Перекрестная ссылка на родственные заявки
Настоящая заявка испрашивает приоритет предварительной заявки на патент США №62/641873, поданной 12 марта 2018 г., и предварительной заявки на патент США №62/625019, поданной 1 февраля 2018 г., каждая из которых включена в данный документ посредством ссылки в ее полном объеме.
Ссылка на перечень последовательностей
Данная заявка подана в электронном виде посредством EFS-Web и включает перечень последовательностей, поданный в электронном виде в формате txt. Файл.txt содержит перечень последовательностей под названием «ALGN-015_02WO_SL.txt», созданный 3 января 2019 г. и имеющий размер 234861 байт. Перечень последовательностей, содержащийся в этом файле.txt, является частью описания и включен в данный документ посредством ссылки в ее полном объеме.
Область техники
Настоящее изобретение относится к антителам, например, полноразмерным антителам или их антигенсвязывающим фрагментам, которые специфически связываются с кластером дифференцировки 70 (CD70). Настоящее изобретение дополнительно относится к гетеромультимерным антителам (например, биспецифическим антителам), содержащим антитело CD70 на одном плече. Также представлены композиции, содержащие антитела к CD70, способы получения и очистки таких антител, а также их применение в диагностике и терапевтических средствах.
Уровень техники
Почечно-клеточная карцинома (RCC) представляет собой рак, который возникает в корковом веществе почки и составляет приблизительно 90% форм рака почки. На основе гистологии RCC можно классифицировать на несколько подтипов, из которых светлоклеточная почечно-клеточная карцинома (ccRCC) является наиболее распространенной и приводит к самой высокой смертности. Каждый год сообщалось о свыше 320000 случаях RCC, что во всем мире приводит к приблизительно 140000 смертей. В течение последних 10 лет частота возникновения RCC стабильно повысилась и составляет 2-3% от всех злокачественных новообразований у взрослых. Пациенты с локализованными опухолями на ранней стадии могут отказаться от хирургической резекции; однако локализованное заболевание может подвергаться ранней гематогенной диссеминации, что приводит к метастазированию. Очаги ранних метастазов включают легкие, лимфоузлы, печень, кость и головной мозг; реже надпочечные железы и контралатеральную почку. Пациенты с заболеванием на поздней стадии сталкиваются с высокими показателями заболеваемости: 5-летняя медиана выживаемости составляет 53% для III стадии заболевания и только 8% для метастатического заболевания. Существующие в настоящее время виды первоочередного лечения для заболевания на поздней стадии включают низкомолекулярные тирозинкиназные ингибиторы (TKI), такие как сунитиниб и пазопаниб, которые нацелены на рецептор фактора роста сосудистого эндотелия (VEGF), моноклональные антитела, нацеленные на VEGF, такие как бевацизумаб, мишень для ингибитора рапамицина млекопитающих (mTOR) темсиролимуса, а также высокие дозы IL-2. Хотя эти целенаправленно воздействующие на VEGF виды терапии характеризуются повышенной общей выживаемостью, долговременная устойчивость к лекарственным средствам приводит к рецидиву заболевания, и при этом лечение заболевания на поздней стадии все еще остается неудовлетворенной потребностью (см., например, Zarrabi, K. et al., Journal of Hematology and Oncology, 10:38 (2017)).
Кластер дифференцировки 70 (CD70, CD27LG или TNFSF7) является представителем суперсемейства фактора некроза опухолей (TNF) и лиганда для CD27, рецептора суперсемейства TNF. Временное взаимодействие между CD27 и CD70 обеспечивает костимуляцию Т-клеток, комплементарную той, которая предусмотрена CD28. CD70 экспрессируется в гематологических формах рака, таких как неходжкинская лимфома и болезнь Ходжкина, а также в солидных опухолях, таких как глиобластома и почечно-клеточная карцинома; при этом его экспрессия с помощью ccRCC является практически однородной (см., например, Grewal I., et al., Expert Opinion on Therapeutic Targets, 12(3): 341-351 (2008)).
Недавно было разработано биспецифическое антитело CD70 в форме T-клетки, взаимодействующей с биспецифическим подходом. Однако ограничение многих биспецифических форматов заключается в том, что они являются низкомолекулярными и с коротким периодом полужизни, что требует непрерывной инфузии. Соответственно, остается потребность в антителах (например, моноспецифических или биспецифических) для лечения рака, где экспрессируется CD70, и в частности mRCC с улучшенным профилем эффективности и безопасности, и подходящим для применения у пациентов-людей.
Краткое описание
Настоящее изобретение, раскрытое в данном документе, направлено на антитела (например, моноспецифические или биспецифические антитела), которые специфически связываются с кластерами дифференцировки 70 (CD70). В некоторых вариантах осуществления антитела к CD70, описанные в данном документе, в полноразмерном биспецифическом формате характеризуются более длительным периодом полужизни, минимизированным Fc-взаимодействием и минимизированным неспецифическим высвобождением цитокинов in vivo посредством взаимодействия с иммунными клетками.
Соответственно, в одном аспекте, в настоящем изобретении предусмотрено выделенное антитело, которое специфически связывается с CD70, где антитело содержит (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую (i) определяющую комплементарность область один (CDR1) VH, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 49, 50, 51, 55, 56, 57, 61, 62, 63, 67, 68, 69, 73, 74, 75, 79, 80, 81, 85, 86, 87, 91, 92, 93, 97, 98, 99, 103, 104, 105, 109, 110, 111, 115, 116, 117, 121, 122, 123, 127, 128, 129, 133, 134, 135, 139, 140, 141, 145, 146, 147, 151, 152, 153, 157, 158, 159, 163, 164, 165, 169, 170, 171, 175, 176, 177, 181, 182, 183, 187, 188, 189, 332, 333, 334, 338, 339, 340, 344, 345, 346, 350, 351, 352, 356, 357, 358, 362, 363, 364, 368, 369, 370, 374, 375, 376, 380, 381, 382, 386, 387, 388, 392, 393, 394, 398, 399, 400, 404, 405, 406, 410, 411, 412, 416, 437, 418, 422, 423, 424, 428, 429, 430, 434, 435, 436, 440, 441, 442, 446, 447, 448, 452, 453, 454, 458, 459 или 460; (ii) CDR2 VH, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 52, 53, 58, 59, 64, 65, 70, 71, 76, 77, 82, 83, 88, 89, 94, 95, 100, 101, 106, 107, 112, 113, 118, 119, 124, 125, 130, 131, 136, 137, 142, 143, 148, 149, 154, 155, 160, 161, 166, 167, 172, 173, 178, 179, 184, 185, 190, 191, 335, 336, 341, 342, 347, 348, 353, 354, 359, 360, 365, 366, 371, 372, 377, 378, 383, 384, 389, 390, 395, 396, 401, 402, 407, 408, 413, 414, 419, 420, 425, 426, 431, 432, 437, 438, 443, 444, 449, 450, 455, 456, 461 или 462; и iii) CDR3 VH, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 54, 60, 66, 72, 78, 84, 90, 96, 102, 108, 114, 120, 126, 132, 138, 144, 150, 156, 162, 168, 174, 180, 186, 192, 337, 343, 349, 355, 361, 367, 373, 379, 385, 391, 397, 403, 409, 415, 421, 427, 433, 439, 445, 451, 457 или 463; и/или вариабельную (VL) область легкой цепи, содержащую (i) CDR1 VL, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 193, 196, 199, 202, 205, 208, 211, 214, 217, 220, 223, 226, 229, 232, 235, 238, 241, 244, 247, 250, 253, 256, 259, 262, 464, 467, 470, 473, 476, 479, 482, 485, 488, 491, 494, 497, 500, 503, 506, 509, 512, 515, 518, 521, 524 или 527; (ii) CDR2 VL, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 194, 197, 200, 203, 206, 209, 212, 215, 218, 221, 224, 227, 230, 233, 236, 239, 242, 245, 248, 251, 254, 257, 260, 263, 465, 468, 471, 474, 477, 480, 483, 486, 489, 492, 495, 498, 501, 504, 507, 510, 513, 516, 519, 522, 525 или 528; и (iii) CDR3 VL, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 195, 198, 201, 204, 207, 210, 213, 216, 219, 222, 225, 228, 231, 234, 237, 240, 243, 246, 249, 252, 255, 258, 261, 264, 466, 469, 472, 475, 478, 481, 484, 487, 490, 493, 496, 499, 502, 505, 508, 511, 514, 517, 520, 523, 526 или 529.
В другом аспекте предусмотрено выделенное антитело, которое специфически связывается с CD70, где антитело содержит: область VH, содержащую CDR1 VH, CDR2 VH и CDR3 VH последовательности VH, представленной под SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 289, 291, 293, 295, 297, 299, 301, 303, 305, 307, 309, 311, 313, 315, 317, 319, 321, 323, 325, 327, 329 или 331; и/или область VL, содержащую CDR1 VL , CDR2 VL и CDR3 VL последовательности VL, представленной под SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 47, 288, 290, 292, 294, 296, 298, 300, 302, 304, 306, 308, 310, 312, 314, 316, 318, 320, 322, 324, 326, 328 или 330. В некоторых вариантах осуществления область VH, описанная в данном документе, содержит вариант с одной или более консервативными аминокислотными заменами в остатках, которые не находятся в CDR, и/или область VL, описанная в данном документе, содержит вариант с одной или более аминокислотными заменами в аминокислотах, которые не находятся в CDR. Например, в некоторых вариантах осуществления область VH или VL может содержать описанную выше аминокислотную последовательность или ее вариант с не более чем 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 консервативными заменами в остатках, которые не находятся в CDR.
В некоторых вариантах осуществления предусмотрено выделенное антитело, которое специфически связывается с CD70, где антитело содержит: область VH, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 18; и/или область VL, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 17.
В некоторых вариантах осуществления предусмотрено антитело, которое специфически связывается с CD70 и конкурирует с выделенным антителом, представленным в данном документе, которое специфически связывается с CD70.
В другом аспекте предусмотрено биспецифическое антитело, где биспецифическое антитело представляет собой полноразмерное антитело, содержащее первый вариабельный домен антитела биспецифического антитела, специфически связывающийся с антигеном-мишенью (например, CD70), и содержащее второй вариабельный домен антитела биспецифического антитела, способный к рекрутингу активности иммунной эффекторной клетки человека посредством специфического связывания с эффекторным антигеном (например, кластером дифференцировки 3 (CD3)), расположенного на иммунной эффекторной клетке человека. В некоторых вариантах осуществления первый вариабельный домен антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую CDR1 VH, CDR2 VH и CDR3 VH последовательности VH, представленной под SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 289, 291, 293, 295, 297, 299, 301, 303, 305, 307, 309, 311, 313, 315, 317, 319, 321, 323, 325, 327, 329 или 331; и/или вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую CDR1 VL, CDR2 VL и CDR3 VL последовательности VL, представленной под SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 47, 288, 290, 292, 294, 296, 298, 300, 302, 304, 306, 308, 310, 312, 314, 316, 318, 320, 322, 324, 326, 328 или 330. В некоторых вариантах осуществления первый вариабельный домен антитела содержит (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую (i) определяющую комплементарность область один (CDR1) VH, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 49, 50, 51, 55, 56, 57, 61, 62, 63, 67, 68, 69, 73, 74, 75, 79, 80, 81, 85, 86, 87, 91, 92, 93, 97, 98, 99, 103, 104, 105, 109, 110, 111, 115, 116, 117, 121, 122, 123, 127, 128, 129, 133, 134, 135, 139, 140, 141, 145, 146, 147, 151, 152, 153, 157, 158, 159, 163, 164, 165, 169, 170, 171, 175, 176, 177, 181, 182, 183, 187, 188, 189, 332, 333, 334, 338, 339, 340, 344, 345, 346, 350, 351, 352, 356, 357, 358, 362, 363, 364, 368, 369, 370, 374, 375, 376, 380, 381, 382, 386, 387, 388, 392, 393, 394, 398, 399, 400, 404, 405, 406, 410, 411, 412, 416, 437, 418, 422, 423, 424, 428, 429, 430, 434, 435, 436, 440, 441, 442, 446, 447, 448, 452, 453, 454, 458, 459 или 460; (ii) CDR2 VH, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 52, 53, 58, 59, 64, 65, 70, 71, 76, 77, 82, 83, 88, 89, 94, 95, 100, 101, 106, 107, 112, 113, 118, 119, 124, 125, 130, 131, 136, 137, 142, 143, 148, 149, 154, 155, 160, 161, 166, 167, 172, 173, 178, 179, 184, 185, 190, 191, 335, 336, 341, 342, 347, 348, 353, 354, 359, 360, 365, 366, 371, 372, 377, 378, 383, 384, 389, 390, 395, 396, 401, 402, 407, 408, 413, 414, 419, 420, 425, 426, 431, 432, 437, 438, 443, 444, 449, 450, 455, 456, 461 или 462; и iii) CDR3 VH, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 54, 60, 66, 72, 78, 84, 90, 96, 102, 108, 114, 120, 126, 132, 138, 144, 150, 156, 162, 168, 174, 180, 186, 192, 337, 343, 349, 355, 361, 367, 373, 379, 385, 391, 397, 403, 409, 415, 421, 427, 433, 439, 445, 451, 457 или 463; и/или (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую (i) CDR1 VL, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 193, 196, 199, 202, 205, 208, 211, 214, 217, 220, 223, 226, 229, 232, 235, 238, 241, 244, 247, 250, 253, 256, 259, 262, 464, 467, 470, 473, 476, 479, 482, 485, 488, 491, 494, 497, 500, 503, 506, 509, 512, 515, 518, 521, 524 или 527; (ii) CDR2 VL, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 194, 197, 200, 203, 206, 209, 212, 215, 218, 221, 224, 227, 230, 233, 236, 239, 242, 245, 248, 251, 254, 257, 260, 263, 465, 468, 471, 474, 477, 480, 483, 486, 489, 492, 495, 498, 501, 504, 507, 510, 513, 516, 519, 522, 525 или 528; и (iii) CDR3 VL, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 195, 198, 201, 204, 207, 210, 213, 216, 219, 222, 225, 228, 231, 234, 237, 240, 243, 246, 249, 252, 255, 258, 261, 264, 466, 469, 472, 475, 478, 481, 484, 487, 490, 493, 496, 499, 502, 505, 508, 511, 514, 517, 520, 523, 526 или 529.
В некоторых вариантах осуществления второй вариабельный домен антитела содержит область VH и/или VL, специфическую в отношении CD3. Например, второй вариабельный домен антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую CDR1 VH, CDR2 VH и CDR3 VH последовательности VH, представленной под SEQ ID NO: 266; и/или вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую CDR1 VL, CDR2 VL и CDR3 VL последовательности VL, представленной под SEQ ID NO: 265. В некоторых вариантах осуществления второй вариабельный домен антитела содержит (a) область VH, содержащую (i) CDR1 VH, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 267, 268 или 269; (ii) CDR2 VH, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 270 или 271; и iii) CDR3 VH, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 272; и/или область VL содержащую (i) CDR1 VL, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 273; (ii) CDR2 VL, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 274; и (iii) CDR3 VL, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 275.
В некоторых вариантах осуществления антитела, описанные в данном документе, содержат константную область. В некоторых вариантах осуществления антитела, описанные в данном документе, относятся к подклассу IgG1, IgG2 или IgG2Δa, IgG3 или IgG4 человека. В некоторых вариантах осуществления антитела, описанные в данном документе, содержат гликозилированную константную область. В некоторых вариантах осуществления антитела, описанные в данном документе, содержат константную область, характеризующуюся сниженной аффинностью связывания с одним или более Fc-гамма рецептором(-ами) человека.
В некоторых вариантах осуществления как первый, так и второй вариабельные домены антитела биспецифического антитела содержат аминокислотные модификации в положениях 223, 225 и 228 (например, (C223E или C223R), (E225R) и (P228E или P228R)) в шарнирной области и в положении 409 или 368 (например, K409R или L368E (схема нумерации согласно EU)) в области CH3 IgG2 человека (SEQ ID NO: 279).
В некоторых вариантах осуществления как первый, так и второй вариабельные домены антитела биспецифического антитела содержат аминокислотные модификации в положении 265 (например, D265A) IgG2 человека.
В некоторых вариантах осуществления как первый, так и второй вариабельные домены антитела биспецифического антитела содержат аминокислотные модификации в одном или более из положений 265 (например, D265A), 330 (например, A330S) и 331 (например, P331S) IgG2 человека. В некоторых вариантах осуществления как первый, так и второй вариабельные домены антитела биспецифического антитела содержат аминокислотные модификации в каждом из положений 265 (например, D265A), 330 (например, A330S) и 331 (например, P331S) IgG2 человека.
В других вариантах осуществления в настоящем изобретении предусмотрены фармацевтические композиции, содержащие любое из антител, описанных в данном документе.
В настоящем изобретении также предусмотрены линии клеток, которые рекомбинантно продуцируют любое из антител, описанных в данном документе.
В настоящем изобретении также предусмотрены нуклеиновые кислоты, кодирующие любое из антител, описанных в данном документе. В настоящем изобретении также предусмотрены нуклеиновые кислоты, кодирующие вариабельную область тяжелой цепи и/или вариабельную область легкой цепи любого из антител, описанных в данном документе.
В настоящем изобретении также предусмотрена клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту или вектор, предусмотренный в данном документе. Также предусмотрен способ получения антитела (например, моноспецифического или биспецифического), предусмотренного в данном документе, включающий культивирование клетки-хозяина, предусмотренной в данном документе в условиях, которые приводят к выработке антитела, и выделение антитела из клетки-хозяина или культуры.
В настоящем изобретении также предусмотрены наборы, содержащие эффективное количество любого из антител или конъюгатов антител, описанных в данном документе.
Также предусмотрено антитело или биспецифическое антитело, представленное в данном документе, для применения в качестве лекарственного препарата.
В настоящем изобретении также предусмотрены способы лечения субъектов, нуждающихся в этом, включающие обеспечение выделенных антител или биспецифических антител, описанных в данном документе, и введение указанных антител указанному субъекту.
Также предусмотрены способы лечения состояния, ассоциированного со злокачественными клетками, экспрессирующими CD70, у субъекта, включающие введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей антитела, описанные в данном документе. В некоторых вариантах осуществления состояние представляет собой рак. В некоторых вариантах осуществления рак представляет собой связанный с CD70 рак (например, любой рак с экспрессией CD70), выбранный из группы, состоящей из почечно-клеточной карциномы, глиобластомы, глиомы, такой как глиома низкой степени злокачественности, неходжкинской лимфомы (NHL), болезни Ходжкина (HD), макроглобулинемии Вальденстрема, острого миелоидного лейкоза, множественной миеломы, диффузной крупноклеточной лимфомы, фолликулярной лимфомы или немелкоклеточного рака легкого.
В другом аспекте в настоящем изобретении предусмотрен способ подавления роста или прогрессирования опухоли у субъекта, который имеет злокачественные клетки, экспрессирующие CD70, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей выделенные антитела или биспецифические антитела, описанные в данном документе.
В другом аспекте в настоящем изобретении предусмотрен способ подавления метастазирования злокачественных клеток, экспрессирующих CD70, у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей выделенные антитела или биспецифические антитела, описанные в данном документе.
В другом аспекте в настоящем изобретении предусмотрен способ индуцирования регрессии опухоли у субъекта, который имеет злокачественные клетки, экспрессирующие CD70, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей выделенные антитела или биспецифические антитела, описанные в данном документе.
Подробное описание
В настоящем изобретении, раскрытом в данном документе, предусмотрены антитела (например, моноспецифические или биспецифические), которые специфически связываются с CD70 (например, CD70 человека). В настоящем изобретении также предусмотрены полинуклеотиды, кодирующие такие антитела, композиции, содержащие такие антитела, и способы получения и применения этих антител. В настоящем изобретении также предусмотрены способы лечения состояния, ассоциированного с CD70-опосредованными патологиями у субъекта, такими как рак. В частности, авторы настоящего изобретения обнаружили, что антитела к CD70, описанные в данном документе, в полноразмерном биспецифическом формате характеризуются более длительным периодом полужизни, минимизированным Fc-взаимодействием и минимизированным неспецифическим высвобождением цитокинов in vivo посредством взаимодействия с иммунными клетками.
Общие методики
При осуществлении способов и композиций по настоящему изобретению на практике используются, если не указано иное, традиционные методики молекулярной биологии (в том числе рекомбинантные методики), микробиологии, клеточной биологии, биохимии и иммунологии, вирусологии, синтеза моноклональных антител и инженерии, которые находятся в пределах компетенции специалиста в данной области. Такие методики в полном объеме объяснены в литературе, такой как Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition (Sambrook et al., 1989) Cold Spring Harbor Press; Oligonucleotide Synthesis (M.J. Gait, ed., 1984); Methods in Molecular Biology, Humana Press; Cell Biology: A Laboratory Notebook (J.E. Cellis, ed., 1998) Academic Press; Animal Cell Culture (R.I. Freshney, ed., 1987); Introduction to Cell and Tissue Culture (J.P. Mather and P.E. Roberts, 1998) Plenum Press; Cell and Tissue Culture: Laboratory Procedures (A. Doyle, J.B. Griffiths, and D.G. Newell, eds., 1993-1998) J. Wiley and Sons; Methods in Enzymology (Academic Press, Inc.); Handbook of Experimental Immunology (D.M. Weir and C.C. Blackwell, eds.); Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells (J.M. Miller and M.P. Calos, eds., 1987); Current Protocols in Molecular Biology (F.M. Ausubel et al., eds., 1987); PCR: The Polymerase Chain Reaction, (Mullis et al., eds., 1994); Current Protocols in Immunology (J.E. Coligan et al., eds., 1991); Short Protocols in Molecular Biology (Wiley and Sons, 1999); Immunobiology (C.A. Janeway and P. Travers, 1997); Antibodies (P. Finch, 1997); Antibodies: a practical approach (D. Catty., ed., IRL Press, 1988-1989); Monoclonal antibodies: a practical approach (P. Shepherd and C. Dean, eds., Oxford University Press, 2000); Using antibodies: a laboratory manual (E. Harlow and D. Lane (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1999); The Antibodies (M. Zanetti and J.D. Capra, eds., Harwood Academic Publishers, 1995).
Определения
«Антитело» представляет собой молекулу иммуноглобулина, способную специфически связываться с мишенью, такой как углевод, полинуклеотид, липид, полипептид и т.д., посредством по меньшей мере одного антигенраспознающего участка, расположенного в вариабельной области молекулы иммуноглобулина. Используемый в данном документе термин охватывает не только интактные поликлональные или моноклональные антитела, но также их антигенсвязывающие фрагменты (такие как Fab, Fab', F(ab')2, Fv), одноцепочечные (ScFv) и доменные антитела (в том числе, например, антитела акул и верблюдовых), и слитые белки, содержащие антитело и любую другую модифицированную конфигурацию молекулы иммуноглобулина, которая содержит антигенраспознающий участок. Антитело включает антитело любого класса, например, IgG, IgA или IgM (или их подкласс), и при этом антитело не обязательно должно относиться к какому-либо конкретному классу. В зависимости от аминокислотной последовательности антитела константной области его тяжелых цепей иммуноглобулины могут относиться к разным классам. Существует пять основных классов иммуноглобулинов: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, и некоторые из них могут дополнительно подразделяться на подклассы (изотипы), например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2. Константные области тяжелой цепи, которые соответствуют различным классам иммуноглобулинов, называются соответственно альфа, дельта, эпсилон, гамма и мю. Хорошо известны структуры субъединиц и трехмерные конфигурации различных классов иммуноглобулинов.
Термины «антигенсвязывающий фрагмент» или «антигенсвязывающая часть» антитела, используемые в данном документе, относятся к одному или более фрагментам интактного антитела, которые сохраняют способность к специфическому связыванию с данным антигеном (например, CD70). Антигенсвязывающие функции антитела могут выполняться фрагментами интактного антитела. Примеры связывающих фрагментов, охваченных термином «антигенсвязывающий фрагмент антитела», включают Fab; Fab'; F(ab')2; Fd-фрагмент, состоящий из доменов VH и СН1; Fv-фрагмент, состоящий из доменов VL и VH одного плеча антитела, однодоменный (dAb) фрагмент (Ward et al., Nature 341:544-546, 1989) и выделенную определяющую комплементарность область (CDR).
Антитело или полипептид, который «предпочтительно связывается» или «специфически связывается» (используется взаимозаменяемо в данном документе) с мишенью (например, белком CD70) является термином, хорошо известным из уровня техники, и способы определения такого специфического или предпочтительного связывания также хорошо известны из уровня техники. Считается, что молекула демонстрирует «специфическое связывание» или «преимущественное связывание», если она вступает в реакцию или соединяется чаще, быстрее, с большей продолжительностью и/или с большей аффинностью с конкретной клеткой или веществом, чем с альтернативными клетками или веществами. Антитело «специфически связывается» или «преимущественно связывается» с мишенью, если оно связывается с большей аффинностью, авидностью, более легко и/или с большей продолжительностью, чем оно связывается с другими веществами. Например, антитело, которое специфически или преимущественно связывается с эпитопом CD70, представляет собой антитело, которое связывается с этим эпитопом с большей аффинностью, авидностью, более легко и/или с большей продолжительностью, чем оно связывается с другими эпитопами CD70 или эпитопами, не являющимися CD70. Также при чтении этого определения следует понимать, что, например, антитело (или частица или эпитоп), которое специфически или преимущественно связывается с первой мишенью, может либо связываться, либо не связываться специфическим или предпочтительным образом со второй мишенью. Таким образом, «специфическое связывание» или «преимущественное связывание» необязательно требует (хотя оно может включать) исключительное связывание. В целом, но не обязательно, ссылка на связывание означает преимущественное связывание.
«Вариабельная область» антитела относится к вариабельной области легкой цепи антитела или вариабельной области тяжелой цепи антитела либо отдельно, либо в комбинации. Как известно из уровня техники, каждая вариабельная область тяжелой и легкой цепей состоит из четырех каркасных областей (FR), соединенных тремя определяющими комплементарность областями (CDR), также известными как гипервариабельные области. CDR в каждой цепи удерживаются вместе в непосредственной близости с помощью FR и CDR из другой цепи, участвуя в образовании антигенсвязывающего участка антител. Существует по меньшей мере две методики для определения CDR: (1) подход на основе вариабельности межвидовых последовательностей (т.е. Kabat et al. Sequences of Proteins of Immunological Interest, (5th ed., 1991, National Institutes of Health, Bethesda MD)); и (2) подход на основе кристаллографических исследований комплексов антиген-антитело (Al-lazikani et al., 1997, J. Molec. Biol. 273:927-948). Используемая в данном документе CDR может относиться к таким CDR, которые определяются либо с помощью любого подхода, либо с помощью комбинации обоих подходов.
«CDR» вариабельного домена представляют собой аминокислотные остатки в пределах вариабельной области, которые идентифицируются в соответствии с определениями согласно Kabat, Chothia, аккумулированием согласно как Kabat, так и Chothia, AbM, контактными и/или конформационными определениями или в соответствии с любым способом определения CDR, хорошо известным из уровня техники. CDR антитела можно идентифицировать как гипервариабельные области, первоначально определенные Kabat et al. См., например, Kabat et al., 1992, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th ed., Public Health Service, NIH, Washington D.C. Положения CDR можно также идентифицировать как структурные петлевые структуры, первоначально описанные Chothia и др. См., например, Chothia et al., Nature 342:877-883, 1989. Другие подходы к идентификации CDR включают «определение AbM», которое представляет собой компромисс между Kabat и Chothia и получены с использованием программного обеспечения для моделирования антител AbM Oxford Molecular (в настоящее время Accelrys®), или «определение контакта» CDR на основе наблюдаемых контактов антигена, как изложено в MacCallum et al., J. Mol. Biol., 262:732-745, 1996. При другом подходе, называемом в данном документе «определением конформационного положения» CDR, положения CDR можно идентифицировать как остатки, которые принимают энтальпийные участия в связывании антигена. См., например, Makabe et al., Journal of Biological Chemistry, 283:1156-1166, 2008. Тем не менее, другие определения границ CDR могут не строго следовать одному из вышеприведенных подходов, однако тем не менее будут перекрываться по меньшей мере с частью CDR согласно Kabat, хотя они могут быть сокращены или удлинены в свете прогноза или экспериментальных данных о том, что конкретные остатки или группы остатков или даже целые CDR не оказывают значительного влияния на связывание антигена. Используемая в данном документе CDR может относиться к таким CDR, которые определяются любым подходом, известным из уровня техники, включая комбинации подходов. В способах, применяемых в данном документе, можно использовать CDR, определенные в соответствии с любым из этих подходов. Для любого данного варианта осуществления, предусматривающего более чем одну CDR, CDR можно определить в соответствии с любым из определений Kabat, Chothia, расширенного, AbM, контактного и/или конформационного.
Используемый в данном документе термин «моноклональное антитело» относится к антителу, полученному из популяции фактически гомогенных антител, т.е. отдельные антитела, составляющие популяцию, являются идентичными, за исключением возможных встречающихся в природе мутаций, которые могут присутствовать в незначительных количествах. Моноклональные антитела являются высокоспецифическими, направленными против одного антигенного участка. Кроме того, в отличие от препаратов на основе поликлонального антитела, которые обычно содержат разные антитела, направленные против разных детерминантов (эпитопов), каждое моноклональное антитело направлено на один детерминант на антигене. Модификатор «моноклональное» указывает на характер антитела, как полученного из фактически гомогенной популяции антител, и не должен истолковываться как требующий получения антитела любым конкретным способом. Например, моноклональные антитела, подлежащие применению в соответствии с настоящим изобретением, можно получать способом гибридомы, впервые описанным Kohler, Nature 256:495, 1975, или можно получать с помощью способов рекомбинантной ДНК, таких как описанные в патенте США №4816567. Моноклональные антитела также можно выделять из фаговых библиотек, созданных с применением методик, описанных, например, McCafferty et al., Nature 348:552-554, 1990.
Используемый в данном документе термин «гуманизированное» антитело относится к формам антител, отличных от человеческих (например, мышиным), которые представляют собой химерные иммуноглобулины, цепи иммуноглобулинов или их фрагменты (такие как Fv, Fab, Fab', F(ab')2 или другие антигенсвязывающие подпоследовательности антител), которые содержат минимальную последовательность, полученную из иммуноглобулина, отличного от человеческого. Как правило, гуманизированные антитела представляют собой человеческие иммуноглобулины (реципиентное антитело), в которых остатки из определяющей комплементарность области (CDR) реципиента заменены остатками из CDR вида, отличного от человека (донорное антитело), такого как мышь, крыса или кролик, характеризующиеся требуемой специфичностью, аффинностью и активностью. В некоторых случаях остатки каркасной области Fv (FR) человеческого иммуноглобулина замещены соответствующими остатками, отличными от человеческих. Кроме того, гуманизированное антитело может содержать остатки, которые не обнаружены ни в реципиентном антителе, ни в импортированных последовательностях CDR или каркасных областях, однако включены для дополнительного уточнения и оптимизации характеристик антител. В целом, гуманизированное антитело будет содержать фактически все из по меньшей мере одного и, как правило, двух вариабельных доменов, в которых все или фактически все области CDR соответствуют тем, которые находятся в иммуноглобулине, отличном от человеческого, и все или фактически все из областей FR являются таковыми консенсусной последовательности человеческого иммуноглобулина. Оптимально, гуманизированное антитело также будет содержать по меньшей мере часть константной области или домена иммуноглобулина (Fc), как правило, человеческого иммуноглобулина. Предпочтительными являются антитела, имеющие Fc-области, модифицированные, как описано в WO 99/58572. Другие формы гуманизированных антител содержат одну или более CDR (CDR L1, CDR L2, CDR L3, CDR H1, CDR H2 или CDR H3), которые изменены относительно исходного антитела, которые также обозначают одну или более CDR, «полученных из» одной или более CDR из исходного антитела.
