5 Гц, 13,9 гц, 1Н), 1.35 (t, J=7,1 Гц, 3Н).
Стадия 1: транс-этил-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору цис-этил-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (100 мг; 0,37 ммоль) в дихлорметане (8 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (176,9 мг; 1,10 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч и затем гасили, добавляя воду (20 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл), рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной тонкослойной хроматографией (TLC) (50%-ный этилацетат в петролейном эфире, фактор удерживания (Rf)=0,5), получая транс-этил-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (30 мг; 30%) в виде светло-желтого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.40-7.37 (m, 3Н), 7.14-7.12 (m, 2Н), 6.14 (d, J=5,2 Гц, 0,5Н), 6.00 (d, J=5,2 Гц, 0,5Н), 5.74-5.71 (m, 1Н), 4.51-4.45 (m, 2Н), 3.42-3.35 (m, 1Н), 3.07-2.96 (m, 1Н), 1.42 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
Стадия 2: транс-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновая кислота
К раствору транс-этил-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (30 мг; 0,11 моль) в тетрагидрофуране (4 мл) и воде (1 мл) добавляли гидроксида лития моногидрат (14 мг; 0,33 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 2 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Значение рН остатка подводили до 5, добавляя соляную кислоту (2 н.). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл), рассолом (20 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенную транс-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновую кислоту в виде белого твердого вещества (13 мг; 48%), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
1-[рац-(5R,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он
К охлажденному (-78°С) раствору транс-7-фтор-N-метокси-N-метил-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамида (15 мг; 0,05 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли бромид этилмагния (3 М раствор в THF; 0,03 мл; 0,10 ммоль) в атмосфере азота. По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 34-64%/0,05% соляной кислоты в воде), получая 1-[рац-(5R,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он (7,4 мг; 50%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.44-7.38 (m, 3Н), 7.30-7.26 (m, 2Н), 6.27-6.26 (m, 0,5Н), 6.14-6.12 (m, 0,5Н), 5.87-5.84 (m, 1Н), 3.44-3.41 (m, 1Н), 3.12-3.02 (m, 3Н), 1.16 (t, J=7,2 Гц, 3Н). LCMS: RT = 0,840 мин, m/z = 260,1 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,840 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 260,1.
Способ 9
(рац-(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-[1-(трифторметил)циклопропил]метанон
Стадия 1: 3,5-дибром-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-1,2,4-триазол
К раствору 3,5-дибром-1Н-1,2,4-триазола (150,0 г; 661,2 ммоль) в тетрагидрофуране (1500 мл) медленно добавляли п-толуолсульфоновую кислоту (17,1 г; 99,2 ммоль), затем 3,4-дигидро-2Н-пиран (166,9 г; 1983,6 ммоль) при 0°С. По окончании добавления реакционную смесь нагревали при 70°С в течение 3 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток выливали в воду (500 мл) и значение рН подводили до 9, добавляя насыщенный водный раствор бикарбоната натрия. Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×400 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт промывали метанолом (2×50 мл), сушили при пониженном давлении, получая неочищенный 3,5-дибром-1-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол (155 г; 75%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 5.49-5.46 (m, 1Н), 4.12-3.99 (m, 1Н), 3.72-3.61 (m, 1Н), 2.38-2.26 (m, 1Н), 2.18-2.07 (m, 1Н), 1.98-1.90 (m, 1Н), 1.78-1.60 (m, 3Н).
Стадия 2: 1-фенилбут-3-ен-1-ол
К охлажденному (0°С) раствору бензальдегида (130 г; 1,23 моль) в тетрагидрофуране (1000 мл) добавляли хлорид аллилмагния (2 М раствор в THF; 858 мл; 1,72 моль) в течение 30 мин. По окончании добавления реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Затем смесь гасили путем добавления насыщенного водного раствора хлорида аммония (1000 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×500 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 5% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-фенилбут-3-ен-1-ол (140 г; 77%) в виде светло-желтого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.37-7.34 (m, 4Н), 7.29-7.26 (m, 1Н), 5.83-5.75 (m, 1Н), 5.21-5.08 (m, 2Н), 4.76-4.69 (m, 1 Н), 2.55-2.45 (m, 2Н), 2.12 (d, J=2,8 Гц, 1Н).
Стадия 3: трет-бутилдиметил((1-фенилбут-3-ен-1-ил)окси)силан
К перемешиваемому раствору 1-фенил-3-бутен-1-ола (29,0 г; 195,7 ммоль) в дихлорметане (400 мл) добавляли имидазол (27,0 г; 391,6 ммоль) и трет-бутилдиметилхлорсилан (39,0 г; 254,4 ммоль). По окончании добавления реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и затем гасили, добавляя воду (200 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (2×200 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, 100%-ный петролейный эфир), получая трет-бутил-диметил-(1-фенилбут-3-енокси)силан (43,0 г; 84%) в виде бесцветного масла, которое использовали в таком виде на следующей стадии.
Стадия 4: 3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-фенилпропаналь
К раствору трет-бутил-диметил-(1-фенилбут-3-енокси)силана (50,0 г; 190,5 ммоль) в смеси тетрагидрофуран/вода (600 мл; 1:1) добавляли тетраоксид осмия (968 мг; 3,8 ммоль). После перемешивания в течение 30 мин при 15°С добавляли периодат натрия (163 г; 762,0 ммоль) малыми порциями в течение 2 ч. Полученную смесь перемешивали в течение еще 2 ч при 30°С и затем гасили путем добавления холодного насыщенного водного раствора тиосульфата натрия (500 мл). Смесь перемешивали в течение 30 мин и затем экстрагировали этилацетатом (3×400 мл). Объединенные органические слои промывали водой (200 мл), рассолом (200 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-фенил-пропаналь (33,0 г; 65%) в виде желтого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9.94 (t, J=2,4 Гц, 1Н), 7.48 (d, J=4,2 Гц, 4Н), 7.44-7.39 (m, 1Н), 5.37-5.34 (m, 1Н), 2.99-2.97 (m, 1Н), 2.80-2.75 (m, 1Н), 1.01 (s, 9Н), 0.19 (s, 3Н), 0.00 (s, 3Н).
Стадия 5: 1-(3-бром-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-фенилпропан-1-ол
К охлажденному (-78°С) раствору 3,5-дибром-1-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазола (39,0 г; 125,4 ммоль) в тетрагидрофуране (400 мл) по каплям добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 55,0 мл; 137,5 ммоль) в атмосфере N2. Смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин, затем по каплям добавляли раствор 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-фенил-пропаналя (33,0 г; 124,2 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 1,5 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (500 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×300 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 5% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-(3-бром-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-фенилпропан-1-ол (50,0 г; 80%) в виде светло-желтого масла.
Стадия 6: транс-2-бром-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол
К перемешиваемому раствору 1-(3-бром-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-фенилпропан-1-ола (50,0 г; 100,7 ммоль) в дихлорметане (150 мл) медленно добавляли трифторуксусную кислоту (150 мл). Полученную смесь нагревали при 50°С в течение 2 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Значение рН остатка подводили до 9 насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и экстрагировали дихлорметаном (3×200 мл). Объединенные органические слои промывали водой (100 мл), рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 32% этилацетата в петролейном эфире), получая транс-2-бром-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол (5,5 г; 20%) в виде желтого твердого вещества (также получали вторую порцию (8,5 г; 30%) в виде смеси 4:3 транс-цис-продуктов). 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.46-7.32 (m, 3Н), 7.15 (d, J=7,6 Гц, 2Н), 5.65 (t, J=6,6 Гц, 1Н), 5.50 (br s, 1Н), 5.45 (d, J=6,4 Гц, 1Н), 3.19-3.11 (m, 1Н), 3.01-2.92 (m, 1Н). LCMS: RT = 0,682 мин, m/z = 279,8 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,682 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 279,8.
Стадия 7: (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол и (5R,7R)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
К перемешиваемому раствору транс-2-бром-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (3,0 г; 10,71 ммоль) в дихлорметане (60 мл) медленно добавляли трифторид диэтиламиносеры (7,8 г; 48,19 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2,5 ч и затем медленно добавляли в перемешиваемый водный насыщенный раствор бикарбоната натрия (100 мл) при 0°С. Смесь экстрагировали дихлорметаном (3×100 мл). Объединенные органические слои промывали водой (100 мл), рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая рацемический цис-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (1,5 г; 49%) в виде светло-желтого твердого вещества и рацемический транс-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (650 мг; 21%) в виде белого твердого вещества.
цис-2-Бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.31-7.24 (m, 3Н), 7.17-7.07 (m, 2Н), 5.97-5.77 (m, 1Н), 5.37-5.27 (m, 1Н), 3.52-3.37 (m, 1Н), 2.84-2.70 (m, 1Н). LCMS: RT = 0,632 мин, m/z = 281,9 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,632 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 281,9.
транс-2-Бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.58-7.29 (m, 3Н), 7.24-7.05 (m, 2Н), 6.14-5.93 (m, 1Н), 5.70-5.65 (m, 1Н), 3.41-3.25 (m, 1Н), 3.04-2.87 (m, 1Н).
Рацемический цис-продукт далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
(5R,7R)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (пик 1, время удерживания = 2,963 мин) (350 мг; 44%) в виде белого твердого вещества и
(5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (пик 2, время удерживания = 3,174 мин) (350 мг; 44%) в виде белого твердого вещества.
Условия SFC: колонка: Chiralpak AD-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: этанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% В в течение 2,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин.
Стадия 8: N-метокси-N-метил-1-(трифторметил)циклопропанкарбоксамид
Смесь 1-(трифторметил)циклопропанкарбоновой кислоты (400 мг; 2,60 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (329 мг; 3,37 ммоль), 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфата (1283 мг; 3,37 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (838 мг; 6,49 ммоль) в N,N-диметилформамиде (15 мл) перемешивали при 25°С в течение 12 ч. Смесь разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 25% этилацетата в петролейном эфире), получая N-метокси-N-метил-1-(трифторметил)циклопропанкарбоксамид (330 мг; 64%) в виде светлого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 3.74 (s, 3Н), 3.29 (s, 3Н), 1.37-1.17 (m, 4Н).
Стадия 9: (рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-[1-(трифторметил)циклопропил]метанон
К охлажденному (-70°С) раствору цис-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (50 мг; 0,18 ммоль) и N-метокси-N-метил-1-(трифторметил)циклопропанкарбоксамида (70 мг; 0,35 ммоль) в тетрагидрофуране (4 мл) добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,1 мл; 0,25 ммоль) в атмосфере азота. По окончании добавления смесь перемешивали при -70°С в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (5 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 45-75%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая, как условно обозначено, (рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-[1-(трифторметил)циклопропил]метанон (14,1 мг; 23%) в виде красного твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.43-7.35 (m, 3Н), 7.24-7.22 (m, 2Н), 6.15-5.99 (m, 1Н), 5.61-5.60 (m, 1 Н), 3.77-3.68 (m, 1Н), 2.84-2.77 (m, 1Н), 2.27-2.17 (m, 2Н), 1.60-1.55 (m, 2Н). LC-MS: RT = 0,933 мин, m/z = 339,9 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% бикарбоната аммония в течение 3,0 мин): время удерживания 0,933 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 339,9.
Способ 10
(рац-(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-(3-метилоксетан-3-ил)метанон
Стадия 1: N-метокси-N,3-диметил-оксетан-3-карбоксамид
Смесь 3-метилоксетан-3-карбоновой кислоты (300 мг; 2,58 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (328 мг; 3,36 ммоль), 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфата (1277 мг; 3,36 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (835 мг; 6,46 ммоль) в N,N-диметилформамиде (15 мл) перемешивали при 25°С в течение 12 ч. Смесь выливали в воду (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2×10 мл), рассолом (20 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая N-метокси-N,3-диметил-оксетан-3-карбоксамид (120 мг; 29,2%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4.97 (d, J=6,4 Гц, 2Н), 4.30 (d, J=6,4 Гц, 2Н), 3.67 (s, 3Н), 3.19 (s, 3Н), 1.67 (s, 3Н).
Стадия 2: (рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-(3-метилоксетан-3-ил)метанон
К охлажденному (-70°С) раствору цис-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (40 мг; 0,14 ммоль) и N-метокси-N,3-диметил-оксетан-3-карбоксамида (45 мг; 0,28 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл) добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,17 мл; 0,43 ммоль) в атмосфере азота. По окончании добавления смесь перемешивали при -70°С в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 30-60%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая (рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-(3-метилоксетан-3-ил)метанон (11,5 мг; 27%) в виде желтого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.43-7.37 (m, 3Н), 7.26-7.23 (m, 2Н), 6.17-6.01 (m, 1Н), 5.65-5.63 (m, 1Н), 5.08-5.03 (m, 2Н), 4.52-4.48 (m, 2Н), 3.78-3.70 (m, 1Н), 2.86-2.76 (m, 1Н), 1.75 (s, 3Н). LCMS: RT = 0,816 мин, m/z = 302,0 [M+H]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,816 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 302,0.
Способ 11
(рац-(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-[рац-(1S,2R)-2-фторциклопропил]метанон
Стадия 1: транс-2-фтор-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамид
Смесь транс-2-фторциклопропан-1-карбоновой кислоты (100 мг; 0,96 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (122 мг; 1,25 ммоль), 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфата (475 мг; 1,25 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (310 мг; 2,40 ммоль) в N,N-диметилформамиде (5 мл) перемешивали при 25°С в течение 12 ч. Смесь выливали в воду (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2×10 мл), рассолом (20 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая транс-2-фтор-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамид (70 мг; 50%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4.89-4.71 (m, 1Н), 3.79 (s, 3Н), 3.21 (s, 3Н), 2.62-2.60 (m, 1Н), 1.48-1.35 (m, 2Н). LCMS: RT = 0,292 мин, m/z = 148,1 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,292 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 148,1.
Стадия 2: (рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-[рац-(1S,2R)-2-фторциклопропил]метанон
К охлажденному (-70°С) раствору цис-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (40 мг; 0,14 ммоль) и транс-2-фтор-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (42 мг; 0,28 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл) добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,07 мл; 0,18 ммоль) в атмосфере азота. По окончании добавления смесь перемешивали при -70°С в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 35-65%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая (рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-[рац-(1S,2R)-2-фторциклопропил]метанон (3,3 мг; 7,6%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.42-7.37 (m, 3Н), 7.28-7.27 (m, 2Н), 6.13-5.97 (m, 1Н), 5.54-5.52 (m, 1Н), 5.03-4.85 (m, 1Н), 3.71-3.51 (m, 2Н), 3.04-2.94 (m, 1Н), 1.70-1.62 (m, 2Н). LCMS: RT = 0,862 мин, m/z = 289,9 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,862 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 289,9.
Способ 12
1-(7-Фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-2-ил)пропан-1-он
Стадия 1: 6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-7-ол
К раствору имидазола (40,0 г; 587,5 ммоль), уксусной кислоты (1,8 мл) и 1,4-диоксана (600 мл) добавляли акролеин (58,8 мл; 881,3 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 110°С в течение 24 ч и охлаждали до 0°С. Полученное твердое вещество собирали фильтрованием, промывали петролейным эфиром (200 мл), получая неочищенный 6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-7-ол (50,0 г; 69%) в виде белого твердого вещества. Использовали в таком виде на следующей стадии.
Стадия 2: 3-хлор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-7-ол
К раствору 6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-7-ола (10,0 г; 80,6 ммоль) в дихлорметане (300 мл) добавляли N-хлорсукцинимид (10,8 г; 80,6 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 2 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 10% метанола в дихлорметане), получая 3-хлор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-7-ол (8,0 г; 63%) в виде белого твердого вещества, которое использовали в таком виде на следующей стадии.
Стадия 3: 3-хлор-2-иод-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-7-ол
К раствору 3-хлор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-7-ола (5,6 г; 35,3 ммоль) в N,N-диметилформамиде (20 мл) добавляли N-иодсукцинимид (8,3 г; 37,1 ммоль). Смесь нагревали при 60°С в течение 3 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 10% метанола в дихлорметане), получая 3-хлор-2-иод-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-7-ол (5,3 г; 53%) в виде светло-желтого твердого вещества, которое использовали в таком виде на следующей стадии.
Стадия 4: 3-хлор-2-иод-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-7(6Н)-он
К раствору 3-хлор-2-иод-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-7-ола (5,3 г; 18,6 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли диоксид марганца (8,1 г; 93,2 ммоль). Смесь нагревали при 40°С в течение 5 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали досуха при пониженном давлении, получая неочищенный 3-хлор-2-иод-5,6-дигидропирроло[1,2-а]имидазол-7-он (3,2 г; 61%) в виде коричневого твердого вещества, которое использовали в таком виде на следующей стадии.
Стадия 5: N-[(Z)-(3-хлор-2-иод-5,6-дигидропирроло[1,2-а]имидазол-7-илиден)амино]-4-метил-бензолсульфонамид
Смесь 4-метилбензолсульфонгидразида (2,1 г; 11,3 ммоль) и 3-хлор-2-иод-5,6-дигидропирроло[1,2-а]имидазол-7-она (3,2 г; 11,3 ммоль) в этаноле (70 мл) нагревали при 90°С в течение 7 ч и охлаждали до 15°С. Полученное твердое вещество собирали фильтрованием и сушили при пониженном давлении, получая неочищенный N-[(Z)-(3-хлор-2-иод-5,6-дигидропирроло[1,2-а]имидазол-7-илиден)амино]-4-метил-бензолсульфонамид (2,8 г; 54%) в виде бледно-зеленого твердого вещества, которое использовали в таком виде на следующей стадии.
Стадия 6: 3-хлор-2-иод-7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол
Смесь N-[(Z)-(3-хлор-2-иод-5,6-дигидропирроло[1,2-а]имидазол-7-илиден)амино]-4-метил-бензолсульфонамида (1,8 г; 3,88 ммоль), фенилбороновой кислоты (710 мг; 5,82 ммоль), карбоната калия (1,6 г; 11,65 ммоль) в 1,4-диоксане (40 мл) нагревали при 110°С в течение 18 ч в атмосфере N2. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-хлор-2-иод-7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол (200 мг; 15%) в виде светло-коричневого твердого вещества. LCMS: rt = 0,879 мин, m/z = 334,9 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания: 0,879 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 334,9.
Стадия 7: метил-3-хлор-7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-2-карбоксилат
Смесь 3-хлор-2-иод-7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазола (200 мг; 0,58 ммоль), дихлорметанового комплекса дихлорида 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладия(II) (24 мг; 0,03 ммоль) и триэтиламина (0,4 мл; 2,9 ммоль) в смеси N,N-диметилформамид (24 мл)/метанол (8 мл) нагревали при 90°С в течение 18 ч в атмосфере СО (50 ф/кв. дюйм (344,7 кПа)). Смесь фильтровали через короткую набивку целита и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (50%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,4), получая метил-3-хлор-7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-2-карбоксилат (140 мг; 87%) в виде светло-коричневого твердого вещества. LCMS: rt = 0,676 мин, m/z = 277,0 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания: 0,676 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 277,0.
Стадия 8: метил-7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-2-карбоксилат
Смесь метил-3-хлор-7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-2-карбоксилата (120 мг; 0,43 ммоль) и палладия (10%-ного на угле; 103 мг; 0,10 ммоль; с влажностью 50%) в метаноле (50 мл) гидрировали (40 ф/кв. дюйм (275,8 кПа)) при 50°С в течение 24 ч и затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный метил-7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-2-карбоксилат (100 мг; 95%) в виде коричневого масла, которое использовали в таком виде на следующей стадии. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.85-7.60 (m, 1H), 7.40-7.25 (m, 4H), 4.70-4.55 (m, 1H), 4.40-4.15 (m, 2H), 3.89 (s, 3Н), 3.30-3.20 (m, 1H), 2.75-2.70 (m, 1H), 1.70-1.60 (m, 1H). LCMS: rt = 0,513 мин, m/z = 243,1 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания: 0,513 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 243,1.
Стадия 9: 7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-2-карбоновая кислота
Смесь метил-7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-2-карбоксилата (100 мг; 0,41 ммоль) и гидроксида лития моногидрата (118 мг; 2,89 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл), воде (1 мл) и метаноле (2 мл) нагревали при 25°С в течение 18 ч. Добавляли гидроксид натрия (100 мг) и смесь нагревали при 40°С в течение еще 2 ч. Полученную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в воде (5 мл) и значение рН подводили до 3, добавляя 2 М раствор HCl. Полученную смесь лиофилизировали досуха, получая неочищенную 7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-2-карбоновую кислоту (94 мг; 99%) в виде белого твердого вещества, которое использовали в таком виде на следующей стадии.
Стадия 10: N-метокси-N-метил-7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-2-карбоксамид
Смесь 7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-2-карбоновой кислоты (60 мг; 0,26 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (77 мг; 0,79 ммоль), триэтиламина (0,11 мл; 0,79 ммоль), 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфата (105 мг; 0,28 ммоль) в N,N-диметилформамиде (4 мл) перемешивали при 15°С в течение 2 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (50%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,5), получая N-метокси-N-метил-7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-2-карбоксамид (70 мг; 98%) в виде белого твердого вещества. LCMS: rt = 0,506 мин, m/z = 272,1 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания: 0,506 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 272,1.
Стадия 11: 1-(7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-2-ил)пропан-1-он
К охлажденному (-70°С) раствору N-метокси-N-метил-7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-2-карбоксамида (50 мг; 0,18 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл) добавляли бромид этилмагния (3,0 М раствор в THF; 0,61 мл; 1,83 ммоль) в атмосфере N2. По окончании добавления смесь перемешивали при -70°С в течение 2 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (3 мл). Смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 25-55%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая 1-(7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-2-ил)пропан-1-он (4,6 мг; 9%) в виде светло-коричневого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.86 (s, 1H), 7.35-7.31 (m, 2H), 7.30-7.21 (m, 3H), 4.42-4.38 (m, 1H), 4.25-4.23 (m, 1H), 4.20-4.11 (m, 1H), 3.12-3.10 (m, 1H), 2.89-2.83 (m, 2H), 2.58-2.50 (m, 1H), 1.14-1.10 (m, 3H). LCMS: rt = 0,634 мин, m/z = 241,1 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,634 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 241,1.
Способ 13
Циклопропил-[рац-(5R,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: транс-7-фтор-N-метокси-N-метил-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид
Смесь транс-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновой кислоты (50 мг; 0,20 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (46 мг; 0,24 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (5 мг; 0,04 ммоль), N,О-диметилгидроксиламина гидрохлорида (12 мг; 0,20 ммоль) в N,N-диметилформамиде (5 мл) перемешивали при 20°С в течение 18 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали препаративной TLC (50%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,7), получая транс-7-фтор-N-метокси-N-метил-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид (30 мг; 51%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 2: циклопропил-[рац-(5R,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К охлажденному (-78°С) раствору транс-7-фтор-N-метокси-N-метил-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамида (15 мг; 0,05 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли бромид циклопропилмагния (0,5 М раствор в THF; 0,2 мл; 0,10 ммоль) в атмосфере азота. По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 35-65%/0,05% соляной кислоты в воде), получая циклопропил-[рац-(5R,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (7,6 мг; 50%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.44-7.40 (m, 3H), 7.30-7.26 (m, 2H), 6.29-6.26 (m, 0,5H), 6.14-6.12 (m, 0,5H), 5.92-5.87 (m, 1H), 3.44-3.41 (m, 1H), 3.01-3.02 (m, 2H), 1.19-1.16 (m, 2H), 1.12-1.09 (m, 2H). LCMS: rt = 0,849 мин, m/z = 272,0 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,849 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 272,0.
Способ 14
1-(6-Фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил)пропан-1-он
Стадия 1: этил-3-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-5-карбоксилат и этил-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-5-карбоксилат
К раствору проп-2-ин-1-ола (30,0 г; 535,14 ммоль) в толуоле (300 мл) добавляли этил-2-диазоацетат (67,2 г; 588,66 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение 5 ч и охлаждали до комнатной температуры. Неочищенный продукт собирали фильтрованием и промывали 10%-ным этилацетатом в петролейном эфире (50 мл), получая смесь этил-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-5-карбоксилата (15,8 г; 17%) и этил-3-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-5-карбоксилата (неразделяемую, 1:3; 63,1 г; 69%) в виде светло-желтого твердого вещества, которое использовали в виде смеси на следующей стадии.
Этил-3-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-5-карбоксилат (основной изомер): 1H ЯМР (DMSO-d6) 12.60 (1Н, s, уширенный); 6.70 (1Н, s); 4.70 (1Н, s); 4.35 (2H, q, J=7,0 Гц); 4.45 (1Н, s, уширенный); 1.25 (3Н, t, J=7,0 Гц).
Этил-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-5-карбоксилат (минорный изомер): 1H ЯМР (DMSO-d6) 12.60 (1Н, s, уширенный); 7.65 (1Н, s); 4.75 (1Н, s); 4.35 (2H, q, J=7,0 Гц); 4.13(1H, s, уширенный); 1.25 (3Н, t, J=7,0 Гц).
Стадия 2: этил-3-(гидроксиметил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5-карбоксилат и этил-4-(гидроксиметил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5-карбоксилат
Смесь этил-3-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-5-карбоксилата и этил-4-(гидроксиметил)-1Н-пиразол-5-карбоксилата (3:1; 4,0 г; 23,5 ммоль), (2-(хлорметокси)этил)триметилсилана (11,2 мл; 70,5 ммоль) и карбоната цезия (45,9 г; 141,0 ммоль) в ацетоне (100 мл) перемешивали при 25°С в течение 3 ч и затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 40% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-3-(гидроксиметил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5-карбоксилат и этил-4-(гидроксиметил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5-карбоксилат (неразделяемые, 3,7 г; 52%), которые использовали в виде смеси на следующей стадии. LC-MS: rt = 0,855 мин, m/z = 322,9 (М+Н)+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,855 мин, ESI+: обнаружено [M+Na]=322,9.
Стадия 3: этил-3-формил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5-карбоксилат
К раствору этил-3-(гидроксиметил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5-карбоксилата и этил-4-(гидроксиметил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5-карбоксилата (2,0 г; 6,66 ммоль) в дихлорметане (100 мл) добавляли диоксид марганца (7,0 г; 80,52 ммоль). Смесь перемешивали при 25°С в течение 15 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-5-формил-2-(2-триметилсилилэтоксиметил)пиразол-3-карбоксилат (700 мг; 35%) в виде бесцветного масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 10.02 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 5.94 (s, 2H), 4.40 (q, J=8,0 Гц, 2Н), 3.69-3.60 (m, 2H), 1.40 (t, J=8,0 Гц, 3Н), 0.98-0.89 (m, 2H), 0.02-0.07 (m, 9H).
Стадия 4: (Е)-этил-3-(3-оксо-3-фенилпроп-1-ен-1-ил)-1Н-пиразол-5-карбоксилат
К раствору этил-5-формил-2-(2-триметилсилилэтоксиметил)пиразол-3-карбоксилата (700 мг; 2,35 ммоль) в дихлорметане (100 мл) добавляли триметил((1-фенилвинил)окси)силан (499 мг; 2,59 ммоль) и тетрахлорид титана (875 мг; 4,61 ммоль). Смесь перемешивали при 40°С в течение 48 ч и затем гасили, добавляя воду (50 мл). Полученную смесь экстрагировали дихлорметаном (3 × 50 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая (Е)-этил-3-(3-оксо-3-фенилпроп-1-ен-1-ил)-1Н-пиразол-5-карбоксилат (310 мг; 49%) в виде желтого твердого вещества. LC-MS: rt = 0,853 мин, m/z = 270,9 (М+Н)+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,853 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 270,9.
Стадия 5: этил-3-(3-гидрокси-3-фенилпропил)-1Н-пиразол-5-карбоксилат
Смесь (Е)-этил-3-(3-оксо-3-фенилпроп-1-ен-1-ил)-1Н-пиразол-5-карбоксилата (310 мг; 1,15 ммоль) и палладия (10%-ного на угле; 122 мг) в метаноле (20 мл) гидрировали (15 ф/кв. дюйм (103,4 кПа)) при 25°С в течение 15 ч и затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-3-(3-гидрокси-3-фенилпропил)-1Н-пиразол-5-карбоксилат (314 мг; 99%) в виде светло-желтого масла. Это неочищенное масло использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 6: этил-3-(3-хлор-3-фенилпропил)-1Н-пиразол-5-карбоксилат
К раствору этил-3-(3-гидрокси-3-фенилпропил)-1Н-пиразол-5-карбоксилата (314 мг; 1,14 ммоль) в ацетонитриле (5 мл) добавляли тионилхлорид (681 мг; 5,72 ммоль). Смесь нагревали при 65°С в течение 15 ч и затем концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-3-(3-хлор-3-фенил-пропил)-1Н-пиразол-5-карбоксилат (335 мг; 100%) в виде желтого масла. Это неочищенное масло использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки. LC-MS: rt = 0,861 мин, m/z = 314,9 (М+Н)+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,861 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 314,9.
Стадия 7: этил-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-карбоксилат
Смесь этил-3-(3-хлор-3-фенил-пропил)-1Н-пиразол-5-карбоксилата (335 мг; 1,14 ммоль) и карбоната цезия (3,0 г; 9,21 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) перемешивали при 15°С в течение 15 ч и затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 25% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-карбоксилат (120 мг; 41%) в виде светло-желтого масла. LC-MS: rt = 0,824 мин, m/z = 279,0 (М+Н)+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,824 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 279,0.
Стадия 8: 6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-карбоновая кислота
Смесь этил-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-карбоксилата (60 мг; 0,23 ммоль) и гидроксида лития моногидрата (50 мг; 1,2 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл), метаноле (5 мл) и воде (2 мл) перемешивали при 25°С в течение 3 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Значение рН остатка подводили до 5, добавляя соляную кислоту (2 н.). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3 × 20 мл). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл), рассолом (20 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенную 6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b] пиразол-2-карбоновую кислоту (30 мг; 56%) в виде желтого твердого вещества, которое использовали в таком виде на следующей стадии.
Стадия 9: N-метокси-N-метил-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-карбоксамид
Смесь 6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-карбоновой кислоты (30 мг; 0,13 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (17 мг; 0,17 ммоль), 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфата (65 мг; 0,17 ммоль), N,N-диизопропилэтиламина (42 мг; 0,33 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) перемешивали при 25°С в течение 2 ч. Смесь разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (3 × 15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая N-метокси-N-метил-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-карбоксамид (25 мг; 70%) в виде белого твердого вещества. LC-MS: rt = 0,952 мин, m/z = 272,1 (М+Н)+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2,0 мин): время удерживания 0,952 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 272,1.
Стадия 10: 1-(6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил)пропан-1-он
К охлажденному (-78°С) раствору N-метокси-N-метил-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-карбоксамида (24 мг; 0,09 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) по каплям добавляли хлорид этилмагния (3,0 М раствор в THF; 0,07 мл; 0,21 ммоль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при -78°С в течение 2 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-(6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил)пропан-1-он (13,0 мг; 61%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.39-7.30 (m, 3Н), 7.11-7.09 (m, 2H), 6.60 (s, 1H), 5.54-5.50 (m, 1H), 3.11-3.01 (m, 3Н), 2.95-2.89 (m, 2H), 2.52-2.48 (m, 1H), 1.11 (t, J=7,2 Гц, 3Н). LC-MS: rt = 1,858 мин, m/z = 241,2 [M+H]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% бикарбоната аммония в течение 3,0 мин): время удерживания 1,858 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 214,2.
Способ 15
1-[(4S)-4-(2-Фторфенил)-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-ил]пропан-1-он и 1-[(4R)-4-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-ил]пропан-1-он
К охлажденному (-78°С) раствору 4-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-карбоксилата (200 мг; 0,63 ммоль) в тетрагидрофуране (13 мл) по каплям добавляли хлорид этилмагния (2 М раствор в THF; 0,63 мл; 1,26 ммоль) в атмосфере азота. По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 2 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3 × 15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-[4-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-ил]пропан-1-он (120 мг; 70%) в виде белого твердого вещества. Этот рацемический продукт далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
1-[(4S)-4-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-ил]пропан-1-он (пик 1, время удерживания = 2,979 мин) (45,0 мг; 37%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.40-7.34 (m, 2H), 7.16-7.14 (m, 2H), 6.22 (s, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.42-4.18 (m, 4H), 2.96-2.92 (m, 2H), 1.10 (t, J=7,2 Гц, 3Н). LC-MS: rt = 1,761 мин, m/z = 275,2 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% бикарбоната аммония в течение 3 мин): время удерживания 1,761 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 275,2;
1-[(4R)-4-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-ил]пропан-1-он (пик 2, время удерживания = 3,234 мин) (52 мг; 43%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.40-7.34 (m, 2H), 7.16-7.14 (m, 2H), 6.22 (s, 1H), 6.08 (s, 1H), 4.41-4.15 (m, 4H), 3.00-2.92 (m, 2H), 1.10 (t, J=7,2 Гц, 3Н). lc-msrt = 1,755 мин, m/z = 275,2 [M+H]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% бикарбоната аммония в течение 3 мин): время удерживания 1,752 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 275,2.
Условия SFC: колонка: Chiralpak AD-3, 150 × 4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: этанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В в течение 5,5 мин и выдерживание при 40% в течение 3 мин, затем при 5% В в течение 1,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 40°С.
Способ 16
3-(рац-(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2,2-диметил-3-оксо-пропаннитрил
Стадия 1: цис-3-(7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-3-оксопропаннитрил
К охлажденному (-78°С) раствору ацетонитрила (298 мг; 7,27 ммоль) в тетрагидрофуране (15 мл) добавляли трет-бутилат калия (611,4 мг; 5,45 ммоль). После перемешивания в течение 30 мин, по каплям добавляли этил-цис-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (500 мг; 1,82 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 2 ч и затем гасили, медленно добавляя холодный насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3 × 15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный цис-3-(7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-3-оксо-пропаннитрил (150 мг; 31%) в виде белого твердого вещества, которое использовали в таком виде на следующей стадии.
Стадия 2: 3-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2,2-диметил-3-оксо-пропаннитрил
К охлажденному (0°С) раствору цис-3-(7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-3-оксо-пропаннитрила (140 мг; 0,52 ммоль) в N,N-диметилформамиде (6 мл) добавляли карбонат цезия (422 мг; 1,30 ммоль). После перемешивания в течение 30 мин добавляли иодметан (2800 мг; 19,7 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 4 ч. Затем смесь гасили путем добавления холодного насыщенного водного раствора хлорида аммония (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (3 × 15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 30-60%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая 3-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2,2-диметил-3-оксо-пропаннитрил (28,0 мг; 17%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.44-7.38 (m, 3H), 7.27-7.25 (m, 2H), 6.15-6.13 (m, 0,5H), 6.01-5.99 (m, 0,5H), 5.57-5.56 (m, 1H), 3.74-3.63 (m, 1H), 3.06-2.95 (m, 1H), 1.81 (s, 3H), 1.78 (s, 3H). LC-MS: rt = 1,734 мин, m/z = 299,2 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% бикарбоната аммония в течение 3 мин): время удерживания 1,734 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 299,2.
Способ 17
1-[(4S)-4-Фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил]пропан-1-он и 1-[(4R)-4-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил]пропан-1-он
Стадия 1: N-метокси-N-метил-4-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-карбоксамид
Смесь 4-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-карбоновой кислоты (93 мг; 0,41 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (80 мг; 0,81 ммоль), 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфата (163 мг; 0,43 ммоль) и триэтиламина (124 мг; 1,22 ммоль) в N,N-диметилформамиде (4 мл) перемешивали при 25°С в течение 2 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали препаративной TLC (10%-ный метанол в дихлорметане, Rf = 0,7), получая N-метокси-N-метил-4-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-карбоксамид (100 мг; 91%) в виде бесцветного масла. LCMS: rt = 0,593 мин, m/z = 272,1 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,593 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 272,1.
Стадия 2: 1-[(4S)-4-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил]пропан-1-он и 1-[(4R)-4-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил]пропан-1-он
К охлажденному (-78°С) раствору N-метокси-N-метил-4-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-карбоксамида (100 мг; 0,37 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) по каплям добавляли хлорид этилмагния (2,7 М раствор в THF; 0,54 мл; 1,47 ммоль) в атмосфере азота. По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (2 × 15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 1-(4-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил)пропан-1-он (80 мг; 90%) в виде светло-коричневого твердого вещества, которое далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
(R)-1-(4-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил)пропан-1-он (пик 1, время удерживания = 2,581 мин) (25,4 мг; 32%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.32-7.21 (m, 5H), 6.43 (s, 1H), 4.50-4.37 (m, 1H), 4.36-4.33 (m, 1H), 4.24-4.22 (m, 1H), 3.13-3.10 (m, 1H), 2.99-2.95 (m, 2H), 2.57-2.53 (m, 1H), 1.15 (t, J=7,2 Гц, 3Н). LCMS: rt = 0,843 мин, m/z = 240,9 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,843 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 240,9;
(S)-1-(4-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил)пропан-1-он (пик 2, время удерживания = 2,968 мин) (22,7 мг; 28%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.35-7.22 (m, 5H), 6.43 (s, 1H), 4.51-4.38 (m, 1H), 4.37-4.33 (m, 1H), 4.25-4.22 (m, 1H), 3.14-3.12 (m, 1H), 3.02-2.96 (m, 2H), 2.58-2.54 (m, 1H), 1.16 (t, J=7,2 Гц, 3Н). LCMS: rt = 0,838 мин, m/z = 241,0 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,838 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 241,0.
Условия SFC: колонка: Chiralpak AD (250 мм × 30 мм, 5 мкм); среда: 0,1% NH3H2O в iPrOH; сначала В 15%, в конце В 15%; скорость потока 60 мл/мин; температура колонки 40°С.
Способ 18
1-(рац-(5R,7R)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-гидрокси-2-метил-пропан-1-он
К раствору 1-[цис-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-2-метил-пропан-1-она (50 мг; 0,18 ммоль) в диметилсульфоксиде (4 мл) добавляли 1-бром-2,5-пирролидиндион (33 мг; 0,18 ммоль). Смесь нагревали при 100°С в течение 15 ч на воздухе. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 25-55%/0,05% гидроксида аммония в воде) и далее препаративной TLC (этилацетат, Rf = 0,6), получая 1-(рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-гидрокси-2-метил-пропан-1-он (48,6 мг; 91%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.43-7.37 (m, 3Н), 7.27-7.25 (m, 2H), 6.20-6.03 (m, 1H), 5.66-5.57 (m, 1H), 3.79-3.71 (m, 1H), 2.87-2.77 (m, 1H), 1.60 (s, 3H), 1.56 (s, 3H). LC-MS: rt = 0,771 мин, m/z = 290,1 (M+H)+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,771 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 290,1.
Способ 19
(рац-(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-(1-метилциклопропил)метанон
Стадия 1: цис-1-(7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-метилпроп-2-ен-1-он
Смесь цис-1-(7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)пропан-1-она (120 мг; 0,46 ммоль), дибромметана (1931 мг; 11,11 ммоль) и диэтиламина (1625 мг; 22,22 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) нагревали при 100°С в течение 30 мин с облучением микроволнами. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 40% этилацетата в петролейном эфире), получая цис-1-(7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-метил-проп-2-ен-1-он (52 мг; 41%) в виде белого твердого вещества. LC-MS: rt = 1,020 мин, m/z = 272,1 [M+H]+. LCMS (от 0 до 60% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,020 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 272,1.
Стадия 2: (рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-(1-метилциклопропил)метанон
К смеси диэтилцинка (123 мг; 1,00 ммоль) и хлорида никеля (8 мг; 0,07 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли дииодметан (355 мг; 1,33 ммоль) при 0°С. После перемешивания в течение 30 мин добавляли 1-(7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-метил-проп-2-ен-1-он (90 мг; 0,33 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Смесь гасили путем добавления холодного насыщенного водного раствора хлорида аммония (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (3 × 15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 25-55%/0,05% HCl в ацетонитриле), получая (рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-(1-метилциклопропил)метанон (3,0 мг; 3%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.41-7.37 (m, 3H), 7.24-7.23 (m, 2H), 6.15-6.13 (m, 0,5H), 6.01-5.99 (m, 0,5H), 5.60-5.59 (m, 1H), 3.76-3.68 (m, 1H), 2.84-2.74 (m, 1H), 1.82-1.76 (m, 2H), 1.41 (s, 3H), 0.97-0.92 (m, 2H). LC-MS: rt = 1,068 мин, m/z = 286,1 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,068 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 286,1.
Способ 20
1-[(4S)-4-Фенил-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-ил]пропан-1-он и 1-[(4R)-4-фенил-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-ил]пропан-1-он
Стадия 1: N-метокси-N-метил-4-фенил-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-карбоксамид
Смесь 4-фенил-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-карбоновой кислоты (156 мг; 0,64 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (125 мг; 1,28 ммоль), 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфата (291,42 мг; 0,77 ммоль) и триэтиламина (258 мг; 2,55 ммоль) в N,N-диметилформамиде (5 мл) перемешивали при 15°С в течение 2 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (10%-ный метанол в дихлорметане, Rf = 0,7), получая N-метокси-N-метил-4-фенил-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-карбоксамид (80 мг; 43,6%) в виде бесцветного масла.
Стадия 2: 1-[(4S)-4-фенил-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-ил]пропан-1-он и 1-[(4R)-4-фенил-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-ил]пропан-1-он
К охлажденному (-78°С) раствору N-метокси-N-метил-4-фенил-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-карбоксамида (60 мг; 0,21 ммоль) в тетрагидрофуране (6 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли хлорид этилмагния (2,7 М раствор в THF; 0,39 мл; 1,04 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3 × 15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный рацемический продукт, который далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
1-[(4S)-4-фенил-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-ил]пропан-1-он (пик 1, время удерживания = 3,254 мин) (11,5 мг; 21%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.39-7.37 (m, 5Н), 6.21 (s, 1H), 5.82 (s, 1H), 4.42-4.36 (m, 2H), 4.30-4.28 (m, 1H), 4.21-4.18 (m, 1H), 3.00-2.95 (m, 2H), 1.13 (t, J=7,2 Гц, 3Н). LCMS: rt = 1,026 мин, m/z = 257,1 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,026 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 257,1;
1-[(4R)-4-фенил-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-ил]пропан-1-он (пик 2, время удерживания = 4,381 мин) (13,6 мг; 25%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.39-7.37 (m, 5Н), 6.21 (s, 1H), 5.82 (s, 1H), 4.42-4.36 (m, 2H), 4.31-4.25 (m, 1H), 4.21-4.19 (m, 1H), 3.00-2.92 (m, 2H), 1.13 (t, J=7,2 Гц, 3Н). LCMS: rt = 1,023 мин, m/z = 257,1 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,023 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 257,1.
Условия SFC: колонка: OD (250 мм × 30 мм, 5 мкм); среда: 0,1% NH3H2O в EtOH; сначала В: 30%, в конце В: 30%; скорость потока 60 мл/мин; температура колонки 40°С.
Способ 21
3,3,3-Трифтор-1-(рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)пропан-1-он
Стадия 1: 1-цис-7-фтор-5-фенил-2-(1-((триметилсилил)окси)винил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
К раствору 1-(цис-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)этанона (200 мг; 0,82 ммоль) в 1,4-диоксане (6 мл) добавляли триэтиламин (165 мг; 1,63 ммоль) и триметилсилил-трифторметансульфонат (254 мг; 1,14 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч и гасили путем добавления холодного насыщенного водного раствора хлорида аммония (10 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3 × 15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 1-(цис-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)винилокси-триметил-силан (245 мг; 95%) в виде светло-желтого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.17-7.10 (m, 3Н), 6.98-6.96 (m, 2H), 5.79-5.78 (m, 0,5H), 5.65-5.64 (m, 0,5H), 5.21-5.17 (m, 2H), 4.40 (s, 1H), 4.49 (s, 1H), 3.37-3.27 (m, 1H), 2.66-2.56 (m, 1H), 0.03 (s, 9H).
Стадия 2: 3,3,3-трифтор-1-(рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)пропан-1-он
Смесь 1-трифторметил-1,2-бензиодоксол-3(1Н)-она (418 мг; 1,32 ммоль), 1-(цис-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)винилокси-триметилсилана (210 мг; 0,66 ммоль) и тиоцианата меди (16 мг; 0,13 ммоль) в N,N-диметилформамиде (4 мл) перемешивали при 15°С в течение 15 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 25-55%/0,05% HCl в ацетонитриле), получая 3,3,3-трифтор-1-(рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)пропан-1-он (31 мг; 15%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.40-7.37 (m, 3H), 7.28-7.26 (m, 2H), 6.19-6.17 (m, 0,5H), 6.05-6.03 (m, 0,5H), 5.65-5.63 (m, 1H), 4.09-4.01 (m, 2H), 3.78-3.29 (m, 1H), 2.89-2.77 (m, 1H). LC-MS: rt = 1,072 мин, m/z = 314,1 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% бикарбоната аммония в течение 2,0 мин): время удерживания 1,072 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 314,1.
Способ 22
1-[(5S)-5-Фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он
К охлажденному (-78°С) раствору этил-(S)-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (200 мг; 0,78 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли хлорид этилмагния (3,0 М раствор в THF; 0,58 мл; 1,74 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 2 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3 × 20 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-[(5S)-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он (60 мг; 32%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.42-7.32 (m, 3H), 7.12-7.10 (m, 2Н), 5.49 (dd, J=5,6, 8,4 гц, 1Н), 3.31-3.21 (m, 1H), 3.17-3.01 (m, 4H), 2.72-2.64 (m, 1H), 1.21 (t, J=7,2 Гц, 3H). LCMS: rt = 1,523 мин, m/z = 242,2 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,1% водного аммиака в течение 3 мин): время удерживания 1,523 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 242,2.
Способ 23
1-[(5S)-5-(2-Фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он
К охлажденному (-70°С) раствору этил-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (496 мг; 1,8 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли хлорид этилмагния (2,7 М раствор в THF; 1,33 мл; 3,6 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -70°С в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3 × 15 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный рацемический продукт, который далее очищали хиральной SFC и RP-HPLC (ацетонитрила 25-55%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая, как условно обозначено:
1-[(5S)-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он (пик 2, время удерживания = 3,038 мин) (17 мг; 8%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.45-7.35 (m, 1H), 7.20-7.12 (m, 3H), 5.80-5.75 (m, 1H), 3.30-3.28 (m, 1H), 3.15-3.05 (m, 2Н), 3.01-2.97 (m, 2Н), 2.72-2.66 (m, 1H), 1.12 (t, J=7,2 Гц, 3H). LCMS: rt = 0,977 мин, m/z = 260,1 [M+H]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,977 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 260,1.
Условия SFC: колонка: OJ (250 мм × 30 мм, 5 мкм); среда: 0,1% NH3H2O в EtOH; сначала В: 20%, в конце В: 20%; скорость потока 60 мл/мин; температура колонки 40°С.
Способ 24
1-[рац-(5R,6S)-6-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он
Стадия 1: (Е)-метил 4-фенилбут-3-еноат
К раствору (Е)-4-фенилбут-3-еновой кислоты (15,0 г; 92,48 ммоль) в метаноле (60 мл) добавляли серную кислоту (2,3 г; 23,12 ммоль). Смесь нагревали при 90°С в течение 18 ч и охлаждали. Смесь разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3 × 50 мл). Объединенные органические слои промывали водой (30 мл), водным насыщенным раствором бикарбоната натрия (30 мл), рассолом (30 мл), сушили и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный метил-(Е)-4-фенилбут-3-еноат (14,8 г; 91%) в виде светлого масла, которое использовали в таком виде на следующей стадии. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.39-7.21 (m, 5Н), 6.54-6.45 (m, 1H), 6.35-6.25 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.30-3.25 (m, 2H).
Стадия 2: метил-2-(3-фенилоксиран-2-ил)ацетат
К смеси метил-(Е)-4-фенилбут-3-еноата (14,8 г; 84,0 ммоль) и бикарбоната натрия (34,4 г; 409,0 ммоль) в ацетоне (300 мл) по каплям при 0°С добавляли раствор тройной соли моноперсульфата калия (67,1 г; 109,2 ммоль) в воде (80 мл). По окончании добавления полученную смесь оставляли нагреваться до 25°С, перемешивали в течение 4 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 5% этилацетата в петролейном эфире), получая метил-2-(3-фенилоксиран-2-ил)ацетат (15,0 г; 93%) в виде бесцветного масла. LC-MS: rt = 0,799 мин, m/z = 233,9 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,799 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 233,9.
Стадия 3: метил-(рац-3R,4S)-4-бром-3-гидрокси-4-фенилбутаноат
К раствору метил-2-(3-фенилоксиран-2-ил)ацетата (15,0 г; 78,0 ммоль) в ацетонитриле (400 мл) добавляли бромид лития (6,8 г; 78,0 ммоль) и перхлорат магния (1,7 г; 78,0 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при 20°С в течение 12 ч и разбавляли дихлорметаном (100 мл). Полученную смесь промывали соляной кислотой (1 н.; 100 мл). Отделенный водный слой промывали дихлорметаном (3×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный метил-(рац-3R,4S)-4-бром-3-гидрокси-4-фенилбутаноат (20,0 г; 94%) в виде бесцветного масла. Неочищенное соединение использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC-MS: rt = 0,610 мин, m/z = 256,9 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,610 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 256,9.
Стадия 4: метил-(рац-3R,4R)-4-азидо-3-гидрокси-4-фенилбутаноат
Смесь метил-(рац-3R,4S)-4-бром-3-гидрокси-4-фенилбутаноата (20,0 г; 73,2 ммоль) и азида натрия (14,3 г; 219,7 ммоль) в N,N-диметилформамиде (500 мл) перемешивали при 20°С в течение 16 ч. Смесь разбавляли водой (500 мл) и экстрагировали этилацетатом (3 × 300 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (150 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный метил-(рац-3R,4R)-4-азидо-3-гидрокси-4-фенилбутаноат (17,0 г; 99%) в виде желтого масла. LC-MS: rt = 0,978 мин, m/z = 208,3 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2,0 мин): время удерживания 0,978 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 208,3.
Стадия 5: метил-(рац-3R,4R)-4-амино-3-гидрокси-4-фенилбутаноат
Смесь метил-(рац-3R,4R)-4-азидо-3-гидрокси-4-фенилбутаноата (17,0 г; 72,3 ммоль) и палладия (10%-ного на угле; 7,7 г) в этилацетате (800 мл) гидрировали (15 ф/кв. дюйм (103,4 кПа)) при 25°С в течение 24 ч и затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный метил-(рац-3R,4R)-4-амино-3-гидрокси-4-фенилбутаноат (15,0 г; 99%) в виде бесцветного масла. Неочищенное масло использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC-MS: rt = 0,315 мин, m/z = 210,2 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2,0 мин): время удерживания 0,315 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 210,2.
Стадия 6: цис-4-гидрокси-5-фенилпирролидин-2-он
Раствор метил-(рац-3R,4R)-4-амино-3-гидрокси-4-фенилбутаноата (15,0 г; 71,7 ммоль) в метаноле (200 мл) нагревали при 50°С в течение 16 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 5% метанола в дихлорметане), получая цис-4-гидрокси-5-фенилпирролидин-2-он (9,6 г; 76%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.45-7.26 (m, 5H), 6.39 (br s, 1H), 4.89-4.87 (m, 1Н), 4.66-4.48 (m, 1Н), 2.80-2.62 (m, 1Н), 2.53-2.30 (m, 1Н). LC-MS: rt = 0,678 мин, m/z = 178,2 [М+Н]+.
LCMS (от 0 до 60% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 0,678 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 178,2.
Стадия 7: цис-4-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-фенилпирролидин-2-он
К раствору цис-4-гидрокси-5-фенилпирролидин-2-она (9,6 г; 54,2 ммоль) в дихлорметане (300 мл) добавляли имидазол (11,1 г; 162,5 ммоль) и трет-бутилдиметилсилилхлорид (16,3 г; 108,4 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая цис-4-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-фенилпирролидин-2-он (10,0 г; 63%) в виде белого твердого вещества. LC-MS: rt = 1,257 мин, m/z = 292,3 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,257 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 292,3.
Стадия 8: цис-1-амино-4-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-фенилпирролидин-2-он
К раствору цис-4-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-фенилпирролидин-2-она (10,0 г; 34,3 ммоль) в N,N-диметилформамиде (50 мл) добавляли гидрид натрия (60%-ный; 2,1 г; 51,5 ммоль) при 0°С. После перемешивания при 0°С в течение 30 мин порциями добавляли оксид (аминоокси)дифенилфосфина (12,0 г; 51,47 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный цис-1-амино-4-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-фенилпирролидин-2-он (9,0 г; 86%) в виде коричневого твердого вещества. Это неочищенное вещество использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC-MS: rt = 1,225 мин, m/z = 307,4 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,225 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 307,4.
Стадия 9: этил-цис-2-((3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-оксо-2-фенилпирролидин-1-ил)амино)-2-иминоацетат
Смесь цис-1-амино-4-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-фенилпирролидин-2-она (9,0 г; 29,4 ммоль) и этил-2-этокси-2-имино-ацетата (21,3 г; 146,8 ммоль) в толуоле (500 мл) нагревали при 90°С в течение 18 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (3 × 150 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-цис-2-((3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-оксо-2-фенилпирролидин-1-ил)амино)-2-иминоацетат (10,0 г; 84%) в виде коричневого масла. LC-MS: rt = 1,128 мин, m/z = 406,4 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,128 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 406,4.
