Показать метаданные Скрыть метаданные

(19)

(11)

2 800 649

(13)

(51)

МПК

C07K16/10(2006-01-01)

A61K39/42(2006-01-01)

A61P31/14(2006-01-01)

(21) (22)

Заявка

2021139704, 2021-12-29

(24)

Дата начала отсчета патента

2021-12-29

(22)

дата подачи заявки

2021-12-29

(45)

опубликовано

2023-07-25

(72)

авторы

Баранов Константин ОлеговичБеловежец Татьяна НиколаевнаВолкова Ольга ЮрьевнаГорчаков Андрей АлександровичГусельников Сергей ВладимировичКулемзин Сергей ВикторовичМечетина Людмила ВасильевнаНаякшин Александр МатвеевичТаранин Александр ВладимировичЧикаев Николай Андреевич

(73)

патентообладатели

Общество С Ограниченной Ответственностью

(56)

Документы, цитированные в отчете о поиске

WO2021211775 A1, 21.10.2021RUI SHI et al., A human neutralizing antibody targets the receptor-binding site of SARS-CoV-2, Nature, 2020, VolBRYAN EJONES et al., The neutralizing antibody, LY-CoV555, protects against SARS-CoV-2 infection in nonhuman primates, TranslMed., 12 May 2021, Vol

МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ РЕЦЕПТОР-СВЯЗЫВАЮЩЕГО ДОМЕНА SPIKE-БЕЛКА ВИРУСА SARS-COV-2 И ИХ АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЕ ФРАГМЕНТЫ, КОДИРУЮЩИЕ ИХ НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ, А ТАКЖЕ СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ Российский патент 2023 года по МПК C07K16/10 A61K39/42 A61P31/14

Описание патента на изобретение RU2800649C2

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к моноклональным антителам и их антигенсвязывающим фрагментам, которые связываются с рецептор-связывающим доменом (RBD) Spike-белка вируса SARS-CoV-2.

Уровень техники

За два года пандемии, вызванной бетакоронавирусом SARS-CoV-2, была зарегистрирована гибель порядка 5 млн человек. Использование ряда средств профилактики и терапии коронавирусной инфекции, вызванной SARS-CoV-2 (также называемой в данном документе ковид-19), позволяет снизить вероятность заражения, госпитализации и летального исхода. К таким средствам относятся вакцинопрофилактика, использование вирус-специфических малых молекул, препаратов плазмы реконвалесцентов, рекомбинантных Spike-специфичных белков (в том числе антител) и их производных. Несмотря на повсеместное проведение кампаний по иммунизации населения и идентификации нейтрализующих моноклональных антител против Spike-белка вируса SARS-CoV-2, существует значительная потребность в получении новых вариантов таких антител для расширения арсенала диагностических, профилактических и терапевтических средств особенно с учетом появления новых вариантов вируса. Кроме того, существуют группы населения, которым вакцинация либо не показана по медицинским соображениям, либо у которых не может быть выработан протективный иммунный ответ. Таким образом, проведение пассивной иммунизации – введение препаратов моноклональных антител в качестве пред- или пост-экспозиционной профилактики или терапии позволяет защитить таких людей, обеспечить менее длительное и тяжелое течение болезни, в том числе предотвратить развитие пост-ковидных осложнений, и снизить вероятность дальнейшей передачи вируса.

Известно, что из трех поверхностных белков SARS-CoV-2 лишь один, Spike, вызывает образование вируснейтрализующих антител. Также было показано, что подавляющее число полученных к настоящему моменту Spike-специфических моноклональных антител, обладающих способностью нейтрализовать вирус, направлены против RBD-домена Spike, ответственного за связывание с основным входным рецептором вируса, белком ACE2.

Идентификация SARS-CoV-2-специфических нейтрализующих моноклональных антител в основном осуществляется одним из нескольких способов, таких как секвенирование генов иммуноглобулинов из единичных В-клеток людей, перенесших ковид-19, или иммунизированных животных (в. т.ч. гуманизированных) (Brouwer, P. J. M. et al. Potent neutralizing antibodies from COVID-19 patients define multiple targets of vulnerability. Science 369, 643–650 (2020); Wu, Y. et al. A noncompeting pair of human neutralizing antibodies block COVID-19 virus binding to its receptor ACE2. Science 368, 1274–1278 (2020); Jones, B. E. et al. The neutralizing antibody, LY-CoV555, protects against SARS-CoV-2 infection in nonhuman primates. Sci. Transl. Med. 13, eabf1906 (2021); Hansen, J. et al. Studies in humanized mice and convalescent humans yield a SARS-CoV-2 antibody cocktail. Science 369, 1010–1014 (2020); Wang, C. et al. A human monoclonal antibody blocking SARS-CoV-2 infection. Nat. Commun. 11, 2251 (2020); Seydoux, E. et al. Analysis of a SARS-CoV-2-infected individual reveals development of potent neutralizing antibodies with limited somatic mutation. Immunity 53, 98–105.e5 (2020); Zost, S. J. et al. Rapid isolation and profiling of a diverse panel of human monoclonal antibodies targeting the SARS-CoV-2 spike protein. Nat. Med. 26, 1422–1427 (2020); Rogers, T. F. et al. Isolation of potent SARS-CoV-2 neutralizing antibodies and protection from disease in a small animal model. Science 369, 956–963 (2020); Shi, R. et al. A human neutralizing antibody targets the receptor-binding site of SARS-CoV-2. Nature 584, 120–124 (2020); Ju, B. et al. Human neutralizing antibodies elicited by SARS-CoV-2 infection. Nature 584, 115–119 (2020); Robbiani, D. F. et al. Convergent antibody responses to SARS-CoV-2 in convalescent individuals. Nature 584, 437–442 (2020); Liu, L. et al. Potent neutralizing antibodies against multiple epitopes on SARS-CoV-2 spike. Nature 584, 450–456 (2020); Chi, X. et al. A neutralizing human antibody binds to the N-terminal domain of the Spike protein of SARS-CoV-2. Science 369, 650–655 (2020); Wan, J. et al. Human-IgG-neutralizing monoclonal antibodies block the SARS-CoV-2 infection. Cell Rep. 32, 107918 (2020); Kreer, C. et al. Longitudinal isolation of potent near-germline SARS-CoV-2-neutralizing antibodies from COVID-19 patients. Cell 182, 843–854.e12 (2020); Kreye, J. et al. A therapeutic non-self-reactive SARS-CoV-2 antibody protects from lung pathology in a COVID-19 hamster model. Cell 183, 1058–1069.e19 (2020); McCallum, M. et al. N-terminal domain antigenic mapping reveals a site of vulnerability for SARS-CoV-2. Cell 184, 2332–2347.e16 (2021); Chen, X. et al. Human monoclonal antibodies block the binding of SARS-CoV-2 spike protein to angiotensin converting enzyme 2 receptor. Cell. Mol. Immunol. 17, 647–649 (2020); Cao, Y. et al. Potent neutralizing antibodies against SARS-CoV-2 identified by high-throughput single-cell sequencing of convalescent patients’ B cells. Cell 182, 73–84.e16 (2020); Andreano, E. et al. Extremely potent human monoclonal antibodies from COVID-19 convalescent patients. Cell. 184(7), 1821–1835.e16 (2021)), людей, перенесших инфекцию SARS-CoV (Wec, A. Z. et al. Broad sarbecovirus neutralizing antibodies define a key site of vulnerability on the SARS-CoV-2 spike protein. bioRxiv https://doi.org/10.1101/2020.05.15.096511 (2020); Tian, X. et al. Potent binding of 2019 novel coronavirus spike protein by a SARS coronavirus-specific human monoclonal antibody. Emerg. Microbes Infect. 9, 382–385 (2020); Pinto, D. et al. Cross-neutralization of SARS-CoV-2 by a human monoclonal SARS-CoV antibody. Nature 583, 290–295 (2020)), скрининг библиотек антител, scFv-, Fab- или VH- фрагментов (Li, W. et al. Rapid identification of a human antibody with high prophylactic and therapeutic efficacy in three animal models of SARS-CoV-2 infection. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 117, 29832–29838 (2020); Parray, H. A. et al. Identification of an anti-SARS-CoV-2 receptor-binding domain-directed human monoclonal antibody from a naïve semisynthetic library. J. Biol. Chem. 295, 12814–12821 (2020); Wang, B. et al. Bivalent binding of a fully human IgG to the SARS-CoV-2 spike proteins reveals mechanisms of potent neutralization. bioRxiv https://doi.org/10.1101/2020.07.14.203414 (2020); Wu, Y. et al. Identification of Human Single-Domain Antibodies against SARS-CoV-2. Cell Host Microbe 27, 891–898.e5 (2020); Ku, Z. et al. Molecular determinants and mechanism for antibody cocktail preventing SARS-CoV-2 escape. Nat. Commun. 12, 469 (2021); Fagre, A. C. et al. A potent SARS-CoV-2 neutralizing human monoclonal antibody that reduces viral burden and disease severity in Syrian hamsters. Front. Immunol. 11, 614256 (2020); Noy-Porat, T. et al. A panel of human neutralizing mAbs targeting SARS-CoV-2 spike at multiple epitopes. Nat. Commun. 11, 4303 (2020); Yao, H. et al. Rational development of a human antibody cocktail that deploys multiple functions to confer Pan-SARS-CoVs protection. Cell Res. 31, 25–36 (2021); Kim, C. et al. A therapeutic neutralizing antibody targeting receptor binding domain of SARS-CoV-2 spike protein. Nat. Commun. 12, 288 (2021)).

В настоящий момент уже получены сотни различных SARS-CoV-2-специфических, в том числе и вируснейтрализующих, антител, обладающих различными профилями потентности и широты нейтрализации. Однако разработанные моноклональные антитела могут быть неактивными в отношении появившихся новых вариантов SARS-CoV-2. Так, например, моноклональное антитело бамланивимаб не способно нейтрализовать дельта-вариант SARS-CoV-2 (Planas, D. et al. Reduced sensitivity of SARS-CoV-2 variant Delta to antibody neutralization. Nature 596, 276–280 (2021)). В отношении бета-варианта бамланивимаб и этесивимаб полностью неактивны, а активность касиривимаба значительно снижена (Wang, P. et al. Antibody resistance of SARS-CoV-2 variants B.1.351 and B.1.1.7. Nature 593, 130–135 (2021)). Таким образом, идентификация и всесторонняя характеризация новых SARS-CoV-2-специфических антител является актуальной задачей и позволяет создавать композиции антител, против новых вирусных вариантов SARS-CoV-2 и потенциально против других, в том числе неописанных, коронавирусов.

Известно моноклональное антитело мыши IgM изотипа к RBD фрагменту в составе S-белка вируса SARS-CoV-2 (патент RU 2744274). Данное антитело способно детектировать до 1 нг рекомбинантного RBD фрагмента S-белка вируса SARS-CoV-2 в иммуноферментном анализе и обладает вируснейтрализующей активностью in vitro. Недостатками данного мышиного антитела для целей терапии и профилактики коронавирусной инфекции, вызванной SARS-CoV-2, являются его чужеродность для организма человека и короткое время полужизни, вследствие чего введение такого антитела пациентам может быть иммуногенным и сопровождаться нежелательными побочными реакциями. Кроме того, неизвестны уровень и механизм постулированной авторами нейтрализующей активности данного антитела в отношении SARS-CoV-2, детали эпитопной специфичности (а следовательно, и узнавание им вирусных вариантов, отличных от исходного штамма Wuhan-Hu-1, более не представленного среди циркулирующих изолятов) и возможность практического использования в системах, основанных на проточной цитометрии. Также не известен уровень (ауто)реактивности данного антитела по отношению к клеткам человека, поскольку оно было получено в иммунизированных мышах и в процессе созревания В-клетки проходило негативную селекцию против антигенов мыши, а не человека. Наконец, известно, что производство антител IgM изотипа является крайне трудоемким и сопровождается низким выходом, а сохранение всех заявленных свойств данного антитела при его возможной конверсии в IgG1-формат для преодоления данного ограничения является сомнительным, поскольку будет связано как минимум со снижением его авидности.

Существует множество публикаций, описывающих получение и характеризацию RBD-специфических моноклональных антител человека, в том числе и обладающих вируснейтрализующей активностью. Например, известно моноклональное антитело человека P4A1 (Guo, Y. et al., Nat Commun.12(1), 2623 (2021)). Однако в настоящий момент нет информации о его последовательности, а кроме того нет данных о сохранении им вируснейтрализующей активности в отношении циркулирующих в настоящее время вариантов SARS-CoV-2, а следовательно и о сохранении им терапевтической активности в отношении таких вирусов. Еще одним примером являются упомянутые выше человеческие RBD-специфические нейтрализующие антитела бамланивимаб (LY-CoV555) (Jones, B. et al. The neutralizing antibody, LY-CoV555, protects against SARS-CoV-2 infection in nonhuman primates. Sci. Transl. Med. 13(593), 1-17 (2021) и этесивимаб (LY-CoV016/JS016/CB6) (Shi, R. et al. A human neutralizing antibody targets the receptor-binding site of SARS-CoV-2. Nature 584, 120–124 (2020)), последовательности которых известны. Однако существенным недостатком данных антител является их неспособность нейтрализовать ряд циркулирующих вирусных вариантов SARS-CoV-2 (https://covdb.stanford.edu/page/susceptibility-data/), что ограничивает их профилактическое и терапевтическое использование.

Известна общедоступная база данных CoV-AbDab (http://opig.stats.ox.ac.uk/webapps/covabdab/), содержащая информацию о последовательностях и свойствах сотен RBD-специфических моноклональных антител различного происхождения (в том числе и человеческих), многие из которых обладают вируснейтрализующей активностью в отношении SARS-CoV-2. Недостатками большинства таких антител является их неполная характеризация в плане устойчивости к циркулирующим вариантам SARS-CoV-2, поскольку такие варианты появились позже, чем были получены антитела, а также в плане эпитопной специфичности, широты нейтрализации, наличия или отсутствия ауто- и полиреактивности и т.д.

Наиболее близким аналогом настоящего изобретения является разработка, описанная в заявке WO2021211775A1, где раскрыты несколько моноклональных антител человека, способных связываться с RBD фрагментом Spike-белка SARS-CoV-2 и ряда других сарбековирусов, а также обладающих широкой вируснейтрализующей активностью по отношению к различным циркулирующим вариантам SARS-CoV-2 и другим сарбековирусам. Поскольку пандемия, вызванная SARS-CoV-2, продолжается, и согласно молекулярно-эпидемиологическим наблюдениям наблюдается активное формирование все новых и новых вирусных вариантов, устойчивых к уже имеющимся моноклональным антителам и их сочетаниям, в будущем не исключено возникновение вариантов, устойчивых и к антителам, описанным в заявке WO2021211775A1. Таким образом, получение новых детально охарактеризованных RBD-специфических моноклональных антител как нейтрализующих, так и ненейтрализующих, является крайне актуальной задачей, поскольку может обеспечить рациональный дизайн композиций антител, предотвращающих мутационное ускользание вируса, а также более точную диагностику, эффективную терапию и профилактику коронавирусной инфекции.

Технической проблемой, решаемой настоящим изобретением, является получение новых моноклональных антител, предпочтительно человеческих моноклональных антител, которые способны к связыванию RBD фрагмента Spike-белка вируса SARS-CoV-2 и с высокой аффинностью распознают различные варианты вируса SARS-CoV-2.

Раскрытие сущности изобретения

Новые варианты вируса SARS-CoV-2 все чаще проявляют устойчивость к нейтрализации одобренными к применению моноклональными антителами. Поэтому расширение репертуара эффективных антител против SARS-CoV-2 продолжает оставаться важнейшей целью в условиях продолжающейся пандемии.

Таким образом задачей настоящего изобретения является получение новых моноклональных антител, способных к связыванию с RBD-районом Spike-белка SARS-CoV-2, предпочтительно обладающих вируснейтрализующей активностью, а также антиген-связывающих фрагментов таких антител.

Для ее решения авторами настоящего изобретения была получена панель антител человека, специфичных к RBD Spike-белка SARS-CoV-2 и охарактеризована их активность in vitro и in vivo.

Техническим результатом настоящего изобретения является получение новых моноклональных антител, способных к связыванию с RBD Spike-белка SARS-CoV-2. Высокая аффинность заявляемых антител позволит снизить их дозировку при диагностическом, профилактическом и терапевтическом применении.

Дополнительным техническим результатом для ряда антител является их высокая вируснейтрализующая активность, что обеспечивает возможность их использования в качестве средств профилактики (до- и пост-контактной) и терапии коронавирусной инфекции, вызванной SARS-CoV-2 и близкородственными ему вирусами.

Также полученные авторами настоящего изобретения данные говорят о том, что возможен рациональный дизайн широкого репертуара RBD-специфичных коктейлей антител, содержащих неконкурирующие нейтрализующие антитела, которые будут активными как в отношении циркулирующих в настоящее время вариантов вирусов, так и возможных будущих вариантов.

Поэтому дополнительным техническим результатом настоящего изобретения является создание коктейлей антител, содержащих комбинацию антител изобретения, которые обладают широкой вируснейтрализующей активностью по отношению к различным вариантам SARS-CoV-2.

Антитела и антигенсвязывающие фрагменты

Поставленная задача была решена получением моноклональных антител человека, селективно связывающих RBD фрагмент Spike-белка вируса SARS-CoV-2.

Используемый в настоящей заявке термин «антитело» предназначен для обозначения молекулы иммуноглобулина, составленной из четырех полипептидных цепей, при этом две тяжелые (Н) цепи и две легкие (L) цепи связываются друг с другом дисульфидными связями. Каждая тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи (сокращенно называемую в настоящем документе VH) и константную область тяжелой цепи. Константная область тяжелой цепи состоит из трех доменов: CH1, СН2 и СН3. Каждая легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи (сокращенно называемую в настоящем документе VL) и константную область легкой цепи. Константная область легкой цепи состоит из одного домена: CL.

Области VH и VL могут далее подразделяться на гипервариабельные районы, которые называются определяющими комплементарность областями (CDR), перемежаемые областями с более высоким уровнем консервативности, называемыми каркасными областями (FR). Каждая область VH и VL образована тремя CDR и четырьмя FR, расположенными от амино-терминального конца к карбокси-терминальному концу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.

Четыре каркасных участка формируют конформацию типа бета-складчатого слоя. Участки CDR расположены в близком соседстве друг с другом благодаря каркасным участкам и вносят вклад в образование антигенсвязывающего участка. Участки CDR и каркасные участки антител могут быть определены путем ссылки на нумерационную систему Кабата [Kabat numbering system, Kabat et al., 1987, "Sequences of Proteins of Immunological Interest", US Dept. of Health and Human Services, US Government Printing Office] в сочетании с данными рентгеноструктурного анализа, как указано в заявке WO 91/09967. Участки CDR и каркасные участки антител могут также быть определены по номенклатуре Международной информационной системы по иммуногенетике (International Immunogenetics Information System, www.imgt.org).

Если не указано иное, любая представленная в описании полипептидная цепь имеет аминокислотную последовательность, которая начинается на N-конце и заканчивается на С-конце. Если антигенсвязывающий центр содержит и VH-, и VL-области, то они могут быть расположены на одной и той же полипептидной молекуле или предпочтительно каждая область может располагаться на разных цепях, VH-область может быть частью тяжелой цепи иммуноглобулина или ее фрагмента, а VL-область - частью легкой цепи иммуноглобулина или ее фрагмента.

Как хорошо известно, минорные изменения аминокислотной последовательности, такие как делеция, добавление или замена одной, небольшого количества или даже нескольких аминокислот, могут приводить к получению аллельной формы исходного белка, которая обладает практически идентичными свойствами. Более того, известен способ «перевивки» CDR-петель одного антитела в контекст каркасных последовательностей другого антитела, также с сохранением исходных свойств, что в частности позволяет производить гуманизацию антител, полученных в других млекопитающих. Таким образом, антитело изобретения включает те варианты, аминокислотная последовательность которых вне CDR петель отличается от приведенных в настоящей заявке последовательностей, но которые сохранили ту же антигенсвязывающую активность.

Антитело настоящего изобретения может быть человеческим антителом, гуманизованным антителом, мышиным антителом, химерным антителом и другими генно-инженерными антителами.

Также антитело изобретение может представлять собой аффинно-зрелое антитело.

Используемый в настоящем документе термин «антиген-связывающий фрагмент» антитела обозначает фрагмент антитела, который сохраняет способность к специфическому связыванию с антигеном. К примерам таких фрагментов, включенных в термин «антиген-связывающий фрагмент» антитела, относятся (i) фрагмент Fab, моновалентный фрагмент, состоящий из доменов VL, VH, CL и CH1; (ii) фрагмент F(ab')2, бивалентный фрагмент, состоящий из двух фрагментов Fab, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области; (iii) фрагмент Fd, состоящий из доменов VH и CH1; (iv) фрагмент Fv, состоящий из доменов VL и VH отдельной области антитела; (v) фрагмент dAb (Ward, E.S. et al. Nature. 241, 544-546, (1989)), состоящий из домена VH; и (vi) отдельная определяющая комплементарность область (CDR). Более того, несмотря на то, что два домена во фрагменте Fv, VL и VH кодируются различными генами, их можно объединить, используя рекомбинантные технологии, посредством синтетического линкера, который позволяет построить из них единую белковую цепочку, в которой области VL и VH связываются с образованием моновалентных молекул (известных как одноцепочечные антитела или scFv; см., например, Bird, R.E. et al. Science. 24, 423-426 (1988); Huston, J.S. et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883 (1988)). Такие одноцепочечные антитела также включаются в сферу охвата термина «антиген-связывающий фрагмент» антитела.