Используемый в данном документе термин «человеческое антитело» означает антитело, имеющее аминокислотную последовательность, соответствующую последовательности антитела, продуцируемого человеком, и/или которое было получено с помощью любой из методик получения человеческих антител, известных специалистам в данной области техники и раскрытых в данном документе. Это определение человеческого антитела включает антитела, содержащие по меньшей мере один полипептид тяжелой цепи человека или по меньшей мере один полипептид легкой цепи человека. Одним из таких примеров является антитело, содержащее полипептиды легкой цепи мыши и тяжелой цепи человека. Человеческие антитела можно получать с помощью различных методик, известных из уровня техники. В одном варианте осуществления человеческое антитело выбрано из фаговой библиотеки, где в фаговой библиотеке экспрессируются человеческие антитела (Vaughan et al., Nature Biotechnology, 14:309-314, 1996; Sheets et al., Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 95:6157-6162, 1998; Hoogenboom and Winter, J. Mol. Biol., 227:381, 1991; Marks et al., J. Mol. Biol., 222:581, 1991). Человеческие антитела также можно получать путем иммунизации животных, которым вводили трансгенно локусы человеческого иммуноглобулина вместо эндогенных локусов, например, мышей, у которых гены эндогенного иммуноглобулина были частично или полностью инактивированы. Этот подход описан в патентах США №№5545807; 5545806; 5569825; 5625126; 5633425 и 5661016. Альтернативно, человеческое антитело можно получать путем иммортализации человеческих В-лимфоцитов, которые продуцируют антитело, направленное против целевого антигена (такие В-лимфоциты можно выделить из субъекта или можно иммунизировать in vitro). См., например, Cole et al. Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77, 1985; Boerner et al., J. Immunol., 147 (1):86-95, 1991; и патент США №5750373.
Термин «химерное антитело» предназначен для обозначения антител, в которых последовательности вариабельной области получены от одного вида, а последовательности константной области получены от других видов, таких как антитело, в котором последовательности вариабельной области получены из антитела мыши, а последовательности константной области получены из человеческого антитела.
Термины «полипептид», «олигопептид», «пептид» и «белок» используются в данном документе взаимозаменяемо для обозначения цепей аминокислот любой длины. Например, цепь может быть относительно короткой (например, 10-100 аминокислот) или длиннее. Цепь может быть линейной или разветвленной, она может содержать модифицированные аминокислоты и/или может прерываться кислотами, не принадлежащими к аминокислотам. Термины также охватывают аминокислотную цепь, которая была модифицирована естественным образом или путем вмешательства; например, путем образования дисульфидной связи, гликозилирования, липидизации, ацетилирования, фосфорилирования или любого другого манипулирования или модификации, такой как конъюгация с метящим компонентом. Также в определение включены, например, полипептиды, содержащие один или более аминокислотных аналогов (включая, например, аминокислоты не природного происхождения и т.д.), а также другие модификации, известные из уровня техники. Понятно, что полипептиды могут встречаться в виде отдельных цепей или ассоциированных цепей.
«Моновалентное антитело» содержит один антигенсвязывающий участок на молекулу (например, IgG или Fab). В некоторых случаях моновалентное антитело может содержать более чем один антигенсвязывающий участок, но участки связывания из разных антигенов.
«Моноспецифическое антитело» содержит два идентичных антигенсвязывающих участка на молекулу (например, IgG) таким образом, что два связывающих участка связывают идентичный эпитоп на антигене. Таким образом, они конкурируют друг с другом за связывание с одной молекулой антигена. Большинство антител, обнаруженных в природе, являются моноспецифическими. В некоторых случаях моноспецифическое антитело также может представлять собой моновалентное антитело (например, Fab)
«Бивалентное антитело» содержит два антигенсвязывающих участка на молекулу (например, IgG). В некоторых случаях два связывающих участка характеризуются одинаковыми специфичностями в отношении антигена. Однако бивалентные антитела могут быть биспецифическими.
«Биспецифическим» или «двухспецифическим» является гибридное антитело, имеющее два различных антигенсвязывающих участка. Два антигенсвязывающих участка биспецифического антитела связываются с двумя разными эпитопами, которые могут находиться на одной и той же или разных белковых мишенях.
«Двухфункциональным» является антитело, имеющее идентичные антигенсвязывающие участки (т.е. идентичные аминокислотные последовательности) в двух плечах, однако каждый связывающий участок может распознавать два разных антигена.
«Гетеромультимер», «гетеромультимерный комплекс» или «гетеромультимерный полипептид» представляет собой молекулу, содержащую по меньшей мере первый полипептид и второй полипептид, где второй полипептид отличается аминокислотной последовательностью от первого полипептида по меньшей мере одним аминокислотным остатком. Гетеромультимер может содержать «гетеродимер», образованный первым и вторым полипептидами, или может образовывать третичные структуры высшего порядка, где полипептиды присутствуют в дополнение к первому и второму полипептидам.
Термины «гетеродимер», «гетеродимерный белок», «гетеродимерный комплекс» или «гетеромультимерный полипептид» представляют собой молекулу, содержащую первый полипептид и второй полипептид, где второй полипептид отличается аминокислотной последовательностью от первого полипептида по меньшей мере одним аминокислотным остатком.
Термины «шарнирная область», «шарнирная последовательность» и их вариации, используемые в данном документе, включают значение, известное из уровня техники, проиллюстрированное, например, у Janeway et al., ImmunoBiology: the immune system in health and disease, (Elsevier Science Ltd., NY) (4th ed., 1999); Bloom et al., Protein Science (1997), 6:407-415; Humphreys et al., J. Immunol. Methods (1997), 209:193-202.
Термины «иммуноглобулиноподобная шарнирная область», «иммуноглобулиноподобная шарнирная последовательность» и их вариации, используемые в данном документе, относятся к шарнирной области и шарнирной последовательности иммуноглобулиноподобной или антителоподобной молекулы (например, иммуноадгезины). В некоторых вариантах осуществления иммуноглобулиноподобная шарнирная область может состоять или может быть получена из любого подтипа IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4 или из IgA, IgE, IgD или IgM, в том числе из их химерных форм, например, химерная шарнирная область IgG1/2.
Термины «иммунная эффекторная клетка» или «эффекторная клетка», используемые в данном документе, относятся к клетке в естественном иммунном репертуаре клеток иммунной системы человека, которая может быть активирована для влияния на жизнеспособность клетки-мишени. Жизнеспособность клетки-мишени может включать выживаемость клетки, пролиферацию и/или способность взаимодействовать с другими клетками.
Антитела по настоящему изобретению можно получать с применением методик, хорошо известных из уровня техники, например, рекомбинантных технологий, технологий фагового дисплея, синтетических технологий или комбинаций таких технологий или других технологий, хорошо известных из уровня техники (см., например, Jayasena, S.D., Clin. Chem., 45: 1628-50, 1999 and Fellouse, F.A., et al, J. MoI. Biol., 373(4): 924-40, 2007).
Как известно из уровня техники, термины «полинуклеотид» или «нуклеиновая кислота», используемые в данном документе взаимозаменяемо, относятся к нуклеотидным цепям любой длины и включают ДНК и РНК. Нуклеотиды могут представлять собой дезоксирибонуклеотиды, рибонуклеотиды, модифицированные нуклеотиды или основания и/или их аналоги, или любую подложку, которая может быть включена в цепь с помощью ДНК или РНК-полимеразы. Полинуклеотид может содержать модифицированные нуклеотиды, такие как метилированные нуклеотиды и их аналоги. При наличии, модификацию нуклеотидной структуре можно придать до или после сборки цепи. Последовательность нуклеотидов может быть прервана с помощью компонентов, не являющихся нуклеотидными. Полинуклеотид можно дополнительно модифицировать после полимеризации, например, путем конъюгации с метящим компонентом. Другие типы модификаций включают, например, «кэпы», замену одного или более встречающихся в природе нуклеотидов на аналог, межнуклеотидные модификации, такие как, например, модификации с незаряженными связями (например, метилфосфонаты, сложные фосфотриэфиры, фосфоамидаты, карбаматы и т.д.) и с заряженными связями (например, фосфоротиоаты, фосфородитиоаты и т.д.), содержащие боковые фрагменты, такие как, например, белки (например, нуклеазы, токсины, антитела, сигнальные пептиды, поли-L-лизин и т.д.), таковые с интеркаляторами (например, акридин, псорален и т.д.), таковые с хелаторами (например, металлы, радиоактивные металлы, бор, окислительные металлы и т.д.), таковые с алкилаторами, таковые с модифицированными связями (например, альфа-аномерные нуклеиновые кислоты и т.д.), а также немодифицированные формы полинуклеотида(-ов). Кроме того, любая из гидроксильных групп, обычно присутствующая в сахарах, может быть замещена, например, фосфонатными группами, фосфатными группами, защищена стандартными защитными группами или активирована с получением дополнительных связей с дополнительными нуклеотидами, или может быть конъюгирована с твердыми подложками. 5'- и 3'-концевой OH может быть фосфорилирован или замещен аминами или органическими фрагментами каппирующих групп с 1-20 атомами углерода. Другие гидроксилы также можно получать в стандартных защитных группах. Полинуклеотиды также могут содержать аналогичные формы рибозы или дезоксирибозы, которые в целом известны из уровня техники, в том числе, например, 2'-O-метил-, 2'-O-аллил, 2'-фтор- или 2'-азидорибоза, карбоциклические аналоги сахаров, альфа- или бета-аномерные сахара, эпимерные сахара, такие как арабиноза, ксилозы или ликсозы, пиранозные сахара, фуранозные сахара, седогептулозы, ациклические аналоги и нуклеозидные аналоги с удаленным азотистым основанием, такие как метилрибозид. Одна или более сложных фосфодиэфирных связей могут быть заменены чередующимися связывающими группами. Эти альтернативные связывающие группы включают без ограничения варианты, в которых фосфат заменен P(O)S («тиоат»), P(S)S («дитиоат»), (O)NR2 («амидат»), P(O)R, P(O)OR', CO или CH2 («формацеталь»), в которых каждый R или R' независимо представляет собой H или замещенный или незамещенный алкил (1-20 C), необязательно содержащий эфирную (-O-) связь, арил, алкенил, циклоалкил, циклоалкенил или аралдил. Не все связи в полинуклеотиде должны быть идентичными. Предыдущее описание применимо ко всем полинуклеотидам в данном документе, в том числе РНК и ДНК.
Как известно из уровня техники, «константная область» антитела относится к константной области легкой цепи антитела или константной области тяжелой цепи антитела отдельно или в комбинации.
Используемый в данном документе термин «фактически чистый» относится к материалу, который является чистым на по меньшей мере 50% (т. Е. не содержит загрязняющих веществ), более предпочтительно чистым на по меньшей мере 90%, более предпочтительно чистым на по меньшей мере 95%, еще более предпочтительно чистым на по меньшей мере 98% и наиболее предпочтительно чистым на по меньшей мере 99%.
«Клетка-хозяин» включает отдельную клетку или культуру клеток, которые могут являться или являются реципиентом вектора(-ов) для включения полинуклеотидных вставок. Клетки-хозяева включают потомство одной клетки-хозяина, и при этом потомство может необязательно являться полностью идентичным (по морфологии или по комплементу геномной ДНК) в исходной родительской клетке вследствие естественной, случайной или преднамеренной мутации. Клетка-хозяин включает клетки, трансфицированные in vivo полинуклеотидом(-ами) по настоящему изобретению.
Как известно из уровня техники, термин «Fc-область» используется для определения C-концевой области тяжелой цепи иммуноглобулина. «Fc-область» может представлять собой последовательность с нативной Fc-областью или вариант Fc-области. Хотя границы Fc-области тяжелой цепи иммуноглобулина могут варьироваться, Fc-область IgG тяжелой цепи человека обычно определяется как фрагмент аминокислотного остатка в положении Cys226 или от Pro230 к его карбоксильному концу. Нумерация остатков в Fc-области соответствует таковой согласно индексу EU, как в Kabat. Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md., 1991. Fc-область иммуноглобулина, как правило, содержит две константные области - CH2 и CH3.
Используемые в данной области техники термины «Fc-рецептор» и «FcR» описывают рецептор, который связывается с Fc-областью антитела. Предпочтительным FcR является FcR человека с нативной последовательностью. Более того, предпочтительный FcR представляет собой тот, который связывает антитело IgG (рецептор гамма) и включает-рецепторы подклассов FcγRI, FcγRII и FcγRIII, в том числе аллельных вариантов и альтернативно сплайсированных форм этих рецепторов. Рецепторы FcγRII включают FcγRIIA («активирующий рецептор») и FcγRIIB («ингибирующий рецептор»), которые имеют идентичные аминокислотные последовательности, которые отличаются главным образом их цитоплазматическими доменами. FcR рассматриваются в Ravetch and Kinet, Ann. Rev. Immunol., 9:457-92, 1991; Capel et al., Immunomethods, 4:25-34, 1994; и de Haas et al., J. Lab. Clin. Med., 126:330-41, 1995. «FcR» также включает неонатальный рецептор FcRn, который отвечает за передачу материнских иммуноглобулинов плоду (Guyer et al., J. Immunol., 117:587, 1976; и Kim et al., J. Immunol., 24:249, 1994).
Термин «конкуренция», используемый в данном документе в отношении антитела, означает, что первое антитело или его антигенсвязывающий фрагмент (или часть) связывается с эпитопом способом, в значительной степени сходным со связыванием второго антитела или его антигенсвязывающей части, так что результат связывания первого антитела с его когнатным эпитопом заметно уменьшается в присутствии второго антитела по сравнению со связыванием первого антитела в отсутствие второго антитела. Может иметь место альтернатива, где связывание второго антитела с его эпитопом также выявляемо снижается в присутствии первого антитела, но не обязательно. То есть первое антитело может ингибировать связывание второго антитела с его эпитопом без подавления этим вторым антителом связывания первого антитела с его соответствующим эпитопом. Однако в тех случаях, когда каждое антитело выявляемо подавляет связывание другого антитела с его родственным эпитопом или лигандом, либо в одинаковой, большей либо меньшей степени, антитела считаются «перекрестно конкурирующими» друг с другом для связывания их соответствующего(-их) эпитопа(-ов). Настоящее изобретение охватывает как конкурирующие, так и перекрестно конкурирующие антитела. Независимо от механизма, с помощью которого происходит такая конкуренция или перекрестная конкуренция (например, стерическое несоответствие, конформационное изменение или связывание с общим эпитопом или его частью), специалист в данной области оценил бы, основываясь на представленных в данном документе идеях, что такие конкурирующие и/или перекрестно конкурирующие антитела охватываются и могут быть применимы для способов, раскрытых в данном документе.
«Функциональная Fc-область» обладает по меньшей мере одной эффекторной функцией нативной Fc-области. Иллюстративные «эффекторные функции» включают связывание C1q; комплементзависимую цитотоксичность; связывание с Fc-рецептором; антителозависимую клеточноопосредованную цитотоксичность; фагоцитоз; понижающую регуляцию рецепторов клеточной поверхности (например, B-клеточного рецептора) и т.д. Такие эффекторные функции обычно требуют объединения Fc-области со связывающим доменом (например, вариабельного домена антитела) и могут оцениваться с помощью различных анализов, известных из уровня техники для оценки таких эффекторных функций антитела.
«Fc-область нативной последовательности» содержит аминокислотную последовательность, идентичную аминокислотной последовательности Fc-области, встречающейся в природе. «Вариант Fc-области» содержит аминокислотную последовательность, которая отличается от Fc-области нативной последовательности по меньшей мере одной модификацией аминокислоты, при этом сохраняет по меньшей мере одну эффекторную функцию Fc-области нативной последовательности. В некоторых вариантах осуществления вариант Fc-области имеет по меньшей мере одну аминокислотную замену по сравнению с Fc-областью нативной последовательности или Fc-областью исходного полипептида, например, от приблизительно одной до приблизительно десяти замен аминокислот и предпочтительно от приблизительно одной до приблизительно пяти замен аминокислот в Fc-области нативной последовательности или в Fc-области исходного полипептида. Вариант Fc-области в данном документе предпочтительно будет характеризоваться по меньшей мере приблизительно 80% идентичностью с Fc-областью нативной последовательности и/или с Fc-областью исходного полипептида, и наиболее предпочтительно по меньшей мере приблизительно 90% идентичностью последовательности с ними, более предпочтительно по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью последовательностей с ними.
Термин «эффекторная функция» относится к биологическим активностям, свойственным Fc-участку антитела. Примеры функций эффекторных антител включают без ограничения антителозависимую клеточноопосредованную цитотоксичность (ADCC), связывание с Fc-рецептором, комплементзависимую цитотоксичность (CDC), фагоцитоз, связывание C1q и понижающую регуляцию рецепторов клеточной поверхности (например, B-клеточного рецептора; BCR). См., например, патент США №6737056. Такие эффекторные функции обычно требуют объединения Fc-области со связывающим доменом (например, вариабельным доменом антитела) и могут оцениваться с помощью различных анализов, известных из уровня техники, для оценки таких эффекторных функций антитела. Иллюстративное измерение эффекторной функции осуществляется посредством связывания Fcγ3 и/или C1q.
Используемый в данном документе термин «антителозависимая клеточноопосредованная цитотоксичность» или «ADCC» относится к клеточноопосредованной реакции, в которой неспецифические цитотоксические клетки экспрессируют Fc-рецепторы (FcR)(например, естественные клетки-киллеры (NK), нейтрофилы и макрофаги) распознают связанное антитело на клетке-мишени, и следовательно приводят к лизису клетки-мишени. Активность ADCC представляющей интерес молекулы можно оценить с помощью анализа ADCC in vitro, такого как описанный в патентах США №5500362 или 5821337. Подходящие эффекторные клетки для таких анализов включают одноядерные клетки периферической крови (PBMC) и NK-клетки. В качестве альтернативы или дополнительно активность ADCC представляющей интерес молекулы можно оценить in vivo, например, на животной модели, такой как раскрытая в Clynes et al., 1998, PNAS (USA), 95:652-656.
«Комплементзависимая цитотоксичность» или «CDC» относится к лизису мишени в присутствии комплемента. Путь активации комплемента инициируется связыванием первого компонента системы комплемента (C1q) с молекулой (например, антителом), образующей комплекс с родственным антигеном. Для оценки активации комплемента можно осуществлять анализ CDC, например, как описано в Gazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods, 202: 163 (1996).
Используемый в данном документе термин «лечение» представляет собой подход для получения благоприятных или требуемых клинических результатов. Для целей настоящего изобретения благоприятные или требуемые клинические результаты включают без ограничения одно или более из следующего: уменьшение пролиферации (или уничтожение) неопластических или раковых клеток, подавление метастазирования неопластических клеток, сокращение или уменьшение размера CD70-экспрессирующей опухоли, ремиссия заболевания, связанного с CD70 (например, рака), уменьшение симптомов, возникающих в результате заболевания, связанного с CD70 (например, рака), повышение качества жизни пациентов, страдающих от заболевания, связанного с CD70 (например, рака), уменьшение дозы других средств для лечения, необходимых для лечения заболевания, связанного с CD70 (например, рака), задержка прогрессирования заболевания, связанного с CD70 (например, рака), излечение заболевания, связанного с CD70 (например, рака) и/или продление выживаемости пациентов, имеющих заболевание, связанное с CD70 (например, рак).
«Снижение выраженности» означает ослабление или улучшение одного или более симптомов по сравнению с отсутствием введения антитела к CD70 (моноспецифического или биспецифического). «Снижение выраженности» также включает сокращение или уменьшение продолжительности симптома.
Используемые в данном документе термины «эффективная доза» или «эффективное количество» лекарственного средства, соединения, или фармацевтической композиции представляет собой количество, достаточное для достижения любого из одного или более благоприятных или требуемых результатов. Для профилактического применения благоприятные или требуемые результаты включают устранение или уменьшение риска, сокращение степени тяжести или отсрочку возникновения заболевания, в том числе биохимических, гистологических и/или поведенческих симптомов заболевания, его осложнений и промежуточных патологических фенотипов, представленных в ходе развития заболевания. Для терапевтического применения благоприятные или требуемые результаты включают клинические результаты, такие как снижение частоты возникновения или уменьшение одного или более симптомов различных заболеваний или состояний, связанных с CD70 (таких как, например, множественная миелома), снижение дозы других средств для лечения, необходимых для лечения заболевания, усиления эффекта другого лекарственного препарата и/или отсрочки прогрессирования заболевания, связанного с CD70, у пациентов. Эффективную дозу можно вводить за одно или более введений. Для целей данного изобретения эффективная доза лекарственного средства, соединения или фармацевтической композиции представляет собой количество, достаточное для осуществления профилактического или терапевтического лечения непосредственно или опосредствованно. Как понятно в клиническом контексте, эффективная доза лекарственного средства, соединения или фармацевтической композиции может достигаться или может не достигаться в сочетании с другим лекарственным средством, соединением или фармацевтической композицией. Таким образом, «эффективную дозу» можно рассматривать в контексте введения одного или более терапевтических средств, и можно считать, что одно средство подлежит введению в эффективном количестве, если в сочетании с одним или более другими средствами требуемый результат может быть достигнут или достигается.
«Индивидуум» или «субъект» представляет собой млекопитающее, более предпочтительно человека. Млекопитающие также включают без ограничения приматов, лошадей, собак, кошек, мышей и крыс.
Используемый в данном документе термин «вектор» означает конструкцию, которая способна доставлять и, предпочтительно, экспрессировать одно или более из представляющих интерес гена(-ов) или последовательности(-ей) в клетке-хозяине. Примеры векторов включают без ограничения вирусные векторы, векторы экспрессии голой ДНК или РНК, плазмиды, космиды или фаговые векторы, векторы экспрессии ДНК или РНК, связанные с катионными конденсирующими средствами, инкапсулированные в липосомы векторы экспрессии ДНК или РНК и определенные эукариотические клетки, такие как клетки-продуценты.
Используемый в данном документе термин «последовательность контроля экспрессии» означает последовательность нуклеиновой кислоты, которая направляет транскрипцию нуклеиновой кислоты. Последовательность контроля экспрессии может представлять собой промотор, такой как конститутивный или индуцибельный промотор, или энхансер. Последовательность контроля экспрессии функционально связана с последовательностью нуклеиновой кислоты, подлежащей транскрипции.
Используемые в данном документе термины «фармацевтически приемлемый носитель» или «фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество» включают любой материал, который в комбинации с активным ингредиентом обеспечивает ингредиенту способность сохранять биологическую активность и не вступать в реакцию с иммунной системой субъекта. Примеры включают без ограничения любые стандартные фармацевтические носители, такие как забуференный фосфатом физиологический раствор, воду, эмульсии, такие как эмульсия масло/вода, и различные типы смачивающих средств. Предпочтительными разбавителями для аэрозольного или парентерального введения являются забуференный фосфатом физиологический раствор (PBS) или нормальный (0,9%) физиологический раствор. Композиции, содержащие такие носители, составлены с помощью хорошо известных общепринятых способов (см., например, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th edition, A. Gennaro, ed., Mack Publishing Co., Easton, PA, 1990; and Remington, The Science and Practice of Pharmacy 21st Ed. Mack Publishing, 2005).
Используемый в данном документе термин «глутаминсодержащая метка ацильного донора» или «глутаминовая метка» относится к полипептиду или белку, содержащим один или более из остатка(-ов) Gln, которые действуют в качестве акцептора амина трансглутаминазы. См., например, WO 2012059882 и WO 2015015448.
Термины «kon» или «ka», используемые в данном документе, относятся к константе скорости связывания антитела с антигеном. В частности, константы скорости (kon/ka и koff/kd) и равновесные константы диссоциации измеряют с помощью полного антитела (т.е. двухвалентного) и мономерных белков CD70 (например, меченого гистидином слитого белка CD70).
Термины «koff » или «kd», используемые в данном документе, относятся к константе скорости диссоциации антитела из комплекса антитело/антиген.
Термин «KD», используемый в данном документе, относится к равновесной константе диссоциации взаимодействия антитело-антиген.
Ссылка на «приблизительно» в отношении значения или параметра в данном документе включает (и описывает) варианты осуществления, которые направлены на данное значение или параметр per se. Например, описание, относящееся к «приблизительно X» включает описание «X». Числовые диапазоны включают числа, определяющие диапазон. Говоря в общем, термин «приблизительно» относится к указанному значению переменной и ко всем значениям переменной, которые находятся в пределах экспериментальной ошибки указанного значения (например, в пределах доверительного интервала 95% для среднего значения) или в пределах 10 процентов от указанного значения, в зависимости от того, что больше. Там, где термин «приблизительно» используется в контексте периода времени (годы, месяцы, недели, дни и т.д.), термин «приблизительно» означает период времени плюс или минус одну величину следующего субординантного периода времени (например, приблизительно 1 год означает 11-13 месяцев; приблизительно 6 месяцев означает 6 месяцев плюс или минус 1 неделя; приблизительно 1 неделя означает 6-8 дней и т.д.), или в пределах 10% от указанного значения, в зависимости от того, что больше.
Понятно, что какие бы варианты осуществления ни описывались в данном документе с формулировкой «содержащий», другие аналогичные варианты осуществления, описываемые терминами «состоящий из» и/или «состоящий фактически из», также предусмотрены.
В тех случаях, когда аспекты или варианты осуществления изобретения описаны в терминах группы Маркуша или другой группы альтернатив, настоящее изобретение охватывает не только всю группу, указанную в целом, но и каждого члена группы в отдельности и все возможные подгруппы основной группы, но также в основной группе отсутствует один или более членов группы. В настоящем изобретении также предусмотрено явное исключение любого одного или более из членов группы в заявленном изобретении.
Если не указано иное, то все технические и научные термины, используемые в данном документе, имеют то же значение, которое обычно понимается специалистами в области техники, к которой относится настоящее изобретение. В случае противоречия настоящее описание, включая определения, будет иметь преимущество. Во всем описании и формуле изобретения слово «содержать» или его варианты, такие как «содержит» или «содержащий», следует понимать как подразумевающие включение указанного целого числа или группы целых чисел, но не исключение какого-либо другого целого числа или группы целых чисел. Если согласно контексту не требуется иное, то термины в единственном числе будут охватывать формы множественного числа, и термины во множественном числе будут включать форму единственного числа.
В данном документе описаны иллюстративные способы и материалы, хотя способы и материалы, подобные или эквивалентные тем, которые описаны в данном документе, также можно применять в практическом осуществлении или тестировании по настоящему изобретению. Указанные материалы, способы и примеры являются лишь иллюстративными и не предназначены для ограничения.
Антитела к CD70 и способы их получения
В настоящем изобретении предусмотрено антитело, которое связывается с CD70 [например, CD70 человека (например, под номером доступа: NP_004110 или SEQ ID NO: 235)] и характеризуется любой одной или более из следующих характеристик: (a) лечение, предупреждение, снижение выраженности одного или более симптомов состояния, ассоциированного со злокачественными CD70-экспрессирующими клетками (например, рака, такого как AML), у субъекта; (b) подавление роста или прогрессирования опухоли у субъекта (у которого имеется злокачественная CD70-экспрессирующая опухоль); (c) подавление метастазирования CD70-экспрессирующих раковых клеток (злокачественных) у субъекта (у которого имеется одна или более злокачественных CD70-экспрессирующих клеток); (d) индуцирование регрессии (например, долговременной регрессии) CD70-экспрессирующей опухоли; (e) проявление цитотоксической активности в злокачественных CD70-экспрессирующих клетках; (f) блокирование взаимодействия CD70 с другими пока еще не идентифицированными факторами и/или (g) индуцирование эффекта «свидетеля», который уничтожает или подавляет рост злокачественных клеток, не являющихся CD70-экспрессирующими, поблизости.
В одном аспекте предусмотрено выделенное антитело, которое специфически связывается с CD70, где антитело содержит (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую (i) определяющую комплементарность область один (CDR1) VH, содержащую последовательность, представленную под 49, 50, 51, 55, 56, 57, 61, 62, 63, 67, 68, 69, 73, 74, 75, 79, 80, 81, 85, 86, 87, 91, 92, 93, 97, 98, 99, 103, 104, 105, 109, 110, 111, 115, 116, 117, 121, 122, 123, 127, 128, 129, 133, 134, 135, 139, 140, 141, 145, 146, 147, 151, 152, 153, 157, 158, 159, 163, 164, 165, 169, 170, 171, 175, 176, 177, 181, 182, 183, 187, 188, 189, 332, 333, 334, 338, 339, 340, 344, 345, 346, 350, 351, 352, 356, 357, 358, 362, 363, 364, 368, 369, 370, 374, 375, 376, 380, 381, 382, 386, 387, 388, 392, 393, 394, 398, 399, 400, 404, 405, 406, 410, 411, 412, 416, 437, 418, 422, 423, 424, 428, 429, 430, 434, 435, 436, 440, 441, 442, 446, 447, 448, 452, 453, 454, 458, 459 или 460; (ii) CDR2 VH, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 52, 53, 58, 59, 64, 65, 70, 71, 76, 77, 82, 83, 88, 89, 94, 95, 100, 101, 106, 107, 112, 113, 118, 119, 124, 125, 130, 131, 136, 137, 142, 143, 148, 149, 154, 155, 160, 161, 166, 167, 172, 173, 178, 179, 184, 185, 190, 191, 335, 336, 341, 342, 347, 348, 353, 354, 359, 360, 365, 366, 371, 372, 377, 378, 383, 384, 389, 390, 395, 396, 401, 402, 407, 408, 413, 414, 419, 420, 425, 426, 431, 432, 437, 438, 443, 444, 449, 450, 455, 456, 461 или 462; и iii) CDR3 VH, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 54, 60, 66, 72, 78, 84, 90, 96, 102, 108, 114, 120, 126, 132, 138, 144, 150, 156, 162, 168, 174, 180, 186, 192, 337, 343, 349, 355, 361, 367, 373, 379, 385, 391, 397, 403, 409, 415, 421, 427, 433, 439, 445, 451, 457 или 463; и/или вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую (i) CDR1 VL, которая содержит последовательность, представленную под SEQ ID NO: 193, 196, 199, 202, 205, 208, 211, 214, 217, 220, 223, 226, 229, 232, 235, 238, 241, 244, 247, 250, 253, 256, 259, 262, 464, 467, 470, 473, 476, 479, 482, 485, 488, 491, 494, 497, 500, 503, 506, 509, 512, 515, 518, 521, 524 или 527; (ii) CDR2 VL, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 194, 197, 200, 203, 206, 209, 212, 215, 218, 221, 224, 227, 230, 233, 236, 239, 242, 245, 248, 251, 254, 257, 260, 263, 465, 468, 471, 474, 477, 480, 483, 486, 489, 492, 495, 498, 501, 504, 507, 510, 513, 516, 519, 522, 525 или 528; и (iii) CDR3 VL, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 195, 198, 201, 204, 207, 210, 213, 216, 219, 222, 225, 228, 231, 234, 237, 240, 243, 246, 249, 252, 255, 258, 261, 264, 466, 469, 472, 475, 478, 481, 484, 487, 490, 493, 496, 499, 502, 505, 508, 511, 514, 517, 520, 523, 526 или 529.
В другом аспекте предусмотрено выделенное антитело, которое специфически связывается с CD70, где антитело содержит: область VH, содержащую CDR1 VH, CDR2 VH и CDR3 VH последовательности VH, представленной под SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 289, 291, 293, 295, 297, 299, 301, 303, 305, 307, 309, 311, 313, 315, 317, 319, 321, 323, 325, 327, 329 или 331; и/или область VL, содержащую CDR1 VL, CDR2 VL и CDR3 VL последовательности VL, представленной под SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 47, 288, 290, 292, 294, 296, 298, 300, 302, 304, 306, 308, 310, 312, 314, 316, 318, 320, 322, 324, 326, 328 или 330.
В некоторых вариантах осуществления предусмотрено антитело имеющее любую одну из частичных последовательностей легкой цепи, как указано в таблице 1, и/или любую одну из частичных последовательностей тяжелой цепи, как указано в таблице 1. В таблице 1 подчеркнутые последовательности представляют собой последовательности CDR согласно Kabat и жирным шрифтом в соответствии с Chothia.