Стадия 10: этил-цис-6-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
Смесь этил-цис-2-((3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-оксо-2-фенилпирролидин-1-ил)амино)-2-иминоацетата (10,0 г; 24,7 ммоль) и 4-метилбензолсульфоновой кислоты гидрата (4,7 г; 24,7 ммоль) в толуоле (300 мл) нагревали при 120°С в течение 16 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (3 × 150 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-цис-6-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (5,5 г; 58%) в виде коричневого масла. LC-MS: rt = 1,345 мин, m/z = 388,4 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,345 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 388,4.
Стадия 11: этил-цис-6-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору фторида тетрабутиламмония (18,5 г; 70,9 ммоль) в тетрагидрофуране (200 мл) добавляли этил-цис-6-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (5,5 г; 14,2 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и разбавляли этилацетатом (300 мл). Смесь промывали водой (50 мл), рассолом (50 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-цис-6-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (1,8 г; 46%) в виде желтого твердого вещества. LC-MS: rt = 1,036 мин, m/z = 274,3 [М+Н]+. LCMS (от 0 до 60% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,036 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 274,3.
Стадия 12: этил-транс-6-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору этил-цис-6-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (1,0 г; 3,66 ммоль) в дихлорметане (50 мл) по каплям добавляли трифторид диэтиламиносеры (10,0 г; 62,0 ммоль) при 25°С. Полученную смесь перемешивали при 25°С в течение 1 ч и затем гасили, медленно добавляя насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3 × 50 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (50 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 40% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-транс-6-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (400 мг; 40%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.41-7.24 (m, 3H), 6.92-6.89 (m, 2H), 5.70-5.55 (m, 1H), 5.62-5.48 (m, 1H), 4.49-4.34 (m, 2H), 3.52-3.35 (m, 1H), 3.35-3.15 (m, 1H), 1.40-1.36 (m, 3H). LC-MS: rt = 0,958 мин, m/z = 276,2 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания: 0,958 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 276,2.
Стадия 13: 1-[рац-(5R,6S)-6-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он
К охлажденному (-78°С) раствору этил-транс-6-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (30 мг; 0,11 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли хлорид этилмагния (3,0 М раствор в THF; 0,25 мл; 0,75 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 2 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3 × 15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая, как условно обозначено, 1-[рац-(5R,6S)-6-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он (13,6 мг; 45%) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.34-7.31 (m, 3Н), 6.90-6.87 (m, 2H), 5.63-5.61 (m, 0,5H), 5.59-5.57 (m, 1H), 5.46-5.44 (m, 0,5H), 3.42-3.28 (m, 1H), 3.26-3.21 (m, 1H), 3.03-3.01 (m, 2H), 1.16 (t, J=7,2 Гц, 3Н). LCMS: rt = 0,977 мин, m/z = 260,1 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 0,977 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 260,1.
Способ 25
(рац-(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-(2-пиридил)метанон
К раствору 2-бромпиридина (435 мг; 2,76 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 1,10 мл; 2,76 ммоль) при -78°С. По окончании добавления смесь оставляли нагреваться до 30°С и перемешивали в течение 2 ч. Смесь охлаждали до -78°С и добавляли цис-7-фтор-N-метокси-N-метил-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид (200 мг; 0,69 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 6 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 25-55%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая (рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-(2-пиридил)метанон (32,0 мг; 15%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8.69-8.65 (m, 1H), 8.00-7.90 (m, 2H), 7.62-7.59 (m, 1H), 7.42-7.30 (m, 3Н), 7.25-7.20 (m, 2H), 6.30-6.22 (m, 0,5H), 6.18-6.14 (m, 0,5H), 5.75-5.55 (m, 1Н), 3.77-3.67 (m, 1H), 2.74-2.45 (m, 1H). LCMS: rt = 1,510 мин, m/z = 309,1 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,1% водного аммиака в течение 3 мин): время удерживания 1,510 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 309,1.
Способ 26
Циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и циклопропил-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: циклопропил-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
К охлажденному (-78°С) раствору этил-цис-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (100 мг; 0,36 ммоль) в тетрагидрофуране (4 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли бромид циклопропилмагния (0,5 М раствор в THF; 1,45 мл; 0,73 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 2 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические слои сушили и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 30-60%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая цис рацемический циклопропил-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (15 мг; 10%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.45-7.35 (m, 3Н), 7.27-7.25 (m, 2H), 6.18-6.15 (m, 0,5H), 6.05-6.00 (m, 0,5H), 5.65-5.60 (m, 1H), 3.77-3.65 (m, 1H), 3.05-2.95 (m, 1H), 2.90-2.70 (m, 1H), 1.17-1.13 (m, 2H), 1.10-1.05 (m, 2H). LCMS: rt = 1,031 мин, m/z = 272,3 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,031 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 272,3.
Стадия 2: циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и циклопропил-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Рацемический циклопропил-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (100 мг; 0,37 ммоль) разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
циклопропил-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 3,575 мин) (25,5 мг; 24%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.44-7.38 (m, 3Н), 7.29-7.27 (m, 2H), 6.19 (d, J=5,6 Гц, 0,5Н), 6.05 (d, J=5,2 Гц, 0,5Н), 5.66-5.62 (m, 1H), 3.79-3.71 (m, 1H), 3.05-3.02 (m, 1H), 3.01-2.81 (m, 1H), 1.29-1.09 (m, 4H). LCMS: rt = 0,816 мин, m/z = 271,9 [M+H]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,816 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 271,9;
циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 2, время удерживания = 3,849 мин) (18,5 мг; 17%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.44-7.27 (m, 5H), 6.20-6.17 (m, 0,5H), 6.06-6.03 (m, 0,5H), 5.66-5.64 (m, 1H), 3.79-3.71 (m, 1H), 3.05-3.02 (m, 1H), 3.01-2.81 (m, 1H), 1.19-1.09 (m, 4H). LCMS: rt = 0,817 мин, m/z = 271,9 [M+H]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,817 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 271,9.
Условия SFC: колонка: Chiralpak AD (250 мм × 30 мм, 10 мкм); среда: 0,1% NH3H2O в iPrOH; сначала В 25%, в конце В 25%; скорость потока 60 мл/мин; температура колонки 40°С.
Способ 27
Циклопентил-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5H-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Стадия 1: циклопентил-(цис-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанол
Бромид циклопентилмагния (1 М раствор в THF; 0,73 мл; 0,73 ммоль) по каплям добавляли к перемешиваемому и охлажденному (-78°С) раствору цис-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (100 мг; 0,36 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) в атмосфере азота. По окончании добавления смесь перемешивали при 25°С в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный цис-циклопентил-(7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанол (100 мг; 91%) в виде белого твердого вещества. LCMS: rt = 0,611 мин, m/z = 302,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,611 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 302,1.
Стадия 2: циклопентил-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
К раствору цис-циклопентил-(7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанола (100 мг; 0,33 ммоль) в дихлорметане (15 мл) добавляли диоксид марганца (288 мг; 3,32 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 35°С в течение 2 ч и затем фильтровали через короткую набивку целита. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали препаративной TLC (40% этилацетата в петролейном эфире), получая циклопентил-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (18,2 мг; 18%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.44-7.40 (m, 3H), 7.28-7.26 (m, 2H), 6.19-6.17 (m, 0,5H), 6.05-6.03 (m, 0,5H), 5.64-5.63 (m, 1H), 3.89-3.68 (m, 2H), 2.88-2.75 (m, 1H), 2.02-1.60 (m, 8H). LCMS: rt = 2,070 мин, m/z = 300,2 [М+Н]+. LCMS (от 0 до 60% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 3 мин): время удерживания 2,070 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 300,2.
Способ 28
(рац-(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-(2-тиенил)метанон
К охлажденному (-78°С) раствору 2-иодтиофена (289 мг; 1,38 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) по каплям добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,55 мл; 1,38 ммоль) в атмосфере N2. Смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч, затем добавляли цис-7-фтор-N-метокси-N-метил-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид (100 мг; 0,34 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл). Смесь перемешивали при -78°С в течение еще 2 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 40-70%/0,05% соляной кислоты в воде), получая (рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-(2-тиенил)метанон (15,6 мг; 14%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 8.50-8.49 (m, 1H), 7.96-7.94 (m, 1H), 7.49-7.35 (m, 3H), 7.35-7.27 (m, 2H), 7.26-7.20 (m, 1H), 6.24-6.22 (m, 0,5H), 6.10-6.08 (m, 0,5H), 5.74-5.68 (m, 1H), 3.86-3.72 (m, 1H), 2.91-2.79 (m, 1H). LCMS: rt = 0,891 мин, m/z = 314,1 [M+H]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,891 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 314,1.
Способ 29
Циклобутил-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К охлажденной (0°С) смеси магния (234 мг; 9,65 ммоль), иода (12 мг; 0,05 ммоль), 1,2-дибромэтана (0,1 мл; 0,10 ммоль) в тетрагидрофуране (15 мл) по каплям добавляли бромциклобутан (0,5 мл; 5,85 ммоль) в атмосфере N2. Смесь перемешивали при 35°С в течение примерно 1 ч. Указанный выше свежеприготовленный раствор бромида циклобутилмагния (1,0 мл; 0,39 ммоль) по каплям добавляли к перемешиваемому и охлажденному (-78°С) раствору цис-7-фтор-N-метокси-N-метил-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамида (28 мг; 0,10 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (2 × 5 мл). Объединенные органические слои сушили и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 42-62%/0,05% соляной кислоты в воде), получая циклобутил-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (2 мг; 7%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.40-7.30 (m, 3Н), 7.25-7.21 (m, 2H), 6.15-6.10 (m, 0,5H), 6.01-5.95 (m, 0,5H), 5.60-5.55 (m, 1 H), 4.15-4.07 (m, 1H), 3.74-3.65 (m, 1H), 2.80-2.70 (m, 1 H), 2.35-2.20 (m, 3H), 2.20-2.15 (m, 1H), 2.12-2.00 (m, 1H), 1.90-1.85 (m, 1H). LCMS: rt = 0,883 мин, m/z = 286,0 [M+H]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,883 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 286,0.
Способ 30
1-(рац-(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2,2-диметил-пропан-1-он
К охлажденному (-78°С) раствору этил-цис-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (30 мг; 0,11 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли трет-бутиллитий (1,3 М раствор в пентане, 0,17 мл; 0,22 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 2 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические слои сушили и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 45-75%/0,05% соляной кислоты в воде), получая 1-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2,2-диметил-пропан-1-он (12,7 мг; 40%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.42-7.36 (m, 3Н), 7.36-7.23 (m, 2H), 6.16-6.13 (m, 0,5H), 6.02-5.99 (m, 0,5H), 5.65-5.61 (m, 1H), 3.77-3.68 (m, 1H), 2.85-2.73 (m, 1Н), 1.35 (s, 9H). LCMS: rt = 0,907 мин, m/z = 288,0 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,907 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 288,0.
Способ 31
1-(рац-(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-метил-пропан-1-он
К охлажденному (-78°С) раствору этил-цис-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (200 мг; 0,73 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 мл в THF; 1,1 мл; 2,20 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 2 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3 × 15 мл). Объединенные органические слои сушили и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 30-60%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая рацемический 1-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-метил-пропан-1-он (6,9 мг; 3,4%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.46-7.36 (m, 3H), 7.28-7.26 (m, 2H), 6.18-6.16 (m, 0,5H), 6.05-6.02 (m, 0,5H), 5.65-5.61 (m, 1H), 3.78-3.72 (m, 1H), 3.64-3.61 (m, 1H), 2.87-2.76 (m, 1H), 1.19 (d, J=7,2 Гц, 3H), 1.17 (d, J=6,8 Гц, 3H). LCMS: rt = 1,971 мин, m/z = 274,2 [M+H]+. LCMS (от 0 до 60% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 3 мин): время удерживания 1,971 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 274,2.
Способ 32
1-[(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он и 1-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он
Стадия 1: 1-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он
К охлажденному (-70°С) раствору цис-7-фтор-N-метокси-N-метил-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамида (30 мг; 0,10 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли бромид этилмагния (3,0 М раствор в THF; 0,1 мл; 0,30 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при 30°С в течение примерно 3 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3 × 15 мл). Объединенные органические слои сушили и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 25-55%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая 1-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он (6,3 мг; 23%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.38-7.35 (m, 3H), 7.25-7.23 (m, 2H), 6.15-6.13 (m, 0,5H), 6.01-5.99 (m, 0,5H), 5.59-5.53 (m, 1H), 3.77-3.67 (m, 1 H), 3.05-2.99 (m, 2H), 2.84-2.73 (m, 1H), 1.13 (t, J=7,2 Гц, 3H). LCMS: rt = 1,038 мин, m/z = 260,2 [M+H]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,038 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 260,2.
Стадия 2: 1-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он и 1-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он
Рацемический 1-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он (220 мг) разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
1-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он (пик 1, время удерживания = 2,265 мин) (78 мг; 35%; энантиомерный избыток (ее) 88%) в виде светло-желтого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.43-7.32 (m, 3H), 7.27-7.23 (m, 2H), 6.17-6.14 (m, 0,5H), 6.02-6.00 (m, 0,5H), 5.65-5.58 (m, 1H), 3.84-3.64 (m, 1H), 3.06-3.00 (m, 2H), 2.88-2.69 (m, 1H), 1.13 (t, J=7,2 Гц, 3H). LCMS: rt = 0,822 мин, m/z = 260,0 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,822 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 260,0;
1-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он (пик 2, время удерживания = 2,382 мин) (80 мг; 35%; 91% ее) в виде светло-желтого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.43-7.32 (m, 3H), 7.27-7.23 (m, 2H), 6.17-6.14 (m, 0,5H), 6.02-6.00 (m, 0,5H), 5.65-5.58 (m, 1H), 3.84-3.64 (m, 1H), 3.06-3.00 (m, 2H), 2.88-2.69 (m, 1H), 1.13 (t, J=7,2 Гц, 3H). LCMS: rt = 0,817 мин, m/z = 260,0 [M+H]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,817 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 260,0.
Условия SFC: колонка: AS (250 мм × 30 мм, 5 мкм); среда: 0,1% NH3H2O в EtOH; сначала В 20%, в конце В 20%; скорость потока (60 мл/мин); температура колонки 40°С.
Способ 33
(1-Метилпиразол-4-ил)-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К охлажденному (-70°С) раствору цис-7-фтор-N-метокси-N-метил-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамида (137 мг; 0,47 ммоль) и 1-метил-4-иод-1Н-пиразола (393 мг; 1,89 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) по каплям добавляли трет-бутиллитий (1,3 М раствор в гексане; 1,45 мл; 1,89 ммоль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при -70°С в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 27-57%/0,05% соляной кислоты в воде), получая цис рацемический (1-метилпиразол-4-ил)-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (53,4 мг; 36%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 8.61 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.46-7.34 (m, 3H), 7.32-7.25 (m, 2H), 6.22-6.19 (m, 0,5H), 6.08-6.05 (m, 0,5H), 5.72-5.65 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.85-3.70 (m, 1 H), 2.90-2.75 (m, 1 H). LCMS: rt = 0,791 мин, m/z = 311,9 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,791 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 311,9.
Способ 34
1-[рац-(5R,7R)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]этанон
Стадия 1: (Е)-бензальдегида оксим
К раствору бензальдегида (45,0 г; 424,1 ммоль) в этаноле (100 мл) добавляли карбонат натрия (112,3 г; 1060,1 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорид (35,3 г; 508,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 3 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток разбавляли водой (50 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3 × 150 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (60 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный (Е)-бензальдегида оксим в виде бесцветного масла (51,0 г; 99%), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 2: метил-3-фенил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат
К раствору (Е)-бензальдегида оксима (20,0 г; 165,1 ммоль) в 1,4-диоксане (500 мл) добавляли метилакрилат (14,2 г; 165,1 ммоль), иодид натрия (24,7 г; 165,1 ммоль), 2,6-лутидин (17,6 г; 165,1 ммоль) и трет-бутиловый эфир хлорноватистой кислоты (17,9 г; 165,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 24 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая метил-3-фенил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат в виде желтого твердого вещества (25,0 г; 74%). LCMS: rt = 0,871 мин, m/z = 206,2 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 0,871 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 206,2.
Стадия 3: 3-гидрокси-5-фенил-пирролидин-2-он
Смесь метил-3-фенил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилата (25,0 г; 121,8 ммоль) и палладия (10%-ного на угле; 2,5 г) в этаноле (800 мл) гидрировали (50 ф/кв. дюйм (344,7 кПа)) при 25°C в течение 2 ч, затем фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 3-гидрокси-5-фенил-пирролидин-2-он в виде желтого твердого вещества (18,0 г; 83%), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS: RT = 0,270 мин, m/z = 177,8 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,270 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 177,8.
Стадия 4: цис-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-пирролидин-2-он и транс-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-пирролидин-2-он
К раствору 3-гидрокси-5-фенил-пирролидин-2-она (15,0 г; 84,6 ммоль) в дихлорметане (300 мл) добавляли трет-бутилдиметилхлорсилан (19,1 г; 126,9 ммоль) и имидазол (11,5 г; 169,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 16 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая, как условно обозначено: цис-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-пирролидин-2-он (12,4 г; 51%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.37-7.25 (m, 5H), 4.88-4.53 (m, 1H), 4.54-4.46 (m, 1H), 2.89-2.79 (m, 1H), 1.80-1.71 (m, 1H), 0.93-0.90 (m, 9H), 0.19-0.12 (m, 6H) и транс-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-пирролидин-2-он в виде бесцветного масла (9,3 г; 38%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.44-7.34 (m, 2H), 7.29-7.24 (m, 3H), 4.87-4.80 (m, 1H), 4.44-4.41 (m, 1H), 2.45-2.37 (m, 1H), 2.27-2.22 (m, 1H), 0.93-0.90 (m, 9H), 0.16-0.13 (m, 6H).
Стадия 5: транс-1-амино-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-фенилпирролидин-2-он
К раствору транс-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-пирролидин-2-она (7,0 г; 24,0 ммоль) в N,N-диметилформамиде (200 мл) добавляли гидрид натрия (1,44 г; 36,0 ммоль) при 0°C и смесь перемешивали при 0°C в течение 20 мин. Затем добавляли о-(дифенилфосфорил)гидроксиламин (8,40 г; 36,03 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 16 часов. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая транс-1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-пирролидин-2-он (7,0 г; 95,1%) в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS: RT = 0,775 мин, m/z = 307,0 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,775 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 307,0.
Стадия 6: транс-этил-2-(3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2-оксо-5-фенилпирролидин-1-ил)амино)-2-иминоацетат
К раствору транс-1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-пирролидин-2-она (7,0 г; 22,8 ммоль) в этаноле (150 мл) добавляли этил-2-этокси-2-имино-ацетат (6,63 г; 45,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение 16 ч и затем концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный транс-этил-2-(3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2-оксо-5-фенилпирролидин-1-ил)амино)-2-иминоацетат (8,50 г; 92%) в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS: RT = 2,154 мин, m/z = 406,3 [М+Н]+. LCMS (от 0 до 60% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 3 мин): время удерживания 2,143 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 406,3.
Стадия 7: транс-этил-7-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору этил-2-[[транс-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-2-оксо-5-фенил-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетата (8,5 г; 21,0 ммоль) в толуоле (100 мл) добавляли п-толуолсульфоновую кислоту (4,4 г; 25,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 120°C в течение 16 ч и затем концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный транс-этил-7-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (7,5 г; 92,3%) в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS: RT = 1,022 мин, m/z = 374,2 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,022 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 374,2.
Стадия 8: транс-этил-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору этил-транс-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (7,0 г; 18,06 ммоль) в тетрагидрофуране (120 мл) добавляли фторид тетрабутиламмония (1 н. раствор в THF; 18,06 мл; 18,06 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 40°C в течение 3 ч и затем концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный транс-этил-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (3,5 г; 57%) в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 7.39-7.35 (m, 3Н), 7.14-7.12 (m, 2H), 5.73-5.70 (m, 1H), 5.54-5.51 (m, 1H), 4.47-4.40 (m, 2H), 3.24-3.21 (m, 1H), 3.05-3.00 (m, 1H), 1.41-1.36 (m, 3Н).
Стадия 9: цис-этил-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору транс-этил-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (100 мг; 0,37 ммоль) в дихлорметане (8 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (176,9 мг; 1,10 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч и затем гасили, добавляя воду (20 мл). Полученную смесь экстрагировали дихлорметаном (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл), рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (50%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,5), получая цис-этил-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (54 мг; 54%) в виде светло-желтого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.44-7.31 (m, 3Н), 7.25-7.17 (m, 2H), 6.09 (dd, J=1,4 Гц, 7,2 Гц, 1H), 5.95 (dd, J=1,4 Гц; 7,2 Гц, 1H), 5.52-5.47 (m, 1H), 4.53-4.37 (m, 2H), 3.74-3.54 (m, 1H), 3.05-2.82 (m, 1H), 1.48-1.33 (m, 3H).
Стадия 10: цис-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновая кислота
К раствору цис-этил-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (54 мг; 0,20 моль) в тетрагидрофуране (4 мл) и воде (1 мл) добавляли гидроксида лития моногидрат (25 мг; 0,59 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 2 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Значение рН остатка подводили до 5, добавляя соляную кислоту (2 н.). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали водой (10 мл), рассолом (10 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенную цис-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновую кислоту (45 мг; 93%) в виде белого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
1-[рац-(5R,7R)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]этанон
Стадия 11: цис-7-фтор-N-метокси-N-метил-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид
Смесь цис-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновой кислоты (350 мг; 1,42 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (201 мг; 1,49 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (407 мг; 2,12 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (180 мг; 1,84 ммоль) в N,N-диметилформамиде (10 мл) перемешивали при 20°C в течение 18 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали препаративной TLC (50%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,7), получая цис-7-фтор-N-метокси-N-метил-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид (225 мг; 54,7%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.41-7.35 (m, 3H), 7.26-7.22 (m, 2H), 6.09-6.07 (m, 0,5H), 5.96-5.93 (m, 0,5H), 5.49-5.46 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.66-3.59 (m, 1H), 3.55-3.35 (brs, 3H), 2.99-2.88 (m, 1H). LCMS: RT = 0,564 мин, m/z = 291,1 [M+H]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,564 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 291,1.
Стадия 12: 1-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]этанон
К охлажденному (-70°C) раствору цис-7-фтор-N-метокси-N-метил-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамида (30 мг; 0,10 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли бромид метилмагния (3,0 М раствор в THF; 0,1 мл; 0,30 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при 30°C в течение примерно 3 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои сушили и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 25-55%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая 1-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]этанон (4 мг; 15%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.41-7.35 (m, 3Н), 7.26-7.24 (m, 2H), 6.16-6.14 (m, 0,5H), 6.01-6.00 (m, 0,5H), 5.62-5.58 (m, 1H), 3.77-3.68 (m, 1H), 2.85-2.74 (m, 1H), 2.55 (s, 3Н). LCMS: RT = 0,954 мин, m/z = 246,2 [M+H]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 0,954 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 246,2.
Способ 35
[(1S,2R)-2-Фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и [(1R,2S)-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К охлажденному (-70°C) раствору (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (150 мг; 0,53 ммоль) и транс-2-фтор-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (157 мг; 1,06 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,64 мл; 1,60 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -70°C в течение 1 ч, затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (30 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 37-67%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая [транс-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (25 мг; 16%) в виде темно-красного твердого вещества. Это вещество далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
[(1S,2R)-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 3,130 мин) (11,2 мг; 44%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.51-7.33 (m, 3Н), 7.30-7.28 (m, 2H), 6.21-6.03 (m, 1H), 5.68-5.64 (m, 1H), 5.02-4.94 (m, 1H), 4.84-4.80 (m, 1H), 3.84-3.70 (m, 1H), 3.47-3.44 (m, 1H), 2.90-2.78 (m, 1H), 1.73-1.62 (m, 1H), 1.60-1.52 (m, 1H). LCMS: RT = 1,765 мин, m/z = 290,1 [M+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% бикарбоната аммония в течение 2 мин): время удерживания 1,765 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 290,1;
[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 2, время удерживания = 3,464 мин) (10,2 мг; 40%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.51-7.33 (m, 3Н), 7.32-7.20 (m, 2H), 6.21-6.04 (m, 1H), 5.70-5.62 (m, 1H), 5.00-4.82 (m, 1H), 3.83-3.70 (m, 1H), 3.47-3.42 (m, 1H), 2.90-2.77 (m, 1H), 1.74-1.63 (m, 1H), 1.60-1.52 (m, 1 H). LCMS: RT = 1,756 мин, m/z = 290,1 [M+H]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% бикарбоната аммония в течение 2 мин): время удерживания 1,756 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 290,1.
Условия SFC: колонка: Chiralcel OD-3, 150 × 4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: этанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% B в течение 2,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин.
Способ 36
(1-Фторциклопропил)(7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Стадия 1: 1-фтор-N-метокси-N-метилциклопропанкарбоксамид
Смесь 1-фторциклопропанкарбоновой кислоты (150 мг; 1,44 ммоль), N,N-диизопропилэтиламина (465 мг; 3,60 ммоль), 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфата (712 мг; 1,87 ммоль) и N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (183 мг; 1,87 ммоль) в N,N-диметилформамиде (5 мл) перемешивали при 25°C в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли насыщенным водным раствором хлорида аммония (15 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2×20 мл), рассолом (20 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-фтор-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамид (140 мг; 66%) в виде бесцветного масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 3.75 (s, 3Н), 3.26 (s, 3Н), 1.31-1.21 (m, 4H).
Стадия 2: (1-фторциклопропил)(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
К охлажденному (-78°C) раствору цис-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (50 мг; 0,18 ммоль) и 1-фтор-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (52 мг; 0,35 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,21 мл; 0,53 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 20-45%/0,05% HCl в воде), получая неочищенный продукт (20 мг). Этот неочищенный продукт далее очищали препаративной TLC (30%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,3), получая (1-фторциклопропил)(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (10,2 мг; 19%) в виде светло-желтого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.41-7.37 (m, 3H), 7.23-7.21 (m, 2H), 6.09-6.07 (m, 0,5H), 5.96-5.93 (m, 0,5H), 5.51-5.50 (m, 1H), 3.67-3.58 (m, 1H), 3.00-2.90 (m, 1H), 1.92-1.88 (m, 2H), 1.62-1.58 (m, 2H). LCMS: RT = 1,726 мин, m/z = 290,1 [M+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,1% водного аммиака в течение 3 мин): время удерживания: 1,726 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 290,1.
Способ 37
((5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(3-метилоксетан-3-ил)метанон
К охлажденному (-78°C) раствору (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (80 мг; 0,28 ммоль) и N-метокси-N,3-диметил-оксетан-3-карбоксамида (90 мг; 0,57 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,34 мл; 0,85 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 30-60%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая [(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-(3-метилоксетан-3-ил)метанон (16,3 мг; 19%) в виде розового твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.43-7.37 (m, 3H), 7.25-7.23 (m, 2H), 6.17-6.15 (m, 0,5H), 6.03-6.01 (m, 0,5H), 5.65-5.62 (m, 1H), 5.09-5.02 (m, 2H), 4.52-4.26 (m, 2H), 3.78-3.70 (m, 1H), 2.86-2.76 (m, 1H), 1.74 (s, 3H). LCMS: RT = 0,675 мин, m/z = 302,1 [M+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания: 0,675 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 302,1.
Способ 38
((5R,7R)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(3-метилоксетан-3-ил)метанон
Стадия 1: N-метокси-N,3-диметилоксетан-3-карбоксамид
Смесь N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (252 мг; 2,58 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (396 мг; 2,07 ммоль), 3-метилоксетан-3-карбоновой кислоты (200 мг; 1,72 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (140 мг; 1,03 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (556 мг; 4,31 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивали при 25°C в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2×10 мл), рассолом (20 мл), сушили и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный N-метокси-N,3-диметил-оксетан-3-карбоксамид (270 мг; 98%) в виде бесцветного масла. Это неочищенное масло использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4.96-4.93 (m, 2H), 4.29-4.27 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.18 (s, 3H), 1.66 (s, 3H).
Стадия 2: ((5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(3-метилоксетан-3-ил)метанон
К охлажденному (-78°C) раствору (5R,7R)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (100 мг; 0,35 ммоль) и N-метокси-N,3-диметил-оксетан-3-карбоксамида (113 мг; 0,71 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,43 мл; 1,06 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 30-60%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая [(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-(3-метилоксетан-3-ил)метанон (13,6 мг; 13%) в виде розового твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.43-7.37 (m, 3Н), 7.25-7.23 (m, 2H), 6.17-6.15 (m, 0,5H), 6.03-6.01 (m, 0,5H), 5.65-5.62 (m, 1H), 5.09-5.02 (m, 2H), 4.52-4.26 (m, 2H), 3.78-3.70 (m, 1H), 2.86-2.76 (m, 1H), 1.74 (s, 3Н). LCMS: RT = 0,678 мин, m/z = 302,1 [M+H]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания: 0,678 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 302,1.
Способ 39
3-Оксабицикло[3.1.0]гексан-6-ил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: N-метокси-N-метил-3-оксабицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксамид
Смесь 3-оксабицикло[3.1.0]гексан-6-карбоновой кислоты (транс-; 300 мг; 2,34 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (297 мг; 3,04 ммоль), 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфата (1157 мг; 3,04 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (756 мг; 5,85 ммоль) в N,N-диметилформамиде (15 мл) перемешивали при 25°C в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2×10 мл), рассолом (20 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая N-метокси-N-метил-3-оксабицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксамид (180 мг; 45%) в виде бесцветного масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 3.95-3.93 (m, 2H), 3.80-3.78 (m, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.20 (s, 3H), 2.17-2.09 (m, 3H).
Стадия 2: 3-оксабицикло[3.1.0]гексан-6-ил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К охлажденному (-70°C) раствору цис-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (50 мг; 0,18 ммоль) и N-метокси-N-метил-3-оксабицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксамида (61 мг; 0,35 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,21 мл; 0,53 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -70°C в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 30-60%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая 3-оксабицикло[3.1.0]гексан-6-ил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (2,2 мг; 3,9%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.43-7.39 (m, 3H), 7.27-7.26 (m, 2H), 6.12-5.96 (m, 1H), 5.53-5.49 (m, 1H), 4.02-3.99 (m, 2H), 3.82-3.80 (m, 2H), 3.70-3.61 (m, 1H), 3.07-3.05 (m, 1H), 3.02-2.95 (m, 1H), 2.45-2.43 (m, 2H). LCMS: RT = 0,821 мин, m/z = 313,9 [M+H]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,821 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 313,9.
Способ 40
Оксетан-3-ил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: N-метокси-N-метил-оксетан-3-карбоксамид
Смесь оксетан-3-карбоновой кислоты (300 мг; 2,94 ммоль), 1,1'-карбонилдиимидазола (524 мг; 3,23 ммоль) и N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (286 мг; 2,94 ммоль) в дихлорметане (8 мл) перемешивали при 25°C в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2×10 мл), рассолом (20 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (60%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,3), получая N-метокси-N-метил-оксетан-3-карбоксамид (60 мг; 14%) в виде бесцветного масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4.92-4.89 (m, 2H), 4.80-4.76 (m, 2H), 4.19-4.13 (m, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.21 (s, 3H).
Стадия 2: оксетан-3-ил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К охлажденному (-70°C) раствору цис-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (38 мг; 0,13 ммоль) и N-метокси-N-метил-оксетан-3-карбоксамида (39 мг; 0,27 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,16 мл; 0,40 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -70°C в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 25-55%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая оксетан-3-ил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (6,3 мг; 15,5%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.43-7.40 (m, 3Н), 7.27-7.23 (m, 2H), 6.11-5.95 (m, 1H), 5.50-5.49 (m, 1H), 4.97-4.90 (m, 4H), 4.72-4.68 (m, 1H), 3.68-3.59 (m, 1H), 3.03-2.92 (m, 1H). LCMS: RT = 0,782 мин, m/z = 287,9 [M+H]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,782 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 287,9.
Способ 41
[1-(Гидроксиметил)циклопропил]-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: 1-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-циклопропанкарбоновая кислота
К раствору 1-(гидроксиметил)циклопропанкарбоновой кислоты (200 мг; 1,72 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли трет-бутилдиметилхлорсилан (532 мг; 3,53 ммоль) и имидазол (240 мг; 3,53 ммоль). Смесь перемешивали при 25°C в течение 5 ч и затем гасили, добавляя воду (10 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (2×10 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в смеси ацетонитрил (6 мл)/вода (6 мл) и добавляли гидроксид натрия (138 мг; 3,44 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 25°C в течение 10 ч и затем значение рН подводили до 4, добавляя лимонную кислоту. Раствор экстрагировали этилацетатом (2×20 мл). Объединенные органические слои сушили и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенную 1-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]циклопропанкарбоновую кислоту (400 мг; 100%) в виде бесцветного масла.
Стадия 2: 1-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамид
Смесь 1-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]циклопропанкарбоновой кислоты (400 мг; 1,74 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (423 мг; 4,34 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (499 мг; 2,6 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (235 мг; 1,74 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (1,23 мл; 6,95 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивали при 25°C в течение 18 ч. Полученную смесь распределяли между водой (30 мл) и дихлорметаном (30 мл). Отделенный органический слой сушили и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамид (200 мг; 42%) в виде бесцветного масла. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания: 0,848 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 274,1.
Стадия 3: (1-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)циклопропил)-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К охлажденному (-78°C) раствору цис-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (60 мг; 0,21 ммоль) и 1-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (116 мг; 0,43 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл) добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,26 мл; 0,64 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали препаративной TLC (50%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,4), получая [1-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]циклопропил]-[цис-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (34 мг; 38%) в виде светло-коричневого масла.
Стадия 4: [1-(гидроксиметил)циклопропил]-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Смесь [1-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]циклопропил]-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона (34 мг; 0,08 ммоль) и 2,2,2-трифторуксусной кислоты (0,50 мл) в дихлорметане (3 мл) перемешивали при 20°C в течение 2 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 30-60%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая [1-(гидроксиметил)циклопропил]-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (4,1 мг; 16%) в виде светло-коричневого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.43-7.37 (m, 3H), 7.27-7.25 (m, 2H), 6.17-6.15 (m, 0,5H), 6.03-6.01 (m, 0,5H), 5.63-5.61 (m, 1H), 3.96-3.85 (m, 2H), 3.77-3.71 (m, 1H), 2.86-2.75 (m, 1H), 1.71-1.67 (m, 2H), 1.10-1.07(m, 2H). LCMS: RT = 0,648 мин, m/z = 302,1 [M+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,648 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 302,1.
Способ 42
((1S)-2,2-Дифторциклопропил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон и ((1R)-2,2-дифторциклопропил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Стадия 1: 2,2-дифтор-N-метокси-N-метилциклопропанкарбоксамид
Смесь 2,2-дифторциклопропанкарбоновой кислоты (1,00 г; 8,19 ммоль), N,N-диизопропилэтиламина (2646 мг; 20,5 ммоль), 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфата (4,05 г; 10,6 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (1,04 г; 10,7 ммоль) в N,N-диметилформамиде (10 мл) перемешивали при 25°C в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли насыщенным водным раствором хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2×20 мл), рассолом (30 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая 2,2-дифтор-N-метокси-N-метилциклопропанкарбоксамид (700 мг; 52%) в виде бесцветного масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 3.77 (s, 3H), 3.26 (s, 3H), 2.96-2.91 (m, 1H), 2.16-2.12 (m, 1H), 1.69-1.65 (m, 1H).
Стадия 2: ((1S)-2,2-дифторциклопропил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон и ((1R)-2,2-дифторциклопропил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
К охлажденному (-78°C) раствору (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (300 мг; 1,06 ммоль) и 2,2-дифтор-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (351 мг; 2,13 ммоль) в тетрагидрофуране (15 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 1,28 мл; 3,19 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 20-45%/0,225% HCl в воде), получая (2,2-дифторциклопропил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (120 мг; 37%) в виде белого твердого вещества. Это вещество далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
((1S)-2,2-дифторциклопропил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (пик 1, время удерживания = 2,069 мин) (35,0 мг; 29%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.42-7.38 (m, 3H), 7.31-7.29 (m, 2H), 6.21-6.19 (m, 0,5H), 6.07-6.05 (m, 0,5H), 5.68-5.66 (m, 1H), 3.85-3.76 (m, 2H), 2.86-2.83 (m, 1H), 2.32-2.28 (m, 1H), 1.96-1.93 (m, 1H). LCMS: RT = 1,834 мин, m/z = 308,1 [M+H]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,1% водного аммиака в течение 3 мин): время удерживания: 1,834 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 308,1;
((1R)-2,2-дифторциклопропил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (пик 2, время удерживания = 3,055 мин) (35,0 мг; 29%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.45-7.41 (m, 3H), 7.30-7.28 (m, 2H), 6.21-6.19 (m, 0,5H), 6.07-6.05 (m, 0,5H), 5.66-5.65 (m, 1H), 3.87-3.74 (m, 2H), 2.89-2.79 (m, 1H), 2.33-2.28 (m, 1H), 1.98-1.97 (m, 1H). LCMS: RT = 1,822 мин, m/z = 308,1 [M+H]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,1% водного аммиака в течение 3 мин): время удерживания: 1,822 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 308,1.
Условия SFC: колонка Chiralcel OD-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: СО2, В: изопропанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% B в течение 2,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 35°C.
Способ 43
(1-Фторциклопропил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
К охлажденному (-78°C) раствору 1-фтор-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (313 мг; 2,13 ммоль) и (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (300 мг; 1,06 ммоль) в тетрагидрофуране (30 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 1,28 мл; 3,19 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 20-45%/0,05% HCl в воде) и затем препаративной TLC (30%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,3), получая (1-фторциклопропил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (80 мг; 25%) в виде светло-желтого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.40-7.37 (m, 3H), 7.23-7.21 (m, 2H), 6.09-6.07 (m, 0,5H), 5.96-5.94 (m, 0,5H), 5.51-5.49 (m, 1H), 3.67-3.58 (m, 1H), 3.00-2.90 (m, 1H), 1.92-1.88 (m, 2H), 1.62-1.60 (m, 2H). LCMS: RT = 1,736 мин; m/z = 290,1 [M+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,1% водного аммиака в течение 3 мин): время удерживания: 1,736 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 290,1.
Способ 44
Циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: 1-(2-фторфенил)бут-3-ен-1-ол
К раствору 2-фторбензальдегида (15,0 г; 120,86 ммоль) в тетрагидрофуране (250 мл) добавляли бромид аллилмагния (1,0 М в тетрагидрофуране; 150,0 мл; 150,0 ммоль) при 0°C в атмосфере азота. По окончании добавления смесь оставляли нагреваться до 25°C и перемешивали в течение 2 ч, затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (100 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 5% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-(2-фторфенил)бут-3-ен-1-ол (6,0 г; 24%) в виде желтого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.49-7.27 (m, 1H), 7.29-7.12 (m, 2H), 7.05-7.00 (m, 1H), 5.89-5.80 (m, 1H), 5.20-5.13 (m, 2H), 5.15-5.07 (m, 1H), 2.66-2.55 (m, 1H), 2.57-5.48 (m, 1H).
Стадия 2: трет-бутил((1-(2-фторфенил)бут-3-ен-1-ил)окси)диметилсилан
К раствору 1-(2-фторфенил)бут-3-ен-1-ола (6,0 г; 36,1 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавляли имидазол (4,9 г; 72,2 ммоль) и трет-бутилдиметилхлорсилан (7,1 г; 146,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 16 ч и гасили путем добавления воды (100 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (2×100 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, 100%-ный петролейный эфир), получая трет-бутил-[1-(2-фторфенил)бут-3-енокси]-диметил-силан (8,5 г; 84%) в виде светлого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.60-7.36 (m, 1H), 7.34-7.18 (m, 2H), 7.13-7.02 (m, 1H), 5.97-5.85 (m, 1H), 5.21-5.07 (m, 3Н), 2.60-2.48 (m, 2H), 0.99 (s, 9H), 0.15 (s, 3H), 0.00 (s, 3H).
Стадия 3: 3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(2-фторфенил)пропаналь
К раствору трет-бутил-[1-(2-фторфенил)бут-3-енокси]-диметил-силана (8,50 г; 30,3 ммоль) в воде (100 мл) и тетрагидрофуране (100 мл) добавляли тетраоксид осмия (0,15 г; 0,6 ммоль). По окончании перемешивания в течение 30 мин при 25°C добавляли малыми порциями в течение 2 ч периодат натрия (25,90 г; 121,2 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при 25°C и гасили путем добавления холодного насыщенного водного раствора тиосульфата натрия (100 мл). Смесь перемешивали в течение 30 мин и затем экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенные органические слои промывали водой (50 мл), рассолом (50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 5% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2-фторфенил)пропаналь (5,5 г; 64%) в виде черного масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9.84-9.77 (m, 1H), 7.53-7.51 (m, 1H), 7.31-7.24 (m, 1Н), 7.21-7.13 (m, 1H), 7.09-6.98 (m, 1H), 5.58-5.55 (m, 1H), 2.85-2.80 (m, 1H), 2.74-2.64 (m, 1H), 0.92-0.85 (m, 9H), 0.09 (s, 3H), -0.09 (s, 3H).
Стадия 4: 1-(3-бром-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(2-фторфенил)пропан-1-ол
К охлажденному (-78°C) раствору 3,5-дибром-1-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазола (6,3 г; 20,1 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл) добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 8,6 мл; 21,4 ммоль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при -78°C в течение 30 мин, затем по каплям добавляли раствор 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2-фторфенил)пропаналя (5,5 г; 19,5 ммоль) в тетрагидрофуране (25 мл). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°C в течение 1,5 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (50 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2-фторфенил)пропан-1-ол (8,0 г; 80%) в виде желтого масла. Использовали в таком виде на следующей стадии.
Стадия 5: 2-бром-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол
Смесь 1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2-фторфенил)пропан-1-ола (8,0 г; 15,55 ммоль) и трифторуксусной кислоты (30,0 мл) в дихлорметане (3,0 мл) перемешивали при 50°C в течение 5 ч и концентрировали при пониженном давлении. Значение рН остатка подводили до 9, добавляя насыщенный водный раствор бикарбоната натрия, и экстрагировали дихлорметаном (2×50 мл). Объединенные органические слои промывали водой (50 мл), рассолом (50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая 2-бром-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол (2,0 г; 43%) в виде светло-желтого твердого вещества. LCMS: RT = 0,505 мин, m/z = 298,1 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 0,505 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 298,1.
Стадия 6: (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
К раствору 2-бром-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (750 мг; 2,52 ммоль) в толуоле (20 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (1,62 г; 10,06 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и затем медленно добавляли в ледяную воду (20 мл) при 0°C. Смесь экстрагировали дихлорметаном (2×50 мл). Объединенные органические слои промывали водой (50 мл), рассолом (50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 15% этилацетата в петролейном эфире), получая рац-(5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (250 мг; 33%) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.40-7.27 (q, J=6,6 Гц, 1Н), 7.20-7.10 (m, 2H), 7.01-6.97 (m, 1H), 6.10-5.89 (m, 1Н), 5.84-5.75 (m, 1Н), 3.70-3.53 (m, 1Н), 2.96-2.75 (m, 1Н). LCMS: RT = 1,112 мин, m/z = 300,0 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,112 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 300,0.
Эту цис-смесь далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
(5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5H-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (пик 2, время удерживания = 3,408 мин) (100 мг; 40%) в виде белого твердого вещества. (Также собирали (5R,7R)-изомер (пик 1, время удерживания = 3,139 мин) (100 мг; 40%)).
Условия SFC: колонка: Chiralpak AD-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: этанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% B в течение 2,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 35°C.
Стадия 7: циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (100 мг; 0,33 ммоль) и N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (86 мг; 0,67 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,27 мл; 0,67 ммоль) при -78°C в атмосфере азота. Смесь перемешивали при -78°C в течение 2 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 35-65%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая, как условно обозначено, циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (7,2 мг; 7%) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.47-7.41 (m, 1H), 7.25-7.18 (m, 2H), 7.16-7.13 (m, 1H), 6.22-6.06 (m, 1H), 5.92-5.88 (m, 1H), 3.85-3.78 (m, 1H), 3.08-3.02 (m, 1H), 2.93-2.78 (m, 1H), 1.22-1.17 (m, 2H), 1.15-1.09 (m, 2H). LCMS: RT = 1,043 мин, m/z = 290,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% бикарбоната аммония в течение 3 мин): время удерживания 1,043 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 290,2.
Способ 45
(S)-Циклопропил(5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
К раствору этил-(5S)-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (100 мг; 0,36 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли бромид цикло про пил магния (0,5 М раствор в тетрагидрофуране; 0,72 мл; 0,36 ммоль) при -78°C. По окончании добавления смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 40-50%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая циклопропил-[(5S)-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (50 мг; 51%) в виде белого твердого вещества (ее 80%). Продукт далее очищали хиральной SFC, получая, как условно обозначено, (S)-циклопропил(5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (17,5 мг; 34%) в виде коричневого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.44-7.35 (m, 1Н), 7.23-7.16 (m, 3H), 5.81-5.77 (m, 1H), 3.37-3.29 (m, 1H), 3.21-3.03 (m, 2H), 2.99-2.93 (m, 1H), 2.77-2.65 (m, 1H), 1.16-1.09 (m, 2H), 1.09-1.00 (m, 2H). LC-MS: RT = 0,699 мин, m/z = 272,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,699 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 272,1.
Условия SFC: колонка: Chiralpak AD-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: СО2, В: этанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5,5 мин и выдерживание при 40% в течение 3 мин, затем при 5% B в течение 1,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 40°C.
Способ 46
(3,3-Дифторциклобутил)((5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
К раствору 3,3-дифтор-N-метокси-N-метил-циклобутанкарбоксамида (76 мг; 0,43 ммоль) и (5R,7R)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (60 мг; 0,21 ммоль) в тетрагидрофуране (13 мл) по каплям добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,26 мл; 0,64 ммоль) при -78°C. По окончании добавления смесь перемешивали при -78°C в течение 2 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (25 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×25 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 20-45%/0,225% соляной кислоты в воде), получая, как условно обозначено, (3,3-дифторциклобутил)-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (11,0 мг; 16%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.43-7.38 (m, 3H), 7.29-7.27 (m, 2H), 6.19-6.17 (m, 0,5H), 6.05-6.03 (m, 0,5H), 5.64-5.63 (m, 1H), 3.94-3.93 (m, 1H), 3.79-3.75 (m, 1H), 2.90-2.82 (m, 5H). LCMS: RT = 1,904 мин, m/z = 322,1 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,1% водного аммиака в течение 3 мин): время удерживания 1,904 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 322,1.
Способ 47
[(5S)-7,7-Дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1S,2R)-2-фторциклопропил]метанон и [(5S)-7,7-дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]метанон
Стадия 1: 2-бром-5-фенил-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7(6Н)-он
К раствору 2-бром-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (2,0 г; 7,14 ммоль) в дихлорметане (100 мл) добавляли хлорхромат пиридиния (1,7 г; 7,85 ммоль). Смесь перемешивали при 20°C в течение 18 ч и затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая 2-бром-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-он (1,8 г; 88%) в виде белого твердого вещества. Использовали в таком виде на следующей стадии.
Стадия 2: (S)-2-бром-7,7-дифтор-5-фенил-6,7-дигидро-5H-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
К охлажденному раствору 2-бром-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-она (1,7 г; 6,11 ммоль) в дихлорметане (80 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (7,88 мл; 61,13 ммоль) при 0°C. По окончании перемешивания при 25°C в течение 2 ч, смесь выливали в ледяную воду (10 мл) и экстрагировали дихлорметаном (2×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая рацемический 2-бром-7,7-дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (1,5 г; 82%) в виде розового твердого вещества. LC-MS: RT = 0,774 мин, m/z = 303,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,774 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 303,1.
Рацемический продукт (950 мг; 3,17 ммоль) далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
(5R)-2-бром-7,7-дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (пик 1, время удерживания = 2,308 мин) (410 мг; 43%) в виде светло-коричневого твердого вещества;
(5S)-2-бром-7,7-дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (пик 2, время удерживания = 2,614 мин) (440 мг; 46%) в виде светло-коричневого твердого вещества.
Условия SFC: колонка: OJ (250 мм × 50 мм, 10 мкм); подвижная фаза: А: СО2, В: 0,1% NH3H2O в EtOH; градиент: от 20% до 20% В; скорость потока: 180 мл/мин; температура колонки: 40°C.
Стадия 3: [(5S)-7,7-дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1S,2R)-2-фторциклопропил]метанон и [(5S)-7,7-дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]метанон
К смеси (5S)-2-бром-7,7-дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (200 мг; 0,67 ммоль) и транс-2-фтор-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (196 мг; 1,33 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,8 мл; 2,0 ммоль) при -78°C. По окончании добавления смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали досуха при пониженном давлении, получая неочищенный продукт, который очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 45-75%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая [(5S)-7,7-дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[транс-2-фторциклопропил]метанон (50 мг; 24%) в виде коричневого масла. Этот рацемический продукт разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
[(5S)-7,7-дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1S,2R)-2-фторциклопропил]метанон (пик 1, время удерживания = 2,365 мин) (15,1 мг; 30%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.49-7.44 (m, 3H), 7.33-7.30 (m, 2H), 5.99-5.92 (m, 1H), 5.02-5.00 (m, 0,5H), 4.86-4.82 (m, 0,5H), 3.89-3.86 (m, 1H), 3.51-3.47 (m, 1H), 3.34-3.33 (m, 0,5H), 3.32-3.22 (m, 0,5H), 1.78-1.70 (m, 1H), 1.63-1.57 (m, 1H). LC-MS: RT = 0,822 мин, m/z = 308,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,822 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 308,0.
[(5S)-7,7-Дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]метанон (пик 2, время удерживания = 3,163 мин) (13,6 мг; 27%) в виде белого твердого вещества.
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.47-7.43 (m, 3H), 7.31-7.29 (m, 2H), 5.98-5.94 (m, 1H), 5.05-4.99 (m, 0,5H), 4.86-4.83 (m, 0,5H), 3.91-3.86 (m, 1H), 3.47-3.45 (m, 1H), 3.34-3.26 (m, 1H), 1.74-1.68 (m, 1H), 1.62-1.56 (m, 1 H). LC-MS: RT = 0,818 мин, m/z = 308,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,818 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 308,1.
Условия SFC: колонка: колонка: AD (250 мм × 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: А: CO2, В: 0,1% NH3H2O в EtOH; градиент: от 20% до 20% В; скорость потока: 50 мл/мин; температура колонки: 40°C.
Способ 48
Циклопропил-[(5S)-7,7-дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и циклопропил-[(5R)-7,7-дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору 7,7-дифтор-N-метокси-N-метил-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамида (100 мг; 0,32 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли бромид циклопропилмагния (0,5 М раствор в тетрагидрофуране; 2,6 мл; 1,3 ммоль) при -78°C в атмосфере азота. Смесь перемешивали при -78°C в течение 2 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая циклопропил-(7,7-дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (60 мг; 64%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.38-7.31 (m, 3Н), 7.16-7.11 (m, 2H), 5.66-5.60 (m, 1H), 3.73-3.61 (m, 1H), 3.23-3.11 (m, 1H), 3.00-2.96 (m, 1H), 1.31-1.19 (m, 2H), 1.11-0.96 (m, 2H).
Этот рацемат далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
циклопропил-[(5S)-7,7-дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 2, время удерживания = 2,971 мин) (22,4 мг; 37%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.45-7.41 (m, 3Н), 7.23-7.21 (m, 2H), 5.73-5.68 (m, 1H), 3.75-3.70 (m, 1H), 3.31-3.19 (m, 1H), 3.09-3.04 (m, 1H), 1.37-1.32 (m, 2H), 1.14-1.09 (m, 2H). LCMS: RT = 1,238 мин, m/z = 290,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,1% водного аммиака в течение 3 мин): время удерживания 1,238 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 290,2;
циклопропил-[(5R)-7,7-дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 2,677 мин) (24,7 мг; 41%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.45-7.41 (m, 3Н), 7.23-7.20 (m, 2H), 5.72-5.68 (m, 1H), 3.81-3.66 (m, 1H), 3.28-3.21 (m, 1H), 3.09-3.05 (m, 1H), 1.37-1.27 (m, 2H), 1.17-1.05 (m, 2H). LCMS: RT = 1,239 мин, m/z = 290,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,1% водного аммиака в течение 3 мин): время удерживания 1,239 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 290,2.
Условия SFC: колонка: Chiralcel OJ (250 мм × 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: А: CO2, В: этанол (0,1% NH3H2O); градиент: от 25% до 25% B в течение 5 мин; 2,5 мл/мин; температура колонки: 35°C.