Моноклональные антитела человека являются минимально иммуногенными молекулами, поэтому многие современные методы направлены на их получение. Для этого в частности могут использоваться В лимфоциты, выделенные из периферической крови переболевших или вакцинированных доноров.

Специфические в отношении RBD Spike-белка SARS-CoV-2 моноклональные антитела настоящего изобретения были получены путем секвенирования и клонирования кДНК генов иммуноглобулинов в отдельных RBD-специфических В-лимфоцитах доноров, перенесших коронавирусную инфекцию ковид-19 в тяжелой форме и сформировавших высокие титры вируснейтрализующих антител в плазме крови.

Подходящий способ для выделения антител, эффективных для использования в рамках настоящего изобретения, включает (i) выделение В-лимфоцитов периферической крови доноров, перенесших коронавирусную инфекцию ковид-19 и сформировавших высокие нейтрализующие титры антител в сыворотке крови, (ii) окрашивание В-лимфоцитов флуоресцентно меченными препаратами RBD SARS-CoV-2, (iii) сортировка единичных окрашенных RBD+ В-лимфоцитов, (iv) проведение обратной транскрипции и ПЦР с наборами вырожденных праймеров, комплементарных лидерным и константным последовательностям генов иммуноглобулинов, (v) секвенирование полученных ПЦР продуктов с целью выяснения нуклеотидной и аминокислотной последовательностей экспрессируемых такими В-клетками антител, (vi) клонирование нуклеотидных последовательностей таких антител в экспрессионные векторы для наработки в культуре клеток млекопитающих, (vii) очистка, анализ специфичности и активности рекомбинантных моноклональных антител человека. В последующем также предусмотрено определение аминокислотной последовательности вариабельных доменов таких антител, измерение аффинности и специфичности, нейтрализующих свойств in vitro и in vivo.

В результате были получены нуклеотидные последовательности, на основании которых были определены аминокислотные последовательности вариабельных доменов тяжелых и легких цепей антител настоящего изобретения. Участки CDRs были определены по номенклатуре Kabat [Kabat numbering system, Kabat et al., 1987 "Sequences of Proteins of Immunological Interest", US Dept. of Health and Human Services, US Government Printing Office].

Полученное антитело включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), которая содержит последовательности гипервариабельных районов: CDRH1, имеющего аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 1-23, CDRH2, имеющего аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 24-46, и CDRH3, имеющего аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 47-69, и вариабельную область легкой цепи (VL), которая содержит последовательности гипервариабельных районов: CDRL1, имеющего аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 70-92, CDRL2, имеющего аминокислотную последовательность, выбранную из AAS (SEQ ID NO:93), SNN (SEQ ID NO:94), WAT (SEQ ID NO:95), EVS (SEQ ID NO:96), DAS (SEQ ID NO:97), EVT (SEQ ID NO:98), KAS (SEQ ID NO:99), GAS (SEQ ID NO:100), NNN (SEQ ID NO:101), AAS (SEQ ID NO:102), DAS (SEQ ID NO:103), DVS (SEQ ID NO:104), GAS (SEQ ID NO:105), EVS (SEQ ID NO:106), KAS (SEQ ID NO:107), DAS (SEQ ID NO:108), GTS (SEQ ID NO:109), GAS (SEQ ID NO:110), GAS (SEQ ID NO:111), WAS (SEQ ID NO:112), DAS (SEQ ID NO:113), AAS (SEQ ID NO:114), или AAS (SEQ ID NO:115) и CDRL3, имеющего аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 116-138. Также настоящим изобретением предусмотрены антиген-связывающие фрагменты данных моноклональных антител.

В следующем аспекте изобретения предусмотрено моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH) с последовательностью аминокислот не менее чем на 90% гомологичную одной из последовательностей SEQ ID NO: 139-161, и вариабельную область легкой цепи (VL) с последовательностью аминокислот не менее чем на 90% гомологичной одной из последовательностей SEQ ID NO: 162-184.

В одном из воплощений моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, селективно связывающие RBD Spike-белка SARS-CoV-2, характеризуются тем, что вариабельный участок тяжелой цепи (VH) содержит:

(i) CDRH1 последовательности GFTFSSYA (SEQ ID NO: 1);

(ii) CDRH2 последовательности ISYDGSNK (SEQ ID NO: 24);

(iii) CDRH3 последовательности ARARPWRYSYGLYYYYGMDV (SEQ ID NO: 47), и

вариабельный участок легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности QSISSY (SEQ ID NO: 70);

(ii) CDRL2 последовательности AAS (SEQ ID NO: 93);

(iii) CDRL3 последовательности QQSYSTPGS (SEQ ID NO: 116) [антитело iB0].

В другом воплощении моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, селективно связывающие RBD Spike-белка SARS-CoV-2, характеризуются тем, что вариабельная область тяжелой цепи (VH) содержит:

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 2;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 25;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 48, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 71;

(ii) CDRL2 последовательности SNN (SEQ ID NO:94);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 117 [антитело iB1].

В следующем воплощении моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, селективно связывающие RBD Spike-белка SARS-CoV-2, характеризуются тем, что вариабельная область тяжелой цепи (VH) содержит:

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 3;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 26;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 49, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 72;

(ii) CDRL2 последовательности WAT (SEQ ID NO:95);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 118 [антитело iB2].

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 4;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 27;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 50, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 73;

(ii) CDRL2 последовательности EVS (SEQ ID NO:96);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 119 [антитело iB3].

В еще одном воплощении моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, селективно связывающие RBD Spike-белка SARS-CoV-2, характеризуются тем, что вариабельная область тяжелой цепи (VH)содержит:

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 5;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 28;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 51, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 74;

(ii) CDRL2 последовательности DAS (SEQ ID NO:97);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 120 [антитело iB4].

В дополнительном воплощении моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, селективно связывающие RBD Spike-белка SARS-CoV-2, характеризуются тем, что вариабельная область тяжелой цепи (VH) содержит:

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 6;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 29;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 52, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 75;

(ii) CDRL2 последовательности EVT (SEQ ID NO:98);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 121 [антитело iB5]

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 7;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 30;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 53, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 76;

(ii) CDRL2 последовательности KAS (SEQ ID NO:99);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 122 [антитело iB6].

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 8;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 31;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 54, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 77;

(ii) CDRL2 последовательности GAS (SEQ ID NO:100);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 123 [антитело iB9].

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 9;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 32;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 55, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 78;

(ii) CDRL2 последовательности NNN (SEQ ID NO:101);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 124 [антитело iB10].

В альтернативном воплощении моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, селективно связывающие RBD Spike-белка SARS-CoV-2, характеризуются тем, что вариабельная область тяжелой цепи (VH) содержит:

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 10;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 33;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 56, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 79;

(ii) CDRL2 последовательности AAS (SEQ ID NO:102);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 125 [антитело iB11].

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 11;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 34;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 57, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 80;

(ii) CDRL2 последовательности DAS (SEQ ID NO:103);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 126 [антитело iB12]

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 12;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 35;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 58, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 81;

(ii) CDRL2 последовательности DVS (SEQ ID NO:104);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 127 [антитело iB13]

В ином воплощении моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, селективно связывающие RBD Spike-белка SARS-CoV-2, характеризуются тем, что вариабельная область тяжелой цепи (VH) содержит:

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 13;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 36;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 59, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 82;

(ii) CDRL2 последовательности GAS (SEQ ID NO:105);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 128 [антитело iB14]

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 14;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 37;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 60, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 83;

(ii) CDRL2 последовательности EVS (SEQ ID NO:106);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 129 [антитело iB15].

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 15;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 38;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 61, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 84;

(ii) CDRL2 последовательности KAS (SEQ ID NO:107);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 130 [антитело iB16].

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 16;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 39;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 62, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 85;

(ii) CDRL2 последовательности DAS (SEQ ID NO:108);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 131 [антитело iB17].

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 17;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 40;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 63, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 86;

(ii) CDRL2 последовательности GTS (SEQ ID NO:109);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 132 [антитело iB18].

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 18;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 41;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 64, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 87;

(ii) CDRL2 последовательности GAS (SEQ ID NO:110);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 133 [антитело iB19].

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 19;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 42;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 65, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 88;

(ii) CDRL2 последовательности GAS (SEQ ID NO:111);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 134 [антитело iB20].

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 20;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 43;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 66, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 89;

(ii) CDRL2 последовательности WAS (SEQ ID NO:112);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 135 [антитело iB21].

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 21;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 44;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 67, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 90;

(ii) CDRL2 последовательности DAS (SEQ ID NO:113);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 136 [антитело iB24].

В следующем воплощений моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, селективно связывающие RBD Spike-белка SARS-CoV-2, характеризуются тем, что содержит:

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 22;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 45;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 68, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 91;

(ii) CDRL2 последовательности AAS (SEQ ID NO:114);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 137 [антитело iB25].

(i) CDRH1 последовательности SEQ ID NO: 23;

(ii) CDRH2 последовательности SEQ ID NO: 46;

(iii) CDRH3 последовательности SEQ ID NO: 69, и

вариабельная область легкой цепи (VL) содержит:

(i) CDRL1 последовательности SEQ ID NO: 92;

(ii) CDRL2 последовательности AAS (SEQ ID NO:115);

(iii) CDRL3 последовательности SEQ ID NO: 138 [антитело iB26]

В следующем воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 139-161; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 162-184.

В частности моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 139; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 162 [антитело iB0].

В следующем воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 140; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 163 [антитело iB1].

В ином воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 141; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 164 [антитело iB2].

В другом воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 142; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 165 [антитело iB3].

В альтернативном воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 143; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 166 [антитело iB4].

В еще одном воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 144; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 167 [антитело iB5].

В дополнительном воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 145; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 168 [антитело iB6].

В альтернативном моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 146; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 169 [антитело iB9].

В еще одном моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 147; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 170 [антитело iB10].

В следующем воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 148; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 171 [антитело iB11].

В альтернативном моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 149; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 172 [антитело iB12].

В ином воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую ий последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 150; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 173 [антитело iB13].

В дополнительном воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 151; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 174 [антитело iB14].

В другом воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 152; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 175 [антитело iB15].

В еще одном воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 153; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 176 [антитело iB16].

В следующем воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 154; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 177 [антитело iB17].

В дополнительном моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 155; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 178 [антитело iB18].

В еще одном моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 156; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 179 [антитело iB19].

В альтернативном воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 157; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 180 [антитело iB20].

В дополнительном воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 158; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 181 [антитело iB21].

В другом воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 159; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 182 [антитело iB24].

В следующем воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 160; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 183 [антитело iB25].

В дополнительном воплощении моноклональное антитело, селективно связывающее RBD Spike-белка SARS-CoV-2, включает вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 161; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную последовательности, SEQ ID NO: 184 [антитело iB26].

В частности, антитела согласно настоящему изобретению обладают способностью к нейтрализации вируса SARS-CoV-2.

Новые антитела человека, селективно связываются с RBD Spike-белка SARS-CoV-2, содержат приведенные выше последовательности вариабельных областей и могут содержать консервативные участки обеих цепей, необходимые для функционирования указанных антител. Консервативные участки тяжелых цепей иммуноглобулинов классов IgG, IgM, IgA, IgD или IgE человека и других млекопитающих могут быть использованы в качестве консервативных участков для тяжелых цепей согласно настоящему изобретению. Например, антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, согласно изобретению, могут содержать консервативные участки тяжелых цепей, принадлежащие к изотипу IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4. Консервативные участки легкой цепи иммуноглобулинов изотипов каппа или лямбда человека и других млекопитающих могут быть использованы в качестве консервативных участков для легких цепей антител согласно настоящему изобретению.

В настоящем изобретении фраза «нейтрализующее моноклональное антитело» означает молекулу, которая связывается с SARS-CoV-2, образует стабильный комплекс и препятствует прикреплению и/или проникновению вируса SARS-CoV-2 в клетку. Способность антитела к связыванию с антигеном может быть определена специалистом в данной области с использованием методов, включающих, но не ограничивающихся методом иммуноферментного анализа (ИФА), равновесным диализом, с использованием плазмон-поверхностного резонанса и биослойной интерферометрии (BLI). Методы определения аффинности хорошо известны специалисту в данной области техники, подробно описаны Janeway и соавт. (Immunobiology: The Immune System in Health and Disease (Garland Publishing Company, 1996)).

Существующий уровень техники является таким, что позволяет специалисту в данной области синтезировать молекулы ДНК, предлагаемые в изобретении на основе представленной в настоящем описании информации, т.е. аминокислотных последовательностей гипервариабельных участков.

Нуклеиновые кислоты

Для решения поставленной задачи также были получены нуклеиновые кислоты, кодирующие VH указанных антител, в частности имеющие нуклеотидные последовательности SEQ ID NO: 185-207, и VL указанных антител, в частности имеющие нуклеотидные последовательности SEQ ID NO: 208-230.

Используемый в настоящем описании термин нуклеиновая кислота относится к фрагменту ДНК или РНК. Предпочтительно нуклеиновой кислотой, кодирующей антитело согласно настоящему изобретению, является фрагмент ДНК, кодирующий вариабельные тяжелую или легкую цепи моноклонального антитела, селективно связывающего RBD Spike-белка SARS-CoV-2, где данное антитело содержит последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную SEQ ID NO: 139-161, и последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную SEQ ID NO: 162-184.

Специалистам в данной области техники известно, что ввиду вырожденности генетического кода могут быть различия в последовательности ДНК кодирующей одну и ту же аминокислотную последовательность [Льюин Б. Гены. Москва.: Мир, 1987.]. Поэтому последовательности нуклеиновых кислот согласно настоящему изобретению могут отличаться, при условии, что они кодируют участки цепей антитела, содержащего последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную SEQ ID NO: 139-161, и последовательность аминокислот не менее чем на 90% гомологичную SEQ ID NO: 162-184.

Нуклеиновые кислоты изобретения также включают нуклеиновые кислоты, кодирующие тяжелую и легкую цепи моноклональных антител, селективно связывающих RBD Spike-белка SARS-CoV-2, содержащих последовательности аминокислот SEQ ID NO: 231-253 и последовательности аминокислот SEQ ID NO: 254-276. В частности, этими нуклеиновыми кислотами могут быть ДНК последовательности, которые приведены в перечне последовательностей под номерами SEQ ID NO: 277-299 и SEQ ID NO: 300-322.

Экспрессионный вектор

В одном воплощении изобретения предусмотрены рекомбинантные экспрессионные векторы, содержащие молекулу нуклеиновой кислоты по изобретению, причем вектор содержит контролирующую экспрессию последовательность, которая способствует экспрессии кодируемого полипептида в прокариотических или эукариотических клетках-хозяевах и функционально связана с данной молекулой нуклеиновой кислоты.

Рекомбинантный вектор также может включать последовательности нуклеотидов, которые способствуют, контролируют или регулируют экспрессию и транскрипцию полинуклеотида по изобретению, а также трансляцию полипептида по изобретению, причем эти последовательности выбирают в соответствии с используемыми клетками-хозяевами.

Клетки-хозяева, производящие антитела

При использовании в данном документе термин «клетка-хозяин» относится к клетке, в которую была введена экзогенная нуклеиновая кислота, такая как ДНК, например, в составе экспрессионного вектора, и которая способна экспрессировать антитело или антигенсвязывающий фрагмент изобретения. Специалистам в данной области понятно, что такой термин относятся не только к конкретной клетке, в которую была введена экзогенная нуклеиновая кислота, но также к потомству такой клетки. Поскольку определенные изменения могут произойти в последующих поколениях из-за мутаций или воздействий окружающей среды, такое потомство может быть не идентично исходной клетке, но все еще включено в объем термина «клетка-хозяин», используемого в данном документе. В некоторых воплощениях клетки-хозяева включают прокариотические и эукариотические клетки, которые пригодны для экспрессии экзогенной ДНК (например, рекомбинантной последовательности нуклеиновой кислоты). Типичные клетки включают клетки прокариот и эукариот (одноклеточных или многоклеточных), такие как бактериальные клетки, клетки грибов, дрожжевые клетки, клетки растений, клетки насекомых, клетки животных, отличных от человека, и клетки человека. В некоторых воплощениях клетка-хозяин представляет собой клетку HEK293T.

Способы получения антитела

Антитела изобретения могут быть получены рекомбинантным путем, при помощи временной доставки или постоянной интеграции кодирующих их нуклеиновых кислот, например в составе экспрессионного вектора, в клетки-хозяева, такие как клетки млекопитающих, насекомых, дрожжей или растений. После наработки в рекомбинантной системе антитела должны быть очищены до гомогенного состояния при помощи традиционных способов очистки антител, например одной или нескольких стадий хроматографического процесса. Например, антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по изобретению может быть получен способом, включающим культивирование или поддержание клетки-хозяина в таких условиях, чтобы указанная клетка-хозяин продуцировала или экспрессировала антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому изобретению, посредством экспрессии нуклеиновой кислоты, кодирующей тяжелую цепь антитела, и нуклеиновой кислоты, кодирующей легкую цепь антитела, например, в составе вектора, содержащего нуклеиновую кислоту, кодирующую тяжелую цепь антитела, и нуклеиновую кислоту, кодирующую легкую цепь антитела, или векторов, один из которых содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую тяжелую цепь антитела, а второй, нуклеиновую кислоту, кодирующую легкую цепь антитела, и, при необходимости, дополнительно включающий выделение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, полученного таким способом.

Кроме того, известны способы получения антител посредством генетического переноса кодирующих их нуклеиновых кислот in situ или in vivo с использованием, например, внутримышечной инъекции, электропорации, вирусных векторов, наночастиц и липосом, позволяющие обеспечить синтез и продукцию антител и их комбинаций прямо в организме, в результате чего достигается искомый профилактический и/или терапевтический эффект.

Коктейли и комбинации антител

Для SARS-CoV-2 описано несколько основных механизмов прямой вируснейтрализующей активности антител. Первый основан на экранировании сайтов связывания S-белка с рецептором Ace2 за счет конкурентного узнавания антителом так называемого рецептор-связывающего мотива (RBM) в пределах RBD. Второй механизм также предотвращает связывание S-белка с Ace2, но за счет узнавания антителом эпитопов, отличных от RBM, при котором молекула антитела стерически мешает взаимодействию Ace2 с RBM. Третьим является дестабилизация антителом пред-фьюжн структуры Spike-белка и индукция его необратимого перехода в пост-фьюжн конформацию. Четвертый, наоборот, основан на стабилизации пред-фьюжн конформации Spike-белка.

Очевидно, что площадь контакта антитела с интерфейсом RBD-Ace2 прямо коррелирует с потенциальной устойчивостью антитела к аминокислотным заменам в Spike-белке. Так как максимальная площадь контакта антитела и антигена ограничена базовыми особенностями структуры вариабельных доменов тяжелой и легкой цепи, она не может быть существенно увеличена для каждого конкретного антитела. Однако, тот же эффект может достигаться за счет одновременного применения различных антител, связывающихся с независимыми или частично перекрывающимися эпитопами на поверхности Spike-белка, поскольку возникновение двух и более мутаций, инактивирующих сразу несколько вируснейтрализующих антител, без негативных последствий для приспособленности вируса крайне маловероятно. Таким образом, оправдано применение коктейлей антител, сформулированных на основе информации об эпитопах связывания со Spike-белком. При этом существует два формальных сценария использования антител в коктейле.

Первый из них рассчитан на одновременное связывание двух или более антител с вирусом (т.е. со Spike-белком) без взаимной конкуренции. Это значительно повышает эффективность вируснейтрализации, однако не является обязательным при использовании высокопотентных антител, каждое из которых по отдельности обладает высоким нейтрализационным потенциалом. Для такого варианта использования антитела не должны конкурировать, что можно установить при помощи специальных способов постановки иммуноферментного анализа, биослойной интерферометрии или структурного анализа комплексов антитело-антиген (криоЭМ, рентгеноструктурный анализ и т.д.).