Таблица 1
(SEQ ID NO: 312)
(SEQ ID NO: 313)
Также в данном документе предусмотрены части CDR антигенсвязывающих доменов антител к CD70 (включая CDR согласно Chothia, Kabat и контактные области CDR). Определение областей CDR хорошо известно специалистам в данной области. Следует понимать, что в некоторых вариантах осуществления CDR могут представлять собой комбинацию CDR согласно Kabat и Chothia (также называемые «комбинированные CR» или «расширенные CDR»). В некоторых вариантах осуществления CDR представляют собой CDR согласно Kabat. В других вариантах осуществления CDR представляют собой CDR согласно Chothia. Другими словами, в вариантах осуществления с более чем одной CDR CDR могут быть любыми: согласно Kabat, Chothia, комбинированными CDR или их комбинациями. В таблице 2 представлены примеры последовательностей CDR, представленных в данном документе.
Таблица 2
GGTFSSY (SEQ ID NO: 50) (Chothia);
GGTFSSYGFS (SEQ ID NO: 51) (расширенная)
IPIFGS (SEQ ID NO: 53) (Chothia)
GGTFSSY (SEQ ID NO: 56) (Chothia)
GGTFSSYGFS (расширенная) (SEQ ID NO: 57)
IPIFGT (SEQ ID NO: 59) (Chothia)
GGSISSY (SEQ ID NO: 62) (Chothia);
GGSISSYYWN (SEQ ID NO: 63) (расширенная)
YYSGS (SEQ ID NO: 65) (Chothia)
GFTFRNS (SEQ ID NO: 68) (Chothia);
GFTFRNSWMS (SEQ ID NO: 69) (расширенная)
KRDGSE (SEQ ID NO: 71) (Chothia)
DDSISVY (SEQ ID NO: 74) (Chothia);
DDSISVYYWS (SEQ ID NO: 75) (расширенная)
YSSGN (SEQ ID NO: 77) (Chothia)
GFTFTSY (SEQ ID NO: 80) (Chothia);
GFTFTSYAMS (SEQ ID NO: 81) (расширенная)
YSSGN (SEQ ID NO: 83) (Chothia)
GGTFITY (SEQ ID NO: 86) (Chothia);
GGTFITYAIS (SEQ ID NO: 87) (расширенная)
IPFFGT (SEQ ID NO: 89) (Chothia)
GFTFTYY (SEQ ID NO: 92) (Chothia);
GFTFTYYSMN (SEQ ID NO: 93) (расширенная)
SIRSST (SEQ ID NO: 95) (Chothia)
GFSLSNARM (SEQ ID NO: 98) (Chothia);
GFSLSNARMGVT (SEQ ID NO: 99) (расширенная)
FSNDE (SEQ ID NO: 101) (Chothia)
GFTFSNH (SEQ ID NO: 104) (Chothia);
GFTFSNHNIH (SEQ ID NO: 105) (расширенная)
SRSSST (SEQ ID NO: 107) (Chothia)
GFTFSSY (SEQ ID NO: 110) (Chothia);
GFTFSSYWMS (SEQ ID NO: 111) (расширенная)
KQDGSE (SEQ ID NO: 113) (Chothia)
GFTFSSY (SEQ ID NO: 116) (Chothia);
GFTFSSYSMN (SEQ ID NO: 117) (расширенная)
SISRGN (SEQ ID NO: 119) (Chothia)
GFAFSNY (SEQ ID NO: 122) (Chothia);
GFAFSNYAMS (SEQ ID NO: 123) (расширенная)
RGGGGS (SEQ ID NO: 125) (Chothia)
GYRFTSY (SEQ ID NO: 128) (Chothia);
GYRFTSYWIG (SEQ ID NO: 129) (расширенная)
YPDDSD (SEQ ID NO: 131) (Chothia)
GYTFTNY (SEQ ID NO: 134) (Chothia);
GYTFTNYWIA (SEQ ID NO: 135) (расширенная)
YPDGSD (SEQ ID NO: 137) (Chothia)
(SEQ ID NO: 138)
GYSFTSS (SEQ ID NO: 140) (Chothia);
GYSFTSSWIG (SEQ ID NO: 141) (расширенная)
YPGDSD (SEQ ID NO: 143) (Chothia)
GYGFTSY (SEQ ID NO: 146) (Chothia);
GYGFTSYWIG (SEQ ID NO: 147) (расширенная)
HPDDSD (SEQ ID NO: 149) (Chothia)
GYTFPSS (SEQ ID NO: 152) (Chothia);
GYTFPSSWIG (SEQ ID NO: 153) (расширенная)
YPDTSH (SEQ ID NO: 155) (Chothia)
GFTFSQY (SEQ ID NO: 158) (Chothia);
GFTFSQYSMS (SEQ ID NO: 159) (расширенная)
SGGGVS (SEQ ID NO: 161) (Chothia)
GFTFSSY (SEQ ID NO: 164) (Chothia);
GFTFSSYAMS (SEQ ID NO: 165) (расширенная)
SGTGGT (SEQ ID NO: 167) (Chothia)
GFTFNNF (SEQ ID NO: 170) (Chothia);
GFTFNNFAMS (SEQ ID NO: 171) (расширенная)
SGSGDN (SEQ ID NO: 173) (Chothia)
GGTFSSY (SEQ ID NO: 176) (Chothia);
GGTFSSYAIS (SEQ ID NO: 177) (расширенная)
IPIFGT (SEQ ID NO: 179) (Chothia)
GYSFASY (SEQ ID NO: 182) (Chothia);
GYSFASYWIG (SEQ ID NO: 183) (расширенная)
YPGTSE (SEQ ID NO: 185) (Chothia)
GYSFTDY (SEQ ID NO: 188) (Chothia);
GYSFTDYWIG (SEQ ID NO: 189) (расширенная)
SPGGST (SEQ ID NO: 191) (Chothia)
GGSISYY (SEQ ID NO: 333) (Chothia);
GGSISYYYWT (SEQ ID NO: 334) (расширенная)
YYSGS (SEQ ID NO: 336) (Chothia)
GFTVSSN (SEQ ID NO: 339) (Chothia);
GFTVSSNYMT (SEQ ID NO: 340) (расширенная)
YSGGS (SEQ ID NO: 342) (Chothia)
GGSIDYY (SEQ ID NO: 345) (Chothia);
GGSIDYYFWN (SEQ ID NO: 346) (расширенная)
YDIGN (SEQ ID NO: 348) (Chothia)
GGSISYY (SEQ ID NO: 351) (Chothia);
GGSISYYYWT (SEQ ID NO: 352) (расширенная)
IYSGT (SEQ ID NO: 354) (Chothia)
GFTFSDY (SEQ ID NO: 357) (Chothia);
GFTFSDYGIH (SEQ ID NO: 358) (расширенная)
WYDGSi (SEQ ID NO: 360) (Chothia)
GGSISSdgY (SEQ ID NO: 363) (Chothia);
GGSISSdgYYWS (SEQ ID NO: 364) (расширенная)
YYSGS (SEQ ID NO: 366) (Chothia)
GGSVSSdgY (SEQ ID NO: 369) (Chothia);
GGSVSSdgYYWS (SEQ ID NO: 370) (расширенная)
YYRRI (SEQ ID NO: 372) (Chothia)
GYTFTGY (SEQ ID NO: 375) (Chothia);
GYTFTGYYLH (SEQ ID NO: 376) (расширенная)
NpNSGG (SEQ ID NO: 378) (Chothia)
GFTFSDY (SEQ ID NO: 381) (Chothia);
GFTFSDYGMH (SEQ ID NO: 382) (расширенная)
WYDGSn (SEQ ID NO: 384) (Chothia)
GGSISSdgY (SEQ ID NO: 387) (Chothia);
GGSISSdgYYWS (SEQ ID NO: 388) (расширенная)
YYSGI (SEQ ID NO: 390) (Chothia)
GGSISSdaY (SEQ ID NO: 393) (Chothia);
GGSISSdaYYWS (SEQ ID NO: 394) (расширенная)
YYSGI (SEQ ID NO: 396) (Chothia)
GFTFSDY (SEQ ID NO: 399) (Chothia);
GFTFSDYGIH (SEQ ID NO: 400) (расширенная)
WYDGSi (SEQ ID NO: 402) (Chothia)
GFTFSNA (SEQ ID NO: 405) (Chothia);
GFTFSNAWMS (SEQ ID NO: 406) (расширенная)
KsktGGGT (SEQ ID NO: 408) (Chothia)
GGSISYY (SEQ ID NO: 411) (Chothia);
GGSISYYFWT (SEQ ID NO: 412) (расширенная)
YYSGN (SEQ ID NO: 414) (Chothia)
GFTFSSY (SEQ ID NO: 417) (Chothia);
GFTFSSYSMN (SEQ ID NO: 418) (расширенная)
StSSNY (SEQ ID NO: 420) (Chothia)
GFTFSSY (SEQ ID NO: 423) (Chothia);
GFTFSSYGMH (SEQ ID NO: 424) (расширенная)
WYDGSn (SEQ ID NO: 426) (Chothia)
GGSISYY (SEQ ID NO: 429) (Chothia);
GGSISYYYWS (SEQ ID NO: 430) (расширенная)
NYMGN (SEQ ID NO: 432) (Chothia)
GYIFTGY (SEQ ID NO: 435) (Chothia);
GYIFTGYYIY (SEQ ID NO: 436) (расширенная)
NpSSGG (SEQ ID NO: 438) (Chothia)
GYTFTSH (SEQ ID NO: 441) (Chothia);
GYTFTSHYIY (SEQ ID NO: 442) (расширенная)
NpNSGG (SEQ ID NO: 444) (Chothia)
GFTFTSH (SEQ ID NO: 447) (Chothia);
GFTFTSHYIY (SEQ ID NO: 448) (расширенная)
NpNSGG (SEQ ID NO: 450) (Chothia)
GFTLSIY (SEQ ID NO: 453) (Chothia);
GFTLSIYAIH (SEQ ID NO: 454) (расширенная)
GgRGSS (SEQ ID NO: 456) (Chothia)
GFTFSNY (SEQ ID NO: 459) (Chothia);
GFTFSNYSMN (SEQ ID NO: 460) (расширенная)
SsSTIY (SEQ ID NO: 462) (Chothia)
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение предусматривает антитело, которое связывается с CD70 и конкурирует с антителом, описанным в данном документе, включая 31H1, 63B2, 40E3, 42C3, 45F11, 64F9, 72C2, 2F10, 4F11, 10H10, 17G6, 65E11, P02B10, P07D03, P08A02, P08E02, P08F08, P08G02, P12B09, P12F02, P12G07, P13F04, P15D02, P16C05, 10A1, 10E2, 11A1, 11C1, 11D1, 11E1, 12A2, 12C4, 12C5, 12D3, 12D6, 12D7, 12F5, 12H4, 8C8, 8F7, 8F8, 9D8, 9E10, 9E5, 9F4 или 9F8.
В некоторых вариантах осуществления в настоящем изобретении также предусмотрены части CDR антител к CD70 на основе контактных областей CDR. Контактные области CDR являются областями антитела, которые придают специфичность антителу в отношении антигена. В целом, контактные области CDR включают положения остатков в CDR и верньерных зонах, которые ограничены для поддержания правильной структуры петли с целью обеспечения связывания антитела со специфическим антигеном. См., например, Makabe et al., J. Biol. Chem., 283:1156-1166, 2007. Определение контактных областей CDR хорошо известно специалистам в данной области.
Аффинность связывания (KD) антитела к CD70, описанного в данном документе, с CD70 (например, CD70 человека (например, (SEQ ID NO: 278)) может составлять от приблизительно 0,001 до приблизительно 5000 нМ. В некоторых вариантах осуществления аффинность связывания составляет приблизительно 5000 нМ, 4500 нМ, 4000 нМ, 3500 нМ, 3000 нМ, 2500 нМ, 2000 нМ, 1789 нМ, 1583 нМ, 1540 нМ, 1500 нМ, 1490 нМ, 1064 нМ, 1000 нМ, 933 нМ, 894 нМ, 750 нМ, 705 нМ, 678 нМ, 532 нМ, 500 нМ, 494 нМ, 400 нМ, 349 нМ, 340 нМ, 353 нМ, 300 нМ, 250 нМ, 244 нМ, 231 нМ, 225 нМ, 207 нМ, 200 нМ, 186 нМ, 172 нМ, 136 нМ, 113 нМ, 104 нМ, 101 нМ, 100 нМ, 90 нМ, 83 нМ, 79 нМ, 74 нМ, 54 нМ, 50 нМ, 45 нМ, 42 нМ, 40 нМ, 35 нМ, 32 нМ, 30 нМ, 25 нМ, 24 нМ, 22 нМ, 20 нМ, 19 нМ, 18 нМ, 17 нМ, 16 нМ, 15 нМ, 12 нМ, 10 нМ, 9 нМ, 8 нМ, 7,5 нМ, 7 нМ, 6,5 нМ, 6 нМ, 5,5 нМ, 5 нМ, 4 нМ, 3 нМ, 2 нМ, 1 нМ, 0,5 нМ, 0,3 нМ, 0,1 нМ, 0,01 нМ или 0,001 нМ. В некоторых вариантах осуществления аффинность связывания составляет менее чем приблизительно любое значение из 5000 нМ, 4000 нМ, 3000 нМ, 2000 нМ, 1000 нМ, 900 нМ, 800 нМ, 250 нМ, 200 нМ, 100 нМ, 50 нМ, 30 нМ, 20 нМ, 10 нМ, 7,5 нМ, 7 нМ, 6,5 нМ, 6 нМ, 5 нМ, 4,5 нМ, 4 нМ, 3,5 нМ, 3 нМ, 2,5 нМ, 2 нМ, 1,5 нМ, 1 нМ или 0,5 нМ.
Биспецифические антитела, моноклональные антитела, которые обладают специфичностями связывания в отношении по меньшей мере двух разных антигенов, можно получать с использованием антитела, раскрытого в данном документе. Способы получения биспецифических антител известны из уровня техники (см., например, Suresh et al., Methods in Enzymology 121:210, 1986). Обычно рекомбинантное продуцирование биспецифических антител основывалось на коэкспрессии двух пар тяжелой цепи и легкой цепи иммуноглобулина с двумя тяжелыми цепями, имеющими различные специфичности (Millstein and Cuello, Nature 305, 537-539, 1983). Соответственно, в одном аспекте предусмотрено биспецифическое антитело, где биспецифическое антитело представляет собой полноразмерное человеческое антитело, содержащее первый вариабельный домен антитела биспецифического антитела, специфически связывающийся с целевым антигеном (например, CD70), и содержащее второй вариабельный домен антитела биспецифического антитела, способный к рекрутингу активности иммунной эффекторной клетки человека путем специфического связывания с эффекторным антигеном, расположенным на иммунной эффекторной клетке человека.
Иммунная эффекторная клетка человека может представлять собой любую из множества иммунных эффекторных клеток, известных из уровня техники. Например, иммунная эффекторная клетка может являться представителем линии лимфоидных клеток человека, включая без ограничения T-клетку (например, цитотоксическую T-клетку), B-клетку и естественную клетку-киллера (NK). Иммунная эффекторная клетка также может являться, например, без ограничения представителем линии миелоидных клеток человека, включая без ограничения моноцит, нейтрофильный гранулоцит и дендритную клетку. Такие иммунные эффекторные клетки могут оказывать цитотоксический или апоптотический эффект в отношении клетки-мишени или другой требуемый эффект при активации путем связывания эффекторного антигена.
Эффекторный антиген представляет собой антиген (например, белок или полипептид), который экспрессируется на эффекторной клетке человека. Примеры эффекторных антигенов, которые могут быть связаны гетеродимерным белком (например, гетеродимерным антителом или биспецифическим антителом), включают без ограничения CD3 человека (или комплекс (кластер дифференцировки) CD3), CD16, NKG2D, NKp46, CD2, CD28, CD25, CD64 и CD89.
Клетка-мишень может представлять собой клетку, являющуюся нативной или чужеродной для людей. В нативной клетке-мишени клетка могла быть трансформирована в злокачественную клетку или патологически модифицирована (например, нативная клетка-мишень, инфицированная вирусом, плазмодием или бактерией). В чужеродной клетке-мишени клетка представляет собой инвазивный агент, такой как бактерия, плазмодий или вирус.
Целевой антиген экспрессируется на клетке-мишени в болезненном состоянии (например, воспалительном заболевании, пролиферативном заболевании (например, рак), иммунологическом расстройстве, неврологическом заболевании, нейродегенеративном заболевании, аутоиммунном заболевании, инфекционном заболевании (например, вирусная инфекции или паразитическая инфекция), аллергической реакции, заболевании «трансплантат против хозяина» или заболевании «хозяин против трансплантата»). Целевой антиген не является эффекторным антигеном. В некоторых вариантах осуществления целевой антиген представляет собой CD70.
В некоторых вариантах осуществления предусмотрено биспецифическое антитело, где биспецифическое антитело представляет собой полноразмерное антитело, содержащее первый вариабельный домен антитела биспецифического антитела, специфически связывающийся с целевым антигеном, и содержащее второй вариабельный домен антитела биспецифического антитела, способный к рекрутингу активности иммунной эффекторной клетки человека путем специфического связывания с эффекторным антигеном, расположенным на иммунной эффекторной клетке человека, где первый вариабельный домен антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую CDR1 VH, CDR2 VH и CDR3 VH последовательности VH, представленной под SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 289, 291, 293, 295, 297, 299, 301, 303, 305, 307, 309, 311, 313, 315, 317, 319, 321, 323, 325, 327, 329 или 331; и/или вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую CDR1 VL, CDR2 VL и CDR3 VL последовательности VL, представленной под SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 47, 288, 290, 292, 294, 296, 298, 300, 302, 304, 306, 308, 310, 312, 314, 316, 318, 320, 322, 324, 326, 328 или 330.
В некоторых вариантах осуществления предусмотрено биспецифическое антитело, где биспецифическое антитело представляет собой полноразмерное антитело, содержащее первый вариабельный домен антитела биспецифического антитела, специфически связывающийся с целевым антигеном, и содержащее второй вариабельный домен антитела биспецифического антитела, способный к рекрутингу активности иммунной эффекторной клетки человека путем специфического связывания с эффекторным антигеном, расположенным на иммунной эффекторной клетке человека, где первый вариабельный домен антитела содержит (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую (i) определяющую комплементарность область VH один (CDR1), которая содержит последовательность, представленную под SEQ ID NO: 49, 50, 51, 55, 56, 57, 61, 62, 63, 67, 68, 69, 73, 74, 75, 79, 80, 81, 85, 86, 87, 91, 92, 93, 97, 98, 99, 103, 104, 105, 109, 110, 111, 115, 116, 117, 121, 122, 123, 127, 128, 129, 133, 134, 135, 139, 140, 141, 145, 146, 147, 151, 152, 153, 157, 158, 159, 163, 164, 165, 169, 170, 171, 175, 176, 177, 181, 182, 183, 187, 188, 189, 332, 333, 334, 338, 339, 340, 344, 345, 346, 350, 351, 352, 356, 357, 358, 362, 363, 364, 368, 369, 370, 374, 375, 376, 380, 381, 382, 386, 387, 388, 392, 393, 394, 398, 399, 400, 404, 405, 406, 410, 411, 412, 416, 437, 418, 422, 423, 424, 428, 429, 430, 434, 435, 436, 440, 441, 442, 446, 447, 448, 452, 453, 454, 458, 459 или 460; (ii) CDR2 VH, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 52, 53, 58, 59, 64, 65, 70, 71, 76, 77, 82, 83, 88, 89, 94, 95, 100, 101, 106, 107, 112, 113, 118, 119, 124, 125, 130, 131, 136, 137, 142, 143, 148, 149, 154, 155, 160, 161, 166, 167, 172, 173, 178, 179, 184, 185, 190, 191, 335, 336, 341, 342, 347, 348, 353, 354, 359, 360, 365, 366, 371, 372, 377, 378, 383, 384, 389, 390, 395, 396, 401, 402, 407, 408, 413, 414, 419, 420, 425, 426, 431, 432, 437, 438, 443, 444, 449, 450, 455, 456, 461 или 462; и iii) CDR3 VH, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 54, 60, 66, 72, 78, 84, 90, 96, 102, 108, 114, 120, 126, 132, 138, 144, 150, 156, 162, 168, 174, 180, 186, 192, 337, 343, 349, 355, 361, 367, 373, 379, 385, 391, 397, 403, 409, 415, 421, 427, 433, 439, 445, 451, 457 или 463; и/или вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую (i) CDR1 VL, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 193, 196, 199, 202, 205, 208, 211, 214, 217, 220, 223, 226, 229, 232, 235, 238, 241, 244, 247, 250, 253, 256, 259, 262, 464, 467, 470, 473, 476, 479, 482, 485, 488, 491, 494, 497, 500, 503, 506, 509, 512, 515, 518, 521, 524 или 527; (ii) CDR2 VL, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 194, 197, 200, 203, 206, 209, 212, 215, 218, 221, 224, 227, 230, 233, 236, 239, 242, 245, 248, 251, 254, 257, 260, 263, 465, 468, 471, 474, 477, 480, 483, 486, 489, 492, 495, 498, 501, 504, 507, 510, 513, 516, 519, 522, 525 или 528; и (iii) CDR3 VL, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 195, 198, 201, 204, 207, 210, 213, 216, 219, 222, 225, 228, 231, 234, 237, 240, 243, 246, 249, 252, 255, 258, 261, 264, 466, 469, 472, 475, 478, 481, 484, 487, 490, 493, 496, 499, 502, 505, 508, 511, 514, 517, 520, 523, 526 или 529.
В некоторых вариантах осуществления второй вариабельный домен антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую CDR1 VH, CDR2 VH и CDR3 VH последовательности VH, представленной под SEQ ID NO: 266; и/или вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую CDR1 VL, CDR2 VL и CDR3 VL последовательности VL, представленной под SEQ ID NO: 265.
В некоторых вариантах осуществления второй вариабельный домен антитела содержит (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую (i) определяющую комплементарность область VH один (CDR1), которая содержит последовательность, представленную под SEQ ID NO: 267, 268 или 269; (ii) CDR2 VH, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 270 или 271; и iii) CDR3 VH, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 272; и/или (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую (i) CDR1 VL, которая содержит последовательность, представленную под SEQ ID NO: 273; (ii) CDR2 VL, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 274; и (iii) CDR3 VL, содержащую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 275.
В таблице 3 показаны специфические последовательности аминокислоты и нуклеиновой кислоты второго вариабельного домена антитела, который является специфическим в отношении CD3. В таблице 3 подчеркнутые последовательности представляют собой последовательности CDR согласно Kabat и жирным шрифтом в соответствии с Chothia.
Таблица 3
В таблице 4 показаны примеры последовательностей CDR второго вариабельного домена антитела, специфического в отношении CD3.
Таблица 4
VL_TK
gfTFSDY (SEQ ID NO: 268) (Chothia);
GFTFSDYYMT (SEQ ID NO: 269) (расширенная)
FIRNRARGYTSDHNPSVKG
(SEQ ID NO: 271) (расширенная)
VL_TK
(SEQ ID NO: 273)
(SEQ ID NO: 274)
(SEQ ID NO: 275)
В некоторых вариантах осуществления биспецифическое антитело, представленное в данном документе, которое содержит CD3-специфический вариабельный домен, имеющий последовательность антитела к CD3, представленного в публикации США №20160297885, которая включена в данный документ посредством ссылки для всех целей.
В соответствии с одним из подходов для получения биспецифических антител вариабельные домены антитела с требуемыми специфичностями связывания (участки связывания антитело-антиген) сливают с последовательностями константной области иммуноглобулина. Слияние предпочтительно происходит с константной областью тяжелой цепи иммуноглобулина, содержащей по меньшей мере часть шарнирной области и областей CH2 и CH3. Предпочтительно, чтобы первая константная область тяжелой цепи (CH1), содержащая участок, необходимый для связывания легкой цепи, присутствовала в по меньшей мере одном из слияний. ДНК, кодирующие слияния тяжелой цепи иммуноглобулина и, если требуется, легкой цепи иммуноглобулина, встроены в отдельные векторы экспрессии и котрансфицированы в подходящий организм-хозяин. Это обеспечивает большую гибкость в регулировании взаимных пропорций трех фрагментов полипептида в вариантах осуществления, когда неравные соотношения трех полипептидных цепей, используемых в конструкции, обеспечивают оптимальные выходы. Однако возможно вставить кодирующие последовательности для двух или всех трех полипептидных цепей в один вектор экспрессии, когда экспрессия по меньшей мере двух полипептидных цепей в равных соотношениях приводит к высоким выходам или когда соотношения не имеют особой значимости.
В другом подходе биспецифические антитела состоят из тяжелой цепи гибридного иммуноглобулина с первой специфичностью связывания в одном плече и пары тяжелая цепь-легкая цепь гибридного иммуноглобулина (обеспечивает вторую специфичность связывания) в другом плече. Эта асимметричная структура с легкой цепью иммуноглобулина только в одной половине биспецифической молекулы способствует отделению требуемого биспецифического соединения от нежелательной комбинации цепи иммуноглобулина. Данный подход описан в публикации согласно PCT № WO 94/04690.
В другом подходе биспецифические антитела состоят из аминокислотной модификации в первой шарнирной области в одном плече, и замещенная/замененная аминокислота в первой шарнирной области имеет заряд, противоположный соответствующей аминокислоте во второй шарнирной области в другом плече. Данный подход описан в Международной заявке на патент № PCT/US 2011/036419 (WO 2011/143545).
В другом подходе образование требуемого гетеромультимерного или гетеродимерного белка (например, биспецифического антитела) улучшают путем изменения или конструирования границы раздела между первой и второй иммуноглобулиноподобными областями Fc (например, шарнирной областью и/или областью CH3). В данном подходе биспецифические антитела могут состоять из области CH3, где область CH3 содержит первый полипептид CH3 и второй полипептид CH3, которые взаимодействуют друг с другом с образованием границы раздела CH3, где одна или более аминокислот на границе раздела CH3 дестабилизируют образование гомодимера и являются электростатически благоприятными для образования гомодимера. Данный подход описан в Международной заявке на патент № PCT/US 2011/036419 (WO 2011/143545).
В другом подходе биспецифические антитела можно получать с применением глутаминсодержащей пептидной метки, сконструированной для антитела, направленного на эпитоп (например, CD70) в одном плече, и другой пептидной метки (например, Lys-содержащей пептидной метки или реакционноспособного эндогенного Lys), сконструированной для второго антитела, направленного на второй эпитоп в другом плече, в присутствии трансглютаминазы. Данный подход описан в Международной заявке на патент № PCT/IB 2011/054899 (WO 2012/059882).
В некоторых вариантах осуществления гетеродимерный белок (например, биспецифическое антитело), описанный в данном документе, содержит полноразмерное человеческое антитело, где первый вариабельный домен антитела биспецифического антитела специфически связывается с целевым антигеном (например, CD70), и содержит второй вариабельный домен антитела биспецифического антитела, способный рекрутировать активность иммунной эффекторной клетки человека путем специфического связывания с эффекторным антигеном (например, CD3), расположенным на иммунной эффекторной клетке человека, где первый и второй вариабельные домены антитела гетеродимерного белка содержат аминокислотные модификации в положениях 223, 225 и 228 (например, (C223E или C223R), (E225E или E225R) и (P228E или P228R)) в шарнирной области и в положениях 409 или 368 (например, K409R или L368E (схема нумерации EU)) в области CH3 IgG2 человека (SEQ ID NO: 279).
В некоторых вариантах осуществления первый и второй вариабельные домены антитела гетеродимерного белка содержат аминокислотные модификации в положениях 221 и 228 (например, (D221R или D221E) и (P228R или P228E)) в шарнирной области и в положении 409 или 368 (например, K409R или L368E (схема нумерации EU)) в области CH3 IgG1 человека (SEQ ID NO: 280).
В некоторых вариантах осуществления первый и второй вариабельные домены антитела гетеродимерного белка содержат аминокислотные модификации в положении 228 (например, (P228E или P228R)) в шарнирной области и в положениях 409 или 368 (например, R409 или L368E (схема нумерации EU)) в области CH3 IgG4 человека (SEQ ID NO: 281).
Антитела, применимые в настоящем изобретении, могут охватывать моноклональные антитела, поликлональные антитела, фрагменты антител (например, Fab, Fab', F(ab')2, Fv, Fc и т.д.), химерные антитела, биспецифические антитела, гетероконъюгатные антитела, одноцепочечный (ScFv), их мутантные формы, слитые белки, содержащие часть антитела (например, домен антитела), гуманизированные антитела и любую другую модифицированную конфигурацию молекулы иммуноглобулина, которая содержит антигенраспознающий участок требуемой специфичности, включая варианты гликозилирования антител, варианты аминокислотной последовательности антител и ковалентно модифицированные антитела. Антитела могут быть мышиными, крысы, человека или любого другого происхождения (включая химерные или гуманизированные антитела).
В некоторых вариантах осуществления моноспецифическое антитело к CD70 или биспецифическое антитело к CD70 (например, CD70-CD3), описанные в данном документе, представляют собой моноклональное антитело. Например, моноспецифическое антитело к CD70 представляет собой моноклональное антитело человека. В другом примере плечо CD70 биспецифического антитела к CD70-CD3 представляет собой моноклональное антитело человека, и плечо CD3 биспецифического антитела к CD70-CD3 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело.
В некоторых вариантах осуществления антитело содержит модифицированную константную область, такую как, например, без ограничения константная область, которая характеризуется повышенным потенциалом вызова иммунного ответа. Например, константная область может быть модифицирована таким образом, чтобы иметь повышенную аффинность с Fc-гамма рецептором, таким как, например, FcγRI, FcγRIIA или FcγIII.
В некоторых вариантах осуществления антитело содержит модифицированную константную область, такую как константная область, которая является иммунологически инертной, то есть обладает пониженным потенциалом вызова иммунного ответа. В некоторых вариантах осуществления константную область модифицируют, как описано в Eur. J. Immunol., 29:2613-2624, 1999; заявке PCT № PCT/GB 99/01441 и/или заявке на патент Великобритании №98099518. Fc может представлять собой IgG1 человека, IgG2 человека, IgG3 человека или IgG4 человека. Fc может представлять собой IgG2 человека, содержащий мутацию от A330P331 до S330S331 (IgG2Δa), в котором аминокислотные остатки пронумерованы со ссылкой на последовательность IgG2 дикого типа. Eur. J. Immunol., 29:2613-2624, 1999. В некоторых вариантах осуществления антитело содержит константную область IgG4, содержащую следующие мутации (Armour et al., Molecular Immunology 40 585-593, 2003): от E233F234L235 до P233V234A235 (IgG4Δc), в которых нумерация приведена со ссылкой на IgG4 дикого типа. В еще одном варианте осуществления Fc представляет собой от E233F234L235 до P233V234A235 IgG4 человека с делецией G236 (IgG4Δb). В другом варианте осуществления Fc представляет собой любой Fc IgG4 человека (IgG4, IgG4Δb или IgG4Δc), содержащий стабилизирующую шарнирную мутацию от S228 до P228 (Aalberse et al., Immunology 105, 9-19, 2002). В другом варианте осуществления Fc может представлять собой агликозилированный Fc.
В некоторых вариантах осуществления константная область является агликозилированной посредством мутации остатка присоединения олигосахарида (такого как Asn297) и/или фланкирующих остатков, которые являются частью последовательности распознавания гликозилирования в константной области. В некоторых вариантах осуществления константная область является агликозилированной для ферментативного N-связанного гликозилирования. Константная область может быть агликозилирована для ферментативного N-связанного гликозилирования или путем экспрессии в клетке-хозяине с дефицитом гликозилирования.
В некоторых вариантах осуществления константная область имеет модифицированную константную область, которая удаляет или уменьшает связывание Fc-гамма рецептора. Например, Fc может представлять собой IgG2 человека, содержащий мутацию D265, в котором аминокислотные остатки пронумерованы со ссылкой на последовательность IgG2 дикого типа (SEQ ID NO: 279). Соответственно, в некоторых вариантах осуществления константная область имеет модифицированную константную область, имеющую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 282:
astkgpsvfplapcsrstsestaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssnfgtqtytcnvdhkpsntkvdktverkcrvrcprcpappvagpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvavshedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstfrvvsvltvvhqdwlngkeykckvsnkglpssiektisktkgqprepqvytlppsreemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppmldsdgsfflysrltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk.