Способ 49
(2,2-Дифторспиро[2.3]гексан-5-ил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: 1,1-дифтор-N-метокси-N-метилспиро[2.3]гексан-5-карбоксамид
Смесь 1-гидроксибензотриазола (83 мг; 0,62 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (180 мг; 1,85 ммоль), 2,2-дифторспиро[2.3]гексан-5-карбоновой кислоты (200 мг; 1,23 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (284 мг; 1,48 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (478 мг; 3,70 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивали при 25°C в течение 12 ч и разбавляли водой (30 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая 2,2-дифтор-N-метокси-N-метил-спиро[2.3]гексан-5-карбоксамид (130 мг; 51%) в виде бесцветного масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 3.67 (s, 3Н), 3.65-3.51 (m, 1H), 3.21 (s, 3Н), 2.78-2.68 (m, 1H), 2.57-2.47 (m, 1H), 2.48-2.37 (m, 1H), 2.28-2.17 (m, 1H), 1.32-1.13 (m, 2H).
Стадия 2: (2,2-дифторспиро[2.3]гексан-5-ил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К охлажденному (-78°C) раствору (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (50 мг; 0,18 ммоль) и 2,2-дифтор-N-метокси-N-метил-спиро[2.3]гексан-5-карбоксамида (73 мг; 0,35 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в н-гексане; 0,28 мл; 0,71 ммоль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при -78°C в течение 2 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 47-77%/0,2% муравьиной кислоты в воде), получая (2,2-дифторспиро[2.3]гексан-5-ил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (10,8 мг; 17%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.43-7.38 (m, 3H), 7.28-7.26 (m, 2H), 6.18-6.02 (m, 1H), 5.64-5.62 (m, 1H), 4.24-4.08 (m, 1H), 3.87-3.64 (m, 1H), 2.91-2.74 (m, 1H), 2.68-2.28 (m, 4H), 1.32-1.23 (m, 2H). LCMS: RT = 1,281 и 1,298 мин, m/z = 348,1 [M+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 1,281 и 1,298 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 348,1.
Способ 50
1-[(5S)-5-(2-Хлорфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он
Стадия 1: этил-4-(2-хлорфенил)-4-оксобутаноат
К раствору 2-хлорацетофенона (100,0 г; 646,87 ммоль), 1,3-диметил-3,4,5,6-тетрагидро-2(1Н)-пиримидинона (156,4 мл; 1293,70 ммоль) в тетрагидрофуране (500 мл) добавляли [бис(триметилсилил)амино]литий (1,0 М раствор в тетрагидрофуране; 711,6 мл; 711,56 ммоль) при -60°C. Смесь перемешивали при -60°C в течение 100 мин и быстро добавляли этилбромацетат (143,5 мл; 1293,7 ммоль). Полученную смесь оставляли нагреваться до 25°C и перемешивали в течение 15 ч. Реакцию гасили путем добавления воды (400 мл) и реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (3×1000 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2×500 мл), рассолом (1500 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-4-(2-хлорфенил)-4-оксо-бутаноат (50,0 г; 32%) в виде бесцветного масла. Использовали в таком виде на следующей стадии.
Стадия 2: трет-бутил-(2-(2-хлорфенил)-5-оксопирролидин-1-ил)карбамат
К раствору этил-4-(2-хлорфенил)-4-оксо-бутаноата (10,0 г; 41,55 ммоль) в уксусной кислоте (33 мл) и тетрагидрофуране (100 мл) добавляли трет-бутил-гидразинкарбоксилат (11,0 г; 83,10 ммоль). Смесь перемешивали при 85°C в течение 12 ч и добавляли цианоборгидрид натрия (7,8 г; 124,65 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 85°C в течение еще 12 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×80 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором карбоната натрия (80 мл), соляной кислотой (2 М раствором; 80 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 20 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая трет-бутил-N-[2-(2-хлорфенил)-5-оксо-пирролидин-1-ил]карбамат (5,0 г; 39%) в виде светло-желтого масла. LCMS: RT = 0,840 мин, m/z = 255,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,840 мин, ESI+: обнаружено [М-55] = 255,0.
Стадия 3: 1-амино-5-(2-хлорфенил)пирролидин-2-он
Раствор трет-бутил-N-[2-(2-хлорфенил)-5-оксо-пирролидин-1-ил]карбамата (5,0 г; 16,09 ммоль) в соляной кислоте (4,0 М растворе в 1,4-диоксане; 40,2 мл; 160,89 ммоль) перемешивали при 25°C в течение 12 ч и фильтровали. Отфильтрованный осадок промывали этилацетатом (20 мл) и растворяли в воде (20 мл). Значение рН раствора подводили до 9, добавляя насыщенный водный раствор бикарбоната натрия, и экстрагировали дихлорметаном (4×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 1-амино-5-(2-хлорфенил)пирролидин-2-он (3,3 г; 97%) в виде белого твердого вещества. LCMS: RT = 0,615 мин, m/z = 211,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,615 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 211,0.
Стадия 4: 1-амино-5-(2-хлорфенил)пирролидин-2-он
Смесь 1-амино-5-(2-хлорфенил)пирролидин-2-она (3,3 г; 15,67 ммоль) и этил-2-этокси-2-имино-ацетата (4,6 г; 31,33 ммоль) в этаноле (50 мл) перемешивали при 70°C в течение 18 ч и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-2-[[2-(2-хлорфенил)-5-оксо-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетат (4,8 г; 99%) в виде коричневого масла. LCMS: RT = 0,675 мин, m/z = 310,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,675 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 310,0.
Стадия 5: (S)-этил-5-(2-хлорфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
Смесь этил-2-[[2-(2-хлорфенил)-5-оксо-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетата (4,8 г; 15,5 ммоль) и оксихлорида фосфора (21,4 г; 139,5 ммоль) перемешивали при 100°C в течение 3 ч и охлаждали до 25°C. Смесь осторожно выливали в воду (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 40% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-5-(2-хлорфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (3,0 г; 66%) в виде коричневого масла. LCMS: RT = 0,741 мин, m/z = 292,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,741 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 292,1.
Указанный выше рацемический продукт (1,0 г; 3,43 ммоль) далее разделяли с использованием SFC, получая, как условно обозначено:
(S)-этил-5-(2-хлорфенил)-6,7-дигидро-5H-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (пик 2, время удерживания = 4,111 мин) (400 мг; 40%) и (R)-этил-5-(2-хлорфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (пик 1, время удерживания = 3,762 мин) (400 мг; 40%), оба в виде желтых твердых веществ.
Условия SFC: колонка: AD-3 (250 мм × 30 мм, 5 мкм); среда: 0,1% NH3H2O в EtOH; сначала В 30%, в конце В 30%; скорость потока 60 мл/мин; температура колонки 40°C.
Стадия 6: (S)-5-(2-хлорфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновая кислота
Смесь этил-(S)-5-(2-хлорфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (400 мг; 1,37 ммоль) и гидроксида лития моногидрата (287 мг; 6,86 ммоль) в этаноле (2 мл), воде (2 мл) и тетрагидрофуране (2 мл) перемешивали при 25°C в течение 12 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли ледяной водой (2 мл) и значение рН подводили до 3, добавляя соляную кислоту (2 М раствор). Твердый продукт собирали фильтрованием и промывали ацетонитрилом, получая неочищенную (S)-5-(2-хлорфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновую кислоту (350 мг; 97%) в виде белого твердого вещества. LCMS: RT = 0,642 мин, m/z = 264,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,642 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 264,0.
Стадия 7: (S)-5-(2-хлорфенил)-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид
Смесь 1-гидроксибензотриазола (215 мг; 1,59 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (194 мг; 1,99 ммоль), (S)-5-(2-хлорфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновой кислоты (350 мг; 1,33 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (305 мг; 1,59 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (515 мг; 3,98 ммоль) в дихлорметане (8 мл) перемешивали при 25°C в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (15 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (2×25 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 10 до 35% этилацетата в петролейном эфире), получая (S)-5-(2-хлорфенил)-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид (300 мг; 74%) в виде бесцветного масла. LCMS: RT = 0,700 мин, m/z = 307,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,700 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 307,0.
Стадия 8: 1-[(5S)-5-(2-хлорфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он
К охлажденному (0°C) раствору (S)-5-(2-хлорфенил)-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамида (20 мг; 0,07 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) добавляли бромид этилмагния (1,0 М раствор в гексане; 0,42 мл; 0,42 ммоль). Смесь перемешивали при 0-5°C в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (5 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (2×20 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (10 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 32-62%/0,2% муравьиной кислоты в воде), получая 1-[(5S)-5-(2-хлорфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-он (5,7 мг; 31%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.52-7.50 (m, 1H), 7.38-7.33 (m, 2H), 6.96-6.94 (m, 1H), 5.99-5.96 (m, 1H), 3.40-3.33 (m, 1H), 3.14-3.11 (m, 2H), 3.07-3.03 (m, 2H), 2.68-2.65 (m, 1H), 1.18 (d, J=7,2 Гц, 3Н). LCMS: RT = 1,185 мин, m/z = 276,1 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,185 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 276,1.
Способ 51
[1-(Гидроксиметил)циклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: 1-(этоксикарбонил)циклопропанкарбоновая кислота
К смеси диэтил-1,1-циклопропандикарбоксилата (10,0 г; 53,7 ммоль) в этаноле (70 мл) и воде (35 мл) добавляли гидроксид натрия (2,1 г; 53,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 16 ч и разбавляли этилацетатом (60 мл). Органический слой отбрасывали. Значение рН водной фазы подводили до 3, добавляя водную соляную кислоту (4 М раствор). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×80 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (30 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенную 1-этоксикарбонилциклопропанкарбоновую кислоту (6,6 г; 78%) в виде бесцветного масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 12.86 (br s, 1H), 4.31-4.17 (m, 2H), 1.87-1.81 (m, 2H), 1.77-1.69 (m, 2H), 1.32-1.24 (m, 3H).
Стадия 2: этил-1-(гидроксиметил)циклопропанкарбоксилат
К смеси 1-этоксикарбонилциклопропанкарбоновой кислоты (6,6 г; 41,7 ммоль) и триэтиламина (6,98 мл; 50,1 ммоль) в тетрагидрофуране (60 мл) по каплям добавляли изобутилхлорформиат (8,12 мл; 62,6 ммоль) при 0°C. По окончании добавления реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и фильтровали. Затем фильтрат добавляли к смеси боргидрида натрия (1,6 г; 41,7 ммоль) в тетрагидрофуране (40 мл) и воде (10 мл). Полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и гасили путем добавления 10%-ного раствора уксусной кислоты (20 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (30 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-1-(гидроксиметил)циклопропанкарбоксилат (3,8 г; 63%) в виде бесцветного масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4.17-4.08 (m, 2H), 3.62 (s, 2H), 1.29-1.21 (m, 5H), 0.87-0.84 (m, 2H).
Стадия 3: этил-1-(((трет-бутилдифенилсилил)окси)-метил)циклопропанкарбоксилат
К перемешиваемому раствору этил-1-(гидроксиметил)циклопропан-1-карбоксилата (1,0 г; 6,94 ммоль) в N,N-диметилформамиде (20 мл) добавляли имидазол (1,4 г; 20,81 ммоль) и трет-бутилдифенилхлорсилан (3,8 г; 13,87 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при 25°C в течение 18 ч и выливали в воду (30 мл). Раствор экстрагировали дихлорметаном (3×20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-1-[[трет-бутил(дифенил)силил]оксиметил]циклопропанкарбоксилат (2,3 г; 87%) в виде бесцветного масла. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.70-7.61 (m, 4H), 7.46-7.35 (m, 6H), 4.15-4.06 (m, 2H), 3.85 (s, 2Н), 1.23 (t, J=7,0 Гц, 3Н), 1.17-1.11 (m, 2H), 1.04 (s, 9H), 0.93-0.87 (m, 2H).
Стадия 4: 1-(((трет-бутилдифенилсилил)окси)-метил)циклопропанкарбоновая кислота
Смесь этил-1-[[трет-бутил(дифенил)силил]оксиметил]-циклопропанкарбоксилата (1,0 г; 2,61 ммоль) и гидроксида лития моногидрата (438 мг; 10,46 ммоль) в тетрагидрофуране (16 мл), метиловом спирте (16 мл) и воде (8 мл) перемешивали при 25°C в течение 18 ч. Органический растворитель удаляли при пониженном давлении. Водный остаток промывали этилацетатом (15 мл) и значение рН подводили до 3, добавляя водную соляную кислоту (4 М раствор) при 0°C. Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (10 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенную 1-[[трет-бутил(дифенил)силил]оксиметил]циклопропанкарбоновую кислоту (950 мг; 100%) в виде слегка клейкого белого твердого вещества. Это неочищенное вещество использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 5: 1-(((трет-бутилдифенилсилил)окси)метил)-N-метокси-N-метилциклопропанкарбоксамид
Смесь 1-[[трет-бутил(дифенил)силил]оксиметил]циклопропанкарбоновой кислоты (950 мг; 2,68 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (523 мг; 5,36 ммоль), N,N-диизопропилэтиламина (1,43 мл; 8,04 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (217 мг; 1,61 ммоль) и 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (771 мг; 4,02 ммоль) в дихлорметане (20 мл) перемешивали при 25°C в течение 18 ч. Полученную смесь выливали в воду (20 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3×10 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (15%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,4), получая 1-[[трет-бутил(дифенил)силил]оксиметил]-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамид (700 мг; 66%) в виде бесцветного масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.68-7.63 (m, 4H), 7.42-7.25 (m, 6H), 3.79 (s, 2H), 3.62 (s, 3H), 3.23 (s, 3Н), 1.04-0.99 (m, 9H), 0.75-0.71 (m, 2H).
Стадия 6: (1-(((трет-бутилдифенилсилил)окси)метил)циклопропил)-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
К смеси (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (100 мг; 0,35 ммоль) и 1-[[трет-бутил(дифенил)силил]оксиметил]-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (282 мг; 0,71 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,43 мл; 1,06 ммоль) при -78°C. По окончании добавления смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (50%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,4), получая [1-[[трет-бутил(дифенил)силил]оксиметил]циклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (60 мг; 31%) в виде светло-коричневого масла.
Стадия 7: [1-(гидроксиметил)циклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору [1-[[трет-бутил(дифенил)силил]оксиметил]циклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона (60 мг; 0,11 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл) добавляли фторид тетрабутиламмония (1,0 М раствор в тетрагидрофуране; 0,17 мл; 0,17 ммоль). Смесь перемешивали при 25°C в течение 3 ч и выливали в воду (10 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (30 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 25-55%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая, как условно обозначено, [1-(гидроксиметил)циклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (7,8 мг; 18%) в виде светло-коричневого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.44-7.38 (m, 3Н), 7.30-7.26 (m, 2H), 6.19-6.16 (m, 0,5H), 6.05-6.02 (m, 0,5H), 5.65-5.61 (m, 1H), 3.97-3.85 (m, 2H), 3.84-3.68 (m, 1H), 2.87-2.80 (m, 1H), 1.72-1.67 (m, 2H), 1.11-1.08 (m, 2H). LC-M3: RT = 0,695 мин, m/z = 302,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,695 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 302,1.
Способ 52
(3,3-Дифторциклобутил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Стадия 1: 3,3-дифтор-N-метокси-N-метилциклобутанкарбоксамид
Смесь 1-гидроксибензотриазола (297 мг; 2,20 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (845 мг; 4,41 ммоль), 3,3-дифторциклобутанкарбоновой кислоты (500 мг; 3,67 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (537 мг; 5,51 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (1187 мг; 9,18 ммоль) в дихлорметане (8 мл) перемешивали при 25°C в течение 5 ч и разбавляли водой (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2×20 мл), рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая 3,3-дифтор-N-метокси-N-метил-циклобутанкарбоксамид (430 мг; 65%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 3.67 (s, 3Н), 3.33-3.22 (m, 1Н), 3.20 (s, 3Н), 2.93-2.78 (m, 2Н), 2.76-2.64 (m, 2Н).
Стадия 2: (3,3-дифторциклобутил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
К раствору 3,3-дифтор-N-метокси-N-метил-циклобутанкарбоксамида (76 мг; 0,43 ммоль) и (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (60 мг; 0,21 ммоль) в тетрагидрофуране (13 мл) по каплям добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,26 мл; 0,64 ммоль) при -78°C. По окончании добавления смесь перемешивали при -78°C в течение 2 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (25 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×25 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 20-45%/0,225% соляной кислоты в воде), получая, как условно обозначено, (3,3-дифторциклобутил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (12,4 мг; 18%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.44-7.39 (m, 3Н), 7.30-7.28 (m, 2Н), 6.20-6.17 (m, 0,5Н), 6.06-6.03 (m, 0,5Н), 5.66-5.64 (m, 1Н), 3.97-3.80 (m, 1Н), 3.78-3.74 (m, 1Н), 2.91-2.83 (m, 5Н). LCMS: RT = 1,241 мин, m/z = 322,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,241 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 322,2.
Способ 53
((5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(2-(пиридин-2-ил)циклопропил)метанон
Стадия 1: N-метокси-N-метил-2-(пиридин-2-ил)циклопропанкарбоксамид
Смесь 1-гидроксибензотриазола (149 мг; 1,10 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (423 мг; 2,21 ммоль), 2-(пиридин-2-ил)циклопропанкарбоновой кислоты (300 мг; 1,84 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (269 мг; 2,76 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (594 мг; 4,60 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивали при 25°C в течение 16 ч и разбавляли водой (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл), рассолом (20 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая N-метокси-N-метил-2-(пиридин-2-ил)циклопропанкарбоксамид (300 мг; 79%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8.47-8.43 (m, 1Н), 7.57-7.51 (m, 1Н), 7.27-7.22 (m, 1Н), 7.10-7.02 (m, 1Н), 3.68 (s, 3Н), 3.21 (s, 3Н), 2.76 (s, 1Н), 2.61-2.52 (m, 1Н), 1.63-1.55 (m, 2Н).
Стадия 2: ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(2-(пиридин-2-ил)циклопропил)метанон
К охлажденному (-78°C) раствору (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (150 мг; 0,53 ммоль) и N-метокси-N-метил-2-(2-пиридил)циклопропанкарбоксамида (219 мг; 1,06 ммоль) в 2-метилтетрагидрофуране (3 мл) добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в н-гексане; 0,64 мл; 1,6 ммоль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при -78°C в течение примерно 30 мин и гасили путем добавления насыщенного раствора хлорида аммония (20 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 32-62%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая, как условно обозначено, [(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[2-(2-пиридил)циклопропил]метанон (11,0 мг; 6%) в виде бледно-розового твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 8.39-8.37 (m, 1Н), 7.69-7.65 (m, 1Н), 7.42-7.31 (m, 4Н), 7.27-7.17 (m, 3Н), 6.18-6.02 (m, 1Н), 5.65-5.61 (m, 1Н), 3.83-3.67 (m, 1Н), 3.56-3.51 (m, 1Н), 2.88-2.73 (m, 2Н), 1.86-1.79 (m, 2Н). LCMS: RT = 0,745 мин, m/z = 348,9 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,1% водного аммиака в течение 3 мин): время удерживания 0,745 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 348,9.
Способ 54
[(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(1S,2S)-2-метилциклопропил]метанон
К раствору транс-N-метокси-N,2-диметил-циклопропанкарбоксамида (137 мг; 0,96 ммоль), (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (180 мг; 0,64 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли бромид изопропилмагния (3,0 М раствор в тетрагидрофуране; 0,85 мл; 2,55 ммоль) при 0°C. По окончании добавления смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Полученный раствор экстрагировали этилацетатом (2×15 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (30%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,2), получая, как условно обозначено, [(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(1S,2S)-2-метилциклопропил]метанон (транс-смесь, содержащая производное метилциклопропила) (80 мг; 44%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.42-7.37 (m, 3Н), 7.28-7.26 (m, 2Н), 6.20-6.16 (m, 0,5Н), 6.05-6.02 (m, 0,5Н), 5.65-5.63 (m, 1Н), 3.78-3.68 (m, 1Н), 2.83-2.75 (m, 2Н), 1.59-1.52 (m, 1Н), 1.45-1.37 (m, 1Н), 1.19-1.14 (m, 3Н), 1.01-0.91 (m, 1Н). LC-MS: RT = 0,793 мин, m/z = 286,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,793 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 286,1.
Способ 55
[(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-спиро[2.3] гексан-5-ил-метанон
Стадия 1: N-метокси-N-метил-спиро[2.3]гексан-5-карбоксамид
Смесь спиро[2.3]гексан-5-карбоновой кислоты (150 мг; 1,19 ммоль), N,N-диизопропилэтиламина (0,5 мл; 2.97 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (96,4 мг; 0,71 ммоль) и N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (174 мг; 1,78 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивали при 25°C в течение 16 ч и разбавляли водой (30 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2×10 мл), рассолом (20 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая N-метокси-N-метил-спиро[2.3]гексан-5-карбоксамид (170 мг; 84%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 3.66 (s, 3Н), 3.20 (s, 3Н), 2.60-2.54 (m, 2Н), 2.17-2.12 (m, 2Н), 0.50-0.40 (m, 4Н).
Стадия 2: [(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-спиро[2.3]гексан-5-ил-метанон
К раствору N-метокси-N-метил-спиро[2.3]гексан-5-карбоксамида (43 мг; 0,25 ммоль), (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (50 мг; 0,18 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл) по каплям добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 0,21 мл; 0,42 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (5 мл). Затем раствор экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (вода (с 0,05% гидроксида аммония, об./об.)/ацетонитрил, 45-70%), получая, как условно обозначено, [(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-спиро[2.3]гексан-5-ил-метанон (42 мг; 75%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.42-7.37 (m, 3Н), 7.27-7.23 (m, 2Н), 6.10-5.94 (m, 1Н), 5.50-5.47 (m, 1Н), 4.32-4.26 (m, 1Н), 3.67-3.60 (m, 1H), 3.01-2.70 (m, 1Н), 2.65-2.57 (m, 2Н), 2.31-2.26 (m, 2Н), 0.51-0.47 (m, 2Н), 0.43-0.40 (m, 2Н). LC-MS: RT = 0,904 мин, m/z = 312,0 [M+H]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,904 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 312,0.
Способ 56
Циклопропил-[(5S)-5-(2-хлорфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К охлажденному (-78°C) раствору (5S)-5-(2-хлорфенил)-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамида (100 мг; 0,33 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли бромид циклопропилмагния (0,5 М раствор в тетрагидрофуране; 4,24 мл; 2,12 ммоль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 38-68%/0,2% муравьиной кислоты в воде), получая, как условно обозначено, циклопропил-[(5S)-5-(2-хлорфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (23,5 мг; 25%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.51 (d, J=1,6 Гц, 1Н), 7.49-7.33 (m, 2Н), 6.96 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 6.00-5.96 (m, 1Н), 3.45-3.36 (m, 1Н), 3.15-3.10 (m, 2Н), 3.05-2.98 (m, 1Н), 2.70-2.60 (m, 1Н), 1.20-1.15 (m, 2Н), 1.11-1.07 (m, 2Н). LCMS: RT = 1,187 мин, m/z = 288,1 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,187 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 288,1.
Способ 57
Циклопропил-[рац-(4S,6S)-4-фтор-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил]метанон и циклопропил-[(4S,6S)-4-фтор-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил]метанон
Стадия 1: рац-(4S,6S)-4-фтор-N-метокси-N-метил-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-карбоксамид
Смесь рац-(4S,6S)-4-фтор-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-карбоновой кислоты (800 мг; 3,25 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (412 мг; 4,22 ммоль), N,N-диизопропилэтиламина (1,34 мл; 8,12 ммоль) и 2-(3Н-[1,2,3]триазоло[4,5-b]пиридин-3-ил)-1,1,3,3-тетраметилизоурония гексафторфосфата(V) (1,6 г; 4,22 ммоль) в N,N-диметилформамиде (20 мл) перемешивали при 25°C в течение 3 ч. Смесь разбавляли водой (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (10 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая рац-(4S,6S)-4-фтор-N-метокси-N-метил-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-карбоксамид (800 мг; 85%) в виде белого твердого вещества. LCMS: RT = 0,707 мин, m/z = 290,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,707 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 290,1.
Стадия 2: циклопропил-[рац-(4S,6S)-4-фтор-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил]метанон
К охлажденному (0°C) раствору рац-(4S,6S)-4-фтор-N-метокси-N-метил-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-карбоксамида (40 мг; 2,77 ммоль) добавляли бромид циклопропилмагния (0,5 М раствор в тетрагидрофуране; 1,5 мл; 0,75 ммоль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (5 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (2×15 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая, как условно обозначено, циклопропил-[рац-(4S,6S)-4-фтор-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил]метанон (28,6 мг; 75%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.41-7.36 (m, 3Н), 7.27-6.90 (m, 2Н), 6.93 (s, 1Н), 6.09-5.92 (m, 1Н), 5.53-5.49 (m, 1Н), 3.58-3.47 (m, 1Н), 2.97-2.79 (m, 2Н), 1.22-1.19 (m, 2Н), 0.99-0.96 (m, 2Н). LCMS: RT = 0,870 мин, m/z = 270,9 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,870 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 270,9.
Стадия 3: циклопропил-[(4S,6S)-4-фтор-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил]метанон (G03280299)
Циклопропил-[рац-(4S,6S)-4-фтор-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил]метанон (600 мг; 2,22 ммоль, из другой партии в увеличенном масштабе) далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено, циклопропил-[(4S,6S)-4-фтор-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 3,306 мин) (250 мг; 41,7%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.39-7.37 (m, 3Н), 7.23-7.21 (m, 2Н), 6.93 (d, J=2,8 Гц, 1Н), 6.09-6.07 (m, 0,5Н), 5.95-5.93 (m, 0,5Н), 5.51-5.49 (m, 1Н), 3.54-3.45 (m, 1Н), 2.96-2.92 (m, 1Н), 2.85-2.82 (m, 1Н), 1.23-1.20 (m, 2Н), 0.99-0.96 (m, 2Н). LCMS: RT = 0,883 мин, m/z = 271,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,883 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 271,0.
Условия SFC: колонка: OD-H (250 мм × 30 мм, 5 мкм); среда: 0,1% NH3H2O в EtOH; сначала В 30%, в конце В 30%; скорость потока 60 мл/мин; температура колонки 40°C.
Способ 58
[1-(Фторметил)циклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: 1-(фторметил)-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамид
Смесь 1-(фторметил)циклопропанкарбоновой кислоты (543 мг; 4,60 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (1057 мг; 5,52 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (372 мг; 2,76 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (897 мг; 9,19 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (594 мг; 4,60 ммоль) в дихлорметане (15 мл) перемешивали при 30°C в течение 18 ч и гасили путем добавления воды (10 мл). Отделенный органический слой промывали рассолом (30 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-(фторметил)-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамид (135 мг; 18%) в виде коричневого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4.63-4.47 (m, 2Н), 3.74 (s, 3Н), 3.26 (s, 3Н), 1.30-1.23 (m, 2Н), 0.95-0.85 (m, 2Н).
Стадия 2: [1-(фторметил)циклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору 1-(фторметил)-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (80 мг; 0,50 ммоль) и (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (70 мг; 0,25 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) по каплям добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 0,3 мл; 0,75 ммоль) при -78°C. По окончании добавления смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (50%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,4), получая, как условно обозначено, [1-(фторметил)циклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (15,6 мг; 20%) в виде коричневого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.43-7.33 (m, 3Н), 7.26-7.23 (m, 2Н), 6.17-6.12 (m, 0,5Н), 6.01-5.98 (m, 0,5Н), 5.62-5.60 (m, 1Н), 4.83-4.76 (m, 1Н), 4.73-4.63 (m, 1Н), 3.76-3.65 (m, 1Н), 2.85-2.77 (m, 1Н), 1.86-1.79 (m, 2Н), 1.23-1.16 (m, 2Н). LC-MS: RT = 1,188 мин, m/z = 304,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 1,188 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 304,2.
Способ 59
(3,3-Дифторбицикло[3.1.0]гексан-6-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Стадия 1: трет-бутил(циклопент-3-ен-1-илокси)диметилсилан
К раствору 3-циклопентен-1-ола (10,0 г; 118,88 ммоль) в тетрагидрофуране (130 мл) добавляли имидазол (16,0 г; 237,76 ммоль) и трет-бутилдиметилхлорсилан (23,0 г; 154,54 ммоль). По окончании добавления реакционную смесь перемешивали при 30°C в течение 16 ч и гасили, добавляя воду (100 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (2×200 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 3% этилацетата в петролейном эфире), получая трет-бутил-циклопент-3-ен-1-илокси-диметил-силан (22,0 г; 93%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 5.61 (s, 2Н), 4.49-4.44 (m, 1Н), 2.54-2.48 (m, 2Н), 2.24-2.19 (m, 2Н), 0.82 (s, 9Н), 0.02 (s, 6Н).
Стадия 2: этил-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)бицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилат
К раствору трет-бутил-циклопент-3-ен-1-илокси-диметил-силана (20,0 г; 100,82 ммоль) в дихлорметане (160 мл) добавляли этилдиазоацетат (13,8 г; 120,98 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 12 ч при 25°C и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 5% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-3-[трет-бутил(диметил)силил]оксибицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилат (15,0 г; 52%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4.49-4.44 (m, 2Н), 2.53-2.48 (m, 2Н), 2.24-2.19 (m, 2Н), 1.65-1.24 (m, 2Н), 1.25-1.22 (m, 2Н), 0.83 (s, 9Н), 0.00 (s, 6Н).
Стадия 3: этил-3-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилат
К раствору этил-3-[трет-бутил(диметил)силил]оксибицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилата (15,0 г; 52,73 ммоль) в тетрагидрофуране (200 мл) добавляли фторид тетрабутиламмония (20,7 г; 79,09 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°C в течение 12 ч и разбавляли водой (200 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (3×100 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-3-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилат (8,8 г; 98%) в виде желтого масла.
Стадия 4: этил-3-оксобицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилат
К раствору периодинана Десса-Мартина (32,9 г; 77,55 ммоль) в дихлорметане (200 мл) добавляли этил-3-гидроксибицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилат (8,8 г; 51,70 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 12 ч и разбавляли водой (200 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×80 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-3-оксобицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилат (8,0 г; 92%) в виде желтого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4.15-4.12 (m, 2Н), 2.68-2.62 (m, 2Н), 2.30-2.25 (m, 2Н), 2.17-2.15 (m, 2Н), 1.27-1.24 (m, 4Н).
Стадия 5: этил-3,3-дифторбицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилат
К раствору этил-3-оксобицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилата (2,0 г; 11,89 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (19,2 г; 118,91 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 12 ч и гасили, добавляя воду (100 мл) при 0°C. Смесь экстрагировали дихлорметаном (3×40 мл). Объединенные органические слои промывали водой (40 мл), рассолом (40 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-3,3-дифторбицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилат (1,7 г; 75%) в виде желтого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4.12-4.07 (m, 2Н), 2.48-2.38 (m, 2Н), 2.29-2.20 (m, 2Н), 1.93-1.92 (m, 2Н), 1.63-1.62 (m, 1Н), 1.25-1.22 (m, 3Н).
Стадия 6: 3,3-дифторбицикло[3.1.0]гексан-6-карбоновая кислота
К раствору этил-3,3-дифторбицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилата (500 мг; 2,63 ммоль) в тетрагидрофуране (24 мл) добавляли раствор гидроксида лития моногидрата (330 мг; 7,89 ммоль) в воде (7 мл). Смесь перемешивали при 25°C в течение 16 ч и концентрировали при пониженном давлении. Значение рН водного остатка подводили до 3, добавляя водную соляную кислоту (4 М раствор) при 0°C. Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (10 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенную 3,3-дифторбицикло[3.1.0]гексан-6-карбоновую кислоту (250 мг; 59%) в виде бесцветного масла.
Стадия 7: 3,3-дифтор-N-метокси-N-метилбицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксамид
Смесь 1-гидроксибензотриазола (250 мг; 1,85 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (426 мг; 2,22 ммоль), 3,3-дифторбицикло[3.1.0]гексан-6-карбоновой кислоты (300 мг; 1,85 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (271 мг; 2,78 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (598 мг; 4,63 ммоль) в дихлорметане (40 мл) перемешивали при 25°C в течение 16 ч и разбавляли водой (20 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая 3,3-дифтор-N-метокси-N-метил-бицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксамид (102 мг; 27%) в виде бесцветного масла. LCMS: RT = 0.522 мин, m/z = 206,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,522 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 206,1.
Стадия 8: (3,3-дифтор-6-бицикло[3.1.0]гексанил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору 3,3-дифтор-N-метокси-N-метил-бицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксамида (102 мг; 0,50 ммоль) и (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (70 мг; 0,25 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) по каплям добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 0,37 мл; 0,74 ммоль) при -78°C в атмосфере азота. По окончании добавления смесь перемешивали при -78°C в течение 2 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (25 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×25 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 20-45%/0,225% соляная кислота в воде), получая, как условно обозначено, (3,3-дифтор-6-бицикло[3.1.0]гексанил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (11 мг; 13%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.44-7.40 (m, 3Н), 7.29-7.27 (m, 2Н), 6.19-6.16 (m, 0,5Н), 6.05-6.02 (m, 0,5Н), 5.65-5.64 (m, 1Н), 3.79-3.73 (m, 1Н), 3.03-3.02 (m, 1Н), 2.90-2.80 (m, 1 Н), 2.54-2.30 (m, 2Н), 2.30-2.25 (m, 2Н), 2.20-2.18 (m, 2Н). LCMS: RT = 1,255 мин, m/z = 348,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,255 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 348,2.
Способ 60
[(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[2-(трифторметил)циклопропил]метанон
Стадия 1: (Е)-4,4,4-трифтор-N-метокси-N-метилбут-2-енамид
Смесь N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (4,42 г; 45,30 ммоль), N,N-диизопропилэтиламина (10,2 мл; 56,94 ммоль), 4,4,4-трифторбут-2-еновой кислоты (5,00 г; 35,70 ммоль) и 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (8,21 г; 42,84 ммоль) в дихлорметане (50 мл) перемешивали при 0°C в течение 5 ч. Смесь промывали рассолом (2×50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая (Е)-4,4,4-трифтор-N-метокси-N-метил-бут-2-енамид (2,50 г; 38%) в виде бесцветного масла. LC-MS: RT = 0,522 мин, m/z = 184,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,522 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 184,1.
Стадия 2: N-метокси-N-метил-2-(трифторметил)-циклопропанкарбоксамид
К раствору иодида триметилсульфоксония (6,01 г; 27,30 ммоль) в диметилсульфоксиде (50 мл) добавляли гидрид натрия (60%-ный; 1,09 г; 27,30 ммоль). Смесь перемешивали в течение 1 ч и добавляли раствор (Е)-4,4,4-трифтор-N-метокси-N-метил-бут-2-енамида (2,50 г; 13,65 ммоль) в диметилсульфоксиде (20 мл). Полученную смесь перемешивали при 25°C в течение 16 ч и разбавляли насыщенным водным раствором хлорида аммония (100 мл). Раствор экстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (150 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (35-65% ацетонитрила/0,05% гидроксида аммония в воде), получая N-метокси-N-метил-2-(трифторметил)циклопропанкарбоксамид (700 мг; 26%) в виде желтого масла. LC-MS: RT = 0,722 мин, m/z = 197,9 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,722 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 197,9.
Стадия 3: [(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[2-(трифторметил)циклопропил]метанон
К раствору N-метокси-N-метил-2-(трифторметил)циклопропанкарбоксамида (98 мг; 0,50 ммоль) и (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (100 мг; 0,35 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл) добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 1,06 мл; 2,13 ммоль) при 0°C в атмосфере азота. По окончании добавления смесь перемешивали при 25°C в течение 16 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (3×10 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; 0-40% этилацетата в петролейном эфире), получая [(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[2-(трифторметил)циклопропил]метанон (30 мг, 24%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.45-7.39 (m, 3Н), 7.32-7.29 (m, 2Н), 6.22-6.05 (m, 1Н), 5.70-5.65 (m, 1Н), 3.84-3.71 (m, 1Н), 3.41-3.37 (m, 1Н), 2.90-2.79 (m, 1Н), 2.45-2.40 (m, 1Н), 1.53-1.46 (m, 2Н). LC-MS: RT = 0,904 мин, m/z = 339,9 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,904 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 339,9.
Способ 61
(6,6-Дифтор-3-бицикло[3.1.0]гексанил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: 6,6-дифтор-N-метокси-N-метилбицикло[3.1.0]гексан-3-карбоксамид
Смесь 6,6-дифторбицикло[3.1.0]гексан-3-карбоновой кислоты (150 мг; 0,93 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (355 мг; 1,85 ммоль), N,N-диизопропилэтиламина (359 мг; 2,78 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (180 мг; 1,85 ммоль) и 1-гидроксибензотриазола (125 мг; 0,93 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивали при 25°C в течение 18 ч. Смесь разбавляли водой (15 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2×10 мл), рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; 0-30% этилацетата в петролейном эфире), получая 6,6-дифтор-N-метокси-N-метил-бицикло[3.1.0]гексан-3-карбоксамид (100 мг; 53%) в виде бесцветного масла. LCMS: RT = 0,540 и 0,572 мин, m/z = 206,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,540 и 0,572 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 206,0.
Стадия 2: (6,6-дифтор-3-бицикло[3.1.0]гексанил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору 6,6-дифтор-N-метокси-N-метил-бицикло[3.1.0]гексан-3-карбоксамида (33 мг; 0,16 ммоль) и (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (30 мг; 0,11 ммоль) в тетрагидрофуране (6 мл) добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 0,16 мл; 0,32 ммоль) в атмосфере азота при -78°C. Смесь перемешивали при -78°C в течение 2 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (15 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали водой (30 мл), рассолом (30 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 40%-70%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая, как условно обозначено, (6,6-дифтор-3-бицикло[3.1.0]гексанил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (3,9 мг; 11%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.42-7.39 (m, 3Н), 7.26-7.23 (m, 2Н), 6.12-5.94 (m, 1Н), 5.52-5.48 (m, 1Н), 4.19-4.15 (m, 0,5Н), 3.88-3.85 (m, 0,5Н), 3.68-3.59 (m, 1Н), 3.02-2.91 (m, 1Н), 2.39-2.30 (m, 4Н), 2.08-2.04 (m, 2Н). LCMS: RT = 0,896 мин, m/z = 347,9 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,896 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 347,9.
Способ 63
Циклопропил-[(5S,7S)-7-метокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: цис-2-бром-7-метокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
К раствору 2-бром-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (1,20 г; 4,28 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл) добавляли гидрид натрия (60%-ный; 342 мг; 8,57 ммоль). Смесь перемешивали в течение 20 мин и по каплям добавляли подметан (3,00 г; 21,14 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали в течение 2 ч и выливали в ледяную воду (70 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×80 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (2×70 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 8 до 12% этилацетата в петролейном эфире), получая цис-2-бром-7-метокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (330 мг; 26%) в виде белого твердого вещества. LCMS: RT = 0,748 мин, m/z = 294,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,748 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 294,0.
Стадия 2: циклопропил-[(5S,7S)-7-метокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору цис-2-бром-7-метокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (220 мг; 0,75 ммоль) и N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (193 мг; 1,50 ммоль) в тетрагидрофуране (6 мл) добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 2,24 мл; 4,49 ммоль) в атмосфере азота при 0°C. Смесь перемешивали при 25°C в течение 2 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (25 мл). Раствор экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 40% этилацетата в петролейном эфире), получая циклопропил(цис-7-метокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (180 мг; 85%) в виде коричневого масла.
Эту цис-смесь далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено, циклопропил-[(5S,7S)-7-метокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 4,247 мин) (29,8 мг; 16%) в виде желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.40-7.31 (m, 5Н), 5.56-5.52 (m, 1Н), 4.94-4.92 (m, 1Н), 3.67-3.59 (m, 4Н), 3.02-3.01 (m, 1Н), 2.62-2.57 (m, 1Н), 1.17-1.15 (m, 2Н), 1.10-1.07 (m, 2Н). LCMS: RT = 0,709 мин, m/z = 284,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,709 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 284,1.
Условия SFC: колонка: Lux Cellulose-2, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: 40%-ный этанол (с 0,05% DEA) в CO2; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 40°C.
Способ 64
Циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-(4-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: 1-(4-фторфенил)бут-3-ен-1-ол
К раствору 4-фторбензальдегида (50,0 г; 402,87 ммоль) в тетрагидрофуране (500 мл) добавляли хлорид аллилмагния (1,82 М раствор в тетрагидрофуране; 288,0 мл; 523,73 ммоль) при 0°C в атмосфере азота. Реакционную смесь оставляли нагреваться до 25°C и перемешивали в течение 2 ч, затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (200 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×300 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 1-(4-фторфенил)бут-3-ен-1-ол (66,8 г; 99%) в виде желтого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.32-7.28 (m, 2Н), 7.04-7.00 (m, 2Н), 5.80-5.73 (m, 1Н), 5.17-5.12 (m, 2Н), 4.70-4.67 (m, 1Н), 2.48-2.46 (m, 2Н), 2.44-2.31 (m, 1Н).
Стадия 2: трет-бутил((1-(4-фторфенил)бут-3-ен-1-ил)окси)диметилсилан
К раствору 1-(4-фторфенил)бут-3-ен-1-ола (66,8 г; 401,95 ммоль) в дихлорметане (500 мл) добавляли имидазол (54,7 г; 803,9 ммоль) и трет-бутилхлордиметилсилан (72,7 г; 482,34 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 16 ч и разбавляли водой (500 мл). Полученную смесь экстрагировали дихлорметаном (2×300 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (500 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный трет-бутил-[1-(4-фторфенил)бут-3-енокси]-диметил-силан (111,0 г; 98%) в виде светлого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.41-7.37 (m, 2Н), 7.14-7.10 (m, 2Н), 5.92-5.85 (m, 1Н), 5.15-5.11 (m, 2Н), 4.81-4.79 (m, 1Н), 2.58-2.45 (m, 2Н), 1.01 (s, 9Н), 0.15 (s, 3Н), 0.00 (s, 3Н).
Стадия 3: 3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(4-фторфенил)пропаналь
К раствору трет-бутил-[1-(4-фторфенил)бут-3-енокси]-диметил-силана (110,0 г; 392,23 ммоль) в воде (500 мл) и тетрагидрофуране (500 мл) добавляли тетраоксид осмия (0,5 г; 1,97 ммоль). По окончании перемешивания в течение 30 мин при 25°C добавляли малыми порциями в течение 2 ч периодат натрия (335,6 г; 1568,90 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение еще 2 ч при 25°C. Смесь гасили путем добавления холодного насыщенного водного раствора тиосульфата натрия (500 мл). Смесь перемешивали в течение 30 мин и затем экстрагировали этилацетатом (3×500 мл). Объединенные органические слои промывали водой (500 мл), рассолом (500 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 2% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(4-фторфенил)пропаналь (70,0 г; 63%) в виде желтого масла. 1Н ЯМР (400 Гц, CDCl3) δ 9.95-9.90 (m, 1Н), 7.48-7.44 (m, 2Н), 7.19-7.15 (m, 2Н), 5.37-5.34 (m, 1Н), 3.02-2.95 (m, 1Н), 2.79-2.77 (m, 1Н), 1.01 (s, 9Н), 0.19 (s, 3Н), 0.00 (s, 3Н).
Стадия 4: 1-(3-бром-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(4-фторфенил)пропан-1-ол
К охлажденному (-78°C) раствору 3,5-дибром-1-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазола (70,1 г; 225,32 ммоль) в тетрагидрофуране (500 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 98,2 мл; 245,37 ммоль). Смесь перемешивали при -78°C в течение 30 мин и по каплям добавляли раствор 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(4-фторфенил)пропаналя (63,0 г; 223,06 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°C в течение 1,5 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (500 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×500 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 12% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(4-фторфенил)пропан-1-ол (95,0 г; 83%) в виде желтого масла.
Стадия 5: 2-бром-5-(4-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол
Смесь 1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(4-фторфенил)пропан-1-ола (40,0 г; 77,75 ммоль) и 2,2,2-трифторуксусной кислоты (150 мл; 1554,9 ммоль) перемешивали при 55°C в течение 8 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли этилацетатом (300 мл) и значение рН подводили до 9, добавляя насыщенный водный раствор бикарбоната натрия. Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×300 мл). Объединенные органические слои промывали водой (150 мл), рассолом (150 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 20 до 33% этилацетата в петролейном эфире), получая 2-бром-5-(4-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол (23,5 г; 100%) в виде желтого твердого вещества. LCMS: RT = 0,679 мин, m/z = 300,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,679 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 300,0.
Стадия 6: цис-2-бром-7-фтор-5-(4-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
К охлажденному (0°C) раствору 2-бром-5-(4-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (6,0 г; 20,13 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (10,7 мл; 80,51 ммоль) в дихлорметане (8 мл). По окончании перемешивания в течение 30 мин смесь выливали в ледяную воду (100 мл). Полученную смесь экстрагировали дихлорметаном (2×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 12% этилацетата в петролейном эфире), получая цис-бром-7-фтор-5-(4-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (2,1 г; 35%) в виде светло-желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (CDCl3, 400 МГц) δ 7.26-7.23 (m, 2Н), 7.12-7.08 (m, 2Н), 6.07-5.91 (m, 1Н), 5.45-5.42 (m, 1Н), 3.64-3.52 (m, 1Н), 2.92-2.85 (m, 1Н).
Стадия 7: циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-(4-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (378 мг; 2,94 ммоль) и цис-2-бром-7-фтор-5-(4-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (400 мг; 1,34 ммоль) в тетрагидрофуране (15 мл) добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 2,66 мл; 5,34 ммоль) при 0°C в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 0°C в течение 8 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (30%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,25), получая циклопропил-[цис-7-фтор-5-(4-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (180 мг; 47%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LCMS: RT = 0,733 мин, m/z = 290,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,733 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 290,1.
Эту цис-смесь далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено, циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-(4-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 2, время удерживания = 3,981 мин) (71 мг; 39%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.36-7.32 (m, 2Н), 7.19-7.14 (m, 2Н), 6.20-6.04 (m, 1Н), 5.65-5.65 (m, 1Н), 3.83-3.69 (m, 1 Н), 3.10-2.97 (m, 1Н), 2.89-2.77 (m, 1Н), 1.20-1.09 (m, 4Н). LCMS: RT = 0,833 мин, m/z = 289,9 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,833 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 289,9.
Также собирали (5R,7R)-изомер (пик 1, время удерживания = 3,439 мин) (65 мг; 36%) в виде белого твердого вещества.
Условия SFC: колонка: Chiralpak AD-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: этанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5,5 мин и выдерживание при 40% в течение 3 мин, затем при 5% В в течение 1,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин, температура колонки: 40°C.
Способ 65
2-(рац-(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил)циклопропанкарбонитрил
Стадия 1: 2-бром-1-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)этанон
К смеси 1-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]этанона (250 мг; 1,02 ммоль) в уксусной кислоте (3 мл) добавляли бромгидрат пербромида пиридиния (370 мг; 1,16 ммоль). Смесь перемешивали при 25°C в течение 3 ч и разбавляли этилацетатом (40 мл). Раствор промывали водой (2×20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая 2-бром-1-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]этанон (185 мг; 56%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 0,771 мин, m/z = 326,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,771 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 326,0.
Стадия 2: 2-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил)циклопропанкарбонитрил
К смеси 2-бром-1-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]этанона (120 мг; 0,37 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл) и диметилсульфоксиде (0,5 мл) добавляли 1,4-диазабицикло[2.2.2.]октан (53 мг; 0,48 ммоль). По окончании перемешивания в течение 30 мин при 20°C в смесь добавляли карбонат натрия (76 мг; 0,72 ммоль) и акрилонитрил (6,2 мл; 94,23 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 90°C в течение 20 ч и разбавляли этилацетатом (40 мл). Раствор промывали водой (2×20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (вода (с 0,05% гидроксида аммония, об./об.)/ацетонитрил, 30-60%), получая, как условно обозначено, 2-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил]циклопропан-карбонитрил (3 мг; 3%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.46-7.42 (m, 3Н), 7.31-7.27 (m, 2Н), 6.15-5.99 (m, 1Н), 5.56-5.53 (m, 1Н), 3.72-3.67 (m, 2Н), 3.07-3.03 (m, 1Н), 2.21-2.08 (m, 1Н), 1.75-1.70 (m, 1Н), 1.68-1.57 (m, 1Н). LCMS: RT = 0,818 мин, m/z = 296,9 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,771 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 296,9.
Способ 66
Циклопропил-[(5S,7S)-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: (цис)-2-бром-7-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол и (транс)-2-бром-7-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
К смеси 2-бром-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (1000 мг; 3,57 ммоль) и триэтиламина (1083 мг; 10,71 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавляли трет-бутилдиметилсилил-трифторметансульфонат (1415 мг; 5,35 ммоль). Смесь перемешивали в течение 14 ч при 25°C и разбавляли водой (50 мл). Полученный раствор экстрагировали дихлорметаном (2×100 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая:
(транс)-2-бром-7-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (870 мг; 62%) в виде желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.41-7.36 (m, 5Н), 5.31-5.28 (m, 1Н), 5.26-5.23 (m, 1Н), 3.47-3.40 (m, 1Н), 2.58-2.52 (m, 1 Н), 0.99 (s, 9Н), 0.23 (s, 3Н), 0.20 (s, 3Н);
(цис)-2-бром-7-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (430 мг; 31%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.49-7.35 (m, 3Н), 7.11-7.10 (m, 2Н), 5.61-5.58 (m, 1Н), 5.33-5.30 (m, 1Н), 3.00-2.96 (m, 1Н), 2.90-2.83 (m, 1Н), 0.93 (s, 9Н), 0.23 (s, 3Н), 0.19 (s, 3Н).
Стадия 2: [цис-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-циклопропил-метанон
К раствору N-метокси-н-метил-циклопропанкарбоксамида (242 мг; 1,88 ммоль) и (цис)-2-бром-7-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (370 мг; 0,94 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл) добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 1,41 мл; 2,81 ммоль) при 0°C в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (50 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 40% этилацетата в петролейном эфире), получая [цис-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-циклопропил-метанон (220 мг; 61%) в виде желтого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.36-7.34 (m, 5Н), 5.39-5.36 (m, 1Н), 5.29-5.28 (m, 1Н), 3.54-3.48 (m, 1Н), 3.08-3.05 (m, 1Н). 2.65-2.61 (m, 1Н), 1.30-1.28 (m, 2Н), 1.07-1.02 (m, 2Н), 0.91 (s, 9Н), 0.24 (s, 3Н), 0.22 (s, 3Н).
Стадия 3: циклопропил-[(5S,7S)-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и циклопропил-[(5R,7R)-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору [цис-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-циклопропил-метанона (200 мг; 0,52 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли фторид тетрабутиламмония (1,0 М раствор в тетрагидрофуране; 2,09 мл; 2,09 ммоль) при 25°C. Смесь перемешивали при 25°C в течение 14 ч и разбавляли дихлорметаном (30 мл). Полученную смесь промывали водой (20 мл), рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 90% этилацетата в петролейном эфире), получая циклопропил-[цис-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (95 мг; 67%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.42-7.36 (m, 5Н), 5.46-5.40 (m, 2Н), 4.79-4.78 (d, 1Н), 3.64-3.58 (m, 1Н), 3.00-2.98 (m, 1Н), 2.81-2.76 (m, 1Н), 1.31-1.27 (m, 2Н), 1.07-1.03 (m, 2Н).
Эту цис-смесь далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
циклопропил-[(5S,7S)-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 3,345 мин) (22,2 мг; 24%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.43-7.36 (m, 5Н), 5.44-5.41 (m, 2Н), 4.81 (s, 1Н), 3.65-3.60 (m, 1Н), 2.99-2.96 (m, 1Н), 2.82-2.76 (m, 1Н), 1.30-1.29 (m, 2Н), 1.06-1.03 (m, 2Н). LCMS: RT = 2,061 мин, m/z = 270,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 7,0 мин): время удерживания 2,061 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 270,2;
циклопропил-[(5R,7R)-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 2, время удерживания = 3,975 мин) (32,2 мг; 35%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.43-7.34 (m, 5Н), 5.44-5.39 (m, 2Н), 3.65-3.57 (m, 1Н), 3.07-3.00 (m, 1Н), 2.79-2.74 (m, 1Н), 1.31-1.28 (m, 2Н), 1.07-1.04 (m, 2Н). LCMS: RT = 0,896 мин, m/z = 270,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 0,896 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 270,2.
Условия SFC: колонка: OD (250 мм × 30 мм, 5 мкм) подвижная фаза: А: CO2, В: 0,1% NH3H2O в EtOH, градиент: 40% В; скорость потока: 60 мл/мин; температура колонки: 40°C.
Способ 67
Циклопропил-[(5S,7R)-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: [транс-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-циклопропил-метанон
К раствору N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (47 мг; 0,36 ммоль) и [транс-2-бром-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]окси-трет-бутил-диметил-силана (100 мг; 0,25 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 0,3 мл; 0,60 ммоль) при 0°C в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (50 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (30%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,5), получая [транс-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-циклопропил-метанон (50 мг; 51%) в виде бесцветного масла. LCMS: RT = 1,008 мин, m/z = 384,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 1,008 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 384,2.