Второй сценарий использования коктейлей предусматривает комбинирование антител вне зависимости от их сайтов связывания со Spike-белком, но с учетом их чувствительности к мутациям в геноме вируса, приводящим к заменам аминокислотных остатков в Spike-белке. При таком комбинировании антитела подбираются таким образом, чтобы возникающие мутации не инактивировали все антитела в коктейле. Для такого дизайна коктейлей не требуются данные о конкуренции антител, но нужна детальная картина мутационной чувствительности антител, что может быть определено в нейтрализационных тестах с панелью мутантных вариантов Spike-псевдотипированных вирусов или в условиях in vitro/in vivo эволюции системы вирус/антитело. При этом сценарии использования коктейлей разные антитела не взаимодействуют со Spike-белком одновременно, но гарантируют повышенную устойчивость препарата к вновь появляющимся мутациям.

Помимо информации о наличии или отсутствии взаимной конкуренции антител за связывание с целевым белком (например, c S-белком SARS-CoV-2), крайне важны данные о механизмах активности, аффинности и фармакодинамики. Например, формирование коктейля из двух антител, связывание одного из которых приводит к стерической реорганизации мишени и исчезновению эпитопа для другого антитела, является заведомо непродуктивным. Кроме того, известны примеры синергичной активности не только вируснейтрализующих антител, но и ненейтрализующих (слабонейтрализующих) антител друг с другом. Наконец, соотношение компонент антительного коктейля не обязательно должно быть эквимолярным, и тем самым оно может в значительной мере определять диапазон терапевтической и/ или профилактической активности.

Таким образом, полученная в данной работе информация о взаимной конкуренции антител друг с другом за связывание с RBD, а также данные о чувствительности антител к аминокислотным заменам в RBD, позволяют осуществлять рациональный дизайн коктейлей антител друг с другом и известными коммерческими нейтрализующими антителами. Например, антитела iB6 можно комбинировать не только друг с другом iB20 (как показано в соответствующих примерах), но и с REGN10987 и формулировать тем самым трехкомпонентный коктейль, целиком состоящий из неконкурирующих нейтрализующих антител против района взаимодействия ACE2 и RBD. Также возможны другие подобные комбинации, обеспечивающие большую устойчивость к возникающим заменам в структуре Spike-белка SARS-CoV-2, такие как iB14 + COVA2-15 или iB14 + COV2-2504 и т.д.

Применение антител в лечении и диагностике

Возможность использования моноклональных антител для целей диагностики является их ценным свойством. В частности распространены тест-системы, основанные на принципах иммуноферментного и иммунохроматографического (lateral flow) анализа, позволяющие специфично и селективно детектировать и измерять уровень интересующего аналита в сложных смесях и биологических жидкостях организма. Важными областями применения RBD-специфических моноклональных антител являются диагностика наличия коронавирусной инфекции у человека и других млекопитающих, оценка ее динамики, выяснение принадлежности обнаруженного изолята SARS-CoV-2 к той или иной кладе и, следовательно, прогноз его устойчивости к препаратам моноклональных антител, а также оценка уровня нейтрализующих антител в сыворотке крови и других биологических жидкостях млекопитающих.

Для целей терапии RBD-специфические моноклональные антитела и их комбинации могут быть использованы при введении человеку или другому млекопитающему в короткий срок после появления первых симптомов заболевания, вызванного SARS-CoV-2. Пути введения антител могут включать внутривенную и внутримышечную инъекцию, доставку аэрозолем в дыхательные пути или подкожное введение. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент изобретения могут быть введены системно, назально или путем прямой доставки кодирующих его нуклеиновых кислот в организм млекопитающих. Помимо терапевтического применения антитела могут быть введены заранее в качестве меры профилактики. В таком случае целесообразно использование антител для лиц, имеющих высокий риск заражения вирусом SARS-CoV-2, тяжелого течения заболевания и не подлежащих вакцинации по медицинским или иным причинам. При профилактическом использовании необходимо учитывать период полужизни антител в кровотоке, который в среднем для антител изотипа IgG1 составляет 21 день, но может быть значительно увеличен за счет модификации последовательности аминокислотных остатков в Fc-части.

Кроме того, необходимо учитывать то, что человек – не единственный вид млекопитающих, для которого показана возможность инфицирования SARS-CoV-2 и близкими ему вирусами. В частности, случаи заражения SARS-CoV-2 были показаны для многих представителей семейства кошачьих (кошка, лев, тигр, снежный барс, пума), куньих (норка, хорек), приматов (горилла, макаки), псовых (собака, енотовидная собака) рукокрылых, грызунов (хомячки), оленевых (белохвостый олень) и панголинов. Несмотря на то, что эффективный перенос вируса и его вариантов внутри этих видов животных и тем более обратного заражения от них человека происходит редко (например, известны случаи заражения людей от выращиваемых в зверохозяйствах норок), возможность формирования новых зоонозных очагов SARS-CoV-2 является эпидемиологической угрозой и требует развития надежного молекулярного инструментария, позволяющего детектировать, типировать, а при необходимости и нейтрализовать SARS-CoV-2, включая его варианты, также и в других видах млекопитающих.

Химерные антигенные рецепторы

В некоторых воплощениях настоящее изобретение относится к химерному антигенному рецептору, содержащему антигенсвязывающий сайт антитела настоящего изобретения. Используемый в данном документе термин «химерный антигенный рецептор» или «CAR» относится к рекомбинантному трансмембранному белку, экспрессируемому в клетке млекопитающего, который включает, по меньшей мере, внеклеточный домен, трансмембранный домен и внутриклеточный домен сигнализации. Необязательно, белок CAR включает «спейсер», который ковалентно связывает внеклеточный домен с трансмембранным доменом. Спейсер часто представляет собой полипептид. CAR обычно экспрессируется в лимфоцитах млекопитающих. В некоторых воплощениях CAR экспрессируется в клетке млекопитающих, такой как Т-клетка, NK-клетка, макрофаг или инфильтрирующий опухоль лимфоцит (TIL). CAR, экспрессируемый на Т-клетках, упоминается в данном документе как “CAR T-клетка” или “CAR-T.” В некоторых воплощениях CAR-T представляет собой хелперную Т-клетку, цитотоксическую Т-клетку, Т-клетку естественного киллера, Т-клетку памяти, регуляторную Т-клетку или гамма-дельта-Т-клетку. CAR-Т часто является аутологичной CAR-Т, хотя аллогенные CAR-Т включены в объем изобретения. Внеклеточный домен CAR включает антигенсвязывающую область, такую как антитело или его антигенсвязывающий фрагмент (например, scFv), который специфически связывается в физиологических условиях с антигеном, таким как S-белок вируса SARS-CoV-2. При специфическом связывании биохимическая цепь событий (т.е. сигнальная трансдукция) приводит к модуляции иммунологической активности CAR-T. Так, например, специфическое связывание антигенсвязывающей области CAR с его антигеном может приводить к изменениям иммунологической активности активности CAR Т-клеток, что отражается на изменениях цитотоксичности, пролиферации или продукции цитокинов. Передача сигнала при активации CAR достигается в некоторых воплощениях CD3-дзета цепью («CD3z»), которая участвует в трансдукции сигнала в нативных Т-клетках млекопитающего. CAR-T могут дополнительно содержать один или несколько костимулирующих доменов, заимствованных от таких белков как CD28, 41BB, OX40 или ICOS для дальнейшей модуляции иммуномодулирующего ответа Т-клетки. CD3z включает консервативный мотив, известный как мотив активации на основе тирозина на основе иммунорецептора (ITAM), который участвует в трансдукции сигнала Т-клеточного рецептора.

Краткое описание чертежей и таблиц, иллюстрирующих изобретение

На Фиг. 1 показаны результаты иммуноферментного анализа сывороток четырех доноров-реконвалесцентов (С33, С34, С35, С36) и контрольной сыворотки здорового донора (К-) против RBD SARS-CoV-2 (изолят Wuhan-Hu-1), иммобилизованного в лунках планшета.

На Фиг. 2 показана стратегия гейтирования и репрезентативные результаты FACS-окрашивания В-лимфоцитов донора-реконвалесцента С34.

На Фиг. 3 показаны результаты разделения очищенных рекомбинантных RBD-специфических антител в SDS-полиакриламидном геле. М – маркер молекулярного веса, LC – легкая цепь антитела, HC – тяжелая цепь антитела.

На Фиг. 4 показаны результаты BLI-анализа аффинности моноклональных антител к RBD SARS-CoV-2 (26,7 нМ). Представлены только данные для антител, обнаруживших заметное связывание с RBD. Данные для остальных антител аналогичны glVRC01 (негативный контроль, отсутствие связывания).

На Фиг. 5 показаны результаты BLI-анализа аффинности наиболее потентных моноклональных антител к RBD SARS-CoV-2.

На Фиг. 6 показаны результаты цитометрического анализа окрашивания клеток линии HEK293T с поверхностной экспрессией Spike-белка коронавирусов HCoV-229E, HCoV-NL63 и SARS-CoV-2 моноклональными антителами против RBD SARS-CoV-2.

На Фиг. 7 показаны результаты нейтрализационных тестов моноклональных антител iB-серии, а также известных референсных SARS-CoV-2-нейтрализующих антител (REGN10933, REGN10987, COVA2-15, COV2-2504) в псевдовирусной (А) и аутентичной (Б) вирусной системе.

На Фиг. 8 показаны данные анализа попарной конкуренции моноклональных антител за связывание с RBD SARS-CoV-2, полученные при помощи биослойной интерферометрии.

На Фиг. 9 представлены результаты BLI-анализа конкуренции вируснейтрализующих RBD-спрецифических моноклональных антител COVA2-15, iB12, iB15, REGN10933, iB4, iB6 с REGN10987, COVA2-15, iB12 и iB20 за связывание с RBD SARS-CoV-2.

На Фиг. 10 показаны данные BLI-анализа, свидетельствующие об отсутствии взаимной конкуренции вируснейтрализующих моноклональных антител iB20, REGN10987 и iB6 за связывание с RBD SARS-CoV-2 (A), и Венн-диаграмма перекрывания эпитопов представленных моноклональных антител.

На Фиг. 11 приведены данные анализа активности моноклональных антител iB12, iB14 и смеси iB6+iB20 терапевтическом и профилактическом введении на модели заражения SARS-CoV-2 сирийских хомячков. А – динамика изменения веса подопытных животных, Б - вирусная нагрузка (количество копий вирусной РНК на 1 мг ткани, данные для гена RdRp SARS-CoV-2) в легких хомяков на 5 день после заражения, В – степень легочной патологии.

На Фиг. 12 приведены данные гистопатологического анализа срезов легких хомяков на 5 день после инфицирования SARS-CoV-2 (окрашивание гематоксилин-эозином, представлены репрезентативные изображения для каждой группы).

На Фиг. 13 представлена диаграмма изменения нейтрализующих свойств моноклональных RBD-специфических антител против вариантов Spike-белка (одноаминокислотные замены (А) и комбинации замен (Б)) на системе нейтрализации Spike-псевдотипированных лентивирусных частиц. * - замены, отсутствующие среди циркулирующих изолятов SARS-CoV-2.

На Фиг. 14 показано сохранение (зеленый круг) или потеря (красный квадрат) нейтрализующей активности в отношении S^KEN-псевдотипированных лентивирусных частиц различными моноклональными антителами и их комбинациями. Представлено изменение значений IC₅₀ относительно предкового варианта Spike (изолят Wuhan-Hu-1), серым выделен диапазон 5-кратного изменения IC₅₀, не являющийся существенным в плане потентности исследуемых антител.

В Табл. 1 представлены характеристики полученных моноклональных антител (серия iB) и известных антител, специфичных к RBD SARS-CoV-2. Блокирование ACE2-RBD 1 было протестировано путем добавления смеси антитело /RBD к клеткам линии ACE2-HEK293T. Способность моноклонального антитела предотвращать связывание RBD с ACE2 была измерена при помощи проточной цитометрии. Протективный эффект был рассчитан по формуле (1 - (MFI_{антитело} - MFI_фон)/(MFI_{только RBD} – MFI_фон)) × 100%. Способность моноклональных антител связываться со Spike-белком на клеточной поверхности была исследована с использованием клеток линии HEK293T с поверхностной экспрессией Spike-белка SARS-CoV-2. Аутореактивность³ исследована при помощи окрашивания клеток линии HEP-2, параметры вируснейтрализации - в системе Spike-псевдотипированных лентивирусных частиц⁴ и аутентичного вируса SARS-CoV-25. Константы афинности⁶ были измерены при помощи биослойной интерферометрии или получены из литературных источников. MFI – средняя интенсивность флуоресценции, NT – не исследовано, ND – не детектировано, NA – не известно.

В Табл. 2 представлены результаты иммуноферментного анализа способности полученных моноклональных антител связываться с RBD SARS-CoV-2 дикого типа (изолят Wuhan-Hu-1), а также с RBD вариантов delta и beta. (+) – связывание, (-) – отсутствие связывания, (+/-) – слабое связывание.

В Табл. 3 представлены результаты Вестерн-блот гибридизации очищенного RBD SARS-CoV-2 и неочищенного рекомбинантного S-белка SARS-CoV-2 с полученными моноклональными антителами в присутствии и в отсутствие восстановителя. (+) – связывание, (-) – отсутствие связывания, (-/+) – слабое связывание.

Осуществление изобретения

Последующие примеры приведены исключительно для целей объяснения и не предназначены для ограничения каким-либо образом объема настоящего изобретения.

Пример 1. Выделение В-лимфоцитов человека, специфических к RBD Spike-белка вируса SARS-CoV-2.

Образцы инактивированной прогреванием в течение 30 минут при +56°С плазмы доноров, перенесших коронавирусную инфекцию ковид-19, были проанализированы при помощи набора SARS-СоV-2-IgG-ИФА (ООО «Хема-Медика»). Затем, у доноров, образцы плазмы которых обнаруживали титры RBD-специфических антител 1:5000 и выше (Фиг. 1), был произведен забор периферической венозной крови и выделение живых CD19⁺ IgG⁺ B-лимфоцитов (окрашивание DAPI, конъюгатами anti-human CD19-PE (ООО «Сорбент»), anti-human IgG-FITC (ООО «Сорбент»), 5 мкл/10⁶ мононуклеарных клеток крови). B-лимфоциты были дополнительно окрашены биотинилированным рекомбинантным RBD SARS-CoV-2 (2 мкг/мл) с последующей детекцией при помощи конъюгата APC-стрептавидин (Thermo Fisher Scientific). Поверхностный фенотип целевой популяции В-лимфоцитов для сортировки единичных клеток в индивидуальные ПЦР-пробирки таким образом был RBD^highCD19⁺IgG⁺DAPI⁻ (Фиг. 2). Окрашенные аналогичным образом В-лимфоциты здоровых доноров были использованы в качестве негативного контроля.

Пример 2. Получение моноклональных антитела человека против RBD Spike-белка вируса SARS-CoV-2.

Процедуры синтеза кДНК с единичных В-лимфоцитов и ПЦР с обратной транскрипцией проводили, как описано в работе Guselnikov и соавт (Guselnikov, S. V. et al. A simple way to increase recovery of the expressed VH and VL genes in single-sorted human B cells. BioTechniques 67, 184–187 (2019)), за исключением того, что для амплификации последовательностей, кодирующих γ- и λ-цепи антител, был использован протокол для μ-цепей. В частности для амплификации последовательностей генов VHγ, Vκ и Vλ были использован набор вырожденных праймеров из работы Tiller и соавт. (Tiller, T. et al. Efficient generation of monoclonal antibodies from single human B cells by single cell RT-PCR and expression vector cloning. J. Immunol. Methods 329, 112–124 (2008)). Парные образцы ПЦР-ампликонов (VHγ + Vκ или Vλ) секвенировали по Сэнгеру и клонировали в векторы для эукариотической экспрессии, кодирующие константные районы γ1, κ или λ-цепей иммуноглобулинов человека (Tiller, T. et al. Efficient generation of monoclonal antibodies from single human B cells by single cell RT-PCR and expression vector cloning. J. Immunol. Methods 329, 112–124 (2008)).

Таким образом были получены пары последовательностей VH- и VL-генов для 33 B-лимфоцитов, из которых 28 были представлены уникальными комбинациями последовательностей. Смесь плазмидных ДНК экспрессионных конструкций, кодирующих корректные пары легких и тяжелых цепей антител, была доставлена в клетки линии HEK293T, используя метод кальций-фосфатной трансфекции (Chenuet, S. et al. Calcium phosphate transfection generates mammalian recombinant cell lines with higher specific productivity than polyfection. Biotechnol. Bioeng. 101, 937–945 (2008)). Как правило, за 12 часов до проведения трансфекции 10⁷ клеток рассаживали в культуральные флаконы площадью 150 см² в среде IMDM (Gibco, Thermo Fisher Scientific) с добавлением 10% FBS (Gibco, Thermo Fisher Scientific) и смеси пенициллина/стрептомицина (Gibco, Thermo Fisher Scientific). Плазмидные ДНК смешивали в молярном соотношении 1:1, к полученной смеси добавляли 2 М CaCl₂ до финальной концентрации 25 мМ и доводили суммарный объем смеси стерильной водой до 3 мл. Затем смесь медленно добавляли к 3 мл раствора 2× HBS (50 мМ HEPES, 1,5 мМ Na₂HPO₄, 280 мМ NaCl, 10 мМ KCl, 12 мМ сахароза, pH = 7.11) при постоянном интенсивном перемешивании. Полученный раствор добавляли по каплям к клеткам. Спустя 8 часов, культуральную среду заменяли на бессывороточную среду EX-CELL® 293 Serum-Free Medium (Sigma). Трансфицированные клетки росли в течение 6 дней в CO₂-инкубаторе при 37°C, 5% CO₂. Супернатантны, очищенные от клеточного дебриса при помощи центрифугирования (4000× g, 10 мин), фильтровали через 0.22 мкм PES-фильтр (TPP). Антитела очищали на колонке с Protein A агарозой (McLab, USA, #PPA-503) в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, после загрузки колонку промывали дважды PBS. Антитела элюировали раствором 0.1 M глицина, pH 2,7, 150 мМ NaCl в нейтрализующий буфер состава 1 M Tris, pH 8,0, в соотношении 1:10. Чистоту и выход препаратов антител контролировали посредством разделения в 15% SDS-полиакриламидном геле (Фиг. 3). Затем проводили диализ в течение ночи в PBS и концентрировали с использованием колонок Ultra-15 Ultracel-100K (Amicon) до финальной концентрации 2 мг/мл.

Для измерения кинетики взаимодействия антител с RBD была использована биослойная интерферометрия (прибор Octet (ForteBio), биосенсоры NTA). С этой целью была вначале проведена иммобилизация рекомбинантного белка RBD-His6 (30 мкг/мл) на поверхности биосенсора. Нерелевантный белок Fn3, также несущий His6-эпитоп и обладающий схожим молекулярным весом, был иммобилизован на контрольном сенсоре (30 мкг/мл), после чего производили необратимую иммобилизацию данных белков на сенсорах при помощи EDC/NHS, в соответствии с инструкциями производителя. Значения KD были получены с использованием концентрации RBD-His6, равной 26,7 нМ. Для обработки данных были использованы параметры полного локального фиттинга, бивалентная модель, R² > 0,9, Χ² < 3 (Фиг. 4). Затем для девяти наиболее аффинных моноклональных антител (iB3, iB6, iB9, iB12, iB13, iB14, iB15, iB19 и iB20) была проведена более точная характеризация связывания в диапазоне 6 концентраций RBD-His6 (6,25 нМ, 12,5 нМ, 25 нМ, 50 нМ, 100 нМ, 200 нМ). С этой целью были использованы AHC-биосенсоры и проведена иммобилизация антител. В качестве нерелевантного антитела было использовано моноклональное антитело человека glVRC01 (Georgiev I. S. et al. Antibodies VRC01 and 10E8 neutralize HIV-1 with high breadth and potency even with Ig-framework regions substantially reverted to germline. J Immunol. 192(3), 1100-1106 (2014)). Для обработки данных были использованы параметры полного глобального фиттинга, бивалентная модель, R² > 0,9, Χ² < 3 и последовательный переход между режимами: Baseline 30 с, Loading 300 с, Baseline2 60 с, Association 600 с, Dissociation 1500 с, Regeneration 3 × 5 с (Фиг. 5). Значения K_D, K_on и K_off для 23 моноклональных антител приведены в Табл. 1.

Способность всех 23 моноклональных антител узнавать RBD в контексте Spike-белка SARS-CoV-2, а не только рекомбинантный RBD, была подтверждена с использованием проточной цитометрии клеток HEK293T, экспрессирующих Spike-белок SARS-CoV-2 на своей поверхности (Фиг. 6, Табл. 1). Более того, ни одно из полученных моноклональных антител не было способно узнавать Spike-белки двух родственных альфакоронавирусов, HCoV-229E и HCoV-NL63 (Фиг. 6), в полном соответствии со значительной степенью эволюционной дивергенции их последовательностей RBD и использованной стратегией отбора В-лимфоцитов именно против RBD Spike-белка SARS-CoV-2.