И нуклеиновая кислота, кодирующая последовательность, представленная под SEQ ID NO: 282, представлена под SEQ ID NO: 283.
В некоторых вариантах осуществления константная область имеет модифицированную константную область, имеющую последовательность, представленную под SEQ ID NO: 284:
astkgpsvfplapcsrstsestaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssnfgtqtytcnvdhkpsntkvdktverkcevecpecpappvagpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvavshedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstfrvvsvltvvhqdwlngkeykckvsnkglpssiektisktkgqprepqvytlppsreemtknqvsltcevkgfypsdiavewesngqpennykttppmldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk.
И нуклеиновая кислота, кодирующая последовательность, представленная под SEQ ID NO: 284, представлена под SEQ ID NO: 285.
Аминокислота константной области каппа человека представлена под SEQ ID NO: 286:
gtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec.
И нуклеиновая кислота, кодирующая последовательность под SEQ ID NO: 286, представлена под SEQ ID NO: 287.
Один из способов определения аффинности связывания антител к CD70 заключается в измерении аффинности связывания двухвалентного антитела с мономерным белком CD70. Аффинность антитела к CD70 можно определять с помощью поверхностного плазмонного резонанса (система поверхностного плазмонного резонанса Biacore™3000™ (SPR), Biacore™, INC, Пискатауэй, Нью- Джерси, США), оснащенного предварительно иммобилизованным антителом к Fc мыши или антителом к Fc человека с использованием подвижного буфера HBS-EP (0,01 M HEPES, pH 7,4, 0,15 NaCl, 3 мМ EDTA, 0,005% об./об., поверхностно-активное вещество P20). Мономерный 8-гистидиновый меченый внеклеточный домен CD70 человека (SEQ ID NO: 530) может быть разбавлен в буфере HBS-EP до концентрации менее 0,5 мкг/мл и инъецирован в отдельные каналы чипа с использованием переменных периодов времени контакта для достижения двух диапазонов плотности антигена: либо 50-200 единиц ответа (RU) для детальных кинетических исследований, либо 800-1000 RU для скрининговых анализов. Исследования регенерации показали, что 25 мМ NaOH в 25% об./об. этаноле эффективно удаляет связанный белок CD70, сохраняя при этом активность антител к CD70 на чипе для более 200 инъекций. Как правило, серийные разбавления (охватывающие концентрации 0,1-10x оцененных KD) очищенных меченых 8-гистидином образцов CD70 (SEQ ID NO: 530) инъецируют в течение 1 мин. при 100 мкл/минута, и время диссоциации составляет не более 2 часов. Концентрации белков CD70 определяли по поглощению при 280 нм на основе специфического для последовательности коэффициента экстинкции белка CD70, меченого 8-гистидином (SEQ ID NO: 530). Кинетические скорости ассоциации (kon или ka) и скорости диссоциации (koff или kd) получали одновременно путем подгонки данных в целом к модели связывания Ленгмюра 1:1 (Karlsson, R. Roos, H. Fagerstam, L. Petersson, B. (1994). Methods Enzymology 6. 99-110) с использованием программы BIAevaluation. Значения равновесной константы диссоциации (KD) рассчитываются как koff/kon. Этот протокол является подходящим для применения при определении аффинности связывания антитела с любым мономером CD70, включая CD70 человека, CD70 другого млекопитающего (такого как CD70 мыши, CD70 крысы или CD70 примата), а также с различными формами CD70 (например, гликозилированным CD70). Аффинность связывания антитела обычно измеряют при 25°C, но также можно измерять при 37°C.
Антитела, описанные в данном документе, можно получать с помощью любого способа, известного из уровня техники. Для получения линий гибридомных клеток путь и график иммунизации животного-хозяина обычно соответствуют общепринятым и традиционным методикам стимуляции и получения антитела, как дополнительно описано в данном документе. Общие методики получения антител человека и мыши известны из уровня техники и/или описаны в данном документе.
Предполагается, что любым субъектом-млекопитающим, включая людей или клетки, продуцирующие антитела от них, можно манипулировать таким образом, чтобы это служило основой для продуцирования клеточных линий млекопитающего, включая клеточные линии человека и гибридомы. Как правило, животное-хозяин инокулируют внутрибрюшинно, внутримышечно, перорально, подкожно, внутриподошвенно и/или внутрикожно количеством иммуногена, включая описанный в данном документе.
Гибридомы можно получать из лимфоцитов и иммортализованных клеток миеломы с применением общей методики гибридизации соматических клеток, описанной у Kohler, B. and Milstein, C., Nature 256:495-497, 1975, или модифицированной, как у Buck, D. W., et al., In Vitro, 18:377-381, 1982. Для гибридизации могут использоваться доступные миеломные линии, включая без ограничения X63-Ag8.653 и линии из Института Солка, Центр распределения клеток, Сан-Диего, Калифорния, США. Как правило, методика включает слияние клеток миеломы и лимфоидных клеток с использованием вещества, способствующего слиянию клеток, такого как полиэтиленгликоль, или с помощью электрических средств, хорошо известных специалистам в данной области. После слияния клетки отделяют от среды для слияния и выращивают в среде для селективного роста, такой как среда гипоксантин-аминоптерин-тимидин (HAT), для удаления негибридизованных исходних клеток. Любая из сред, описанных в данном документе, с добавлением сыворотки крови или без нее, может использоваться для культивирования гибридом, которые секретируют моноклональные антитела. В качестве другой альтернативы методике слияния клеток, иммортализованные B-клетки EBV можно использовать для получения моноклональных антител по настоящему изобретению. Гибридомы расширяли и субклонировали, если требовалось, и супернатанты анализировали в отношении антииммуногенной активности с помощью обычных процедур иммуноанализа (например, радиоиммуноанализа, иммуноферментного анализа или флуоресцентного иммуноанализа).
Гибридомы, которые можно использовать в качестве источника антител, охватывают все производные, клетки-потомки исходних гибридом, которые продуцируют моноклональные антитела, специфические в отношении CD70, или их части.
Гибридомы, которые продуцируют такие антитела, можно выращивать in vitro или in vivo с применением известных процедур. Моноклональные антитела можно выделять из питательной среды или биологических жидкостей с помощью традиционных процедур очистки иммуноглобулина, таких как осаждение сульфатом аммония, гель-электрофорез, диализ, хроматография и ультрафильтрация, если требуется. Нежелательную активность, если она присутствует, можно удалить, например, путем прогона препарата через адсорбенты, полученные из иммуногена, присоединенного к твердой фазе, и элюирования или высвобождения требуемых антител из иммуногена. Посредством иммунизации животного-хозяина клетками, экспрессирующими CD70 человека, белок CD70 человека или фрагмент, содержащий целевую аминокислотную последовательность, конъюгированную с белком, который является иммуногенным для видов, подлежащих иммунизации, например, гемоцианином лимфы улитки, сывороточным альбумином, тироглобулином крупного рогатого скота или ингибитором трипсина сои, с использованием бифункционального или дериватизирующего средства, например, сложного эфира малеимидобензоилсульфосукцинимида (конъюгация через остатки цистеина), N-гидроксисукцинимида (через остатки лизина), глутаральдегида, янтарного ангидрида, SOCl2 или R1N=C=NR, где R и R1 являются разными алкильными группами, можно получать популяцию антител (например, моноклональных антител).
Если требуется, антитело (моноклональное или поликлональное), представляющее интерес, можно секвенировать, а затем полинуклеотидную последовательность можно клонировать в вектор для экспрессии или размножения. Последовательность, кодирующая представляющее интерес антитело, может сохраняться в векторе в клетке-хозяине, а затем клетка-хозяин может быть размножена и заморожена для будущего использования. Получение рекомбинантных моноклональных антител в культуре клеток можно осуществлять посредством клонирования генов антител из B-клеток с помощью способов, известных из уровня техники. См., например Tiller et al., J. Immunol. Methods 329, 112, 2008; патент США №7314622.
В качестве альтернативы полинуклеотидную последовательность можно использовать для генетической манипуляции с целью «гуманизации» антитела или для улучшения аффинности или других характеристик антитела. Например, константная область может быть сконструирована так, чтобы быть более похожей на человеческие константные области, чтобы избежать иммунного ответа, если антитело применяют в клинических испытаниях и способах лечения у людей. Может быть необходимо генетически манипулировать последовательностью антитела для получения большей аффинности к CD70 и большей эффективности подавления CD70.
Существует четыре общие стадии гуманизации моноклонального антитела. Таковыми являются: (1) определение нуклеотидной и предсказанной аминокислотной последовательности вариабельных доменов легкой и тяжелой цепей исходного антитела, (2) конструирование гуманизированного антитела, т.е. определение того, какую каркасную область антитела использовать в процессе гуманизации, (3) применение фактических методик/методов гуманизации и (4) трансфекция и экспрессия гуманизированного антитела. См., например, патенты США №№4816567; 5807715; 5866692; 6331415; 5530101; 5693761; 5693762; 5585089 и 6180370.
Был описан ряд молекул «гуманизированного» антитела, содержащих антигенсвязывающий участок, полученный из иммуноглобулина, отличного от человеческого, включая химерные антитела, имеющие V-области грызунов или модифицированных грызунов, и ассоциированные с ними CDR, слитые с человеческими константными областями. См., например, Winter et al. Nature 349:293-299, 1991, Lobuglio et al. Proc. Nat. Acad. Sci. USA 86:4220-4224, 1989, Shaw et al. J Immunol. 138:4534-4538, 1987 и Brown et al. Cancer Res. 47:3577-3583, 1987. В других источниках описаны CDR грызунов, привитые в человеческую опорную каркасную область (FR) перед слиянием с соответствующей константной областью человеческого антитела. См., например, Riechmann et al. Nature 332:323-327, 1988, Verhoeyen et al. Science 239:1534-1536, 1988, и Jones et al. Nature 321:522-525, 1986. В другом источнике описаны CDR грызуна, поддерживаемые рекомбинантно сконструированными каркасными областями грызунов. См., например, публикацию европейского патента №0519596. Такие «гуманизированные» молекулы предназначены для минимизации нежелательного иммунологического ответа в отношении молекул антитела грызуна к человеческому иммуноглобулину, что ограничивает продолжительность и эффективность терапевтического применения этих компонентов у реципиентов-людей. Например, константную область антитела можно сконструировать так, чтобы она была иммунологически инертной (например, не инициировала лизис комплемента). См., например публикацию PCT № PCT/GB 99/01441; заявку на патент Великобритании №9809951.8. Другие способы гуманизации антител, которые также можно применять, раскрыты у Daugherty et al., Nucl. Acids Res. 19:2471-2476, 1991, и в патентах США №№6180377; 6054297; 5997867; 5866692; 6210671 и 6350861; а также в публикации согласно PCT № WO 01/27160.
Обсуждаемые выше общие принципы, относящиеся к гуманизированным антителам, также применимы для изменения антител для применения, например, у собак, кошек, примата, лошадей и крупного рогатого скота. Кроме того, один или более из аспектов гуманизации антитела, описанного в данном документе, можно комбинировать, например, прививка CDR, мутация каркаса и мутация CDR.
В одном варианте осуществления полностью человеческие антитела можно получать с использованием коммерчески доступных мышей, которых сконструировали для экспрессии специфических белков человеческого иммуноглобулина. Трансгенные животные, которые разработаны для получения более желательного (например, полностью человеческих антител) или более сильного иммунного ответа, могут также использоваться для создания гуманизированных антител или человеческих антител. Примером такой технология является Xenomouse™ от Abgenix, Inc. (Фремонт, Калифорния, США), а также HuMAb-Mouse® и TC Mouse™ от Medarex, Inc. (Принстон, Нью-Джерси, США).
В альтернативном варианте антитела можно получать рекомбинантно и экспрессировать с применением любого способа, известного из уровня техники. В другом альтернативном варианте антитела можно получать рекомбинантно с помощью технологии фагового дисплея. См., например, патенты США №.5565332; 5580717; 5733743 и 6265150; а также Winter et al., Annu. Rev. Immunol. 12:433-455, 1994. В качестве альтернативы технология фагового дисплея (McCafferty et al., Nature 348:552-553, 1990) может использоваться для получения человеческих антител и фрагментов антител in vitro из репертуара генов вариабельного домена (V) иммуноглобулина от неиммунизированных доноров. В соответствии с данной методикой гены V-домена антитела клонировали в рамку либо основного, либо второстепенного гена белка оболочки нитевидного бактериофага, такого как M13 или fd, и представляли в качестве функциональных фрагментов антитела на поверхности фаговой частицы. Поскольку филаментная частица содержит копию однонитевой ДНК фагового генома, то отборы на основе функциональных свойств антитела также приводят к отбору гена, кодирующего антитела, проявляющие эти свойства. Таким образом, фаг имитирует некоторые свойства В-клетки. Фаговый дисплей можно осуществлять в разнообразных форматах; для обзора см., например, Johnson, Kevin S. and Chiswell, David J., Current Opinion in Structural Biology 3:564-571, 1993. Для фагового дисплея могут использоваться несколько источников сегментов V-гена. Clackson et al., Nature 352:624-628, 1991, выделяли разнотипные массивы антител к оксазолону из небольшой случайной комбинаторной библиотеки V-генов, полученной из селезенок иммунизированных мышей. Может быть сконструирован репертуар V-генов из неиммунизированных человеческих доноров, и могут быть выделены антитела к разнотипным массивам антигенов (в том числе аутоантигенам), главным образом в соответствии со способами, описанным Mark et al., J. Mol. Biol. 222:581-597, 1991, или Griffith et al., EMBO J. 12:725-734, 1993. В естественном иммунном ответе гены антитела накапливают мутации с высокой скоростью (соматическая сверхмутация). Некоторые из введенных изменений будут придавать более высокую аффинность, и B-клетки, демонстрирующие поверхностный иммуноглобулин с высокой аффинностью, преимущественно реплицируются и дифференцируются во время последующего антигенного стимула. Этот естественный процесс можно имитировать с помощью применения методики, известной как «рекомбинирование цепей.» (Marks et al., Bio/Technol. 10:779-783, 1992). В данном способе аффинность «первичных» человеческих антител, полученных с помощью фагового дисплея, может быть улучшена посредством последовательного замещения V-области тяжелой и легкой цепей генов репертуарами встречающихся в природе вариантов (репертуаров) генов V-домена, полученных от неиммунизированных доноров. Данная методика позволяет получать антитела и фрагменты антитела с аффинностью в диапазоне пМ-нМ. Стратегия изготовления очень больших репертуаров антитела к фагу (также известна как «библиотеки всех библиотек») была описана Waterhouse et al., Nucl. Acids Res. 21:2265-2266, 1993. Рекомбинирование генов может также применяться для получения человеческих антител из антител грызуна, при этом человеческое антитело имеет сходное сродство и специфичности с исходным антителом грызуна. В соответствии с данным способом который также называется «импринтингом эпитопа», тяжелую или легкую цепь гена V-домена антител грызуна, полученную с помощью методики фагового дисплея, заменяют репертуаром генов V-домена человека с образованием химер грызун-человек. Отбор по антигену приводит к выделению человеческих вариабельных областей, способных к восстановлению функционального антигенсвязывающего участка, т.е. эпитоп определяет (закрепляет) выбор партнера. Когда способ повторяют с целью замены оставшегося V-домена грызуна, то получают человеческое антитело (см. публикацию PCT № WO 93/06213). В отличие от традиционной гуманизации антител грызуна с помощью пересадки CDR, данная методика предусматривает полностью человеческие антитела, которые не имеют каркаса или остатков CDR от исходного грызуна.
Антитела можно получать рекомбинантно путем сначала выделения антител и клеток, продуцирующих антитело, из животных-хозяев с получением последовательности гена и с использованием последовательности гена для экспрессии антитела рекомбинантно в клетках-хозяевах (например, клетках CHO). Другим способом, который можно применять, является экспрессия последовательности антитела в растениях (например, табаке) или трансгенном молоке. Были раскрыты способы экспрессии антител рекомбинантно в растениях или молоке. См., например, Peeters, et al. Vaccine 19:2756, 2001; Lonberg, N. and D. Huszar Int. Rev. Immunol 13:65, 1995; и Pollock, et al., J Immunol Methods 231:147, 1999. Способы получения производных от антител, например, гуманизированных, одноцепочечных и т.д., известны из уровня техники.
Иммуноанализы и методики сортировки с помощью проточной цитометрии, такой как сортировка клеток с активированной флуоресценцией (FACS), можно также использовать для выделения антител, которые являются специфическими для CD70 или соответствующих представляющих интерес антигенов опухоли.
Антитела, описанные в данном документе, могут связываться с множеством различных носителей. Носители могут быть активными и/или инертными. Примеры хорошо известных носителей включают полипропилен, полистирол, полиэтилен, декстран, нейлон, амилазы, стекло, природные и модифицированные целлюлозы, полиакриламиды, агарозы и магнетит. Класс носителя может быть растворимым либо нерастворимым в целях настоящего изобретения. Специалистам в данной области будут известны другие подходящие носители для связывания антител, или они будет способны выяснить это с использованием стандартных экспериментов. В некоторых вариантах осуществления носитель содержит фрагмент, которые нацелен на миокард.
ДНК, кодирующее моноклональные антитела, с легкостью выделяют и секвенируют с применением традиционных процедур (например, с применением олигонуклеотидных зондов, которые способны к специфическому связыванию с генами, кодирующими тяжелую и легкую цепи моноклонального антитела). Клетки гибридомы служат в качестве предпочтительного источника такой ДНК. После выделения ДНК может быть помещена в векторы экспрессии (такие как векторы экспрессии, раскрытые в публикации согласно PCT № WO 87/04462), которые затем трансфицируют в клетку-хозяина, как например, клетки E. coli, клетки COS обезьяны, клетки яичника китайского хомячка (CHO) или миеломные клетки, которые не продуцируют белок иммуноглобулина иным образом, с обеспечением тем самым синтеза моноклональных антител в рекомбинантных клетках-хозяевах. См., например, публикацию PCT № WO 87/04462. ДНК также может быть модифицирована, например, путем замены кодирующей последовательности для человеческих константных областей тяжелой и легкой цепей вместо гомологичных мышиных последовательностей, Morrison et al., Proc. Nat. Acad. Sci. 81:6851, 1984, или путем ковалентного присоединения к последовательности, кодирующей иммуноглобулин, всей или части кодирующей последовательности для полипептида, не принадлежащего к иммуноглобулину. Таким образом получают «химерные» или «гибридные» антитела, которые характеризуются специфичностью связывания моноклонального антитела согласно данному документу.
Антитела к CD70, описанные в данном документе, можно идентифицировать или отличить с помощью способов, известных из уровня техники, посредством чего выявляют и/или измеряют снижение уровней экспрессии CD70. В некоторых вариантах осуществления антитело к CD70 идентифицируют путем инкубирования потенциального средства с CD70 и контроля связывания и/или сопутствующего снижения уровней экспрессии CD70. Анализ связывания может быть осуществлен с помощью очищенного(-ых) полипептида(-ов) CD70 или с помощью клеток, в норме экспрессирующих полипептид(-ы) CD70 или трансфицированных для их экспрессии. В одном варианте осуществления анализ связывания представляет собой конкурентный анализ связывания, где оценивают способность антитела-кандидата конкурировать с известным антителом к CD70 в отношении связывания CD70. Анализ можно проводить в различных форматах, включая формат ELISA.
После исходной идентификации активность антитела-кандидата к CD70 может быть дополнительно подтверждена и улучшена с помощью биологических анализов, известных для тестирования нацеленных биологических активностей. В качестве альтернативы биологические анализы можно использовать для непосредственного скрининга кандидатов. Некоторые из способов идентификации и определения характеристик антител подробно описаны примерах.
Антитела к CD70 могут быть описаны с применением способов, хорошо известных из уровня техники. Например, одним из способов является идентификация эпитопа, с которым он связывается, или «картирование эпитопа». Существует много способов, известных из уровня техники, для картирования и определения положения эпитопов на белках, включая растворение кристаллической структуры комплекса антитело-антиген, конкурентные анализы, анализы экспрессии фрагментов гена и анализы, основанные на синтетических пептидах, описанные, например, в Chapter 11 of Harlow and Lane, Using Antibodies, a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, 1999. В дополнительном примере картирование эпитопов может использоваться для определения последовательности, с которой связывается антитело. Картирование эпитопов коммерчески доступно из различных источников, например, Pepscan Systems (Edelhertweg 15, 8219 PH, Лелистад, Нидерланды). Эпитоп может представлять собой линейный эпитоп, т.е. содержащийся в одном отрезке аминокислот, или конформационный эпитоп, образованный путем трехмерного взаимодействия аминокислот, которые могут необязательно содержаться в одном отрезке. Пептиды различной длины (например, длиной по меньшей мере 4-6 аминокислот) можно выделять или синтезировать (например, рекомбинантно) и применять для анализов связывания с CD70 или другим антителом к антигену опухоли. В другом примере эпитоп, с которым связывается антитело к CD70, может быть определен при систематическом скрининге с использованием перекрывающихся пептидов, полученных из последовательности CD70, и определения связывания антитела к CD70. В соответствии с анализами экспрессии фрагментов гена, открытая рамка считывания, кодирующая CD70, фрагментирована либо произвольным образом, либо с помощью специфических генетических конструкций, и определена реакционная способность экспрессированных фрагментов CD70 с антителом, подлежащим тестированию. Фрагмент гена можно, например, получить с помощью ПЦР, а затем считать и транслировать в белок in vitro в присутствии радиоактивных аминокислот. Затем связывание антитела с радиоактивно меченым CD70 определяли с помощью иммунопреципитации и гель-электрофореза. Определенные эпитопы можно также идентифицировать посредством применения больших библиотек случайных последовательностей пептидов, отображенных на поверхности фаговых частиц (фаговая библиотека). В качестве альтернативы, определенная библиотека фрагментов перекрывающихся пептидов может тестироваться в отношении связывания с исследуемым антителом в анализах прямого связывания. В дополнительном примере мутагенез антигенсвязывающего домена, эксперименты перестановки домена и аланин-сканирующий мутагенез можно проводить для идентификации требуемых остатков, достаточных и/или необходимых для связывания эпитопа. Например, эксперименты перестановки домена можно проводить с использованием мутантного CD70, в котором различные фрагменты белка CD70 заменили (осуществили перестановку) последовательностями из CD70 от других видов (например, мыши), или близкого, но антигенно отличающегося белка. С помощью оценки связывания антитела с мутантным CD70 можно оценить важность конкретного фрагмента CD70 в отношении связывания с антителами. В случае антитела, специфического к CD70 (т.е. антитела, которое не связывает CD70wt (дикого типа) или любые другие белки), эпитоп может быть установлен из выравнивания последовательности CD70 с CD70wt.
Еще один способ, который может использоваться для определения характеристик антитела к CD70, является применение конкурентных анализов в отношении других антител, для которых известно, что они связываются с тем же антигеном, т.е. различными фрагментами на CD70, для определения того, связывается ли антитело к CD70 с тем же эпитопом, что и другие антитела. Конкурентные анализы хорошо известны специалистам в данной области.
Вектор экспрессии может использоваться для прямой экспрессии антитела к CD70. Специалист в данной области знаком с введением векторов экспрессии для достижения экспрессии экзогенных белков in vivo. См., например, патенты США №№6436908; 6413942 и 6376471. Введение векторов экспрессии включает локальное или системное введение, включая инъекцию, пероральное введение, генную пушку или введение с помощью катетера, а также местное введение. В другом варианте осуществления вектор экспрессии вводят непосредственно в симпатический ствол, или ганглий, или в коронарную артерию, предсердие, желудочек сердца, или перикард.
Можно также использовать направленную доставку терапевтической композиции, содержащей вектор экспрессии или субгеномные полинуклеотиды. Методики рецептор-опосредованной доставки ДНК описаны в, например, Findeis et al., Trends Biotechnol., 1993, 11:202; Chiou et al., Gene Therapeutics: Methods And Applications Of Direct Gene Transfer, J.A. Wolff, ed., 1994; Wu et al., J. Biol. Chem., 263:621, 1988; Wu et al., J. Biol. Chem., 269:542, 1994; Zenke et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87:3655, 1990; и Wu et al., J. Biol. Chem., 266:338, 1991. Терапевтические композиции, содержащие полинуклеотид, вводят в диапазоне от приблизительно 100 нг до приблизительно 200 мг ДНК для локального введения согласно протоколу генной терапии. Диапазоны концентраций от приблизительно 500 нг до приблизительно 50 мг, от приблизительно 1 мкг до приблизительно 2 мг, от приблизительно 5 мкг до приблизительно 500 мкг и от приблизительно 20 мкг до приблизительно 100 мкг ДНК можно также применять во время применения протокола генной терапии. Терапевтические полинуклеотиды и полипептиды можно доставлять с использованием средств для доставки генов. Средство для доставки генов может быть вирусного или невирусного происхождения (см. в основном Jolly, Cancer Gene Therapy,1:51, 1994; Kimura, Human Gene Therapy, 5:845, 1994; Connelly, Human Gene Therapy, 1995, 1:185; и Kaplitt, Nature Genetics, 6:148, 1994). Экспрессия таких кодирующих последовательностей может быть индуцирована с использованием эндогенных промоторов млекопитающих или гетерологичных промоторов. Экспрессия кодирующей последовательности может быть конститутивной либо контролируемой.
Векторы на основе вируса для доставки требуемого полинуклеотида и экспрессии в требуемой клетке хорошо известны из уровня техники. Иллюстративные носители на основе вируса включают без ограничения рекомбинантные ретровирусы (см., например, публикации согласно PCT №№ WO 90/07936; WO 94/03622; WO 93/25698; WO 93/25234; WO 93/11230; WO 93/10218; WO 91/02805; патенты США №№5219740 и 4777127; патент Великобритании №2200651 и европейский патент №0345242), векторы на основе альфавируса (например, векторы на основе вируса Синдбис, вируса леса Семлики (ATCC VR-67; ATCC VR-1247), вируса Росс Ривер (ATCC VR-373; ATCC VR-1246) и вируса венесуэльского энцефалита лошадей (ATCC VR-923; ATCC VR-1250; ATCC VR 1249; ATCC VR-532)) и векторов на основе аденоассоциированного вируса (AAV) (см., например, публикации согласно PCT № WO 94/12649, WO 93/03769; WO 93/19191; WO 94/28938; WO 95/11984 и WO 95/00655). Можно также использовать введение ДНК, связанное с нейтрализованным аденовирусом, как описано у Curiel, Hum. Gene Ther., 1992, 3:147.
Также можно использовать невирусные средства доставки и способы, включая без ограничения поликатионную конденсированную ДНК, связанную или несвязанную с нейтрализованным одиночным аденовирусом (см., например, Curiel, Hum. Gene Ther., 3:147, 1992); лиганд-связанную ДНК (см., например, Wu, J. Biol. Chem., 264:16985, 1989); клетки-носители для доставки в эукариотические клетки (см., например, патент США №5814482; публикации согласно PCT №№ WO 95/07994; WO 96/17072; WO 95/30763 и WO 97/42338) и нейтрализацию заряда ядра или слияние с клеточными мембранами. Можно также использовать голую ДНК. Иллюстративные способы введения голой ДНК описаны в публикации согласно PCT № WO 90/11092 и патенте США №5580859. Липосомы, которые могут служить в качестве средств для доставки гена, описаны в патенте США №5422120; публикациях согласно PCT № WO 95/13796; WO 94/23697; WO 91/14445 и EP 0524968. Дополнительные подходы описаны в Philip, Mol. Cell Biol., 14:2411, 1994, и в Woffendin, Proc. Natl. Acad. Sci., 91:1581, 1994.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение охватывает композиции, в том числе фармацевтические композиции, содержащие антитела, описанные в данном документе или полученные с помощью способов, и имеющие характеристики, описанные в данном документе. Как используется в данном документе, композиции содержат одно или более антител, которые связываются с CD70, и/или один или более полинуклеотидов, содержащих последовательности, кодирующие одно или более из этих антител. Такие композиции могут дополнительно содержать подходящие вспомогательные вещества, такие как фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, включая буферы, которые хорошо известны из уровня техники.
В настоящем изобретении также предусмотрены способы получения любых из этих антител. Антитела по настоящему изобретению можно получать с помощью процедур, известных из уровня техники. Полипептиды можно получать с помощью протеолитического или другого расщепления антител, с помощью рекомбинантных способов (т.е. одиночных или гибридных полипептидов), как описано выше, или с помощью химического синтеза. Полипептиды антител, особенно более короткие полипептиды, не более чем приблизительно 50 аминокислот, удобно получать с помощью химического синтеза. Способы химического синтеза известны из уровня техники и являются коммерчески доступными. Например, антитело можно получать с помощью автоматического устройства для синтеза полипептидов с применением твердофазного способа. См. также, патенты США №№5807715; 4816567 и 6331415.
В другом альтернативном варианте антитела можно получать рекомбинантно с применением процедур, которые хорошо известны из уровня техники. В одном варианте осуществления полинуклеотид содержит последовательность, кодирующую тяжелую цепь и/или вариабельные области легкой цепи антитела 31H1, 63B2, 40E3, 42C3, 45F11, 64F9, 72C2, 2F10, 4F11, 10H10, 17G6, 65E11, P02B10, P07D03, P08A02, P08E02, P08F08, P08G02, P12B09, P12F02, P12G07, P13F04, P15D02 или P16C05. Последовательность, кодирующую представляющее интерес антитело, можно сохранять в векторе в клетке-хозяине, а клетку-хозяина можно затем увеличить в количестве и заморозить для будущего применения. Векторы (в том числе векторы экспрессии) и клетки-хозяева дополнительно описаны в данном документе.
Гетероконъюгатные антитела, содержащие два ковалентно соединенных антитела, также находятся в пределах объема настоящего изобретения. Эти антитела были применили для выявления клетками иммунной системы нежелательных клеток (патент США №4676980) и для лечения ВИЧ-инфекции (публикация согласно PCT № WO 91/00360 и WO 92/200373; EP 03089). Гетероконъюгатные антитела можно получать с применением любых подходящих способов перекрестного сшивания. Подходящее средство для перекрестного сшивания и методики хорошо известны из уровня техники и описаны в патенте США №4676980.
Химерные или гибридные антитела также можно получать in vitro с применением известных способов химического анализа синтетического белка, в том числе с использованием средств для перекрестного сшивания. Например, иммунотоксины можно конструировать с применением реакции дисульфидного обмена или путем образования тиоэфирной связи. Примеры подходящих реагентов для данной цели включают иминотиолат и метил-4-меркаптобутиримидат.
В рекомбинантных гуманизированных антителах участок Fcγ может быть модифицирован, чтобы избежать взаимодействия с рецептором Fcγ, и комплементом, и иммунными системами. Методики для получения таких антител описаны в WO 99/58572. Например, константную область можно сконструировать для большего сходства с человеческими константными областями, чтобы избежать иммунного ответа, если антитело применяют в клинических испытаниях и лечении у людей. См., например, патенты США №№5997867 и 5866692.
Настоящее изобретение охватывает модификации антитела и полипептидов по настоящему изобретению, в том числе варианты, показанные в таблице 5, включая функционально эквивалентные антитела, которые в значительной степени не влияют на их свойства и варианты, которые имеют повышенную или пониженную активность и/или аффинность. Например, аминокислотную последовательность можно мутировать с получением антитела с требуемой аффинностью связывания с CD70. Модификация полипептидов является установившейся практикой в данной области и не нуждается в подробном описании в данном документе. Примеры модифицированных полипептидов включают полипептиды с консервативными заменами аминокислотных остатков, одну или более делеций или добавлений аминокислот, которые в значительной степени не оказывают вредного воздействия на функциональную активность, или которые развивают (усиливают) аффинность полипептида для его лиганда, или используют химические аналоги.