Стадия 2: циклопропил-[(5S,7R)-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и циклопропил-[(5R,7S)-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору [транс-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-циклопропил-метанона (50 мг; 0,13 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) добавляли фторид тетрабутиламмония (1,0 М раствор в тетрагидрофуране; 0,52 мл; 0,52 ммоль). Смесь перемешивали при 25°C в течение 14 ч и разбавляли дихлорметаном (20 мл). Раствор промывали водой (10 мл), рассолом (10 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (2,5%-ный метанол в дихлорметане, Rf = 0,5), получая циклопропил-[(транс)-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (20 мг; 57%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.43-7.38 (m, 3Н), 7.19-7.17 (m, 2Н), 5.76-5.73 (m, 1Н), 5.54-5.52 (m, 1Н), 3.29-3.25 (m, 1Н), 3.03-3.00 (m, 2Н), 1.31-1.28 (m, 2Н), 1.06-1.03 (m, 2Н).
Эту транс-смесь (70 мг из другой партии) далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
циклопропил-[(5S,7R)-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 3,515 мин) (10,5 мг; 15%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.44-7.38 (m, 3Н), 7.20-7.18 (m, 2Н), 5.76-5.73 (m, 1Н), 5.70-5.62 (m, 1Н), 5.52-5.49 (m, 1Н), 3.29-3.25 (m, 1Н), 3.01-2.96 (m, 2Н), 1.32-1.26 (m, 2Н), 1.06-1.04 (m, 2Н). LCMS: RT = 0,906 мин, m/z = 270,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 0,906 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 270,2;
циклопропил-[(5R,7S)-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 2, время удерживания = 3,729 мин) (17,0 мг; 24%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.44-7.38 (m, 3Н), 7.20-7.18 (m, 2Н), 5.76-5.73 (m, 1Н), 5.65 (brs, 1Н), 5.51-5.50 (m, 1Н), 3.28-3.25 (m, 1Н), 3.01-2.96 (m, 2Н), 1.32-1.26 (m, 2Н), 1.06-1.04 (m, 2Н). LCMS: RT = 0,905 мин, m/z = 270,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 0,905 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 270,2.
Условия SFC: колонка: Chiralpak AD-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: IPA (изопропиловый спирт) (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5,5 мин и выдерживание при 40% в течение 3 мин, затем при 5% В в течение 1,5 мин; скорость потока: 25 мл/мин; температура колонки: 40°C.
Способ 68
[(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1S,2S)-2-метилциклопропил]метанон и [(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1R,2R)-2-метилциклопропил]метанон
Рацемический [(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(1S,2S)-2-метилциклопропил]метанон (транс-смесь LHS (вращение в левую сторону)) (80 мг) далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1S,2S)-2-метилциклопропил]метанон (пик 1, время удерживания = 3,714 мин) (28 мг; 35%; ее: 96,1%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.45-7.38 (m, 3Н), 7.29-7.26 (m, 2Н), 6.19-6.17 (m, 0,5Н), 6.05-6.03 (m, 0,5Н), 5.67-5.62 (m, 1Н), 3.81-3.71 (m, 1Н), 2.89-2.75 (m, 2Н), 1.62-1.54 (m, 1Н), 1.45-1.39 (m, 1Н), 1.18 (d, J=6,4 Гц, 3Н), 0.99-0.96 (m, 1Н). LC-MS: RT = 0,756 мин, m/z = 286,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,756 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 286,1;
[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1R,2R)-2-метилциклопропил]метанон (пик 2, время удерживания = 3,901 мин) (48 мг; 60%; ее: 86%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.44-7.40 (m, 3Н), 7.29-7.27 (m, 2Н), 6.20-6.16 (m, 0,5Н), 6.06-6.02 (m, 0,5Н), 5.67-5.61 (m, 1Н), 3.79-3.73 (m, 1Н), 2.89-2.74 (m, 2Н), 1.64-1.60 (m, 1Н), 1.44-1.39 (m, 1 Н), 1.17 (d, J=6,0 Гц, 3Н), 1.00-0.95 (m, 1Н). LC-MS: RT = 0,757 мин, m/z = 286,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,757 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 286,1.
Условия SFC: колонка: AD (250 мм × 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: А: CO2, В: 0,1% NH3H2O в EtOH; градиент: от 25% до 25% В; скорость потока: 50 мл/мин; температура колонки: 40°C.
Способ 69
[(1R,2S)-2-Фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и [(1S,2R)-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору транс-2-фтор-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (транс-смесь) (245 мг; 1,65 ммоль) и (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (250 мг; 0,85 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли хлорид изопропилмагния (2,1 мл; 4,15 ммоль; 2 M в раствор тетрагидрофуране) при 0°C в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа. Реакционную смесь гасили путем добавления воды (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (33%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,6), получая [(1S,2R)-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (транс-смесь) (105 мг; 41%) в виде белого твердого вещества. LCMS: RT = 0,739 мин, m/z = 308,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,739 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 308,1.
Указанную выше транс-смесь далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено, [(1R,2S)-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 2,773 мин) (48,1 мг; 45%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.48-7.42 (m, 1Н), 7.25-7.13 (m, 3Н), 6.22-6.06 (m, 1Н), 5.93-5.89 (m, 1Н), 5.01-4.87 (m, 0,5Н), 4.85-4.82 (m, 0,5Н), 3.88-3.75 (m, 1Н), 3.51-3.42 (m, 1Н), 2.93-2.81 (m, 1Н), 1.75-1.64 (m, 1Н), 1.62-1.54 (m, 1Н). LC-MS: RT = 0,852 мин, m/z = 308,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,852 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 308,0.
Условия SFC: колонка: Chiralcel OD-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: этанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% В в течение 2,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 35°C.
Более крупную партию транс-смеси (215 мг; 0,70 ммоль) разделяли хиральной SFC, получая [(1S,2R)-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 2,445 мин) (19,5 мг; 9%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.40-7.38 (m, 1Н), 7.18-7.15 (m, 2Н), 6.98-6.97 (m, 1Н), 6.13-6.11 (m, 0,5Н), 5.99-5.98 (m, 0,5Н), 5.87-5.85 (m, 1Н), 5.05-5.04 (m, 0,5Н), 4.89-4.88 (m, 0,5Н), 3.73-3.67 (m, 1Н), 3.58-3.54 (m, 1Н), 3.01-2.95 (m, 1Н), 1.72-1.65 (m, 2Н). LC-MS: RT = 1,763 мин, m/z = 308,1 (М+Н)+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,1% водного аммиака в течение 3 мин): время удерживания 1,763 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 308,1. Примечание: (1R,2S)-изомеру соответствовал пик 2 (время удерживания = 2,728 мин) в условиях SFC на AD-колонке.
Условия SFC: колонка: Daicel Chiralpak AD-H (250 мм × 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: А: CO2, В: этанол (0,1% NH3H2O в метаноле); градиент: от 15% до 15% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% В в течение 2,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 35°C.
Способ 70
[(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1S,2S)-2-метилциклопропил]метанон и [(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1R,2R)-2-метилциклопропил]метанон
Рацемический [(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(15,25)-2-метилциклопропил]метанон (транс-смесь LHS) (80 мг) далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1S,2S)-2-метилциклопропил]метанон (пик 1, время удерживания = 3,714 мин) (28 мг; 35%; ее: 96,1%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.45-7.38 (m, 3Н), 7.29-7.26 (m, 2Н), 6.19-6.17 (m, 0,5Н), 6.05-6.03 (m, 0,5Н), 5.67-5.62 (m, 1Н), 3.81-3.71 (m, 1 Н), 2.89-2.75 (m, 2Н), 1.62-1.54 (m, 1Н), 1.45-1.39 (m, 1Н), 1.18 (d, J=6,4 Гц, 3Н), 0.99-0.96 (m, 1Н). LC-MS: RT = 0,756 мин, m/z = 286,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,756 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 286,1;
[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1R,2R)-2-метилциклопропил]метанон (пик 2, время удерживания = 3,901 мин) (48 мг; 60%; ее: 86%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.44-7.40 (m, 3Н), 7.29-7.27 (m, 2Н), 6.20-6.16 (m, 0,5Н), 6.06-6.02 (m, 0,5Н), 5.67-5.61 (m, 1Н), 3.79-3.73 (m, 1 Н), 2.89-2.74 (m, 2Н), 1.64-1.60 (m, 1Н), 1.44-1.39 (m, 1Н), 1.17 (d, J=6,0 Гц, 3Н), 1.00-0.95 (m, 1Н). LC-MS: RT = 0,757 мин, m/z = 286,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,757 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 286,1.
Условия SFC: колонка: AD (250 мм × 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: А: CO2, В: 0,1% NH3H2O в EtOH; градиент: от 25% до 25% В; скорость потока: 50 мл/мин; температура колонки: 40°C.
Способ 71
Циклопропил-[(5R,7S)-5-этил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: этил-3-этил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат
К раствору этилакрилата (89,6 мл; 841,85 ммоль), ди-трет-бутилдикарбоната (58,0 мл; 252,55 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (2,1 г; 16,84 ммоль) в ацетонитриле (50 мл) добавляли раствор 1-нитропропана (15,1 мл; 168,37 ммоль) при 25°C. Смесь перемешивали при 25°C в течение 5 ч и гасили путем добавления насыщенного раствора хлорида аммония (80 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-3-этил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат (25,5 г; 88%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4.94-4.86 (m, 1Н), 4.24-4.13 (m, 2Н), 3.21-3.14 (m, 2Н), 2.40-2.29 (m, 2Н), 1.30-1.24 (m, 3Н), 1.16-1.11 (m, 3Н).
Стадия 2: 5-этил-3-гидрокси-пирролидин-2-он
Смесь этил-3-этил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилата (15,0 г; 87,62 ммоль) и палладия (10%-ного на угле; 6,7 г) в этаноле (300 мл) перемешивали в атмосфере водорода (50 ф/кв. дюйм (344,7 кПа)) при 40°C в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 5-этил-3-гидрокси-пирролидин-2-он (11,0 г; 97%) в виде бесцветного масла.
Стадия 3: 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-этил-пирролидин-2-он
К раствору 5-этил-3-гидрокси-пирролидин-2-она (11,0 г; 85,17 ммоль) в дихлорметане (200 мл) добавляли имидазол (11,6 г; 170,33 ммоль) и трет-бутилдиметилхлорсилан (19,2 г; 127,75 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-этил-пирролидин-2-он (10,0 г; 48%) в виде бесцветного масла.
Стадия 4: 1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-этил-пирролидин-2-он
К раствору 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-этил-пирролидин-2-она (10,0 г; 41,08 ммоль) в N,N-диметилформамиде (200 мл) добавляли гидрид натрия (60%-ный; 2,5 г; 61,62 ммоль). По окончании перемешивания при 0°C в течение 20 мин к смеси добавляли 0-(дифенилфосфорил)гидроксиламин (14,4 г; 61,62 ммоль) и перемешивали при 25°C в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный (1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-этил-пирролидин-2-он (10,0 г; 94%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 1,130 мин, m/z = 259,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,130 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 259,2.
Стадия 5: этил-2-[[3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-этил-2-оксо-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетат
Смесь 1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-этил-пирролидин-2-она (10,0 г; 38,7 ммоль) и этил-2-этокси-2-имино-ацетата (14,0 г; 96,74 ммоль) в этаноле (250 мл) перемешивали при 90°C в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-2-[[3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-этил-2-оксо-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетат (13,0 г; 94%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 1,148 мин, m/z = 358,3 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,148 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 358,3.
Стадия 6: этил-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-этил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
Смесь этил-2-[[3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-этил-2-оксо-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетата (13,0 г; 36,36 ммоль) и п-толуолсульфоновой кислоты (7,5 г; 43,63 ммоль) в толуоле (250 мл) перемешивали при 120°C в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-этил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (12,0 г; 97%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 0,823 мин, m/z = 340,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,823 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 340,2.
Стадия 7: этил-транс-5-этил-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору этил-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-этил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (12,0 г; 35,35 ммоль) в тетрагидрофуране (200 мл) добавляли фторид тетрабутиламмония (1,0 М раствор в тетрагидрофуране; 35,35 мл; 35,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 40°C в течение 16 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (70 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×70 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 100% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-транс-5-этил-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (2,3 г; 29%) в виде бледно-красного масла (вместе с цис-изомером (2,8 г; 35%)). 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 5.32-5.27 (m, 1Н), 4.49-4.43 (m, 3Н), 3.24-3.17 (m, 1Н), 2.41-2.36 (m, 1Н), 2.21-2.12 (m, 1Н), 1.94-1.84 (m, 1Н), 1.36 (t, J=7,2 Гц, 3Н), 1.03 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
Стадия 8: этил-цис-5-этил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору этил-транс-5-этил-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (2,3 г; 10,21 ммоль) в дихлорметане (50 мл) по каплям добавляли трифторид диэтиламиносеры (6,6 г; 40,85 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч и гасили путем добавления насыщенного раствора бикарбоната натрия (20 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-фтор-этил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (800 мг; 34%) в виде желтого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 6.00-5.78 (m, 1Н), 4.53-4.37 (m, 3Н), 3.35-3.16 (m, 1Н), 2.69-2.54 (m, 1Н), 2.13-2.05 (m, 1Н), 1.98-1.91 (m, 1Н), 1.43 (t, J=7,2 Гц, 3Н), 1.02 (t, J=7,6 Гц, 3Н).
Стадия 9: цис-5-этил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновая кислота
К смеси этил-цис-5-этил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (200 мг; 0,88 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл), воде (2 мл) и метаноле (1 мл) добавляли гидроксида лития моногидрат (148 мг; 3,52 ммоль). Смесь перемешивали при 25°C в течение 16 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли ледяной водой (20 мл) и значение рН подводили до 3, добавляя водную соляную кислоту (4 М раствор). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенную цис-5-этил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновую кислоту (150 мг; 86%) в виде желтого масла.
Стадия 10: цис-5-этил-7-фтор-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид, цис-смесь
Смесь цис-5-этил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновой кислоты (100 мг; 0,50 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (34 мг; 0,25 ммоль), N,N-диизопропилэтиламина (0,21 мл; 1,26 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (74 мг; 0,75 ммоль) и 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (116 мг; 0,60 ммоль) в дихлорметане (5 мл) перемешивали при 25°C в течение 16 ч. Смесь разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 60% этилацетата в петролейном эфире), получая цис-5-этил-7-фтор-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид (120 мг; 99%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 5.99-5.79 (m, 1Н), 4.40-4.39 (m, 1Н), 3.84 (s, 3Н), 3.43 (s, 3Н), 3.36-3.16 (m, 1Н), 2.67-2.54 (m, 1Н), 2.14-2.03 (m, 1Н), 1.97-1.90 (m, 1Н), 1.07-1.03 (m, 3Н) LCMS: RT = 0,481 мин, m/z = 243,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,481 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 243,1.
Стадия 11: циклопропил-[(5R,7S)-5-этил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору цис-5-этил-7-фтор-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамида (100 мг; 0,41 ммоль) добавляли бромид циклопропилмагния (0,5 М раствор в тетрагидрофуране; 2,0 мл; 1,0 ммоль) в атмосфере азота при 0°C. По окончании добавления смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (50%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,4), получая циклопропил-[цис-5-этил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (80 мг; 87%) в виде желтого масла. Эту цис-смесь далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено, циклопропил-[(5R,7S)-5-этил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 3,928 мин) (22,5 мг; 28%) в виде оранжевого твердого вещества (также собирали (5S,7R)-изомер в виде пика 2 (время удерживания = 4,391 мин, 18,8 мг; 22%)). 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 6.09-5.89 (m, 1Н), 4.55-4.45 (m, 1Н), 3.43-3.36 (m, 1Н), 3.15-3.06 (m, 1Н), 2.67-2.53 (m, 1Н), 2.09-1.93 (m, 2Н), 1.23-1.18 (m, 2Н), 1.17-1.11 (m, 2Н), 1.05 (t, J=7,2 Гц, 3Н). LCMS: RT = 0,770 мин, m/z = 224,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,770 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 224,0.
Условия SFC: колонка: Chiralcel IC, 100×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: метанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 3,5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% В в течение 1,5 мин; скорость потока: 3 мл/мин; температура колонки: 40°C.
Способ 72
Циклопропил-[(5R,7S)-7-фтор-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: этил-3-пропил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат
К раствору этилакрилата (10,32 мл; 96,97 ммоль), ди-трет-бутилдикарбоната (6,68 мл; 29,09 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (0,24 г; 1,94 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) добавляли раствор 1-нитробутана (2,01 мл; 19,39 ммоль) при 25°C. По окончании добавления смесь перемешивали при 25°C в течение 5 ч и гасили, добавляя насыщенный раствор хлорида аммония (80 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (силикагель, 100-200 меш) с элюированием 0-10% этилацетата в петролейном эфире, получая этил-3-пропил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат (3,2 г; 89%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4.98-4.93 (m, 1Н), 4.27-4.20 (m, 2Н), 3.21-3.18 (m, 2Н), 2.37-2.33 (m, 2Н), 1.64-1.58 (m, 2Н), 1.33-1.28 (m, 3Н), 0.98-0.94 (m, 3Н).
Стадия 2: гидрокси-5-пропил-пирролидин-2-он
Смесь этил-3-пропил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилата (8,0 г; 43,19 ммоль) и палладия (10%-ного на угле; 3,3 г) в этаноле (200 мл) перемешивали в атмосфере водорода (50 ф/кв. дюйм (344,7 кПа)) при 40°C в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 3-гидрокси-5-пропил-пирролидин-2-он (6,1 г; 99%) в виде светло-желтого масла. LCMS: RT = 0,263 мин, m/z = 144,3 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 0,263 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 144,3.
Стадия 3: 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-пропил-пирролидин-2-он
К раствору 3-гидрокси-5-пропил-пирролидин-2-она (6,1 г; 42,60 ммоль) в дихлорметане (200 мл) добавляли имидазол (5,8 г; 85,21 ммоль) и трет-бутилдиметилхлорсилан (9,6 г; 63,91 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-пропил-пирролидин-2-он (7,5 г; 68%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 1,474 мин, m/z = 258,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,474 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 258,2.
Стадия 4: 1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-пропил-пирролидин-2-он
К раствору 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-пропил-пирролидин-2-она (7,0 г; 27,19 ммоль) в N,N-диметилформамиде (200 мл) добавляли гидрид натрия (60%-ный; 1,6 г; 40,79 ммоль; 60%). По окончании перемешивания при 0°С в течение 20 мин к смеси добавляли O-(дифенилфосфорил)гидроксиламин (9,5 г; 40,79 ммоль) и перемешивали при 25°С в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-пропил-пирролидин-2-он (6,8 г; 92%) в виде желтого масла. Это неочищенное масло использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS: RT = 0,766 мин, m/z = 273,3 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,766 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 273,3.
Стадия 5: этил-2-[[3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-2-оксо-5-пропил-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетат
Смесь 1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-пропил-пирролидин-2-она (6,6 г; 24,22 ммоль) и этил-2-этокси-2-имино-ацетата (8,8 г; 60,56 ммоль) в этаноле (100 мл) перемешивали при 90°С в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-2-[[3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-2-оксо-5-пропил-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетат (9,0 г; 100%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 1,192 мин, m/z = 372,3 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,192 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 372,3.
Стадия 6: этил-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
Смесь этил-2-[[3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-2-оксо-5-пропил-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетата (9,0 г; 24,22 ммоль) и п-толуолсульфоновой кислоты (6,3 г; 36,33 ммоль) в толуоле (150 мл) перемешивали при 120°С в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (8,3 г; 97%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 0,803 мин, m/z = 240,2 [M-TBS (трет-бутилдиметилсилил)]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 0,803 мин, ESI+: обнаружено [M-TBS] = 240,2.
Стадия 7: этил-транс-7-гидрокси-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору этил-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (8,30 г; 23,48 ммоль) в тетрагидрофуране (150 мл) добавляли фторид тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (11,74 мл; 11,74 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 40°С в течение 15 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (70 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×70 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 60% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-транс-7-гидрокси-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (1,0 г; 18%) в виде желтого масла (вместе с таким же количеством цис-продукта): 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 5.33-5.31 (m, 1H), 4.64-4.63 (m, 1H), 4.46-4.40 (m, 2H), 2.87-2.85 (m, 1H), 2.70-2.66 (m, 1H), 2.66-2.06 (m, 1H), 1.63-1.33 (m, 6H), 0.96-0.92 (m, 3H).
Стадия 8: этил-цис-7-фтор-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору этил-транс-7-гидрокси-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (800 мг; 3,34 ммоль) в дихлорметане (30 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (2,2 г; 13,37 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч и гасили путем добавления насыщенного раствора бикарбоната натрия (20 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 60% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-цис-7-фтор-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (270 мг; 34%) в виде желтого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 5.99-5.78 (m, 1H), 4.53-4.40 (m, 3H), 3.34-3.15 (m, 1H), 2.70-2.54 (m, 1H), 2.14-2.02 (m, 1H), 1.91-1.78 (m, 1H), 1.63-1.50 (m, 1H), 1.46-1.41 (m, 4H), 0.98 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 9: цис-7-фтор-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновая кислота
Смесь этил-цис-7-фтор-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (260 мг; 1,08 ммоль) и гидроксида лития моногидрата (135 мг; 3,23 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл), воде (1 мл) и метиловом спирте (0,5 мл) перемешивали при 25°С в течение 4 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли ледяной водой (20 мл) и значение рН подводили до 3, добавляя водную соляную кислоту (4 М раствор). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенную цис-7-фтор-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновую кислоту (225 мг; 98%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 10: циклопропил-[цис-7-фтор-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Смесь цис-7-фтор-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновой кислоты (200 мг; 0,94 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (63 мг; 0,47 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (137 мг; 1,41 ммоль), N,N-диизопропилэтиламина (0,39 мл; 2,35 ммоль) и 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (215 мг; 1,13 ммоль) перемешивали при 25°С в течение 3 ч. Смесь разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 60% этилацетата в петролейном эфире), получая цис-7-фтор-N-метокси-N-метил-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид (180 мг; 75%) в виде бесцветного масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 6.00-5.76 (m, 1H), 4.51-4.37 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.43 (s, 2H), 3.33-3.17 (m, 1H), 2.70-2.53 (m, 1H), 2.11-1.97 (m, 1H), 1.89-1.77 (m, 1H), 1.66-1.53 (m, 1H), 1.51-1.38 (m, 1H), 0.98 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
Стадия 11: циклопропил-[(5R,7S)-7-фтор-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору цис-7-фтор-N-метокси-N-метил-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамида (170 мг; 0,66 ммоль) добавляли бромид циклопропилмагния (0,5 М раствор в тетрагидрофуране; 3,21 мл; 1,61 ммоль) в атмосфере азота при 0°С. По окончании добавления смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (50%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,4), получая циклопропил-[цис-7-фтор-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (100 мг; 64%) в виде бесцветного масла. Эту цис-смесь далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено, циклопропил-[(5R,7S)-7-фтор-5-пропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 3,997 мин) (40,0 мг; 40%) в виде бесцветного масла. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 6.07-5.91 (m, 1H), 4.59-4.53 (m, 1H), 3.42-3.33 (m, 1H), 3.11-3.07 (m, 1H), 2.67-2.52 (m, 1H), 2.02-1.98 (m, 1H), 1.91-1.80 (m, 1H), 1.69-1.57 (m, 1H), 1.52-1.38 (m, 1H), 1.23-1.11 (m, 4H), 1.01 (t, J=7,2 Гц, 3Н). LCMS: RT = 0,972 мин, m/z = 238,2 [M+H]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 0,972 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 238,2.
Условия SFC: колонка: Chiralcel IC, 100×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: метанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% B в течение 3,5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% B в течение 1,5 мин; скорость потока: 3 мл/мин; температура колонки: 40°С.
Примечание: также собирали (5S,7R)-изомер в виде бесцветного масла (пик 2, время удерживания = 4,420 мин) (42,0 мг; 42%).
Способ 73
Циклопропил-[(5S,7S)-5-(2,6-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: 1-(2,6-дифторфенил)бут-3-ен-1-ол
К раствору 2,6-дифторбензальдегида (90,0 г; 633,36 ммоль) в тетрагидрофуране (2000 мл) по каплям добавляли бромид аллилмагния (1,0 М раствор в тетрагидрофуране; 760,0 мл; 760,0 ммоль) при 0°С в атмосфере азота. Смесь оставляли нагреваться до 25°С и перемешивали в течение 2 ч, затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (2000 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×2000 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (1000 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 1-(2,6-дифторфенил)бут-3-ен-1-ол (116 г; 99%) в виде бесцветного масла.
Стадия 2: трет-бутил((1-(2,6-дифторфенил)бут-3-ен-1-ил)окси)диметилсилан
К раствору 1-(2,6-дифторфенил)бут-3-ен-1-ола (116,0 г; 629,82 ммоль) в дихлорметане (2000 мл) добавляли имидазол (85,8 г; 1259,60 ммоль) и трет-бутилдиметилхлорсилан (113,9 г; 755,78 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 4 ч и фильтровали. Фильтрат промывали водой (2×2000 мл), насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (2×2000 мл), рассолом (500 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный трет-бутил-[1-(2,6-дифторфенил)бут-3-енокси]-диметил-силан (180,0 г; 96%) в виде светло-желтого масла.
Стадия 3: 3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(2,6-дифторфенил)пропаналь
К раствору трет-бутил-[1-(2,6-дифторфенил)бут-3-енокси]-диметил-силана (180,0 г; 603,14 ммоль) в воде (1000 мл) и тетрагидрофуране (1000 мл) добавляли тетраоксид осмия (0,88 г; 3,45 ммоль). По окончании перемешивания в течение 30 мин при 15°С малыми порциями добавляли периодат натрия (516,0 г; 2412,6 ммоль) в течение 2 ч. Полученную смесь перемешивали в течение еще 2 ч при 25°С и гасили путем добавления холодного насыщенного водного раствора тиосульфата натрия (300 мл). Смесь перемешивали в течение 30 мин и экстрагировали этилацетатом (3×2000 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2000 мл), рассолом (2000 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный продукт 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,6-дифторфенил)пропаналь (180,0 г; 99%) в виде желтого масла.
Стадия 4: 1-(3-бром-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(2,6-дифторфенил)пропан-1-ол
К охлажденному (-78°С) раствору 3,5-дибром-1-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазола (190,0 г; 610,99 ммоль) в тетрагидрофуране (2000 мл) медленно добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 268,8 мл; 672,09 ммоль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин, затем по каплям добавляли раствор 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,6-дифторфенил)пропаналя (177,0 г; 589,17 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 1,5 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (500 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×2000 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 12% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,6-дифторфенил)пропан-1-ол (160 г; 49%) в виде желтого масла.
Стадия 5: 2-бром-5-(2,6-дифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол
Смесь 1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,6-дифторфенил)пропан-1-ола (80,0 г; 150,24 ммоль), трифторуксусной кислоты (400 мл; 6009,5 ммоль) и трифторметансульфоновой кислоты (40 мл; 600,95 ммоль) перемешивали при 50°С в течение 12 ч и концентрировали при пониженном давлении. Значение рН остатка подводили до 9, добавляя насыщенный водный раствор бикарбоната натрия, и экстрагировали дихлорметаном (2×700 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2×300 мл), рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток промывали метил-трет-бутиловым эфиром (80 мл), получая неочищенный 2-бром-5-(2,6-дифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол (40 г; 84%) в виде белого твердого вещества. LCMS: RT = 0,694 и 0,711 мин, m/z = 317,9 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,694 и 0,711 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 317,9.
Стадия 6: (5S,7S)-2-бром-5-(2,6-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
К охлажденному (0°С) раствору 2-бром-5-(2,6-дифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (1,5 г; 4,75 ммоль) в дихлорметане (30 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (2,5 мл; 18,98 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили путем добавления насыщенного водного раствора бикарбоната натрия (100 мл) при 0°С. Смесь экстрагировали дихлорметаном (2×100 мл). Объединенные органические слои промывали водой (100 мл), рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 12% этилацетата в петролейном эфире), получая цис-2-бром-5-(2,6-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (0,25 г; 16%) в виде светло-желтого твердого вещества. LCMS: RT = 0,808 мин, m/z = 319,9 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,808 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 319,9.
Эту цис-смесь далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено, (5S,7S)-2-бром-5-(2,6-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (пик 2, время удерживания = 3,293 мин) (115 мг; 46%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Условия SFC: Chiralpak AD-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: этанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5,5 мин и выдерживание при 40% в течение 3 мин, затем при 5% B в течение 1,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 40°С.
Стадия 7: циклопропил-[(5S,7S)-5-(2,6-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору (5S,7S)-2-бром-5-(2,6-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (115 мг; 0,36 ммоль) и N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (93 мг; 0,72 ммоль) в тетрагидрофуране (6 мл) добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 0,36 мл; 0,72 ммоль) при 0°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл), рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 37-67%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая циклопропил-[(5S,7S)-5-(2,6-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (32,6 мг; 29%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.54-7.48 (m, 1H), 7.10-7.06 (m, 2H), 6.24-6.21 (m, 0,5H), 6.10-6.07 (m, 0,5H), 5.98-5.94 (m, 1H), 3.89-3.81 (m, 1H), 3.03-2.91 (m, 2H), 1.18-1.16 (m, 2H), 1.11-1.08 (m, 2H). LCMS: RT = 0,740 мин, m/z = 308,1 [M+H]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,740 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 308,1.
Способ 74
1-[(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил]циклопропанкарбонитрил
Стадия 1: 1-циано-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамид
Смесь 1-цианоциклопропанкарбоновой кислоты (500 мг; 4,5 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (365 мг; 2,7 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (1,0 г; 5,4 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (878 мг; 9,0 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (0,8 мл; 4,5 ммоль) в дихлорметане (40 мл) перемешивали при 25°С в течение 16 ч и гасили, добавляя воду (100 мл). Полученную смесь экстрагировали дихлорметаном (2×100 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 50% до 60% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-циано-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамид (410 мг; 59%) в виде желтого масла.
Стадия 2: 1-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил]циклопропанкарбонитрил
К охлажденной (0°С) смеси (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (200 мг; 0,71 ммоль) и 1-циано-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (164 мг; 1,06 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 1,06 мл; 2,13 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при 25°С в течение 3 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 35-65%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая, как условно обозначено, 1-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил]циклопропанкарбонитрил (20 мг; 9,2%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.43-7.40 (m, 3H), 7.78-7.27 (m, 2H), 6.15-5.99 (m, 1H), 5.57-5.55 (m, 1H), 3.69-3.61 (m, 1H), 3.06-2.96 (m, 1H), 2.10-2.03 (m, 2H), 1.84-1.81 (m, 2H). LCMS: RT = 0,813 мин, m/z = 296,9 [M+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,813 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 296,9.
Способ 75
[(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-спиро[2.2]пентан-2-ил-метанон
Стадия 1: N-метокси-N-метилспиро[2.2]пентан-1-карбоксамид
Смесь спиро[2.2]пентан-2-карбоновой кислоты (0,5 г; 4,46 м моль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (0,65 г; 6,69 ммоль), 1-[бис(диметиламино)метилен]-1H-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфата (1,70 г; 4,46 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (1,44 г; 11,15 ммоль) в N,N-диметилформамиде (10 мл) перемешивали при 25°С в течение 5 ч. Реакционную смесь выливали в воду (30 мл) и экстрагировали дихлорметаном (2×20 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл) и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный N-метокси-N-метил-спиро[2.2]пентан-2-карбоксамид (690 мг; 100%) в виде бесцветного масла. Неочищенное масло использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
LC-MS: RT = 0,638 мин, m/z = 156,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,638 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 156,1.
Стадия 2: [(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-спиро[2.2]пентан-2-ил-метанон
К смеси (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (100 мг; 0,35 ммоль) и N-метокси-N-метил-спиро[2.2]пентан-2-карбоксамида (110 мг; 0,71 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл) добавляли бромид изопропилмагния (3,0 М в 2-метилтетрагидрофуране; 0,71 мл; 2,13 ммоль) в атмосфере азота при 0°С. По окончании добавления смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×30 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (10 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 40-70%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая, как условно обозначено, [(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-спиро[2.2]пентан-2-ил-метанон (18,6 мг; 18%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.41-7.33 (m, 3H), 7.29-7.23 (m, 2Н), 6.09-5.93 (m, 1Н), 5.52-5.44 (m, 1Н), 3.68-3.60 (m, 1Н), 3.40-3.36 (m, 1Н), 3.01-2.89 (m, 1H), 1.88-1.82 (m, 1H), 1.63-1.61 (m, 1H), 1.05-0.97 (m, 2H), 0.95-0.89 (m, 1H), 0.88-0.83 (m, 1H). LC-MS: RT = 0,786 мин, m/z = 298,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,786 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 298,1.
Способ 76
[(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-спиро[2.3]гексан-2-ил-метанон
Стадия 1: N-метокси-N-метилспиро[2.3]гексан-1-карбоксамид
Смесь спиро[2.3]гексан-2-карбоновой кислоты (300 мг; 2,38 м моль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (464 мг; 4,76 ммоль), N,N-диизопропилэтиламина (922 мг; 7,13 ммоль), 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфата (949 мг; 2,5 ммоль) в N,N-диметилформамиде (10 мл) перемешивали при 20°С в течение 2 ч. Смесь выливали в воду (60 мл) и экстрагировали дихлорметаном (2×30 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2×20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный N-метокси-N-метил-спиро[2.3]гексан-2-карбоксамид (400 мг; 99%) в виде светло-желтого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC-MS: RT = 0,725 мин, m/z = 170,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,725 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 170,2.
Стадия 2: [(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-спиро[2.3]гексан-2-ил-метанон
К раствору (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (100 мг; 0,35 ммоль) и N-метокси-N-метил-спиро[2.3]гексан-2-карбоксамида (120 мг; 0,71 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл) по каплям добавляли бромид изопропилмагния (3,0 М раствор в 2-метилтетрагидрофуране; 0,71 мл; 2,13 ммоль) в атмосфере азота при 0°С. По окончании добавления смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 45-75%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая, как условно обозначено, [(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-спиро[2.3]гексан-2-ил-метанон (21,6 мг; 19%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.42-7.38 (m, 3H), 7.29-7.26 (m, 2H), 6.11-5.95 (m, 1H), 5.51-5.48 (m, 1H), 3.69-3.60 (m, 1H), 3.10-3.03 (m, 1H), 3.02-2.90 (m, 1H), 2.38-2.13 (m, 4H), 2.08-1.99 (m, 1H), 1.98-1.89 (m, 1H), 1.56-1.52 (m, 1H), 1.29-1.24 (m, 1H). LC-MS: RT = 0,821 мин, m/z = 312,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,821 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 312,1.
Способ 77
[1-(2-Пиридил)циклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: N-метокси-N-метил-1-(2-пиридил)циклопропанкарбоксамид
Смесь 1-(2-пиридил)циклопропанкарбоновой кислоты (200 мг; 1,23 ммоль), N,N-диизопропилэтиламина (475 мг; 3,68 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (198 мг; 1,47 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (282 мг; 1,47 ммоль) и N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (179 мг; 1,84 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивали при 30°С в течение 18 ч и разбавляли водой (30 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2×10 мл), рассолом (20 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая N-метокси-N-метил-1-(2-пиридил)циклопропанкарбоксамид (200 мг; 79%) в виде белого твердого вещества. LC-MS: RT = 0,733 мин, m/z = 207 (М+Н)+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,733 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 207.
Стадия 2: [1-(2-пиридил)циклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору N-метокси-N-метил-1-(2-пиридил)циклопропанкарбоксамида (55 мг; 0,27 ммоль), (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (50 мг; 0,18 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл) по каплям при 0°С добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 0,4 мл; 0,80 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (5 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (вода (с 0,05% гидроксида аммония, об./об.)/ацетонитрил, 35-65%), получая, как условно обозначено, [1-(2-пиридил)циклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (15,4 мг; 24%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8.42-8.40 (m, 1H), 7.50-7.47 (m, 1H), 7.34-7.32 (m, 3H), 7.26-7.10 (m, 1H), 7.06-7.02 (m, 3H), 6.00-5.83 (m, 1H), 5.40-5.35 (m, 1H), 3.60-3.49 (m, 1H), 2.92-2.81 (m, 1H), 2.02-1.90 (m, 1H), 1.83-1.78 (m, 2H), 1.60-1.50 (m, 1H). LCMS: RT = 1,678 мин, m/z = 349,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,1% водного аммиака в течение 3 мин): время удерживания 1,678 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 349,2.
Способ 78
(1-Циклопропилциклопропил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: 1-циклопропил-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамид
Смесь 1-циклопропилциклопропанкарбоновой кислоты (500 мг; 3,96 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (321 мг; 2,38 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (773 мг; 7,93 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (912 мг; 4,76 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (512 мг; 3,96 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивали при 25°С в течение 18 ч и гасили, добавляя воду (10 мл). Отделенный органический слой промывали рассолом (10 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 50 до 60% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-циклопропил-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамид (370 мг; 55%) в виде желтого масла.
Стадия 2: (1-циклопропилциклопропил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору 1-циклопропил-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (340 мг; 2,01 ммоль), (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (288 мг; 1,02 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) по каплям при 0°С добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 3,57 мл; 7,15 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (20%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,6), получая, как условно обозначено, (1-циклопропилциклопропил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (100 мг; 31%) в виде коричневого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.40-7.36 (m, 3H), 7.24-7.22 (m, 2Н), 6.09-5.91 (m, 1Н), 5.52-5.45 (m, 1Н), 3.69-3.54 (m, 1H), 2.99-2.86 (m, 1Н), 1.88-1.83 (m, 1Н), 1.54-1.50 (m, 2Н), 0.78-0.76 (m, 2Н), 0.43-0.39 (m, 2H), 0.07-0.03 (m, 2Н). LC-MS: RT = 0,816 мин, m/z = 312,1 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% бикарбоната аммония в течение 3 мин): время удерживания 1,935 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 312,2.
Способ 79
Циклопропил-[(5S,7S)-5-(2-хлорфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: 1-(2-хлорфенил)бут-3-ен-1-ол
К раствору 2-хлорбензальдегида (90,0 г; 640,25 ммоль) в тетрагидрофуране (1000 мл) добавляли хлорид аллилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 448,1 мл; 896,35 ммоль) при -78°С в атмосфере азота. Полученную смесь оставляли нагреваться до 25°С и перемешивали в течение 1 ч, затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (100 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×500 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 1-(2-хлорфенил)бут-3-ен-1-ол (116,0 г; 99%) в виде желтого масла.
Стадия 2: трет-бутил-[1-(2-хлорфенил)бут-3-енокси]-диметил-силан
К раствору 1-(2-хлорфенил)бут-3-ен-1-ола (116,0 г; 634,55 ммоль) в дихлорметане (1,5 л) добавляли имидазол (86,4 г; 1269,1 ммоль) и трет-бутилдиметилхлорсилан (124,3 г; 824,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и гасили, добавляя воду (1 л). Смесь экстрагировали этилацетатом (2×1 л). Объединенные органические слои промывали рассолом (1 л), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный трет-бутил-[1-(2-хлорфенил)бут-3-енокси]-диметил-силан (188,0 г; 99%) в виде желтого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 7.59-7.54 (m, 1H), 7.31-7.23 (m, 2H), 7.20-7.14 (m, 1H), 5.92-5.79 (m, 1H), 5.17-5.12 (m, 1H), 5.07-5.00 (m, 2H), 2.49-2.42 (m, 1H), 2.40-2.32 (m, 1H), 0.89 (s, 9H), 0.05 (s, 3H), от -0.10 до -0.13 (m, 3H).
Стадия 3: 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2-хлорфенил)пропаналь
К раствору трет-бутил-[1-(2-хлорфенил)бут-3-енокси]-диметил-силана (188,0 г; 633,19 ммоль) в воде (1,0 л) и тетрагидрофуране (1,0 л) добавляли тетраоксид осмия (0,04%-ный раствор в воде; 41,55 мл; 6,65 ммоль). По окончании перемешивания в течение 30 мин при 15°С добавляли малыми порциями в течение 2 ч периодат натрия (541,7 г; 2532,8 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение еще 2 ч при 30°С и гасили путем добавления холодного насыщенного водного раствора тиосульфата натрия (500 мл). Смесь перемешивали в течение 30 мин и экстрагировали этилацетатом (3×500 мл). Объединенные органические слои промывали водой (500 мл), рассолом (500 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 5% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2-хлорфенил)пропаналь (189,0 г; 99%) в виде окрашенного масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 9.84-9.81 (m, 1H), 7.63-7.59 (m, 1H), 7.35-7.28 (m, 2H), 7.25-7.19 (m, 1H), 5.66-5.62 (m, 1H), 2.76-2.69 (m, 2H), 0.89 (s, 9H), 0.09 (s, 3H), -0.10 (s, 3H).
Стадия 4: 1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2-хлорфенил)пропан-1-ол
К охлажденному (-78°С) раствору 3,5-дибром-1-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазола (194,6 г; 626,04 ммоль) в тетрагидрофуране (1100 мл) медленно добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 278,2 мл; 695,6 ммоль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин, затем по каплям добавляли раствор 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2-хлорфенил)пропаналя (189,0 г; 632,4 ммоль) в тетрагидрофуране (400 мл). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 2 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (200 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×800 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2-хлорфенил)пропан-1-ол (202,0 г; 60%) в виде желтого масла. LC-MS: RT = 2,657 мин, m/z = 446,1 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% бикарбоната аммония в течение 3 мин): время удерживания 2,657 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 446,1.
Стадия 5: 2-бром-5-(2-хлорфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол
Смесь 1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,3,6-трифторфенил)пропан-1-ола (50,0 г; 94,17 ммоль) и трифторуксусной кислоты (280,7 мл; 3766,8 ммоль) перемешивали при 55°С в течение 16 ч и концентрировали при пониженном давлении. Значение рН остатка подводили до 9, добавляя насыщенный водный раствор бикарбоната натрия, и экстрагировали этилацетатом (3×300 мл). Объединенные органические слои промывали водой (100 мл), рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая 2-бром-5-(2-хлорфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол (9,2 г; 31%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3Cl) δ 7.48-7.41 (m, 1Н), 7.34-7.27 (m, 2H), 7.10-6.79 (m, 1H), 6.08-5.83 (m, 1H), 5.70-5.53 (m, 1H), 5.41 (br s, 1H), 3.74-3.57 (m, 0,5H), 3.35-3.21 (m, 0,5H), 2.99-2.84 (m, 1H), 2.67-2.52 (m, 0,5H). LC-MS: RT = 0,614 мин, m/z = 314,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,614 мин, ESI+: обнаружено [M+H]=314,0.
Стадия 6: 2-бром-5-(2-хлорфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
К охлажденному (0°С) раствору 2-бром-5-(2-хлорфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (5,2 г; 16,53 ммоль) в дихлорметане (80 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (8,8 мл; 66,12 ммоль) в дихлорметане (20 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили путем добавления насыщенного водного раствора бикарбоната натрия (300 мл) при 0°С. Смесь экстрагировали дихлорметаном (2×200 мл). Объединенные органические слои промывали водой (200 мл), рассолом (200 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 12% этилацетата в петролейном эфире), получая 2-бром-5-(2-хлорфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (3,9 г; 75%) в виде густого желтого масла.
Стадия 7: циклопропил-[(5S,7S)-5-(2-хлорфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К смеси N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (402 мг; 3,11 ммоль), 2-бром-5-(2-хлорфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (500 мг; 1,58 ммоль) в тетрагидрофуране (30 мл) по каплям при 0°С добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 5,5 мл; 11,06 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили, добавляя воду (30 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (20%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,5), получая [5-(2-хлорфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-циклопропил-метанон (250 мг; 52%) в виде белого твердого вещества. LC-MS: RT = 0,685 мин, m/z = 306,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,685 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 306,1.
Указанную выше цис-/транс-смесь далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
циклопропил-[(5S,7S)-5-(2-хлорфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 2, время удерживания = 2,509 мин) (50,6 мг; 12%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.45-7.43 (m, 1H), 7.34-7.28 (m, 1H), 7.26-7.24 (m, 1H), 6.76-6.72 (m, 1H), 6.10-6.06 (m, 0,5H), 6.01-5.95 (m, 1H), 5.95-5.93 (m, 0,5H), 3.78-3.62 (m, 1H), 3.12-3.04 (m, 1H), 2.93-2.80 (m, 1H), 1.37-1.32 (m, 2H), 1.14-1.09 (m, 2H). LC-MS: RT = 1,049 мин, m/z = 306,1 [M+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,049 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 306,1;
циклопропил-[(5R,7R)-5-(2-хлорфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 4, время удерживания = 3,571 мин) (65,6 мг; 15%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.47-7.43 (m, 1H), 7.34-7.26 (m, 1,5H), 7.25-7.22 (m, 0,5H), 6.76-6.72 (m, 1H), 6.10-6.06 (m, 0,5H), 6.01-5.96 (m, 1H), 5.95-5.93 (m, 0,5H), 3.78-3.62 (m, 1H), 3.12-3.04 (m, 1H), 2.93-2.80 (m, 1H), 1.37-1.32 (m, 2H), 1.14-1.08 (m, 2H). LC-MS: RT = 0,776 мин, m/z = 306,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,776 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 306,1.
Примечание: в пике 1 и пике 3 представлены транс-изомеры.
Метод SFC: колонка: Chiralcel OJ-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: СО2, В: этанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% B в течение 2,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 35°С.
Способ 80
Циклопропил-[(5S,7S)-5-(2,5-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: 1-(2,5-дифторфенил)бут-3-ен-1-ол
К раствору 2,5-дифторбензальдегида (10,0 г; 70,4 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) добавляли бромид аллилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 49,3 мл; 98,5 ммоль) при 0°С в атмосфере азота. По окончании добавления реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Смесь гасили путем добавления насыщенного водного раствора хлорида аммония (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 1-(2,5-дифторфенил)бут-3-ен-1-ол (11,0 г; 85%) в виде желтого масла.
Стадия 2: трет-бутил((1-(2,5-дифторфенил)бут-3-ен-1-ил)окси)диметилсилан
К раствору 1-(2,5-дифторфенил)бут-3-ен-1-ола (11,0 г; 59,7 ммоль) в дихлорметане (200 мл) добавляли имидазол (8,1 г; 119,5 ммоль) и трет-бутилдиметилхлорсилан (11,7 г; 77,6 ммоль). По окончании добавления реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и гасили, добавляя воду (100 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (2×200 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный трет-бутил-[1-(2,5-дифторфенил)бут-3-енокси]-диметил-силан (17,0 г; 95%) в виде светлого масла.
Стадия 3: 3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(2,5-дифторфенил)пропаналь
К раствору трет-бутил-[1-(2,5-дифторфенил)бут-3-енокси]-диметил-силана (17,0 г; 57,0 ммоль) в смеси тетрагидрофуран/вода (100 мл; 1:1) добавляли тетраоксид осмия (80,0 мг; 0,33 ммоль). По окончании перемешивания в течение 30 мин при 15°С добавляли малыми порциями в течение 2 ч периодат натрия (48,7 г; 227,9 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение еще 2 ч при 30°С. Смесь гасили путем добавления холодного насыщенного водного раствора тиосульфата натрия (100 мл). Смесь перемешивали в течение 30 мин и затем экстрагировали этилацетатом (3×150 мл). Объединенные органические слои промывали водой (100 мл), рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,5-дифторфенил)пропаналь (10,8 г; 63%) в виде светло-желтого масла.
Стадия 4: 1-(3-бром-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1H-1,2,4-триазол-5-ил)-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(2,5-дифторфенил)пропан-1-ол
К охлажденному (-78°С) раствору 3,5-дибром-1-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазола (11,4 г; 36,6 ммоль) в тетрагидрофуране (80 мл) медленно добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 16,1 мл; 40,3 ммоль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин, затем по каплям добавляли раствор 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,3-дифторфенил)пропаналя (10,8 г; 36,0 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 1,5 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (100 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,5-дифторфенил)пропан-1-ол (10,0 г; 52%) в виде желтого масла.
Стадия 5: 2-бром-5-(2,3,6-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол
К раствору 1-(3-бром-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,5-дифторфенил)пропан-1-ола (3,96 г; 8,83 ммоль) в трифторуксусной кислоте (25 мл; 88,3 ммоль) добавляли трифторметансульфоновую кислоту (2,5 мл; 8,83 ммоль). Полученную смесь нагревали при 60°С в течение 2 ч и концентрировали при пониженном давлении. Значение рН остатка подводили до 9, добавляя насыщенный водный раствор бикарбоната натрия, и экстрагировали дихлорметаном (3×100 мл). Объединенные органические слои промывали водой (100 мл), рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 50 до 60% этилацетата в петролейном эфире), получая неочищенный продукт, который промывали метил-трет-бутиловым эфиром (20 мл), получая 2-бром-5-(2,5-дифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол (1,1 г; 39%) в виде коричневого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.11-7.03 (m, 1H), 6.98-6.75 (m, 1H), 5.84-5.68 (m, 1H), 5.47-5.30 (m, 2H), 3.64-3.18 (m, 1H), 3.02-2.63 (m, 1H). LCMS: RT = 0,727 мин, m/z = 318,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,727 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 318,0.
Стадия 6: (5S,7S)-2-бром-5-(2,5-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
К раствору 2-бром-5-(2,5-дифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (5,0 г; 15,8 ммоль) в толуоле (50 мл) по каплям добавляли трифторид диэтиламиносеры (10,2 г; 63,3 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 16 ч и затем медленно добавляли в насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (100 мл) при 0°С. Смесь экстрагировали дихлорметаном (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали водой (100 мл), рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 15% этилацетата в петролейном эфире), получая рац-(5S,7S)-2-бром-5-(2,5-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (1,3 г; 26%) в виде коричневого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.15-7.05 (m, 2H), 6.72-6.68 (m, 1H), 6.07-5.91 (m, 1H), 5.78-5.74 (m, 1H), 3.68-3.55 (m, 1H), 2.90-2.79 (m, 1H). LCMS: RT = 0,821 мин, m/z = 317,9 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,821 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 317,9.
Эту цис-смесь (500 мг; 1,7 ммоль) далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено, (5S,7S)-2-бром-5-(2,5-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (пик 2, время удерживания = 2,600 мин) (220 мг; 44%) в виде коричневого твердого вещества (вместе с (5R,7R)-изомером (пик 1, время удерживания = 2,295 мин) (220 мг; 44%)).
Условия SFC: колонка: Chiralpak IC-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм. Подвижная фаза: А: CO2, В: этанол (с 0,05% DEA). Градиент: от 5% до 40% В за 5,5 мин и выдерживание при 40% в течение 3 мин, затем при 5% B в течение 1,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 40°С.
Стадия 7: циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2,3,6-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К смеси (5S,7S)-2-бром-5-(2,5-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (100 мг; 0,31 ммоль), N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (81 мг; 0,63 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл) по каплям добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 0,31 мл; 0,63 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при 0°С в течение 0,5 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл), рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC, получая циклопропил-[(5S,7S)-5-(2,5-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (22,1 мг; 23%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.28-7.17 (m, 2H), 6.93-6.88 (m, 1H), 6.22-6.06 (m, 1H), 5.90-5.86 (m, 1H), 3.88-3.74 (m, 1H), 3.09-3.02 (m, 1H), 2.93-2.82 (m, 1H), 1.21-1.18 (m, 2H), 1.15-1.11 (m, 2H). LCMS: RT = 1,007 мин, m/z = 308,1 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,007 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 308,1.
Способ 81
Циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2,3,6-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: 1-(2,3,6-трифторфенил)бут-3-ен-1-ол
К раствору 2,3,6-трифторбензальдегида (25,0 г; 156,2 ммоль) в тетрагидрофуране (350 мл) добавляли бромид аллилмагния (2,5 М раствор в гексане; 93,7 мл; 187,4 ммоль) при 0°С в атмосфере азота. Полученную смесь оставляли нагреваться до 25°С и перемешивали в течение 1 ч, затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (100 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 1-(2,3,6-трифторфенил)бут-3-ен-1-ол (30 г; 95%) в виде светло-желтого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.01-7.17 (m, 1H), 6.79-6.92 (m, 1H), 5.72-5.91 (m, 1H), 5.07-5.26 (m, 3Н), 2.74-2.88 (m, 1H), 2.65-2.69 (m, 1H), 2.44 (s, 1H).
Стадия 2: трет-бутилдиметил((1-(2,3,6-трифторфенил)бут-3-ен-1-ил)окси)силан
К раствору 1-(2,3,6-трифторфенил)бут-3-ен-1-ола (30,0 г; 148,4 ммоль) в дихлорметане (250 мл) добавляли имидазол (20,2 г; 296,8 ммоль) и трет-бутилдиметилхлорсилан (29,1 г; 192,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и затем гасили, добавляя воду (100 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (2×200 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный трет-бутил-диметил-[1-(2,3,6-трифторфенил)бут-3-енокси]силан (46,0 г; 98%) в виде светло-желтого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.26 (s, 1H), 7.07-6.95 (m, 1H), 6.97-6.77 (m, 1H), 5.58-5.82 (m, 1H), 4.97-5.11 (m, 3Н), 2.84-2.64 (m, 1 Н), 2.62-2.44 (m, 1 Н), 0.83-0.86 (m, 9H), 0.03-0.07 (m, 3Н), -0.17--0.13 (m, 3H).