На основании полученных данных с учетом генетического кода были определены аминокислотные последовательности вариабельных доменов тяжелых (SEQ ID NO: 139-161) и легких (SEQ ID NO: 162-184) цепей 23 моноклональных антител, специфичных к RBD Spike-белка SARS-CoV-2. Участки CDRs VH (SEQ ID NO: 1-69) и VL (SEQ ID NO: 70-138) были определены по номенклатуре Kabat [Kabat numbering system, Kabat et al., 1987 "Sequences of Proteins of Immunological Interest", US Dept. of Health and Human Services, US Government Printing Office].

Таким образом, были получены аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 139-161 и SEQ ID NO: 162-184, а также кодирующие их нуклеотидные последовательности SEQ ID NO: 185-207 и SEQ ID NO: 208-230.

Проведенный биоинформатический анализ последовательностей этих антител против известных последовательностей антител к SARS-CoV-2 не выявил антител, на 100% совпадающих по последовательностям легкой и тяжелой цепи с антителами изобретения.

Пример 3. Определение вируснейтрализующей активности моноклональных антител человека in vitro.

Для оценки уровня вируснейтрализующей активности моноклональных антител использовали два подхода: суррогатный тест с использованием псевдотипированных лентивирусных частиц и микронейтрализационный тест с использованием аутентичного вируса SARS-CoV-2.

Для получения лентивирусных частиц, псевдотипированных Spike-белком SARS-CoV-2 проводили кальций-фосфатную трансфекцию клеток линии HEK293T смесью плазмид psPAX2, pLV-EGFP и pCAGGS-SpikeΔ19 в молярном соотношении 4:6:3. Плазмида pCAGGS-SpikeΔ19 кодировала укороченный с С-конца на 19 аминокислотных остатков Spike-белок, соответствующий исходному штамму Wuhan-Hu-1 SARS-CoV-2 или мутантным вариантам Spike SARS-CoV-2 (SΔ19). Через восемь часов после трансфекции среду заменяли на Opti-Mem (Gibco, Thermo Fisher Scientific) с добавлением 2,5% FBS (Gibco, Thermo Fisher Scientific). Супернатанты собирали два дня спустя, центрифугировали при 4000 об/мин в течение 5 минут, после чего лентивирусные частицы концентрировали путем центрифугирования при 20000× g, 4°C в течение 90 минут. Для проведения нейтрализационного теста в качестве мишеней использовали клетки линии ACE2-HEK293T со стабильной поверхностной экспрессией белка ACE2, рассаженные с плотностью 30000 клеток/лунку в 96-луночном штативе в день проведения теста. Антитела серийно двукратно разводили в среде Opti-MEM с добавлением 2,5% FBS в диапазоне от 0,5 нг/мл до 1 мкг/мл и ко-инкубировали с 20000 лентивирусных частиц, псевдотипированных Spike-белком SARS-CoV-2 в течение 30 мин при 37°C в объеме 100 мкл. Полученную смесь антител и лентивирусных частиц добавляли к клеткам ACE2-HEK293T и возвращали в CO₂-инкубатор. Спустя 72 часа после трансдукции измеряли процент трансдуцированных (GFP⁺) клеток, используя проточный цитометр. Значение концентрации полумаксимального ингибирования IC₅₀ определяли, используя нелинейную регрессию, как концентрацию, обеспечивавшую нейтрализацию 50% псевдотипированных лентивирусных частиц (Фиг. 7а).

Микронейтрализационный тест с использованием аутентичного вируса SARS-CoV-2 проводили, как описано в работе Nurtop и соавторов (Nurtop, E. et al. Combination of ELISA screening and seroneutralisation tests to expedite Zika virus seroprevalence studies. Virol. J. 15, 192 (2018)) в 96-луночных планшетах (Costar), используя в качестве мишеней клетки линии VeroE6, культивируемые в среде DMEM с добавлением 5% FBS. Вирусный супернатант (100 TCID₅₀) смешивали с равным объемом серийных разведений моноклональных антител и инкубировали при 37°C в течение 1 часа. Затем полученные смеси вирус/антитело (100 мкл) переносили в лунки планшета с монослоем клеток линии VeroE6. Спустя 5-7 дней лунки c клетками анализировали визуально при помощи инвертированного микроскопа и выясняли IC₁₀₀ (наименьшая концентрация антитела, обеспечивавшая полную защиту от заражения 100 TCID₅₀ вируса SARS-CoV-2 (Фиг. 7б). Значения вируснейтрализующей активности моноклональных антител в обоих тестах in vitro приведены в Табл. 1. Таким образом, установлено, что моноклональные антитела iВ12, iВ15, iB14, iB3 являются ультрапотентными нейтрализаторами SARS-CoV-2 (IC₁₀₀<16 нг/мл), вируснейтрализующая активность iB9, iB20, iB6, iB13, iB19, iB18, iB24, iB11, iB4 значительно ниже и находится в диапазоне 125 нг/мл – 25 мкг/мл, а остальные моноклональные RBD-специфические антитела не обладают выраженной вируснейтрализующей активностью (Табл. 1).

Пример 4. Определение конкурентных взаимоотношений между моноклональными антителами за связывание с эпитопами RBD.

Мы обратились к анализу на основе биослойной интерферометрии для выяснения попарной конкуренции 22 RBD-специфических моноклональных антител за связывание с RBD. С этой целью рекомбинантный RBD-His6 (14 мкг/мл) был иммобилизован на NTA-биосенсор, после чего к нему было добавлено насыщающее количество первого антитела (Ab1, 75 мкг/мл (500 нМ). Сформированный таким образом комплекс RBD-Ab1 затем инкубировали со вторым антителом, Ab2. В целом была использована следующая 6-шаговая схема: Baseline 60 с, Loading 200 с, Baseline2 30 с, Saturation Ab1 600 с, Competing Ab2 600 с, Regeneration в глицин-HCl, pH 1,7, 5 × 3 с.

Большинство нейтрализующих моноклональных антител формировали два крупных кластера (Фиг. 8). В первый кластер входили высокопотентные антитела iB3, iB12, iB14 и iB15, а также умереннопотентное iB13 и слабопотентное iB11. Кластер II состоял из умеренно- и слабопотентных антител iB9, iB17, iB18, iB19, iB20, iB24 и iB25. Нейтрализующее моноклональное антитело iB6 не принадлежало ни одному из этих кластеров. Ненейтрализующие антитела также формировали свой отдельный кластер.

Данный анализ был расширен с целью выяснения возможности комбинирования выделенных нами 9 лидирующих нейтрализующих антител с рядом известных нейтрализующих антител, в частности REGN10933, REGN10987, COVA2-15 и COV2-2504 (Brouwer, P. J. M. et al. Potent neutralizing antibodies from COVID-19 patients define multiple targets of vulnerability. Science 369, 643–650 (2020); Hansen, J. et al. Studies in humanized mice and convalescent humans yield a SARS-CoV-2 antibody cocktail. Science 369, 1010-1014 (2020). Zost, S. J. et al. Rapid isolation and profiling of a diverse panel of human monoclonal antibodies targeting the SARS-CoV-2 spike protein. Nat. Med. 26, 1422–1427 (2020)). Было обнаружено, что моноклональные нейтрализующие антитела iB20, iB6, и REGN10987 не конкурируют друг с другом и могут одновременно связываться с RBD, т.е. их эпитопы не перекрываются. Эпитопы остальных моноклональных антител в разной степени перекрываются друг с другом (Фиг. 9, Фиг. 10). В частности, моноклональные нейтрализующие антитела iB3, iB12, iB13, iB14, iB15, REGN10933 и COV2-2504 конкурируют друг с другом за связывание с RBD, однако различаются между собой в плане конкуренции с СOVA2-15 и REGN10987. Последние два антитела конкурируют с iB3 и iB12, но не с iB13 и iB14. В то же время, REGN10933, iB15 и COV2-2504 не обнаруживают конкуренции с REGN10987, но конкурируют с COVA2-15. Антитела iB3, iB12, iB13, iB14, iB15, REGN10933, СOV2-2504 и COVA2-15, связанные с RBD, предотвращают связывание iB9, iB19 и iB20. Однако при обратной постановке эксперимента блокирование оказывается неполным. Таким образом, проведенный конкурентный анализ свидетельствует о том, что 13 нейтрализующих моноклональных антител образуют 8 эпитопных групп: iB13/iB14, REGN10933/COV2-2504/iB15, iB3/iB12, iB9, COVA2-15, iB19/iB20, iB6 и REGN10987 (Фиг. 10), что открывает значительный простор для создания различных композиций неконкурирующих друг с другом вируснейтрализующих антител. Например, такие композиции могут быть образованы сочетаниями iB14 + COVA2-15, iB14 + REGN10987, iB20 + iB6, iB15 + REGN10987, COV2-2504 + REGN10987, iB20 + REGN10987 или iB6 + iB20 + REGN10987.

Пример 5. Вируснейтрализующая активность моноклональных антител и их комбинаций in vivo.

Для оценки вируснейтрализующей активности моноклональных антител и их комбинаций in vivo была использована модель инфекции SARS-CoV-2 на сирийских хомячках. Вначале была исследована активность iB12 и смеси iB6/iB20 (1:1) в качестве профилактики и/или терапии инфекции SARS-CoV-2 и вызванной этим вирусом легочной патологии (Фиг. 11, верхняя панель). Дополнительно был проведен независимый эксперимент с антителами iB14, поскольку оно было более устойчиво к некоторым из замен в последовательности Spike-белка у циркулировавших в 2020-2021 годах вариантов SARS-CoV-2 (Фиг. 11, нижняя панель). В профилактической схеме было сформировано семь групп животных (n = 6), которым внутрибрюшинно вводили моноклональные антитела: 10 мг/кг iB12 (группа 1), 1 мг/кг iB12 (группа 2), 10 мг/кг 1:1 смесь iB6 и iВ20 (группа 3), 1 мг/кг смесь iB6 и iВ20 (группа 4), 10 мг/кг суммарный иммуноглобулин IgG человека (группа 5, негативный контроль) за 24 часа до инфекции (–1 dpi). Животные, не получившие ни антител, ни вирус (группа 6), были использованы в качестве дополнительного негативного контроля. На следующий день (0 dpi) животных интаназально зараражали SARS-CoV-2 (50 мкл/нозд.) в суммарной дозе 1,3 × 10³ БОЕ. В терапевтической схеме животные получали iB12 (10 мг/кг, внутрибрюшинно) 6 часов после заражения (группа 7). Животных взвешивали ежедневно. В каждой группе троих животных усыпляли на 5 день после заражения (5 dpi), легкие выделяли для оценки вирусной нагрузки и патолого-морфологического исследования. Также производили забор крови для измерения уровня иммуноглобулинов человека IgG в сыворотке животных. В эксперименте по оценке протективных свойств моноклонального антитела iB14 была проверена дополнительная временная точка, 24 ч после инфекции (6-7 животных на группу).

Как профилактическое, так и терапевтическое введение антител обладало выраженным эффектом. В то время как контрольные животные прогрессивно теряли в весе (снижение на 15% к 5 дню после заражения), все животные из экспериментальных групп прибавляли в весе, начиная с 3 дня после заражения (Фиг. 11А). Кроме того, измерение уровней вирусной нагрузки в гомогенатах легких хомяков (ртПЦР) свидетельствовало о том, что животные, получившие моноклональные антитела профилактически имели уровни вирусной РНК, сниженные по сравнению с контролем, на 2–6 порядков. Терапевтическое применение моноклональных антител iB12 и iB14 в дозировке 1 мг на животное также обладало протективным эффектом, выражавшимся в снижении вирусной нагрузки в легких (Фиг. 11Б). В легких контрольных животных были обнаружены признаки интерстициальной пневмонии, включая множественные перибронхиальные и периваскулярные очаги лейкоцитарной инфильтрации в сочетании с отеком, множественными некротическими изменениями в интерстиции и выраженной консолидацией легочной ткани (более 50%). Профилактическое введение iB12 (1 мг) обладало наибольшим протективным эффектом в отношении легких: у животных из этой группы уровень легочной патологии был минимальным. Снижение дозы моноклонального антитела iB12 (0,1 мг), использование смеси iB6 + iB20 (0,1 и 1 мг), а также терапевтическое введение iB12 предотвращало развитие пневмонии, хотя иногда и наблюдалось утолщение альвеолярных перегородок с незначительной гиперплазией альвеолярных эпителиоцитов второго типа или десквамацией эпителия бронхиол, а также периваскулярные отеки (Фиг. 11В, Фиг. 12). Терапевтическое введение сниженной дозы моноклонального антитела iB14 или его отложенное введение через 24 часа после заражения не отражалось на уровне вирусной РНК в легких хомяков, однако потеря веса у таких животных была значительно меньше, чем в контроле (Фиг. 11А,Б). Измерение уровня вирусной РНК в гомогенатах легких хомяков проводили с использованием количественной обратной ПЦР в реальном времени. Для этой цели половину левой доли легкого взвешивали, помещали в раствор LIRA (Биолабмикс) и замораживали. Образцы тщательно гомогенизировали и использовали для выделения РНК в соответствии с инструкциями производителя. Используя набор RevertAid cDNA synthesis kit (Thermo Scientific) и случайные гексамерные олигонуклеотиды, была получена кДНК с 1 мг суммарной РНК. Для проведения обратной ПЦР в реальном времени были использованы два набора праймеров, специфически узнающих последовательности генов RdRp и E SARS-CoV-2 (Corman, V. M. et al. Detection of 2019 novel coronavirus (2019-nCoV) by real-time RT-PCR. Euro Surveill. 25, 2000045 (2020)), а также нормировочные праймеры, соответствующие транскриптам гена Rpl18 хомяка (Zivcec, M., Safronetz, D., Haddock, E., Feldmann, H. & Ebihara, H. Validation of assays to monitor immune responses in the Syrian golden hamster (Mesocricetus auratus). J. Immunol. Methods 368, 24–35 (2011)).

Пример 6. Изучение чувствительности нейтрализующих моноклональных антител к разнообразным заменам в Spike-белка SARS-CoV-2, в том числе присутствующим в циркулирующих вирусных вариантах.

С целью выяснения возможной чувствительности нейтрализующих моноклональных антител к заменам в RBD Spike-белка SARS-CoV-2 с использованием направленного мутагенеза была получена панель экспрессионных конструкций, кодирующих 9 одноаминокислотных вариантов Spike-белка (K417N, N439K, K444Q, N460T, A475V, Е484K, F486K, F490L и N501Y) SARS-CoV-2. Такие конструкции были использованы для получения псевдотипированных лентивирусных частиц и проведения суррогатного теста на вируснейтрализацию с моноклональными нейтрализующими антителами iB3, iB6, iB9, iB12, iB14, iB15 и iB20), а также четырьмя референсными нейтрализующими антителами REGN10987, REGN10933, COVA2-15 и COV2-2504. Замена N501Y присутствует в нескольких циркулирующих вариантах вируса SARS-CoV-2, а именно в 501Y.V1 (клада B.1.1.7), 501Y.V2 (клада B.1.351) и 501Y.V3 (клада P.1). В последних двух случаях, N501Y встречается в сочетании с заменами K417N и E484K. В свою очередь замена E484K встречается в кладе B.1.525 и обусловливает устойчивость таких вирусов к некоторым известным нейтрализующим моноклональным антителам (Jones, B.E. et al. The neutralizing antibody, LY-CoV555, protects against SARS-CoV-2 infection in nonhuman primates. Sci. Transl. Med. 13, eabf1906 (2021); Hansen, J. et al. Studies in humanized mice and convalescent humans yield a SARS-CoV-2 antibody cocktail. Science 369, 1010–1014 (2020); Barnes, C.O. et al. Structures of human antibodies bound to SARS-CoV-2 spike reveal common epitopes and recurrent features of antibodies. Cell 182, 828–842.e16 (2020); Weisblum, Y. et al. Escape from neutralizing antibodies by SARS-CoV-2 spike protein variants. elife 9, e61312 (2020); Starr, T.N. et al. Prospective mapping of viral mutations that escape antibodies used to treat COVID-19. Science 371, 850–854 (2021); Baum, A. et al. Antibody cocktail to SARS-CoV-2 spike protein prevents rapid mutational escape seen with individual antibodies. Science 369, 1014–1018 (2020); Greaney, A.J. et al. Complete mapping of mutations to the SARS-CoV-2 spike receptor-binding domain that escape antibody recognition. Cell Host Microbe 29, 44–57.e9 (2021)).

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что из исследованных вирусных вариантов три - Е484K, F486K и F490L обладают наибольшим негативным эффектом на нейтрализующую активность протестированных моноклональных антител (Фиг. 13А). В частности, вариант E484K не нейтрализовался 7 из 11 антител. Три антитела, - iB14, iB20 и REGN10987 сохраняли активность в отношении этого варианта, в то время как нейтрализующая активность REGN10933 была снижена в ~11 раз. F490L полностью блокировал активность iB12 и iB15, снижал активность iB3 и COV2-2504 примерно в 20 раз, и незначительно снижал активность iB9, iB20 и COVA2-15. Антитело iB20 теряло нейтрализующую активность по отношению к вариантам N460T и A475V. В соответствии с опубликованными данными замена K417N приводила к снижению нейтрализующей активности REGN10933, а варианты N439K и K444Q негативно влияли на активность REGN10987 (Starr, T.N. et al. Prospective mapping of viral mutations that escape antibodies used to treat COVID-19. Science 371, 850–854 (2021); Baum, A. et al. Antibody cocktail to SARS-CoV-2 spike protein prevents rapid mutational escape seen with individual antibodies. Science 369, 1014–1018 (2020)). Важно отметить, что ни одна из последних трех замен не влияла на нейтрализующую активность полученных нами моноклональных нейтрализующих антител. Из исследованных моноклональных антител лишь одно, COVA2-15, проявляло умеренную чувствительность к варианту N501Y в соответствии с опубликованными данными (Shen, X. et al. SARS-CoV-2 variant B.1.1.7 is susceptible to neutralizing antibodies elicited by ancestral Spike vaccines. Cell Host Microbe. 29, 529-539.e3 (2021)).

Затем мы проверили, сохраняют ли моноклональные антитела iB14 и iB20 нейтрализующую активность против вариантов Spike-белка с тремя заменами - K417, E484 и N501 (KEN) – в пределах RBD, поскольку данная комбинация замен встречается в двух кладах циркулирующих вариантов SARS-CoV-2, 501Y.V2 и 501Y.V3. В полном соответствии с данными, что индивидуальные замены приводят к устойчивости таких вариантов Spike к iB14 и iB20, а также к REGN10987, наблюдалось сохранение полной нейтрализующей активности этих трех антител по отношению к KEN-варианту Spike. Антитела iB6 и COVA2-15 при этом полностью теряли такую активность (Фиг. 13Б). Соответственно, композиции антитела iB6 с iB20 или REGN10987, а также антитела COVA2-15 с iB14 также полностью нейтрализовали данный вариант (Фиг. 14).

Наконец, отдельно была исследована способность моноклональных нейтрализующих антител iB6, iB14 и iB20 нейтрализовать лентивирусные частицы, псевдотипированные вариантами Spike-белка с заменами в RBD, присутствующими в кладах SARS-CoV-2 delta (B.1.617.2 (L452R + T478K)), kappa (B.1.617.1 (L452R + E484Q)) и lambda (C.37 (L452Q + F490S)), которые появились в циркуляции в 2020-2021 годах. Антитела iB14 и iB20 сохраняют активность на полном уровне в отношении этих трех вариантов вируса (Фиг. 13Б), в отличие от iB6, которое оказалось чувствительно к заменам по остатку L452. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о возможности применения моноклональных антител iB14 и iB20 в качестве профилактики заражения и терапии пациентов, зараженных данными вариантами SARS-CoV-2.

Пример 7. Оценка способности RBD-специфических моноклональных антител узнавать RBD SARS-CoV-2, а также RBD циркулирующих вариантов вируса, delta и beta, в формате иммуноферментного анализа.