Вставки аминокислотной последовательности включают слияния амино- и/или карбоксил-конца, варьирующееся по длине от одного остатка до полипептидов, содержащих сто или более остатков, а также вставки внутри последовательности из одиночной или множества аминокислотных остатков. Примеры концевых вставок включают антитело с N-концевым остатком метионила или антитело, сочлененное с эпитопной меткой. Другие вставочные варианты молекулы антитела включают слияние фермента или полипептида с N- или C-концом антитела, что увеличивает время полужизни антитела в кровотоке.
Варианты замещения имеют по меньшей мере один удаленный аминокислотный остаток в молекуле антитела и другой остаток, вставленный на это место. Сайты, представляющие наибольший интерес для замещающего мутагенеза, включают гипервариабельные области, но изменения FR также предусмотрены. Консервативные замены показаны в таблице 5 под заголовком «консервативные замены». Если такие замещения приводят в результате к изменению в биологической активности, то можно ввести более значительные изменения, обозначенные в таблице 5 как «иллюстративные замены», или дополнительно описанные ниже в ссылке на аминокислотные классы, и продукты подвергнуть скринингу. В некоторых вариантах осуществления варианты замещения антител, представленные в данном документе, имеют не более 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 консервативное замещение в области VH или VL по сравнению с эталонным исходным антителом. В некоторых вариантах осуществления замещения находятся не внутри CDR области VH или VL.
Таблица 5. Аминокислотные замены
Существенные модификации биологических свойств антитела осуществляют путем отбора замен, которые отличаются в значительной степени их эффектами в отношении поддержания (a) структуры главной цепи пептида в области замены, например, листовой или спиральной конформации, (b) заряда или гидрофобности молекулы в целевом участке или (c) объема боковой цепи. Встречающиеся в природе аминокислотные остатки разделены на группы на основании общих свойств боковой цепи:
(1) Неполярные: норлейцин, Met, Ala, Val, Leu, Ile;
(2) Полярные без заряда: Cys, Ser, Thr, Asn, Gln;
(3) Кислотные (отрицательно заряженные): Asp, Glu;
(4) Основные (положительно заряженные): Lys, Arg;
(5) Остатки, которые влияют на ориентацию цепи: Gly, Pro и
(6) Ароматические: Trp, Tyr, Phe, His.
Неконсервативные замены получают путем замены члена одного из этих классов на другой класс.
Любой остаток цистеина, не участвующий в поддержании надлежащей конформации антитела, также может быть замещен обычно серином для улучшения устойчивости к окислению молекулы и предупреждению неправильного перекрестного сшивания. С другой стороны, цистеиновую(-ые) связь(-и) можно добавлять к антителу для улучшения его стабильности, в частности где антитело представляет собой фрагмент антитела, такой как Fv-фрагмент.
Аминокислотные модификации могут находиться в диапазоне от изменения или модификации одной или более аминокислот до полной перестройки области, например вариабельной области. Изменения в вариабельной области могут изменять аффинность связывания и/или специфичность. В некоторых вариантах осуществления получают не более чем от одной до пяти консервативных аминокислотных замен внутри CDR-домена. В других вариантах осуществления получают не более чем от одной до трех консервативных аминокислотных замен внутри CDR-домена. В еще других вариантах осуществления CDR-домен представляет собой H3 CDR и/или L3 CDR.
Модификации также включают гликозилированные и негликозилированные полипептиды, а также полипептиды с другими посттрансляционными модификациями, такими как, например, гликозилирование различными сахарами, ацетилирование и фосфорилирование. Антитела гликозилировали в консервативных положениях в их константных областях (Jefferis and Lund, Chem. Immunol. 65:111-128, 1997; Wright and Morrison, TibTECH 15:26-32, 1997). Боковые цепи олигосахаридов иммуноглобулинов влияют на функцию белка (Boyd et al., Mol. Immunol. 32:1311-1318, 1996; Wittwe and Howard, Biochem. 29:4175-4180, 1990) и на внутримолекулярное взаимодействие между частями гликопротеинов, что может влиять на конформацию и представленную трехмерную поверхность гликопротеина (Jefferis and Lund, supra; Wyss and Wagner, Current Opin. Biotech. 7:409-416, 1996). Олигосахариды могут также служить для нацеливания данного гликопротеина на определенные молекулы, основанного на специфических структурах распознавания. Также сообщалось, что гликозилирование антител влияет на антителозависимую клеточную цитотоксичность (ADCC). В частности, для клеток CHO с экспрессией β(1,4)-N-ацетилглюкозаминтрансферазы III (GnTIII), контролируемой тетрациклином, с гликозилтрансферазной катализирующей активностью GlcNAc в точках ветвления, сообщали о наличии улучшенной активности ADCC (Umana et al., Mature Biotech. 17:176-180, 1999).
Гликозилирование антител представляет собой, как правило, либо N-связанное, либо O-связанное. N-связанное относится к присоединению фрагмента углевода к боковой цепи остатка аспарагина. Трипептидные последовательности аспарагин-X-серин, аспарагин-X-треонин и аспарагин-X-цистеин, где X представляет собой любую аминокислоту за исключением пролина, являются последовательностями распознавания для ферментативного присоединения фрагментов углевода к боковой цепи аспарагина. Таким образом, наличие любой из этих последовательностей трипептидов в полипептиде создает потенциальный участок гликозилирования. Термин «O-связанное гликозилирование» относится к присоединению одного из сахаров N-ацетилгалактозамина, галактозы или ксилозы к гидроксиаминокислоте, наиболее распространены серин или треонин, хотя также можно использовать 5-гидроксипролин или 5-гидроксилизин.
Добавление участков гликозилирования к антителу удобно осуществлять путем изменения аминокислотной последовательности так, чтобы она содержала одну или более из вышеописанных трипептидных последовательностей (для N-связанных сайтов гликозилирования). Изменение также можно осуществлять путем добавления или замены одного или более из остатков серина или треонина последовательности исходного антитела (для O-связанных сайтов гликозилирования).
Профиль гликозилирования антител также можно изменить без изменения основной нуклеотидной последовательности. Гликозилирование во многом зависит от клетки-хозяина, используемой для экспрессии антитела. Поскольку тип клеток, используемый для экспрессии рекомбинантных гликопротеинов, например антител, в качестве потенциальных терапевтических средств редко представляет собой нативную клетку, можно ожидать вариации в профиле гликозилирования антител (см., например Hse et al., J. Biol. Chem. 272:9062-9070, 1997).
В дополнение к выбору клеток-хозяев, факторы, которые влияют на гликозилирование во время рекомбинантного продуцирования антител, включают режим роста, состав среды, плотность культуры, насыщение кислородом, pH, схемы очистки и т.п. Были предложены различные способы для изменения профиля гликозилирования, достигнутого в конкретном организме-хозяине, включая введение или сверхэкспрессию некоторых ферментов, вовлеченных в получение олигосахаридов (патенты США №№5047335; 5510261 и 5278299). Гликозилирование или некоторые типы гликозилирования можно ферментативно удалить из гликопротеина, например, с использованием эндогликозидазы H (эндо-H), N-гликозидазы F, эндогликозидазы F1, эндогликозидазы F2, эндогликозидазы F3. Кроме того, рекомбинантная клетка-хозяин может быть генетически сконструирована, чтобы быть дефектной в отношении обработки некоторыми типами полисахаридов. Эти и подобные методики хорошо известны из уровня техники.
Другие способы модификации включают применение метода связывания, известного из уровня техники, включающего без ограничения ферментативные способы, окислительное замещение и хелатирование. Модификации можно использовать, например, для прикрепления меток для иммуноанализа. Модифицированные полипептиды получают с применением установленных в уровне техники процедур и могут быть подвергнуты скринингу с использованием стандартных анализов, известных из уровня техники, некоторые из которых описаны ниже и в примерах.
Другие модификации антител включают антитела, которые были модифицированы, как описано в публикации согласно PCT № WO 99/58572. Такие антитела содержат, в дополнение к связывающему домену, направленному на целевую молекулу, эффекторный домен, имеющий аминокислотную последовательность, фактически гомологичную всей или части константной области тяжелой цепи человеческого иммуноглобулина. Такие антитела способны к связыванию с молекулой-мишенью без запуска выраженного комплементзависимого лизиса или клеточноопосредованного разрушения мишени. В некоторых вариантах осуществления эффекторный домен способен к специфическому связыванию FcRn и/или FcγRIIb. Как правило, они основаны на химерном домене, полученном из двух или более тяжелых цепей человеческого иммуноглобулина доменов CH2. Антитела, модифицированные данным способом, являются особенно подходящими для применения в терапии хронических заболеваний с использованием антител во избежание воспалительных и других нежелательных реакций на традиционную терапию антителами.
Настоящее изобретение включает варианты осуществления с созревшей аффинностью. Например, антитела с созревшей аффинностью можно получать с помощью процедур, известных из уровня техники (Marks et al., Bio/Technology, 10:779-783, 1992; Barbas et al., Proc Nat. Acad. Sci, USA 91:3809-3813, 1994; Schier et al., Gene, 169:147-155, 1995; Yelton et al., J. Immunol., 155:1994-2004, 1995; Jackson et al., J. Immunol., 154(7):3310-9, 1995, Hawkins et al., J. Mol. Biol., 226:889-896, 1992; and PCT Publication No. WO 2004/058184).
Следующие способы можно применять для регулирования аффинности антитела и для определения характеристик CDR. Один способ определения характеристик CDR антитела и/или изменения (как например, улучшения) аффинности связывания полипептида, такого как антитело, называется «сканирующим мутагенезом с использованием библиотеки». В общем, сканирующий мутагенез с использованием библиотек работает следующим образом. Одно или более аминокислотных положений в CDR заменяют двумя или более (например, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20) аминокислотами с применением общепризнанных способов из уровня техники. В результате получают небольшие библиотеки клонов (в некоторых вариантах осуществления одну для каждого аминокислотного положения, которое анализируют), каждая с множеством от двух или более членов (если две или более аминокислоты замещены в каждом положении). В общем, библиотека также включает клон, содержащий нативную (незамещенную) аминокислоту. Небольшое количество клонов, например, приблизительно 20-80 клонов (в зависимости от сложности библиотеки) из каждой библиотеки подвергают скринингу в отношении аффинности связывания с целевым полипептидом (или другой целью связывания) и идентифицируют кандидатов с повышенным, идентичным, пониженным связыванием или без связывания. Способы определения аффинности связывания хорошо известны из уровня техники. Аффинность связывания можно определять с помощью анализа с использованием поверхностного плазмонного резонанса Biacore™, который выявляет отличия в аффинности связывания, составляющие приблизительно 2 раза или больше. Biacore™ особенно применим, когда исходное антитело уже связывается с относительно высокой аффинностью, например, KD составляет приблизительно 10 нМ или ниже. Скрининг с использованием поверхностного плазмонного резонанса Biacore™ описан в примерах данного документа.
Аффинность связывания можно определить с использованием биосенсора Kinexa Biocensor, сцинтилляционных анализов сближения, ELISA, иммуноанализа ORIGEN (IGEN), гашения флуоресценции, переноса флуоресценции и/или дрожжевого дисплея. Аффинность связывания также можно подвергнуть скринингу с использованием подходящего биологического анализа.
В некоторых вариантах осуществления каждое положение аминокислот в CDR заменяют (в некоторых вариантах осуществления по одному) всеми 20 аминокислотами природного происхождения с применением общепризнанных в уровне техники способов мутагенеза (некоторые из которых описаны в данном документе). В результате получают небольшие библиотеки клонов (в некоторых вариантах осуществления одну для каждого аминокислотного положения, которое анализируют), каждая с множеством из 20 членов (если все 20 аминокислот замещены в каждом положении).
В некоторых вариантах осуществления библиотека, подлежащая скринингу, содержит замены в двух или более положениях, которые могут быть в той же CDR или в двух или более CDR. Таким образом, библиотека может содержать замены в двух или более положениях в одном CDR. Библиотека может содержать замену в двух или более положениях в двух или более CDR. Библиотека может содержать замены в 3, 4, 5 или более положениях, при этом указанные положения находятся в двух, трех, четырех, пяти или шести CDR. Замену можно получать с использованием кодонов с низкой избыточностью. См., например, таблицу 2 из Balint et al., Gene 137(1):109-18, 1993.
CDR может представлять собой CDRH3 и/или CDRL3. CDR может представлять собой одну или более из CDRL1, CDRL2, CDRL3, CDRH1, CDRH2 и/или CDRH3. CDR может представлять собой CDR согласно Kabat, CDR согласно Chothia или расширенную CDR.
Кандидаты с улучшенным связыванием могут быть секвенированы, идентифицируя тем самым мутантную замену CDR, которая приводит к улучшенной аффинности (также называемую «улучшенной» заменой). Кандидатов, которые связываются, также можно секвенировать, идентифицируя тем самым замену CDR, которая сохраняет способность к связыванию.
Могут проводить множество циклов скрининга. Например, кандидаты (каждый содержит аминокислотную замену в одном или более из положений одной или более CDR) с улучшенным связыванием также применимы для разработки второй библиотеки, содержащей по меньшей мере исходную и замещенную аминокислоту в каждом улучшенном положении CDR (т.е. положении аминокислот в CDR, в котором мутантная замена демонстрирует улучшенное связывание). Получение и скрининг или отбор данной библиотеки дополнительно рассматривается ниже.
Сканирующий мутагенез с использованием библиотек также предусматривает средство для определения характеристик CDR, поскольку частота клонов с улучшенным связыванием, идентичным связыванием, пониженным связыванием или с отсутствием связывания также предоставляет информацию, относящуюся к важности каждого положения аминокислот для стабильности комплекса антитело-антиген. Например, если положение CDR сохраняет способность к связыванию, то при изменении всех 20 аминокислот это положение идентифицируют как положение, которое с малой вероятностью необходимо для связывания антигена. С другой стороны, если положение CDR сохраняет способность к связыванию лишь в небольшой процентной доле замен, то такое положение идентифицируют как положение, которое является важным для функции CDR. Таким образом, способы сканирующего мутагенеза с использованием библиотек генерируют информацию относительно положений в CDR, которые можно заменить на множество разных аминокислот (включая все 20 аминокислот) и относительно положений CDR, которые не могут быть изменены, или которые можно заменить лишь несколькими аминокислотами.
Кандидатов с улучшенной аффинностью можно объединять во вторую библиотеку, которая включает улучшенную аминокислоту, исходную аминокислоту в данном положении, и может дополнительно включать дополнительные замены в данном положении, в зависимости от сложности библиотеки, которая требуется или разрешена с применением требуемого способа скрининга или отбора. Кроме того, если требуется, смежное положение аминокислот может быть рандомизировано по меньшей мере двумя или более аминокислотами. Рандомизация смежных аминокислот может обеспечить дополнительную конформационную гибкость в мутантной CDR, которая может, в свою очередь, обеспечить или способствовать введению большего количества улучшающих мутаций. Библиотека также может содержать замены в положениях, которые не демонстрировали улучшенную аффинность в первом цикле скрининга.
Вторую библиотеку подвергают скринингу или отбору членов библиотеки с улучшенной и/или измененной аффинностью связывания с применением любого способа, известного из уровня техники, включая скрининг с помощью анализа с использованием поверхностного плазмонного резонанса Biacore™, и отбору с применением любого способа, известного из уровня техники для отбора, включая фаговый дисплей, дрожжевой дисплей и рибосомный дисплей.
Настоящее изобретение также охватывает слитые белки, содержащие один или более фрагментов или областей из антител по настоящему изобретению. В одном варианте осуществления предусмотрен гибридный полипептид, который содержит по меньшей мере 10 смежных аминокислот вариабельной области легкой цепи, представленной под SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45 или 47, и/или по меньшей мере 10 аминокислот вариабельной области тяжелой цепи, представленной под SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46 или 48. В других вариантах осуществления предусмотрен гибридный полипептид, который содержит по меньшей мере приблизительно 10, по меньшей мере приблизительно 15, по меньшей мере приблизительно 20, по меньшей мере приблизительно 25 или по меньшей мере приблизительно 30 смежных аминокислот вариабельной области легкой цепи, и/или по меньшей мере приблизительно 10, по меньшей мере приблизительно 15, по меньшей мере приблизительно 20, по меньшей мере приблизительно 25 или по меньшей мере приблизительно 30 смежных аминокислот вариабельной области тяжелой цепи. В другом варианте осуществления гибридный полипептид содержит одну или более CDR. В еще других вариантах осуществления гибридный полипептид содержит CDR H3 (CDR3 VH) и/или CDR L3 (CDR3 VL). Для целей данного изобретения слитый белок содержит одно или более антител и другую аминокислотную последовательность, к которой он не присоединен в нативной молекуле, например, гетерологичной последовательности или гомологичной последовательности из другой области. Иллюстративные гетерологичные последовательности включают без ограничения «метку», такую как метка FLAG или метка 6His (SEQ ID NO: 531). Метки хорошо известны из уровня техники.
Гибридный полипептид можно получать с помощью способов, известных из уровня техники, например, синтетически или рекомбинантно. Как правило, слитые белки по настоящему изобретению создают путем получения экспрессирующего полинуклеотида, кодирующего их, с применением рекомбинантных способов, описанных в данном документе, хотя они также могут быть получены с помощью других способов, известных из уровня техники, включая например химический синтез.
Настоящее изобретение также предусматривает композиции, содержащие антитела, сопряженные (например, связанные) со средством, которое облегчает связывание с твердой подложкой (такой как биотин или авидин). Для простоты, ссылка обычно будет даваться на антитела с пониманием того, что такие способы применимы к любым вариантам осуществления антитела к CD70, описанным в данном документе. В целом, термин «конъюгация» относится к связыванию этих компонентов, как описано в данном документе. Связывание (которое, как правило, фиксирует такие компоненты в непосредственной ассоциации для по меньшей мере введения) может быть достигнуто любым количеством способов. Например, прямая реакция между средством и антителом возможна, когда каждый обладает заместителем, способным вступать в реакцию с другим. Например, нуклеофильное группа, такая как амино или сульфгидрильная группа, с одной стороны может быть способной к осуществлению реакции с карбонилсодержащей группой, такой как ангидрид или галоидангидрид, или с алкильной группой, содержащей хорошую замещаемую группу (например, галогенид) с другой стороны.
В настоящем изобретении также предусмотрены выделенные полинуклеотиды, кодирующие антитела по настоящему изобретению, и векторы и клетки-хозяева, содержащие полинуклеотид.
Соответственно, настоящее изобретение предусматривает полинуклеотиды (или композиции, включая фармацевтические композиции), включающие полинуклеотиды, кодирующие любое из следующих: 31H1, 63B2, 40E3, 42C3, 45F11, 64F9, 72C2, 2F10, 4F11, 10H10, 17G6, 65E11, P02B10, P07D03, P08A02, P08E02, P08F08, P08G02, P12B09, P12F02, P12G07, P13F04, P15D02 или P16C05, или любой фрагмент или его часть, обладающие способностью связывать CD70.
В другом аспекте настоящее изобретение предусматривает полинуклеотиды, кодирующие любое из антител (включая фрагменты антител) и полипептиды, описанные в данном документе, например, антитела и полипептиды, имеющие нарушенную эффекторную функцию. Полинуклеотиды можно получать и экспрессировать с помощью процедур, известных из уровня техники.
В другом аспекте настоящее изобретение предусматривает композиции (такие как фармацевтические композиции), содержащие любой из полинуклеотидов по настоящему изобретению. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит вектор экспрессии, содержащий полинуклеотид, кодирующий любые из антител, описанных в данном документе.
В данном документе дополнительно описаны векторы экспрессии и введение композиций полинуклеотида.
В другом аспекте настоящее изобретение предусматривает способ получения любого из полинуклеотидов, описанных в данном документе.
Настоящим изобретением также охвачены полинуклеотиды, комплементарные любым таким последовательностям. Полинуклеотиды могут являться однонитевыми (кодирующими или антисмысловыми) или двухнитевыми и могут представлять собой ДНК (геномную, cDNA или синтетическую) или молекулы РНК. Молекулы РНК предусматривают молекулы HnRNA, которые содержат интроны и соответствуют молекуле ДНК «один-к-одному» и молекулы mRNA, которые не содержат интронов. Дополнительные кодирующие или некодирующие последовательности могут, но не обязательно, быть представлены в полинуклеотиде по настоящему изобретению, и при этом полинуклеотид может, но не обязательно, быть связанным с другой молекулой и/или материалами для подложки.
Полинуклеотиды могут содержать нативную последовательность (т.е. эндогенную последовательность, которая кодирует антитело или его часть) или могут содержать вариант такой последовательности. Полинуклеотидные варианты содержат одну или более замен, добавлений, делеций и/или вставок так, что иммунореактивность кодирующего полипептида не уменьшается относительно нативной иммунореактивной молекулы. Эффект в отношении иммунореактивности кодируемого полипептида в целом можно оценить, как описано в данном документе,. Варианты предпочтительно характеризуются по меньшей мере приблизительно 70% идентичностью, более предпочтительно по меньшей мере приблизительно 80% идентичностью, еще более предпочтительно по меньшей мере приблизительно 90% идентичностью и наиболее предпочтительно по меньшей мере приблизительно 95% идентичностью с полинуклеотидной последовательностью, которая кодирует нативное антитело или его часть.
Две полинуклеотидные или полипептидные последовательности называются «идентичными», если последовательность нуклеотидов или аминокислот в этих двух последовательностях одинакова при выравнивании для максимального сходства, как описано ниже. Сравнения между двумя последовательностями, как правило, выполняют путем сравнения последовательностей в окне сравнения для идентификации и сравнения локальных областей сходства последовательности. Термин «окно сравнения», используемый в данном документе, относится к сегменту из по меньшей мере приблизительно 20 смежных положений, обычно от 30 до приблизительно 75 или от 40 до приблизительно 50, в которых последовательность можно сравнить с эталонной последовательностью такого же числа смежных положений после того, как две последовательности оптимально выровнены.
Оптимальное выравнивание последовательностей для сравнения можно проводить с использованием программы Megalign в комплекте программного обеспечения для биоинформатики Lasergene (DNASTAR, Inc., Мадисон, Висконсин, США) с использованием параметров по умолчанию. Данная компьютерная программа реализует несколько схем выравнивания, описанных в следующих ссылках: Dayhoff, M.O., 1978, A model of evolutionary change in proteins - Matrices for detecting distant relationships. In Dayhoff, M.O. (ed.) Atlas of Protein Sequence and Structure, National Biomedical Research Foundation, Washington DC Vol. 5, Suppl. 3, pp. 345-358; Hein J., 1990, Unified Approach to Alignment and Phylogenes pp. 626-645 Methods in Enzymology vol. 183, Academic Press, Inc., San Diego, CA; Higgins, D.G. and Sharp, P.M., 1989, CABIOS 5:151-153; Myers, E.W. and Muller W., 1988, CABIOS 4:11-17; Robinson, E.D., 1971, Comb. Theor. 11:105; Santou, N., Nes, M., 1987, Mol. Biol. Evol. 4:406-425; Sneath, P.H.A. and Sokal, R.R., 1973, Numerical Taxonomy the Principles and Practice of Numerical Taxonomy, Freeman Press, San Francisco, CA; Wilbur, W.J. and Lipman, D.J., 1983, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80:726-730.
Предпочтительно, «процентное значение идентичности последовательности» определяют путем сравнения двух оптимально выровненных последовательностей в окне сравнения из по меньшей мере 20 положений, где часть полинуклеотидной или полипептидной последовательности в окне сравнения может содержать добавления или делеции (т.е. разрывы), состоящие из 20 процентов или меньше, обычно от 5 до 15 процентов или от 10 до 12 процентов по сравнению с эталонными последовательностями (которые не содержат добавления или делеции) для оптимального выравнивания двух последовательностей. Долю в процентах рассчитывают путем определения числа положений, в которых встречаются идентичные основания нуклеиновых кислот или аминокислотный остаток в обоих последовательностях с получением количества совпавших положений, разделения количества совпавших положений на общее количество положений в эталонной последовательности (т.е. размер окна) и умножения результатов на 100 с получением процентного значения идентичности последовательности.
Варианты могут также, или в качестве альтернативы, являться фактически гомологичными нативному гену или его части или их комплементу. Эти полинуклеотидные варианты способны к гибридизации в умеренно-жестких условиях с встречающейся в природе последовательностью ДНК, кодирующей нативное антитело (или комплементарную последовательность).
Подходящие «умеренно-жесткие условия» включают предварительное промывание в растворе 5 X SSC, 0,5% SDS, 1,0 мМ EDTA (pH 8,0); гибридизацию при 50°C-65°C, 5 X SSC в течение ночи с последующим промыванием дважды при 65°C в течение 20 минут с каждым из 2X, 0,5X и 0,2X SSC, содержащим 0,1% SDS.
Используемые в данном документе «очень жесткие условия» или «условия с высокой жесткостью» являются следующими: (1) использование низкой ионной силы и высокой температуры для промывания, например, 0,015 M хлорида натрия/0,0015 M цитрата натрия/0,1% натрийдодецилсульфата при 50°C; (2) использование во время гибридизации средства для денатурации, такого как формамид, например, 50% (об./об.) формамида с 0,1% альбумином бычьей сыворотки/0,1% фиколл/0,1% поливинилпирролидона/50 мМ натрий-фосфатного буфера при pH 6,5 с 750 мМ хлорида натрия, 75 мМ цитрата натрия при 42°C; или (3) использование 50% формамида, 5 x SSC (0,75 M NaCl, 0,075 M цитрата натрия), 50 мМ фосфата натрия (pH 6,8), 0,1% пирофосфата натрия, 5 x раствора Денхардта, подвергнутый воздействию ультразвука раствор ДНК спермы лосося (50 мкг/мл), 0,1% SDS и 10% сульфат декстрана при 42°C с промыванием при 42°C в 0,2 x SSC (хлорид натрия/цитрат натрия) и 50% формамида при 55°C с последующим промыванием в условиях с высокой жесткостью, состоящий из 0,1 x SSC, содержащий EDTA при 55°C. Специалист в данной области техники поймет как регулировать температуру, ионную силу и т.д., при необходимости подстраиваться под факторы, такие как длина зонда и т.п.
Специалистам в данной области будет понятно, что в результате вырожденности генетического кода существует множество нуклеотидных последовательностей, которые кодируют полипептид, описанный в данном документе. Некоторые из этих полинуклеотидов обладают минимальной гомологией с нуклеотидной последовательностью любого нативного гена. Тем не менее, полинуклеотиды, которые отличаются из-за отличий в использовании кодонов, специально предусмотрены настоящим изобретением. Кроме того, аллели генов, содержащие полинуклеотидные последовательности, представленные в данном документе, находятся в пределах объема настоящего изобретения. Аллели представляют собой эндогенные гены, которые изменяются в результате одной или более мутаций, такой как делеции, добавления и/или замены нуклеотидов. Полученная mRNA и белок могут, но не обязательно, иметь измененные структуру или функцию. Аллели можно идентифицировать с применением стандартных методик (например гибридизации, амплификации и/или сравнения базы данных последовательностей).
Полинуклеотиды по настоящему изобретению можно получать с применением химического синтеза, рекомбинантных способов или ПЦР. Способы химического синтеза полинуклеотидов хорошо известны из уровня техники и не нуждаются в подробном описании в данном документе. Специалист в данной области может применять последовательности, представленные в данном документе, и коммерческий ДНК-синтезатор для получения требуемой последовательности ДНК.
Для получения полинуклеотидов с применением рекомбинантных способов, полинуклеотид, содержащий требуемую последовательность можно поместить в подходящий вектор, и вектор, в свою очередь, можно внедрить в подходящую клетку-хозяина для репликации и амплификации, как дополнительно рассмотрено в данном документе. Полинуклеотиды можно поместить в клетки-хозяева с помощью способов, известных из уровня техники. Клетки трансформируют путем введения экзогенного полинуклеотида с помощью непосредственного введения, эндоцитоза, трансфекции, F-спаривания или электропорации. После введения экзогенный полинуклеотид можно сохранять в клетке в качестве неинтегрируемого вектора (такого как плазмида) или интегрировать в геном клетки-хозяина. Амплифицированный таким образом полинуклеотид можно выделить из клетки-хозяина с помощью способов, хорошо известных из уровня техники. См., например, Sambrook et al., 1989.
В качестве альтернативы ПЦР обеспечивает возможность воспроизведения последовательностей ДНК. Технология ПЦР хорошо известна из уровня техники и описана в патентах США №4683195, 4800159, 4754065 и 4683202, а также ПЦР: The Polymerase Chain Reaction, Mullis et al. eds., Birkauswer Press, Boston, 1994.
РНК можно получать путем применения выделенной ДНК в подходящем векторе и помещения его в подходящую клетку-хозяина. Когда клетки воспроизводятся путем клеточного деления и ДНК транскрибируется в РНК, РНК можно затем выделить с применением способов, хорошо известных специалистам в данной области, как представлено ранее, например в Sambrook et al., 1989.
Подходящие клонирующие векторы могут быть сконструированы согласно стандартным методикам или могут быть выбраны из большого количества клонирующих векторов, доступных из уровня техники. Хотя выбранный клонирующий вектор может варьировать в зависимости от клетки-хозяина, предназначенной для использования, применимые клонирующие векторы будут, как правило, иметь способность к самовоспроизведению, могут содержать одиночную цель для конкретной эндонуклеазы рестрикции и/или могут нести гены для маркера, который может использоваться в выборе клонов, содержащих вектор. Подходящие примеры включают плазмиды и бактериальные вирусы, например, pUC18, pUC19, Bluescript (например, pBS SK+) и их производные, mp18, mp19, pBR322, pMB9, ColE1, pCR1, RP4, ДНК-фаги и бифункциональные векторы, например pSA3 и pAT28. Эти и многие другие клонирующие векторы доступны от коммерческих производителей, таких как BioRad, Strategene и Invitrogen.
Векторы экспрессии обычно представляют собой конструкции на основе реплицируемых полинуклеотидов, которые содержат полинуклеотид в соответствии с настоящим изобретением. Предполагается, что вектор экспрессии должен быть способен реплицироваться в клетках-хозяевах либо в виде эписом, либо в виде неотделимой части хромосомной ДНК. Подходящие векторы экспрессии включают без ограничения плазмиды, вирусные векторы, в том числе аденовирусы, аденоассоциированные вирусы, ретровирусы, космиды и вектор(-ы) экспрессии, раскрытые в публикации согласно PCT № WO 87/04462. Компоненты вектора обычно могут включать без ограничения одно или более из следующего: сигнальную последовательность; точку начала репликации; один или более маркерных генов; подходящие элементы контроля транскрипции (такие как промоторы, энхансеры и терминатор). Для экспрессии (т.е. трансляции) также обычно требуются один или более элементов контроля транскрипции, например, сайты связывания рибосом, сайты инициации трансляции и стоп-кодоны.
Векторы, содержащие представляющие интерес полинуклеотиды, можно внедрить в клетку-хозяина с помощью любого количества подходящих способов, включая электропорацию, трансфекцию, с использованием хлорида кальция, хлорида рубидия, фосфата кальция, DEAE-декстрана или других веществ; бомбардировку микрочастицами; липофекцию и инфекцию (например, где вектор представляет собой инфекционное средство, например вирус осповакцины). Выбор вводимых векторов или полинуклеотидов будет часто зависеть от свойств клетки-хозяина.
В настоящем изобретении также предусмотрены клетки-хозяева, содержащие любой из полинуклеотидов, описанных в данном документе. Любые клетки-хозяева, способные к сверхэкспрессии гетерологичных ДНК, могут использоваться с целью выделения генов, кодирующих представляющие интерес антитело, полипептид или соответствующий белок. Неограничивающие примеры клеток-хозяев млекопитающих включают без ограничения клетки COS, HeLa и CHO. См. также публикацию согласно PCT № WO 87/04462. Подходящие клетки-хозяева, не принадлежащие млекопитающим, включают прокариоты (такие как E. coli или B. subtillis) и дрожжи (такие как S. cerevisae, S. pombe или K. lactis). Предпочтительно, клетки-хозяева экспрессируют cDNA на уровне в приблизительно 5 раз выше, более предпочтительно в 10 раз выше, еще более предпочтительно в 20 раз выше, чем у соответствующего эндогенного антитела или представляющего интерес белка, если он присутствует, в клетках-хозяевах. Скрининг клеток-хозяев в отношении специфического связывания с CD70 осуществляют с помощью иммуноанализа или FACS. Можно идентифицировать клетку, сверхэкспрессирующую представляющие интерес антитело или белок.