Стадия 3: 3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(2,3,6-трифторфенил)пропаналь
К раствору трет-бутил-диметил-[1-(2,3,6-трифторфенил)бут-3-енокси]силана (5,0 г; 15,8 ммоль) в воде (30 мл) и тетрагидрофуране (30 мл) добавляли тетраоксид осмия (0,5 г; 1,97 ммоль). По окончании перемешивания в течение 30 мин при 15°С, малыми порциями добавляли периодат натрия (13,5 г; 63,2 ммоль) в течение 2 ч. Полученную смесь перемешивали в течение еще 2 ч при 30°С и затем гасили путем добавления холодного насыщенного водного раствора тиосульфата натрия (300 мл). Смесь перемешивали в течение 30 мин и затем экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенные органические слои промывали водой (200 мл), рассолом (200 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный продукт, 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,3,6-трифторфенил)пропаналь (5 г; 99%) в виде желтого масла.
Стадия 4: 1-(3-бром-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1H-1,2,4-триазол-5-ил)-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(2,3,6-трифторфенил)пропан-1-ол
К охлажденному (-78°С) раствору 3,5-дибром-1-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазола (26,9 г; 86,4 ммоль) в тетрагидрофуране (300 мл) добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 38,0 мл; 95,0 ммоль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин, затем по каплям добавляли раствор 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,3,6-трифторфенил)пропаналя (27,0 г; 84,8 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 1,5 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (100 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-(3-бром-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(2,3,6-трифторфенил)пропан-1-ол (23 г; 49%) в виде желтого масла.
Стадия 5: 2-бром-5-(2,3,6-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол
Смесь 1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,3,6-трифторфенил)пропан-1-ола (22,9 г; 41,6 ммоль) и трифторметансульфоновой кислоты (12,2 мл; 138,4 ммоль) в дихлорметане (200 мл) нагревали при 55°С в течение 4 суток и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (100 мл) и значение рН подводили до 9 насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Смесь экстрагировали дихлорметаном (3×200 мл). Объединенные органические слои промывали водой (100 мл), рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая 2-бром-5-(2,3,6-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол (9,2 г; 66%) в виде желтого твердого вещества. LCMS: RT = 0,873 и 0,897 мин, m/z = 334,0/336,0 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 0,873 и 0,897 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 334,0/336,0.
Стадия 6: рац-(5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-(2,3,6-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
К охлажденному (0°С) раствору 2-бром-5-(2,3,6-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (9,2 г; 27,5 ммоль) в толуоле (100 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (14,6 мл; 110,2 ммоль) в толуоле (4 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и затем медленно добавляли в насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (100 мл) при 0°С. Смесь экстрагировали дихлорметаном (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали водой (100 мл), рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 12% этилацетата в петролейном эфире), получая рац-(5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-(2,3,6-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (1,8 г; 19%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 7: циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2,3,6-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К охлажденному (0°С) раствору N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (188 мг; 1,47 ммоль) и рац-(5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-(2,3,6-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (150 мг; 0,72 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 0,73 мл; 1,46 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили, добавляя воду (30 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 5% этилацетата в петролейном эфире), получая циклопропил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-(2,3,6-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (95 мг; 40%) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.25-7.16 (m, 1Н), 6.92-6.89 (m, 1H), 6.23-5.96 (m, 1H), 5.91-5.77 (m, 1H), 3.87-3.72 (m, 1H), 3.14-2.97 (m, 2H), 1.37-1.27 (m, 2H), 1.14-1.03 (m, 2H). LCMS: RT = 0,655 мин, m/z = 326,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,655 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 326,1.
Эту цис-смесь далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено, циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2,3,6-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 2,856 мин) (40 мг; 42%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.24-7.20 (m, 1H), 6.93-6.90 (m, 1H), 6.19-6.03 (m, 1H), 5.86-5.83 (m, 1H), 3.84-3.74 (m, 1H), 3.10-3.04 (m, 2H), 1.34-1.31 (m, 2H), 1.13-1.08 (m, 2H). LCMS: RT = 0,864 мин, m/z = 325,9 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,864 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 325,9.
Условия SFC: колонка: Chiralcel OJ-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм. Подвижная фаза: А: СО2, В: этанол (с 0,05% DEA). Градиент: от 5% до 40% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% B в течение 2,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 35°С.
Способ 82
Циклопропил-[(5S,7S)-7-дейтеро-7-фтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: цис-2-бром-7-дейтеро-7-фтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
К охлажденному (0°С) раствору транс-2-бром-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (400 мг; 1,42 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (917 мг; 5,69 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили путем добавления насыщенного раствора бикарбоната натрия (30 мл) при 0°С. Смесь экстрагировали дихлорметаном (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали водой (50 мл), рассолом (50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 12% этилацетата в петролейном эфире), получая цис-2-бром-7-дейтеро-7-фтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (0,22 г; 55%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.43-7.38 (m, 3H), 7.27-7.24 (m, 2Н), 5.47-5.42 (m, 1Н), 3.63-3.51 (m, 1H), 2.94-2.84 (m, 1H).
Стадия 2: циклопропил-[(5S,7S)-7-дейтеро-7-фтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору цис-2-бром-7-дейтеро-7-фтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (210 мг; 0,74 ммоль) и N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (192 мг; 1,48 ммоль) в тетрагидрофуране (6 мл) добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 0,74 мл; 1,48 ммоль) при 0°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл), рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 44-74%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая циклопропил-[цис-7-дейтеро-7-фтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (55 мг; 27%) в виде белого твердого вещества. LCMS: RT = 0,646 мин, m/z = 273,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания: 0,646 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 273,2.
Указанную выше цис-смесь далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено, циклопропил-[(5S,7S)-7-дейтеро-7-фтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 2, время удерживания = 4,354 мин) (16,6 мг; 29%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.45-7.38 (m, 3Н), 7.29-7.27 (m, 2H), 5.67-5.63 (m, 1H), 3.80-3.70 (m, 1H), 3.05-3.02 (m, 1H), 2.88-2.80 (m, 1H), 1.19-1.16 (m, 2H), 1.12-1.09 (m, 2H). LCMS: RT = 0,738 мин, m/z = 273,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания: 0,738 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 273,1.
Условия SFC: колонка: Daicel Chiralpak AD-H, 250 мм × 30 мм (внутр. диам.), 5 мкм; подвижная фаза: А: СО2, В: этанол (0,1% NH3H2O в IPA). Градиент: от 30% до 30% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% B в течение 2,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 35°С.
Способ 83
[(1R,2S)-2-Фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и [(1S,2R)-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору транс-2-фтор-N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (транс-смеси) (245 мг; 1,65 ммоль) и (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (250 мг; 0,85 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли хлорид изопропилмагния (2,1 мл; 4,15 ммоль; 2 M раствор в тетрагидрофуране) при 0°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 часа. Реакционную смесь гасили путем добавления воды (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (33%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,6), получая [(1S,2R)-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (транс-смесь) (105 мг; 41%) в виде белого твердого вещества. LCMS: RT = 0,739 мин, m/z = 308,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,739 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 308,1.
Указанную выше транс-смесь дополнительно разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено, [(1R,2S)-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 2,773 мин) (48,1 мг; 45%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.48-7.42 (m, 1H), 7.25-7.13 (m, 3H), 6.22-6.06 (m, 1H), 5.93-5.89 (m, 1H), 5.01-4.87 (m, 0,5H), 4.85-4.82 (m, 0,5H), 3.88-3.75 (m, 1H), 3.51-3.42 (m, 1H), 2.93-2.81 (m, 1H), 1.75-1.64 (m, 1H), 1.62-1.54 (m, 1H). LC-MS: RT = 0,852 мин, m/z = 308,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,852 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 308,0.
(1S,2R)-Изомер не выделяли.
Условия SFC: колонка: Chiralcel OD-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: СО2, В: этанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% B в течение 2,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 35°С.
Более крупную партию транс-смеси (215 мг; 0,70 ммоль) разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено, [(1S,2R)-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5H-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 2,445 мин) (19,5 мг; 9%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.40-7.38 (m, 1H), 7.18-7.15 (m, 2H), 6.98-6.97 (m, 1H), 6.13-6.11 (m, 0,5H), 5.99-5.98 (m, 0,5H), 5.87-5.85 (m, 1H), 5.05-5.04 (m, 0,5H), 4.89-4.88 (m, 0,5H), 3.73-3.67 (m, 1H), 3.58-3.54 (m, 1H), 3.01-2.95 (m, 1 Н), 1.72-1.65 (m, 2H). LC-MS: RT = 1,763 мин, m/z = 308,1 (М+Н)+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,1% водного аммиака в течение 3 мин): время удерживания 1,763 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 308,1. Примечание: (1R,2S)-изомеру соответствовал пик 2 (время удерживания = 2,728 мин) в условиях SFC на AD-колонке.
Условия SFC: колонка: Daicel Chiralpak AD-H, 250 мм × 30 мм, 5 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: этанол (0,1% NH3H2O в метаноле). Градиент: от 15% до 15% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% B в течение 2,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 35°С.
Способ 84
рац-(1R,2R)-2-[(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил]циклопропанкарбонитрил
Стадия 1: транс-2-(этоксикарбонил)циклопропанкарбоновая кислота
К раствору диэтил-транс-циклопропан-1,2-дикарбоксилата (2000 мг; 10,74 ммоль) в этаноле (26 мл) добавляли раствор гидроксида натрия (429 мг; 10,74 ммоль) в воде (3 мл). Смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и концентрировали при пониженном давлении. Значение рН водного остатка подводили до 3, добавляя водную соляную кислоту (4 М раствор) при 0°С. Смесь экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (10 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая транс-2-этоксикарбонилциклопропанкарбоновую кислоту (820 мг; 48%) в виде белого твердого вещества. LCMS: RT = 0,430 мин, m/z = 159,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,430 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 159,1.
Стадия 2: этил-транс-2-(метокси(метил)карбамоил)-циклопропанкарбоксилат
Смесь 1-гидроксибензотриазола (684 мг; 5,06 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (1164 мг; 6,07 ммоль), транс-2-этоксикарбонилциклопропанкарбоновой кислоты (800 мг; 5,06 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (740 мг; 7,59 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (1634 мг; 12,65 ммоль) в дихлорметане (20 мл) перемешивали при 25°С в течение 16 ч и разбавляли водой (20 мл). Реакционную смесь экстрагировали дихлорметаном (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-транс-2-[метокси(метил)карбамоил]циклопропанкарбоксилат (600 мг; 59%) в виде светло-желтого масла. LCMS: RT = 0,525 мин, m/z = 202,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,525 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 202,2.
Стадия 3: этил-транс-2-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил)циклопропанкарбоксилат
К раствору этил-транс-2-[метокси(метил)карбамоил]циклопропан-карбоксилата (571 мг; 2,84 ммоль) и (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (400 мг; 1,42 ммоль) в тетрагидрофуране (13 мл) по каплям добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 2,84 мл; 5,67 ммоль) при 0°С в атмосфере азота. По окончании добавления смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×25 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 40% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-транс-2-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил]-циклопропанкарбоксилат (350 мг; 72%) в виде светло-желтого масла. LCMS: RT = 0,693 мин, m/z = 344,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,693 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 344,1.
Стадия 4: транс-2-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил)циклопропанкарбоновая кислота
К раствору этил-транс-2-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил]циклопропанкарбоксилата (100 мг; 0,29 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли раствор гидроксида лития (42 мг; 1,75 ммоль) в воде (2 мл). Смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и концентрировали при пониженном давлении. Значение рН водного остатка подводили до 3, добавляя водную соляную кислоту (4 М раствор) при 0°С. Затем смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (10 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенную транс-2-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил]циклопропанкарбоновую кислоту (90 мг; 98%) в виде белого твердого вещества. LCMS: RT = 0,590 мин, m/z = 316,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,590 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 316,2.
Стадия 5: транс-2-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил)циклопропанкарбоксамид
Смесь 1-гидроксибензотриазола (34 мг; 0,25 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (49 мг; 0,25 ммоль), хлорида аммония (27 мг; 0,51 ммоль), N,N-диизопропилэтиламина (98 мг; 0,76 ммоль) и транс-2-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил]циклопропанкарбоновой кислоты (80 мг; 0,25 ммоль) в N,N-диметилформамиде (3 мл) перемешивали при 25°С в течение 18 ч и разбавляли водой (10 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в метаноле), получая транс-2-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил]циклопропанкарбоксамид (75 мг; 94%) в виде белого твердого вещества. LCMS: RT = 0,555 мин, m/z = 315,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,555 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 315,1.
Стадия 6: рац-(1R,2R)-2-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил]циклопропанкарбонитрил
К раствору транс-2-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил]циклопропанкарбоксамида (65 мг; 0,21 ммоль) в 1,4-диоксане (3 мл) добавляли триэтиламин (62 мг; 0,62 ммоль) и трифторуксусный ангидрид (87 мг; 0,41 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 2 ч и разбавляли водой (15 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 15-45%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая, как условно обозначено, рац-(1R,2R)-2-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил]циклопропанкарбонитрил (24,0 мг; 38%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.45-7.39 (m, 3H), 7.32-7.30 (m, 2H), 6.22-6.20 (m, 0,5H), 6.08-6.06 (m, 0,5H), 5.70-5.67 (m, 1H), 3.81-3.75 (m, 1H), 3.62-3.31 (m, 1H), 2.90-2.75 (m, 1H), 2.28-2.24 (m, 1H), 1.68-1.63 (m, 2H). LCMS: RT = 0,957 мин, m/z = 297,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% бикарбонат аммония в течение 2 мин): время удерживания 0,957 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 297,2.
Способ 85
Циклопропил-[(5S,7S)-5-(2,3-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: 1-(2,3-дифторфенил)бут-3-ен-1-ол
К охлажденному (0°С) раствору 2,3-дифторбензальдегида (10,0 г; 70,4 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл) добавляли хлорид аллилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 46,0 мл; 92,0 ммоль) в течение 30 мин. По окончании добавления реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (100 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 1-(2,3-дифторфенил)бут-3-ен-1-ол (12,9 г; 99%) в виде светло-желтого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.27-7.24 (m, 1H), 7.11-7.06 (m, 2H), 5.87-5.77 (m, 1H), 5.20-5.08 (m, 3H), 2.62-2.47 (m, 2H).
Стадия 2: трет-бутил((1-(3,4-дифторфенил)бут-3-ен-1-ил)окси)диметилсилан
К перемешиваемому раствору 1-(2,3-дифторфенил)бут-3-ен-1-ола (12,9 г; 70,6 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли имидазол (9,6 г; 141,2 ммоль) и трет-бутилдиметилхлорсилан (12,8 г; 84,7 ммоль). По окончании добавления реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и гасили, добавляя воду (100 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (2×200 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный трет-бутил-[1-(2,3-дифторфенил)бут-3-енокси]-диметилсилан (21,0 г; 99%) в виде бесцветного масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.25-7.22 (m, 1H), 7.08-7.03 (m, 2H), 5.82-5.75 (m, 1H), 5.10-4.99 (m, 3Н), 2.49-2.42 (m, 2H), 0.89 (s, 9H), 0.67 (s, 3H), -0.08 (s, 3H).
Стадия 3: 3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(3,4-дифторфенил)пропаналь
К раствору трет-бутил-[1-(2,3-дифторфенил)бут-3-енокси]-диметилсилана (21,0 г; 70,4 ммоль) в смеси тетрагидрофуран/вода (200 мл; 1:1) добавляли тетраоксид осмия (0,1 г; 0,39 ммоль). По окончании перемешивания в течение 30 мин при 15°С к смеси малыми порциями добавляли периодат натрия (60,2 г; 281,5 ммоль) в течение 2 ч. Полученную смесь перемешивали в течение еще 2 ч при 30°С и затем гасили путем добавления холодного насыщенного водного раствора тиосульфата натрия (300 мл). Смесь перемешивали в течение 30 мин и затем экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенные органические слои промывали водой (200 мл), рассолом (200 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, от 0 до 3% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,3-дифторфенил)пропаналь (15,0 г; 71%) в виде желтого масла.
Стадия 4: 1-(3-бром-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1H-1,2,4-триазол-5-ил)-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(3,4-дифторфенил)пропан-1-ол
К охлажденному (-78°С) раствору 3,5-дибром-1-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазола (15,7 г; 50,4 ммоль) в тетрагидрофуране (150 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексанах; 22,0 мл; 54,9 ммоль). Смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин, затем по каплям добавляли раствор 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,3-дифторфенил)пропаналя (15,0 г; 49,9 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл). По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 1,5 ч и затем гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (100 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 12% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,3-дифторфенил)пропан-1-ол (12,0 г; 45%) в виде желтого масла.
Стадия 5: 2-бром-5-(2,3-дифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол
Раствор 1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(3,4-дифторфенил)пропан-1-ола (56,0 г; 105,2 ммоль) в трифторуксусной кислоте (150 мл) нагревали при 55°С в течение 16 ч и концентрировали при пониженном давлении. Значение рН остатка подводили до 9, добавляя насыщенный водный раствор бикарбоната натрия, и экстрагировали дихлорметаном (3×200 мл). Объединенные органические слои промывали водой (100 мл), рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 2-бром-5-(2,3-дифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол (22,0 г; 66%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 6: (5S,7S)-2-бром-5-(2,3-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол и (5R,7R)-2-бром-5-(2,3-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
К перемешиваемому раствору 2-бром-5-(2,3-дифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (30,0 г; 94,9 ммоль) в толуоле (200 мл) медленно добавляли трифторид диэтиламиносеры (45,9 г; 284,7 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 16 ч и затем медленно добавляли в перемешиваемый насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (200 мл) при 0°С. Смесь экстрагировали дихлорметаном (3×150 мл). Объединенные органические слои промывали водой (100 мл), рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 15% этилацетата в петролейном эфире), получая цис-2-бром-5-(2,3-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол. Этот цис-продукт далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
(5S,7S)-2-бром-5-(2,3-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (пик 1, время удерживания = 2,828 мин) (1,1 г; 3,7%) в виде белого твердого вещества и (5R,7R)-2-бром-5-(2,3-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (пик 2, время удерживания = 2,935 мин) (1,1 г; 3,7%) в виде белого твердого вещества.
Условия SFC: колонка: Chiral Cel OJ-H, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 5 мкм. Подвижная фаза: А: CO2, В: этанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5,5 мин и выдерживание при 40% в течение 3 мин, затем при 5% B в течение 1,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 40°С.
Стадия 7: циклопропил-[(5S,7S)-5-(2,3-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору (5S,7S)-2-бром-5-(2,3-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (150 мг; 0,47 ммоль), N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (122 мг; 0,94 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл) по каплям добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 0,47 мл; 0,94 ммоль) при 0°С. По окончании добавления смесь перемешивали при 0°С в течение 0,5 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл), рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-НPLC (ацетонитрила 40-70%/0,225% муравьиной кислоты в воде), получая, как условно обозначено, циклопропил-[(5S,7S)-5-(2,3-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (49,1 мг; 34%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.22-7.16 (m, 1Н), 7.14-7.08 (m, 1Н), 6.75-6.72 (m, 1Н), 6.13-6.10 (m, 0,5Н), 5.99-5.96 (m, 0,5Н), 5.88-5.84 (m, 1Н), 3.74-3.67 (m, 1Н), 3.09-3.04 (m, 1Н), 2.99-2.92 (m, 1Н), 1.36-1.31 (m, 2Н), 1.14-1.09 (m, 2Н). LC-MS: RT = 0,666 мин, m/z = 308,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,666 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 308,1.
Способ 86
Циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2,3,5-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: 1-(2,3,5-трифторфенил)бут-3-ен-1-ол
К раствору 2,3,5-трифторбензальдегида (20,0 г; 124,93 ммоль) в дихлорметане (120 мл) и воде (120 мл) добавляли иодид тетрабутиламмония (4,6 г; 12,49 ммоль) и аллилтрифторборат калия (40,7 г; 137,42 ммоль) при 25°С. Смесь перемешивали в течение 2 ч при 25°С и экстрагировали дихлорметаном (2×100 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (50 мл) и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 1-(2,3,5-трифторфенил)бут-3-ен-1-ол (29,0 г; 100%) в виде желтого масла.
Стадия 2: трет-бутилдиметил((1-(2,3,5-трифторфенил)бут-3-ен-1-ил)окси)силан
К смеси 1-(2,3,5-трифторфенил)бут-3-ен-1-ола (20,5 г; 101,4 ммоль) и имидазола (13,8 г; 202,7 ммоль) в дихлорметане (120 мл) добавляли трет-бутилдиметилхлорсилан (19,9 г; 131,9 ммоль). Смесь перемешивали при 35°С в течение 16 ч и разбавляли дихлорметаном (50 мл). Смесь промывали водой (2×50 мл), рассолом (50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая трет-бутилдиметил((1-(2,3,5-трифторфенил)бут-3-ен-1-ил)окси)силан (28,0 г; 87%) в виде бесцветного масла.
Стадия 3: 3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(2,3,5-трифторфенил)пропаналь
Смесь трет-бутил-диметил-[1-(2,3,5-трифторфенил)бут-3-енокси]силана (5,0 г; 15,8 ммоль) и тетраоксида осмия (5,0 г; 19,7 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) и воде (20 мл) перемешивали при 20°С в течение 0,5 ч и затем добавляли периодат натрия (13,5 г; 63,2 ммоль) в виде 3 порций в течение 0,5 ч. По окончании добавления реакционную смесь перемешивали при 20°С в течение 3 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор тиосульфата натрия (30 мл). Твердое вещество удаляли фильтрованием. Фильтрат экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 5% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,3,5-трифторфенил)пропаналь (1,6 г; 32%) в виде коричневого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9.78 (t, J=2,2 Гц, 1Н), 7.04-7.01 (m, 1Н), 6.87-6.83 (m, 1Н), 5.56-5.53 (m, 1Н), 2.85-2.79 (m, 1Н), 2.71-2.66 (m, 1Н), 0.89 (s, 1Н), 0.11 (s, 1Н), -0.05 (s, 1Н).
Стадия 4: 1-(3-бром-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(2,3,5-трифторфенил)пропан-1-ол
К смеси 3,5-дибром-1-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазола (1,6 г; 5,2 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) по каплям добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в гексане; 2,1 мл; 5,2 ммоль) в атмосфере азота при -78°С. По окончании добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 0,5 ч и по каплям добавляли раствор 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,3,5-трифторфенил)пропаналя (1,5 г; 4,71 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл). Полученную смесь перемешивали при -78°С в течение 4 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (2×20 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 15% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,3,5-трифторфенил)пропан-1-ол (1,78 г; 69%) в виде желтого смолообразного вещества. LCMS: RT = 1,056 мин, m/z = 466,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 1,056 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 466,0.
Стадия 5: 2-бром-5-(2,3,5-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол
Раствор 1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(2,3,5-трифторфенил)пропан-1-ола (1,8 г; 3,2 ммоль) в трифторуксусной кислоте (250 мл; 32,3 ммоль) перемешивали при 50°С в течение 1 ч и затем добавляли трифторметансульфоновую кислоту (1 мл; 3,2 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 50°С в течение 3 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли этилацетатом (50 мл) и значение рН подводили до 8, добавляя водный раствор гидроксида натрия (20%-ный). Отделенный органический слой промывали водой (2×50 мл), рассолом, сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 40 до 60% этилацетата в петролейном эфире), получая неочищенный продукт. Этот неочищенный продукт промывали метил-трет-бутиловым эфиром (20 мл), получая 2-бром-5-(2,3,5-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол (0,55 г; 51%) в виде коричневого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.01-6.94 (m, 1Н), 6.980-6.56 (m, 1Н), 5.88-5.60 (m, 2Н), 5.47-5.40 (m, 1Н), 3.66-3.22 (m, 1Н), 3.01-3.64 (m, 1Н).
Стадия 6: (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-(2,3,5-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
К смеси 2-бром-5-(2,3,5-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (550 мг; 1,65 ммоль) в толуоле (10 мл) по каплям добавляли трифторид диэтиламиносеры (1,06 г; 6,6 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 16 ч и затем гасили путем добавления насыщенного водного раствора бикарбоната натрия (50 мл). Полученную смесь экстрагировали дихлорметаном (3×30 мл). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл), рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 15 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая рац-(5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-(2,3,5-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (197 мг; 36%) в виде коричневого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.00-6.95 (m, 1Н), 6.52-6.48 (m, 1Н), 6.08-5.92 (m, 1Н), 5.81-5.77 (m, 1Н), 3.71-3.57 (m, 1Н), 2.90-2.80 (m, 1Н).
Этот рацемат далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено, (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-(2,3,5-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (пик 2, время удерживания = 2,866 мин) (80 мг; 41%) в виде коричневого твердого вещества (вместе с (5R,7R)-изомер (пик 1, время удерживания = 2,345 мин) (80 мг; 41%)).
Условия SFC: колонка: Chiralpak IC-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм. Подвижная фаза: А: CO2 В: изопропанол (с 0,05% DEA). Градиент: от 5% до 40% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% B в течение 2,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 35°С.
Стадия 7: циклопропил-((5S,7S)-7-фтор-5-(2,3,5-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
К смеси (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-(2,3,5-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (80 мг; 0,24 ммоль), N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (62 мг; 0,48 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл) по каплям добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 0,24 мл; 0,48 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (2×20 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (15 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 40-70%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая, как условно обозначено, циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2,3,5-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (11 мг; 14%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.29-7.26 (m, 1Н), 6.78-6.75 (m, 1Н), 6.23-6.06 (m, 1Н), 5.96-5.93 (m, 1Н), 3.88-3.80 (m, 1Н), 3.07-3.04 (m, 1Н), 2.96-2.89 (m, 1Н), 1.22-1.11 (m, 4Н). LCMS: RT = 1,029 мин, m/z = 326,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 1,029 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 326,2.
Способ 87
Циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: (1Е)-2-метилпропаналя оксим
К раствору изобутиральдегида (200,0 г; 2773,5 ммоль) в воде (2,0 л) добавляли гидроксиламина гидрохлорид (231,3 г; 3328,3 ммоль) и карбонат натрия (587,9 г; 5547,1 ммоль). По окончании добавления реакционную смесь перемешивали при 20°С в течение 4 ч и фильтровали. Фильтрат экстрагировали этилацетатом (3×1 л). Объединенные органические слои промывали рассолом (2×1 л), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный (1Е)-2-метилпропаналя оксим (220 г; 91%) в виде бесцветного масла.
Стадия 2: метил-3-изопропил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат
К раствору н-хлорсукцинимида (268,2 г; 2008,7 ммоль) в хлороформе (1500 мл) добавляли пиридин (9,73 мл; 120,5 ммоль) и (1Е)-2-метилпропаналя оксим (175,0 г; 2008,7 ммоль) при 25°С. По окончании перемешивания в течение 0,5 ч при 25°С добавляли по каплям раствор метилакрилата (227,2 мл; 2506,9 ммоль) и триэтиламина (292,4 мл; 2109,2 ммоль) в хлороформе (100 мл) в течение 30 мин при 25°С. Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и разбавляли дихлорметаном (1000 мл). Отделенный органический слой промывали водой (3×500 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая метил-3-изопропил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат (240 г; 70%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4.98-4.93 (m, 1Н), 3.76 (s, 3Н), 3.21-3.19 (m, 2Н), 2.75-2.66 (m, 1Н), 1.16 (d, J=6,8 Гц, 6Н).
Стадия 3: 3-гидрокси-5-изопропил-пирролидин-2-он
Смесь метил-3-изопропил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилата (240,0 г; 1402 ммоль) и палладия (10%-ного на угле; 14,9 г) в этаноле (2 л) гидрировали (50 ф/кв. дюйм (344,7 кПа)) при 45°С в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 3-гидрокси-5-изопропил-пирролидин-2-он (70 г; 35%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 4: 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-изопропил-пирролидин-2-он
К охлажденной (0°С) смеси 3-гидрокси-5-изопропил-пирролидин-2-она (49,0 г; 342,2 ммоль) и имидазола (69,9 г; 1026,7 ммоль) в дихлорметане (1120 мл) добавляли трет-бутилдиметилхлорсилан (77,4 г; 513,3 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и выливали в воду (1000 мл). Отделенный органический слой промывали рассолом (500 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-изопропил-пирролидин-2-он (35,0 г; 40%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 6.63 (s, 1Н), 4.32-4.28 (m, 1Н), 3.17-3.11 (m, 1Н), 2.46-2.40 (m, 1Н), 1.66-1.60 (m, 2Н), 0.92-0.89 (m, 14Н), 0.15 (d, J=10,4 Гц, 6Н).
Стадия 5: 1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-изопропил-пирролидин-2-он
К охлажденному (0°С) раствору 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-изопропил-пирролидин-2-она (5,0 г; 19,42 ммоль) в N,N-диметилформамиде (200 мл) добавляли гидрид натрия (60%-ный; 1,2 г; 29,13 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, затем добавляли о-(дифенилфосфорил)гидроксиламин (6,8 г; 29,13 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 20°С в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный (1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-изопропил-пирролидин-2-он (5,3 г; 100%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 1,178 мин, m/z = 273,3 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,178 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 273,3.
Стадия 6: этил-2-[[3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-изопропил-2-оксо-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетат
К раствору 1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-изопропил-пирролидин-2-она (5,28 г; 19,38 ммоль) в этаноле (250 мл) добавляли этил-2-этокси-2-имино-ацетат (8,44 г; 58,14 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 90°С в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая этил-2-[[3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-изопропил-2-оксо-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетат (7,10 г; 98%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 0,948 мин, m/z = 372,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,948 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 372,2.
Стадия 7: этил-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору этил-2-[[3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-изопропил-2-оксо-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетата (7,1 г; 19,11 ммоль) в толуоле (140 мл) добавляли п-толуолсульфоновой кислоты моногидрат (4,4 г; 22,93 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 120°С в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая этил-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (6,6 г; 98%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 0,952 мин, m/z = 354,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,952 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 354,2.
Стадия 7: этил-цис-7-гидрокси-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору этил-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (6,6 г; 18,67 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл) добавляли фторид тетрабутиламмония (1,0 М раствор в тетрагидрофуране; 18,67 мл; 18,67 ммоль) при 25°С. Реакционную смесь перемешивали при 40°С в течение 16 ч и концентрировали. Остаток разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 70% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-цис-7-гидрокси-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (2,8 г; 62,7%) в виде желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 5.34-5.31 (m, 1Н), 4.47-4.43 (m, 2Н), 4.26-4.24 (m, 1Н), 3.14-3.09 (m, 1Н), 2.48-2.42 (m, 2Н), 1.43-1.39 (m, 3Н), 1.07 (d, J=7,2 Гц, 3Н), 0.92 (d, J=7,2 Гц, 3Н).
Стадия 8: этил-транс-5-изопропил-7-(4-нитробензоил)окси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К смеси этил-цис-7-гидрокси-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (2,0 г; 8,36 ммоль), 4-нитробензойной кислоты (2,1 г; 12,54 ммоль) и трифенилфосфина (6,6 г; 25,08 ммоль) в тетрагидрофуране (40 мл) добавляли диизопропилазодикарбоксилат (5,0 мл; 25,08 ммоль) при 0°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 17% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-транс-5-изопропил-7-(4-нитробензоил)окси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (2,5 г; 77%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 9: этил-транс-7-гидрокси-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
Смесь карбоната калия (1,23 г; 8,88 ммоль) и этил-транс-5-изопропил-7-(4-нитробензоил)окси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (2,3 г; 5,92 ммоль) в смеси этанол (10 мл)/тетрагидрофуран (5 мл)/вода (5 мл) перемешивали при 25°С в течение 1 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (2×30 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-транс-7-гидрокси-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (1,10 г; 78%) в виде бесцветного масла.
Стадия 10: этил-цис-7-фтор-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К смеси этил-транс-7-гидрокси-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (1,0 г; 4,18 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (2,23 мл; 16,72 ммоль) при 0°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили путем добавления насыщенного водного раствора бикарбоната натрия (200 мл). Раствор экстрагировали дихлорметаном (3×100 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (2×100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 7% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-цис-7-фтор-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (550 мг; 55%) в виде бесцветного масла.
Стадия 11: цис-7-фтор-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновая кислота
Смесь этил-цис-фтор-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (550 мг; 2,28 ммоль) и гидроксида лития гидрата (191 мг; 4,56 ммоль) в смеси метанол (10 мл)/тетрагидрофуран (5 мл)/вода (5 мл) перемешивали при 20°С в течение 1 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (20 мл) и промывали этилацетатом (20 мл). Значение рН водной фазы подводили до 6 путем добавления раствора соляной кислоты (1 М) и затем экстрагировали этилацетатом (2×20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенную цис-7-фтор-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновую кислоту (420 мг; 86%) в виде бесцветного масла.
Стадия 12: цис-7-фтор-5-изопропил-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид
Смесь цис-7-фтор-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновой кислоты (420 мг; 1,97 ммоль), N,N-диизопропилэтиламина (1,05 мл; 5,91 ммоль), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (453 мг; 2,36 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (160 мг; 1,18 ммоль) и N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (384 мг; 3,94 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивали при 25°С в течение 16 ч и гасили, добавляя воду (20 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (2×50 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (2×50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 50 до 60%), получая цис-7-фтор-5-изопропил-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид (200 мг; 40%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 0,692 мин, m/z = 257,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,692 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 257,1.
Стадия 13: циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К охлажденному (0°С) раствору цис-7-фтор-5-изопропил-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамида (200 мг; 0,78 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) добавляли бромид циклопропилмагния (0,5 М раствор в тетрагидрофуране; 1,0 мл; 0,50 ммоль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 25°С в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (2×10 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 40% этилацетата в петролейном эфире), получая циклопропил-[цис-7-фтор-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (100 мг; 52%) в виде белого твердого вещества. Эту цис-смесь далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено, циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-изопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 2, время удерживания = 5,136 мин) (24 мг; 23%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 5.99-5.83 (m, 1Н), 4.39-4.34 (m, 1Н), 3.22-3.18 (m, 1Н), 3.12-3.08 (m, 1Н), 2.72-2.62 (m, 1Н), 2.42-2.38 (m, 1Н), 1.34-1.33 (m, 2Н), 1.13-1.10 (m, 2Н), 1.08 (d, J=6,8 Гц, 3Н), 0.94 (d, J=6,8 Гц, 3Н). LCMS: RT = 0,822 мин, m/z = 238,0 [M+H]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,822 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 238,0.
Условия SFC: колонка: Lux 3u Cellulose-2, 150×4,6 мм; подвижная фаза: А: CO2, В: метанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% В в течение 2,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки 35°С.
Способ 88
Циклопропил-[(5S,7S)-5-циклопропил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: (Е)-циклопропанкарбальдегида оксим
К раствору циклопропанкарбоксальдегида (50,0 г; 713,37 ммоль) в этаноле (500 мл) добавляли карбонат натрия (166,3 г; 1569,4 ммоль) и гидроксиламина гидрохлорид (59,5 г; 856,04 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 3 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (1000 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×600 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (1000 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный (Е)-циклопропанкарбальдегида оксим (40 г; 66%) в виде бесцветного масла.
Стадия 2: метил-3-циклопропил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат
Смесь пиридина (2,85 мл; 35,25 ммоль), N-хлорсукцинимида (78,5 г; 587,54 ммоль) и (Е)-циклопропанкарбальдегида оксима (50 г; 587,54 ммоль) в хлороформе (500 мл) перемешивали при 25°С в течение 2 ч, затем добавляли раствор метилакрилата (66,45 мл; 733,25 ммоль) и триэтиламина (85,35 мл; 615,75 ммоль) в хлороформе (100 мл). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 12 ч и гасили, добавляя воду (200 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×200 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая метил-3-циклопропил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат (75,0 г; 76%) в виде бесцветного масла.
Стадия 3: 5-циклопропил-3-гидрокси-пирролидин-2-он
Смесь метил-3-циклопропил-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилата (35,0 г; 206,88 ммоль) и оксида платины (6,1 г; 26,89 ммоль) в этиленгликоле (300 мл) перемешивали при 25°С в атмосфере водорода (30 ф/кв. дюйм (206,8 кПа)) в течение 48 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 100% этилацетата в петролейном эфире), получая 5-циклопропил-3-гидрокси-пирролидин-2-он (15,5 г; 53%) в виде бесцветного масла. LCMS: RT = 0,297 мин, m/z = 142,1 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,1% водного аммиака в течение 3 мин): время удерживания 0,297 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 142,1.
Стадия 4: 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-циклопропил-пирролидин-2-он
К охлажденной (0°С) смеси 5-циклопропил-3-гидрокси-пирролидин-2-она (13,0 г; 92,09 ммоль) и имидазола (18,8 г; 276,26 ммоль) в дихлорметане (150 мл) добавляли трет-бутилдиметилхлорсилан (20,8 г; 138,13 ммоль). Смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и затем промывали водой (2×50 мл), рассолом (50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-циклопропил-пирролидин-2-он (10,2 г; 43%) в виде бесцветного масла.
Стадия 5: 1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-циклопропил-пирролидин-2-он
К охлажденному (0°С) раствору 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-циклопропил-пирролидин-2-она (10,2 г; 39,93 ммоль) в N,N-диметилформамиде (150 мл) добавляли гидрид натрия (60%-ный в минеральном масле; 2,4 г; 59,9 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин и затем добавляли О-(дифенилфосфорил)гидроксиламин (14,0 г; 59,9 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 10°С в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный (1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-циклопропил-пирролидин-2-он (10,5 г; 97%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 0,810 мин, m/z = 271,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,810 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 271,2.
Стадия 6: этил-2-[[3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-циклопропил-2-оксо-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетат
Смесь 1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-циклопропил-пирролидин-2-она (10,5 г; 38,83 ммоль) и этил-2-этокси-2-имино-ацетата (14,1 г; 97,06 ммоль) в этаноле (150 мл) перемешивали при 90°С в течение 12 ч и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-2-[[3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-циклопропил-2-оксо-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетат (10,0 г; 70%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 0,804 мин, m/z = 370,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,804 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 370,2.
Стадия 7: этил-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-циклопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору этил-(2Z)-2-амино-2-[3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-циклопропил-2-оксо-пирролидин-1-ил]имино-ацетата (10,0 г; 27,06 ммоль) в толуоле (120 мл) добавляли п-толуолсульфоновую кислоту (5,6 г; 32,47 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 120°С в течение 16 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-циклопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (9,5 г; 99%) в виде красного масла. LCMS: RT = 0,928 мин, m/z = 352,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,928 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 352,2.
Стадия 8: этил-5-циклопропил-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору этил-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-циклопропил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (9,5 г; 27,03 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл) добавляли фторид тетрабутиламмония (1,0 М раствор в тетрагидрофуране; 27,0 мл; 27,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 40°С в течение 12 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 100% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-5-циклопропил-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (2,2 г; 34%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 0,521 мин, m/z = 238,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,521 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 238,1.
Стадия 9: этил-цис-5-циклопропил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К охлажденному (0°С) раствору этил-5-циклопропил-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (2,0 г; 8,43 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (3,26 мл; 25,29 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 12 ч при 0°С и гасили, добавляя воду (5,0 мл). Полученную смесь экстрагировали дихлорметаном (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-цис-5-циклопропил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (220 мг; 11%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 0,701 мин, m/z = 240,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,701 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 240,1.
Стадия 10: цис-5-циклопропил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновая кислота
Смесь гидроксида лития моногидрата (105 мг; 2,51 ммоль) и этил-цис-5-циклопропил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (200 мг; 0,84 ммоль) в смеси этанол (0,50 мл)/вода (0,50 мл)/тетрагидрофуран (0,50 мл) перемешивали при 25°С в течение 2 ч и концентрировали при пониженном давлении. Значение рН водного остатка подводили до 7, добавляя водную соляную кислоту (1 М раствор), и остаток концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенную цис-5-циклопропил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновую кислоту (175 мг; 99%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 0,452 мин, m/z = 212,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,452 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 212,1.
Стадия 11: цис-5-циклопропил-7-фтор-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид
Смесь цис-5-циклопропил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновой кислоты (175 мг; 0,83 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (56 мг; 0,41 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (121 мг; 1,24 ммоль), N,N-диизопропилэтиламина (0,34 мл; 2,07 ммоль) и 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (190,6 мг; 0,99 ммоль) в дихлорметане (5 мл) перемешивали при 25°С в течение 16 ч и гасили, добавляя воду (10 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (10 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 60% этилацетата в петролейном эфире), получая цис-5-циклопропил-7-фтор-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид (75 мг; 36%) в виде бесцветного масла. LCMS: RT = 0,604 мин, m/z = 255,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,604 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 255,1.
Стадия 12: циклопропил-[(5S,7S)-5-циклопропил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К охлажденному (0°С) раствору цис-5-циклопропил-7-фтор-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамида (65 мг; 0,26 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) добавляли бромид циклопропилмагния (0,5 М раствор в тетрагидрофуране; 1,24 мл; 0,62 ммоль) в атмосфере азота. По окончании добавления смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (3 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×5 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (5 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (50%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,4), получая циклопропил-[цис-5-циклопропил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (50 мг; 83%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 0,676 мин, m/z = 236,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,676 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 236,1.
Эту цис-смесь далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено, циклопропил-[(5S,7S)-5-циклопропил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 2,841 мин) (3,1 мг; 6%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 6.05-5.89 (m, 1Н), 4.02-3.95 (m, 1Н), 3.51-3.35 (m, 1Н), 3.14-3.10 (m, 1Н), 2.78-2.70 (m, 1Н), 1.26-1.12 (m, 5H), 0.79-0.67 (m, 3Н), 0.58-0.52 (m, 1H). LCMS: RT = 0,677 мин, m/z = 236,1 [M+H]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,677 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 236,1.
Условия SFC: колонка: DAICEL CHIRALPAK IC (250 мм × 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: А: CO2, В: 0,1% NH3H2O в IPA; сначала В 40%, в конце В 40%; режим градиентного элюирования: градиент: от 40% до 40% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин; скорость потока: 60 мл/мин; температура колонки: 35°С.
Способ 89
Циклопропил-[(5S,7S)-7-дейтеро-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору циклопропил-[(5S,7S)-7-хлор-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона (50 мг; 0,17 ммоль) в метаноле (2,0 мл) добавляли никель (10 мг; 0,17 ммоль). Смесь перемешивали при 20°С в атмосфере водорода (15 ф/кв. дюйм (103,4 кПа)) в течение 2 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (вода (с 0,05% гидроксида аммония, об./об.)/ацетонитрил: 33-63%), получая, как условно обозначено, циклопропил-[(5S,7S)-7-дейтеро-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (14,8 мг; 33%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.41-7.36 (m, 3Н), 7.14-7.11 (m, 2Н), 5.52-5.48 (m, 1Н), 3.28-3.21 (m, 1Н), 3.06-3.00 (m, 2Н), 2.70-2.65 (m, 1Н), 1.30-1.27 (m, 2Н), 1.06-1.03 (m, 2Н). LCMS: RT = 1,551 мин, m/z = 255,1 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,1% водного аммиака в течение 3 мин): время удерживания 1,551 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 255,1.
Способ 90
Циклопропил-[рац-(5S,7S)-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон, циклопропил-[(5S,7S)-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и циклопропил-[(5R,7R)-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: 1-нитробутан-2-ол
К смеси нитрометана (52,6 г; 860,9 ммоль), гексадецилтриметилхлорида аммония (27,6 г; 86,1 ммоль), гидроксида натрия (34,4 г; 860,9 ммоль) в воде (2,5 л) добавляли пропиональдегид (50,0 г; 860,9 ммоль) при 25°С. Смесь перемешивали при 25°С в течение 4 ч, затем добавляли хлорид натрия (700 г) и экстрагировали этилацетатом (2×300 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 1-нитробутан-2-ол (80,0 г; 78%) в виде светло-коричневого масла. Неочищенное масло использовали на следующей стадии непосредственно без дополнительной очистки.
Стадия 2: трет-бутилдиметил((1-нитробутан-2-ил)окси)силан
К перемешиваемому раствору 1-нитробутан-2-ола (40,0 г; 335,8 ммоль) и имидазола (48,0 г; 705,2 ммоль) в N,N-диметилформамиде (300 мл) добавляли трет-бутилдиметилхлорсилан (53,2 г; 352,6 ммоль) в атмосфере азота при 25°С. По окончании добавления реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 15 ч. Затем смесь разбавляли водой (400 мл) и экстрагировали этилацетатом (2×200 мл). Объединенные органические слои промывали водой (200 мл), рассолом (200 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая трет-бутил-диметил-[1-(нитрометил)пропокси]силан (28,0 г; 36%) в виде светло-коричневого масла.
Стадия 3: метил-3-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)пропил)-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат
К смеси метилакрилата (54,4 мл; 599,9 ммоль), ди-трет-бутилдикарбоната (39,3 г; 179,9 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (1,5 г; 12,0 ммоль) в ацетонитриле (500 мл) добавляли раствор трет-бутил-диметил-[1-(нитрометил)пропокси]силана (28,0 г; 119,9 ммоль) в ацетонитриле (10 мл). Смесь перемешивали при 25°С в течение 5 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая метил-3-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксипропил]-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат (17,0 г; 47%) в виде коричневого масла.
Стадия 4: 5-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)пропил)-3-гидроксипирролидин-2-он
Смесь этил-3-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксипропил]-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилата (17,0 г; 53,89 ммоль) и палладия (10%-ного на угле; 3,0 г) в этаноле (500 мл) перемешивали при 40°С в атмосфере водорода (50 ф/кв. дюйм (344,7 кПа)) в течение 48 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксипропил]-3-гидрокси-пирролидин-2-он (12,0 г; 82%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 5: 3-(бензилокси)-5-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)пропил)пирролидин-2-он
К раствору 5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксипропил]-3-гидрокси-пирролидин-2-она (8,8 г; 32,2 ммоль) в дихлорметане (440 мл) добавляли бромид тетрабутиламмония (519 мг; 1,6 ммоль), водный раствор гидроксида натрия (30%-ный, 60 мл) и бензилбромид (8,3 г; 48,3 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при 40°С в течение 18 ч. Затем смесь выливали в воду (200 мл) и экстрагировали дихлорметаном (2×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 80% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-бензилокси-5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксипропил]пирролидин-2-он (6,8 г; 58%) в виде бесцветного масла.
Стадия 6: 1-амино-3-(бензилокси)-5-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)пропил)пирролидин-2-он
К раствору 3-бензилокси-5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксипропил]-пирролидин-2-она (6,80 г; 18,7 ммоль) в N,N-диметилформамиде (150 мл) добавляли гидрид натрия (60%-ный в минеральном масле; 1,12 г; 28,1 ммоль) при 0°С. По окончании перемешивания при 25°С в течение 20 мин к смеси добавляли о-(дифенилфосфорил)гидроксиламин (6,50 г; 28,1 ммоль) и перемешивали в течение еще 18 ч при 25°С. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 1-амино-3-бензилокси-5-[1-[трет-бутил (диметил)силил]оксипропил]пирролидин-2-он (7,10 г; 100%) в виде светло-желтого твердого вещества. LC-MS: RT = 0,876 мин, m/z = 379,3 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,876 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 379,3.
Стадия 7: этил-2-((3-(бензилокси)-5-(1-((трет-бутилдиметилсилил)-окси)пропил)-2-оксопирролидин-1-ил)амино)-2-иминоацетат
Смесь 1-амино-3-бензилокси-5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксипропил]-пирролидин-2-она (1,87 г; 4,94 ммоль) и этил-2-этокси-2-имино-ацетата (1,79 г; 12,35 ммоль) в этаноле (25 мл) перемешивали при 90°С в течение 33 ч и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-2-((3-(бензилокси)-5-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)пропил)-2-оксопирролидин-1-ил)амино)-2-иминоацетат (2,36 г; 99%) в виде желтого масла. Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC-MS: RT = 1,037 и 1,061 мин, m/z = 478,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 1,037 и 1,061 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 478,2.
Стадия 8: этил-7-(бензилокси)-5-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-пропил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору этил-2-[[3-бензилокси-5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]-оксипропил]-2-оксо-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетата (2,2 г; 4,61 ммоль) в толуоле (50 мл) добавляли п-толуолсульфоновую кислоту (моногидрат; 1,1 г; 5,53 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 120°С в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-7-бензилокси-5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксипропил]-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (0,9 г; 43%) в виде бесцветного масла. LC-MS: RT = 0,935 мин, m/z = 460,3 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,935 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 460,3.
Стадия 9: этил-7-(бензилокси)-5-(1-гидроксипропил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору этил-7-бензилокси-5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксипропил]-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (800 мг; 1,74 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли фторид тетрабутиламмония (1,0 М раствор в тетрагидрофуране; 5,22 мл; 5,22 ммоль). Смесь перемешивали при 25°С в течение 18 ч и разбавляли водой (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×50 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-7-бензилокси-5-(1-гидроксипропил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (70 мг; 93%) в виде коричневого масла. Это неочищенное масло использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 10: этил-7-(бензилокси)-5-пропионил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К смеси этил-7-бензилокси-5-(1-гидроксипропил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (600 мг; 1,74 ммоль) и бикарбоната натрия (584 мг; 6,95 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли периодинан Десса-Мартина (1473 мг; 3,47 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 40 мин и затем гасили путем добавления насыщенного водного раствора сульфита натрия (20 мл). Отделенный органический слой промывали рассолом (10 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (50%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,3), получая этил-7-бензилокси-5-пропаноил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (590 мг; 99%) в виде светло-коричневого масла. LC-MS: RT = 0,834 мин, m/z = 344,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,834 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 344,1.
Стадия 11: этил-7-гидрокси-5-пропионил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
Смесь этил-7-бензилокси-5-пропаноил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (450 мг; 1,31 ммоль) в 2,2,2-трифторуксусной кислоте (20 мл) нагревали при 120°С в течение 3 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток перерастворяли в дихлорметане (30 мл), промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (15 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (60%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,3), получая этил-7-гидрокси-5-пропаноил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (220 мг; 66%) в виде коричневого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 5.43-5.39 (m, 1Н), 5.25-5.21 (m, 1Н), 4.50-4.43 (m, 2Н), 3.05-3.01 (m, 2Н), 2.75-2.55 (m, 2Н), 1.44-1.40 (m, 3Н), 1.13-1.08 (m, 3Н). LC-MS: RT = 0,530 и 0,564 мин, m/z = 254,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,530 и 0,564 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 254,1.
Стадия 12: этил-цис-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
Смесь этил-7-гидрокси-5-пропаноил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (220 мг; 0,87 ммоль) и трифторида диэтиламиносеры (140 мг; 0,87 ммоль) перемешивали при 10°С в течение 2 ч и затем гасили путем добавления насыщенного водного раствора бикарбоната натрия (15 мл). Полученную смесь экстрагировали дихлорметаном (2×10 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (50%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,4 для цис-изомера и Rf = 0,6 для транс-изомера), получая этил-транс-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (60 мг; 25%) и этил-цис-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (60 мг; 25%), оба в виде коричневого масла.
Стадия 13: цис-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновая кислота
К раствору этил-цис-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (55 мг; 0,20 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл), этаноле (2 мл) и воде (0,5 мл) добавляли гидроксида лития моногидрат (83 мг; 1,98 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 2 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли ледяной водой (20 мл) и значение рН подводили до 3, добавляя водную соляную кислоту (4 М раствор). Смесь экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенную цис-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновую кислоту (40 мг; 81%) в виде светло-розового твердого вещества.
Стадия 14: цис-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид
Смесь цис-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновой кислоты (40 мг; 0,16 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (31 мг; 0,32 ммоль), 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфата (64 мг; 0,17 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (0,08 мл; 0,48 ммоль) в N,N-диметилформамиде (1 мл) перемешивали при 20°С в течение 2 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (50%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,3), получая цис-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид (27 мг; 58%) в виде бесцветного масла. LC-MS: RT = 0,714 мин, m/z = 293,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,714 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 293,1
Стадия 15: циклопропил-[рац-(5S,7S)-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору цис-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамида (27 мг; 0,09 ммоль) в тетрагидрофуране (0,5 мл) добавляли бромид циклопропилмагния (0,5 М раствор в тетрагидрофуране; 0,92 мл; 0,46 ммоль) в атмосфере азота. По окончании добавления смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили, добавляя метанол (10 мл). Полученную смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали препаративной TLC (50%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,6), получая циклопропил-[рац-(5S,7S)-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (цис-смесь) (9,9 мг; 35%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 5.97-5.80 (m, 1Н), 4.90-4.78 (m, 1Н), 3.45-3.25 (m, 1Н), 3.05-2.95 (m, 1Н), 2.95-2.75 (m, 1Н), 2.28-2.00 (m, 2Н), 1.20-1.11 (m, 2Н), 1.07-0.98 (m, 5Н). LC-MS: RT = 0,766 мин, m/z = 274,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,766 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 274,1.
Стадия 16: циклопропил-[(5S,7S)-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и циклопропил-[(5R,7R)-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Циклопропил-[рац-(5S,7S)-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (58 мг) разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
циклопропил-[(5S,7S)-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 2, время удерживания = 5,085 мин) (8,2 мг; 14%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 6.02-5.84 (m, 1Н), 4.71-4.66 (m, 1 Н), 3.33-3.23 (m, 1Н), 3.19-3.07 (m, 2Н), 2.34-2.26 (m, 1Н), 2.18-2.01 (m, 1Н), 1.35-1.25 (m, 2Н), 1.18 (s, 1Н), 1.17-1.15 (m, 2Н), 1.14-1.11 (m, 2Н). LC-MS: RT = 0,818 мин, m/z = 273,9 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,818 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 273,9;
циклопропил-[(5R,7R)-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 3,815 мин) (13,9 мг; 23%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 6.04-5.81 (m, 1Н), 4.69-4.61 (m, 1Н), 3.43-3.23 (m, 1Н), 3.20-3.00 (m, 2Н), 2.43-2.22 (m, 1Н), 2.20-2.00 (m, 1Н), 1.35-1.25 (m, 2Н), 1.18 (s, 1Н), 1.16-1.15 (m, 2Н), 1.15-1.12 (m, 2Н). LC-MS: RT = 0,815 мин, m/z = 273,9 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,815 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 273,9.