С целью верификации возможности использования полученных RBD-специфических рекомбинантных моноклональных антител в диагностических целях был проведен иммуноферментный анализ их связывания с RBD Spike-белка SARS-CoV-2, соответствующих трем его вариантам (исходный изолят Wuhan-Hu-1, delta (замены L452R + T478K) и beta (замены K417N+E484K+N501Y, KEN). Антиген (RBD-His6) был разбавлен в 0,1 M NaHCO₃ до концентрации 3 мкг/мл и перенесен в объеме 100 мкл в лунки 96-луночного планшета повышенной сорбции, Greiner Bio-One, Германия. После инкубирования в течение ночи при 4°C раствор, содержащий антиген, удаляли, промывали 5 раз отмывочным буфером, содержащим 0,1 M NaHCO₃ и 0,1% Triton X-100, и проводили блокировку свободных центров связывания с использованием 150 мкл 2% (w/v) обезжиренного сухого молока (Santa Cruz, США) в 0,1 M NaHCO₃ в течение 1 часа при комнатной температуре. Затем лунки 5 раз промывали отмывочным буфером и добавляли двукратные разведения антител в диапазоне от 1 мкг/мл до 7,5 нг/мл в отмывочном буфере (100 мкл на лунку). По завершении инкубирования при комнатной температуре в течение 1 часа лунки промывали 5 раз отмывочным буфером. Затем в каждую лунку добавляли по 100 мкл конъюгата мышиных моноклональных антител против IgG человека с пероксидазой (Вектор, Кольцово) (разведение 1:12000) в отмывочном буфере. Через 1час инкубирования планшета при комнатной температуре лунки промывали пять раз отмывочным буфером и добавляли 100 мкл субстратного раствора для пероксидазы: 0,5 M Na-цитратный буфер, pH 5,2, содержащий 5 мг/мл орто-фенилендиамина и 0,01% H₂O₂. После развития цветной реакции в течение 5-10 минут окрашивание останавливали внесением 0,5 М серной кислоты (100 мкл на лунку). Измерения оптической плотности сформированного в результате реакции продукта проводили при длине волны 490 нм (OD₄₉₀) с использованием планшетного спектрофотометра Multiskan. Специфичность по отношению к RBD SARS-CoV-2 исходного изолята Wuhan-Hu-1 была подтверждена для всех приведенных в Таблице 2 антител. Вместе с тем необходимо отметить, что в соответствии с данными экспериментов по изучению чувствительности нейтрализующих моноклональных антител к разнообразным заменам в Spike-белке SARS-CoV-2, в том числе и присутствующим в циркулирующих вирусных вариантах (Пример 6), в формате иммуноферментного анализа обнаруживалась неспособность некоторых из моноклональных антител детектировать варианты RBD, соответствующие последовательностям Spike в кладах delta и beta. Другими словами, использование нечувствительных к указанным заменам антител (например, iB0, iB14, iB20) позволяет детектировать SARS-CoV-2 исходного типа, delta и beta, а использование комбинаций антител, напротив, теряющих сродство к RBD delta и/или beta, позволяет дифференцировать/типировать такие образцы и отличать от исходного, немутированного варианта, при проведении иммуноферментного анализа.

Название
антитела RBD (Wuhan-Hu-1) RBD
(delta) RBD (beta) iB0 + + + iB3 + + - iB4 + + - iB6 + +/- - iB9 + +/- - iB10 +/- - - iB11 + + - iB12 + + - iB13 + - + iB14 + + + iB15 + + - iB17 + + - iB18 + + - iB19 + + - iB20 + + + iB24 + + - iB26 + + -

Таблица 2

Пример 8. Оценка способности RBD-специфических моноклональных антител узнавать RBD и S-белок SARS-CoV-2 в условиях иммуноблоттинга.

Важным свойством любого моноклонального антитела является его способность узнавать целевой антиген в условиях иммуноблоттинга, при которых данный антиген может быть полностью или частично денатурирован/ренатурирован. Как правило, антитела, узнающие линейные эпитопы, обладают способностью эффективно детектировать целевые антигены в условиях иммуноблотинга независимо от условий денатурации, а именно присутствия или отсутствия в системе восстановителей дисульфидных связей, таких как бета-меркаптоэтанол, дитиотреитол и т.д. Полученные в данной заявке антитела были протестированы на способность узнавать RBD и S-белок SARS-CoV-2 в иммуноблоттинге при добавлении или без добавления бета-меркаптоэтанола. Данные, полученные в результате этих экспериментов, суммированы в Табл. 3, и свидетельствуют о том, что в отсутствие восстановителя большинство протестированных RBD-специфических моноклональных антител способно распознавать RBD и S-белок SARS-CoV-2, т.е. такие агенты обладают потенциалом для использования в качестве инструмента детекции. В то же время необходимо отметить, что в денатурирующих условиях ни одно из антител не узнает RBD или S-белок, что косвенно указывает на то, что сайты связывания полученных антител представлены сложными конформационными эпитопами.

Антитело iB 0 1 2 3 4 5 6 9 10 11 12 13 без b-МЭ + -/+ -/+ + -/+ -/+ + + -/+ + + + с b-МЭ - - - - - - - - - - - - Антитело iB 14 15 16 17 18 19 20 21 24 25 26 без b-МЭ + + -/+ -/+ -/+ -/+ + + -/+ - -/+ с b-МЭ - - - - - - - - - - -

Таблица 3

Пример 9. Оценка уровня аутореактивности RBD-специфических моноклональных антител.

Чтобы узнать, обладают ли полученные моноклональные RBD-специфические антитела аутореактивностью, т.е. способностью связываться с антигенами человека, как это было показано для некоторых SARS-CoV-2-специфических антител (Kreer, C. et al. Longitudinal isolation of potent near-germline SARS-CoV-2-neutralizing antibodies from COVID-19 patients. Cell 182, 843–854.e12 (2020); Kreye, J. et al. A therapeutic non-self-reactive SARS-CoV-2 antibody protects from lung pathology in a COVID-19 hamster model. Cell 183, 1058–1069.e19 (2020)), был использован протокол иммуноокрашивания клеток линии HEp-2 с последующей детекцией при помощи проточной цитометрии. Для этого клетки данной линии открепляли от поверхности культурального пластика используя раствор Версена, трижды промывали PBS и фиксировали в 2% параформальдегиде на льду в течение 10 минут. Затем для пермеабилизации клеток к ним добавляли сапонин до финальной концентрации 0,05%. В качестве позитивных контролей использовали первичные антитела против актина (ab3280, Abcam) и BIP (ab21685, Abcam). Для всех последующих шагов иммуноокрашивания использовали FACS-буфер с сапонином. Суспензии клеток инкубировали с антителами (5 мкг/мл) в течение получаса, трижды отмывали, после чего к клеткам добавляли APC-конъюгированные антитела donkey-anti-human IgG (1:600) (Jackson ImmunoResearch), goat-anti-rabbit-Alexa488 (1:600, Thermo Fisher Scientific), или goat-anti-mouse-Alexa488 (1:600, Thermo Fisher Scientific). Клетки без добавления первичных антител (но с добавлением конъюгатов) использовали для определения уровня фоновой флуоресценции. Уровень аутореактивности рассчитывали по формуле: MFI(антитело)–MFI(фон)/MFI(фон) (Табл. 1).

--->

Sequence Listing Information:

DTD Version: V1_3

File Name: R211040 sequence listing.xml

Software Name: WIPO Sequence

Software Version: 1.1.0

Production Date: 2021-12-28

General Information:

Current application / Applicant file reference: R21100410

Applicant name: Общество с ограниченной ответственностью "Имген+"

Applicant name / Language: ru

Applicant name / Name Latin: Obshchestvo s ogranichennoj otvetstvennostju

"Imgen+"

Invention title: Моноклональные антитела против рецептор-связывающего

домена SPIKE-белка вируса SARS-COV-2 и их антигенсвязывающие фрагменты,

кодирующие их нуклеиновые кислоты, а также способы применения (Ru)

Sequence Total Quantity: 322

Sequences:

Sequence Number (ID): 1

Length: 11

Molecule Type: AA

Residues:

GFTFSSYA 8

Sequence Number (ID): 2

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

GFSFNTYS 8

Sequence Number (ID): 3

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

GGSLSGYY 8

Sequence Number (ID): 4

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

GYTFTGYY 8

Sequence Number (ID): 5

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

GYTFTGYY 8

Sequence Number (ID): 6

Length: 10

Molecule Type: AA

Residues:

GGSISSGDYY 10

Sequence Number (ID): 7

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

GGTFITYA 8

Sequence Number (ID): 8

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

GGTFSNYA 8

Sequence Number (ID): 9

Length: 11

Molecule Type: AA

Residues:

GFTFSDYY 8

Sequence Number (ID): 10

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

GYTFTSYY 8

Sequence Number (ID): 11

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

GYLFTGYY 8

Sequence Number (ID): 12

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

GFTFSSYA 8

Sequence Number (ID): 13

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

GFTFPSSA 8

Sequence Number (ID): 14

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

GYTFTNYD 8

Sequence Number (ID): 15

Length: 10

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..10

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

GGSISSSSYY 10

Sequence Number (ID): 16

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

GYTFTSYY 8

Sequence Number (ID): 17

Length: 11

Molecule Type: AA

Residues:

GFTVSSNY 8

Sequence Number (ID): 18

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EFTVSSNY 8

Sequence Number (ID): 19

Length: 11

Molecule Type: AA

Residues:

GFTVSRNY 8

Sequence Number (ID): 20

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

GFTFSSYA 8

Sequence Number (ID): 21

Length: 11

Molecule Type: AA

Residues:

GFTVSSNY 8

Sequence Number (ID): 22

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

GLTVSSNY 8

Sequence Number (ID): 23

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

GFTFSSYG 8

Sequence Number (ID): 24

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ISYDGSNK 8

Sequence Number (ID): 25

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ISSSGSIL 8

Sequence Number (ID): 26

Length: 10

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..10

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ITQSGGT 7

Sequence Number (ID): 27

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

INPNSGAT 8

Sequence Number (ID): 28

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

INPNSGGT 8

Sequence Number (ID): 29

Length: 10

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..10

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

IFYSGST 7

Sequence Number (ID): 30

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

IIPILGIT 8

Sequence Number (ID): 31

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

IIPILGIA 8

Sequence Number (ID): 32

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ISSSGSTI 8

Sequence Number (ID): 33

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

INPSGGST 8

Sequence Number (ID): 34

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

INPNSGGT 8

Sequence Number (ID): 35

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

VSGSGGST 8

Sequence Number (ID): 36

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

IVVGSGNT 8

Sequence Number (ID): 37

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

MNPNSGNT 8

Sequence Number (ID): 38

Length: 10

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..10

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

IYYSGST 7

Sequence Number (ID): 39

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

INPSGGST 8

Sequence Number (ID): 40

Length: 10

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..10

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

IYSGGST 7

Sequence Number (ID): 41

Length: 10

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..10

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

IYSGGST 7

Sequence Number (ID): 42

Length: 10

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..10

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

IYSGGST 7

Sequence Number (ID): 43

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ISGSGGST 8

Sequence Number (ID): 44

Length: 10

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..10

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

IYSGGST 7

Sequence Number (ID): 45

Length: 10

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..10

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

IYSGGST 7

Sequence Number (ID): 46

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH2

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ISYDGSNK 8

Sequence Number (ID): 47

Length: 20

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..20

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARARPWRYSY GLYYYYGMDV 20

Sequence Number (ID): 48

Length: 20

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..20

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARVGTRVGAS NFDYYYGMDV 20

Sequence Number (ID): 49

Length: 17

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..17

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARGGYDDNRG YYAYFDY 17

Sequence Number (ID): 50

Length: 28

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..28

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARVAQVVSNP LPYDVLTGLT YYYYGMDV 28

Sequence Number (ID): 51

Length: 14

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..14

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARDYYYDSSV NPDY 14

Sequence Number (ID): 52

Length: 15

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..15

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARRCRFVDTS MAFDY 15

Sequence Number (ID): 53

Length: 14

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..14

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARGGRGANPG WFDY 14

Sequence Number (ID): 54

Length: 16

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..16

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARTAYEYDSS GYFLDY 16

Sequence Number (ID): 55

Length: 13

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..13

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARHPMVRGVI GDY 13

Sequence Number (ID): 56

Length: 18

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..18

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARGHSGYDRL PQPPYFDY 18

Sequence Number (ID): 57

Length: 14

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..14

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARSGYYTSAV NFDY 14

Sequence Number (ID): 58

Length: 25

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..25

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

AKTVLAGRDD SSGYFTVYYY FGMDV 25

Sequence Number (ID): 59

Length: 16

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..16

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

AAPYCSGGSC YDGFDI 16

Sequence Number (ID): 60

Length: 24

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..24

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARAYQNRPIA VTDMGYYYYY GMDV 24

Sequence Number (ID): 61

Length: 16

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..16

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARGGSIYDYG DYEFDS 16

Sequence Number (ID): 62

Length: 14

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..14

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

AILGLHLGEL LFDP 14

Sequence Number (ID): 63

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARDFGEQWFD Y 11

Sequence Number (ID): 64

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARDFGDYYFD Y 11

Sequence Number (ID): 65

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARDLLEVGGS DY 12

Sequence Number (ID): 66

Length: 21

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..21

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

AKPLLGYDFW SGYYRGGWFD P 21

Sequence Number (ID): 67

Length: 13

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..13

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARDPYSYGRG GGY 13

Sequence Number (ID): 68

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

ARDGVYYGMD V 11

Sequence Number (ID): 69

Length: 17

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..17

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRH3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

AKDYDFWSGY YPQPFDY 17

Sequence Number (ID): 70

Length: 9

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..9

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSISSY 6

Sequence Number (ID): 71

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

SSNIGRNT 8

Sequence Number (ID): 72

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSVLYSFRNK IC 12

Sequence Number (ID): 73

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

SSDVGSYNL 9

Sequence Number (ID): 74

Length: 9

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..9

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QDISNY 6

Sequence Number (ID): 75

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

SSDVGSYDL 9

Sequence Number (ID): 76

Length: 9

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..9

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSISSW 6

Sequence Number (ID): 77

Length: 10

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..10

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSVSSSY 7

Sequence Number (ID): 78

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

SSNIGSNT 8

Sequence Number (ID): 79

Length: 9

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..9

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSISKY 6

Sequence Number (ID): 80

Length: 9

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..9

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QDISNY 6

Sequence Number (ID): 81

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

SSDIGGYNY 9

Sequence Number (ID): 82

Length: 10

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..10

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSVSSSY 7

Sequence Number (ID): 83

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

SSDVGSYNL 9

Sequence Number (ID): 84

Length: 9

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..9

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSISSW 6

Sequence Number (ID): 85

Length: 9

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..9

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QDISNY 6

Sequence Number (ID): 86

Length: 10

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..10

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSVSSSY 7

Sequence Number (ID): 87

Length: 10

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..10

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSVSSSY 7

Sequence Number (ID): 88

Length: 10

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..10

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSISSSY 7

Sequence Number (ID): 89

Length: 15

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..15

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSVLYSSNNK NY 12

Sequence Number (ID): 90

Length: 9

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..9

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QDISNY 6

Sequence Number (ID): 91

Length: 9

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..9

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QGISSY 6

Sequence Number (ID): 92

Length: 9

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..9

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL1

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QGIRND 6

Sequence Number (ID): 93

Residues:

000

Sequence Number (ID): 94

Residues:

000

Sequence Number (ID): 95

Residues:

000

Sequence Number (ID): 96

Residues:

000

Sequence Number (ID): 97

Residues:

000

Sequence Number (ID): 98

Residues:

000

Sequence Number (ID): 99

Residues:

000

Sequence Number (ID): 100

Residues:

000

Sequence Number (ID): 101

Residues:

000

Sequence Number (ID): 102

Residues:

000

Sequence Number (ID): 103

Residues:

000

Sequence Number (ID): 104

Residues:

000

Sequence Number (ID): 105

Residues:

000

Sequence Number (ID): 106

Residues:

000

Sequence Number (ID): 107

Residues:

000

Sequence Number (ID): 108

Residues:

000

Sequence Number (ID): 109

Residues:

000

Sequence Number (ID): 110

Residues:

000

Sequence Number (ID): 111

Residues:

000

Sequence Number (ID): 112

Residues:

000

Sequence Number (ID): 113

Residues:

000

Sequence Number (ID): 114

Residues:

000

Sequence Number (ID): 115

Residues:

000

Sequence Number (ID): 116

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QQSYSTPGS 9

Sequence Number (ID): 117

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

AAWDDSLNGL V 11

Sequence Number (ID): 118

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QQFYSTPWT 9

Sequence Number (ID): 119

Length: 10

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..10

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

CSYADSRTLV 10

Sequence Number (ID): 120

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QQYDNLPPRV T 11

Sequence Number (ID): 121

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

CSFAGSSPL 9

Sequence Number (ID): 122

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QQYNSYSPM 9

Sequence Number (ID): 123

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

HQYGSSPRT 9

Sequence Number (ID): 124

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

AAWDDSLNGY V 11

Sequence Number (ID): 125

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QQSYSTPPT 9

Sequence Number (ID): 126

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QQYDNLPPRL T 11

Sequence Number (ID): 127

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

SSYTRSSTQV V 11

Sequence Number (ID): 128

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QQYGTSPWT 9

Sequence Number (ID): 129

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

CSYARISTPG FV 12

Sequence Number (ID): 130

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QQYNSYST 8

Sequence Number (ID): 131

Length: 13

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..13

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QQYDNLLGVT 10

Sequence Number (ID): 132

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QQYGSSPRT 9

Sequence Number (ID): 133

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QQYGSSPRT 9

Sequence Number (ID): 134

Length: 10

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..10

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QQYGSSPPIT 10

Sequence Number (ID): 135

Length: 10

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..10

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QQYYSTLLLT 10

Sequence Number (ID): 136

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QQYDNLPIT 9

Sequence Number (ID): 137

Length: 11

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..11

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QHLNSYPSMY T 11

Sequence Number (ID): 138

Length: 12

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..12

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, CDRL3

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

LQDYNYPRT 9

Sequence Number (ID): 139

Length: 127

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..127

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYAMHWVRQA PGKGLEWVAV ISYDGSNKYY 60

ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARAR PWRYSYGLYY YYGMDVWGQG 120

TTVTVSS 127

Sequence Number (ID): 140

Length: 127

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..127

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLVESGGG LVQSGGSLRL SCAASGFSFN TYSMNWVRQA PGKGLEWVSY ISSSGSILHY 60

ADSVKGRLTI SRDNAKNSLY LQMNSLRAED TAVYYCARVG TRVGASNFDY YYGMDVWGQG 120

TTVTVSS 127

Sequence Number (ID): 141

Length: 123

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..123

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLRQWGSG LLKPSETLSL TCAVYGGSLS GYYWSYFRQP PGKGLEWIGE ITQSGGTNYN 60

PSLKSRITIS VDTSKNQFSL DLSSVTAADT AVYYCARGGY DDNRGYYAYF DYWGQGTLVT 120

VSS 123

Sequence Number (ID): 142

Length: 135

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..135

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFT GYYIHWVRQA PGQGLEWMGW INPNSGATNY 60

AQKFQGRVTV TRDTSISTAY MELSRLRSDD TAVYYCARVA QVVSNPLPYD VLTGLTYYYY 120

GMDVWGQGTT VTVSS 135

Sequence Number (ID): 143

Length: 121

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..121

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFT GYYMHWVRQA PGQGLEWMGW INPNSGGTNY 60

AQKFQGRVTM TRDTSITTAY MELSRLRSDD TAVYYCARDY YYDSSVNPDY WGQGTLVTVS 120

S 121

Sequence Number (ID): 144

Length: 123

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..123

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLQESGPG LVKPSQTLSL TCTVSGGSIS SGDYYWSWIR QHPGKGLEWI GYIFYSGSTY 60

YNPSLKSRVT ISVDTSKNQF SLKLSSVTAA DTAVYYCARR CRFVDTSMAF DYWGQGTLVT 120

VSS 123

Sequence Number (ID): 145

Length: 121

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..121

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGAE VKKPGSSVKV SCKASGGTFI TYAFSWVRQA PGQGLEWMGR IIPILGITNY 60

AQKFQGRVTI TADKSTSTAY MELSSLRSED TAVYYCARGG RGANPGWFDY WGQGTLVTVS 120

S 121

Sequence Number (ID): 146

Length: 123

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..123

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGAE VKKPGSSVKV SCKASGGTFS NYAISWVRQA PGQGLEWMGR IIPILGIANY 60

AQKFQGRLTI TADKSTSTAY MELSSLRSED TAVYYCARTA YEYDSSGYFL DYWGQGTLVT 120

VSS 123

Sequence Number (ID): 147

Length: 120

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..120

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLLESGGG LVKPGGSLRL SCAASGFTFS DYYMSWIRQA PGKGLEWVSY ISSSGSTIYY 60

ADSVKGRFTI SRDNAKNSLY LQMNSLRAED TAVYYCARHP MVRGVIGDYW GQGTLVTVSS 120

Sequence Number (ID): 148

Length: 125

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..125

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFT SYYMHWVRQA PGQGLEWMGI INPSGGSTSY 60

VQKFQGRVTM TRDTSTSTVY MELSSLRFED TAVYYCARGH SGYDRLPQPP YFDYWGQGTL 120

VTVSS 125

Sequence Number (ID): 149

Length: 121

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..121

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYLFT GYYMHWVRQA PGQGLEWMGW INPNSGGTNY 60

AQKFQDRVTM TRDTSITTAY MELSRLRSDD TAVYYCARSG YYTSAVNFDY WGQGTLVTVS 120

S 121

Sequence Number (ID): 150

Length: 132

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..132

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLLESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS SYAMSWVRQA PGKGLEWVSA VSGSGGSTYY 60

ADSVKGRFTI SRDNSKNMLY LQMNSLRAED TAVYYCAKTV LAGRDDSSGY FTVYYYFGMD 120

VWGQGTTVTV SS 132

Sequence Number (ID): 151

Length: 123

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..123

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGPE VKKPGTSVKV SCKASGFTFP SSAVQWVRQA RGQRLEWIGW IVVGSGNTNY 60

AQKFQERVTI TRDMSTSTAY MELSSLRSED TAVYYCAAPY CSGGSCYDGF DIWGQGTMVT 120

VSS 123

Sequence Number (ID): 152

Length: 131

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..131

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFT NYDINWVRQA TGQGLEWMGW MNPNSGNTGF 60