Способы применения антител к CD70
Антитела по настоящему изобретению полезны в различных применениях, включая без ограничения терапевтические способы лечения и диагностические способы лечения.
Антитела (например, моноспецифические и биспецифические), полученные с помощью описанных выше способов могут использоваться в качестве лекарственного препарата. В некоторых вариантах осуществления такой лекарственный препарат может использоваться для лечения рака. В некоторых вариантах осуществления рак представляет собой рак гематопоэтического происхождения, такой как лимфома или лейкоз. В некоторых вариантах осуществления рак представляет собой почечно-клеточную карциному, глиобластому, глиому, такую как глиома низкой степени злокачественности, неходжкинскую лимфому (NHL), болезнь Ходжкина (HD), макроглобулинемию Вальденстрема, острый миелоидный лейкоз, множественную миелому, диффузную крупноклеточную лимфому, фолликулярную лимфому или немелкоклеточный рак легкого
В некоторых вариантах осуществления предусмотрен способ подавления роста или прогрессирования опухоли у субъекта, у которого имеются злокачественные клетки, экспрессирующие CD70, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества композиции, содержащей антитела к CD70 (например, CD70-CD3 биспецифические антитела), описанные в данном документе. В других вариантах осуществления предусмотрен способ подавления метастазирования клеток, экспрессирующих CD70, у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества композиции, содержащей антитела к CD70 (например, CD70-CD3 биспецифические антитела), описанные в данном документе. В других вариантах осуществления предусмотрен способ индуцирования регрессии опухоли в злокачественных клетках у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества композиции, содержащей антитела к CD70 (например, CD70-CD3 биспецифические антитела), описанные в данном документе.
В некоторых вариантах осуществления антитело (например, CD70-CD3 биспецифическое антитело) в соответствии с настоящим изобретением может использоваться в изготовлении лекарственного препарата для лечения рака у пациента, нуждающегося в этом.
В некоторых вариантах осуществления лечение может осуществляться в комбинации с одним или более видами терапии против рака, выбранными из группы из терапии с помощью антител, химиотерапии, терапии с помощью цитокинов, направленной терапии, вакцинотерапии, терапии с помощью дендритных клеток, генной терапии, гормональной терапии, хирургической резекции, терапии с помощью лазерного излучения и лучевой терапии.
Например, в некоторых вариантах осуществления антитела к CD70 (например, CD70-CD3 биспецифические антитела) по настоящему изобретению вводят пациенту вместе с лечением (например, до, одновременно или после) с помощью низкомолекулярных тирозинкиназных ингибиторов (TKI), таких как сунитиниб и пазопаниб, которые нацелены на рецептор фактора роста сосудистого эндотелия (VEGF), моноклональных антител, нацеленных на VEGF, таких как бевацизумаб, мишень для ингибитора рапамицина млекопитающих (mTOR) темсиролимуса, а также высоких доз IL-2. В некоторых вариантах осуществления антитела к CD70 (например, CD70-CD3 биспецифические антитела) по настоящему изобретению вводят пациенту вместе с одним или более из следующих: антитело к PD-1 (например, ниволумаб, пембролизумаб или PF-06801591), антитело к PD-L1 (например, авелумаб, атезолизумаб или дурвалумаб), антитело к OX40 (например, PF-04518600), антитело к 4-1BB (например, PF-05082566), антитело к MCSF (например, PD-0360324), антитело к GITR и/или антитело к TIGIT.
Введение антител (например, моноспецифических или биспецифических) в соответствии с настоящим изобретением можно осуществлять любым удобным способом, в том числе с помощью аэрозольной ингаляции, инъекции, перорального приема, трансфузии, имплантации или трансплантации. Композиции, описанные в данном документе, можно вводить пациенту подкожно, внутрикожно, внутрь опухоли, интракраниально, интранодально, интрамедуллярно, внутримышечно, посредством внутривенной или внутрилимфатической инъекции или внутрибрюшинно. В одном варианте осуществления композиции антитела по настоящему изобретению предпочтительно вводят посредством внутривенной инъекции.
В некоторых вариантах осуществления введение антител (например, моноспецифических или биспецифических) может включать введение, например, от приблизительно 0,01 до приблизительно 20 мг на кг веса тела, включая все целочисленные значения мг на кг в этих диапазонах. В некоторых вариантах осуществления введение антитела может включать введение от приблизительно 0,1 до 10 мг на кг веса тела, включая все целочисленные значения мг на кг в этих диапазонах. Антитело можно вводить в одной или более дозах. В некоторых вариантах осуществления указанное эффективное количество антитела можно вводить одной дозой. В некоторых вариантах осуществления указанное эффективное количество антител можно вводить более чем одной дозой в течение периода времени. Срок введения определяется в рамках суждения управляющего врача и зависит от клинического состояния пациента. В то время как индивидуальные потребности варьируются, определение оптимальных диапазонов эффективных количеств данного антитела (например, моноспецифического или биспецифического) для конкретного заболевания или условий находится в пределах компетенции специалиста в данной области. Эффективное количество означает количество, которое обеспечивает терапевтическую или профилактическую пользу. Вводимая доза будет зависеть от возраста, состояния здоровья и веса реципиента, вида сопутствующего лечения, при наличии такового, частоты лечения и природы требуемого эффекта. В некоторых вариантах осуществления эффективное количество гетеромультимерного антитела или композиции, содержащей эти антитела, вводят парентерально. В некоторых вариантах осуществления введение может быть внутривенным. В некоторых вариантах осуществления введение можно осуществлять непосредственно с помощью инъекции в пределах опухоли.
В некоторых вариантах осуществления антитела к CD70, представленные в данном документе, можно использовать в диагностических целях, как например, в анализах для идентификации белка CD70 в образцах (например, в анализах иммуногистохимического исследования) или у пациента.
Композиции
В одном аспекте настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую антитело (например, моноспецифическое или биспецифическое) по настоящему изобретению или его часть, как описано выше, в фармацевтически приемлемом носителе. В некоторых вариантах осуществления полипептиды по настоящему изобретению могут быть представлены в нейтральной форме (включая цвиттер-ионные формы) или в качестве положительно или отрицательно заряженных соединений. В некоторых вариантах осуществления полипептиды могут находиться в комплексе с противоионом с образованием «фармацевтически приемлемой соли», который относится к комплексу, содержащему один или более полипептидов и один или более противоионов, где противоионы происходят из фармацевтически приемлемых неорганических и органических кислот и оснований.
Антитело (например, моноспецифическое или биспецифическое) или его части можно вводить отдельно или в комбинации с одним или более другими полипептидами по настоящему изобретению, или в комбинации с одним или более другими лекарственными средствами (или в качестве любой его комбинации). Таким образом, фармацевтические композиции, способы и применения по настоящему изобретению также охватывают варианты осуществления комбинаций (совместного введения) с другими активными средствами, как подробно описано ниже.
Используемые в данном документе термины «совместное введение», «вводимый совместно» и «в комбинации с», относящиеся к антителам по настоящему изобретению и одному или более из других терапевтических средств, предназначены для обозначения, а также относятся и включают следующее: (i) одновременное введение такой комбинации антитела, раскрытого в данном документе, и терапевтического(-их) средства(-ств) пациенту, нуждающемуся в лечении, когда такие компоненты составлены вместе в одну лекарственную форму, которая высвобождает указанные компоненты указанному пациенту фактически одновременно; (ii) фактически одновременное введение такой комбинации антитела, раскрытой в данном документе, и терапевтического(-их) средства(-ств) пациенту, нуждающемуся в лечении, когда такие компоненты составлены отдельно друг от друга в отдельные лекарственные формы, которые принимаются указанным пациентом фактически одновременно, после чего указанные компоненты высвобождаются указанному пациенту фактически одновременно; (iii) последовательное введение такой комбинации антитела, раскрытого в данном документе, и терапевтического(-их) средства(-ств) пациенту, нуждающемуся в лечении, когда такие компоненты составлены отдельно друг от друга в отдельные лекарственные формы, которые принимаются в последующие моменты времени указанным пациентом в пределах значительных временных интервалов между каждым введением, после чего указанные компоненты высвобождаются указанному пациенту фактически в разные моменты времени и (iv) последовательное введение такой комбинации антитела, раскрытого в данном документе, и терапевтического(-их) средства(-ств) пациенту, нуждающемуся в лечении, когда эти компоненты составлены вместе в одну лекарственную форму, которая высвобождает указанные компоненты заданным образом, после чего они высвобождаются указанному пациенту одновременно, последовательно и/или перекрывающимся образом в одно и тоже время и/или разное время, где каждая часть может вводиться посредством либо того же, либо другого пути.
Как правило, раскрытое в данном документе антитело (например, моноспецифическое или биспецифическое) или его части являются подходящими для введения в качестве состава в ассоциации с одним или более из фармацевтически приемлемого(-ых) вспомогательного(-ых) вещества(-ств). Термин «вспомогательное вещество» используется в данном документе для описания любого ингредиента, отличного от соединения(-й) по настоящему изобретению. Выбор вспомогательного(-ых) вещества(-ств) будет в значительной степени зависеть от факторов, таких как конкретный режим введения, эффект вспомогательного вещества в отношении растворимости и стабильности и природа лекарственной формы. Используемый в данном документе термин «фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество» включает любой и все растворители, дисперсионные среды, покрытия, антибактериальные и противогрибковые средства, изотонические и замедляющие абсорбцию средства и т.п., которые являются физиологически совместимыми. Некоторыми примерами фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ являются вода, солевой раствор, забуференный фосфатом физиологический раствор, декстроза, глицерин, этанол и т.п., а также их комбинации. Во многих случаях будет предпочтительным включать в композицию изотонические средства, например, сахара, полиспирты, такие как маннит, сорбит, или хлорид натрия. Дополнительными примерами фармацевтически приемлемых веществ являются смачивающие средства или небольшие количества вспомогательных веществ, таких как смачивающие или эмульгирующие средства, консерванты или буферы, которые увеличивают период жизни или эффективность антитела.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению и способы их получения будут очевидны специалистам в данной области. Такие композиции и способы их получения можно найти, например, в Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th Edition (Mack Publishing Company, 1995). Фармацевтические композиции предпочтительно изготовлены в условиях GMP.
Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может быть получена, упакована или продана без упаковки в виде отдельной однократной дозы или в виде множества отдельных однократных доз. Используемый в данном документе термин «однократная доза» представляет собой дискретное количество фармацевтической композиции, содержащей заранее определенное количество активного ингредиента. Как правило, количество активного ингредиента равно дозе активного ингредиента, которая могла бы вводиться субъекту, или подходящий доле такой дозы, такой как, например, половина или одна треть такой дозы. Любой способ введения пептидов, белков или антител, принятый в уровне техники, соответствующим образом можно применять для гетеродимерных белков и его частей, раскрытых в данном документе.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению являются, как правило, подходящими для парентерального введения. Используемый в данном документе термин «парентеральное введение» фармацевтической композиции включает любой путь введения, характеризующийся физическим преодолением ткани субъекта и введением фармацевтической композиции через отверстие в ткани, таким образом обычно приводя в результате к непосредственному введению в кровоток, в мышцу или во внутренний орган. Таким образом, парентеральное введение включает без ограничения введение фармацевтической композиции путем инъекции композиции, путем внесения композиции через хирургический разрез, путем внесения композиции через проникающую в ткань нехирургическую рану и т.п. В частности, предполагается, что парентеральное введение включает без ограничения подкожную, внутрибрюшинную, внутримышечную, интрастернальную, внутривенную, внутриартериальную, интратекальную, внутрижелудочковую, внутриуретральную, интракраниальную, внутрисуставную инъекции или инфузии и методики диалитической инфузии в почке. Предпочтительные варианты осуществления включают внутривенные и подкожные пути.
Составы фармацевтической композиции, подходящей для парентерального введения, как правило, обычно содержат активный ингредиент в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем, таким как стерильная вода или стерильный изотонический солевой раствор. Такие составы можно получать, упаковывать или продавать в форме, подходящей для болюсного введения или для непрерывного введения. Инъецируемые составы можно получать, упаковывать или продавать в виде единичной лекарственной формы, такой как ампулы, или в многодозовых контейнерах, содержащих консервант. Составы для парентерального введения включают без ограничения суспензии, растворы, эмульсии в масляных или водных средах-носителях, пасты и т.п. Такие составы могут дополнительно содержать один или более дополнительных ингредиентов, в том числе без ограничения суспендирующие, стабилизирующие или диспергирующие средства. В одном варианте осуществления состава для парентерального введения активный ингредиент предусмотрен в сухой (т.е. порошковой или гранулированной) форме для разбавления подходящим носителем (например, стерильной апирогенной водой) перед парентеральным введением восстановленной композиции. Парентеральные составы также включают водные растворы, которые могут содержать вспомогательные вещества, такие как соли, углеводы и буферные средства (предпочтительно до значения pH от 3 до 9), однако для некоторых применений они могут быть более приемлемо составлены в виде стерильного неводного раствора или в виде высушенной формы для использования совместно с подходящей средой-носителем, такой как стерильная апирогенная вода. Иллюстративные формы для парентерального введения включают растворы или суспензии в стерильных водных растворах, например, водные растворы пропиленгликоля или декстрозы. Если требуется, такие лекарственные формы можно соответствующим образом буферизовать. Другие пригодные для парентерального введения составы, являющиеся применимыми, включают те, которые содержат активный ингредиент в микрокристаллической форме или в липосомальном препарате. Составы для парентерального введения можно составлять для немедленного и/или модифицированного высвобождения. Составы с модифицированным высвобождением включают составы с контролируемым, отсроченным, замедленным, импульсным, целевым и запрограммированным высвобождением. Например, в одном аспекте стерильные инъецируемые растворы можно получать путем включения гетеродимерного белка, например, биспецифического антитела, в необходимом количестве в подходящем растворителе с одним или комбинацией перечисленных выше ингредиентов, при необходимости, с последующей стерилизацией фильтрованием. Обычно дисперсии получают путем включения активного соединения в стерильную среду-носитель, которая содержит основную дисперсную среду и необходимые прочие ингредиенты из тех, которые перечислены выше. В случае стерильных порошков для получения стерильных инъецируемых растворов предпочтительными способами получения являются вакуумная сушка и сублимационная сушка, которые приводят к получению порошка активного ингредиента плюс любой дополнительный требуемый ингредиент из его первоначально стерильного отфильтрованного раствора. Надлежащая текучесть раствора может поддерживаться, например, за счет использования покрытия, такого как лецитин, за счет поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсии и за счет использования поверхностно-активных веществ. Пролонгированная абсорбция инъецируемых композиций может быть достигнута за счет включения в композиции средства, замедляющего абсорбцию, например, солей моностеарата и желатина.
Режимы дозирования можно корректировать с обеспечением оптимального требуемого ответа. Например, можно вводить один болюс, несколько разделенных доз можно вводить с течением времени или доза может быть пропорционально уменьшена или увеличена, как указано, в зависимости от терапевтической ситуации. Особенно полезно составлять парентеральные композиции в стандартной лекарственной форме для облегчения введения и однородности дозы. Используемая в данном документе стандартная лекарственная форма относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичных дозировок для пациентов/субъектов, подлежащих лечению; при этом каждая единица содержит заранее определенное количество активного соединения, рассчитанное для получения требуемого терапевтического эффекта в ассоциации с необходимым фармацевтическим носителем. Спецификация для стандартной лекарственной формы по настоящему изобретению в целом определяется и непосредственно зависит от (a) уникальных характеристик химиотерапевтического средства и конкретного терапевтического или профилактического эффекта, которые должны быть достигнуты, и (b) ограничений, характерных для области техники, относящейся к составлению такого активного соединения, для лечения чувствительности у индивидуумов.
Таким образом, специалисту в данной области было бы понятно, на основании раскрытия, представленного в данном документе, что доза и режим дозирования корректируются в соответствии со способами, хорошо известными в терапевтических областях. То есть максимально переносимую дозу можно легко установить, и также можно определить эффективное количество, обеспечивающее выявляемую терапевтическую пользу для пациента, а также временные требования в отношении введения каждого средства пациенту для обеспечения выявляемой терапевтической пользы. Соответственно, хотя определенные дозы и схемы введения приведены в качестве примера в данном документе, эти примеры никоим образом не ограничивают дозу и режим введения, которые можно обеспечить пациенту при осуществлении настоящего изобретения.
Следует отметить, что значения дозировки могут варьировать в зависимости от типа и тяжести состояния, которое необходимо облегчить, и может включать одну или множество доз. Также следует понимать, что для любого конкретного субъекта специфические режимы дозирования необходимо корректировать с течением времени в соответствии с индивидуальной необходимостью и профессиональным суждением лица, управляющего или контролирующего введение композиций, и что диапазоны дозировок, изложенные в данном документе, приводятся лишь в качестве примера и не предполагают ограничение объема или практической реализации заявленной композиции. Кроме того, режим дозирования с композициями по настоящему изобретению может быть основан на различных факторах, включая тип заболевания, возраст, вес, пол, медицинское состояние пациента, тяжесть состояния, путь введения и конкретное используемое антитело. Таким образом, режим дозирования может широко варьировать, но его можно определить обычным образом с использованием стандартных способов. Например, дозы можно корректировать на основании фармакокинетических или фармакодинамических параметров, которые могут включать клинические эффекты, такие как токсические эффекты и/или лабораторные значения. Таким образом, настоящее изобретение охватывает повышение дозы у одного и того же пациента, как определено специалистом в данной области. Определение соответствующих дозировок и схем лечения хорошо известно из уровня техники и будет понятно специалисту в данной области при предоставлении идей, раскрытых в данном документе.
Как правило, для введения антител, описанных в данном документе (моноспецифических или биспецифических), кандидатную дозу можно вводить ежедневно, каждую неделю, каждую вторую неделю, каждые три недели, каждые четыре недели, каждые пять недель, каждые шесть недель, каждые семь недель, каждые восемь недель, каждые десять недель, каждые двенадцать недель или чаще чем каждые двенадцать недель. Для повторных введений в течение нескольких дней или дольше, в зависимости от состояния, лечение продолжают до тех пор, пока не произойдет требуемое подавление симптомов или пока не будут достигнуты достаточные терапевтические уровни, например, для уменьшения симптомов, связанных с раком. Прогресс такой терапии легко контролировать с помощью традиционных методик и анализов. Режим дозирования (в том числе используемого моноспецифического или биспецифического антитела к FLT) может меняться с течением времени.
В некоторых вариантах осуществления кандидатную дозу вводят ежедневно в дозе, находящейся в диапазоне от приблизительно любого значения от 1 мкг/кг до 30 мкг/кг, до 300 мкг/кг, до 3 мг/кг, до 30 мг/кг, до 100 мг/кг или больше, в зависимости от вышеупомянутых факторов. Например, можно применять ежедневную дозу, составляющую приблизительно 0,01 мг/кг, приблизительно 0,03 мг/кг, приблизительно 0,1 мг/кг, приблизительно 0,3 мг/кг, приблизительно 1 мг/кг, приблизительно 2,5 мг/кг, приблизительно 3 мг/кг, приблизительно 5 мг/кг, приблизительно 10 мг/кг, приблизительно 15 мг/кг и приблизительно 25 мг/кг.
В некоторых вариантах осуществления кандидатную дозу вводят каждую неделю в дозе, находящейся в диапазоне от приблизительно любого значения от 1 мкг/кг до 30 мкг/кг, до 300 мкг/кг, до 3 мг/кг, до 30 мг/кг, до 100 мг/кг или больше, в зависимости от упомянутых выше факторов. Например, можно применять еженедельную дозу, составляющую приблизительно 0,01 мг/кг, приблизительно 0,03 мг/кг, приблизительно 0,1 мг/кг, приблизительно 0,3 мг/кг, приблизительно 0,5 мг/кг, приблизительно 1 мг/кг, приблизительно 2,5 мг/кг, приблизительно 3 мг/кг, приблизительно 5 мг/кг, приблизительно 10 мг/кг, приблизительно 15 мг/кг, приблизительно 25 мг/кг и приблизительно 30 мг/кг.
В некоторых вариантах осуществления кандидатную дозу вводят каждые две недели в дозе, находящейся в диапазоне от приблизительно любого значения от 1 мкг/кг до 30 мкг/кг, до 300 мкг/кг, до 3 мг/кг, до 30 мг/кг, до 100 мг/кг или больше, в зависимости от упомянутых выше факторов. Например, можно применять дозу раз в две недели, составляющую приблизительно 0,1 мг/кг, приблизительно 0,3 мг/кг, приблизительно 1 мг/кг, приблизительно 2,5 мг/кг, приблизительно 3 мг/кг, приблизительно 5 мг/кг, приблизительно 10 мг/кг, приблизительно 15 мг/кг, приблизительно 25 мг/кг и приблизительно 30 мг/кг.
В некоторых вариантах осуществления кандидатную дозу вводят каждые три недели в дозе, находящейся в диапазоне от приблизительно любого значения от 1 мкг/кг до 30 мкг/кг, до 300 мкг/кг, до 3 мг/кг, до 30 мг/кг, до 100 мг/кг или больше, в зависимости от упомянутых выше факторов. Например, можно применять дозу раз в три недели, составляющую приблизительно 0,1 мг/кг, приблизительно 0,3 мг/кг, приблизительно 1 мг/кг, приблизительно 2,5 мг/кг, приблизительно 3 мг/кг, приблизительно 5 мг/кг, приблизительно 10 мг/кг, приблизительно 15 мг/кг, приблизительно 25 мг/кг, приблизительно 30 мг/кг, приблизительно 35 мг/кг, приблизительно 40 мг/кг, приблизительно 45 мг/кг и приблизительно 50 мг/кг.
В некоторых вариантах осуществления кандидатную дозу вводят каждый месяц или каждые четыре недели в дозе, находящейся в диапазоне от приблизительно любого значения от 1 мкг/кг до 30 мкг/кг, до 300 мкг/кг, до 3 мг/кг, до 30 мг/кг, до 100 мг/кг или больше, в зависимости от упомянутых выше факторов. Например, можно применять дозу раз в месяц, составляющую приблизительно 0,1 мг/кг, приблизительно 0,3 мг/кг, приблизительно 1 мг/кг, приблизительно 2,5 мг/кг, приблизительно 3 мг/кг, приблизительно 5 мг/кг, приблизительно 10 мг/кг, приблизительно 15 мг/кг, приблизительно 25 мг/кг, приблизительно 30 мг/кг, приблизительно 35 мг/кг, приблизительно 40 мг/кг, приблизительно 45 мг/кг и приблизительно 50 мг/кг.
В других вариантах осуществления кандидатную дозу вводят ежедневно в дозе, находящейся в диапазоне от приблизительно 0,01 мг до приблизительно 1200 мг или больше, в зависимости от упомянутых выше факторов. Например, можно применять ежедневную дозу, составляющую приблизительно 0,01 мг, приблизительно 0,1 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 100 мг, приблизительно 200 мг, приблизительно 300 мг, приблизительно 400 мг, приблизительно 500 мг, приблизительно 600 мг, приблизительно 700 мг, приблизительно 800 мг, приблизительно 900 мг, приблизительно 1000 мг, приблизительно 1100 мг или приблизительно 1200 мг.
В других вариантах осуществления кандидатную дозу вводят каждую неделю в дозе, находящейся в диапазоне от приблизительно 0,01 мг до приблизительно 2000 мг или больше, в зависимости от упомянутых выше факторов. Например, можно применять ежедневную дозу, составляющую приблизительно 0,01 мг, приблизительно 0,1 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 100 мг, приблизительно 200 мг, приблизительно 300 мг, приблизительно 400 мг, приблизительно 500 мг, приблизительно 600 мг, приблизительно 700 мг, приблизительно 800 мг, приблизительно 900 мг, приблизительно 1000 мг, приблизительно 1100 мг, приблизительно 1200 мг, приблизительно 1300 мг, приблизительно 1400 мг, приблизительно 1500 мг, приблизительно 1600 мг, приблизительно 1700 мг, приблизительно 1800 мг, приблизительно 1900 мг или приблизительно 2000 мг.
В других вариантах осуществления кандидатную дозу вводят каждые две недели в дозе, находящейся в диапазоне от приблизительно 0,01 мг до приблизительно 2000 мг или больше, в зависимости от упомянутых выше факторов. Например, можно применять дозу раз в две недели, составляющую приблизительно 0,01 мг, приблизительно 0,1 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 100 мг, приблизительно 200 мг, приблизительно 300 мг, приблизительно 400 мг, приблизительно 500 мг, приблизительно 600 мг, приблизительно 700 мг, приблизительно 800 мг, приблизительно 900 мг, приблизительно 1000 мг, приблизительно 1100 мг, приблизительно 1200 мг, приблизительно 1300 мг, приблизительно 1400 мг, приблизительно 1500 мг, приблизительно 1600 мг, приблизительно 1700 мг, приблизительно 1800 мг, приблизительно 1900 мг или приблизительно 2000 мг.
В других вариантах осуществления кандидатную дозу вводят каждые три недели в дозе, находящейся в диапазоне от приблизительно 0,01 мг до приблизительно 2500 мг или больше, в зависимости от упомянутых выше факторов. Например, можно применять дозу раз в три недели, составляющую приблизительно 0,01 мг, приблизительно 0,1 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 100 мг, приблизительно 200 мг, приблизительно 300 мг, приблизительно 400 мг, приблизительно 500 мг, приблизительно 600 мг, приблизительно 700 мг, приблизительно 800 мг, приблизительно 900 мг, приблизительно 1000 мг, приблизительно 1100 мг, приблизительно 1200 мг, приблизительно 1300 мг, приблизительно 1400 мг, приблизительно 1500 мг, приблизительно 1600 мг, приблизительно 1700 мг, приблизительно 1800 мг, приблизительно 1900 мг, приблизительно 2000 мг, приблизительно 2100 мг, приблизительно 2200 мг, приблизительно 2300 мг, приблизительно 2400 мг или приблизительно 2500 мг.
В других вариантах осуществления кандидатную дозу вводят каждые четыре недели или месяц в дозе, находящейся в диапазоне от приблизительно 0,01 мг до приблизительно 3000 мг или больше, в зависимости от упомянутых выше факторов. Например, можно применять дозу раз в месяц, составляющую приблизительно 0,01 мг, приблизительно 0,1 мг, приблизительно 1 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 100 мг, приблизительно 200 мг, приблизительно 300 мг, приблизительно 400 мг, приблизительно 500 мг, приблизительно 600 мг, приблизительно 700 мг, приблизительно 800 мг, приблизительно 900 мг, приблизительно 1000 мг, приблизительно 1100 мг, приблизительно 1200 мг, приблизительно 1300 мг, приблизительно 1400 мг, приблизительно 1500 мг, приблизительно 1600 мг, приблизительно 1700 мг, приблизительно 1800 мг, приблизительно 1900 мг, приблизительно 2000 мг, приблизительно 2100 мг, приблизительно 2200 мг, приблизительно 2300 мг, приблизительно 2400 мг, приблизительно 2500, приблизительно 2600 мг, приблизительно 2700 мг, приблизительно 2800 мг, приблизительно 2900 мг или приблизительно 3000 мг.
Наборы
В настоящем изобретении также предусмотрены наборы для использования в настоящих способах. Наборы по настоящему изобретению включают один или более контейнеров, содержащих антитело (например, моноспецифическое или биспецифическое), описанное в данном документе, и инструкции для применения в соответствии с любым из способов по настоящему изобретению, описанных в данном документе. Как правило, эти инструкции содержат описание введения белка антитела для описанных выше видов терапевтического лечения.
Инструкции, относящиеся к использованию антитела (например, моноспецифического или биспецифического), описанного в данном документе, как правило, включают информацию о дозе, схеме введения доз и пути введения для предполагаемого лечения. Контейнеры могут представлять собой однократные дозы, общие упаковки (например, многодозовые упаковки) или субъединицы доз. Инструкции, подаваемые в наборе по настоящему изобретению, как правило, представляют собой письменные инструкции на этикетке или листке-вкладыше (например, бумажном листке, включенном в набор), однако приемлемыми также являются машиночитаемые инструкции (например, инструкции, хранящиеся на магнитном или оптическом диске для хранения).
Наборы по настоящему изобретению находятся в подходящей упаковке. Подходящая упаковка включает без ограничения флаконы, бутылки, банки, гибкую упаковку (например, герметичные майларовые или пластиковые пакеты) и т.п. Также предусмотрены упаковки для применения в комбинации со специальным устройством, таким как ингалятор, устройство для назального введения (например, распылитель) или инфузионное устройство, такое как мининасос. Набор может иметь стерильный порт доступа (например, контейнер может представлять собой мешок для внутривенного раствора или флакон с пробкой, прокалываемой иглой для подкожных инъекций). Контейнер также может иметь стерильный порт доступа (например, контейнер может представлять собой мешок для внутривенного раствора или флакон с пробкой, прокалываемой иглой для подкожных инъекций). По меньшей мере одно действующее средство в композиции представляет собой биспецифическое антитело. Контейнер может дополнительно содержать второе фармацевтически действующее средство.
В наборах могут необязательно предоставляться дополнительные компоненты, такие как буферы и интерпретирующая информация. Обычно набор содержит контейнер и этикетку или листок-вкладыш(-и) на контейнере или связанные с ним.
Следующие примеры предложены лишь в иллюстративных целях и никоим образом не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения. Действительно, различные модификации настоящего изобретения в дополнение к представленным и описанным в данном документе будут очевидны специалистам в данной области, исходя из вышеизложенного описания, и попадают в объем прилагаемой формулы изобретения.
Примеры
Пример 1. Определение кинетики и аффинности взаимодействия антител к CD70/CD70 человека при 37°C
Кинетику и аффинность антител к CD70, раскрытых в данном документе, можно измерять на биосенсоре Biacore T200 с помощью поверхностного плазмонного резонанса (GE Lifesciences, Пискатауэй, Нью-Джерси, США).
Пример 2. Опосредованный Т-клетками киллинг линий клеток RCC с использованием биспецифического IgG CD70-CD3 in vitro
Антитела к CD70 человека и антитела к CD3 (h2B4-VH-hnps VL-TK («H2B4»)) экспрессируются как IgG2dA_D265A человека, сконструированные с EEEE на одном плече и RRRR на другом плече для биспецифического обмена в положениях 223, 225 и 228 (например, (C223E или C223R), (E225E или E225R) и (P228E или P228R)) в шарнирной области и в положениях 409 или 368 (например, K409R или L368E (схема нумерации согласно EU)) в области CH3 IgG2 человека (SEQ ID NO: 279). Биспецифическое антитело к CD70/CD3 также имеет мутацию от D до A в положении 265 (схема нумерации согласно EU).
CD3+Т-клетки из РВМС человека отбирали отрицательно с использованием набора для выделения Т-клеток Pan человека (Miltenyi, Сан-Диего, Калифорния, США). Целевые экспрессирующие (786-O) клетки и CD3+ T-клетки высевали на прозрачные планшеты с U-образным дном при 20000 и 100000 клеток/лунка, соответственно. Клетки обрабатывали 8-кратно серийно разбавленным биспецифическим антителом. Истощение клеток RCC определяли путем анализа с помощью проточной цитометрии через 24 часа после лечения. Истощение клеток измеряли по контрасту с обработанными контролем клетками. EC50 рассчитывали с помощью программного обеспечения Prism.
Пример 3. Биспецифический IgG CD70-CD3 индуцирует деструкцию опухоли в модели подкожного ксенотрансплантата RCC
Мышам NOD scid гамма (NSG) имплантировали подкожно опухоли 786-O, и после получения опухолей объемом 200 мм3 мышам вводили внутрибрюшинно дозу, составляющую 20 миллионов размноженных Т-клеток каждой. Через два дня биспецифические антитела к CD70 вводили внутривенно в дозах, составляющих 300, 100 или 30 мкг/мл, посредством инъекции в хвостовую вену для определения оптимальной дозы биспецифического антитела.