Способ 91
Циклопропил-[(5R,7S)-5-(циклопропилметил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: метил-2-циклопропилоксиран-2-карбоксилат
К смеси метилата натрия (40,5 г; 749,04 ммоль) в метаноле (250 мл) добавляли циклопропанкарбоксальдегид (35,0 г; 499,36 ммоль) при -10°С, затем по каплям в течение 2 ч добавляли метилхлорацетат (81,3 г; 749,04 ммоль). По окончании добавления смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и гасили, добавляя уксусную кислоту. Полученную смесь разбавляли водой (300 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×300 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (500 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный метил-2-циклопропилоксиран-2-карбоксилат в виде коричневого масла. Масло подвергали дистилляции при пониженном давлении, получая метил-2-циклопропилоксиран-2-карбоксилат (38 г; 53%) в виде бесцветного масла.
Стадия 2: (Z)-2-циклопропилацетальдегида оксим
К раствору гидроксида натрия (19,9 г; 498,07 ммоль) в воде (70 мл) добавляли метил-2-циклопропилоксиран-2-карбоксилат (59,0 г; 415,05 ммоль) при 25°С в течение 2 ч. Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 1 ч и добавляли гидроксиламина сульфат (37,5 г; 228,28 ммоль) в течение 30 мин при 25°С. Смесь перемешивали при 25°С в течение 2 ч и разбавляли водой (300 мл). Раствор экстрагировали этилацетатом (3×300 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (300 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; 50% этилацетата в петролейном эфире), получая (Z)-2-циклопропилацетальдегида оксим (23,5 г; 57%) в виде белого твердого вещества. LC-MS: RT = 0,265 мин, m/z = 100,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,265 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 100,1.
Стадия 3: метил-3-(циклопропилметил)-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат
Раствор пиридина (0,85 мл; 10,59 ммоль), N-хлорсукцинимида (28,3 г; 211,84 ммоль) и (Z)-2-циклопропилацетальдегида оксима (21,0 г; 211,84 ммоль) в хлороформе (200 мл) перемешивали при 25°С в течение 2 ч и затем добавляли раствор метилакрилата (23,96 мл; 264,38 ммоль) и триэтиламина (30,77 мл; 222,01 ммоль) в хлороформе (30 мл). Смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и разбавляли водой (300 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; 0-50% этилацетата в петролейном эфире), получая метил-3-(циклопропилметил)-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат (21,0 г; 54%) в виде бесцветного масла. LC-MS: RT = 0,565 мин, m/z = 184,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,565 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 184,1.
Стадия 4: 5-(циклопропилметил)-3-гидроксипирролидин-2-он
Смесь метил-3-(циклопропилметил)-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилата (18,0 г; 98,25 ммоль) в метаноле и палладий (10%-ный на угле; 10,5 г) перемешивали при 25°С в атмосфере водорода (15 ф/кв. дюйм (103,4 кПа)) в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; 0-100% этилацетата в петролейном эфире), получая 5-(циклопропилметил)-3-гидрокси-пирролидин-2-он (6,2 г; 41%) в виде бесцветного масла. LC-MS: RT = 0,272 мин, m/z = 165,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,272 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 165,2.
Стадия 5: 3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-(циклопропилметил)пирролидин-2-он
К раствору 5-(циклопропилметил)-3-гидрокси-пирролидин-2-она (5,7 г; 36,73 ммоль) и имидазола (5,5 г; 80,80 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавляли трет-бутилдиметилхлорсилан (11,1 г; 73,46 ммоль). Смесь перемешивали при 20°С в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; 0-50% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-(циклопропилметил)пирролидин-2-он (7,7 г; 78%) в виде белого твердого вещества. LC-MS: RT = 0,872 мин, m/z = 270,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,872 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 270,2.
Стадия 6: 1-амино-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-(циклопропилметил)пирролидин-2-он
К раствору 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-(циклопропилметил)пирролидин-2-она (7,2 г; 26,72 ммоль) в N,N-диметилформамиде (10 мл) добавляли гидрид натрия (60%-ный; 1,6 г; 40,08 ммоль) при 0°С. По окончании перемешивания при 0°С в течение 30 мин добавляли O-(дифенилфосфорил)гидроксиламин (9,3 г; 40,08 ммоль) и смесь перемешивали при 10°С в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-(циклопропилметил)пирролидин-2-он (7,5 г; 99%) в виде желтого масла. LC-MS: RT = 0,772 мин, m/z = 285,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,772 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 285,2.
Стадия 7: (Z)-этил-2-амино-2-((3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-(циклопропилметил)-2-оксопирролидин-1-ил)имино)ацетат
Смесь 1-амино-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-(циклопропилметил)пирролидин-2-она (7,1 г; 24,96 ммоль) и этил-2-этокси-2-имино-ацетата (9,1 г; 62,4 ммоль) в этаноле (150 мл) перемешивали при 90°С в течение 12 ч и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный (Z)-этил-2-амино-2-((3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-(циклопропилметил)-2-оксопирролидин-1-ил)имино)ацетат (9,2 г; 96%) в виде желтого масла. LC-MS: RT = 0,783 мин, m/z = 384,3 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,783 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 384,3.
Стадия 8: этил-5-(циклопропилметил)-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
Смесь (Z)-этил-2-амино-2-[3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-(циклопропилметил)-2-оксо-пирролидин-1-ил]имино-ацетата (9,2 г; 23,99 ммоль) и п-толуолсульфоновой кислоты (5,0 г; 28,78 ммоль) в толуоле (100 мл) перемешивали при 120°С в течение 16 ч и разбавляли водой (200 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-5-(циклопропилметил)-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (4,9 г; 82%) в виде красного масла. LC-MS: RT = 0,540 мин, m/z = 252,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,540 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 252,2.
Стадия 9: этил-цис-5-(циклопропилметил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору этил-5-(циклопропилметил)-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (3,0 г; 11,98 ммоль) в дихлорметане (150 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (5,8 г; 35,94 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 16 ч и гасили путем добавления насыщенного водного раствора бикарбоната натрия (200 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш, 0-30% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-транс-5-(циклопропилметил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (650 мг; 21%) и этил-цис-5-(циклопропилметил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (850 мг; 28%), оба в виде желтого масла (TLC: 33%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,35 для цис-изомера и Rf = 0,85 для транс-изомера).
Стадия 10: цис-5-(циклопропилметил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновая кислота
Смесь этил-цис-5-(циклопропилметил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (750 мг; 2,96 ммоль) и гидроксида лития моногидрата (1,2 г; 29,61 ммоль) в этаноле (3 мл) и воде (1 мл) перемешивали при 20°С в течение 16 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли ледяной водой (2 мл) и значение рН подводили до 3 путем добавления соляной кислоты (2 М раствора). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенную цис-5-(циклопропилметил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновую кислоту (660 мг; 99%) в виде прозрачного масла. LC-MS: RT = 0,491 мин, m/z = 226,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,491 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 226,2.
Стадия 11: цис-5-(циклопропилметил)-7-фтор-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид
Смесь цис-5-(циклопропилметил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновой кислоты (660 мг; 3,11 ммоль), N,N-диизопропилэтиламина (3,32 мл; 18,65 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (606 мг; 6,22 ммоль) и 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфата (1536 мг; 4,04 ммоль) в N,N-диметилформамиде (10 мл) перемешивали при 25°С в течение 3 ч и разбавляли водой (50 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (2×50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный цис-5-(циклопропилметил)-7-фтор-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид (670 мг; 80%) в виде коричневого твердого вещества. LC-MS: RT = 0,706 мин, m/z = 269,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,706 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 269,2.
Стадия 12: циклопропил-[(5R,7S)-5-(циклопропилметил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору цис-5-(циклопропилметил)-7-фтор-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамида (150 мг; 0,56 ммоль) в тетрагидрофуране (1 мл) добавляли бромид циклопропилмагния (0,5 М раствор в тетрагидрофуране; 3,35 мл; 1,68 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при 0°С в течение 5 ч и гасили, добавляя воду (5 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×5 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали RP-HPLC (ацетонитрила 30-60%/0,225% муравьиной кислоты в воде) и далее очищали хиральной SFC, получая, как условно обозначено: циклопропил-[(5R,7S)-5-(циклопропилметил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 2, время удерживания = 3,498 мин) (13,6 мг; 9,5%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 6.02-6.00 (m, 0,5Н), 5.88-5.86 (m, 0,5Н), 4.60-4.55 (m, 1Н), 3.37-3.23 (m, 1Н), 3.05-3.01 (m, 1Н), 2.75-2.60 (m, 1Н), 2.00-1.95 (m, 1Н), 1.68-1.65 (m, 1Н), 1.16-1.06 (m, 4Н), 0.90-0.77 (m, 1Н), 0.49-0.47 (m, 2Н), 0.10-0.02 (m, 2Н). LC-MS: RT = 0,635 мин, m/z = 250,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,635 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 250,2.
(5S,7R)-Изомер (пик 1, время удерживания = 3,041 мин) (13,5 мг; 9%) также получали в виде бесцветного масла.
Условия SFC: колонка: Chiralpak AD-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: этанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5,5 мин и выдерживание при 40% в течение 3 мин, затем при 5% B в течение 1,5 мин; скорость потока: 25 мл/мин; температура колонки: 40°С.
Условия SFC: колонка: Lux Cellulose-2, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: этанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5,5 мин и выдерживание при 40% в течение 3 мин, затем при 5% B в течение 1,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 40°С.
Способ 92
Циклопропил-[(5S)-7,7-дидейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: циклопропил-[(5S,7S)-7-хлор-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и циклопропил-[(5R,7R)-7-хлор-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Циклопропил-[рац-(5S,7S)-7-хлор-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (350 мг; из партии другого масштаба) разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
циклопропил-[(5R,7R)-7-хлор-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1: время удерживания = 3,132 мин, 100 мг; 10%) и циклопропил-[(5S,7S)-7-хлор-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 2: время удерживания = 4,124 мин, 100 мг; 10%), оба в виде белых твердых веществ.
Условия SFC: колонка: OJ-H (250 мм × 30 мм; 10 мкм); среда: 0,1% NH3H2O в EtOH; сначала В 30%, в конце В 30%; скорость потока (80 мл/мин); температура колонки 40°С.
Стадия 2: циклопропил-[(5S)-7,7-дидейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Раствор циклопропил-[(5S,7S)-7-хлор-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона (40 мг; 0,14 ммоль) и цинка (40 мг; 0,61 ммоль) в муравьиной кислоте-D2 (2,0 мл; 0,14 ммоль) перемешивали при 20°С в течение 48 ч. Смесь разбавляли этилацетатом (20 мл), промывали водой (2×10 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (вода (с 0,05% гидроксида аммония, об./об.)/ацетонитрил, 36-66%), получая, как условно обозначено, циклопропил-[(5S)-7,7-дидейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (13,2 мг; 36%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.41-7.36 (m, 3Н), 7.14-7.11 (m, 2Н), 5.52-5.48 (m, 1Н), 3.28-3.21 (m, 1Н), 3.04-3.00 (m, 1Н), 2.70-2.65 (m, 1Н), 1.30-1.27 (m, 2Н), 1.06-1.03 (m, 2Н). LCMS: RT = 1,549 мин, m/z = 256,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,1%-ный водного аммиака в течение 3 мин): время удерживания 1,549 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 256,2.
Способ 93
Циклопропил-[(5S,7S)-7-хлор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и циклопропил-[(5R,7R)-7-хлор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Смесь тионилхлорида (441 мг; 3,71 ммоль) и циклопропил-[транс-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона (400 мг; 1,49 ммоль) перемешивали при 0°С в течение 0,5 ч и гасили, добавляя воду (100 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (2×200 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая циклопропил-[цис-7-хлор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (220 мг; 52%) в виде желтого твердого вещества. LC-MS: RT = 0,692 мин, m/z = 288,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,692 мин, [М+Н] = 288,1.
Эту цис-смесь далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено:
циклопропил-[(5S,7S)-7-хлор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 1, время удерживания = 3,711 мин) (72,9 мг; 33%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.43-7.39 (m, 2Н), 7.33-7.28 (m, 3Н), 5.56-5.51 (m, 1Н), 5.40-5.35 (m, 1Н), 3.95-3.88 (m, 1Н), 3.07-2.99 (m, 2Н), 1.34-1.31 (m, 2Н), 1.11-1.07 (m, 2Н). LCMS: RT = 1,034 мин, m/z = 288,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,034 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 288,2;
циклопропил-[(5R,7R)-7-хлор-5-фенил-6,7-дигидро-5H-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 2, время удерживания = 3,949 мин) (84,6 мг; 38%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.43-7.39 (m, 2Н), 7.33-7.28 (m, 3Н), 5.56-5.51 (m, 1Н), 5.40-5.35 (m, 1Н), 3.96-3.86 (m, 1Н), 3.10-2.99 (m, 2Н), 1.35-1.28 (m, 2Н), 1.10-1.06 (m, 2Н). LCMS: RT = 1,033 мин, m/z = 288,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,033 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 288,2.
SFC способ: колонка: Chiralcel OJ-3, 150×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: этанол (с 0,05% DEA); градиент: от 5% до 40% В за 5 мин и выдерживание при 40% в течение 2,5 мин, затем при 5% B в течение 2,5 мин; скорость потока: 2,5 мл/мин; температура колонки: 35°С.
Способ 94
Циклопропил-[(5S,7R)-7-хлор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: [рац-(5S,7S)-2-бром-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]окси-трет-бутил-диметил-силан
Смесь рац-(5S,7S)-2-бром-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (800 мг; 2,86 ммоль), имидазола (389 мг; 5,71 ммоль) и трет-бутилдиметилхлорсилана (646 мг; 4,28 ммоль) в дихлорметане (20 мл) перемешивали при 15°С в течение 1,5 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая [рац-(5S,7S)-2-бром-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]окси-трет-бутил-диметил-силан (900 мг; 80%) в виде бесцветного масла.
Стадия 2: циклопропил-[(рац-5S,7S)-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (589 мг; 4,56 ммоль) и [рац-(5S,7S)-2-бром-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]окси-трет-бутил-диметил-силана (900 мг; 2,28 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) по каплям добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 3,42 мл; 6,85 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и разбавляли этилацетатом (100 мл). Отделенный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая циклопропил-[(рац-5S,7S)-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (450 мг; 51%) в виде бесцветного масла. LCMS: RT = 1,016 мин, m/z = 384,3 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 1,016 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 384,3.
Стадия 3: циклопропил-[(5S,7R)-7-хлор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К раствору циклопропил-[(рац-5S,7S)-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона (450 мг; 1,17 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли тионилхлорид (0,43 мл; 5,87 ммоль). Смесь перемешивали при 25°С в течение 40 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая циклопропил-[рац-(5S,7R)-7-хлор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (200 мг; 59%) в виде бесцветного масла. LCMS: RT = 0,803 мин, m/z = 288,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,803 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 288,2.
Этот рацемат далее разделяли хиральной SFC, получая, как условно обозначено, циклопропил-[(5S,7R)-7-хлор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (пик 2, время удерживания = 4,690 мин) (60 мг; 40%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.45-7.38 (m, 3Н), 7.34-7.32 (m, 2Н), 5.85 (t, J=7,2 Гц, 1Н), 5.69-5.67 (m, 1Н), 3.40-3.31 (m, 2Н), 3.03-3.00 (m, 1Н), 1.19-1.16 (m, 2Н), 1.11-1.08 (m, 2Н). LCMS: RT = 1,028 мин, m/z = 288,2 [М+Н]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,028 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 288,2.
Условия SFC: колонка: Chiralcel OJ-H, 100×4,6 мм (внутр. диам.), 3 мкм; подвижная фаза: А: CO2, В: метанол (с 0,05% DEA); градиент: от 30% до 30% В; температура: 40°С.
Способ 95
Циклопропил-[рац-(5S,7S)-5-(3-хлор-2-пиридил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и циклопропил-[(5S,7S)-5-(3-хлор-2-пиридил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: этил-3-хлор-2-винилпиридин
Смесь 2-бром-3-хлорпиридина (62,5 г; 324,78 ммоль), винилтрифторбората калия (47,9 г; 357,25 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]-дихлорпалладия(II) (13,2 г; 16,24 ммоль) и бикарбоната натрия (68,2 г; 811,94 ммоль) в 1,4-диоксане (600 мл) и воде (150 мл) перемешивали при 100°С в течение 24 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли петролейным эфиром (500 мл) и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-хлор-2-винил-пиридин (40,0 г; 88%) в виде зеленого масла. LCMS: RT = 0,554 мин, m/z = 140,1/142,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,554 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 140,1 и 142,1.
Стадия 2: 3-хлорпиколинальдегид
К раствору 3-хлор-2-винил-пиридина (35,0 г; 250,75 ммоль) в воде (200 мл) и тетрагидрофуране (200 мл) добавляли тетраоксид осмия (0,89 г; 3,51 ммоль). Черный раствор перемешивали в течение 30 мин при 25°С и добавляли периодат натрия (214,5 г; 1003 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 25°С в течение 2 ч и гасили путем добавления насыщенного водного сульфита натрия (200 мл). Раствор экстрагировали этилацетатом (2×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-хлорпиридин-2-карбальдегид (18,5 г; 52%) в виде желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 10.45-10.18 (m, 1Н), 8.73-8.70 (m, 1Н), 7.86-7.84 (m, 1Н), 7.48-7.44 (m, 1Н).
Стадия 3: 1-(3-хлорпиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ол
К раствору 3-хлорпиридин-2-карбоксальдегида (18,5 г; 130,7 ммоль) в тетрагидрофуране (200 мл) по каплям в течение 30 мин добавляли бромид аллилмагния (1,0 М раствор в н-гексане; 162,2 мл; 162,2 ммоль) при 0°С. По окончании добавления реакционную смесь оставляли нагреваться до 20°С и перемешивали в течение 2 ч. Смесь гасили путем добавления насыщенного водного раствора хлорида аммония (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (2×100 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-(3-хлор-2-пиридил)бут-3-ен-1-ол (10,0 г; 42%) в виде бесцветного масла. LCMS: RT = 0,524 мин, m/z = 184,1/186,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,524 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 184,1 и 186,1.
Стадия 4: 2-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)бут-3-ен-1-ил)-3-хлорпиридин
К раствору 1-(3-хлор-2-пиридил)бут-3-ен-1-ола (10,0 г; 54,46 ммоль) в дихлорметане (100 мл) добавляли имидазол (7,4 г; 108,91 ммоль) и трет-бутилдиметилхлорсилан (12,3 г; 81,69 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 10°С в течение 16 ч и разбавляли водой (50 мл). Отделенный органический слой промывали рассолом (50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая трет-бутил-[1-(3-хлор-2-пиридил)бут-3-енокси]-диметил-силан (10 г; 62%) в виде светлого масла.
Стадия 5: 3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(3-хлорпиридин-2-ил)пропаналь
К раствору трет-бутил-[1-(3-хлор-2-пиридил)бут-3-енокси]-диметил-силана (10,0 г; 33,57 ммоль) в воде (100 мл) и тетрагидрофуране (100 мл) добавляли тетраоксид осмия (0,11 г; 0,44 ммоль). По окончании перемешивания в течение 30 мин при 15°С к смеси малыми порциями в течение 30 мин добавляли периодат натрия (28,7 г; 134,27 ммоль) и перемешивали при 25°С в течение еще 2 ч. Смесь гасили путем добавления насыщенного водного раствора сульфита натрия (1,50 л) и экстрагировали этилацетатом (3×300 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (300 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(3-хлор-2-пиридил)пропаналь (6,5 г; 65%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 0,719 мин, m/z = 300,1/302,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,719 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 300,1 и 302,1.
Стадия 6: 1-(3-бром-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(3-хлорпиридин-2-ил)пропан-1-ол
К охлажденному (-78°С) раствору 3,5-дибром-1-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазола (8,1 г; 26,01 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли н-бутиллитий (2,5 М раствор в н-гексане; 9,97 мл; 24,93 ммоль). Смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин и затем добавляли раствор 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(3-хлор-2-пиридил)пропаналя (6,5 г; 21,68 ммоль) в тетрагидрофуране (15 мл). Полученную смесь перемешивали при -78°С в течение 1,5 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (50 мл). Раствор экстрагировали этилацетатом (2×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая 1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(3-хлор-2-пиридил)пропан-1-ол (10,0 г; 87%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 0,941 мин; m/z = 533,2 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,941 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 533,2.
Стадия 7: [1-(3-бром-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-3-(3-хлорпиридин-2-ил)пропил]-2,2-диметилпропаноат
К смеси 4-диметиламинопиридина (321 мг; 2,63 ммоль), 1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(3-хлор-2-пиридил)пропан-1-ола (14,0 г; 26,32 ммоль) и триэтиламина (7,01 мл; 52,64 ммоль) в дихлорметане (100 мл) добавляли пивалоилхлорид (4,8 г; 39,48 ммоль). Смесь перемешивали при 20°С в течение 2 ч и гасили, добавляя воду (50 мл). Раствор экстрагировали дихлорметаном (2×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая [1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-3-(3-хлор-2-пиридил)пропил]-2,2-диметилпропаноат (12,5 г; 77%) в виде бесцветного масла.
Стадия 8: 1-(3-бром-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-(3-хлорпиридин-2-ил)-3-гидроксипропил-2,2-диметилпропаноат
Смесь [1-(5-бром-2-тетрагидропиран-2-ил-1,2,4-триазол-3-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]-окси-3-(3-хлор-2-пиридил)пропил]-2,2-диметилпропаноата (12,0 г; 19,48 ммоль) и п-толуолсульфоновой кислоты (4,0 г; 23,37 ммоль) в метаноле (100 мл) перемешивали при 50°С в течение 2 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 17-47%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая [1-(3-бром-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-(3-хлор-2-пиридил)-3-гидрокси-пропил]-2,2-диметилпропаноат (6,8 г; 83%) в виде белого твердого вещества. LCMS: RT = 0,760 и 0,768 мин, m/z = 417,1/419,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,760 и 0,768 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 417,1 и 419,0.
Стадия 9: рац-[(5S,7S)-2-бром-5-(3-хлорпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]-2,2-диметилпропаноат
К смеси [1-(3-бром-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-(3-хлор-2-пиридил)-3-гидрокси-пропил]-2,2-диметилпропаноата (6,2 г; 14,84 ммоль), трифенилфосфина (4,7 г; 17,81 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл) добавляли раствор диизопропилазодикарбоксилата (3,6 г; 17,81 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл). Смесь перемешивали при 25°С в течение 12 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая рац-[(5S,7S)-2-бром-5-(3-хлор-2-пиридил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]-2,2-диметилпропаноат (2,3 г; 39%) в виде бесцветного масла. LCMS: RT = 0,753 и 0,781 мин, m/z = 399,0/401,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,753 и 0,781 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 399,0 и 401,0.
Стадия 10: рац-(5S,7S)-2-бром-5-(3-хлорпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол
Смесь рац-[(5S,7S)-2-бром-5-(3-хлор-2-пиридил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]-2,2-диметилпропаноата (2,3 г; 5,75 ммоль), гидроксида лития моногидрата (2,4 г; 57,55 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) и воде (10 мл) перемешивали при 25°С в течение 12 ч и затем экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая рац-(5S,7S)-2-бром-5-(3-хлор-2-пиридил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол (1,7 г; 94%) в виде белого твердого вещества. LCMS: RT = 0,639 мин, m/z = 315,0/317,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,639 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 315,0 и 317,0.
Стадия 11: рац-(5S,7R)-2-бром-5-(3-хлорпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил-4-нитробензоат
К смеси трифенилфосфина (1,25 г; 4,75 ммоль), рац-(5S,7S)-2-бром-5-(3-хлор-2-пиридил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (1,2 г; 3,80 ммоль) и 4-нитробензойной кислоты (790 мг; 4,75 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) по каплям при 0°С добавляли диизопропилазодикарбоксилат (0,77 мл; 4,75 ммоль) в атмосфере азота. Раствор перемешивали при 0°С в течение 12 ч и фильтровали, получая неочищенный рац-[(5S,7R)-2-бром-5-(3-хлор-2-пиридил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]-4-нитробензоат (1,6 г; 91%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 12: рац-(5S,7R)-2-бром-5-(3-хлорпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол
Смесь карбоната калия (713 мг; 5,16 ммоль) и рац-[(5S,7R)-2-бром-5-(3-хлор-2-пиридил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]-4-нитробензоата (1,6 г; 3,44 ммоль) в метаноле (5 мл) и воде (5 мл) перемешивали при 70°С в течение 1 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (10 мл) и фильтровали. Твердый продукт промывали ацетонитрилом (5 мл), получая неочищенный рац-(5S,7R)-2-бром-5-(3-хлор-2-пиридил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол (800 мг; 74%) в виде белого твердого вещества. LCMS: RT = 0,649 мин, m/z = 315,0/317,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,649 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 315,0 и 317,0.
Стадия 13: рац-(5S,7R)-2-бром-7-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-(3-хлорпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
К смеси рац-(5S,7R)-2-бром-5-(3-хлор-2-пиридил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (350 мг; 1,11 ммоль), имидазола (151 мг; 2,22 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли трет-бутилдиметилхлорсилан (251 мг; 1,66 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая рац-(5S,7R)-2-бром-7-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-(3-хлорпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (450 мг; 94%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8.43-8.41 (m, 1Н), 7.73 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 7.25-7.21 (m, 1Н), 6.22-6.19 (m, 1Н), 5.49-5.46 (m, 1Н), 3.12-3.08 (m, 1Н), 2.97-2.93 (m, 1Н), 0.95 (s, 9Н), 0.24-0.19 (m, 6Н).
Стадия 14: рац-((5S,7R)-7-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-(3-хлорпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(циклопропил)метанон
К раствору рац-(5S,7R)-2-бром-7-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-(3-хлорпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (450 мг; 1,05 ммоль) и N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (270 мг; 2,09 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 2,62 мл; 5,23 ммоль) при 0°С. По окончании добавления реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили, добавляя воду (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая рац-((5S,7R)-7-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-(3-хлорпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(циклопропил)метанон (125 мг; 28%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8.41-8.40 (m, 1Н), 7.75-7.73 (m, 1Н), 7.24-7.22 (m, 1Н), 6.28-6.25 (m, 1Н), 5.53-5.50 (m, 1Н), 3.15-3.12 (m, 1Н), 3.10-3.06 (m, 1Н), 3.04-3.02 (m, 1Н), 1.06-1.04 (m, 2Н), 0.96 (s, 9Н), 0.91-0.86 (m, 2Н), 0.25 (d, J=6,8 Гц, 6Н). LCMS: RT = 0,857 мин, m/z = 419,1 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,857 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 419,1.
Стадия 15: рац-((5S,7R)-5-(3-хлорпиридин-2-ил)-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(циклопропил)метанон
Смесь рац-((5S,7R)-7-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-(3-хлорпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(циклопропил)метанона (120 мг; 0,29 ммоль) и соляной кислоты (4,0 М раствора в метаноле; 3,60 мл; 14,40 ммоль) в метаноле (10 мл) перемешивали при 20°С в течение 1 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (10 мл) и значение рН подводили до 7, добавляя насыщенный водный раствор бикарбоната натрия. Смесь экстрагировали дихлорметаном (2×20 мл). Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный рац-((5S,7R)-5-(3-хлорпиридин-2-ил)-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(циклопропил)метанон (52 мг; 60%) в виде желтого твердого вещества. LCMS: RT = 0,567 мин, m/z = 305,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,567 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 305,0.
Стадия 16: циклопропил-[рац-(5S,7S)-5-(3-хлор-2-пиридил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и циклопропил-[(5S,7S)-5-(3-хлор-2-пиридил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К смеси рац-((5S,7R)-5-(3-хлорпиридин-2-ил)-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(циклопропил)метанона (90 мг; 0,28 ммоль) в дихлорметане (2 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (40 мг; 0,25 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали в течение 1 ч и затем гасили, добавляя воду (5 мл). Полученную смесь экстрагировали дихлорметаном (3×5 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (5 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 32-62/0,05% гидроксида аммония в воде), получая циклопропил-[рац-(5S,7S)-5-(3-хлор-2-пиридил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (G03345456) (15,0 мг; 28,7%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 8.45 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 7.97-7.95 (m, 1Н), 7.42-7.38 (m, 1Н), 6.24-6.03 (m, 2Н), 3.83-3.72 (m, 1Н), 3.04-2.89 (m, 2Н), 1.18-1.15 (m, 2Н), 1.11-1.08 (m, 2Н). LCMS: RT = 0,780 мин, m/z = 306,9 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,780 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 306,9.
цис-Смесь далее разделяли SFC, получая, как условно обозначено, циклопропил-[(5S,7S)-5-(3-хлор-2-пиридил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (G03348054) (пик 1, время удерживания = 3,920 мин) (5,2 мг; 34%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 8.47 (d, J=4,8 Гц, 1Н), 7.79-7.76 (m, 1Н), 7.29-7.27 (m, 1Н), 6.14-6.12 (m, 1Н), 6.11-6.10 (m, 0,5Н), 5.99-5.98 (m, 0,5Н), 3.71-3.64 (m, 1Н), 3.13-3.02 (m, 2Н), 1.34-1.32 (m, 2Н), 1.11-1.08 (m, 2Н). LCMS: RT = 0,617 мин, m/z = 307,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,617 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 307,0.
Условия SFC: колонка: OJ-H (250 мм × 30 мм, 5 мкм); среда: 0,1% NH3H2O в EtOH; сначала В 35%, в конце В 35%; скорость потока (50 мл/мин); температура колонки 40°С.
Способ 96
Циклопропил-[рац-(5S,7S)-7-хлор-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: цис-2-бром-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол
К раствору 2-бром-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-она (3,0 г; 10,79 ммоль) в метаноле (100 мл) добавляли бородейтерид натрия (1,4 г; 32,36 ммоль). Смесь перемешивали при 20°С в течение 1 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (50 мл), водной соляной кислотой (1,0 М раствором; 2 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (40 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный цис-2-бром-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол (3,0 г; 99%) в виде желтого твердого вещества. LCMS: RT = 0,681 мин, m/z = 283,0 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,681 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 283,0.
Стадия 2: [транс-2-бром-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]-4-нитробензоат
К смеси 4-нитробензойной кислоты (1,0 г; 6,24 ммоль), трифенилфосфина (1,9 г; 7,21 ммоль) и цис-2-бром-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (1,4 г; 4,8 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли диизопропилазодикарбоксилат (1,5 г; 7,21 ммоль) при 0°С. Эту смесь перемешивали в течение 1,5 ч и фильтровали. Твердое вещество промывали тетрагидрофураном (10 мл) и метил-трет-бутиловым эфиром (10 мл), получая [транс-2-бром-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]-4-нитробензоат (800 мг; 39%) в виде белого твердого вещества. LCMS: RT = 0,904 мин, m/z = 432,0 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,904 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 432,0.
Стадия 3: транс-2-бром-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол
Смесь карбоната калия (514 мг; 3,72 ммоль) и [транс-2-бром-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]-4-нитробензоата (800 мг; 1,86 ммоль) в смеси метанол (10 мл)/вода (5 мл) перемешивали при 25°С в течение 16 ч и разбавляли водой (20 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (2×20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 35% этилацетата в петролейном эфире), получая транс-2-бром-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол (300 мг; 57%) в виде тускло-желтого твердого вещества. LCMS: RT = 0,689 мин, m/z = 281,0 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,689 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 281,0.
Стадия 4: [транс-2-бром-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]окси-трет-бутил-диметил-силан
К раствору транс-2-бром-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (300 мг; 1,07 ммоль) и имидазола (145 мг; 2,13 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли трет-бутилдиметилхлорсилан (241 мг; 1,6 ммоль). Смесь перемешивали при 25°С в течение 18 ч и разбавляли водой (30 мл). Раствор экстрагировали дихлорметаном (2×30 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая [транс-2-бром-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]окси-трет-бутил-диметил-силан (350 мг; 83%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 0,931 мин, m/z = 397,1 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,931 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 397,1.
Стадия 5: [транс-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-циклопропил-метанон
К раствору N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (457 мг; 3,54 ммоль) и [транс-2-бром-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]окси-трет-бутил-диметил-силана (350 мг; 0,89 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 1,33 мл; 2,66 ммоль) при 0°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), получая [транс-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-циклопропил-метанон (200 мг; 59%) в виде желтого масла. LCMS: RT = 0,935 мин, m/z = 385,3 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,935 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 385,3.
Стадия 6: циклопропил-[рац-(5S,7S)-7-хлор-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К смеси [транс-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-циклопропил-метанона (200 мг; 0,52 ммоль) в дихлорметане (3 мл) добавляли тионилхлорид (0,19 мл; 2,6 ммоль) и 2 капли диметилформамида. Смесь перемешивали при 25°С в течение 16 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (30 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали сначала колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 30% этилацетата в петролейном эфире), затем RP-HPLC (ацетонитрила 54-84%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая циклопропил-[рац-(5S,7S)-7-хлор-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (35,0 мг; 23%) в виде желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.46-7.38 (m, 3Н), 7.33-7.31 (m, 2Н), 5.69-5.65 (m, 1Н), 4.02-3.96 (m, 1Н), 3.07-2.99 (m, 1Н), 2.91-2.86 (m, 1Н), 1.21-1.16 (m, 2Н), 1.13-1.09 (m, 2Н). LCMS: RT = 1,033 мин, m/z = 289,1 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2 мин): время удерживания 1,033 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 289,1.
Способ 97
Циклопропил-[рац-(5S,7R)-7-хлор-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: [цис-2-бром-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]окси-трет-бутил-диметил-силан
К раствору цис-2-бром-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (1,5 г; 5,34 ммоль) и имидазола (726 мг; 10,67 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавляли трет-бутилдиметилхлорсилан (1,2 г; 8,00 ммоль). Смесь перемешивали при 15°С в течение 16 ч и разбавляли водой (20 мл). Полученную смесь экстрагировали дихлорметаном (2×30 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая [цис-2-бром-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]окси-трет-бутил-диметил-силан (1,8 г; 85%) в виде бесцветного масла. LCMS: RT = 1,029 мин, m/z = 395,1 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 1,029 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 395,1.
Стадия 2: [цис-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-циклопропил-метанон
К раствору N-метокси-N-метил-циклопропанкарбоксамида (1,2 г; 9,10 ммоль) и [цис-2-бром-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ил]окси-трет-бутил-диметил-силана (1,8 г; 4,55 ммоль) в тетрагидрофуране (40 мл) по каплям при 0°С добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в тетрагидрофуране; 6,83 мл; 13,66 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1,5 ч и гасили, добавляя насыщенный водный раствор хлорида аммония (50 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 20% этилацетата в петролейном эфире), получая [цис-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-циклопропил-метанон (450 мг; 26%) в виде бесцветного масла. LCMS: RT = 1,030 мин, m/z = 384,2 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 1,030 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 384,2.
Стадия 3: циклопропил-[рац-(5S,7R)-7-хлор-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К смеси [цис-7-[трет-бутил(диметил)силил]окси-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-циклопропил-метанона (450 мг; 1,17 ммоль) в дихлорметане (4 мл) добавляли тионилхлорид (1,47 мл; 20.23 ммоль). Смесь перемешивали при 25°С в течение 25 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (40 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали сначала колоночной хроматографией на диоксиде кремния (градиент растворителей: 0-30% этилацетата в петролейном эфире), затем RP-HPLC (ацетонитрила 40-70%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая, как условно обозначено, циклопропил-[рац-(5S,7R)-7-хлор-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (110 мг; выход 32,2%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7.74-7.69 (m, 3Н), 7.63-7.61 (m, 2Н), 6.14 (t, J=6,8 Гц, 1Н), 3.73-3.62 (m, 2Н), 3.61-3.59 (m, 1Н), 1.48-1.45 (m, 2Н), 1.40-1.37 (m, 2Н). LCMS: RT = 1,033 мин, m/z = 289,2 [М+Н]+. LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 2,0 мин): время удерживания 1,033 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 289,2.
Способ 98
Циклопропил-[рац-(5S,7S)-5-(1,1-дифторэтил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: 1-нитропропан-2-ол
К охлажденному (0°С) раствору ацетальдегида (45,9 мл; 819,13 ммоль) и нитрометана (44,4 мл; 819,13 ммоль) в гидроксиде натрия (32,8 г; 819,13 ммоль) в воде (1000 мл) добавляли гексадецилтриметилхлорид аммония (26,2 г; 81,91 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 15°С в течение 16 ч и значение рН подводили до 7, добавляя уксусную кислоту. Смесь экстрагировали этилацетатом (2×500 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 1-нитропропан-2-ол (61,0 г; 71%) в виде светло-коричневого масла.
Стадия 2: трет-бутил-диметил-(1-метил-2-нитро-этокси)силан
К смеси имидазола (83,0 г; 1219 ммоль) и 1-нитропропан-2-ола (61,0 г; 580,45 ммоль) в дихлорметане (1,00 л) добавляли трет-бутилдиметилхлорсилан (104,9 г; 696,55 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при 20°С в течение 16 ч и разбавляли водой (200 мл). Раствор экстрагировали дихлорметаном (2×200 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (200 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая трет-бутил-диметил-(1-метил-2-нитро-этокси)силан (115,0 г; 90%) в виде светло-желтого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4.53-4.68 (m, 1Н), 4.24-4.53 (m, 2Н), 1.25-1.32 (m, 3Н), 0.87-0.90 (m, 9Н), 0.07-0.12 (m, 6Н).
Стадия 3: этил-3-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат
К смеси этилакрилата (242,6 мл; 2279,5 ммоль), ди-трет-бутилдикарбоната (157,1 мл; 683,84 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (5,6 г; 45,59 ммоль) в ацетонитриле (1 л) добавляли трет-бутил-диметил-(1-метил-2-нитро-этокси)силан (100,0 г; 455,89 ммоль) при 20°С. Смесь перемешивали при 20°С в течение 16 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 10% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-3-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат (40,0 г; 29%) в виде коричневого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4.89-5.07 (m, 1Н), 4.66-4.84 (m, 1Н), 4.16-4.33 (m, 2Н), 3.21-3.41 (m, 2Н), 1.32-1.37 (m, 3Н), 1.26-1.30 (m, 3Н), 0.86-0.87 (m, 9Н), 0.03-0.10 (m, 6Н).
Стадия 4: 5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]-3-гидрокси-пирролидин-2-он
Смесь этил-3-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилата (40,0 г; 132,69 ммоль) и палладия (10%-ного на угле; 7,06 г) в этаноле (1,0 л) гидрировали (50 ф/кв. дюйм (344,7 кПа)) при 40°С в течение 48 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]-3-гидрокси-пирролидин-2-он (37,0 г; 92%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 5: 3-бензилокси-5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]пирролидин-2-он
К раствору 5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]-3-гидрокси-пирролидин-2-она (31,2 г; 120,27 ммоль) в дихлорметане (500 мл) добавляли бромид тетрабутиламмония (1,94 г; 6,01 ммоль), гидроксид натрия (30%-ный раствор в воде; 80,2 г; 601,34 ммоль) и бензилбромид (30,9 г; 180,4 ммоль). Смесь перемешивали при 40°С в течение 18 ч и охлаждали до 25°С. Отделенный органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 80% этилацетата в петролейном эфире), получая 3-бензилокси-5-[1-[трет-бутил(диметил) силил]оксиэтил]пирролидин-2-он (22,0 г; 52%) в виде бесцветного масла. LC-MS: RT = 0,957 мин, m/z = 350,2 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,957 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 350,2.
Стадия 6: 1-амино-3-бензилокси-5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]пирролидин-2-он
К раствору 3-бензилокси-5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]-пирролидин-2-она (22,0 г; 62,94 ммоль) в N,N-диметилформамиде (400 мл) добавляли гидрид натрия (60%-ный в минеральном масле; 3,78 г; 94,41 ммоль) при 0°С. По окончании перемешивания при 20°С в течение 30 мин добавляли о-(дифенилфосфорил)гидроксиламин (19,1 г; 81,82 ммоль). Смесь перемешивали при 20°С в течение 18 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный 1-амино-3-бензилокси-5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]пирролидин-2-он (22,9 г; 99%) в виде коричневого масла.
Стадия 7: этил-2-((3-(бензилокси)-5-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)-2-оксопирролидин-1-ил)амино)-2-иминоацетат
Смесь 1-амино-3-бензилокси-5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]-пирролидин-2-она (22,0 г; 60,4 ммоль) и этил-2-этокси-2-имино-ацетата (20,3 мл; 150,9 ммоль) в этаноле (220 мл) перемешивали при 90°С в течение 33 ч и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-2-((3-(бензилокси)-5-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)-2-оксопирролидин-1-ил)амино)-2-иминоацетат (27,9 г; 99%) в виде желтого масла. LC-MS: RT = 0,840 мин, m/z = 365,3 [М+15]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,840 мин, ESI+: обнаружено [М+15] = 365,3.
Стадия 8: этил-7-бензилокси-5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору этил-2-[[3-бензилокси-5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]-2-оксо-пирролидин-1-ил]амино]-2-имино-ацетата (27,0 г; 58,2 ммоль) в толуоле (500 мл) добавляли п-толуолсульфоновой кислоты моногидрат (13,3 г; 69,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 130°С в течение 16 ч и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 100-200 меш; от 0 до 50% этилацетата в петролейном эфире), получая этил-7-бензилокси-5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (11,2 г; 43%) в виде желтого масла. LC-MS: RT = 1,029 мин, m/z = 446,3 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 1,029 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 446,3.
Стадия 9: этил-7-бензилокси-5-(1-гидроксиэтил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К раствору этил-7-бензилокси-5-[1-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (5,1 г; 11,44 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл) добавляли фторид тетрабутиламмония (1,0 М раствор в тетрагидрофуране; 34,33 мл; 34,33 ммоль). Смесь перемешивали при 25°С в течение 18 ч и разбавляли водой (50 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (2×50 мл). Объединенные органические слои промывали водной соляной кислотой (1 н. раствором, 15 мл) и рассолом (50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный этил-7-бензилокси-5-(1-гидроксиэтил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (3,8 г; 100%) в виде коричневого масла.
Стадия 10: этил-5-ацетил-7-бензилокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
К охлажденному (0°С) раствору этил-7-бензилокси-5-(1-гидроксиэтил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (3,8 г; 11,44 ммоль) в дихлорметане (25 мл) добавляли бикарбонат натрия (3,8 г; 45,75 ммоль) и периодинан Десса-Мартина (9,7 г; 22,87 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч и фильтровали. Фильтрат разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3×20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (50%-ный этилацетат в петролейном эфире; Rf = 0,5), получая этил-5-ацетил-7-бензилокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (1,5 г; 40%) в виде светло-коричневого масла. LC-MS: RT = 0,655 мин, m/z = 330,2 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,655 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 330,2.
Стадия 11: этил-5-ацетил-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
Смесь этил-5-ацетил-7-бензилокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (1,5 г; 4,6 ммоль) в 2,2,2-трифторуксусной кислоте (3 мл) нагревали при 120°С в течение 3 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (раствор 5% метанола и 45% этилацетата в петролейном эфире, Rf = 0,2), получая этил-5-ацетил-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (350 мг; 32%) в виде светло-коричневого масла. LC-MS: RT = 0,278 мн; m/z = 240,2 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,278 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 240,2.
Стадия 12: этил-цис-5-(1,1-дифторэтил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
Смесь этил-5-ацетил-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (350 мг; 1,46 ммоль) и трифторида диэтиламиносеры (5,0 мл; 1,46 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивали при 10°С в течение 2 ч и гасили путем добавления охлажденного во льду насыщенного водного раствора бикарбоната натрия (20 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (50%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,4), получая этил-цис-5-(1,1-дифторэтил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (37 мг; 10%) в виде бесцветного масла. LC-MS: RT = 0,694 мин, m/z = 264,1 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,694 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 264,1.
Стадия 13: цис-5-(1,1-дифторэтил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновая кислота
Смесь этил-цис-5-(1,1-дифторэтил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (27 мг; 0,10 ммоль), гидроксида лития моногидрата (22 мг; 0,51 ммоль) в смеси метанол (0,7 мл)/вода (0,7 мл)/тетрагидрофуран (0,7 мл) перемешивали при 10°С в течение 2 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли ледяной водой (2 мл) и значение рН подводили до 4, добавляя водную соляную кислоту (1 М раствор). Смесь концентрировали досуха при пониженном давлении, получая неочищенную цис-5-(1,1-дифторэтил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновую кислоту вместе с солью хлорида лития (28 мг; 98%).
Стадия 14: цис-5-(1,1-дифторэтил)-7-фтор-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид
Смесь цис-5-(1,1-дифторэтил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоновой кислоты (28 мг; 0,12 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (23 мг; 0,24 ммоль), 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфата (48 мг; 0,13 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (62 мг; 0,48 ммоль) в N,N-диметилформамиде (2 мл) перемешивали при 20°С в течение 3 ч и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной TLC (70%-ный этилацетат в петролейном эфире, Rf = 0,3), получая цис-5-(1,1-дифторэтил)-7-фтор-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид (15 мг; 45%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 6.05-5.73 (m, 1Н), 4.62 (br s, 1Н), 3.86-3.82 (m, 3Н), 3.54-3.21 (m, 5H), 3.14-2.99 (m, 1H), 1.96-1.75 (m, 3Н).
Стадия 15: циклопропил-[рац-(5S,7S)-5-(1,1-дифторэтил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
К охлажденному (0°С) раствору цис-5-(1,1-дифторэтил)-7-фтор-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамида (10 мг; 0,04 ммоль) в тетрагидрофуране (1 мл) по каплям в атмосфере азота добавляли бромид циклопропилмагния (0,5 М раствор в тетрагидрофуране; 0,5 мл; 0,25 ммоль). По окончании перемешивания при 0°С в течение 1 ч смесь гасили путем добавления насыщенного водного раствора хлорида аммония (0,5 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток перерастворяли в дихлорметане (50 мл), фильтровали для удаления твердых веществ, фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 36-66%/0,05% гидроксида аммония в воде), получая циклопропил-[рац-(5S,7S)-5-(1,1-дифторэтил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (2,2 мг; 23%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 6.00-5.84 (m, 1Н), 4.75-4.55 (m, 1Н), 3.38-3.29 (m, 1Н), 3.18-2.99 (m, 2Н), 1.86 (t, J=19,2 Гц, 3Н), 1.36-1.33 (m, 2Н), 1.16-1.12 (m, 2Н). LCMS: RT = 0,828 мин, m/z = 259,9 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,03% трифторуксусной кислоты в течение 1,5 мин): время удерживания 0,828 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 259,9.
Способ 99
2-[(5S,7S)-2-(Циклопропанкарбонил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-5-ил]бензонитрил
Смесь [(5S,7S)-5-(2-хлорфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-циклопропил-метанона (40 мг; 0,13 ммоль), гексацианоферрата(II) калия тригидрата (28 мг; 0,07 ммоль), ацетата калия (2 мг; 0,02 ммоль), t-BuXPhos-Phos-бифенил-2-амин-палладия(II) мезилата (10 мг; 0,01 ммоль) и 2-ди-трет-бутилфосфино-2',4',6'-триизопропилбифенила (6 мг; 0,01 ммоль) в воде (5 мл) и 1,4-диоксане (5 мл) перемешивали при 100°С в течение 6 ч в атмосфере азота. Реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством RP-HPLC (ацетонитрила 40-70%/0,04% NH3H2O + 10 мМ NH4HCO3 в воде), получая 2-[(5S,7S)-2-(циклопропанкарбонил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-5-ил]бензонитрил (6,1 мг; 16%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7.79-7.76 (m, 1Н), 7.64-7.60 (m, 1Н), 7.53-7.50 (m, 1Н), 7.01 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 6.15-6.12 (m, 0,5Н), 6.00-5.98 (m, 1.5Н), 3.90-3.74 (m, 1Н), 3.10-3.06 (m, 1Н), 2.99-2.85 (m, 1Н), 1.39-1.33 (m, 2Н), 1.17-1.09 (m, 2Н). LC-MS: RT = 0,915 мин, m/z = 397,2 [M+H]+.
LCMS (от 10 до 80% ацетонитрила в воде + 0,03% бикарбоната аммония в течение 3,0 мин): время удерживания 0,915 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 397,2.
Способ 100
(1-Этилциклопропил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Стадия 1: 1-этил-N-метокси-N-метилциклопропан-1-карбоксамид
Получали из 1-этилциклопропанкарбоновой кислоты, используя способ 5. Неочищенную реакционную смесь очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель, 0-100% изопропилацетата/гептан), получая 1-этил-N-метокси-N-метилциклопропан-1-карбоксамид (435 мг; выход 63%). 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 3.71 (s, 3Н), 3.24 (s, 3Н), 1.60 (q, J=7,4 Гц, 2Н), 0.97 (d, J=2,0 Гц, 2Н), 0.96 (t, J=7,4 Гц, 3Н), 0.59-0.52 (m, 2Н). LCMS: RT = 0,92 мин, m/z = 157,9 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 100% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 1,6 мин): время удерживания 0,92 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 157,9.
Стадия 2: (1-этилциклопропил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Получали из 1-этил-N-метокси-N-метилциклопропан-1-карбоксамида, используя способ 2. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством RP-HPLC (30-70% ацетонитрила/0,1% муравьиной кислоты в воде; 10 мин), получая (1-этилциклопропил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (134 мг; выход 72%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.46-7.34 (m, 3Н), 7.25-7.19 (m, 2Н), 6.20 (ddd, J=56,5; 7,1; 1,9 Гц, 1Н), 5.69 (ddd, J=8,5; 6,6; 3,0 Гц, 1Н), 3.72 (dddd, J=26,1; 15,4; 8,5; 7,1 Гц, 1Н), 2.68 (dddd, J=26,6; 15,3; 3,1; 1,9 Гц, 1Н), 1.73 (qd, J=7,2; 1,7 Гц, 2Н), 1.58 (dq, J=4,4; 1,7; 1,2 Гц, 2Н), 0.93 (q, J=3,2; 2,6 Гц, 2Н), 0.86 (t, J=7,3 Гц, 3Н). LCMS: RT = 5,29 мин, m/z = 300,1 [М+Н]+. LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 5,29 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 300,1.
Способ 101
((5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанон
Стадия 1: N-метокси-N-метилтетрагидро-2Н-пиран-4-карбоксамид
Получали из тетрагидропиран-4-карбоновой кислоты, используя способ 5. Неочищенную реакционную смесь очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель, 0-100% изопропилацетата/гептан), получая N-метокси-N-метилтетрагидро-2Н-пиран-4-карбоксамид (721 мг; количественный выход). 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 4.08-3.95 (m, 2Н), 3.71 (s, 3Н), 3.46 (td, J=11,8; 2,3 Гц, 2Н), 3.18 (s, 3Н), 2.91 (tt, J=11,4; 3,8 Гц, 1Н), 1.94-1.78 (m, 2Н), 1.73-1.59 (m, 2Н). LCMS: RT = 0,70 мин, m/z = 173,9 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 100% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 1,6 мин): время удерживания 0,70 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 173,9.
Стадия 2: ((5S,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанон
Получали из N-метокси-N-метилтетрагидро-2Н-пиран-4-карбоксамида, используя способ 2. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством RP-HPLC (20-60% ацетонитрила/0,1% NH4OH в воде; 10 мин), получая ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метанон (167 мг; выход 85%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.47-7.35 (m, 3Н), 7.28-7.21 (m, 2Н), 6.23 (ddd, J=56,4; 7,2; 1,9 Гц, 1Н), 5.73 (ddd, J=8,9; 6,5; 3,0 Гц, 1Н), 3.88 (ddt, J=11,0; 4,6; 2,4 Гц, 2Н), 3.74 (dddd, J=26,1; 15,5; 8,6; 7,2 Гц, 1Н), 3.60 (tt, J=11,5; 3,8 Гц, 1Н), 3.42 (tdd, J=11,4; 3,6; 2,2 Гц, 2Н), 2.70 (dddd, J=26,7; 15,2; 3,1; 1,9 Гц, 1Н), 1.76 (tdt, J=10,8; 4,5; 2,2 Гц, 2Н), 1.58 (dtdd, J=13,3; 11,7; 8,8; 4,5 Гц, 2Н). LCMS: RT = 4,22 мин, m/z = 316,1 [М+Н]+. LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 4,22 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 316,1.