AQKFQGRVTM TRNTSIRTVY MELSSLRSED TAVYYCARAY QNRPIAVTDM GYYYYYGMDV 120

WGQGTTVTVS S 131

Sequence Number (ID): 153

Length: 124

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..124

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QLQLQESGPG LVKPSETLSL TCTVSGGSIS SSSYYWGWIR QPPGKGLEWI GSIYYSGSTY 60

YNPSLKSRVT ISVDTSKNQF SLKLSSVTAA DTALYYCARG GSIYDYGDYE FDSWGQGTLV 120

TVSS 124

Sequence Number (ID): 154

Length: 121

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..121

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFT SYYMHWVRQA PGQGLEWMGI INPSGGSTSY 60

AQKFQGRVTM TRDTSTSTVY MELSSLRSED TAVYYCAILG LHLGELLFDP WGQGTLVTVS 120

S 121

Sequence Number (ID): 155

Length: 117

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..117

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLVESGGG LIQPGGSLRL SCAASGFTVS SNYMSWVRQA PGKGLEWVSV IYSGGSTFYA 60

DSVKGRFTIS RDNSKNTLYL QMNSLRAEDT AVYYCARDFG EQWFDYWGQG TLVTVSS 117

Sequence Number (ID): 156

Length: 117

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..117

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASEFTVS SNYMSWVRQA PGKGLEWVSV IYSGGSTYYA 60

DSVKGRFTIS RDNSKNTLYL QMNSLRAEDT AVYYCARDFG DYYFDYWGQG TLVTVSS 117

Sequence Number (ID): 157

Length: 118

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..118

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLVETGGG LIQPGGSLRL SCAASGFTVS RNYMSWVRQA PGKGLEWVSL IYSGGSTFYA 60

DSVKGRFTIS RDDSKNTLYL QMNSLRAEDT AVYYCARDLL EVGGSDYWGQ GTLVTVSS 118

Sequence Number (ID): 158

Length: 128

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..128

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLLESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS SYAMSWVRQA PGKGLEWVSA ISGSGGSTYY 60

ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCAKPL LGYDFWSGYY RGGWFDPWGQ 120

GTLVTVSS 128

Sequence Number (ID): 159

Length: 119

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..119

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLVESGGG LIQPGGSLRL SCAASGFTVS SNYMSWVRQA PGKGLEWVSV IYSGGSTYYA 60

DSVKGRFIIS RDNSKNTLYL QMNSLRAEDT AVYYCARDPY SYGRGGGYWG QGTLVTVSS 119

Sequence Number (ID): 160

Length: 117

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..117

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLVETGGG LIQPGGSLRL SCAASGLTVS SNYMNWVRQA PGKGLEWVSV IYSGGSTYYA 60

DSVKGRFTIS RDNSKNTLYL QMNSLRAEDT AVYYCARDGV YYGMDVWGQG TTVTVSS 117

Sequence Number (ID): 161

Length: 124

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..124

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VH

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV ISYDGSNKYY 60

ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCAKDY DFWSGYYPQP FDYWGQGTLV 120

TVSS 124

Sequence Number (ID): 162

Length: 107

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..107

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQSIS SYLNWYQQKP GKAPKLLIYA ASSLQSGVPS 60

RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ SYSTPGSFGQ GTKLEIK 107

Sequence Number (ID): 163

Length: 110

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..110

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSVLTQPPSA SGTPGQRVTI SCSGSSSNIG RNTVNWYQQL PGTAPKLVIY SNNQRPSGVP 60

DRFSGSKSGT SASLAISGLQ SEDEADYYCA AWDDSLNGLV FGGGTKLTVL 110

Sequence Number (ID): 164

Length: 113

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..113

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIVMTQSPDS LAVSLGERAT INCKSSQSVL YSFRNKICLA WYQQKPGQPP KLLIYWATTR 60

ESGVPDRFSG SGSGTDFTLT ISSLQAEDVA VYYCQQFYST PWTFGQGTKV EIK 113

Sequence Number (ID): 165

Length: 110

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..110

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSALTQSASV SGSPGQPITI SCTGTSSDVG SYNLVSWYQQ HPGKAPKLMI YEVSKRPSGV 60

SNRFSGSKSG NTASLTISGL QAEDEADYYC CSYADSRTLV FGGGTKLTVL 110

Sequence Number (ID): 166

Length: 109

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..109

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCQASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKLLIYD ASNLETGVPS 60

RFSGSGSGTD FTFTISSLQP EDIATYYCQQ YDNLPPRVTF GQGTKVEIK 109

Sequence Number (ID): 167

Length: 109

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..109

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSALTQPASV SGSPGQSITI SCTGTSSDVG SYDLVSWYQQ HPGKAPKLMI YEVTKRPSGV 60

SNRFSGSKSG NTASLTISGL QAEDEADYYC CSFAGSSPLF GGGTKLTVL 109

Sequence Number (ID): 168

Length: 107

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..107

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPST LSASVGDRVT ITCRASQSIS SWLAWYQQKP GKAPKVLIYK ASSLESGVPS 60

RFSGSGSGTE FTLTISSLQP DDFATYYCQQ YNSYSPMFGQ GTKVEIK 107

Sequence Number (ID): 169

Length: 108

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..108

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EIVLTQSPGT LSLSPGERAT LSCRASQSVS SSYLAWYQQK PGQAPRLLIY GASSRATGIP 60

DRFSGSGSGT DFTLTISRLE PEDFAVYYCH QYGSSPRTFG QGTKVEIK 108

Sequence Number (ID): 170

Length: 110

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..110

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSVLTQPPSA SGTPGQRVTI SCSGSSSNIG SNTVNWYQQL PGTAPKLLIY NNNQRPSGVP 60

DRFSGSKSGT SASLAISGLQ SEDEADYYCA AWDDSLNGYV FGTGTKVTVL 110

Sequence Number (ID): 171

Length: 107

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..107

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPSS LSTSVGDRVT ITCRASQSIS KYLNWYQQKP GKAPKLLIYA ASSLQSGVPS 60

RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ SYSTPPTFGQ GTKVEIK 107

Sequence Number (ID): 172

Length: 109

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..109

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCQASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKLLIYD ASNLETGVPS 60

RFSGSGSGTD FTFTISSLQP EDIATYYCQQ YDNLPPRLTF GGGTKVEIK 109

Sequence Number (ID): 173

Length: 111

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..111

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSALTQPASV SGSPGQSITI SCTGTSSDIG GYNYVSWYQQ HPGKAPKLMI YDVSNRPSGV 60

SNRFSGSKSG NTASLTISGL QAEDEAEYYC SSYTRSSTQV VFGGGTKLTV L 111

Sequence Number (ID): 174

Length: 108

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..108

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EIVLTQSPGT LSLSPGERAT LSCRASQSVS SSYLAWYQQK PGQAPRLLIY GASSRATGIP 60

DRFSGSGSGT DFTLTISRLE PEDFAVYHCQ QYGTSPWTFG QGTKVEIK 108

Sequence Number (ID): 175

Length: 112

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..112

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSALTQPASV SGSPGQSITI SCTGTSSDVG SYNLVSWYQQ HPGKAPKLMI YEVSKRPSGV 60

SNRFSGSKSG NTASLTISGL QAEDEADYYC CSYARISTPG FVFGTGTKVT VL 112

Sequence Number (ID): 176

Length: 106

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..106

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPST LSASVGDRVT ITCRASQSIS SWLAWYQQKP GKAPKLLIYK ASNLESGVPS 60

RFSGSGSGTE FTLTISSLQP DDFATYYCQQ YNSYSTFGQG TKVEIK 106

Sequence Number (ID): 177

Length: 108

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..108

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPSS LSASLGDRVT ITCQASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKLLIYD ASNLQTGVPS 60

RFSGGGSGTD FTFTISSLQP EDIATYYCQQ YDNLLGVTFG PGTKVDIK 108

Sequence Number (ID): 178

Length: 108

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..108

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EIVLTQSPGT LSLSPGERAT LSCRASQSVS SSYLAWYQQS PGQAPRLLIY GTSSRATGIP 60

DRFSGSGSGT DFTLTISRLE PEDFAVYYCQ QYGSSPRTFG QGTKVEIK 108

Sequence Number (ID): 179

Length: 108

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..108

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EIVLTQSPGT LSLSPGERAT LSCRASQSVS SSYLAWYQQK PGQAPRLLIY GASSRATGIP 60

DRFSGSGSGT DFTLTISRLE PEDFAVYYCQ QYGSSPRTFG QGTKVEIK 108

Sequence Number (ID): 180

Length: 109

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..109

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EIVLTQSPGT LSLSPGERAT LSCRASQSIS SSYLAWYQQK PGQAPRLLFY GASSRATGIP 60

DRFSGSGSGT DFTLTISKLE PEDFAVYYCQ QYGSSPPITF GQGTRLEIK 109

Sequence Number (ID): 181

Length: 114

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..114

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIVMTQSPDS LAVSLGERAT INCKSSQSVL YSSNNKNYLA WYQQKPGQPP KLLIYWASTR 60

ESGVPDRFSG SGSGTDFTLT ISSLQAEDVA VYYCQQYYST LLLTFGGGTK VEIK 114

Sequence Number (ID): 182

Length: 107

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..107

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCQASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKLLIYD ASNLETGVPS 60

RFSGSGSGTD FTFTISSLQP EDIATYYCQQ YDNLPITFGQ GTRLEIK 107

Sequence Number (ID): 183

Length: 109

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..109

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQLTQSPSF LSASVGDRVT ITCRASQGIS SYLAWYQQKP GKAPKLLIFA ASTLQSGVPS 60

RFSASGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCQH LNSYPSMYTF GQGTKLEIK 109

Sequence Number (ID): 184

Length: 107

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..107

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, VL

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKLLIYA ASSLQSGVPS 60

RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCLQ DYNYPRTFGQ GTKVEIK 107

Sequence Number (ID): 185

Length: 381

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..381

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatgcta tgcactgggt ccgccaggct 120

ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcgtatg atggaagtaa taaatactac 180

gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agctgaggac acggctgtgt attactgtgc gagagcccgt 300

ccgtggagat acagctatgg cctctactac tactacggta tggacgtctg gggccaaggg 360

accacggtca ccgtctcctc a 381

Sequence Number (ID): 186

Length: 381

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..381

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagt cgggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt cagcttcaat acctatagca tgaactgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtttcatac attagcagta gtggtagtat cttgcactac 180

gcagactctg tgaagggccg actcaccatt tccagagaca acgccaagaa ctcactgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggctgtgt attactgtgc gagagtgggg 300

acccgagtgg gagcttcaaa cttcgactac tactacggta tggacgtctg gggccaaggg 360

accacggtca ccgtctcctc a 381

Sequence Number (ID): 187

Length: 369

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..369

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

caggtgcagc tacgccagtg gggctcagga ctgttgaagc cttcggagac cctgtccctc 60

acctgcgctg tgtatggtgg gtctctaagt ggttactact ggagctactt ccgccagccc 120

ccagggaagg ggctggagtg gattggggaa atcactcaaa gtggcggcac caactacaac 180

ccgtccctca agagtcggat cacaatatca gtggacacgt ccaagaatca gttctctttg 240

gacctgagct ctgtgaccgc cgcggacacg gctgtgtatt actgtgcgag aggcggatac 300

gatgataata gaggttatta cgcgtatttt gactactggg gccagggaac cctggtcacc 360

gtctcctca 369

Sequence Number (ID): 188

Length: 405

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..405

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggata caccttcacc ggctactata tacactgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcaacccta acagtggtgc cacaaactat 180

gcacagaagt ttcagggcag ggtcaccgtg accagggaca cgtccatcag cacagcctac 240

atggagctga gcaggctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagagttgcc 300

caagtcgtgt ccaacccact gccttacgat gttttgactg gtttaaccta ttactactac 360

ggtatggacg tctggggcca agggaccacg gtcaccgtct cctca 405

Sequence Number (ID): 189

Length: 363

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..363

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggata caccttcacc ggctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcaacccta acagtggtgg cacaaactat 180

gcacagaagt ttcagggcag ggtcaccatg accagggaca cgtccatcac cacagcctac 240

atggagctga gcaggctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagagactac 300

tactatgata gtagtgtgaa ccctgactac tggggccagg gaaccctggt caccgtctcc 360

tca 363

Sequence Number (ID): 190

Length: 369

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..369

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

caggtgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcacagac cctgtccctc 60

acctgcactg tctctggtgg ctccatcagc agtggtgatt actactggag ctggatccgc 120

cagcacccag ggaagggcct ggagtggatt gggtacatct tttacagtgg gagcacctac 180

tacaacccgt ccctcaagag tcgggttacc atatcagtag acacgtctaa gaaccagttc 240

tccctgaagc tgagctctgt gactgccgcg gacacggccg tgtattactg tgcgaggagg 300

tgccgttttg tagatacatc tatggcattt gactactggg gccagggaac cctggtcacc 360

gtctcctca 369

Sequence Number (ID): 191

Length: 363

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..363

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcatc acctatgctt tcagctgggt acgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaagg atcatcccta tccttggtat aacaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaggggga 300

cgcggtgcta accccggttg gtttgactac tggggccagg gaaccctggt caccgtctcc 360

tca 363

Sequence Number (ID): 192

Length: 369

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..369

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc aactatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaagg atcatcccta tccttggtat agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag actcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctaag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gaggacggcg 300

tatgaatatg atagtagtgg ttatttcctt gactactggg gccagggaac cctggtcacc 360

gtctcctca 369

Sequence Number (ID): 193

Length: 360

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..360

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtcaagc ctggagggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt gactactaca tgagctggat ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtttcatac attagtagta gtggtagtac catatactac 180

gcagactctg tgaagggccg attcaccatc tccagggaca acgccaagaa ctcactgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gaggcatcct 300

atggttcggg gagttatcgg agactactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca 360

Sequence Number (ID): 194

Length: 375

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..375

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtt 60

tcctgcaagg catctggata caccttcacc agctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaata atcaacccta gtggaggtag cacaagctac 180

gtacagaagt tccagggcag agtcaccatg accagggaca cgtccacgag cacagtctac 240

atggagctga gcagcctgag atttgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaggtcat 300

agtggctacg atcggttacc tcaaccccct tactttgact actggggcca gggaaccctg 360

gtcaccgtct cctca 375

Sequence Number (ID): 195

Length: 363

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..363

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggata cctcttcacc ggctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcaacccta acagtggtgg cacaaactat 180

gcacagaagt ttcaggacag ggtcaccatg accagggaca cgtccatcac cacagcctac 240

atggagctga gcaggctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc caggagtggt 300

tattatacga gtgctgtaaa ctttgactac tggggccagg gaaccctggt caccgtctcc 360

tca 363

Sequence Number (ID): 196

Length: 396

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..396

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgagttgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct gttagtggta gtggtggtag cacatactac 180

gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa catgctgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaaccgtt 300

ttggctggtc gcgacgatag cagtggctac ttcacggttt actactactt cggtatggac 360

gtctggggcc aggggaccac ggtcaccgtc tcctca 396

Sequence Number (ID): 197

Length: 369

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..369

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

caggtgcagc tggtgcagtc tgggcctgag gtgaagaagc ctgggacctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggatt cacctttcct agctctgctg tgcagtgggt gcgacaggct 120

cgtggacaac gccttgagtg gataggatgg atcgtcgttg gcagtggtaa cacaaactac 180

gcacagaagt tccaggaaag agtcaccatt accagggaca tgtccacaag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atccgaggac acggccgtgt attactgtgc ggctccctat 300

tgtagtggtg gtagctgtta tgatggtttt gatatctggg gccaagggac aatggtcacc 360

gtctcttca 369

Sequence Number (ID): 198

Length: 393

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..393

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggata caccttcacc aattatgata tcaactgggt gcgacaggcc 120

actggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atgaacccta acagtggtaa cacaggcttt 180

gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accaggaaca cctccataag aacagtctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagagcctat 300

caaaatagac cgatagcagt aactgatatg ggttactact actactacgg tatggacgtc 360

tggggccaag ggaccacggt caccgtctcc tca 393

Sequence Number (ID): 199

Length: 372

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..372

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

cagctgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60

acctgcactg tctctggtgg ctccatcagc agtagtagtt actactgggg ctggatccgc 120

cagcccccag ggaaggggct ggagtggatt gggagtatct attatagtgg gagcacctac 180

tacaacccgt ccctcaagag tcgagtcacc atatcagtag acacgtccaa gaaccagttc 240

tccctgaagc tgagctctgt gaccgccgcg gacacggcct tgtattactg tgcgagaggg 300

gggtcgatct atgactacgg tgactacgaa tttgactcct ggggccaggg aaccctggtc 360

accgtctcct ca 372

Sequence Number (ID): 200

Length: 363

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..363

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtt 60

tcctgcaagg catctggata caccttcacc agctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaata atcaacccta gtggtggtag cacaagctac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accagggaca cgtccacgag cacagtctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gatattaggg 300

ttacatttgg gggagttatt attcgacccc tggggccagg gaaccctggt caccgtctcc 360

tca 363

Sequence Number (ID): 201

Length: 351

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..351

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

gaggtgcagc tggtggagtc tggaggaggc ttgatccagc ctggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctcggggtt caccgtcagt agcaactaca tgagctgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagtt atttatagcg gtggtagcac attctacgca 180

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtatctt 240

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacacg gccgtgtatt actgtgcgag agatttcgga 300

gaacagtggt ttgactactg gggccaggga accctggtca ccgtctcctc a 351

Sequence Number (ID): 202

Length: 351

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..351

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctgaatt caccgtcagt agcaactaca tgagctgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagtt atttatagcg gtggtagcac atactacgca 180

gactccgtga agggcagatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtatctt 240

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacacg gctgtgtatt actgtgcgag agatttcggg 300

gactactact ttgactactg gggccaggga accctggtca ccgtctcctc a 351

Sequence Number (ID): 203

Length: 354

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..354

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

gaggtgcagc tggtggagac tggaggaggc ttgatccagc ctggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggctt caccgtcagt aggaactaca tgagctgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtctcactt atttatagtg gtggtagcac attctacgca 180

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacgatt ccaagaacac gttgtatctt 240

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacacg gccgtgtatt actgtgcgag agatctcctc 300

gaggtgggag gcagcgacta ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtctc ctca 354

Sequence Number (ID): 204

Length: 384

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..384

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180

gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaaccactc 300

ttggggtacg atttttggag tggttattat cggggtggct ggttcgaccc ctggggccag 360

ggaaccctgg tcaccgtctc ctca 384

Sequence Number (ID): 205

Length: 357

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..357

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

gaggtgcagc tggtggagtc tggaggaggc ttgatccagc ctggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctgggtt caccgtcagt agcaactaca tgagctgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagtt atttatagcg gtggtagcac atactacgca 180

gactccgtga agggccgatt catcatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtatctt 240

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacacg gccgtgtatt actgtgcgag agatccatac 300

agctatggtc gaggtggcgg ctactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctca 357

Sequence Number (ID): 206

Length: 351

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..351

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

gaggtgcagc tggtggagac tggaggaggc ttgatccagc ctggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctgggct caccgtcagt agcaactaca tgaactgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagtt atttatagcg gtggtagcac atactacgca 180

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtatctt 240

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacacg gccgtgtatt actgtgcgag agatggggtc 300

tactacggta tggacgtctg gggccaaggg accacggtca ccgtctcctc a 351

Sequence Number (ID): 207

Length: 372

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..372

> mol_type, other DNA

> note, VH

> organism, synthetic construct

Residues:

gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatggca tgcactgggt ccgccaggct 120

ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcatatg atggaagtaa taaatactac 180

gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agctgaggac acggctgtgt attactgtgc gaaggattac 300

gatttttgga gtggttatta cccccagccc tttgactact ggggccaggg aaccctggtc 360

accgtctcct ca 372

Sequence Number (ID): 208

Length: 321

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..321

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttacta ctgtcaacag agttacagta cccctggcag ttttggccag 300

gggaccaagc tggagatcaa a 321

Sequence Number (ID): 209

Length: 330

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..330

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

cagtctgtgc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60

tcttgttctg gaagtagctc caacatcgga agaaatactg taaactggta ccagcagctc 120

ccaggaacgg cccccaaact cgtcatctat agtaataatc agcggccctc aggggtccct 180

gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccag 240

tctgaggatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg acagcctgaa tggtctggta 300

ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta 330

Sequence Number (ID): 210

Length: 339

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..339

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

gacatcgtga tgacccagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60

atcaactgca agtccagcca gagtgtttta tacagcttca ggaataagat ctgcttagct 120

tggtaccagc agaaaccagg acagcctcct aaactgctca tttactgggc aactacccgg 180

gaatccgggg tccctgaccg attcagtggc agcgggtctg ggacagattt cactctcacc 240

atcagcagcc tgcaggctga agatgtggct gtttattact gtcagcaatt ttatagtact 300

ccgtggacgt tcggccaagg gaccaaggtg gaaatcaaa 339

Sequence Number (ID): 211

Length: 330

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..330

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

cagtctgccc tgactcagtc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagcc gatcaccatc 60

tcctgcactg gaaccagcag tgatgttggg agttataacc ttgtctcctg gtaccaacag 120

cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgaggtca gtaagcggcc ctcaggggtt 180

tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgacaat ctctgggctc 240

caggctgagg acgaggctga ttattactgc tgctcatatg cagatagtag gactttggtg 300

ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta 330

Sequence Number (ID): 212

Length: 327

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..327

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc aggcgagtca ggacattagc aactatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctacgat gcatccaatt tggaaacagg ggtcccatca 180

aggttcagtg gaagtggatc tgggacagat tttactttca ccatcagcag cctgcagcct 240

gaagatattg caacatatta ctgtcaacag tatgataatc tccctccgag ggtgacgttc 300

ggccaaggga ccaaggtgga aatcaaa 327

Sequence Number (ID): 213

Length: 327

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..327

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60

tcctgcactg gaaccagcag tgatgttggg agttatgacc ttgtctcctg gtaccaacag 120

cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgaggtca ctaagcggcc ctcaggggtt 180

tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgacaat ctctgggctc 240

caggctgagg acgaggctga ttattactgc tgctcatttg caggtagtag ccccttgttc 300

ggcggaggga ccaagctgac cgtccta 327

Sequence Number (ID): 214

Length: 321

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..321

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

gacatccaga tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggccagtca gagtattagt agctggttgg cctggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaaggtcct gatctataag gcgtctagtt tagaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240

gatgattttg caacttatta ctgccaacag tataatagtt attctccaat gttcggccaa 300

gggaccaagg tggaaatcaa a 321

Sequence Number (ID): 215

Length: 324

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..324

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60

ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120

cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtgcatcca gcagggccac tggcatccca 180

gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240

cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcac cagtatggta gctcacctcg aacgttcggc 300

caagggacca aggtggagat caaa 324

Sequence Number (ID): 216

Length: 330

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..330

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

cagtctgtgc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60

tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga agtaatactg taaactggta ccagcagctc 120

ccaggaacgg cccccaaact cctcatctat aataataatc aacggccctc aggggtccct 180

gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccag 240

tctgaggatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg acagcctgaa tggttatgtc 300

ttcggaactg ggaccaaggt caccgtccta 330

Sequence Number (ID): 217

Length: 321

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..321

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctacat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc aagtatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttacta ctgtcaacag agttatagta cccctccgac gttcggccaa 300

gggaccaagg tggaaatcaa a 321

Sequence Number (ID): 218

Length: 327

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..327

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc aggcgagtca ggacattagc aactatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctacgat gcatccaatt tggaaacagg ggtcccatca 180

aggttcagtg gaagtggatc tgggacagat tttactttca ccatcagcag cctgcagcct 240

gaagatattg ctacatatta ctgtcaacag tatgataatc tccctccgcg gctcactttc 300

ggcggaggga ccaaggtgga aatcaaa 327

Sequence Number (ID): 219

Length: 333

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..333

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60

tcctgcactg gaaccagcag tgacattggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacaa 120

cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgatgtca gtaatcggcc ctcaggggtt 180

tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240

caggctgagg acgaggctga atattactgc agctcatata caagaagcag cactcaggtg 300

gtattcggcg gagggaccaa gctgaccgtc cta 333

Sequence Number (ID): 220

Length: 324

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..324

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60

ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120

cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtgcatcca gcagggccac tggcatccca 180

gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcactatcag cagactggag 240

cctgaagatt ttgcagtgta tcactgtcag cagtatggta cctcaccgtg gacgttcggc 300

caagggacca aggtggaaat caaa 324

Sequence Number (ID): 221

Length: 336

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..336

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60

tcctgcactg gaaccagcag tgatgttggg agttataacc ttgtctcctg gtaccaacag 120

cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgaagtca gtaagcggcc ctcaggggtt 180

tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgacaat ctctgggctc 240

caggctgagg acgaggctga ttattactgc tgctcatatg cacgtattag cacccccgga 300

tttgtcttcg gaactgggac caaggtcacc gtccta 336

Sequence Number (ID): 222

Length: 318

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..318

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

gacatccaga tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggccagtca gagtattagt agctggttgg cctggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctataag gcatctaatt tagaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240

gatgattttg caacttatta ctgccaacag tataatagtt attcgacgtt cggccaaggg 300

accaaggtgg agatcaaa 318

Sequence Number (ID): 223

Length: 324

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..324

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctctaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc aggcgagtca ggacattagc aactatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaggccc ctaagctcct gatctacgat gcatccaatt tgcaaacagg ggtcccatca 180

aggttcagtg gaggtggatc tgggacagat tttactttca ccatcagcag cctgcagcct 240

gaagatattg caacatatta ctgtcaacag tatgataatc tcctgggagt cactttcggc 300

cctgggacca aagtggatat caaa 324

Sequence Number (ID): 224

Length: 324

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..324

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60

ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagagt 120

cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtacatcca gcagggccac tggcatccca 180

gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240

cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtatggta gctcacctag aacgttcggc 300

caagggacca aggtggagat caaa 324

Sequence Number (ID): 225

Length: 324

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..324

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60

ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120

cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtgcatcca gcagggccac tggcatccca 180

gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240

cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtatggta gctcacctcg aacgttcggc 300

caagggacca aggtggagat caaa 324

Sequence Number (ID): 226

Length: 327

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..327

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60

ctctcctgca gggccagcca gagtattagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120

cctggccagg ctcccaggct cctcttctat ggtgcatcca gcagggccac tggcatccca 180

gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag caaactggag 240

cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtatggta gctcacctcc gatcaccttc 300

ggccaaggga cacgactgga gattaaa 327

Sequence Number (ID): 227

Length: 342

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..342

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

gacatcgtga tgacccagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60

atcaactgca agtccagcca gagtgtttta tacagctcca acaataagaa ctacttagct 120

tggtaccagc agaaaccagg acagcctcct aagctgctca tttactgggc atctacccgg 180

gaatccgggg tccctgaccg attcagtggc agcgggtctg ggacagattt cactctcacc 240

atcagcagcc tgcaggctga agatgtggca gtttattact gtcagcaata ttatagtact 300

ctcttgctca ctttcggcgg agggaccaag gtggagatca aa 342

Sequence Number (ID): 228

Length: 321

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..321

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc aggcgagtca ggacattagc aactatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctacgat gcatccaatt tggaaacagg ggtcccatca 180

aggttcagtg gaagtggatc tgggacagat tttactttca ccatcagcag cctgcagcct 240

gaagatattg caacatatta ctgtcaacag tatgataatc tcccgatcac cttcggccaa 300

gggacacgac tggagattaa a 321

Sequence Number (ID): 229

Length: 327

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..327

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

gacatccagt tgacccagtc tccatccttc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggccagtca gggcattagc agttatttag cctggtatca gcaaaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctttgct gcatccactt tgcagagtgg ggtcccatca 180

aggttcagcg ccagtggatc tgggacagaa ttcactctca caatcagcag cctgcagcct 240

gaagattttg caacttatta ctgtcaacac cttaatagtt acccttctat gtacactttt 300

ggccagggga ccaagctgga gatcaaa 327

Sequence Number (ID): 230

Length: 321

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..321

> mol_type, other DNA

> note, VL

> organism, synthetic construct

Residues:

gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tacaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagcg gcagtggatc tggcacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240

gaagattttg caacttatta ctgtctacaa gattacaatt accctcggac gttcggccaa 300

gggaccaagg tggaaatcaa a 321

Sequence Number (ID): 231

Length: 457

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..457

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYAMHWVRQA PGKGLEWVAV ISYDGSNKYY 60

ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARAR PWRYSYGLYY YYGMDVWGQG 120

TTVTVSSAST KGPSVFPLAP SSKSTSGGTA ALGCLVKDYF PEPVTVSWNS GALTSGVHTF 180

PAVLQSSGLY SLSSVVTVPS SSLGTQTYIC NVNHKPSNTK VDKRVEPKSC DKTHTCPPCP 240

APELLGGPSV FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK 300

PREEQYNSTY RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT 360

LPPSREEMTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL 420

TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK 457

Sequence Number (ID): 232

Length: 457

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..457

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLVESGGG LVQSGGSLRL SCAASGFSFN TYSMNWVRQA PGKGLEWVSY ISSSGSILHY 60

ADSVKGRLTI SRDNAKNSLY LQMNSLRAED TAVYYCARVG TRVGASNFDY YYGMDVWGQG 120

TTVTVSSAST KGPSVFPLAP SSKSTSGGTA ALGCLVKDYF PEPVTVSWNS GALTSGVHTF 180

PAVLQSSGLY SLSSVVTVPS SSLGTQTYIC NVNHKPSNTK VDKRVEPKSC DKTHTCPPCP 240

APELLGGPSV FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK 300

PREEQYNSTY RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT 360

LPPSREEMTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL 420

TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK 457

Sequence Number (ID): 233

Length: 453

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..453

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLRQWGSG LLKPSETLSL TCAVYGGSLS GYYWSYFRQP PGKGLEWIGE ITQSGGTNYN 60

PSLKSRITIS VDTSKNQFSL DLSSVTAADT AVYYCARGGY DDNRGYYAYF DYWGQGTLVT 120

VSSASTKGPS VFPLAPSSKS TSGGTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL 180

QSSGLYSLSS VVTVPSSSLG TQTYICNVNH KPSNTKVDKR VEPKSCDKTH TCPPCPAPEL 240

LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVVV DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 300

QYNSTYRVVS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 360

REEMTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 420

SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK 453

Sequence Number (ID): 234

Length: 465

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..465

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFT GYYIHWVRQA PGQGLEWMGW INPNSGATNY 60

AQKFQGRVTV TRDTSISTAY MELSRLRSDD TAVYYCARVA QVVSNPLPYD VLTGLTYYYY 120

GMDVWGQGTT VTVSSASTKG PSVFPLAPSS KSTSGGTAAL GCLVKDYFPE PVTVSWNSGA 180

LTSGVHTFPA VLQSSGLYSL SSVVTVPSSS LGTQTYICNV NHKPSNTKVD KRVEPKSCDK 240

THTCPPCPAP ELLGGPSVFL FPPKPKDTLM ISRTPEVTCV VVDVSHEDPE VKFNWYVDGV 300

EVHNAKTKPR EEQYNSTYRV VSVLTVLHQD WLNGKEYKCK VSNKALPAPI EKTISKAKGQ 360

PREPQVYTLP PSREEMTKNQ VSLTCLVKGF YPSDIAVEWE SNGQPENNYK TTPPVLDSDG 420

SFFLYSKLTV DKSRWQQGNV FSCSVMHEAL HNHYTQKSLS LSPGK 465

Sequence Number (ID): 235

Length: 451

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..451

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFT GYYMHWVRQA PGQGLEWMGW INPNSGGTNY 60

AQKFQGRVTM TRDTSITTAY MELSRLRSDD TAVYYCARDY YYDSSVNPDY WGQGTLVTVS 120

SASTKGPSVF PLAPSSKSTS GGTAALGCLV KDYFPEPVTV SWNSGALTSG VHTFPAVLQS 180

SGLYSLSSVV TVPSSSLGTQ TYICNVNHKP SNTKVDKRVE PKSCDKTHTC PPCPAPELLG 240

GPSVFLFPPK PKDTLMISRT PEVTCVVVDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN AKTKPREEQY 300

NSTYRVVSVL TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP QVYTLPPSRE 360

EMTKNQVSLT CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL YSKLTVDKSR 420

WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG K 451

Sequence Number (ID): 236

Length: 453

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..453

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLQESGPG LVKPSQTLSL TCTVSGGSIS SGDYYWSWIR QHPGKGLEWI GYIFYSGSTY 60

YNPSLKSRVT ISVDTSKNQF SLKLSSVTAA DTAVYYCARR CRFVDTSMAF DYWGQGTLVT 120

VSSASTKGPS VFPLAPSSKS TSGGTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL 180

QSSGLYSLSS VVTVPSSSLG TQTYICNVNH KPSNTKVDKR VEPKSCDKTH TCPPCPAPEL 240

LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVVV DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 300

QYNSTYRVVS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 360

REEMTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 420

SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK 453

Sequence Number (ID): 237

Length: 451

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..451

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGAE VKKPGSSVKV SCKASGGTFI TYAFSWVRQA PGQGLEWMGR IIPILGITNY 60

AQKFQGRVTI TADKSTSTAY MELSSLRSED TAVYYCARGG RGANPGWFDY WGQGTLVTVS 120

SASTKGPSVF PLAPSSKSTS GGTAALGCLV KDYFPEPVTV SWNSGALTSG VHTFPAVLQS 180

SGLYSLSSVV TVPSSSLGTQ TYICNVNHKP SNTKVDKRVE PKSCDKTHTC PPCPAPELLG 240

GPSVFLFPPK PKDTLMISRT PEVTCVVVDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN AKTKPREEQY 300

NSTYRVVSVL TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP QVYTLPPSRE 360

EMTKNQVSLT CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL YSKLTVDKSR 420

WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG K 451

Sequence Number (ID): 238

Length: 453

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..453

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGAE VKKPGSSVKV SCKASGGTFS NYAISWVRQA PGQGLEWMGR IIPILGIANY 60

AQKFQGRLTI TADKSTSTAY MELSSLRSED TAVYYCARTA YEYDSSGYFL DYWGQGTLVT 120

VSSASTKGPS VFPLAPSSKS TSGGTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL 180

QSSGLYSLSS VVTVPSSSLG TQTYICNVNH KPSNTKVDKR VEPKSCDKTH TCPPCPAPEL 240

LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVVV DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 300

QYNSTYRVVS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 360

REEMTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 420

SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK 453

Sequence Number (ID): 239

Length: 450

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..450

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLLESGGG LVKPGGSLRL SCAASGFTFS DYYMSWIRQA PGKGLEWVSY ISSSGSTIYY 60

ADSVKGRFTI SRDNAKNSLY LQMNSLRAED TAVYYCARHP MVRGVIGDYW GQGTLVTVSS 120

ASTKGPSVFP LAPSSKSTSG GTAALGCLVK DYFPEPVTVS WNSGALTSGV HTFPAVLQSS 180

GLYSLSSVVT VPSSSLGTQT YICNVNHKPS NTKVDKRVEP KSCDKTHTCP PCPAPELLGG 240

PSVFLFPPKP KDTLMISRTP EVTCVVVDVS HEDPEVKFNW YVDGVEVHNA KTKPREEQYN 300

STYRVVSVLT VLHQDWLNGK EYKCKVSNKA LPAPIEKTIS KAKGQPREPQ VYTLPPSREE 360

MTKNQVSLTC LVKGFYPSDI AVEWESNGQP ENNYKTTPPV LDSDGSFFLY SKLTVDKSRW 420

QQGNVFSCSV MHEALHNHYT QKSLSLSPGK 450

Sequence Number (ID): 240

Length: 455

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..455

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFT SYYMHWVRQA PGQGLEWMGI INPSGGSTSY 60

VQKFQGRVTM TRDTSTSTVY MELSSLRFED TAVYYCARGH SGYDRLPQPP YFDYWGQGTL 120

VTVSSASTKG PSVFPLAPSS KSTSGGTAAL GCLVKDYFPE PVTVSWNSGA LTSGVHTFPA 180

VLQSSGLYSL SSVVTVPSSS LGTQTYICNV NHKPSNTKVD KRVEPKSCDK THTCPPCPAP 240

ELLGGPSVFL FPPKPKDTLM ISRTPEVTCV VVDVSHEDPE VKFNWYVDGV EVHNAKTKPR 300

EEQYNSTYRV VSVLTVLHQD WLNGKEYKCK VSNKALPAPI EKTISKAKGQ PREPQVYTLP 360

PSREEMTKNQ VSLTCLVKGF YPSDIAVEWE SNGQPENNYK TTPPVLDSDG SFFLYSKLTV 420

DKSRWQQGNV FSCSVMHEAL HNHYTQKSLS LSPGK 455

Sequence Number (ID): 241

Length: 451

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..451

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYLFT GYYMHWVRQA PGQGLEWMGW INPNSGGTNY 60

AQKFQDRVTM TRDTSITTAY MELSRLRSDD TAVYYCARSG YYTSAVNFDY WGQGTLVTVS 120

SASTKGPSVF PLAPSSKSTS GGTAALGCLV KDYFPEPVTV SWNSGALTSG VHTFPAVLQS 180

SGLYSLSSVV TVPSSSLGTQ TYICNVNHKP SNTKVDKRVE PKSCDKTHTC PPCPAPELLG 240

GPSVFLFPPK PKDTLMISRT PEVTCVVVDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN AKTKPREEQY 300

NSTYRVVSVL TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP QVYTLPPSRE 360

EMTKNQVSLT CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL YSKLTVDKSR 420

WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG K 451

Sequence Number (ID): 242

Length: 462

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..462

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLLESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS SYAMSWVRQA PGKGLEWVSA VSGSGGSTYY 60

ADSVKGRFTI SRDNSKNMLY LQMNSLRAED TAVYYCAKTV LAGRDDSSGY FTVYYYFGMD 120

VWGQGTTVTV SSASTKGPSV FPLAPSSKST SGGTAALGCL VKDYFPEPVT VSWNSGALTS 180

GVHTFPAVLQ SSGLYSLSSV VTVPSSSLGT QTYICNVNHK PSNTKVDKRV EPKSCDKTHT 240

CPPCPAPELL GGPSVFLFPP KPKDTLMISR TPEVTCVVVD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH 300

NAKTKPREEQ YNSTYRVVSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN KALPAPIEKT ISKAKGQPRE 360

PQVYTLPPSR EEMTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG QPENNYKTTP PVLDSDGSFF 420

LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC SVMHEALHNH YTQKSLSLSP GK 462

Sequence Number (ID): 243

Length: 453

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..453

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGPE VKKPGTSVKV SCKASGFTFP SSAVQWVRQA RGQRLEWIGW IVVGSGNTNY 60

AQKFQERVTI TRDMSTSTAY MELSSLRSED TAVYYCAAPY CSGGSCYDGF DIWGQGTMVT 120

VSSASTKGPS VFPLAPSSKS TSGGTAALGC LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL 180

QSSGLYSLSS VVTVPSSSLG TQTYICNVNH KPSNTKVDKR VEPKSCDKTH TCPPCPAPEL 240

LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVVV DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 300

QYNSTYRVVS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 360

REEMTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 420

SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK 453

Sequence Number (ID): 244

Length: 461

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..461

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFT NYDINWVRQA TGQGLEWMGW MNPNSGNTGF 60

AQKFQGRVTM TRNTSIRTVY MELSSLRSED TAVYYCARAY QNRPIAVTDM GYYYYYGMDV 120

WGQGTTVTVS SASTKGPSVF PLAPSSKSTS GGTAALGCLV KDYFPEPVTV SWNSGALTSG 180

VHTFPAVLQS SGLYSLSSVV TVPSSSLGTQ TYICNVNHKP SNTKVDKRVE PKSCDKTHTC 240

PPCPAPELLG GPSVFLFPPK PKDTLMISRT PEVTCVVVDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN 300

AKTKPREEQY NSTYRVVSVL TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP 360

QVYTLPPSRE EMTKNQVSLT CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL 420

YSKLTVDKSR WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG K 461

Sequence Number (ID): 245

Length: 454

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..454

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QLQLQESGPG LVKPSETLSL TCTVSGGSIS SSSYYWGWIR QPPGKGLEWI GSIYYSGSTY 60

YNPSLKSRVT ISVDTSKNQF SLKLSSVTAA DTALYYCARG GSIYDYGDYE FDSWGQGTLV 120

TVSSASTKGP SVFPLAPSSK STSGGTAALG CLVKDYFPEP VTVSWNSGAL TSGVHTFPAV 180

LQSSGLYSLS SVVTVPSSSL GTQTYICNVN HKPSNTKVDK RVEPKSCDKT HTCPPCPAPE 240

LLGGPSVFLF PPKPKDTLMI SRTPEVTCVV VDVSHEDPEV KFNWYVDGVE VHNAKTKPRE 300

EQYNSTYRVV SVLTVLHQDW LNGKEYKCKV SNKALPAPIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP 360

SREEMTKNQV SLTCLVKGFY PSDIAVEWES NGQPENNYKT TPPVLDSDGS FFLYSKLTVD 420

KSRWQQGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SPGK 454

Sequence Number (ID): 246

Length: 451

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..451

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QVQLVQSGAE VKKPGASVKV SCKASGYTFT SYYMHWVRQA PGQGLEWMGI INPSGGSTSY 60