Материалы и способы
Мышей NOD scid гамма (NSG) брили и подготавливали для подкожного имплантирования опухоли на правом боку. Опухолевые клетки 786-O, которые, как известно, экспрессируют CD70, размножали в RPMI, дополненной 10% FBS. В день 0 клетки 786-O ресуспендировали в бессывороточной RPMI в необходимой концентрации для введения 5 миллионов клеток на животное. Опухолевые клетки инъецировали подкожно в 100 мкл бессывороточной RPMI в комбинации с 100 мкл Matrigel (Corning) на животное. Исходные значения веса тела в день 0 у всех животных регистрировали сразу же после имплантации опухоли. Опухоли измеряли дважды в неделю, начиная с дня 9, с использованием электронно-лучевых калиперов (Mitutoyo) и регистрировали значения веса тела. В день 14, когда опухоли достигали 200 мм3 (стандартная ошибка 8,39), 40 мышей, несущих опухоль, рандомизировали на 4 группы по 10 мышей в каждой. T-клетки оттаивали и размножали, а затем их ресуспендировали в бессывороточной RPMI в необходимой концентрации для введения 20 миллионов T-клеток на животное. T-клетки вводили внутрибрюшинно в 200 мкл бессывороточной RPMI на животное. Через два дня биспецифические антитела вводили внутривенно в хвостовую вену в дозах, составляющих 300, 100 или 30 мкг/мл на животное. Опухоли измеряли и значения веса тела записывали два раза в неделю до тех пор, пока необработанная группа не достигала конечной точки исследования (объем опухоли 1500 мм3).
Объемы опухолей (среднее значение и ошибка SEM) наносили на график с использованием GraphPad Prism и статистические данные рассчитывали с использованием однофакторного ANOVA с повторными измерениями.
Хотя раскрытые идеи были описаны со ссылкой на различные варианты применения, способы, наборы и композиции, следует понимать, что различные изменения и модификации могут быть сделаны без отклонения от идей данного документа и заявленной формулы изобретения, представленной ниже. Вышеуказанные примеры предусмотрены для лучшего иллюстрирования раскрытых идей и не предназначены для ограничения объема идей, представленных в данном документе. Хотя настоящие идеи были описаны в определениях этих иллюстративных вариантов осуществления, специалист в данной области легко поймет, что многочисленные вариации и модификации этих иллюстративных вариантов осуществления возможны без излишних экспериментов. Все такие вариации и модификации находятся в рамках действующих идей.
Все ссылки, цитируемые в данном документе, в том числе патенты, заявки на патенты, научные статьи, пособия и т.п., а также ссылки, цитируемые в них, в той степени, в которой они уже не являются таковыми, включены в данный документ с помощью ссылки в их полном объеме. В случае если одна или более из ссылок на литературные источники и аналогичные материалы отличаются или противоречат данной заявке, включая без ограничения определенные термины, термины относительно использования, описанные методики и т.п., данная заявка имеет преимущественную силу.
В изложенных выше описании и примерах подробно определены некоторые конкретные варианты осуществления изобретения и описан наилучший способ осуществления, предполагаемый авторами настоящего изобретения. Однако будет понятно, что независимо от того, насколько подробно изложенное выше может быть представлено в тексте, настоящее изобретение может быть реализовано на практике многими путями, и при этом настоящее изобретение следует истолковывать в соответствии с прилагаемой формулой изобретения и любыми ее эквивалентами.
--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> ПФАЙЗЕР ИНК.
<120> АНТИТЕЛА, СПЕЦИФИЧЕСКИЕ В ОТНОШЕНИИ CD70, И ПУТИ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
<130> ALGN-015_02WO
<140>
<141>
<150> 62/641873
<151> 2018-03-12
<150> 62/625019
<151> 2018-02-01
<160> 531
<170> PatentIn версия 3.5
<210> 1
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 1
Asp Ile Val Met Thr Gln Asn Pro Leu Ser Ser Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser
20 25 30
Asp Gly Asn Thr Tyr Leu Ser Trp Leu Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Lys Ile Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Ala
85 90 95
Thr Gln Phe Pro Leu Thr Ile Gly Gly Gly Ser Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 2
<211> 118
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 2
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Phe Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Ser Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ile Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Ser Ser Ser Pro Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 3
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 3
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Ser Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser
20 25 30
Asp Gly Asn Thr Tyr Leu Ser Trp Leu Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Lys Ile Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Ala
85 90 95
Thr Gln Phe Pro Leu Thr Ile Gly Gly Gly Ser Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 4
<211> 118
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 4
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Phe Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Val Phe
65 70 75 80
Met Glu Leu Ile Ser Leu Arg Ser Glu Tyr Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Ser Ser Ser Pro Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 5
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 5
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ser Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Lys Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 6
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 6
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asp Ile Arg Thr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
100 105 110
<210> 7
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 7
Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val Tyr Ser
20 25 30
Asp Glu Asn Thr Tyr Leu Asn Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Leu Arg Arg Leu Ile Tyr Gln Val Ser Asn Arg Asp Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Phe Cys Met Gln Gly
85 90 95
Thr Tyr Trp Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 8
<211> 117
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 8
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asn Ser
20 25 30
Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Asn Ile Lys Arg Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gln Thr Gly Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 9
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 9
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Met Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Gly Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ile Asn Trp Pro His
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 10
<211> 115
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 10
Gln Val Gln Leu Arg Gly Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Asp Asp Ser Ile Ser Val Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Val Tyr Ser Ser Gly Asn Ile Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Glu
50 55 60
Ser Arg Val Thr Met Ser Val Asp Thr Ser Lys Ser Arg Phe Ser Leu
65 70 75 80
Asn Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Gly Leu Asp Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser
115
<210> 11
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 11
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ile Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Ala Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Asn Phe Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 12
<211> 115
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 12
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Val Ser Gly Phe Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Val Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ile Ile Ser Gly Val Ala Phe Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp His Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Gly Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Lys Val Asp Gly Glu Val Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser
115
<210> 13
<211> 108
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 13
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Ile Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Thr Arg Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Ser Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Asn Trp Pro Pro
85 90 95
Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 14
<211> 117
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 14
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Glu Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ile Thr Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Phe Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Ser
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Gln Trp Glu Leu Phe Phe Phe Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr Pro
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 15
<211> 108
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 15
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Gln Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Phe Ala Ile Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro
85 90 95
Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 16
<211> 120
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 16
Ala Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Tyr Tyr
20 25 30
Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser His Ile Ser Ile Arg Ser Ser Thr Ile Tyr Phe Ala Asp Ser Ala
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Ser Gly Trp Tyr Gly Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 17
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 17
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ala Met Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Leu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Leu Asn Ser Phe Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Asn
100 105
<210> 18
<211> 123
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 18
Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu Val Lys Pro Thr Glu
1 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Asn Ala
20 25 30
Arg Met Gly Val Thr Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Ala His Ile Phe Ser Asn Asp Glu Lys Ser Tyr Ser Thr Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Thr Gln Val
65 70 75 80
Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Ile Arg Asp Tyr Tyr Asp Ile Ser Ser Tyr Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Ser Val Ser Ser
115 120
<210> 19
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 19
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Val Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Phe Ser Phe Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 20
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 20
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn His
20 25 30
Asn Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Ser Tyr Ile Ser Arg Ser Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp His Ala Gln Trp Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 21
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 21
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser
20 25 30
Tyr Asn Asn Lys Asn Tyr Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Asn Leu Leu Ile Phe Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
85 90 95
Tyr Tyr Ser Thr Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 22
<211> 124
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 22
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ser Ile Lys Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Gly Val Asn Trp Gly Trp Arg Leu Tyr Trp His Phe Asp
100 105 110
Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 23
<211> 108
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 23
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Asp Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro
85 90 95
Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 24
<211> 120
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 24
Glu Val Gln Val Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser His Ser Ser Ile Ser Arg Gly Asn Ile Tyr Phe Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Ser Gly Trp Tyr Gly Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 25
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 25
Glu Leu Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro
1 5 10 15
Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly
20 25 30
Ser Asn Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys
35 40 45
Leu Leu Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg
50 55 60
Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly
65 70 75 80
Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp
85 90 95
Ser Leu Ser Gly Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 26
<211> 120
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 26
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ala Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Arg Gly Gly Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Phe Ile Ser Gly Thr Trp Tyr Pro Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 27
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 27
Glu Leu Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro
1 5 10 15
Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Arg Ser Asn Ile Gly
20 25 30
Ser Asn Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys
35 40 45
Leu Leu Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg
50 55 60
Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly
65 70 75 80
Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ser Trp Asp Gly
85 90 95
Ser Leu Ser Ala Val Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 28
<211> 122
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 28
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Arg Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ser Ile Tyr Pro Asp Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ser Ser Thr Val Asp Tyr Pro Gly Tyr Ser Tyr Phe Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 29
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 29
Glu Leu Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro
1 5 10 15
Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly
20 25 30
Ser Asn Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys
35 40 45
Leu Leu Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg
50 55 60
Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly
65 70 75 80
Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Asp
85 90 95
Ser Leu Gly Ser Pro Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 30
<211> 123
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 30
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Ala Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Asp Gly Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Ile Thr Ser Trp Tyr Tyr Gly Glu Pro Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 31
<211> 110
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 31
Glu Leu Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser
1 5 10 15
Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser
20 25 30
Arg Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Ile Leu Gln Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu
65 70 75 80
Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr
85 90 95
Thr Met Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 32
<211> 122
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 32
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Ser
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Gly Leu Ser Gln Ala Met Thr Gly Phe Gly Phe Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 33
<211> 113
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 33
Glu Leu Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro
1 5 10 15
Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly
20 25 30
Ser Asn Tyr Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys
35 40 45
Leu Leu Ile Tyr Gly Asp Tyr Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg
50 55 60
Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly
65 70 75 80
Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Thr Arg Asp Asp
85 90 95
Ser Leu Ser Gly Ser Val Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val
100 105 110
Leu
<210> 34
<211> 122
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 34
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Gly Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile His Pro Asp Asp Ser Asp Thr Lys Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ser Ser Tyr Leu Arg Gly Leu Trp Gly Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 35
<211> 110
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 35
Glu Leu Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser
1 5 10 15
Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Tyr
20 25 30
Asp Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu
65 70 75 80
Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Thr Thr
85 90 95
Pro Leu Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 36
<211> 126
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 36
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Pro Ser Ser
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Asp Thr Ser His Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ala Ser Tyr Phe Asp Arg Gly Thr Gly Tyr Ser Ser Trp Trp
100 105 110
Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 37
<211> 110
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 37
Glu Leu Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser
1 5 10 15
Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Gly
20 25 30
Arg Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Arg Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile His Gly Ala Thr Ser Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu
65 70 75 80
Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr
85 90 95
Thr Ser Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 38
<211> 123
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 38
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Gln Tyr
20 25 30
Ser Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Gly Gly Gly Val Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ser Asp Ile Ser Asp Ser Gly Gly Ser His Trp Tyr Phe Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 39
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 39
Glu Leu Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro
1 5 10 15
Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Thr Ser Asn Ile Gly
20 25 30
Arg Asn Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys
35 40 45
Leu Leu Ile Tyr Arg Thr Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg
50 55 60
Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly
65 70 75 80
Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp
85 90 95
Ser Leu Ser Gly Arg Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 40
<211> 121
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 40
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Thr Ile Ser Gly Thr Gly Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Val Arg Ala Gly Ile Asp Pro Thr Ala Ser Asp Val Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 41
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 41
Glu Leu Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro
1 5 10 15
Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly
20 25 30
Ser Asn Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys
35 40 45
Pro Leu Ile Tyr Met Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg
50 55 60
Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly
65 70 75 80
Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp
85 90 95
Ser Leu Ser Ala Val Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 42
<211> 124
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 42
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Asn Phe
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Gly Ser Gly Asp Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Arg Asp Ile Gly Leu Gly Trp Tyr Ser Tyr Tyr Leu Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 43
<211> 113
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 43
Glu Leu Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro
1 5 10 15
Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Asn Ser Asn Ile Gly
20 25 30
Thr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys
35 40 45
Leu Leu Ile Tyr Arg Ser Ser Arg Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg
50 55 60
Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly
65 70 75 80
Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Gly
85 90 95
Ser Leu Ser Gly His Trp Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val
100 105 110
Leu
<210> 44
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 44
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Glu Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Ser Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ala Gly Trp Asp Asp Ser Trp Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 45
<211> 110
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 45
Glu Leu Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser
1 5 10 15
Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asp
20 25 30
Thr Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Ser Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu
65 70 75 80
Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr
85 90 95
Thr Ala Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 46
<211> 122
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 46
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Ala Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Val Ile Tyr Pro Gly Thr Ser Glu Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Gly Leu Ser Ala Ser Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Gln Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 47
<211> 109
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 47
Glu Leu Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser
1 5 10 15
Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly
20 25 30
Gln Ser Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu
65 70 75 80
Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr
85 90 95
Pro Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 48
<211> 124
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 48
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Met Ile Ser Pro Gly Gly Ser Thr Thr Ile Tyr Arg Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Met Tyr Thr Gly Gly Tyr Gly Gly Ser Trp Tyr Phe Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 49
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 49
Ser Tyr Gly Phe Ser
1 5
<210> 50
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 50
Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
1 5
<210> 51
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 51
Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Phe Ser
1 5 10
<210> 52
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 52
Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Ser Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 53
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 53
Ile Pro Ile Phe Gly Ser
1 5
<210> 54
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 54
Gly Gly Ser Ser Ser Pro Phe Ala Tyr
1 5
<210> 55
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 55
Ser Tyr Gly Phe Ser
1 5
<210> 56
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 56
Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
1 5
<210> 57
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 57
Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Phe Ser
1 5 10
<210> 58
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 58
Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 59
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 59
Ile Pro Ile Phe Gly Thr
1 5
<210> 60
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 60
Gly Gly Ser Ser Ser Pro Phe Ala Tyr
1 5
<210> 61
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 61
Ser Tyr Tyr Trp Asn
1 5
<210> 62
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 62
Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
1 5
<210> 63
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 63
Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Asn
1 5 10
<210> 64
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 64
Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 65
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 65
Tyr Tyr Ser Gly Ser
1 5
<210> 66
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 66
Asp Ile Arg Thr Trp
1 5
<210> 67
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 67
Asn Ser Trp Met Ser
1 5
<210> 68
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 68
Gly Phe Thr Phe Arg Asn Ser
1 5
<210> 69
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 69
Gly Phe Thr Phe Arg Asn Ser Trp Met Ser
1 5 10
<210> 70
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 70
Asn Ile Lys Arg Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 71
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 71
Lys Arg Asp Gly Ser Glu
1 5
<210> 72
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 72
Asp Gln Thr Gly Ser Phe Asp Tyr
1 5
<210> 73
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 73
Val Tyr Tyr Trp Ser
1 5
<210> 74
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 74
Asp Asp Ser Ile Ser Val Tyr
1 5
<210> 75
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 75
Asp Asp Ser Ile Ser Val Tyr Tyr Trp Ser
1 5 10
<210> 76
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 76
Val Tyr Ser Ser Gly Asn Ile Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Glu Ser
1 5 10 15
<210> 77
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 77
Tyr Ser Ser Gly Asn
1 5
<210> 78
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 78
Gly Leu Asp Ala Phe Asp Ile
1 5
<210> 79
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 79
Ser Tyr Ala Met Ser
1 5
<210> 80
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 80
Gly Phe Thr Phe Thr Ser Tyr
1 5
<210> 81
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 81
Gly Phe Thr Phe Thr Ser Tyr Ala Met Ser
1 5 10
<210> 82
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 82
Arg Val Tyr Ser Ser Gly Asn Ile Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Glu Ser
1 5 10 15
<210> 83
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 83
Tyr Ser Ser Gly Asn
1 5
<210> 84
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 84
Gly Leu Asp Ala Phe Asp Ile
1 5
<210> 85
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 85
Thr Tyr Ala Ile Ser
1 5
<210> 86
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 86
Gly Gly Thr Phe Ile Thr Tyr
1 5
<210> 87
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 87
Gly Gly Thr Phe Ile Thr Tyr Ala Ile Ser
1 5 10
<210> 88
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 88
Gly Ile Ile Pro Phe Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 89
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 89
Ile Pro Phe Phe Gly Thr
1 5
<210> 90
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 90
Trp Glu Leu Phe Phe Phe Asp Phe
1 5
<210> 91
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 91
Tyr Tyr Ser Met Asn
1 5
<210> 92
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 92
Gly Phe Thr Phe Thr Tyr Tyr
1 5
<210> 93
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 93
Gly Phe Thr Phe Thr Tyr Tyr Ser Met Asn
1 5 10
<210> 94
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 94
His Ile Ser Ile Arg Ser Ser Thr Ile Tyr Phe Ala Asp Ser Ala Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 95
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 95
Ser Ile Arg Ser Ser Thr
1 5
<210> 96
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 96
Gly Ser Gly Trp Tyr Gly Asp Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 97
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 97
Asn Ala Arg Met Gly Val Thr
1 5
<210> 98
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 98
Gly Phe Ser Leu Ser Asn Ala Arg Met
1 5
<210> 99
<211> 12
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 99
Gly Phe Ser Leu Ser Asn Ala Arg Met Gly Val Thr
1 5 10
<210> 100
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 100
His Ile Phe Ser Asn Asp Glu Lys Ser Tyr Ser Thr Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 101
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 101
Phe Ser Asn Asp Glu
1 5
<210> 102
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 102
Ile Arg Asp Tyr Tyr Asp Ile Ser Ser Tyr Tyr Asp Tyr
1 5 10
<210> 103
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 103
Asn His Asn Ile His
1 5
<210> 104
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 104
Gly Phe Thr Phe Ser Asn His
1 5
<210> 105
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 105
Gly Phe Thr Phe Ser Asn His Asn Ile His
1 5 10
<210> 106
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 106
Tyr Ile Ser Arg Ser Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 107
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 107
Ser Arg Ser Ser Ser Thr
1 5
<210> 108
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 108
Asp His Ala Gln Trp Tyr Gly Met Asp Val
1 5 10
<210> 109
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 109
Ser Tyr Trp Met Ser
1 5
<210> 110
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 110
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
1 5
<210> 111
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 111
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Trp Met Ser
1 5 10
<210> 112
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 112
Ser Ile Lys Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 113
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 113
Lys Gln Asp Gly Ser Glu
1 5
<210> 114
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 114
Glu Gly Val Asn Trp Gly Trp Arg Leu Tyr Trp His Phe Asp Leu
1 5 10 15
<210> 115
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 115
Ser Tyr Ser Met Asn
1 5
<210> 116
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 116
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
1 5
<210> 117
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 117
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ser Met Asn
1 5 10
<210> 118
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 118
His Ser Ser Ile Ser Arg Gly Asn Ile Tyr Phe Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 119
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 119
Ser Ile Ser Arg Gly Asn
1 5
<210> 120
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 120
Gly Ser Gly Trp Tyr Gly Asp Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 121
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 121
Asn Tyr Ala Met Ser
1 5
<210> 122
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 122
Gly Phe Ala Phe Ser Asn Tyr
1 5
<210> 123
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 123
Gly Phe Ala Phe Ser Asn Tyr Ala Met Ser
1 5 10
<210> 124
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 124
Ala Ile Arg Gly Gly Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 125
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 125
Arg Gly Gly Gly Gly Ser
1 5
<210> 126
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 126
Asp Phe Ile Ser Gly Thr Trp Tyr Pro Asp Tyr
1 5 10
<210> 127
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 127
Ser Tyr Trp Ile Gly
1 5
<210> 128
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 128
Gly Tyr Arg Phe Thr Ser Tyr
1 5
<210> 129
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 129
Gly Tyr Arg Phe Thr Ser Tyr Trp Ile Gly
1 5 10
<210> 130
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 130
Ser Ile Tyr Pro Asp Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 131
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 131
Tyr Pro Asp Asp Ser Asp
1 5
<210> 132
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 132
Ser Thr Val Asp Tyr Pro Gly Tyr Ser Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 133
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 133
Asn Tyr Trp Ile Ala
1 5
<210> 134
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 134
Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
1 5
<210> 135
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 135
Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Trp Ile Ala
1 5 10
<210> 136
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 136
Ile Ile Tyr Pro Asp Gly Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 137
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 137
Tyr Pro Asp Gly Ser Asp
1 5
<210> 138
<211> 14
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 138
Asp Ile Thr Ser Trp Tyr Tyr Gly Glu Pro Ala Phe Asp Ile
1 5 10
<210> 139
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 139
Ser Ser Trp Ile Gly
1 5
<210> 140
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 140
Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Ser
1 5
<210> 141
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 141
Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Ser Trp Ile Gly
1 5 10
<210> 142
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 142
Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 143
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 143
Tyr Pro Gly Asp Ser Asp
1 5
<210> 144
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 144
Gly Leu Ser Gln Ala Met Thr Gly Phe Gly Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 145
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 145
Ser Tyr Trp Ile Gly
1 5
<210> 146
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 146
Gly Tyr Gly Phe Thr Ser Tyr
1 5
<210> 147
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 147
Gly Tyr Gly Phe Thr Ser Tyr Trp Ile Gly
1 5 10
<210> 148
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 148
Ile Ile His Pro Asp Asp Ser Asp Thr Lys Tyr Ser Pro Ser Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 149
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 149
His Pro Asp Asp Ser Asp
1 5
<210> 150
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 150
Ser Tyr Leu Arg Gly Leu Trp Gly Gly Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 151
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 151
Ser Ser Trp Ile Gly
1 5
<210> 152
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 152
Gly Tyr Thr Phe Pro Ser Ser
1 5
<210> 153
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 153
Gly Tyr Thr Phe Pro Ser Ser Trp Ile Gly
1 5 10
<210> 154
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 154
Ile Ile Tyr Pro Asp Thr Ser His Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe Gln
1 5 10 15
<210> 155
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 155
Tyr Pro Asp Thr Ser His
1 5
<210> 156
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 156
Ala Ser Tyr Phe Asp Arg Gly Thr Gly Tyr Ser Ser Trp Trp Met Asp
1 5 10 15
Val
<210> 157
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 157
Gln Tyr Ser Met Ser
1 5
<210> 158
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 158
Gly Phe Thr Phe Ser Gln Tyr
1 5
<210> 159
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 159
Gly Phe Thr Phe Ser Gln Tyr Ser Met Ser
1 5 10
<210> 160
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 160
Ala Ile Ser Gly Gly Gly Val Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 161
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 161
Ser Gly Gly Gly Val Ser
1 5
<210> 162
<211> 14
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 162
Asp Ile Ser Asp Ser Gly Gly Ser His Trp Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 163
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 163
Ser Tyr Ala Met Ser
1 5
<210> 164
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 164
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
1 5
<210> 165
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 165
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met Ser
1 5 10
<210> 166
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 166
Thr Ile Ser Gly Thr Gly Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 167
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 167
Ser Gly Thr Gly Gly Thr
1 5
<210> 168
<211> 12
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 168
Val Arg Ala Gly Ile Asp Pro Thr Ala Ser Asp Val
1 5 10
<210> 169
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 169
Asn Phe Ala Met Ser
1 5
<210> 170
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 170
Gly Phe Thr Phe Asn Asn Phe
1 5
<210> 171
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 171
Gly Phe Thr Phe Asn Asn Phe Ala Met Ser
1 5 10
<210> 172
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 172
Gly Ile Ser Gly Ser Gly Asp Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 173
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 173
Ser Gly Ser Gly Asp Asn
1 5
<210> 174
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 174
Asp Arg Asp Ile Gly Leu Gly Trp Tyr Ser Tyr Tyr Leu Asp Val
1 5 10 15
<210> 175
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 175
Ser Tyr Ala Ile Ser
1 5
<210> 176
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 176
Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
1 5
<210> 177
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 177
Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser
1 5 10
<210> 178
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 178
Glu Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Ser Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 179
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 179
Ile Pro Ile Phe Gly Thr
1 5
<210> 180
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 180
Ala Gly Trp Asp Asp Ser Trp Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 181
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 181
Ser Tyr Trp Ile Gly
1 5
<210> 182
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 182
Gly Tyr Ser Phe Ala Ser Tyr
1 5
<210> 183
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 183
Gly Tyr Ser Phe Ala Ser Tyr Trp Ile Gly
1 5 10
<210> 184
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 184
Val Ile Tyr Pro Gly Thr Ser Glu Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 185
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 185
Tyr Pro Gly Thr Ser Glu
1 5
<210> 186
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 186
Gly Leu Ser Ala Ser Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Gln Tyr
1 5 10
<210> 187
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 187
Asp Tyr Trp Ile Gly
1 5
<210> 188
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 188
Gly Tyr Ser Phe Thr Asp Tyr
1 5
<210> 189
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 189
Gly Tyr Ser Phe Thr Asp Tyr Trp Ile Gly
1 5 10
<210> 190
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 190
Met Ile Ser Pro Gly Gly Ser Thr Thr Ile Tyr Arg Pro Ser Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 191
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 191
Ser Pro Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 192
<211> 14
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 192
Met Tyr Thr Gly Gly Tyr Gly Gly Ser Trp Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 193
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 193
Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser Asp Gly Asn Thr Tyr Leu Ser
1 5 10 15
<210> 194
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 194
Lys Ile Ser Asn Arg Phe Ser
1 5
<210> 195
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 195
Met Gln Ala Thr Gln Phe Pro Leu Thr
1 5
<210> 196
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 196
Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser Asp Gly Asn Thr Tyr Leu Ser
1 5 10 15
<210> 197
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 197
Lys Ile Ser Asn Arg Phe Ser
1 5
<210> 198
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 198
Met Gln Ala Thr Gln Phe Pro Leu Thr
1 5
<210> 199
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 199
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 200
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 200
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 201
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 201
Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu Thr
1 5
<210> 202
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 202
Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val Tyr Ser Asp Glu Asn Thr Tyr Leu Asn
1 5 10 15
<210> 203
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 203
Gln Val Ser Asn Arg Asp Ser
1 5
<210> 204
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 204
Met Gln Gly Thr Tyr Trp Pro Pro Thr
1 5
<210> 205
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 205
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser Leu Ala
1 5 10
<210> 206
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 206
Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr
1 5
<210> 207
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 207
Gln Gln Tyr Ile Asn Trp Pro His
1 5
<210> 208
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 208
Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 209
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 209
Gly Ala Ser Asn Leu Glu Thr
1 5
<210> 210
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 210
Gln Gln Tyr Asp Asn Phe Pro Ile Thr
1 5
<210> 211
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 211
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn Leu Ala
1 5 10
<210> 212
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 212
Ser Ala Ser Thr Arg Ala Ser
1 5
<210> 213
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 213
Gln Gln Tyr Asp Asn Trp Pro Pro Leu Thr
1 5 10
<210> 214
<211> 12
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 214
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 215
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 215
Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr
1 5
<210> 216
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 216
Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Leu Thr
1 5
<210> 217
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 217
Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 218
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 218
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 219
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 219
Leu Gln Leu Asn Ser Phe Pro Phe Thr
1 5
<210> 220
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 220
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp Leu Ala
1 5 10
<210> 221
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 221
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 222
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 222
Gln Gln Ala Phe Ser Phe Pro Phe Thr
1 5
<210> 223
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 223
Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser Tyr Asn Asn Lys Asn Tyr Val
1 5 10 15
Ala
<210> 224
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 224
Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser
1 5
<210> 225
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 225
Gln Gln Tyr Tyr Ser Thr Leu Thr
1 5
<210> 226
<211> 12
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 226
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 227
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 227
Asp Ala Ser Ser Arg Ala Thr
1 5
<210> 228
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 228
Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Leu Thr
1 5
<210> 229
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 229
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Tyr Val Tyr
1 5 10
<210> 230
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 230
Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser
1 5
<210> 231
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 231
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Val Val
1 5 10
<210> 232
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 232
Ser Gly Ser Arg Ser Asn Ile Gly Ser Asn Tyr Val Tyr
1 5 10
<210> 233
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 233
Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser
1 5
<210> 234
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 234
Ala Ser Trp Asp Gly Ser Leu Ser Ala Val Val
1 5 10
<210> 235
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 235
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Tyr Val Tyr
1 5 10
<210> 236
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 236
Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser
1 5
<210> 237
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 237
Ala Thr Trp Asp Asp Ser Leu Gly Ser Pro Val
1 5 10
<210> 238
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 238
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Arg Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 239
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 239
Ala Ala Ser Ile Leu Gln Thr
1 5
<210> 240
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 240
Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Thr Met Trp Thr
1 5 10
<210> 241
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 241
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Tyr Val Asn
1 5 10
<210> 242
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 242
Gly Asp Tyr Gln Arg Pro Ser
1 5
<210> 243
<211> 12
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 243
Ala Thr Arg Asp Asp Ser Leu Ser Gly Ser Val Val
1 5 10
<210> 244
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 244
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Tyr Asp Tyr Leu His
1 5 10
<210> 245
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 245
Asp Ala Ser Asn Leu Gln Ser
1 5
<210> 246
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 246
Gln Gln Ser Tyr Thr Thr Pro Leu Phe Thr
1 5 10
<210> 247
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 247
Arg Ala Ser Gln Tyr Ile Gly Arg Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 248
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 248
Gly Ala Thr Ser Leu Ala Ser
1 5
<210> 249
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 249
Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Thr Ser Pro Thr
1 5 10
<210> 250
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 250
Ser Gly Ser Thr Ser Asn Ile Gly Arg Asn Tyr Val Tyr
1 5 10
<210> 251
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 251
Arg Thr Asn Gln Arg Pro Ser
1 5
<210> 252
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 252
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Arg Val
1 5 10
<210> 253
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 253
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Tyr Val Tyr
1 5 10
<210> 254
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 254
Met Asn Asn Gln Arg Pro Ser
1 5
<210> 255
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 255
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Ala Val Val
1 5 10
<210> 256
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 256
Ser Gly Ser Asn Ser Asn Ile Gly Thr Asn Tyr Val Ser
1 5 10
<210> 257
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 257
Arg Ser Ser Arg Arg Pro Ser
1 5
<210> 258
<211> 12
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 258
Ala Ala Trp Asp Gly Ser Leu Ser Gly His Trp Val
1 5 10
<210> 259
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 259
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asp Thr Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 260
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 260
Ser Ala Ser Ser Leu His Ser
1 5
<210> 261
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 261
Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Thr Ala Trp Thr
1 5 10
<210> 262
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 262
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Gln Ser Leu Asn
1 5 10
<210> 263
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 263
Gly Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 264
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 264
Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile Thr
1 5
<210> 265
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 265
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Phe Asn Val
20 25 30
Arg Ser Arg Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Ser Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Lys Gln
85 90 95
Ser Tyr Asp Leu Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 266
<211> 121
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 266
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Phe Ile Arg Asn Arg Ala Arg Gly Tyr Thr Ser Asp His Asn Pro
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Ala Arg Asp Arg Pro Ser Tyr Tyr Val Leu Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 267
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 267
Ser Asp Tyr Tyr Met Thr
1 5
<210> 268
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 268
Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
1 5
<210> 269
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 269
Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Tyr Met Thr
1 5 10
<210> 270
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 270
Arg Asn Arg Ala Arg Gly Tyr Thr
1 5
<210> 271
<211> 19
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 271
Phe Ile Arg Asn Arg Ala Arg Gly Tyr Thr Ser Asp His Asn Pro Ser
1 5 10 15
Val Lys Gly
<210> 272
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 272
Asp Arg Pro Ser Tyr Tyr Val Leu Asp Tyr
1 5 10
<210> 273
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 273
Lys Ser Ser Gln Ser Leu Phe Asn Val Arg Ser Arg Lys Asn Tyr Leu
1 5 10 15
Ala
<210> 274
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 274
Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser
1 5
<210> 275
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 275
Lys Gln Ser Tyr Asp Leu Phe Thr
1 5
<210> 276
<211> 336
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полинуклеотид"
<400> 276
gacattgtga tgactcaatc ccccgactcc ctggctgtgt ccctcggcga acgcgcaact
60
atcaactgta aaagcagcca gtccctgttc aacgtccggt cgaggaagaa ctacctggcc
120
tggtatcagc agaaacctgg gcagccgccg aagcttctga tctcatgggc ctcaactcgg
180
gaaagcggag tgccagatag attctccgga tctggctccg gaaccgactt caccctgacg
240
atttcgagct tgcaagcgga ggatgtggcc gtgtactact gcaagcagtc ctacgacctc
300
ttcacctttg gttcgggcac caagctggag atcaaa
336
<210> 277
<211> 363
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полинуклеотид"
<400> 277
gaagtccaac ttgtcgaatc gggaggaggc cttgtgcaac ccggtggatc cctgaggctg
60
tcatgcgcgg cctcgggctt caccttttcc gattactaca tgacctgggt cagacaggcc
120
cctggaaagg ggttggaatg ggtggcattc atccggaata gagcccgcgg atacacttcc
180
gaccacaacc ccagcgtgaa ggggcggttc accattagcc gcgacaacgc caagaactcc
240
ctctacctcc aaatgaacag cctgcgggcg gaggataccg ctgtgtacta ctgcgcccgc
300
gaccggccgt cctactatgt gctggactac tggggccagg gtactacggt caccgtctcc
360
tca
363
<210> 278
<211> 193
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 278
Met Pro Glu Glu Gly Ser Gly Cys Ser Val Arg Arg Arg Pro Tyr Gly
1 5 10 15
Cys Val Leu Arg Ala Ala Leu Val Pro Leu Val Ala Gly Leu Val Ile
20 25 30
Cys Leu Val Val Cys Ile Gln Arg Phe Ala Gln Ala Gln Gln Gln Leu
35 40 45
Pro Leu Glu Ser Leu Gly Trp Asp Val Ala Glu Leu Gln Leu Asn His
50 55 60
Thr Gly Pro Gln Gln Asp Pro Arg Leu Tyr Trp Gln Gly Gly Pro Ala
65 70 75 80
Leu Gly Arg Ser Phe Leu His Gly Pro Glu Leu Asp Lys Gly Gln Leu
85 90 95
Arg Ile His Arg Asp Gly Ile Tyr Met Val His Ile Gln Val Thr Leu
100 105 110
Ala Ile Cys Ser Ser Thr Thr Ala Ser Arg His His Pro Thr Thr Leu
115 120 125
Ala Val Gly Ile Cys Ser Pro Ala Ser Arg Ser Ile Ser Leu Leu Arg
130 135 140
Leu Ser Phe His Gln Gly Cys Thr Ile Ala Ser Gln Arg Leu Thr Pro
145 150 155 160
Leu Ala Arg Gly Asp Thr Leu Cys Thr Asn Leu Thr Gly Thr Leu Leu
165 170 175
Pro Ser Arg Asn Thr Asp Glu Thr Phe Phe Gly Val Gln Trp Val Arg
180 185 190
Pro
<210> 279
<211> 255
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 279
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
115 120 125
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
130 135 140
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
145 150 155 160
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
165 170 175
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
180 185 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
195 200 205
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
<210> 280
<211> 255
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 280
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
225 230 235 240
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe
245 250 255
<210> 281
<211> 255
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 281