Способ 102
((5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)метанон
Стадия 1: N-метокси-N-метилтетрагидро-2Н-пиран-3-карбоксамид
Получали из тетрагидропиран-3-карбоновой кислоты, используя способ 5. Неочищенную реакционную смесь очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель, 0-100% изопропилацетата/гептан), получая N-метокси-N-метилтетрагидро-2Н-пиран-3-карбоксамид (697 мг; количественный выход). 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 4.03-3.96 (m, 1Н), 3.96-3.89 (m, 1Н), 3.71 (s, 3Н), 3.49 (t, J=10,9 Гц, 1Н), 3.45-3.37 (m, 1Н), 3.16 (s, 3Н), 3.07-2.94 (m, 1Н), 1.94 (dtd, J=11,1; 3,7; 1,9 Гц, 1Н), 1.86-1.61 (m, 3Н). LCMS: RT = 0,73 мин, m/z = 173,9 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 100% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 1,6 мин): время удерживания 0,73 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 173,9.
Стадия 2: ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)метанон
Получали из N-метокси-N-метилтетрагидро-2Н-пиран-3-карбоксамида, используя способ 2. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством RP-HPLC (20-60% ацетонитрила/0,1% NH4OH в воде; 10 мин), получая ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(тетрагидро-2Н-пиран-3-ил)метанон (169 мг; выход 86%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.49-7.34 (m, 3Н), 7.25 (dt, J=7,8; 1,4 Гц, 2Н), 6.23 (dddd, J=56,4; 7,2; 2,0; 0,9 Гц, 1Н), 5.73 (ddd, J=8,8; 6,4; 3,0 Гц, 1Н), 4.01 (tdd, J=10,5; 3,9; 1,8 Гц, 1Н), 3.84-3.65 (m, 2Н), 3.57 (tdd, J=9,8; 3,8; 1,9 Гц, 1Н), 3.45 (ddd, J=10,9; 9,5; 2,6 Гц, 1Н), 3.41-3.33 (m, 1Н), 2.79-2.62 (m, 1Н), 2.05-1.89 (m, 1Н), 1.78-1.47 (m, 3Н). LCMS: RT = 4,42 мин, m/z = 316,1 [М+Н]+. LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 4,42 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 316,1.
Способ 103
(5S,7S)-2-(D-Пролил)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
Стадия 1: трет-бутил-(R)-2-(метокси(метил)карбамоил)пирролидин-1-карбоксилат
Получали из N-Boc-D-пролина, используя способ 1 (1,23 г; количественный выход). Продукт использовали без очистки. 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 4.65 (ddd, J=42,4; 8,5; 3,5 Гц, 1Н), 3.74 (d, J=25,4 Гц, 3Н), 3.57 (dddd, J=15,0; 10,5; 7,8; 5,0 Гц, 1Н), 3.44 (ddt, J=28,9; 10,3; 6,9 Гц, 1Н), 3.19 (s, 3Н), 2.27-2.08 (m, 1Н), 2.08-1.74 (m, 3Н), 1.43 (d, J=17,9 Гц, 9Н). LCMS: RT = 1,03 мин, m/z = 158,9 [(М-Вос)+Н]+. LCMS (от 5 до 100% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 1,6 мин): время удерживания 1,03 мин, ESI+: обнаружено [(М-Вос)+Н] = 158,9.
Стадия 2: трет-бутил-(R)-2-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил)пирролидин-1-карбоксилат
Получали из трет-бутил-(R)-2-(метокси(метил)карбамоил)пирролидин-1-карбоксилата, используя способ 3. Продукт использовали без очистки. LCMS: RT = 1,30 мин, m/z = 300,9 [(М-Вос)+Н]+.
LCMS (от 5 до 100% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 1,6 мин): время удерживания 1,30 мин, ESI+: обнаружено [(М-Вос)+Н] = 300,9.
Стадия 3: (5S,7S)-2-(D-пролил)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
трет-Бутил-(R)-2-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил)пирролидин-1-карбоксилат растворяли в дихлорметане (2 мл) и охлаждали до 0°С. Добавляли трифторуксусную кислоту (2 мл) и реакционную смесь перемешивали при 0°С. Реакционную смесь концентрировали и очищали с использованием SFC (5-60% метанола в двуокиси углерода; колонка Pyridyl Amide; 12 мин), получая (5S,7S)-2-(D-пролил)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (3,7 мг; выход 3%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.48-7.29 (m, 3Н), 7.23 (ddt, J=11,8; 6,1; 1,6 Гц, 2Н), 6.35-5.99 (m, 1Н), 5.82-5.52 (m, 1Н), 4.37-3.89 (m, 1Н), 3.88-3.45 (m, 1Н), 3.12-2.51 (m, 3Н), 2.40-0.29 (m, 4Н). LCMS: RT = 0,88 мин, m/z = 300,9 [М+Н]+.
LCMS (от 5 до 100% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 1,6 мин): время удерживания 0,88 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 300,9.
Способ 104
((5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(2-метилтетрагидрофуран-2-ил)метанон
Стадия 1: N-метокси-N,2-диметилтетрагидрофуран-2-карбоксамид
Получали из 2-метилтетрагидрофуран-2-карбоновой кислоты, используя способ 2 (76 мг; выход 38%). Продукт использовали без очистки. LCMS: RT = 0,82 мин, m/z = 174,0 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 100% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 1,6 мин): время удерживания 0,82 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 174,0.
Стадия 2: ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(2-метилтетрагидрофуран-2-ил)метанон
Получали из N-метокси-N,2-диметилтетрагидрофуран-2-карбоксамида, используя способ 3. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством RP-HPLC (20-60% ацетонитрила/0,1% муравьиной кислоты в воде; 10 мин), получая ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(2-метилтетрагидрофуран-2-ил)метанон (24 мг; выход 17%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.48-7.35 (m, 3Н), 7.28-7.19 (m, 2Н), 6.23 (ddt, J=56,5; 7,2; 2,0 Гц, 1Н), 5.72 (ddt, J=8,9; 6,3; 2,8 Гц, 1Н), 3.93-3.82 (m, 1Н), 3.82-3.65 (m, 2Н), 2.71 (dddd, J=26,6; 15,2; 3,1; 1,9 Гц, 1Н), 2.52 (m, 1Н), 1.99-1.85 (m, 2Н), 1.85-1.72 (m, 1Н), 1.53 (d, J=3,6 Гц, 3Н). LCMS: RT = 4,66 мин, m/z = 316,1 [М+Н]+. LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 4,66 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 316,1.
Способ 105
((5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(тетрагидрофуран-3-ил)метанон
Стадия 1: N-метокси-N-метилтетрагидрофуран-3-карбоксамид
Получали из тетрагидрофуран-3-карбоновой кислоты, используя способ 3 (97 мг; выход 47%). Продукт использовали без очистки. LCMS: RT = 0,80 мин, m/z = 160,0 [M+H]+. LCMS (от 5 до 100% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 1,6 мин): время удерживания 0,80 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 160,0.
Стадия 2: ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(тетрагидрофуран-3-ил)метанон
Получали из N-метокси-N-метилтетрагидрофуран-3-карбоксамида, используя способ 3. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством RP-HPLC (20-60% ацетонитрила/0,1% муравьиной кислоты в воде; 10 мин), получая диастереомерную смесь ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(тетрагидрофуран-3-ил)метанона (49 мг; выход 37%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.49-7.35 (m, 3Н), 7.30-7.21 (m, 2Н), 6.24 (ddd, J=56,2; 7,1; 1,9 Гц, 1Н), 5.74 (ddd, J=9,2; 6,6; 3,1 Гц, 1Н), 4.14-4.05 (m, 1Н), 3.93 (dt, J=11,3; 8,4 Гц, 1Н), 3.87-3.65 (m, 4Н), 2.72 (dddd, J=26,7; 15,3; 3,1; 1,9 Гц, 1Н), 2.19-2.00 (m, 2Н). LCMS: RT = 4,33 мин, m/z = 302,2 [М+Н]+. LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 4,33 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 302,2.
Способ 106
((5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((S)-тетрагидрофуран-3-ил)метанон
Диастереомерную смесь ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(тетрагидрофуран-3-ил)метанона очищали хиральной SFC (время удерживания = 1,241 мин), получая, как условно обозначено, ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((S)-тетрагидрофуран-3-ил)метанон (15 мг; выход 11%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.49-7.35 (m, 3Н), 7.30-7.21 (m, 2Н), 6.24 (ddd, J=56,2; 7,1; 1,9 Гц, 1Н), 5.74 (ddd, J=9,2; 6,6; 3,1 Гц, 1Н), 4.14-4.05 (m, 1Н), 3.93 (dt, J=11,3; 8,4 Гц, 1Н), 3.87-3.65 (m, 4Н), 2.72 (dddd, J=26,7; 15,3; 3,1; 1,9 Гц, 1H), 2.19-2.00 (m, 2H). LCMS: RT = 4,33 мин, m/z = 302,2 [M+H]+. LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 4,33 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 302,2.
((5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((R)-тетрагидрофуран-3-ил)метанон
Диастереомерную смесь ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(тетрагидрофуран-3-ил)метанона очищали хиральной SFC (время удерживания = 1,627 мин), получая, как условно обозначено, ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((R)-тетрагидрофуран-3-ил)метанон (23 мг; выход 17%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.49-7.35 (m, 3Н), 7.30-7.21 (m, 2Н), 6.24 (ddd, J=56,2; 7,1; 1,9 Гц, 1Н), 5.74 (ddd, J=9,2; 6,6; 3,1 Гц, 1Н), 4.14-4.05 (m, 1Н), 3.93 (dt, J=11,3; 8,4 Гц, 1Н), 3.87-3.65 (m, 4Н), 2.72 (dddd, J=26,7; 15,3; 3,1; 1,9 Гц, 1Н), 2.19-2.00 (m, 2Н). LCMS: RT = 4,33 мин, m/z = 302,2 [М+Н]+. LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 4,33 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 302,2.
Условия SFC: колонка: Chiralpak IA (150 мм × 21,2 мм, 5 мкм); среда: 0,1% NH4OH в МеОН; сначала В 10%, в конце В 10%; скорость потока 70 мл/мин; температура колонки 40°С.
Условия SFC: колонка: Chiralpak IA (150 мм × 21,2 мм, 5 мкм); среда: 0,1% NH4OH в МеОН; сначала В 10%, в конце В 10%; скорость потока 70 мл/мин; температура колонки 40°С.
Способ 107
1-((5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-3-метокси-2,2-диметилпропан-1-он
Стадия 1: N,3-диметокси-N,2,2-триметилпропанамид
Получали из 3-метокси-2,2-диметилпропановой кислоты, используя способ 2 (184 мг; выход 46%). Продукт использовали без очистки. LCMS: RT = 0,93 мин, m/z = 176,0 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 100% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 1,6 мин): время удерживания 0,93 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 176,0.
Стадия 2: 1-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-3-метокси-2,2-диметилпропан-1-он
Получали из N,3-диметокси-N,2,2-триметилпропанамида, используя способ 3. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством RP-HPLC (20-60% ацетонитрила/0,1% муравьиной кислоты в воде, 10 мин), получая 1-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-3-метокси-2,2-диметилпропан-1-он (16 мг; выход 18%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.48-7.34 (m, 3Н), 7.25-7.18 (m, 2Н), 6.23 (ddd, J=56,5; 7,1; 1,9 Гц, 1Н), 5.74 (ddd, J=8,9; 6,5; 2,9 Гц, 1Н), 3.84-3.71 (m, 2Н), 3.79-3.66 (m, 1Н), 3.07 (s, 3Н), 2.71 (dddd, J=26,6; 15,2; 3,14; 1,9 Гц, 1Н), 1.25 (d, J=6,0 Гц, 6Н). LCMS: RT = 5,44 мин, m/z = 318,2 [М+Н]+. LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 5,44 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 318,2.
Способ 108
(S)-3,3,3-Трифтор-1-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-гидроксипропан-1-он
Стадия 1: (S)-3,3,3-трифтор-2-гидрокси-N-метокси-N-метилпропанамид
Получали из (S)-3,3,3-трифтор-2-гидроксипропановой кислоты, используя способ 2 (52 мг; выход 13%). Продукт использовали без очистки. LCMS: RT = 0,72 мин, m/z = 187,9 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 100% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 1,6 мин): время удерживания 0,72 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 187,9.
Стадия 2: (S)-3,3,3-трифтор-1-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-гидроксипропан-1-он
Получали из (S)-3,3,3-трифтор-2-гидрокси-N-метокси-N-метилпропанамида, используя способ 3. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством RP-HPLC (20-60% ацетонитрила/0,1% муравьиной кислоты в воде; 10 мин), получая, как условно обозначено, (S)-3,3,3-трифтор-1-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-гидроксипропан-1-он (7,5 мг; выход 9%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.42 (dddd, J=9,2; 7,4; 6,3; 3,3 Гц, 3Н), 7.26 (td, J=8,3; 7,8; 1,6 Гц, 2Н), 6.27 (dddd, J=56,3; 7,3; 3,5; 2,0 Гц, 1Н), 5.77 (ddd, J=9,0; 6,3; 3,1 Гц, 1Н), 5.62 (dd, J=10,2; 4,0 Гц, 1Н), 3.77 (dddd, J=25,7; 15,5; 8,5; 7,2 Гц, 1Н), 2.80-2.65 (m, 1Н). LCMS: RT = 4,82 мин, m/z = 330,1 [М+Н]+. LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 4,82 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 330,1.
Способ 109
1-((5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)этан-1-он
Стадия 1: N-метокси-N-метил-2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)ацетамид
Получали из 2-тетрагидропиран-2-илуксусной кислоты, используя способ 2 (200 мг; выход 77%). Продукт использовали без очистки. LCMS: RT = 0,84 мин, m/z = 188,0 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 100% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 1,6 мин): время удерживания 0,84 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 188,0.
Стадия 2: 1-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)этан-1-он
Получали из N-метокси-N-метил-2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)ацетамида, используя способ 3. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством RP-HPLC (5-85% ацетонитрила/0,1% муравьиной кислоты в воде; 10 мин), получая 1-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)этан-1-он (2,5 мг; выход 3%). LCMS: RT = 4,94 мин, m/z = 330,2 [М+Н]+. LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 4,94 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 330,2.
Способ 110
1-((5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)этан-1-он
Стадия 1: N-метокси-N-метил-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)ацетамид
Получали из 2-тетрагидропиран-4-илуксусной кислоты, используя способ 2 (154 мг; выход 59%). Продукт использовали без очистки. LCMS: RT = 0,78 мин, m/z = 188,0 [M+H]+. LCMS (от 5 до 100% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 1,6 мин): время удерживания 0,78 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 188,0.
Стадия 2: 1-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)этан-1-он
Получали из N-метокси-N-метил-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)ацетамида, используя способ 3. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством RP-HPLC (20-60% ацетонитрила/0,1% муравьиной кислоты в воде; 10 мин), получая 1-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)этан-1-он (46 мг; выход 52%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.46-7.34 (m, 3Н), 7.28-7.22 (m, 2Н), 6.22 (ddd, J=56,4; 7,2; 1,9 Гц, 1Н), 5.71 (ddd, J=8,5; 6,5; 3,1 Гц, 1Н), 3.84-3.63 (m, 3Н), 3.28-3.21 (m, 1Н), 2.94 (dd, J=6,8; 2,1 Гц, 2Н), 2.71 (dddd, J=26,7; 15,2; 3,2; 2,0 Гц, 1Н), 2.10 (ttt, J=11,0; 7,1; 3,9 Гц, 1Н), 1.55 (ddd, J=12,9; 4,2; 2,0 Гц, 2Н), 1.23 (qd, J=12,4; 4,4 Гц, 2Н), 0.87-0.65 (m, 1 Н). LCMS: RT = 2,51 мин, m/z = 330,2 [М+Н]+.
LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 2,51 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 330,2.
Способ 111
((5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((R)-3-метилтетрагидрофуран-3-ил)метанон и ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((S)-3-метилтетрагидрофуран-3-ил)метанон
Стадия 1: N-метокси-N,3-диметилтетрагидрофуран-3-карбоксамид
Получали из 3-метилтетрагидрофуран-3-карбоновой кислоты, используя способ 2 (386 мг; выход 58%). Продукт использовали без очистки. LCMS: RT = 0,89 мин, m/z = 173,9 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 100% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 1,6 мин): время удерживания 0,89 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 173,9.
((5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((R)-3-метилтетрагидрофуран-3-ил)метанон
Получали из N-метокси-N,3-диметилтетрагидрофуран-3-карбоксамида, используя способ 3. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством RP-HPLC (20-60% ацетонитрила/0,1% муравьиной кислоты в воде; 10 мин), получая диастереомерную смесь ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(3-метилтетрагидрофуран-3-ил)метанона (31 мг; выход 28%). Диастереомерную смесь ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(3-метилтетрагидрофуран-3-ил)метанона очищали хиральной SFC (время удерживания = 0,785 мин), получая, как условно обозначено, ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((R)-3-метилтетрагидрофуран-3-ил)метанон (11 мг; 10%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.46-7.35 (m, 3Н), 7.28-7.21 (m, 2Н), 6.24 (ddd, J=56,4; 7,1; 2,0 Гц, 1Н), 5.73 (ddd, J=8,9; 6,4; 3,1 Гц, 1Н), 4.18 (d, J=8,9 Гц, 1Н), 3.84-3.66 (m, 3Н), 3.64 (d, J=8,9 Гц, 1Н), 2.71 (dddd, J=26,6; 15,2; 3,1; 2,0 Гц, 1Н), 2.56 (ddd, J=12,6; 8,2; 6,8 Гц, 1Н), 1.85 (ddd, J=13,0; 7,6; 5,6 Гц, 1Н), 1.48 (s, 3Н). LCMS: RT = 4,68 мин, m/z = 316,2 [М+Н]+. LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 4,68 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 316,2.
Условия SFC: колонка: Chiralpak IG (150 мм × 21,2 мм, 5 мкм); среда: 0,1% NH4OH в МеОН; сначала В 20%, в конце В 20%; скорость потока (70 мл/мин); температура колонки 40°С.
((5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((S)-3-метилтетрагидрофуран-3-ил)метанон
Диастереомерную смесь ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(3-метилтетрагидрофуран-3-ил)метанона очищали хиральной SFC (время удерживания = 0,966 мин), получая, как условно обозначено, ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((S)-3-метилтетрагидрофуран-3-ил)метанон (12 мг; выход 11%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.47-7.34 (m, 3Н), 7.28-7.21 (m, 2Н), 6.24 (ddd, J=56,3; 7,1; 1,9 Гц, 1Н), 5.73 (ddd, J=8,9; 6,5; 3,1 Гц, 1Н), 4.21 (d, J=8,9 Гц, 1Н), 3.83-3.64 (m, 3Н), 3.67 (d, J=8,9 Гц, 1Н), 2.71 (dddd, J=26,6; 15,2; 3,1; 2,0 Гц, 1Н), 2.59-2.52 (m, 1Н), 1.82 (ddd, J=12,6; 7,6; 5,7 Гц, 1Н), 1.47 (s, 3Н). LCMS: RT = 4,68 мин, m/z = 316,2 [М+Н]+. LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 4,68 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 316,2.
Условия SFC: колонка: Chiralpak IG (150 мм × 21,2 мм, 5 мкм); среда: 0,1% NH4OH в МеОН; сначала В 25%, в конце В 25%; скорость потока (70 мл/мин); температура колонки 40°С.
Способ 112
((1R,2R,4S)-7-Оксабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон, ((1S,2R,4R)-7-оксабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон и ((1R,2S,4S)-7-оксабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Стадия 1: N-метокси-N-метил-7-оксабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксамид
Получали из 7-оксабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоновой кислоты, используя способ 2 (184 мг; выход 70%). Продукт использовали без очистки. LCMS: RT = 0,76 мин, m/z = 185,8 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 100% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 1,6 мин): время удерживания 0,76 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 185,8.
Стадия 2: ((1R,2R,4S)-7-оксабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Получали из N-метокси-N-метил-7-оксабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксамида, используя способ 3. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством RP-HPLC (20-60% ацетонитрила/0,1% муравьиной кислоты в воде; 10 мин), получая диастереомерную смесь (7-оксабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона (41 мг; выход 31%). Диастереомерную смесь (7-оксабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона очищали хиральной SFC (время удерживания = 0,442 мин), получая, как условно обозначено, ((1R,2R,4S)-7-оксабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (3 мг; выход 2%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.47-7.35 (m, 3Н), 7.29-7.22 (m, 2Н), 6.25 (ddd, J=56,4; 7,2; 2,0 Гц, 1Н), 5.74 (ddd, J=9,1; 6,4; 3,1 Гц, 1Н), 4.91 (t, J=4,9 Гц, 1Н), 4.59 (t, J=5,2 Гц, 1Н), 3.96-3.87 (m, 1Н), 3.75 (dddd, J=25,8; 15,5; 8,5; 7,2 Гц, 1Н), 2.72 (dddd, J=26,7; 15,1; 3,1; 2,0 Гц, 1Н), 2.00 (dd, J=11,9; 4,6 Гц, 1Н), 1.75 (dddd, J=12,0; 10,9; 5,3; 2,8 Гц, 1Н), 1.66-1.52 (m, 1Н), 1.50-1.36 (m, 2Н), 1.29-1.17 (m, 1Н). LCMS: RT = 4,61 мин, m/z = 328,2 [М+Н]+. LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 4,61 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 328,2.
Условия SFC: колонка: Chiralpak ID (250 мм × 21,2 мм, 5 мкм); среда: 0,1% NH4OH в МеОН; сначала В 25%, в конце В 25%; скорость потока (70 мл/мин); температура колонки 40°С.
((1S,2R,4R)-7-Оксабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Диастереомерную смесь (7-оксабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона очищали хиральной SFC (время удерживания = 0,523 мин), получая, как условно обозначено, ((1S,2R,4R)-7-оксабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (3 мг; выход 2%). 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 7.43-7.34 (m, 3Н), 7.25-7.19 (m, 2Н), 6.03 (ddd, J=55,8; 7,1; 1,7 Гц, 1Н), 5.50 (ddd, J=8,8; 6,2; 2,8 Гц, 1Н), 4.83 (d, J=4,7 Гц, 1Н), 4.70 (t, J=4,8 Гц, 1Н), 3.77-3.51 (m, 2Н), 2.95 (dddd, J=25,0; 15,4; 2,8; 1,7 Гц, 1Н), 2.32 (dtd, J=12,2; 5,0; 2,1 Гц, 1Н), 1.90-1.63 (m, 5Н). LCMS: RT = 4,54 мин, m/z = 328,2 [М+Н]+. LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 4,54 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 328,2.
Условия SFC: колонка: Chiralpak ID (250 мм × 21,2 мм, 5 мкм); среда: 0,1% NH4OH в МеОН; сначала В 25%, в конце В 25%; скорость потока (70 мл/мин); температура колонки 40°С.
((1R,2S,4S)-7-Оксабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Диастереомерную смесь (7-оксабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона очищали хиральной SFC (время удерживания = 1,220 мин), получая, как условно обозначено, ((1R,2S, 4S)-7-оксабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (21 мг; выход 16%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.47-7.35 (m, 3Н), 7.31-7.24 (m, 2Н), 6.23 (ddd, J=56,3; 7,2; 1,9 Гц, 1Н), 5.74 (ddd, J=8,9; 6,5; 3,1 Гц, 1Н), 4.94 (t, J=4,9 Гц, 1Н), 4.59 (t, J=5,2 Гц, 1Н), 3.93-3.83 (m, 1Н), 3.75 (dddd, J=26,1; 15,5; 8,5; 7,2 Гц, 1Н), 2.72 (dddd, J=26,6; 15,2; 3,1; 1,9 Гц, 1Н), 1.99 (dd, J=12,0; 4,6 Гц, 1Н), 1.73 (dddd, J=11,9; 10,8; 5,3; 2,8 Гц, 1Н), 1.59 (ddt, J=12,8; 8,5; 4,8 Гц, 1Н), 1.51-1.37 (m, 2Н), 1.28-1.17 (m, 1Н). LCMS: RT = 4,61 мин, m/z = 328,2 [М+Н]+.
LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 4,61 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 328,2.
Условия SFC: колонка: Chiralpak ID (250 мм × 21,2 мм, 5 мкм); среда: 0,1% NH4OH в МеОН; сначала В 25%, в конце В 25%; скорость потока (70 мл/мин); температура колонки 40°С.
Способ 113
1-((5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-(трифторметокси)этан-1-он
Стадия 1: N-метокси-N-метил-2-(трифторметокси)ацетамид
Получали из 2-(трифторметокси)уксусной кислоты, используя способ 2 (129 мг; выход 20%). Продукт использовали без очистки. LCMS: RT = 0,88 мин, m/z = 187,8 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 100% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 1,6 мин): время удерживания 0,88 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 187,8.
Стадия 2: 1-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-(трифторметокси)этан-1-он
Получали из N-метокси-N-метил-2-(трифторметокси)ацетамида, используя способ 3. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством RP-HPLC (20-60% ацетонитрила/0,1% муравьиной кислоты в воде, 10 мин), получая 1-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-(трифторметокси)этан-1-он (2 мг; выход 2%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.47-7.36 (m, 3Н), 7.30-7.24 (m, 2Н), 6.26 (ddd, J=56,2; 7,2; 1,9 Гц, 1Н), 5.75 (ddd, J=8,8; 6,5; 3,1 Гц, 1Н), 5.50 (d, J=1,2 Гц, 2Н), 3.84-3.63 (m, 1Н), 2.74 (dddd, J=26,8; 15,3; 3,2; 1,9 Гц, 1Н). LCMS: RT = 5,39 мин, m/z = 330,1 [М+Н]+. LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 5,39 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 330,1.
Способ 114
((1R,5R)-3-Оксабицикло[3,1.0]гексан-1-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон и ((1S,5S)-3-оксабицикло[3,1.0]гексан-1-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Стадия 1: N-метокси-N-метил-3-оксабицикло[3,1.0]гексан-1-карбоксамид
Получали из 3-оксабицикло[3,1.0]гексан-1-карбоновой кислоты, используя способ 3 (150 мг; выход 56%). Продукт использовали без очистки. LCMS: RT = 0,72 мин, m/z = 171,9 [М+Н]+. LCMS (от 5 до 100% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 1,6 мин): время удерживания 0,72 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 171,9.
Стадия 2: ((1R,5R)-3-оксабицикло[3,1.0]гексан-1-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Получали из N-метокси-N-метил-3-оксабицикло[3,1.0]гексан-1-карбоксамида, используя способ 3. Неочищенную реакционную смесь очищали посредством RP-HPLC (20-60% ацетонитрила/0,1% муравьиной кислоты в воде; 10 мин), получая диастереомерную смесь (3-оксабицикло[3,1.0]гексан-1-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона (30 мг; выход 27%). Диастереомерную смесь (3-оксабицикло[3,1.0]гексан-1-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона очищали хиральной SFC (время удерживания = 0,736 мин), получая, как условно обозначено, ((1R,5R)-3-оксабицикло[3,1.0]гексан-1-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (28 мг; выход 25%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.48-7.33 (m, 3Н), 7.24 (dt, J=7,8; 1,5 Гц, 2Н), 6.22 (dddd, J=56,4; 7,2; 3,5; 1,9 Гц, 1Н), 5.76-5.65 (m, 1Н), 4.11-4.04 (m, 1Н), 4.00 (dd, J=8,7; 1,7 Гц, 1Н), 3.81-3.64 (m, 3Н), 2.83-2.61 (m, 2Н), 1.84 (td, J=8,3; 3,9 Гц, 1Н), 1.13 (dd, J=5,7; 4,0 Гц, 1Н). LCMS: RT = 4,58 мин, m/z = 314,1 [М+Н]+.
LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 4,58 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 314,1.
Условия SFC: колонка: Chiralcel ОХ (50 мм × 4,6 мм, 3 мкм); среда: 0,1% NH4OH в МеОН; сначала В 25%, в конце В 25%; скорость потока (4 мл/мин); температура колонки 40°С.
((1S,5S)-3-Оксабицикло[3,1.0]гексан-1-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Диастереомерную смесь (3-оксабицикло[3,1.0]гексан-1-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона очищали хиральной SFC (время удерживания = 0,914 мин), получая, как условно обозначено, ((1S,5S)-3-оксабицикло[3,1.0]гексан-1-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (0,5 мг; выход 0,05%). LCMS: RT = 4,58 мин, m/z = 314,2 [М+Н]+. LCMS (от 2 до 98% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 7 мин): время удерживания 4,58 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 314,2.
Условия SFC: колонка: Chiralcel ОХ (50 мм × 4,6 мм, 3 мкм); среда: 0,1% NH4OH в МеОН; сначала В 25%, в конце В 25%; скорость потока (4 мл/мин); температура колонки 40°С.
Способ 115
Циклопропил-(5-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2-ил)метанон и (S)-циклопропил(5-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2-ил)метанон
Стадия 1: 2-бром-5-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин
Водород барботировали через раствор 5-фенил-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2-амина (0,90 г; 4,28 ммоль) и оксида платины(IV) (97,2 мг; 0,428 ммоль) в уксусной кислоте (43 мл). Через 5 мин иглу удаляли из раствора и реакционную смесь оставляли перемешиваться в атмосфере водорода в течение 48 ч (конверсия приблизительно на 50%). Реакционную смесь фильтровали через набивку целита, используя метанол. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и неочищенный остаток переносили на следующую стадию без дополнительной очистки.
К раствору бромида меди(II) (1,72 г; 7,61 ммоль) и трет-бутилнитрита (0,750 мл; 5,71 ммоль) в ацетонитриле (7,6 мл) при 60°С добавляли неочищенный 5-фенил-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2-амин (0,80 г; 3,81 ммоль). Затем реакционную смесь нагревали при 75°С в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры (кт) добавляли 1 М раствор HCl. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом. Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (диоксид кремния, от 0% до 50% изопропилацетата в гептане), получая 2-бром-5-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин (0,354 г; 1,27 ммоль; выход 33%). LCMS: RT = 1,15 мин, m/z = 277,8 [М=Н]+.
Стадия 2: циклопропил-(5-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2-ил)метанон
(S)-циклопропил(5-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2-ил)метанон
Хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в THF; 0,27 мл; 0,540 ммоль) по каплям добавляли к раствору 2-бром-5-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридина (50 мг; 0,180 ммоль) и N-метокси-N-метилциклопропанкарбоксамида (71 мг; 0,54 ммоль) в THF (1,8 мл) при 0°С в течение 15 мин. Через 1 ч добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (2×20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали препаративной TLC (100%-ный изопропилацетат), получая циклопропил-(5-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2-ил)метанон (20,9 мг; 0,078 ммоль; выход 44%). Неочищенное вещество далее очищали препаративной SFC, получая, как условно обозначено, (S)-циклопропил(5-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2-ил)метанон.
Циклопропил-(5-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2-ил)метанон:
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.41-7.27 (m, 3Н), 7.12-7.04 (m, 2Н), 5.62 (t, J=5,9 Гц, 1Н), 3.12-2.83 (m, 3Н), 2.46-2.35 (m, 1Н), 2.13-2.01 (m, 1Н), 1.93-1.81 (m, 2Н), 1.04-0.92 (m, 4Н). LCMS: RT = 4,37 мин, m/z = 268,1 [М+Н]+.
(S)-Циклопропил(5-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2-ил)метанон:
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.42-7.23 (m, 3Н), 7.12-7.04 (m, 2Н), 5.62 (t, J=6,0 Гц, 1Н), 3.12-2.85 (m, 3Н), 2.45-2.35 (m, 1Н), 2.13-2.00 (m, 1Н), 1.96-1.82 (m, 2Н), 1.05-0.93 (m, 4Н). LCMS: RT = 4,39 мин, m/z = 268,1 [М+Н]+.
Информация о препаративной SFC: колонка: Chiralcel OJ, 5 мкм (250×21,2 мм); подвижная фаза: двуокись углерода (А)/0,1% гидроксида аммония в метаноле (В), программа элюирования: изократическое, 15% В; скорость потока: 70 мл/мин; температура колонки: 30°С; длина волны: 220 нм.
Способ 116
Циклопропил((5S,7R)-7-гидрокси-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон, циклопропил-[рац-(5S,7R)-7-фтор-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон и циклопропил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон
Стадия 1: 1-(3-бром-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-(о-толил)пропан-1,3-дион
Бис(триметилсилил)амид лития (1,0 М раствор в THF; 26 мл; 26 ммоль) добавляли к раствору 1-(о-толил)этанона (1,9 мл; 15 ммоль) и метил-3-бром-1Н-1,2,4-триазол-5-карбоксилата (2,0 г; 9,7 ммоль) в THF (32 мл) при -78°С. Затем реакционную смесь нагревали до кт и перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли водой и изопропилацетатом. Добавляли 5%-ный раствор лимонной кислоты (100 мл) и водный слой экстрагировали изопропилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (диоксид кремния, от 0% до 80% изопропилацетата в гептане), получая 1-(3-бром-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-(о-толил)пропан-1,3-дион (2,03 г; 6,59 ммоль; выход 68%). LCMS: RT = 1,28 мин, m/z = 307,8 [М+Н]+.
Стадия 2: (5S,7R)-2-бром-7-фтор-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол и (5S,7R)-2-бром-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол и (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
Боргидрид натрия (3,84 г; 97,4 ммоль) добавляли к раствору 1-(3-бром-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-(о-толил)пропан-1,3-диона (2,00 г; 6,49 ммоль) в этаноле (130 мл) при кт. Через 1 ч добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток растворяли в изопропилацетате и воде. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (6×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, концентрировали и неочищенный остаток переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. LCMS: RT = 0,96 мин, m/z = 311,8 [М+Н]+. К раствору неочищенного остатка в дихлорметане (65 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (65 мл) при кт. Через 30 мин реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток растворяли в дихлорметане. Добавляли воду и насыщенный водный раствор бикарбоната натрия. Водный слой экстрагировали дихлорметаном (4×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, концентрировали и неочищенный остаток переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. LCMS: RT = 1,08 мин, m/z = 293,8 [М+Н]+ и LCMS: RT = 0,98 мин, m/z = 293,8 [М+Н]+. К раствору неочищенного остатка в дихлорметане (65 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (3,60 мл; 26,0 ммоль) при кт. Через 30 мин осторожно добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия. Водный слой экстрагировали дихлорметаном (4×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (диоксид кремния, от 10% до 100% изопропилацетата в гептане, затем 10%-ный метанол в дихлорметане), получая смесь 2:1 (5S,7R)-2-бром-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола и (5S,7R)-2-бром-7-фтор-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (0,470 г) и (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (0,350 г; 1,18 ммоль; выход 18%).
(5S,7R)-2-Бром-7-фтор-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.30-7.18 (m, 3Н), 6.88 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 6.30 (ddd, J=56,2; 6,8; 1,6 Гц, 1Н), 6.11 (td, J=6,8; 3,8 Гц, 1Н), 3.44-3.27 (m, 1Н), 2.92 (ddt, J=27,9; 15,2; 6,5 Гц, 1Н), 2.36 (s, 3Н). LCMS: RT = 1,26 мин, m/z = 295,8 [М+Н]+.
(5S,7S)-2-Бром-7-фтор-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.38-7.09 (m, 3Н), 6.78-6.69 (m, 1Н), 6.20 (ddd, J=56,4; 7,2; 1,9 Гц, 1Н), 5.95-5.80 (m, 1Н), 3.69 (dddd, J=25,4; 15,4; 8,5; 7,2 Гц, 1Н), 2.66-2.51 (m, 1Н), 2.39 (s, 3Н). LCMS: RT = 1,25 мин, m/z = 295,7 [М+Н]+.
Стадия 3: циклопропил((5S,7R)-7-фтор-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон и циклопропил((5S,7R)-7-гидрокси-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в THF; 2,4 мл; 4,76 ммоль) по каплям в течение 15 мин добавляли к раствору смеси 2:1 (5S,7R)-2-бром-5-(o-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола и (5S,7R)-2-бром-7-фтор-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (0,470 г) и N-метокси-N-метилциклопропанкарбоксамида (0,634 г; 4,76 ммоль) в THF (15,9 мл) при 0°С. Через 1 ч добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (2×20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали препаративной HPLC/SFC, получая, как условно обозначено, циклопропил((5S,7R)-7-фтор-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (137 мг; 0,480 ммоль) и циклопропил((5S,7R)-7-гидрокси-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (33,8 мг; 0,119 ммоль).
Циклопропил((5S,7R)-7-фтор-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.33-7.14 (m, 3Н), 6.89 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 6.35 (ddd, J=56,2; 6,8; 1,6 Гц, 1Н), 6.19 (td, J=6,9; 3,2 Гц, 1Н), 3.59-3.27 (m, 1Н), 3.11-2.91 (m, 2Н), 2.38 (s, 3Н), 1.14-1.01 (m, 4Н). LCMS: RT = 4,81 мин, m/z = 286,1 [М+Н]+.
Информация о препаративной SFC: колонка: Torus Diol, 5 мкм (150×30 мм), подвижная фаза: двуокись углерода (А)/0,1% гидроксида аммония в метаноле (В), программа элюирования: изократическое, 5% В; скорость потока: 150 мл/мин; температура колонки: 25°С; длина волны: 220 нм.
Циклопропил((5S,7R)-7-гидрокси-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.30-7.13 (m, 3Н), 7.01-6.94 (m, 1Н), 6.25 (bs, 1Н), 5.75 (dd, J=8,1; 5,8 Гц, 1Н), 5.23 (dd, J=7,9; 4,6 Гц, 1Н), 3.63-3.52 (m, 1Н), 3.03-2.92 (m, 1Н), 2.38 (s, 3Н), 2.31-2.14 (m, 1Н), 1.09-0.96 (m, 4Н). LCMS: RT = 4,08 мин, m/z = 284,1 [М+Н]+.
Информация о препаративной HPLC: колонка: Gemini-NX С18, 5 мкм (50×30 мм), подвижная фаза: 0,1% гидроксида аммония в воде (А)/ацетонитрил (В), программа элюирования: градиент: от 10% до 60% В; скорость потока: 60 мл/мин; температура колонки: 25°С; длина волны: 254 нм.
Стадия 4: циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в THF; 1,80 мл; 3,55 ммоль) по каплям в течение 15 мин добавляли к раствору (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (0,350 г; 1,18 ммоль) и N-метокси-N-метилциклопропанкарбоксамида (0,472 г; 3,55 ммоль) в THF (11,8 мл) при 0°С. Через 1 ч добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (2×20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали препаративной SFC, получая, как условно обозначено, циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (0,179 г; 0,627 ммоль; выход 53%).
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.35-7.14 (m, 3Н), 6.76-6.66 (m, 1Н), 6.26 (ddd, J=56,3; 7,2; 1,9 Гц, 1Н), 5.94 (ddd, J=8,5; 6,6; 3,2 Гц, 1Н), 3.94-3.48 (m, 1Н), 3.01 (ddt, J=7,6; 6,1; 5,2 Гц, 1Н), 2.66 (dddd, J=26,8; 15,1; 3,2; 2,0 Гц, 1Н), 2.42 (s, 3Н), 1.18-0.99 (m, 4Н). LCMS: RT = 4,80 мин, m/z = 286,1 [М+Н]+.
Информация о препаративной SFC: колонка: Torus Diol, 5 мкм (150×30 мм), подвижная фаза: двуокись углерода (А)/0,1% гидроксида аммония в метаноле (В), программа элюирования: изократическое, 5% В; скорость потока: 150 мл/мин; температура колонки: 25°С; длина волны: 220 нм.
Способ 117
Циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(3-фторпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон и циклопропил((5S,7R)-7-фтор-5-(3-фторпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Стадия 1: метил-3-(3-фторпиридин-2-ил)-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат
Триэтиламин (9,8 мл; 70 ммоль) добавляли к раствору (2Z)-3-фтор-N-гидрокси-пиридин-2-карбоксимидоилхлорида (12,0 г; 68,7 ммоль) и метилакрилата (6,3 мл; 70 ммоль) в дихлорметане (460 мл) при 0°С. Реакционную смесь нагревали до кт и перемешивали в течение еще 4 ч. Добавляли воду и водный слой экстрагировали дихлорметаном (3×200 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (диоксид кремния, от 0% до 100% изопропилацетата в гептане), получая метил-3-(3-фтор-2-пиридил)-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат (10,6 г; 47,3 ммоль; выход 68%).
Для получения (2Z)-3-фтор-N-гидрокси-пиридин-2-карбохимидоилхлорида см.: WO 2006/114706, 2006, А1. LCMS: RT = 0,89 мин, m/z = 224,8 [М+Н]+.
Стадия 2: 3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-5-(3-фторпиридин-2-ил)пирролидин-2-он
Хлорида никеля(II) гексагидрат (21,6 г; 89,2 ммоль) и метил-3-(3-фтор-2-пиридил)-4,5-дигидроизоксазол-5-карбоксилат (10,0 г; 44,6 ммоль) растворяли в метаноле (372 мл) и охлаждали до -30°С в атмосфере азота. Добавляли боргидрид натрия (8,79 г; 223 ммоль) в виде порций в течение 10 мин. Затем реакционную смесь нагревали до кт и перемешивали в течение еще 1 ч. Добавляли гидроксид аммония (100 мл) и реакционную смесь оставляли перемешиваться при кт в течение ночи. Осадок отфильтровывали. Фильтрат концентрировали и неочищенный остаток переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. LCMS: RT = 0,75 мин, m/z = 196,8 [М+Н]+. К раствору неочищенного субстрата, имидазола (9,11 г; 134 ммоль) и трет-бутилдиметилхлорсилана (13,9 г; 89,2 ммоль) в диметилсульфоксиде (89 мл) добавляли 4-диметиламинопиридин (0,545 г; 4,46 ммоль) при 40°С. Через 24 ч реакционную смесь разбавляли водой и изопропилацетатом. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (4×200 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (диоксид кремния, от 0% до 100% изопропилацетата в гептане), получая 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-(3-фтор-2-пиридил)пирролидин-2-он (9,6 г; 31 ммоль; выход 69%).
1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) смесь 1:1 диастереомеров: δ 8.41-8.36 (m, 1Н), 7.45-7.35 (m, 1Н), 7.31-7.22 (m, 1Н), 6.21 (s, 0,5Н), 5.87 (s, 0,5Н), 5.18-5.10 (m, 0,5Н), 4.90 (ddd, J=9,5; 6,3; 1,3 Гц, 0,5Н), 4.59-4.47 (m, 1Н), 3.01-2.90 (m, 0,5Н), 2.61 (ddd, J=13,0; 7,5; 3,7 Гц, 0,5Н), 2.48 (ddd, J=13,2; 8,1; 6,5 Гц, 0,5Н), 2.21 (dt, J=12,3; 9,5 Гц, 0,5Н), 0.93 (s, 4.5Н), 0.91 (s, 4.5Н), 0.22-0.13 (m, 6Н). LCMS: RT = 1,38 мин, m/z = 311,0 [М+Н]+.
Стадия 3: этил-5-(3-фторпиридин-2-ил)-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
Гидрид натрия (60%-ный в масле; 0,390 г; 9,7 ммоль) добавляли к раствору 3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-(3-фтор-2-пиридил)пирролидин-2-она (2,0 г; 6,4 ммоль) в N,N-диметилформамиде (64 мл) при 0°С. Через 30 мин добавляли О-дифенилфосфорилгидроксиламин (2,3 г; 9,7 ммоль). Реакционную смесь нагревали до кт и перемешивали в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали и фильтрат упаривали при пониженном давлении. Неочищенный остаток переносили на следующую реакционную стадию без дополнительной очистки. LCMS: RT = 1,34 мин, m/z = 326,0 [М+Н]+ и LCMS: RT = 1,30 мин, m/z = 326,0 [М+Н]+. Этил-2-этокси-2-иминоацетат (2,50 г; 16 ммоль) и неочищенный остаток растворяли в этаноле (23 мл) и реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 16 ч. После охлаждения до кт реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток переносили на следующую реакционную стадию без дополнительной очистки. LCMS: RT = 1,38 мин, m/z = 425,0 [М+Н]+ и LCMS: RT = 1,34 мин, m/z = 425,0 [М+Н]+. К раствору неочищенного остатка в толуоле (25 мл) добавляли п-толуолсульфоновой кислоты моногидрат (1,5 г; 7,7 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 120°С в течение 16 ч. После охлаждения до кт реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток переносили на следующую реакционную стадию без дополнительной очистки. LCMS: RT = 1,55 мин, m/z = 407,0 [М+Н]+ и LCMS: RT = 1,50 мин, m/z = 407,1 [М+Н]+. К раствору неочищенного остатка в THF (21 мл) добавляли фторид тетрабутиламмония (1,0 М раствор в THF; 6,4 мл; 6,4 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 40°С в течение 1 ч. После охлаждения до кт добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (4×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (диоксид кремния, от 0% до 10% метанола в дихлорметане), получая этил-5-(3-фтор-2-пиридил)-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (0,800 г; 2,74 ммоль; выход 42%). 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) смесь 1:1 диастереомеров: δ 8.41-8.29 (m, 1Н), 7.63-7.26 (m, 2Н), 6.12 (dd, J=8,1; 4,4 Гц, 0,5Н), 6.07 (d, J=8,2 Гц, 0,5Н), 5.64 (dd, J=7,6; 4,0 Гц, 0,5Н), 5.21 (d, J=6,5 Гц, 0,5Н), 4.51-4.38 (m, 2Н), 3.45 (ddd, J=14,7; 8,3; 6,6 Гц, 0,5Н), 3.29 (ddd, J=13,8; 7,5; 4,3 Гц, 0,5Н), 3.10 (ddd, J=13,8; 8,1; 4,0 Гц, 0,5Н), 2.74 (d, J=14,4 Гц, 0,5Н), 1.40 (t, J=7,1 Гц, 3Н). LCMS: RT = 0,89 мин, m/z = 292,9 [М+Н]+.
Стадия 4: этил-7-фтор-5-(3-фторпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат
Трифторид диэтиламиносеры (1,53 мл; 10,9 ммоль) добавляли к раствору этил-5-(3-фтор-2-пиридил)-7-гидрокси-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (0,800 г; 2,74 ммоль) в дихлорметане (27,4 мл) при кт. Через 20 мин добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия. Водный слой экстрагировали дихлорметаном (4×30 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (диоксид кремния; от 0% до 10% DCM в метаноле), получая этил-7-фтор-5-(3-фтор-2-пиридил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилат (0,800 г; 2,72 ммоль; выход 99%). LCMS: RT = 1,01 мин, m/z = 294,8 [М+Н]+.
Стадия 5: 7-фтор-5-(3-фторпиридин-2-ил)-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид
Гидроксида лития моногидрат (1,20 г; 27 ммоль) добавляли к раствору этил-7-фтор-5-(3-фтор-2-пиридил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксилата (0,80 г; 2,7 ммоль) в THF (9,1 мл), воде (4,5 мл) и метаноле (9,1 мл) при кт. Через 1 ч реакционную смесь нейтрализовали 1 М раствором HCl (27 мл). Реакционную смесь экстрагировали изопропилацетатом (10×20 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток переносили на следующую реакционную стадию без дополнительной очистки. LCMS: RT = 0,83 мин, m/z = 266,8 [М+Н]+. К раствору 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (0,790 г; 4,1 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (0,370 г; 2,7 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (0,540 г; 5,4 ммоль) и неочищенного остатка в N,N-диметилформамиде (9,1 мл) добавляли триэтиламин (1,5 мл; 11 ммоль) при кт. Через 2 ч реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (от 0% до 10% метанола в дихлорметане), получая 7-фтор-5-(3-фтор-2-пиридил)-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамид (0,224 г; 0,724 ммоль; выход 27%). LCMS: RT = 0,85 мин, m/z = 309,9 [М+Н]+.
Стадия 6: циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(3-фторпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон и циклопропил((5S,7R)-7-фтор-5-(3-фторпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Бромид циклопропилмагния (0,5 М раствор в THF; 5,7 мл; 2,85 ммоль) добавляли к раствору 7-фтор-5-(3-фтор-2-пиридил)-N-метокси-N-метил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбоксамида (0,220 г; 0,711 ммоль) в THF (2,4 мл) при -50°С. Через 20 мин реакционную смесь помещали в баню при кт и содержимое реакционной смеси перемешивали в течение 3 мин. Добавляли воду и реакционную смесь разбавляли изопропилацетатом. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (4×20 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали препаративной SFC, получая, как условно обозначено, циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(3-фторпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (16,59 мг; 0,057 ммоль; выход 8%) и циклопропил((5S,7R)-7-фтор-5-(3-фторпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5H-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (23,7 мг; 0,082 ммоль; выход 12%).
Циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(3-фторпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8.45 (dt, J=4,6; 1,5 Гц, 1Н), 7.89 (ddd, J=10,0; 8,4; 1,3 Гц, 1Н), 7.57 (dt, J=8,6; 4,4 Гц, 1Н), 6.26 (ddd, J=56,6; 7,7; 2,7 Гц, 1Н), 6.10-5.99 (m, 1Н), 3.74 (dddd, J=19,7; 14,7; 8,5; 7,7 Гц, 1Н), 3.16-2.84 (m, 2Н), 1.18-0.93 (m, 4Н). LCMS: RT = 3,64 мин, m/z = 291,1 [М+Н]+.
Информация о препаративной SFC: колонка: Chiralcel OJ, 5 мкм (250×21,2 мм), подвижная фаза: двуокись углерода (А)/метанол (В), программа элюирования: изократическое, 15% В; скорость потока: 70 мл/мин; температура колонки: 35°С; длина волны: 261 нм.
Циклопропил((5S,7R)-7-фтор-5-(3-фторпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8.42 (dt, J=4,6; 1,5 Гц, 1Н), 7.89 (ddd, J=10,0; 8,5; 1,3 Гц, 1Н), 7.56 (dt, J=8,6; 4,4 Гц, 1Н), 6.58-6.32 (m, 2Н), 3.55-3.19 (m, 2Н), 2.95 (tt, J=7,5; 4,9 Гц, 1Н), 1.13-0.98 (m, 4Н). LCMS: RT = 3,82 мин, m/z = 291,1 [М+Н]+.
Информация о препаративной SFC: колонка: Chiralcel OJ, 5 мкм (250×21,2 мм), подвижная фаза: двуокись углерода (А)/метанол (В), программа элюирования: изократическое, 15% В; скорость потока: 70 мл/мин; температура колонки: 35°С; длина волны: 261 нм.
Способ 118
Циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Стадия 1: 1-(5-бром-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-1,2,4-триазол-3-ил)-3-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)пропан-1,3-дион
Бис(триметилсилил)амид лития (1,0 М раствор в THF; 9,5 мл; 9,5 ммоль) добавляли к раствору метил-5-бром-1-(2-триметилсилилэтоксиметил)-1,2,4-триазол-3-карбоксилата (2,0 г; 5,9 ммоль) и 1-(1-метилпиразол-4-ил)этанона (1,20 г; 9,5 ммоль) в THF (40 мл) при 0°С. Затем реакционную смесь нагревали до кт и перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли водой и изопропилацетатом. Добавляли раствор 5%-ной лимонной кислоты и водный слой экстрагировали изопропилацетатом (4×100 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (диоксид кремния; от 0% до 100% изопропилацетата в гептане), получая 1-[5-бром-1-(2-триметилсилилэтоксиметил)-1,2,4-триазол-3-ил]-3-(1-метилпиразол-4-ил)пропан-1,3-дион (2,40 г; 5,60 ммоль; выход 94%). LCMS: RT = 1,57 мин, m/z = 427,9 [М+Н]+.
Стадия 2: 2-бром-7-фтор-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
Боргидрид натрия (3,30 г; 84 ммоль) добавляли к раствору 1-[5-бром-1-(2-триметилсилилэтоксиметил)-1,2,4-триазол-3-ил]-3-(1-метилпиразол-4-ил)пропан-1,3-диона (2,4 г; 5,6 ммоль) в этаноле (110 мл) при кт. Через 30 мин реакцию гасили насыщенным водным раствором хлорида аммония и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Неочищенный остаток растворяли в изопропилацетате и разбавляли водой. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (4×100 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. LCMS: RT = 1,17 мин, m/z = 431,9 [М+Н]+. К неочищенному остатку добавляли трифторуксусную кислоту (56 мл) и дихлорметан (56 мл) и реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 16 ч. После охлаждения до кт реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток растворяли в дихлорметане и добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия. Водный слой экстрагировали дихлорметаном (4×100 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. LCMS: RT = 0,82 мин, m/z = 283,8 [М+Н]+. К раствору неочищенного остатка в дихлорметане (56 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (3,1 мл; 22 ммоль) при кт. Через 20 мин к реакционной смеси добавляли бикарбонат натрия (5,0 г). Реакционную смесь разбавляли водой и изопропилацетатом. Добавляли рассол и водный слой экстрагировали изопропилацетатом (4×100 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (от 50% до 100% изопропилацетата в гептане), получая 2-бром-7-фтор-5-(1-метилпиразол-4-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (0,379 г; 1,32 ммоль; выход 24%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) смесь 1:1 диастереомеров: δ 7.84 (s, 0,5Н), 7.78 (s, 0,5Н), 7.52 (d, J=0,8 Гц, 0,5Н), 7.45 (d, J=0,8 Гц, 0,5Н), 6.33-6.03 (m, 1Н), 5.88-5.74 (m, 0,5Н), 5.63-5.51 (m, 0,5Н), 3.83 (s, 1.5Н), 3.82 (s, 1.5Н), 3.65-3.47 (m, 0,5Н), 3.25-3.00 (m, 1Н), 2.81-2.64 (m, 0,5Н). LCMS: RT = 0,92 мин, m/z = 285,8 [М+Н]+.