AQKFQGRVTM TRDTSTSTVY MELSSLRSED TAVYYCAILG LHLGELLFDP WGQGTLVTVS 120

SASTKGPSVF PLAPSSKSTS GGTAALGCLV KDYFPEPVTV SWNSGALTSG VHTFPAVLQS 180

SGLYSLSSVV TVPSSSLGTQ TYICNVNHKP SNTKVDKRVE PKSCDKTHTC PPCPAPELLG 240

GPSVFLFPPK PKDTLMISRT PEVTCVVVDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN AKTKPREEQY 300

NSTYRVVSVL TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP QVYTLPPSRE 360

EMTKNQVSLT CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL YSKLTVDKSR 420

WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG K 451

Sequence Number (ID): 247

Length: 447

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..447

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLVESGGG LIQPGGSLRL SCAASGFTVS SNYMSWVRQA PGKGLEWVSV IYSGGSTFYA 60

DSVKGRFTIS RDNSKNTLYL QMNSLRAEDT AVYYCARDFG EQWFDYWGQG TLVTVSSAST 120

KGPSVFPLAP SSKSTSGGTA ALGCLVKDYF PEPVTVSWNS GALTSGVHTF PAVLQSSGLY 180

SLSSVVTVPS SSLGTQTYIC NVNHKPSNTK VDKRVEPKSC DKTHTCPPCP APELLGGPSV 240

FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY 300

RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSREEMTK 360

NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG 420

NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK 447

Sequence Number (ID): 248

Length: 447

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..447

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASEFTVS SNYMSWVRQA PGKGLEWVSV IYSGGSTYYA 60

DSVKGRFTIS RDNSKNTLYL QMNSLRAEDT AVYYCARDFG DYYFDYWGQG TLVTVSSAST 120

KGPSVFPLAP SSKSTSGGTA ALGCLVKDYF PEPVTVSWNS GALTSGVHTF PAVLQSSGLY 180

SLSSVVTVPS SSLGTQTYIC NVNHKPSNTK VDKRVEPKSC DKTHTCPPCP APELLGGPSV 240

FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY 300

RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSREEMTK 360

NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG 420

NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK 447

Sequence Number (ID): 249

Length: 448

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..448

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLVETGGG LIQPGGSLRL SCAASGFTVS RNYMSWVRQA PGKGLEWVSL IYSGGSTFYA 60

DSVKGRFTIS RDDSKNTLYL QMNSLRAEDT AVYYCARDLL EVGGSDYWGQ GTLVTVSSAS 120

TKGPSVFPLA PSSKSTSGGT AALGCLVKDY FPEPVTVSWN SGALTSGVHT FPAVLQSSGL 180

YSLSSVVTVP SSSLGTQTYI CNVNHKPSNT KVDKRVEPKS CDKTHTCPPC PAPELLGGPS 240

VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSHE DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQYNST 300

YRVVSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSREEMT 360

KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ 420

GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGK 448

Sequence Number (ID): 250

Length: 458

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..458

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLLESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS SYAMSWVRQA PGKGLEWVSA ISGSGGSTYY 60

ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCAKPL LGYDFWSGYY RGGWFDPWGQ 120

GTLVTVSSAS TKGPSVFPLA PSSKSTSGGT AALGCLVKDY FPEPVTVSWN SGALTSGVHT 180

FPAVLQSSGL YSLSSVVTVP SSSLGTQTYI CNVNHKPSNT KVDKRVEPKS CDKTHTCPPC 240

PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSHE DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT 300

KPREEQYNST YRVVSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY 360

TLPPSREEMT KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK 420

LTVDKSRWQQ GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGK 458

Sequence Number (ID): 251

Length: 449

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..449

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLVESGGG LIQPGGSLRL SCAASGFTVS SNYMSWVRQA PGKGLEWVSV IYSGGSTYYA 60

DSVKGRFIIS RDNSKNTLYL QMNSLRAEDT AVYYCARDPY SYGRGGGYWG QGTLVTVSSA 120

STKGPSVFPL APSSKSTSGG TAALGCLVKD YFPEPVTVSW NSGALTSGVH TFPAVLQSSG 180

LYSLSSVVTV PSSSLGTQTY ICNVNHKPSN TKVDKRVEPK SCDKTHTCPP CPAPELLGGP 240

SVFLFPPKPK DTLMISRTPE VTCVVVDVSH EDPEVKFNWY VDGVEVHNAK TKPREEQYNS 300

TYRVVSVLTV LHQDWLNGKE YKCKVSNKAL PAPIEKTISK AKGQPREPQV YTLPPSREEM 360

TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPE NNYKTTPPVL DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ 420

QGNVFSCSVM HEALHNHYTQ KSLSLSPGK 449

Sequence Number (ID): 252

Length: 447

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..447

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLVETGGG LIQPGGSLRL SCAASGLTVS SNYMNWVRQA PGKGLEWVSV IYSGGSTYYA 60

DSVKGRFTIS RDNSKNTLYL QMNSLRAEDT AVYYCARDGV YYGMDVWGQG TTVTVSSAST 120

KGPSVFPLAP SSKSTSGGTA ALGCLVKDYF PEPVTVSWNS GALTSGVHTF PAVLQSSGLY 180

SLSSVVTVPS SSLGTQTYIC NVNHKPSNTK VDKRVEPKSC DKTHTCPPCP APELLGGPSV 240

FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY 300

RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSREEMTK 360

NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG 420

NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK 447

Sequence Number (ID): 253

Length: 454

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..454

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, heavy chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFTFS SYGMHWVRQA PGKGLEWVAV ISYDGSNKYY 60

ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCAKDY DFWSGYYPQP FDYWGQGTLV 120

TVSSASTKGP SVFPLAPSSK STSGGTAALG CLVKDYFPEP VTVSWNSGAL TSGVHTFPAV 180

LQSSGLYSLS SVVTVPSSSL GTQTYICNVN HKPSNTKVDK RVEPKSCDKT HTCPPCPAPE 240

LLGGPSVFLF PPKPKDTLMI SRTPEVTCVV VDVSHEDPEV KFNWYVDGVE VHNAKTKPRE 300

EQYNSTYRVV SVLTVLHQDW LNGKEYKCKV SNKALPAPIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP 360

SREEMTKNQV SLTCLVKGFY PSDIAVEWES NGQPENNYKT TPPVLDSDGS FFLYSKLTVD 420

KSRWQQGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SPGK 454

Sequence Number (ID): 254

Length: 214

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..214

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQSIS SYLNWYQQKP GKAPKLLIYA ASSLQSGVPS 60

RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ SYSTPGSFGQ GTKLEIKRTV AAPSVFIFPP 120

SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180

LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214

Sequence Number (ID): 255

Length: 216

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..216

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSVLTQPPSA SGTPGQRVTI SCSGSSSNIG RNTVNWYQQL PGTAPKLVIY SNNQRPSGVP 60

DRFSGSKSGT SASLAISGLQ SEDEADYYCA AWDDSLNGLV FGGGTKLTVL GQPKAAPSVT 120

LFPPSSEELQ ANKATLVCLI SDFYPGAVTV AWKADSSPVK AGVETTTPSK QSNNKYAASS 180

YLSLTPEQWK SHRSYSCQVT HEGSTVEKTV APTECS 216

Sequence Number (ID): 256

Length: 220

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..220

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIVMTQSPDS LAVSLGERAT INCKSSQSVL YSFRNKICLA WYQQKPGQPP KLLIYWATTR 60

ESGVPDRFSG SGSGTDFTLT ISSLQAEDVA VYYCQQFYST PWTFGQGTKV EIKRTVAAPS 120

VFIFPPSDEQ LKSGTASVVC LLNNFYPREA KVQWKVDNAL QSGNSQESVT EQDSKDSTYS 180

LSSTLTLSKA DYEKHKVYAC EVTHQGLSSP VTKSFNRGEC 220

Sequence Number (ID): 257

Length: 216

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..216

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSALTQSASV SGSPGQPITI SCTGTSSDVG SYNLVSWYQQ HPGKAPKLMI YEVSKRPSGV 60

SNRFSGSKSG NTASLTISGL QAEDEADYYC CSYADSRTLV FGGGTKLTVL GQPKAAPSVT 120

LFPPSSEELQ ANKATLVCLI SDFYPGAVTV AWKADSSPVK AGVETTTPSK QSNNKYAASS 180

YLSLTPEQWK SHRSYSCQVT HEGSTVEKTV APTECS 216

Sequence Number (ID): 258

Length: 216

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..216

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCQASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKLLIYD ASNLETGVPS 60

RFSGSGSGTD FTFTISSLQP EDIATYYCQQ YDNLPPRVTF GQGTKVEIKR TVAAPSVFIF 120

PPSDEQLKSG TASVVCLLNN FYPREAKVQW KVDNALQSGN SQESVTEQDS KDSTYSLSST 180

LTLSKADYEK HKVYACEVTH QGLSSPVTKS FNRGEC 216

Sequence Number (ID): 259

Length: 215

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..215

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSALTQPASV SGSPGQSITI SCTGTSSDVG SYDLVSWYQQ HPGKAPKLMI YEVTKRPSGV 60

SNRFSGSKSG NTASLTISGL QAEDEADYYC CSFAGSSPLF GGGTKLTVLG QPKAAPSVTL 120

FPPSSEELQA NKATLVCLIS DFYPGAVTVA WKADSSPVKA GVETTTPSKQ SNNKYAASSY 180

LSLTPEQWKS HRSYSCQVTH EGSTVEKTVA PTECS 215

Sequence Number (ID): 260

Length: 214

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..214

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPST LSASVGDRVT ITCRASQSIS SWLAWYQQKP GKAPKVLIYK ASSLESGVPS 60

RFSGSGSGTE FTLTISSLQP DDFATYYCQQ YNSYSPMFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120

SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180

LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214

Sequence Number (ID): 261

Length: 215

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..215

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EIVLTQSPGT LSLSPGERAT LSCRASQSVS SSYLAWYQQK PGQAPRLLIY GASSRATGIP 60

DRFSGSGSGT DFTLTISRLE PEDFAVYYCH QYGSSPRTFG QGTKVEIKRT VAAPSVFIFP 120

PSDEQLKSGT ASVVCLLNNF YPREAKVQWK VDNALQSGNS QESVTEQDSK DSTYSLSSTL 180

TLSKADYEKH KVYACEVTHQ GLSSPVTKSF NRGEC 215

Sequence Number (ID): 262

Length: 216

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..216

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSVLTQPPSA SGTPGQRVTI SCSGSSSNIG SNTVNWYQQL PGTAPKLLIY NNNQRPSGVP 60

DRFSGSKSGT SASLAISGLQ SEDEADYYCA AWDDSLNGYV FGTGTKVTVL GQPKANPTVT 120

LFPPSSEELQ ANKATLVCLI SDFYPGAVTV AWKADSSPVK AGVETTTPSK QSNNKYAASS 180

YLSLTPEQWK SHRSYSCQVT HEGSTVEKTV APTECS 216

Sequence Number (ID): 263

Length: 214

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..214

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPSS LSTSVGDRVT ITCRASQSIS KYLNWYQQKP GKAPKLLIYA ASSLQSGVPS 60

RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ SYSTPPTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120

SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180

LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214

Sequence Number (ID): 264

Length: 216

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..216

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCQASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKLLIYD ASNLETGVPS 60

RFSGSGSGTD FTFTISSLQP EDIATYYCQQ YDNLPPRLTF GGGTKVEIKR TVAAPSVFIF 120

PPSDEQLKSG TASVVCLLNN FYPREAKVQW KVDNALQSGN SQESVTEQDS KDSTYSLSST 180

LTLSKADYEK HKVYACEVTH QGLSSPVTKS FNRGEC 216

Sequence Number (ID): 265

Length: 217

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..217

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSALTQPASV SGSPGQSITI SCTGTSSDIG GYNYVSWYQQ HPGKAPKLMI YDVSNRPSGV 60

SNRFSGSKSG NTASLTISGL QAEDEAEYYC SSYTRSSTQV VFGGGTKLTV LGQPKAAPSV 120

TLFPPSSEEL QANKATLVCL ISDFYPGAVT VAWKADSSPV KAGVETTTPS KQSNNKYAAS 180

SYLSLTPEQW KSHRSYSCQV THEGSTVEKT VAPTECS 217

Sequence Number (ID): 266

Length: 215

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..215

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EIVLTQSPGT LSLSPGERAT LSCRASQSVS SSYLAWYQQK PGQAPRLLIY GASSRATGIP 60

DRFSGSGSGT DFTLTISRLE PEDFAVYHCQ QYGTSPWTFG QGTKVEIKRT VAAPSVFIFP 120

PSDEQLKSGT ASVVCLLNNF YPREAKVQWK VDNALQSGNS QESVTEQDSK DSTYSLSSTL 180

TLSKADYEKH KVYACEVTHQ GLSSPVTKSF NRGEC 215

Sequence Number (ID): 267

Length: 218

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..218

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

QSALTQPASV SGSPGQSITI SCTGTSSDVG SYNLVSWYQQ HPGKAPKLMI YEVSKRPSGV 60

SNRFSGSKSG NTASLTISGL QAEDEADYYC CSYARISTPG FVFGTGTKVT VLGQPKANPT 120

VTLFPPSSEE LQANKATLVC LISDFYPGAV TVAWKADSSP VKAGVETTTP SKQSNNKYAA 180

SSYLSLTPEQ WKSHRSYSCQ VTHEGSTVEK TVAPTECS 218

Sequence Number (ID): 268

Length: 213

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..213

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPST LSASVGDRVT ITCRASQSIS SWLAWYQQKP GKAPKLLIYK ASNLESGVPS 60

RFSGSGSGTE FTLTISSLQP DDFATYYCQQ YNSYSTFGQG TKVEIKRTVA APSVFIFPPS 120

DEQLKSGTAS VVCLLNNFYP REAKVQWKVD NALQSGNSQE SVTEQDSKDS TYSLSSTLTL 180

SKADYEKHKV YACEVTHQGL SSPVTKSFNR GEC 213

Sequence Number (ID): 269

Length: 215

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..215

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPSS LSASLGDRVT ITCQASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKLLIYD ASNLQTGVPS 60

RFSGGGSGTD FTFTISSLQP EDIATYYCQQ YDNLLGVTFG PGTKVDIKRT VAAPSVFIFP 120

PSDEQLKSGT ASVVCLLNNF YPREAKVQWK VDNALQSGNS QESVTEQDSK DSTYSLSSTL 180

TLSKADYEKH KVYACEVTHQ GLSSPVTKSF NRGEC 215

Sequence Number (ID): 270

Length: 215

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..215

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EIVLTQSPGT LSLSPGERAT LSCRASQSVS SSYLAWYQQS PGQAPRLLIY GTSSRATGIP 60

DRFSGSGSGT DFTLTISRLE PEDFAVYYCQ QYGSSPRTFG QGTKVEIKRT VAAPSVFIFP 120

PSDEQLKSGT ASVVCLLNNF YPREAKVQWK VDNALQSGNS QESVTEQDSK DSTYSLSSTL 180

TLSKADYEKH KVYACEVTHQ GLSSPVTKSF NRGEC 215

Sequence Number (ID): 271

Length: 215

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..215

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EIVLTQSPGT LSLSPGERAT LSCRASQSVS SSYLAWYQQK PGQAPRLLIY GASSRATGIP 60

DRFSGSGSGT DFTLTISRLE PEDFAVYYCQ QYGSSPRTFG QGTKVEIKRT VAAPSVFIFP 120

PSDEQLKSGT ASVVCLLNNF YPREAKVQWK VDNALQSGNS QESVTEQDSK DSTYSLSSTL 180

TLSKADYEKH KVYACEVTHQ GLSSPVTKSF NRGEC 215

Sequence Number (ID): 272

Length: 216

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..216

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

EIVLTQSPGT LSLSPGERAT LSCRASQSIS SSYLAWYQQK PGQAPRLLFY GASSRATGIP 60

DRFSGSGSGT DFTLTISKLE PEDFAVYYCQ QYGSSPPITF GQGTRLEIKR TVAAPSVFIF 120

PPSDEQLKSG TASVVCLLNN FYPREAKVQW KVDNALQSGN SQESVTEQDS KDSTYSLSST 180

LTLSKADYEK HKVYACEVTH QGLSSPVTKS FNRGEC 216

Sequence Number (ID): 273

Length: 221

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..221

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIVMTQSPDS LAVSLGERAT INCKSSQSVL YSSNNKNYLA WYQQKPGQPP KLLIYWASTR 60

ESGVPDRFSG SGSGTDFTLT ISSLQAEDVA VYYCQQYYST LLLTFGGGTK VEIKRTVAAP 120

SVFIFPPSDE QLKSGTASVV CLLNNFYPRE AKVQWKVDNA LQSGNSQESV TEQDSKDSTY 180

SLSSTLTLSK ADYEKHKVYA CEVTHQGLSS PVTKSFNRGE C 221

Sequence Number (ID): 274

Length: 214

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..214

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCQASQDIS NYLNWYQQKP GKAPKLLIYD ASNLETGVPS 60

RFSGSGSGTD FTFTISSLQP EDIATYYCQQ YDNLPITFGQ GTRLEIKRTV AAPSVFIFPP 120

SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180

LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214

Sequence Number (ID): 275

Length: 216

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..216

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQLTQSPSF LSASVGDRVT ITCRASQGIS SYLAWYQQKP GKAPKLLIFA ASTLQSGVPS 60

RFSASGSGTE FTLTISSLQP EDFATYYCQH LNSYPSMYTF GQGTKLEIKR TVAAPSVFIF 120

PPSDEQLKSG TASVVCLLNN FYPREAKVQW KVDNALQSGN SQESVTEQDS KDSTYSLSST 180

LTLSKADYEK HKVYACEVTH QGLSSPVTKS FNRGEC 216

Sequence Number (ID): 276

Length: 214

Molecule Type: AA

Features Location/Qualifiers:

- SOURCE, 1..214

> MOL_TYPE, protein

> NOTE, light chain

> ORGANISM, synthetic construct

Residues:

DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRASQGIR NDLGWYQQKP GKAPKLLIYA ASSLQSGVPS 60

RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCLQ DYNYPRTFGQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP 120

SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT 180

LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC 214

Sequence Number (ID): 277

Length: 1428

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..1428

> mol_type, other DNA

> note, heavy chain

> organism, synthetic construct

Residues:

atgggatggt catgtatcat cctttttcta gtagcaactg caaccggtgt acattctgag 60

gtgcagctgg tggagtctgg gggaggcgtg gtccagcctg ggaggtccct gagactctcc 120

tgtgcagcct ctggattcac cttcagtagc tatgctatgc actgggtccg ccaggctcca 180

ggcaaggggc tggagtgggt ggcagttata tcgtatgatg gaagtaataa atactacgca 240

gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtatctg 300

caaatgaaca gcctgagagc tgaggacacg gctgtgtatt actgtgcgag agcccgtccg 360

tggagataca gctatggcct ctactactac tacggtatgg acgtctgggg ccaagggacc 420

acggtcaccg tctcctcagc gtcgaccaag ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc 480

tccaagagca cctctggggg cacagcggcc ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc 540

gaacctgtga cggtctcgtg gaactcaggc gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg 600

gctgtcctac agtcctcagg actctactcc ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc 660

agcttgggca cccagaccta catctgcaac gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg 720

gacaagagag ttgagcccaa atcttgtgac aaaactcaca catgcccacc gtgcccagca 780

cctgaactcc tggggggacc gtcagtcttc ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc 840

atgatctccc ggacccctga ggtcacatgc gtggtggtgg acgtgagcca cgaagaccct 900

gaggtcaagt tcaactggta cgtggacggc gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg 960

cgggaggagc agtacaacag cacgtaccgt gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag 1020

gactggctga atggcaagga gtacaagtgc aaggtctcca acaaagccct cccagccccc 1080

atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg 1140

cccccatccc gggaggagat gaccaagaac caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc 1200

ttctatccca gcgacatcgc cgtggagtgg gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac 1260

aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac ggctccttct tcctctatag caagctcacc 1320

gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct 1380

ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc tccctgtccc cgggtaaa 1428

Sequence Number (ID): 278

Length: 1428

Molecule Type: DNA

Features Location/Qualifiers:

- source, 1..1428

> mol_type, other DNA

> note, heavy chain

> organism, synthetic construct

Residues:

atgggatggt catgtatcat cctttttcta gtagcaactg caaccggtgt acattctgag 60

gtgcagctgg tggagtctgg gggaggcttg gtacagtcgg gggggtccct gagactctcc 120

tgtgcagcct ctggattcag cttcaatacc tatagcatga actgggtccg ccaggctcca 180

gggaaggggc tggagtgggt ttcatacatt agcagtagtg gtagtatctt gcactacgca 240

gactctgtga agggccgact caccatttcc agagacaacg ccaagaactc actgtatctg 300

caaatgaaca gcctgagagc cgaggacacg gctgtgtatt actgtgcgag agtggggacc 360

cgagtgggag cttcaaactt cgactactac tacggtatgg acgtctgggg ccaagggacc 420