Стадия 3: циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в THF; 2,0 мл; 3,97 ммоль) добавляли к раствору 2-бром-7-фтор-5-(1-метилпиразол-4-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (0,379 г; 1,32 ммоль) и N-метокси-N-метилциклопропанкарбоксамида (0,529 г; 3,97 ммоль) в THF (13,2 мл) при 0°С. Через 5 мин реакционную смесь нагревали до кт и перемешивали в течение еще 1 ч. Добавляли воду и реакционную смесь разбавляли изопропилацетатом. Добавляли рассол и водный слой экстрагировали изопропилацетатом (4×50 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали препаративной SFC, получая, как условно обозначено, циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон (44,23 мг; 0,161 ммоль; выход 12%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.80 (d, J=0,8 Гц, 1Н), 7.48 (d, J=0,8 Гц, 1Н), 6.21 (ddd, J=56,4; 7,0; 2,4 Гц, 1Н), 5.66 (ddd, J=8,2; 6,0; 3,6 Гц, 1Н), 3.81 (s, 3Н), 3.73-3.55 (m, 1Н), 2.99 (tt, J=7,5; 4,9 Гц, 1Н), 2.80 (dddd, J=26,4; 14,9; 3,7; 2,4 Гц, 1Н), 1.14-0.95 (m, 4Н). LCMS: RT = 3,10 мин, m/z = 276,1 [М+Н]+.
Информация о препаративной SFC: колонка: Whelk-O1, 5 мкм (150×21,2 мм), подвижная фаза: двуокись углерода (А)/0,1% гидроксида аммония в метаноле (В), программа элюирования: изократическое, 35% В; скорость потока: 70 мл/мин; температура колонки: 40°С; длина волны: 220 нм.
Способ 119
Циклопропил(7-фтор-5-(5-метилизоксазол-4-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Стадия 1: 1-(5-бром-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-1,2,4-триазол-3-ил)-3-(5-метилизоксазол-4-ил)пропан-1,3-дион
Бис(триметилсилил)амид лития (1,0 М раствор в THF; 7,1 мл; 7,1 ммоль) добавляли к раствору метил-5-бром-1-(2-триметилсилилэтоксиметил)-1,2,4-триазол-3-карбоксилата (1,5 г; 4,5 ммоль) и 1-(5-метилизоксазол-4-ил)этанона (0,890 г; 7,1 ммоль) в THF (30 мл) при 0°С. Через 5 мин реакционную смесь нагревали до кт и перемешивали в течение еще 30 мин. Добавляли воду и реакционную смесь разбавляли изопропилацетатом. Добавляли 10%-ный водный раствор лимонной кислоты для подведения значения рН до 2. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (2×200 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (диоксид кремния, от 0% до 100% изопропилацетата в гептане), получая 1-[5-бром-1-(2-триметилсилилэтоксиметил)-1,2,4-триазол-3-ил]-3-(5-метилизоксазол-4-ил)пропан-1,3-дион (1,6 г; 3,7 ммоль; выход 84%). LCMS: RT = 1,35 мин, m/z = 428,9 [М+Н]+.
Стадия 2: циклопропил(7-фтор-5-(5-метилизоксазол-4-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Боргидрид натрия (3,30 г; 84 ммоль) добавляли к раствору 1-[5-бром-1-(2-триметилсилилэтоксиметил)-1,2,4-триазол-3-ил]-3-(5-метилизоксазол-4-ил)пропан-1,3-диона (2,4 г; 5,6 ммоль) в этаноле (110 мл) при кт. Через 30 мин реакцию гасили насыщенным водным раствором хлорида аммония. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Неочищенный остаток растворяли в изопропилацетате и разбавляли водой. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (4×100 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. LCMS: RT = 1,27 мин, m/z = 432,9 [М+Н]+. К неочищенному остатку добавляли серную кислоту (10 мл) и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 2 ч. После охлаждения до кт реакционную смесь разбавляли водой. Добавляли гидроксид натрия (3 М раствор в воде) до тех пор, пока водный слой не становился основным. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. К раствору неочищенного остатка в дихлорметане (8,4 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (0,470 мл; 3,37 ммоль) при кт. Через 20 мин добавляли бикарбонат натрия (2,0 г). Реакционную смесь разбавляли водой и изопропилацетатом. Добавляли рассол и водный слой экстрагировали изопропилацетатом (4×20 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток (0,110 г; 0,383 ммоль) переносили на следующую реакционную стадию без дополнительной очистки. LCMS: RT = 1,02 мин, m/z = 286,8 [М+Н]+. К раствору неочищенного остатка и N-метокси-N-метилциклопропанкарбоксамида (0,153 г; 1,15 ммоль) в THF (3,8 мл) добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М в THF; 0,38 мл; 0,766 ммоль) при 0°С. Через 5 мин реакционную смесь нагревали до кт и перемешивали в течение дополнительных 20 мин. Добавляли воду и реакционную смесь разбавляли изопропилацетатом. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (4×20 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали препаративной SFC, получая диастереомерную смесь циклопропил(7-фтор-5-(5-метилизоксазол-4-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона (1,26 мг; 0,0046 ммоль). LCMS: RT = 3,63 мин, m/z = 277,1 [М+Н]+.
Информация о препаративной SFC: колонка: Chiracel ОХ, 5 мкм (150×21,2 мм), подвижная фаза: двуокись углерода (А)/метанол (В), программа элюирования: изократическое, 20% В; скорость потока: 70 мл/мин; температура колонки: 40°С; длина волны: 220 нм.
Способ 120
((5S,7S)-5-(4-Хлор-1-метил-1Н-пиразол-3-ил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(циклопропил)метанон и ((5S,7R)-5-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-3-ил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(циклопропил)метанон
Стадия 1: 1-(5-бром-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-1,2,4-триазол-3-ил)-3-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-3-ил)пропан-1,3-дион
Бис(триметилсилил)амид лития (1,0 М раствор в THF; 5,9 мл; 5,9 ммоль) добавляли к раствору метил-5-бром-1-(2-триметилсилилэтоксиметил)-1,2,4-триазол-3-карбоксилата (2,0 г; 5,9 ммоль) и 1-(4-хлор-1-метил-пиразол-3-ил)этанона (0,940 г; 5,9 ммоль) в THF (40 мл) при 0°С. Через 5 мин реакционную смесь нагревали до кт и перемешивали в течение еще 30 мин. Добавляли воду и реакционную смесь разбавляли изопропилацетатом. Добавляли 10%-ный водный раствор лимонной кислоты для подведения значения рН до 2. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (2×200 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (диоксид кремния, от 0% до 100% изопропилацетата в гептане), получая 1-[5-бром-1-(2-триметилсилилэтоксиметил)-1,2,4-триазол-3-ил]-3-(4-хлор-1-метил-пиразол-3-ил)пропан-1,3-дион (2,40 г; 5,19 ммоль; выход 87%). LCMS: RT = 1,68 мин, m/z = 461,9 [М+Н]+.
Стадия 2: ((5S,7S)-5-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-3-ил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(циклопропил)метанон и ((5S,7R)-5-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-3-ил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(циклопропил)метанон
Боргидрид натрия (3,10 г; 78 ммоль) добавляли к раствору 1-[5-бром-1-(2-триметилсилилэтоксиметил)-1,2,4-триазол-3-ил]-3-(4-хлор-1-метил-пиразол-3-ил)пропан-1,3-диона (2,4 г; 5,2 ммоль) в этаноле (100 мл) при кт. Через 30 мин реакцию гасили насыщенным водным раствором хлорида аммония. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в изопропилацетате и разбавляли водой. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (4×100 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. К неочищенному остатку добавляли серную кислоту (10 мл) и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 2 ч. После охлаждения до кт реакционную смесь разбавляли водой. Добавляли гидроксид натрия (3 М раствор в воде) до тех пор, пока водный слой не становился основным. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток переносили на следующую стадию без дополнительной очистки.
К раствору неочищенного остатка в дихлорметане (26 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (1,5 мл; 10 ммоль) при кт. Через 20 мин добавляли бикарбонат натрия (2,0 г). Реакционную смесь разбавляли водой и изопропилацетатом. Добавляли рассол и водный слой экстрагировали изопропилацетатом (4×50 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток (0,40 г; 1,25 ммоль) переносили на следующую реакционную стадию без дополнительной очистки. К раствору неочищенного остатка и N-метокси-N-метилциклопропанкарбоксамида (0,498 г; 3,74 ммоль) в THF (12,5 мл) добавляли хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в THF; 1,2 мл; 2,50 ммоль) при 0°С. Через 5 мин реакционную смесь нагревали до кт и перемешивали в течение еще 20 мин. Добавляли воду и реакционную смесь разбавляли изопропилацетатом. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (4×20 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали препаративной SFC, получая, как условно обозначено, ((5S,7S)-5-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-3-ил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(циклопропил)метанон (8,4 мг; 0,027 ммоль) и ((5S,7R)-5-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-3-ил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(циклопропил)метанон (38,8 мг; 0,125 ммоль).
((5S,7S)-5-(4-Хлор-1-метил-1Н-пиразол-3-ил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(циклопропил)метанон. 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8.03 (s, 1Н), 6.23 (ddd, J=56,8; 7,8; 3,3 Гц, 1Н), 5.70 (ddd, J=8,4; 6,5; 5,0 Гц, 1Н), 3.82 (s, 3Н), 3.72 (ddt, J=16,3; 14,6; 8,1 Гц, 1Н), 3.02-2.82 (m, 2Н), 1.14-0.99 (m, 4Н). LCMS: RT = 3,86 мин, m/z = 310,0 [М+Н]+.
Информация о препаративной SFC: колонка: Chiralpak IB-N, 5 мкм (150×21,2 мм), подвижная фаза: двуокись углерода (А)/0,1% гидроксида аммония в метаноле (В), программа элюирования: изократическое, 20% В; скорость потока: 70 мл/мин; температура колонки: 40°С; длина волны: 225 нм.
((5S,7R)-5-(4-Хлор-1-метил-1Н-пиразол-3-ил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(циклопропил)метанон. 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 8.03 (s, 1Н), 6.58-6.22 (m, 1Н), 6.04 (ddd, J=7,4; 6,1; 3,1 Гц, 1Н), 3.81 (s, 3Н), 3.46-3.21 (m, 2Н), 2.97 (tt, J=7,6; 4,8 Гц, 1Н), 1.14-1.00 (m, 4Н). LCMS: RT = 4,01 мин, m/z = 310,0 [М+Н]+.
Информация о препаративной SFC: колонка: Chiralpak IB-N, 5 мкм (150×21,2 мм), подвижная фаза: двуокись углерода (А)/0,1% гидроксида аммония в метаноле (В), программа элюирования: изократическое, 20% В; скорость потока: 70 мл/мин; температура колонки: 40°С; длина волны: 225 нм.
Способ 121
Циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(3-метоксифенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Стадия 1: 1-(5-бром-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-1,2,4-триазол-3-ил)-3-(3-метоксифенил)пропан-1,3-дион
Бис(триметилсилил)амид лития (1,0 М раствор в THF; 14 мл; 14 ммоль) добавляли к раствору метил-5-бром-1-(2-триметилсилилэтоксиметил)-1,2,4-триазол-3-карбоксилата (3,00 г; 8,9 ммоль) и 1-(3-метоксифенил)этанона (2,0 мл; 14 ммоль) в THF (59 мл) при 0°С. Через 5 мин реакционную смесь нагревали до кт и перемешивали в течение еще 30 мин. Добавляли воду и реакционную смесь разбавляли изопропилацетатом. Добавляли 10%-ный водный раствор лимонной кислоты для подведения значения рН до 2. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (2×200 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (диоксид кремния; от 0% до 100% изопропилацетата в гептане), получая 1-[5-бром-1-(2-триметилсилилэтоксиметил)-1,2,4-триазол-3-ил]-3-(3-метоксифенил)пропан-1,3-дион (4,10 г; 9,02 ммоль; выход 100%; продукт содержал примесь 1-(3-метоксифенил)этенона). LCMS: RT = 1,80 мин, m/z = 453,9 [М+Н]+.
Стадия 2: 2-бром-7-фтор-5-(3-метоксифенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
Боргидрид натрия (5,30 г; 140 ммоль) добавляли к раствору 1-[5-бром-1-(2-триметилсилилэтоксиметил)-1,2,4-триазол-3-ил]-3-(3-метоксифенил)пропан-1,3-диона (4,1 г; 9,0 ммоль) в этаноле (180 мл) при кт. Через 30 мин добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Неочищенный остаток растворяли в изопропилацетате и разбавляли водой. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (4×100 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. LCMS: RT = 1,40 мин, m/z = 357,9 [М+Н]+. К раствору неочищенного остатка добавляли серную кислоту (10 мл) и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 2 ч. После охлаждения до кт реакционную смесь разбавляли водой. Добавляли гидроксид натрия (3 М раствор в воде) до тех пор, пока водный слой не становился основным. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. LCMS: RT = 1,02 мин, m/z = 309,8 [М+Н]+. К раствору неочищенного остатка в дихлорметане (89 мл) добавляли трифторид диэтиламиносеры (2,50 мл; 17,9 ммоль) при кт. Через 20 мин добавляли бикарбонат натрия (5,0 г). Реакционную смесь разбавляли водой и изопропилацетатом. Добавляли рассол и водный слой экстрагировали изопропилацетатом (4×100 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (диоксид кремния; от 0% до 100% изопропилацетата в гептане), получая 2-бром-7-фтор-5-(3-метоксифенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (50 мг; 0,160 ммоль; выход 1,79%). 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 7.35-7.26 (m, 1Н), 6.90 (ddd, J=8,3; 2,5; 0,9 Гц, 1Н), 6.83 (dd, J=7,6; 1,6 Гц, 1Н), 6.76 (t, J=2,1 Гц, 1Н), 5.97 (ddd, J=56,0; 7,14 1,8 Гц, 1Н), 5.39 (t, J=9,1 Гц, 1Н), 3.79 (s, 3Н), 3.64-3.46 (m, 1Н), 2.96-2.80 (m, 1Н). LCMS: RT = 1,16 мин, m/z = 311,8 [М+Н]+.
Стадия 3: циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(3-метоксифенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в THF; 0,24 мл; 0,481 ммоль) по каплям в течение 15 мин добавляли к раствору (5S,7S)-2-бром-7-фтор-5-(3-метоксифенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (50 мг; 0,160 ммоль) и N-метокси-N-метилциклопропанкарбоксамида (64 мг; 0,481 ммоль) в THF (1,6 мл) при 0°С. Затем реакционную смесь оставляли перемешиваться при этой температуре в течение 1 ч. Добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (2×20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали препаративной SFC, получая, как условно обозначено, циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-(3-метоксифенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (2,35 мг; 0,0078 ммоль; выход 5%). LCMS: RT = 4,92 мин, m/z = 302,1 [М+Н]+.
Информация о препаративной SFC: колонка: Cellulose-1, 5 мкм (150×21,2 мм), подвижная фаза: двуокись углерода (А)/метанол (В), программа элюирования: изократическое, 15% В; скорость потока: 70 мл/мин; температура колонки: 40°С; длина волны: 220 нм.
Способ 122
Циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(3-фтор-5-(трифторметил)фенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Стадия 1: метил 3-(3-бром-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-оксо-пропаноат
Бис(триметилсилил)амид лития (1,0 М раствор в THF; 194 мл; 194 ммоль) добавляли к раствору метил-3-бром-1Н-1,2,4-триазол-5-карбоксилата (20,0 г; 97,1 ммоль) и метилацетата (15,5 мл; 194 ммоль) в THF (324 мл) при -20°С. По окончании добавления реакционную смесь оставляли нагреваться до кт и перемешивали в течение ночи. Значение рН реакционной смеси подводили до рН 1, добавляя 10%-ный водный раствор лимонной кислоты. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (3×200 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (диоксид кремния; от 0% до 100% изопропилацетата в гептане), получая метил-3-(3-бром-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-оксо-пропаноат (15,4 г; 62,1 ммоль; выход 64,0%). LCMS: RT = 0,91 мин, m/z = 247,7 [М+Н]+.
Стадия 2: 2-бром-5-(3-фтор-5-(трифторметил)фенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол
Пиперидиния ацетат (0,250 г; 1,6 ммоль) добавляли к раствору метил-3-(3-бром-1Н-1,2,4-триазол-5-ил)-3-оксо-пропаноата (2,00 г; 8,1 ммоль) и 3-фтор-5-(трифторметил)бензальдегида (1,2 мл; 8,1 ммоль) в бензоле (8,1 мл). Реакционный сосуд был оборудован ловушкой Дина-Старка и обратным холодильником, и реакционную смесь нагревали при температуре дефлегмации в течение 3 ч. После охлаждения до кт реакционную смесь разбавляли водой и изопропилацетатом. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (диоксид кремния; от 0% до 100% изопропилацетата в гептане), получая метил-2-бром-5-[3-фтор-5-(трифторметил)фенил]-7-гидрокси-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-6-карбоксилат (0,60 г; 1,4 ммоль; выход 18%), который незамедлительно использовали на следующей реакционной стадии. LCMS: RT = 1,28 мин, m/z = 421,8 [М+Н]+.
К раствору неочищенного остатка в диметилсульфоксиде (4,7 мл) и воде (0,47 мл) добавляли хлорид натрия (0,830 г; 14 ммоль). Затем реакционную смесь нагревали при 120°С в течение 15 мин, после чего реакционный сосуд помещали в водяную баню при кт и добавляли боргидрид натрия (0,270 г; 7,1 ммоль). Через 10 мин добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония и реакционную смесь разбавляли водой и изопропилацетатом. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (диоксид кремния; от 0% до 100% изопропилацетата в гептане), получая 2-бром-5-[3-фтор-5-(трифторметил)фенил]-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ол (0,320 г; 0,874 ммоль; выход 61%). 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) смесь 3:1 диастереомеров: δ 7.45 (s, 1Н), 7.39-7.25 (m, 2Н), 5.46-5.35 (m, 2Н), 3.63-3.49 (m, 0.75Н), 3.18 (ddd, J=14,3; 7,5; 2,5 Гц, 0,25 Н), 2.90 (ddd, J=14,2; 7,1; 6,1 Гц, 0.25Н), 2.66 (ddd, J=14,5; 3,9; 3,0 Гц, 0.75Н). LCMS: RT = 1,19 мин, m/z = 365,8 [M+H]+.
Стадия 3: 2-бром-7-фтор-5-(3-фтор-5-(трифторметил)фенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол
Трифторид диэтиламиносеры (0,230 мл; 1,75 ммоль) добавляли к раствору 2-бром-5-[3-фтор-5-(трифторметил)фенил]-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-7-ола (0,320 г; 0,874 ммоль) в дихлорметане (17,5 мл) при 40°С. Через 10 мин добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия. Реакционную смесь разбавляли водой и дихлорметаном. Водный слой экстрагировали дихлорметаном (3×20 мл). Объединенные органические слои сушили с использованием сульфата натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (диоксид кремния; от 0% до 100% изопропилацетата в гептане), получая 2-бром-7-фтор-5-[3-фтор-5-(трифторметил)фенил]-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол (0,250 г; 0,679 ммоль; выход 78%). 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) смесь 3:1 диастереомеров: δ 7.42-7.33 (m, 1Н), 7.27 (d, J=12,2 Гц, 1Н), 7.15-7.04 (m, 1Н), 6.14-5.88 (m, 1Н), 5.72 (td, J=6,8; 3,6 Гц, 0,75Н), 5.60-5.44 (m, 0,25Н), 3.70-3.52 (m, 0.25Н), 3.41 (dddd, J=22,4; 15,3; 7,0; 1,3 Гц, 0,75Н), 3.01-2.80 (m, 1Н). LCMS: RT = 1,35 мин, m/z = 367,7 [М+Н]+.
Стадия 4: циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(3-фтор-5-(трифторметил)фенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
Хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в THF; 1,0 мл; 2,04 ммоль) по каплям в течение 15 мин добавляли к раствору N-метокси-N-метилциклопропанкарбоксамида (0,271 г; 2,04 ммоль) и 2-бром-7-фтор-5-[3-фтор-5-(трифторметил)фенил]-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазола (0,250 г; 0,679 ммоль) в THF (6,8 мл) при 0°С. Через 1 ч добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония. Водный слой экстрагировали изопропилацетатом (2×20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, концентрировали и неочищенный остаток очищали препаративной SFC, получая, как условно обозначено, циклопропил-[7-фтор-5-[3-фтор-5-(трифторметил)фенил]-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон (3,47 мг; 0,0097 ммоль; выход 1,4%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.76 (dt, J=8,8; 2,1 Гц, 1Н), 7.61 (s, 1Н), 7.47 (dt, J=9,4; 1,9 Гц, 1Н), 6.26 (ddd, J=56,2; 7,0; 2,1 Гц, 1Н), 5.89 (ddd, J=8,9; 6,2; 3,4 Гц, 1Н), 3.86-3.66 (dddd, J=25,2; 15,4; 8,5; 7,1 Гц, 1Н), 3.09-2.93 (m, 1Н), 2.83 (dddd, J=26,1; 15,2; 3,4; 2,2 Гц, 1Н), 1.16-0.99 (m, 4Н). LCMS: RT = 5,51 мин, m/z = 358,1 [М+Н]+.
Информация о препаративной SFC: колонка: Whelk-O1, 5 мкм (150×21,2 мм), подвижная фаза: двуокись углерода (А)/метанол (В), программа элюирования: изократическое, 20% В; скорость потока: 70 мл/мин; температура колонки: 40°С; длина волны: 220 нм.
Способ 123
(1-((1Н-Пиразол-1-ил)метил)циклопропил)(5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон
(1-((1Н-Пиразол-1-ил)метил)циклопропил)(5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон получали из (1R,2R)-2-(1-метилпиразол-4-ил)циклопропанкарбоновой кислоты в соответствии со способами 2 и 3. Неочищенный остаток далее очищали препаративной HPLC (Gemini-NX С18, 50×30 мм, 5 мкм; 20-60% смеси 0,1% муравьиной кислоты в воде/ацетонитрил), получая конечный продукт (20,2 мг; 32%) в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.57 (d, J=2,2 Гц, 1Н), 7.44-7.30 (m, 4Н), 7.26-7.18 (m, 2Н), 6.16 (d, J=2,2 Гц, 1Н), 5.60 (dd, J=8,3; 5,8 Гц, 1Н), 4.63 (q, J=14,4 Гц, 2Н), 3.22-2.81 (m, 2Н), 2.61-2.28 (m, 1 Н), 1.70-1.53 (m, 2Н), 1.35-1.13 (m, 3Н). LCMS: RT = 4,31 мин, m/z = 334,2 (М+Н)+. LCMS (от 5 до 95% ацетонитрила в воде + 0,1% муравьиной кислоты в течение 10 мин): время удерживания 4,31 мин, ESI+: обнаружено [М+Н] = 334,2.
Дополнительные условия для очистки посредством SFC и анализа
SFC 1
Циклопропил((4S,6S)-4-фтор-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил)метанон
Для условно обозначенного как циклопропил((4S,6S)-4-фтор-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил)метанон (7,9 мг; выход 55%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.46-7.28 (m, 3Н), 7.28-7.07 (m, 2Н), 6.94 (d, J=2,6 Гц, 1Н), 6.34-5.96 (m, 1Н), 5.88-5.51 (m, 1Н), 2.94-2.75 (m, 1Н), 2.76-2.55 (m, 1Н), 2.07 (s, 1Н), 1.04-0.74 (m, 4Н). LC-MS: RT = 5,11 мин, m/z = 271,1 (М+Н)+.
SFC 2
[рац-(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(1S,2S)-2-(трифторметил)циклопропил]метанон
Для условно обозначенного как [рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(1S,2S)-2-(трифторметил)циклопропил]метанон (4,2 мг; выход 31%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.59-7.08 (m, 5Н), 6.50-6.06 (m, 1Н), 5.93-5.55 (m, 1Н), 3.76-3.25 (m, 1Н), 2.58 (d, J=2,5 Гц, 1Н), 1.88-1.15 (m, 2Н). LC-MS: RT = 5,36 мин, m/z = 340,1 (М+Н)+.
SFC 3
[рац-(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(1R,2R)-2-(трифторметил)циклопропил]метанон
Для условно обозначенного как [рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(1R,2R)-2-(трифторметил)циклопропил]метанон (12,2 мг; выход 89%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 7.50-7.13 (m, 5Н), 6.51-6.05 (m, 1Н), 5.93-5.49 (m, 1Н), 3.90-3.54 (m, 1Н), 2.84-2.59 (m, 1Н), 2.62-2.53 (m, 1Н), 2.07 (s, 1Н), 1.64-1.26 (m, 2Н). LC-MS: RT = 5,40 мин, m/z = 340,1 (М+Н)+.
SFC 4
[рац-(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(2S)-спиро[2.2]пентан-2-ил]метанон
Для условно обозначенного как [рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(2S)-спиро[2.2]пентан-2-ил]метанон (3,2 мг; выход 39%). LC-MS: RT = 4,95 мин, m/z = 298,1 (М+Н)+.
SFC 5
[рац-(5S,7S)-7-Фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(2R)-спиро[2.2]пентан-2-ил]метанон
Для условно обозначенного как [рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(2R)-спиро[2.2]пентан-2-ил]метанон (х мг; выход х%). LC-MS: RT = 4,94 мин, m/z = 298,1 (М+Н).
Анализы ингибирования киназы RIP1 (биохимический анализ)
Соединения по настоящему изобретению тестировали по их способности ингибировать активность RIP1K, как описано ниже.
Ферментативный анализ. Способность протеинкиназы рецептор-взаимодействующего белка-1 (RIPK1) катализировать гидролиз аденозин-5'-трифосфата (АТФ) отслеживают, используя анализ на АДФ (аденозин-5'-дифосфата) Transcreener (BellBrook Labs). Очищенный домен киназы RIP1 человека (2-375) (50 нМ), происходящий из экспрессирующей системы бакуловирус-инфицированных клеток насекомых, инкубируют с тестируемыми соединениями в течение 2 часов в 50 мМ буфере на основе Hepes (4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновая кислота) (рН 7,5), содержащем 30 мМ MgCl2, 1 мМ дитиотреит, 50 мкМ АТФ, 0,002% Brij-35 и 0,5% диметилсульфоксида (DMSO). Реакции гасят, добавляя 1Х буфер В для остановки реакции от BellBrooks (20 мМ Hepes (рН 7,5), 40 мМ этилендиаминтетрауксусная кислота и 0,02% Brij-35), дополнительно содержащий 12 мМ EDTA и антитело к ADP2 (55 мкг/мл) и 4 нМ индикатор на АДФ AlexaFluor® 633. Индикатор, связанный с антителом, вытесняется АДФ, образованным в ходе реакции с участием RIP1K, что вызывает уменьшение поляризации флуоресценции (FP), которую измеряют, используя лазер с возбуждением на длине волны 633 нм с применением микропланшетного ридера М1000 для считывания FP. Строили график зависимости относительной активности от концентрации тестируемого соединения. С использованием программного обеспечения Genedata Screener (Genedata; Базель, Швейцария) данные апроксимировали к уравнению Моррисона для определения кажущейся константы ингибирования с прочным связыванием (Kiapp) (Williams, J.W. and Morrison, J.F. (1979) The kinetics of reversible tight-binding inhibition. Methods Enzymol., 63: 437-67). Для расчета относительной активности и Kiapp использовали следующее уравнение:
где [Е]T и [I]T представляют собой общие концентрации активного фермента и тестируемого соединения, соответственно.
Типичные соединения по настоящему изобретению приведены в Таблицах 1 и 2 наряду с их физико-химическими характеристиками и данными по ингибированию активности киназы RIP1 in vitro. "Способ" в первой колонке каждой таблицы относится к способу(ам) синтеза, использованному(ным) для получения каждого соединения, как показано выше в примерах. В некоторых примерах для некоторых стереоизомеров приведены времена удерживания (мин) на хиральных колонках. Если не указано иное, стереохимическая конфигурация, показанная для каждой структуры, представляет собой относительную конфигурацию индивидуального стерео изо мера, а указанная абсолютная конфигурация (т.е. "R" и/или "S") является условно обозначенной. В некоторых воплощениях, где описанный способ включают разделение стереоизомеров, представлен индивидуальный стереоизомер соединения из Таблицы 1 или Таблицы 2.
Все патенты США, публикации заявок на патент США, заявки на патент США, зарубежные патенты, зарубежные патентные заявки и непатентные публикации, упомянутые в этом описании, включены в данную заявку посредством ссылки во всей своей полноте.
Несмотря на то, что приведенное выше изобретение описано довольно подробно для облегчения понимания, будет очевидно, что при практическом применении могут быть сделаны некоторые изменения и модификации в объеме прилагаемой формулы изобретения. Соответственно, описанные воплощения следует рассматривать как иллюстративные, а не ограничивающие, и изобретение не должно ограничиваться приведенными в данном описании подробностями, а может быть модифицировано в пределах объема и эквивалентов прилагаемой формулы изобретения.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| ИНГИБИТОРЫ Axl ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В КОМБИНИРОВАННОЙ ТЕРАПИИ ДЛЯ ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ, УСТРАНЕНИЯ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ МЕТАСТAЗИРУЮЩЕГО РАКА | 2010 |
|
RU2555326C2 |
| БИЦИКЛИЧЕСКИЕ ЛАКТАМЫ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2016 |
|
RU2716136C2 |
| ПРОИЗВОДНОЕ ФТАЛАЗИНОНКЕТОНА, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ЕГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ | 2011 |
|
RU2564527C2 |
| ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРИДАЗИНА В КАЧЕСТВЕ МОДУЛЯТОРОВ RORc | 2017 |
|
RU2757571C2 |
| КОНДЕНСИРОВАННЫЕ С ГЕТЕРОАРИЛКЕТОНАМИ АЗАДЕКАЛИНЫ - МОДУЛЯТОРЫ ГЛЮКОКОРТИКОИДНЫХ РЕЦЕПТОРОВ | 2013 |
|
RU2639867C2 |
| ЗАМЕЩЕННЫЕ [1,2,4]ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7-ИЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ PDE2 | 2015 |
|
RU2659070C9 |
| Соединения 6, 7-дигидро-5H-пиразоло[5,1-b][1,3]оксазин-2-карбоксамида | 2017 |
|
RU2719599C2 |
| ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО, СОДЕРЖАЩЕЕ ИНГИБИТОР НАТРИЙЗАВИСИМОГО ПЕРЕНОСЧИКА ФОСФАТА | 2015 |
|
RU2740008C2 |
| СОЕДИНЕНИЯ, ГЕТЕРОБИЦИКЛО-ЗАМЕЩЕННЫЕ-[1,2,4]ТРИАЗОЛО[1,5c]ХИНАЗОЛИН-5-АМИНА, ОБЛАДАЮЩИЕ СВОЙСТВАМИ А2А АНТАГОНИСТОВ | 2013 |
|
RU2671628C2 |
| ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО, СОДЕРЖАЩЕЕ ИНГИБИТОР НАТРИЙЗАВИСИМОГО ПЕРЕНОСЧИКА ФОСФАТА | 2015 |
|
RU2811864C1 |
Изобретение относится к соединению, имеющему общую формулу (I)
где R1, кольцо А и кольцо В являются такими, как они описаны в формуле изобретения, которое используется для ингибирования активности киназы RIP1, к фармацевтической композиции, содержащей данное соединение, к применению данного соединения и к способу лечения с применением данного соединения. Технический результат – разработка нового ингибитора RIP1 киназы, полезного для лечения заболеваний и расстройств, ассоциированных с воспалением, гибелью клеток и другими причинами. 16 н. и 12 з.п. ф-лы, 2 табл., 163 пр.
1. Соединение формулы (I)
где R1 выбран из группы, состоящей из С1-С6алкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6галогеналкила, С1-С6галогеналкокси, -С1-С6алкил-N(RN)2, фенил, бензил, 4-8-членный гетероциклил и 5-6-членный гетероарил; при этом R1 связан с соседним карбонилом через атом углерода и при этом R1 возможно замещен одним или двумя заместителями, выбранными из группы, состоящей из F, Cl, Br, С1-С6алкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкила, С1-С6галогеналкокси, -С1-С6алкил-N(RN)2, гидроксил, гидроксиметил, циано, цианометил, цианоэтил, С(O)С1-С6алкил, фенил, бензил, СН2-(С3-С6циклоалкил), 5-6-членный гетероарил и СН2-(5-6-членный гетероарил);
каждый RN независимо выбран из группы, состоящей из Н, С1-С6алкила, С3-С6цикпоалкила, С1-С6алкокси и С1-С6галогеналкила; или два RN вместе с соседним атомом N могут образовывать 4-6-членное кольцо;
кольцо А и кольцо В совместно выбраны из группы, состоящей из:
где R2 выбран из группы, состоящей из С1-С6галогеналкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкокси, С1-С6тиоалкила, фенила, бензила, групп СН2-(С3-С6циклоалкил), СН2СН2-(С3-С6циклоалкил), СН2-(4-6-членный гетероциклил), СН2СН2-(4-6-членный гетероциклил), 5-6-членный гетероарил и СН2-(5-6-членный гетероарил); при этом в случае присутствия фенильного кольца или 5-6-членного гетероарильного кольца оно может быть замещено 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, С1-С4алкила, С1-С4галогеналкила, С1-С4алкокси, С1-С4галогеналкокси, циклопропила и циано; и
R3a и R3b выбраны следующим образом:
(1) один из R3a и R3b представляет собой Н, а другой выбран из группы, состоящей из D, F, Cl, ОН, CN, С1-С4алкила, С1-С4галогеналкила, циклопропила, С1-С4алкокси и С1-С4галогеналкокси;
(2) каждый из R3a и R3b выбран из группы, состоящей из D, F, Cl, ОН, CN и метила, при условии, что R3a и R3b оба не могут представлять собой ОН или CN; или
(3) R3a и R3b совместно образуют циклопропил.
2. Соединение по п. 1, где кольцо А и кольцо В совместно выбраны из группы, состоящей из:
где R2 выбран из группы, состоящей из С1-С6галогеналкила, С3-С6циклоалкила, С1-С6алкокси, С1-С6галогеналкокси, С1-С6тиоалкила, фенила, бензила, групп СН2-(С3-С6циклоалкил), СН2СН2-(С3-С6циклоалкил), СН2-(4-6-членный гетероциклил), СН2СН2-(4-6-членный гетероциклил), 5-6-членный гетероарил и СН2-(5-6-членный гетероарил); при этом в случае присутствия фенильного кольца или 5-6-членного гетероарильного кольца оно может быть замещено 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, С1-С4алкила, С1-С4галогеналкила, С1-С4алкокси, С1-С4галогеналкокси и циано; и
R4a и R4b выбраны следующим образом:
(1) один из R4a и R4b представляет собой Н, а другой выбран из группы, состоящей из D, F, Cl, ОН, CN, C1-С4алкила, C1-С4галогеналкила, циклопропила, С1-С4алкокси и С1-С4галогеналкокси; или
(2) каждый из R4a и R4b выбран из группы, состоящей из D, F, Cl и метила.
3. Соединение по п. 1 или 2, где R2 выбран из группы, состоящей из фенила, монофторфенила, дифторфенила, монохлорфенила и дихлорфенила.
4. Соединение по п. 1 или 2, где кольцо А и кольцо В совместно выбраны из группы, состоящей из:
где R3a и R3b выбраны следующим образом:
(1) один из R3a и R3b представляет собой Н, а другой выбран из группы, состоящей из D, F, Cl, ОН, CN, С1-4алкила, С1-4галогеналкила, циклопропила, С1-С4алкокси и С1-С4галогеналкокси;
(2) каждый из R3a и R3b выбран из группы, состоящей из D, F, Cl, ОН, CN и метила, при условии, что R3a и R3b оба не могут представлять собой ОН или CN; или
(3) R3a и R3b совместно образуют циклопропил;
каждый R5 выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, С1-С6алкила, С1-С6галогеналкила, С1-С6алкокси и С1-С6галогеналкокси; и
m равно 1, 2 или 3.
5. Соединение по п. 1 или 2, где кольцо А и кольцо В совместно представляют собой:
где каждый R5 выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, С1-С6алкила, С1-С6галогеналкила, С1-С6алкокси и С1-С6галогеналкокси; и
m равно 1, 2 или 3.
6. Соединение по п. 1 или 2, где R2 выбран из группы, состоящей из фенила, монофторфенила, дифторфенила, монохлорфенила и дихлорфенила.
7. Соединение по п. 1 или 2, где кольцо А и кольцо В совместно выбраны из группы, состоящей из:
где R4a и R4b выбраны следующим образом:
(1) один из R4a и R4b представляет собой Н, а другой выбран из группы, состоящей из F, Cl, ОН, CN, С1-С4алкила, С1-С4галогеналкила, циклопропила, С1-С4алкокси и C1-С6галогеналкокси; или
(2) каждый из R4a и R4b выбран из группы, состоящей из F, Cl и метила;
каждый R5 выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, С1-С6алкила, С1-С4галогеналкила, С1-С4алкокси и С1-С4галогеналкокси; и
m равно 1, 2 или 3.
8. Соединение, где соединение выбрано из группы, состоящей из:
((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил) ((1R,2R)-2-фторцикпопропил)метанона;
((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((1S,2S)-2-фторциклопропил)метанона;
((5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5H-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((1R,2R)-2-фторциклопропил)метанона;
((5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((1S,2S)-2-фторциклопропил)метанона;
2-гидрокси-2-метил-1-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-она;
2-гидрокси-2-метил-1-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-она;
2-фенил-1-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]этанона;
((5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((1R,2S)-2-фторцикпопропил)метанона;
((5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((1S,2R)-2-фторциклопропил)метанона;
(7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-[рац-(1S,2S)-2-фторциклопропил]метанона;
(2,2-дифторциклопропил)-(7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона;
фенил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
1-[рац-(5R,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-она;
(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-[1-(трифторметил)циклопропил]метанона;
(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-(3-метилоксетан-3-ил)метанона;
(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-[рац-(1S,2R)-2-фторцикпопропил]метанона;
1-(7-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-а]имидазол-2-ил)пропан-1-она;
циклопропил-[рац-(5R,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
1-(6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил)пропан-1-она;
1-[рац-(4R)-4-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-ил]пропан-1-она;
1-[рац-(4S)-4-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-ил]пропан-1-она;
3-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2,2-диметил-3-оксо-пропаннитрила;
(S)-1-(4-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил)пропан-1-она;
(R)-1-(4-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил)пропан-1-она;
1-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-гидрокси-2-метил-пропан-1-она;
(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-(1-метил циклопропил)метанона;
1-[рац-(4R)-4-фенил-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-ил]пропан-1-она;
1-[рац-(4S)-4-фенил-6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-ил]пропан-1-она;
3,3,3-трифтор-1-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-она;
1-[рац-(5S)-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-она;
1-[рац-(5S)-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-она;
1-[рац-(5R,6S)-6-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-она;
(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-(2-пиридил)метанона;
циклопропил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопентил-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона;
2,2-диметил-1-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-она;
2,2-диметил-1-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-она;
(1-метилпиразол-4-ил)-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
(1-метилпиразол-4-ил)-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-(2-тиенил)метанона;
циклобутил-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
1-(7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2,2-диметил-пропан-1-она;
1-(7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-2-метил-пропан-1-она;
1-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-она;
1-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-она;
(1-метилпиразол-4-ил)-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
1-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-она;
1-[рац-(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]этанона;
((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((1R,2S)-2-фторциклопропил)метанона;
((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((1S,2R)-2-фторциклопропил)метанона;
(1-фторцикпопропил)-(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона;
(3-метилоксетан-3-ил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
(3-метилоксетан-3-ил)-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
3-оксабицикпо[3.1.0]гексан-6-ил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
оксетан-3-ил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
[1-(гидроксиметил)циклопропил]-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
[(1R)-2,2-дифторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
[(1S)-2,2-дифторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
(1-фторцикпопропил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[рац-(5S)-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
(3,3-дифторциклобутил)-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
[(1S,2R)-2-фторциклопропил]-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
[(5S)-7,7-дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1S,2R)-2-фторциклопропил]метанона;
[(5S)-7,7-дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1R,2S)-2-фторциклопропил]метанона;
циклопропил-[(5S)-7,7-дифтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-[(5R,7R)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
(2,2-дифторспиро[2.3]гексан-5-ил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
1-[(5S)-5-(2-хлорфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-она;
[1-(гидроксиметил)циклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
(3,3-дифторциклобутил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
[2-(2-пиридил)циклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(1S,2S)-2-метилциклопропил]метанона;
[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-спиро[2.3]гексан-5-ил-метанона;
циклопропил-[(5S)-5-(2-хлорфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[рац-(4S,6S)-4-фтор-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил]метанона;
[1-(фторметил)цикпопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
(3,3-дифтор-6-бицикло[3.1.0]гексанил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[2-(трифторметил)циклопропил]метанона;
(6,6-дифтор-3-бицикло[3.1.0]гексанил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
2-[1-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил]циклопропил]ацетонитрила;
циклопропил-[(5S,7S)-7-метокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-(4-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
2-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил]-циклопропанкарбонитрила;
циклопропил-[(5S,7S)-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S,7R)-7-гидрокси-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1S,2S)-2-метилциклопропил]метанона;
[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[(1R,2R)-2-метилциклопропил]метанона;
циклопропил-[(5S,7S)-5-(2,6-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
1-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил]циклопропанкарбонитрила;
[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-спиро[2.2]пентан-2-ил-метанона;
[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-спиро[2.3]гексан-2-ил-метанона;
[1-(2-пиридил)циклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
(1-циклопропилциклопропил)-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S,7S)-5-(2-хлорфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S,7S)-5-(2,5-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2,3,6-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S,7S)-7-дейтеро-7-фтор-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
[(1S,2R)-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
рац-(1R,2R)-2-[(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-карбонил]циклопропанкарбонитрила;
циклопропил-[(5S,7S)-5-(2,3-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2,3,5-трифторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(4S,6S)-4-фтор-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S,7S)-5-цикпопропил-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S,7S)-7-дейтеро-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[рац-(5S,7S)-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5R,7S)-5-(цикпопропилметил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S)-7,7-дидейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5R,7R)-7-хлор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S,7S)-7-хлор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S,7R)-7-хлор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[рац-(5S,7S)-5-(3-хлор-2-пиридил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[рац-(5S,7S)-7-хлор-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[рац-(5S,7R)-7-хлор-7-дейтеро-5-фенил-5,6-дигидропирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S,7S)-5-(1,1-дифторпропил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[рац-(5S,7S)-5-(1,1-дифторэтил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S,7S)-5-(3-хлор-2-пиридил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
2-[(5S,7S)-2-(циклопропанкарбонил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-5-ил]бензонитрила;
(1-этилциклопропил)-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-тетрагидропиран-4-ил-метанона;
[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-тетрагидропиран-3-ил-метанона;
[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(2R)-пирролидин-2-ил]метанона;
(2-метилтетрагидрофуран-2-ил)-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-тетрагидрофуран-3-ил-метанона;
[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(3S)-тетрагидрофуран-3-ил]метанона;
[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(3R)-тетрагидрофуран-3-ил]метанона;
3-метокси-2,2-диметил-1-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-она;
рац-(2S)-3,3,3-трифтор-2-гидрокси-1-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]пропан-1-она;
[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(3R)-3-метилтетрагидрофуран-3-ил]метанона;
[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(3S)-3-метилтетрагидрофуран-3-ил]метанона;
[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(1R,2R,4S)-7-оксабицикло[2.2.1]гептан-2-ил]метанона;
((1S,2R,4R)-7-оксабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона;
((1R,2S,4S)-7-оксабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона;
1-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-2-(трифторметокси)этанона;
[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(1R,5R)-3-оксабицикло[3.1.0]гексан-1-ил]метанона;
[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(1S,5S)-3-оксабицикло[3.1.0]гексан-1-ил]метанона;
циклопропил-(5-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2-ил)метанона;
(S)-циклопропил(5-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридин-2-ил)метанона;
циклопропил((5S,7R)-7-гидрокси-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона;
циклопропил-[рац-(5S,7R)-7-фтор-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-(о-толил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(3-фторпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона;
циклопропил((5S,7R)-7-фтор-5-(3-фторпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона;
циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(1-метил-1 Н-пиразол-4-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона;
циклопропил(7-фтор-5-(5-метилизоксазол-4-ил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона;
((5S,7S)-5-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-3-ил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(циклопропил)метанона;
((5S,7R)-5-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-3-ил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)(циклопропил)метанона;
циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(3-метоксифенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона;
циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(3-фтор-5-(трифторметил)фенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона;
(5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-[1-(пиразол-1-илметил)циклопропил]метанона;
циклопропил((4S,6S)-4-фтор-6-фенил-5,6-дигидро-4Н-пирроло[1,2-b]пиразол-2-ил)метанона;
[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(1S,2S)-2-(трифторметил)цикпопропил]метанона;
[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(1R,2R)-2-(трифторметил)циклопропил]метанона;
[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(2S)-спиро[2.2]пентан-2-ил]метанона; и
[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]-[рац-(2R)-спиро[2.2]пентан-2-ил]метанона.
9. Соединение, где соединение выбрано из группы, состоящей из:
((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((1R,2R)-2-фторциклопропил)метанона;
фенил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
(рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-(1-метилциклопропил)метанона;
циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона;
[(1R,2S)-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S,7S)-5-(2,6-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S,7S)-5-(2-хлорфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона;
циклопропил-[(5S,7S)-7-хлор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанона; и
циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(3-метоксифенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанона.
10. Соединение, где соединение представляет собой ((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло [1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)((1R,2R) -2-фторциклопропил)метанон.
11. Соединение, где соединение представляет собой фенил-[рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон.
12. Соединение, где соединение представляет собой (рац-(5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)-(1-метилциклопропил)метанон.
13. Соединение, где соединение представляет собой циклопропил-((5S,7S)-7-фтор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон.
14. Соединение, где соединение представляет собой [(1R,2S)-2-фторциклопропил]-[(5S,7S)-7-фтор-5-(2-фторфенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон.
15. Соединение, где соединение представляет собой циклопропил-[(5S,7S)-5-(2,6-дифторфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон.
16. Соединение, где соединение представляет собой циклопропил-[(5S,7S)-5-(2-хлорфенил)-7-фтор-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон.
17. Соединение, где соединение представляет собой циклопропил-[(5S,7S)-7-хлор-5-фенил-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил]метанон.
18. Соединение, где соединение представляет собой циклопропил((5S,7S)-7-фтор-5-(3-метоксифенил)-6,7-дигидро-5Н-пирроло[1,2-b][1,2,4]триазол-2-ил)метанон.
19. Соединение по п. 1, где выбранное соединение представляет собой соединение, обладающее ингибирующей киназу RIP1 (рецептор-взаимодействующего белка-1) активностью с K1 меньше 100 нМ.
20. Фармацевтическая композиция для ингибирования активности киназы RIP1, содержащая эффективное количество соединения по любому из пп. 1-19 и терапевтически инертный носитель.
21. Соединение по любому из пп. 1-19 для применения в качестве терапевтически активного вещества.
22. Применение соединения по любому из пп. 1-19 для лечения заболевания или расстройства, ассоциированного с активностью киназы RIP1, выбранного из группы, состоящей из болезни Паркинсона, деменции с тельцами Леви, множественной системной атрофии, синдрома "паркинсонизм-плюс", таупатии, болезни Альцгеймера, лобно-височной деменции, амиотрофического бокового склероза, спинальной мышечной атрофии, первичного бокового склероза, болезни Гентингтона, ишемии, инсульта, внутричерепного кровоизлияния, внутримозгового кровоизлияния, мышечной дистрофии, прогрессирующей мышечной атрофии, псевдобульбарного паралича, прогрессирующего бульбарного паралича, спинальной мышечной атрофии, врожденной мышечной атрофии, периферической нейропатии, прогрессирующего супрануклеарного паралича, кортикобазальной дегенерации, демиелинизирующего заболевания, воспалительного заболевания кишечника, болезни Крона, язвенного колита, глаукомы, псориаза, псориатического артрита, ревматоидного артрита, спондилоартрита, ювенильного идиопатического артрита, остеоартрита, поражения/повреждения почек (в результате нефрита, трансплантации почки, хирургического вмешательства, введения нефротоксичных лекарственных средств), острого поражения почек (AKI), отторжения трансплантата, ишемического/реперфузионного повреждения цельных органов, сепсиса и синдрома системной воспалительной реакции (SIRS).
23. Применение соединения по любому из пп. 1-19 для приготовления лекарственного средства для лечения заболевания или расстройства, ассоциированного с активностью киназы RIP1, выбранного из группы, состоящей из болезни Паркинсона, деменции с тельцами Леви, множественной системной атрофии, синдрома "паркинсонизм-плюс", таупатии, болезни Альцгеймера, лобно-височной деменции, амиотрофического бокового склероза, спинальной мышечной атрофии, первичного бокового склероза, болезни Гентингтона, ишемии, инсульта, внутричерепного кровоизлияния, внутримозгового кровоизлияния, мышечной дистрофии, прогрессирующей мышечной атрофии, псевдобульбарного паралича, прогрессирующего бульбарного паралича, спинальной мышечной атрофии, врожденной мышечной атрофии, периферической нейропатии, прогрессирующего супрануклеарного паралича, кортикобазальной дегенерации, демиелинизирующего заболевания, воспалительного заболевания кишечника, болезни Крона, язвенного колита, глаукомы, псориаза, псориатического артрита, ревматоидного артрита, спондилоартрита, ювенильного идиопатического артрита, остеоартрита, поражения/повреждения почек (в результате нефрита, трансплантации почки, хирургического вмешательства, введения нефротоксичных лекарственных средств), острого поражения почек (AKI), отторжения трансплантата, ишемического/реперфузионного повреждения цельных органов, сепсиса и синдрома системной воспалительной реакции (SIRS).
24. Применение по п. 22 или 23, где заболевание или расстройство, ассоциированное с активностью киназы RIP1, представляет собой воспалительное заболевание кишечника, болезнь Крона, язвенный колит, глаукому, псориаз, псориатический артрит, ревматоидный артрит, спондилоартрит, ювенильный идиопатический артрит или остеоартрит.
25. Применение по п. 22 или 23, где заболевание или расстройство, ассоциированное с активностью киназы RIP1, представляет собой поражение/повреждение почек (в результате нефрита, трансплантации почки, хирургического вмешательства, введения нефротоксичных лекарственных средств), острое поражение почек (AKI), отторжение трансплантата, ишемическое/реперфузионное повреждение цельных органов, сепсис или синдром системной воспалительной реакции (SIRS).
26. Способ лечения заболевания или расстройства, ассоциированного с активностью киназы RIP1, у человека, включающий введение нуждающемуся в этом человеку эффективного количества соединения по любому из пп. 1-19, где заболевание или расстройство выбрано из группы, состоящей из болезни Паркинсона, деменции с тельцами Леви, множественной системной атрофии, синдрома "паркинсонизм-плюс", таупатии, болезни Альцгеймера, лобно-височной деменции, амиотрофического бокового склероза, спинальной мышечной атрофии, первичного бокового склероза, болезни Гентингтона, ишемии, инсульта, внутричерепного кровоизлияния, внутримозгового кровоизлияния, мышечной дистрофии, прогрессирующей мышечной атрофии, псевдобульбарного паралича, прогрессирующего бульбарного паралича, спинальной мышечной атрофии, врожденной мышечной атрофии, периферической нейропатии, прогрессирующего супрануклеарного паралича, кортикобазальной дегенерации, демиелинизирующего заболевания, воспалительного заболевания кишечника, болезни Крона, язвенного колита, глаукомы, псориаза, псориатического артрита, ревматоидного артрита, спондилоартрита, ювенильного идиопатического артрита, остеоартрита, поражения/повреждения почек (в результате нефрита, трансплантации почки, хирургического вмешательства, введения нефротоксичных лекарственных средств), острого поражения почек (AKI), отторжения трансплантата, ишемического/реперфузионного повреждения цельных органов, сепсиса и синдрома системной воспалительной реакции (SIRS).
27. Способ по п. 26, где заболевание или расстройство, ассоциированное с активностью киназы RIP1, представляет собой воспалительное заболевание кишечника, болезнь Крона, язвенный колит, глаукому, псориаз, псориатический артрит, ревматоидный артрит, спондилоартрит, ювенильный идиопатический артрит или остеоартрит.
28. Способ по п. 26, где заболевание или расстройство, ассоциированное с активностью киназы RIP1, представляет собой поражение/повреждение почек (в результате нефрита, трансплантации почки, хирургического вмешательства, введения нефротоксичных лекарственных средств), острое поражение почек (AKI), отторжение трансплантата, ишемическое/реперфузионное повреждение цельных органов, сепсис или синдром системной воспалительной реакции (SIRS).
| СТУПЕНЬ ГАЗОВОЙ ТУРБИНЫ | 1988 |
|
SU1554480A1 |
| Устройство для счета фотонов | 1988 |
|
SU1542201A1 |
| Способ косвенного определения механической характеристики асинхронного электродвигателя | 1987 |
|
SU1539697A1 |
| Способ получения сульфида кальция | 1987 |
|
SU1528724A1 |
| WO 2014125444 A1, 21.08.2014 | |||
| Устройство для обрушения сводов в бункерах | 1955 |
|
SU103930A1 |