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser
245 250 255
<210> 282
<211> 326
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 282
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Arg Val Arg Cys Pro Arg Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
115 120 125
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ala
130 135 140
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
145 150 155 160
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
165 170 175
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
180 185 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
195 200 205
Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
245 250 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
260 265 270
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg
275 280 285
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
290 295 300
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
305 310 315 320
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325
<210> 283
<211> 255
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полинуклеотид"
<400> 283
gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag
60
agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg
120
tggaactcag gcgctctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca
180
ggactctact ccctcagcag cgtagtgacc gtgccctcca gcaacttcgg cacccagacc
240
tacacctgca acgta
255
<210> 284
<211> 326
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 284
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Glu Val Glu Cys Pro Glu Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
115 120 125
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ala
130 135 140
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
145 150 155 160
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
165 170 175
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
180 185 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
195 200 205
Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Glu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
245 250 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
260 265 270
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
275 280 285
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
290 295 300
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
305 310 315 320
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325
<210> 285
<211> 255
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полинуклеотид"
<400> 285
gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag
60
agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg
120
tggaactcag gcgctctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca
180
ggactctact ccctcagcag cgtagtgacc gtgccctcca gcaacttcgg cacccagacc
240
tacacctgca acgta
255
<210> 286
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 286
Gly Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 287
<211> 255
<212> ДНК
<213> Homo sapiens
<400> 287
ggaactgtgg ctgcaccatc tgtcttcatc ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct
60
ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat aacttctatc ccagagaggc caaagtacag
120
tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt aactcccagg agagtgtcac agagcaggac
180
agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc accctgacgc tgagcaaagc agactacgag
240
aaacacaaag tctac
255
<210> 288
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 288
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Thr Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Val Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Ile Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Ser Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Lys Ser Tyr Ser His
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 289
<211> 118
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 289
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Tyr Tyr
20 25 30
Tyr Trp Thr Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly His Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn Leu Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Ala Glu Gly Ser Leu Asp Ala Phe Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Met Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 290
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 290
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Val Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Lys Ser Phe Ser Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 291
<211> 113
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 291
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Ile Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Ser Asn
20 25 30
Tyr Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Val Ile Tyr Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asn Trp Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
100 105 110
Ser
<210> 292
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 292
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Val Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Ser Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly His Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 293
<211> 118
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 293
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gly
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Asp Tyr Tyr
20 25 30
Phe Trp Asn Trp Phe Arg Gln Ser Pro Val Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly His Val Tyr Asp Ile Gly Asn Thr Lys Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Glu Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Gly Glu Gly Ala Leu Asp Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Met Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 294
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 294
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ile Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Val Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Thr Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Thr Tyr Ser His
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 295
<211> 118
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 295
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Asn Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Tyr Tyr
20 25 30
Tyr Trp Thr Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly His Val Ile Tyr Ser Gly Thr Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val
85 90 95
Arg Ala Glu Gly Ser Leu Asp Ala Phe Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Met Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 296
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 296
Ala Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Asp Tyr Asn Tyr Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 297
<211> 120
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 297
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Gly Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Met Gly Gln Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Ile Lys Lys Tyr Ser Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn Ser Glu Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Gly Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Glu Val Gly Thr Phe Gly Ala Phe Asp Phe Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Lys Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 298
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 298
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Ser Ile Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asp Asn Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Thr Gly Lys Val Pro Lys Val Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ala Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Tyr Asn Ser Gly Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 299
<211> 118
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 299
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Leu Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Asp
20 25 30
Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Asn Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Met Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Thr Arg Asp Phe Gly Trp Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 300
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 300
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Arg Val Pro Glu Val Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ala Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Tyr Asn Ser Ala Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 301
<211> 118
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 301
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Thr Cys Ser Val Ser Gly Gly Ser Val Ser Ser Asp
20 25 30
Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Arg Arg Ile Thr Asp Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Asn Ile Ser Leu Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Phe Gly Trp Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr
100 105 110
Leu Val Ala Val Ser Ser
115
<210> 302
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 302
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Val Leu Ile Leu Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Val Ser Ala Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Met Gln Ala Glu Asp Val Gly Ile Tyr Tyr Cys Met Gln Thr
85 90 95
Leu Gln Thr Pro Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 303
<211> 122
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 303
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr
20 25 30
Tyr Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Thr Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ile Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Arg Gly Val Thr Met Ile Val Asp Gly Met Asp Asp Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 304
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 304
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ile Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Asn Ser His
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Ala Ser Thr Leu Pro Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Val Thr Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn His Tyr Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Asp Ile Asn
100 105
<210> 305
<211> 120
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 305
Glu Val Glu Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Met Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Met Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Thr Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Val Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Glu Val Gly Phe Val Gly Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 306
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 306
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 307
<211> 118
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 307
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Asp
20 25 30
Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Met Tyr Tyr Ser Gly Ile Thr Tyr His Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Phe Gly Trp Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 308
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 308
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Ala Tyr Tyr Cys Gln Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 309
<211> 118
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 309
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Asp
20 25 30
Ala Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Met Tyr Tyr Ser Gly Ile Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Phe Gly Trp Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 310
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 310
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Ser Phe
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Val Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Val Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Val Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu His Val Tyr Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Arg
100 105
<210> 311
<211> 120
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 311
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Gly Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Met Gly Gln Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Ile Lys Lys Tyr Ser Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn Ser Glu Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Gly Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Glu Val Gly Thr Phe Gly Ala Phe Asp Phe Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Lys Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 312
<211> 113
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 312
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser
20 25 30
Asp Asp Gly Asn Thr Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Thr Leu Ser Tyr Arg Ala Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys
65 70 75 80
Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln
85 90 95
Arg Ile Glu Phe Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile
100 105 110
Lys
<210> 313
<211> 122
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 313
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Ala
20 25 30
Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Arg Ile Lys Ser Lys Thr Gly Gly Gly Thr Thr Asp Tyr Ala Ala
50 55 60
Pro Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Thr Ser Leu Ile Val Gly Ala Ile Ser Leu Phe Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 314
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 314
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ala Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ala Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Thr Ile Ser Thr Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Val Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gln Thr Phe Ser His
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 315
<211> 118
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 315
Gln Val Gln Leu Arg Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Ile Ser Gly Gly Ser Ile Ser Tyr Tyr
20 25 30
Phe Trp Thr Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Gln Ile Tyr Tyr Ser Gly Asn Thr Asn Ser Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Thr Ser Val Thr Val Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val
85 90 95
Arg Ala Glu Gly Ser Leu Asp Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Met Val Ala Val Ser Ser
115
<210> 316
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 316
Asp Met Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Leu Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Phe Gln Leu Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ala Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 317
<211> 122
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 317
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Phe Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Thr Ser Ser Asn Tyr Ile His Tyr Ala Asp Ser Leu
50 55 60
Gln Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Val Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Arg Asp Lys Gly Thr Thr Leu Thr Asn Trp Tyr Phe Asp Leu Trp
100 105 110
Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 318
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 318
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Thr Leu Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asn Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Met Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Ala
85 90 95
Ile Gln Thr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Asn Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 319
<211> 121
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 319
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Gly Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Leu
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gly Tyr Ser Gly Ser Ser Asp Ala Phe Asp Ile Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 320
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 320
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Val Leu Ile
35 40 45
Tyr Lys Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Ser Cys
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 321
<211> 118
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 321
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Gln Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Tyr Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Asn Ile Asn Tyr Met Gly Asn Thr Ile Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asp Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Thr Ser Val Ser Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val
85 90 95
Arg Ala Glu Gly Ser Leu Asp Ala Phe Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Ala Val Ser Leu
115
<210> 322
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 322
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Ile Ile Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Tyr
20 25 30
Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asp Trp Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp His Leu Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 323
<211> 123
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 323
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Thr Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Gly Tyr
20 25 30
Tyr Ile Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Pro Ser Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Ala Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Arg Lys Arg Glu Tyr Tyr Tyr Asn Phe Gly Met Asp Val
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Thr
115 120
<210> 324
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 324
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ile Leu Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asp Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Ala Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Asn Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp His Leu Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 325
<211> 123
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 325
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Thr Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser His
20 25 30
Tyr Ile Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Asp Arg Val Thr Met Ala Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Arg Lys Arg Glu Tyr Tyr Tyr Asn Phe Gly Met Asp Val
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ala
115 120
<210> 326
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 326
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ile Leu Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asp Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Ala Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Asn Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp His Leu Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 327
<211> 123
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 327
Gln Val Gln Leu Val Gln Phe Gly Val Glu Val Arg Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Phe Thr Phe Thr Ser His
20 25 30
Tyr Ile Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Lys Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Asp Arg Val Thr Met Ala Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ser Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Lys Asp Arg Lys Arg Glu Tyr Tyr Tyr Asn Phe Gly Met Asp Val
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 328
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 328
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Asn Leu Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 329
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 329
Glu Val Gln Met Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Ile Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Lys Thr Ser Gly Phe Thr Leu Ser Ile Tyr
20 25 30
Ala Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Phe Gly Gly Arg Gly Ser Ser Thr Tyr Phe Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ala Ser Glu Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu His Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Glu Lys Asp Trp Gly Arg Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 330
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 330
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser
20 25 30
Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Phe Leu Asn Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Phe Cys Met Gln Ala
85 90 95
Leu Gln Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 331
<211> 122
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
полипептид"
<400> 331
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Ser Ser Thr Ile Tyr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Ile Gly Trp Glu Val Phe Thr Leu Gly Phe Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 332
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 332
Tyr Tyr Tyr Trp Thr
1 5
<210> 333
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 333
Gly Gly Ser Ile Ser Tyr Tyr
1 5
<210> 334
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 334
Gly Gly Ser Ile Ser Tyr Tyr Tyr Trp Thr
1 5 10
<210> 335
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 335
His Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 336
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 336
Tyr Tyr Ser Gly Ser
1 5
<210> 337
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 337
Ala Glu Gly Ser Leu Asp Ala Phe Asp Phe
1 5 10
<210> 338
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 338
Ser Asn Tyr Met Thr
1 5
<210> 339
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 339
Gly Phe Thr Val Ser Ser Asn
1 5
<210> 340
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 340
Gly Phe Thr Val Ser Ser Asn Tyr Met Thr
1 5 10
<210> 341
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 341
Val Ile Tyr Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly
1 5 10 15
<210> 342
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 342
Tyr Ser Gly Gly Ser
1 5
<210> 343
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 343
Asn Trp Gly Asp Tyr Trp
1 5
<210> 344
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 344
Tyr Tyr Phe Trp Asn
1 5
<210> 345
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 345
Gly Gly Ser Ile Asp Tyr Tyr
1 5
<210> 346
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 346
Gly Gly Ser Ile Asp Tyr Tyr Phe Trp Asn
1 5 10
<210> 347
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 347
His Val Tyr Asp Ile Gly Asn Thr Lys Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 348
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 348
Tyr Asp Ile Gly Asn
1 5
<210> 349
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 349
Gly Glu Gly Ala Leu Asp Ala Phe Asp Ile
1 5 10
<210> 350
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 350
Tyr Tyr Tyr Trp Thr
1 5
<210> 351
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 351
Gly Gly Ser Ile Ser Tyr Tyr
1 5
<210> 352
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 352
Gly Gly Ser Ile Ser Tyr Tyr Tyr Trp Thr
1 5 10
<210> 353
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 353
His Val Ile Tyr Ser Gly Thr Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 354
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 354
Ile Tyr Ser Gly Thr
1 5
<210> 355
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 355
Ala Glu Gly Ser Leu Asp Ala Phe Asp Leu
1 5 10
<210> 356
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 356
Asp Tyr Gly Ile His
1 5
<210> 357
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 357
Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
1 5
<210> 358
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 358
Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Gly Ile His
1 5 10
<210> 359
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 359
Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Ile Lys Lys Tyr Ser Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 360
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 360
Trp Tyr Asp Gly Ser Ile
1 5
<210> 361
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 361
Asp Glu Val Gly Thr Phe Gly Ala Phe Asp Phe
1 5 10
<210> 362
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 362
Ser Asp Gly Tyr Tyr Trp Ser
1 5
<210> 363
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 363
Gly Gly Ser Ile Ser Ser Asp Gly Tyr
1 5
<210> 364
<211> 12
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 364
Gly Gly Ser Ile Ser Ser Asp Gly Tyr Tyr Trp Ser
1 5 10
<210> 365
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 365
Tyr Met Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 366
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 366
Tyr Tyr Ser Gly Ser
1 5
<210> 367
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 367
Asp Phe Gly Trp Tyr Phe Asp Leu
1 5
<210> 368
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 368
Ser Asp Gly Tyr Tyr Trp Ser
1 5
<210> 369
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 369
Gly Gly Ser Val Ser Ser Asp Gly Tyr
1 5
<210> 370
<211> 12
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 370
Gly Gly Ser Val Ser Ser Asp Gly Tyr Tyr Trp Ser
1 5 10
<210> 371
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 371
Tyr Ile Tyr Tyr Arg Arg Ile Thr Asp Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 372
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 372
Tyr Tyr Arg Arg Ile
1 5
<210> 373
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 373
Asp Phe Gly Trp Tyr Phe Asp Leu
1 5
<210> 374
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 374
Gly Tyr Tyr Leu His
1 5
<210> 375
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 375
Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr
1 5
<210> 376
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 376
Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr Tyr Leu His
1 5 10
<210> 377
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 377
Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 378
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 378
Asn Pro Asn Ser Gly Gly
1 5
<210> 379
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 379
Asp Arg Gly Val Thr Met Ile Val Asp Gly Met Asp Asp
1 5 10
<210> 380
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 380
Asp Tyr Gly Met His
1 5
<210> 381
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 381
Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
1 5
<210> 382
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 382
Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Gly Met His
1 5 10
<210> 383
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 383
Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 384
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 384
Trp Tyr Asp Gly Ser Asn
1 5
<210> 385
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 385
Asp Glu Val Gly Phe Val Gly Ala Phe Asp Ile
1 5 10
<210> 386
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 386
Ser Asp Gly Tyr Tyr Trp Ser
1 5
<210> 387
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 387
Gly Gly Ser Ile Ser Ser Asp Gly Tyr
1 5
<210> 388
<211> 12
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 388
Gly Gly Ser Ile Ser Ser Asp Gly Tyr Tyr Trp Ser
1 5 10
<210> 389
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 389
Tyr Met Tyr Tyr Ser Gly Ile Thr Tyr His Asn Pro Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 390
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 390
Tyr Tyr Ser Gly Ile
1 5
<210> 391
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 391
Asp Phe Gly Trp Tyr Phe Asp Leu
1 5
<210> 392
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 392
Ser Asp Ala Tyr Tyr Trp Ser
1 5
<210> 393
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 393
Gly Gly Ser Ile Ser Ser Asp Ala Tyr
1 5
<210> 394
<211> 12
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 394
Gly Gly Ser Ile Ser Ser Asp Ala Tyr Tyr Trp Ser
1 5 10
<210> 395
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 395
Tyr Met Tyr Tyr Ser Gly Ile Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 396
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 396
Tyr Tyr Ser Gly Ile
1 5
<210> 397
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 397
Asp Phe Gly Trp Tyr Phe Asp Leu
1 5
<210> 398
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 398
Asp Tyr Gly Ile His
1 5
<210> 399
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 399
Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
1 5
<210> 400
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 400
Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Gly Ile His
1 5 10
<210> 401
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 401
Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Ile Lys Lys Tyr Ser Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 402
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 402
Trp Tyr Asp Gly Ser Ile
1 5
<210> 403
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 403
Asp Glu Val Gly Thr Phe Gly Ala Phe Asp Phe
1 5 10
<210> 404
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 404
Asn Ala Trp Met Ser
1 5
<210> 405
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 405
Gly Phe Thr Phe Ser Asn Ala
1 5
<210> 406
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 406
Gly Phe Thr Phe Ser Asn Ala Trp Met Ser
1 5 10
<210> 407
<211> 19
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 407
Arg Ile Lys Ser Lys Thr Gly Gly Gly Thr Thr Asp Tyr Ala Ala Pro
1 5 10 15
Val Lys Gly
<210> 408
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 408
Lys Ser Lys Thr Gly Gly Gly Thr
1 5
<210> 409
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 409
Leu Ile Val Gly Ala Ile Ser Leu Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 410
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 410
Tyr Tyr Phe Trp Thr
1 5
<210> 411
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 411
Gly Gly Ser Ile Ser Tyr Tyr
1 5
<210> 412
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 412
Gly Gly Ser Ile Ser Tyr Tyr Phe Trp Thr
1 5 10
<210> 413
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 413
Gln Ile Tyr Tyr Ser Gly Asn Thr Asn Ser Asn Pro Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 414
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 414
Tyr Tyr Ser Gly Asn
1 5
<210> 415
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 415
Ala Glu Gly Ser Leu Asp Ala Phe Asp Ile
1 5 10
<210> 416
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 416
Ser Tyr Ser Met Asn
1 5
<210> 417
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 417
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
1 5
<210> 418
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 418
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ser Met Asn
1 5 10
<210> 419
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 419
Ser Ile Ser Thr Ser Ser Asn Tyr Ile His Tyr Ala Asp Ser Leu Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 420
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 420
Ser Thr Ser Ser Asn Tyr
1 5
<210> 421
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 421
Asp Lys Gly Thr Thr Leu Thr Asn Trp Tyr Phe Asp Leu
1 5 10
<210> 422
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 422
Ser Tyr Gly Met His
1 5
<210> 423
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 423
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
1 5
<210> 424
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 424
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His
1 5 10
<210> 425
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 425
Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Leu Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 426
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 426
Trp Tyr Asp Gly Ser Asn
1 5
<210> 427
<211> 12
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 427
Asp Gly Tyr Ser Gly Ser Ser Asp Ala Phe Asp Ile
1 5 10
<210> 428
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 428
Tyr Tyr Tyr Trp Ser
1 5
<210> 429
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 429
Gly Gly Ser Ile Ser Tyr Tyr
1 5
<210> 430
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 430
Gly Gly Ser Ile Ser Tyr Tyr Tyr Trp Ser
1 5 10
<210> 431
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 431
Asn Ile Asn Tyr Met Gly Asn Thr Ile Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 432
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 432
Asn Tyr Met Gly Asn
1 5
<210> 433
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 433
Ala Glu Gly Ser Leu Asp Ala Phe Asp Phe
1 5 10
<210> 434
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 434
Gly Tyr Tyr Ile Tyr
1 5
<210> 435
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 435
Gly Tyr Ile Phe Thr Gly Tyr
1 5
<210> 436
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 436
Gly Tyr Ile Phe Thr Gly Tyr Tyr Ile Tyr
1 5 10
<210> 437
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 437
Trp Ile Asn Pro Ser Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 438
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 438
Asn Pro Ser Ser Gly Gly
1 5
<210> 439
<211> 14
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 439
Asp Arg Lys Arg Glu Tyr Tyr Tyr Asn Phe Gly Met Asp Val
1 5 10
<210> 440
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 440
Ser His Tyr Ile Tyr
1 5
<210> 441
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 441
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser His
1 5
<210> 442
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 442
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser His Tyr Ile Tyr
1 5 10
<210> 443
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 443
Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Asp
<210> 444
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 444
Asn Pro Asn Ser Gly Gly
1 5
<210> 445
<211> 14
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 445
Asp Arg Lys Arg Glu Tyr Tyr Tyr Asn Phe Gly Met Asp Val
1 5 10
<210> 446
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 446
Ser His Tyr Ile Tyr
1 5
<210> 447
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 447
Gly Phe Thr Phe Thr Ser His
1 5
<210> 448
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 448
Gly Phe Thr Phe Thr Ser His Tyr Ile Tyr
1 5 10
<210> 449
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 449
Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Lys Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Asp
<210> 450
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 450
Asn Pro Asn Ser Gly Gly
1 5
<210> 451
<211> 14
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 451
Asp Arg Lys Arg Glu Tyr Tyr Tyr Asn Phe Gly Met Asp Val
1 5 10
<210> 452
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 452
Ile Tyr Ala Ile His
1 5
<210> 453
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 453
Gly Phe Thr Leu Ser Ile Tyr
1 5
<210> 454
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 454
Gly Phe Thr Leu Ser Ile Tyr Ala Ile His
1 5 10
<210> 455
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 455
Ser Phe Gly Gly Arg Gly Ser Ser Thr Tyr Phe Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 456
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 456
Gly Gly Arg Gly Ser Ser
1 5
<210> 457
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 457
Glu Lys Asp Trp Gly Arg Gly Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 458
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 458
Asn Tyr Ser Met Asn
1 5
<210> 459
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 459
Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
1 5
<210> 460
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 460
Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ser Met Asn
1 5 10
<210> 461
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 461
Ser Ile Ser Ser Ser Thr Ile Tyr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 462
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 462
Ser Ser Ser Thr Ile Tyr
1 5
<210> 463
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 463
Asp Ile Gly Trp Glu Val Phe Thr Leu Gly Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 464
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 464
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Thr Trp Leu Ala
1 5 10
<210> 465
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 465
Lys Ala Ser Ser Leu Glu Ser
1 5
<210> 466
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 466
Gln Gln Tyr Lys Ser Tyr Ser His Thr
1 5
<210> 467
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 467
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Trp Leu Ala
1 5 10
<210> 468
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 468
Lys Ala Ser Ser Leu Glu Ser
1 5
<210> 469
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 469
Gln Gln Tyr Lys Ser Phe Ser Leu Thr
1 5
<210> 470
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 470
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Trp Leu Ala
1 5 10
<210> 471
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 471
Lys Ala Ser Thr Leu Glu Ser
1 5
<210> 472
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 472
Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Ser Tyr Thr
1 5
<210> 473
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 473
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Trp Leu Ala
1 5 10
<210> 474
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 474
Lys Ala Ser Ser Leu Glu Ser
1 5
<210> 475
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 475
Gln Gln Tyr Asn Thr Tyr Ser His Thr
1 5
<210> 476
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 476
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp Leu Gly
1 5 10
<210> 477
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 477
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 478
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 478
Leu Gln Asp Tyr Asn Tyr Pro Phe Thr
1 5
<210> 479
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 479
Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asp Asn Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 480
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 480
Ala Ala Ser Ala Leu Gln Ser
1 5
<210> 481
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 481
Gln Asn Tyr Asn Ser Gly Pro Arg Thr
1 5
<210> 482
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 482
Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Thr
1 5 10
<210> 483
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 483
Ala Ala Ser Ala Leu Gln Ser
1 5
<210> 484
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 484
Gln Asn Tyr Asn Ser Ala Pro Arg Thr
1 5
<210> 485
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 485
Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp
1 5 10 15
<210> 486
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 486
Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser
1 5
<210> 487
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 487
Met Gln Thr Leu Gln Thr Pro Phe Thr
1 5
<210> 488
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 488
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Asn Ser His Leu Ala
1 5 10
<210> 489
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 489
Tyr Ala Ser Thr Leu Pro Ser
1 5
<210> 490
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 490
Gln Gln Leu Asn His Tyr Pro Ile Thr
1 5
<210> 491
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 491
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 492
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 492
Ala Ala Ser Thr Leu His Ser
1 5
<210> 493
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 493
Gln Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Arg Thr
1 5
<210> 494
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 494
Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 495
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 495
Ala Ala Ser Thr Leu His Ser
1 5
<210> 496
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 496
Gln Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Arg Thr
1 5
<210> 497
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 497
Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Ser Phe Leu Ala
1 5 10
<210> 498
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 498
Val Ala Ser Thr Leu Gln Ser
1 5
<210> 499
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 499
Gln Gln Leu His Val Tyr Pro Ile Thr
1 5
<210> 500
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 500
Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser Asp Asp Gly Asn Thr Tyr Leu
1 5 10 15
Asp
<210> 501
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 501
Thr Leu Ser Tyr Arg Ala Ser
1 5
<210> 502
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 502
Met Gln Arg Ile Glu Phe Pro Phe Thr
1 5
<210> 503
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 503
Arg Ala Ser Gln Thr Ile Ser Thr Trp Leu Ala
1 5 10
<210> 504
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 504
Lys Ala Ser Asn Leu Glu Ser
1 5
<210> 505
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 505
Gln Gln Tyr Gln Thr Phe Ser His Thr
1 5
<210> 506
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 506
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 507
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 507
Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser
1 5
<210> 508
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 508
Gln Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Leu Thr
1 5
<210> 509
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 509
Arg Ser Ser Gln Thr Leu Val His Ser Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asn
1 5 10 15
<210> 510
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 510
Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser
1 5
<210> 511
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 511
Met Gln Ala Ile Gln Thr Pro Tyr Thr
1 5
<210> 512
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 512
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Trp Leu Ala
1 5 10
<210> 513
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 513
Lys Ala Ser Asn Leu Glu Ser
1 5
<210> 514
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 514
Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Ser Cys Thr
1 5
<210> 515
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 515
Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Tyr Leu His
1 5 10
<210> 516
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 516
Asp Ala Ser Asp Trp Glu Thr
1 5
<210> 517
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 517
Gln Gln Tyr Asp His Leu Pro Ile Thr
1 5
<210> 518
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 518
Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu His
1 5 10
<210> 519
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 519
Asp Ala Ser Asp Leu Glu Thr
1 5
<210> 520
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 520
Gln Gln Tyr Asp His Leu Pro Ile Thr
1 5
<210> 521
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 521
Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu His
1 5 10
<210> 522
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 522
Asp Ala Ser Asp Leu Glu Thr
1 5
<210> 523
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 523
Gln Gln Tyr Asp His Leu Pro Ile Thr
1 5
<210> 524
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 524
Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 525
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 525
Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr
1 5
<210> 526
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 526
Gln Gln Tyr Asp Asn Leu Pro Tyr Thr
1 5
<210> 527
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 527
Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp
1 5 10 15
<210> 528
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 528
Leu Asn Ser Asn Arg Ala Ser
1 5
<210> 529
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
пептид"
<400> 529
Met Gln Ala Leu Gln Thr Pro Leu Thr
1 5
<210> 530
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
8x гистидиновая метка"
<400> 530
His His His His His His His His
1 5
<210> 531
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:
синтетический
6x гистидиновая метка"
<400> 531
His His His His His His
1 5
<---
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| АНТИТЕЛА, КОТОРЫЕ СВЯЗЫВАЮТ ОПУХОЛЕВУЮ ТКАНЬ, ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ | 2020 |
|
RU2806915C2 |
| АНТИТЕЛА К ТАУ И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2018 |
|
RU2787779C2 |
| АНТИТЕЛА К ENTPD2, ВИДЫ КОМБИНИРОВАННОЙ ТЕРАПИИ И СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ АНТИТЕЛ И ВИДОВ КОМБИНИРОВАННОЙ ТЕРАПИИ | 2019 |
|
RU2790991C2 |
| КОНЪЮГАТЫ АНТИТЕЛА К CCR7 И ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА | 2018 |
|
RU2777662C2 |
| КОМБИНИРОВАННЫЕ ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА, НАЦЕЛЕННЫЕ НА PD-1, TIM-3 И LAG-3 | 2018 |
|
RU2795232C2 |
| ХИМЕРНЫЕ АНТИГЕННЫЕ РЕЦЕПТОРЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА | 2017 |
|
RU2826270C2 |
| АНТИТЕЛА К CD40 И ПУТИ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2017 |
|
RU2752049C2 |
| C3-СВЯЗЫВАЮЩИЕ АГЕНТЫ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2019 |
|
RU2802307C2 |
| АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЕ БЕЛКИ ПРОТИВ TIGIT И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2018 |
|
RU2776714C2 |
| АНТИ-BCMA АНТИТЕЛА, СОДЕРЖАЩИЕ ТОЛЬКО ТЯЖЁЛУЮ ЦЕПЬ | 2017 |
|
RU2781301C2 |
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к выделенному антителу, которое специфически связывается с кластером дифференциации 70 (CD70), способу его получения, а также к композиции, его содержащей. Также раскрыты молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая вышеуказанное антитело, а также клетка и вектор, ее содержащие. Изобретение также относится к биспецифическому антителу, которое специфически связывается с CD70, способу его получения, а также содержащей его композиции. Также раскрыты молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая вышеуказанное биспецифическое антитело, а также клетка и вектор, ее содержащие. Изобретение эффективно в качестве лекарственного средства для лечения рака, связанного с CD70. 24 н. и 8 з.п. ф-лы, 5 табл., 3 пр.
1. Выделенное антитело, которое специфически связывается с кластером дифференциации 70 (CD70), где антитело содержит:
a) область VH, содержащую
(i) определяющую комплементарность область (CDR1) VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 97, 98 или 99;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 100 или 101; и
iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 102; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 217;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 218; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 219;
или
b) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 428, 429 или 430;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 431 или 432; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 433; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 512;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 513; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 514;
или
c) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 49, 50 или 51;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 52 или 53; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 54; и
вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 193;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 194; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 195;
или
d) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 55, 56 или 57;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 58 или 59; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 60; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 196;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 197; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 198;
или
e) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 61, 62 или 63;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 64 или 65; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 66; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 199;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 200; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 201;
или
f) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 67, 68 или 69;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 70 или 71; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 72; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 202;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 203; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 204;
или
g) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 73, 74 или 75;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 76 или 77; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 78; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 205;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 206; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 207;
или
h) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 79, 80 или 81;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 82 или 83; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 84; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 208;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 209; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 210;
или
i) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 85, 86 или 87;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 88 или 89; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 90; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 211;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 212; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 213;
или
j) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 91, 92 или 93;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 94 или 95; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 96; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 214;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 215; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 216;
или
k) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 103, 104 или 105;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 106 или 107; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 108; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 220;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 221; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 222;
или
l) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 109, 110 или 111;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 112 или 113; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 114; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 223;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 224; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 225;
или
m) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 115, 116 или 117;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 118 или 119; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 120; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 226;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 227; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 228;
или
n) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 121, 122 или 123;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 124 или 125; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 126; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 229;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 230; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 231;
или
o) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 127, 128 или 129;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 130 или 131; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 132; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 232;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 233; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 234;
или
p) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 133, 134 или 135;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 136 или 137; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 138; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 235;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 236; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 237;
или
q) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 139, 140 или 141;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 142 или 143; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 144; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 238;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 239; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 240;
или
r) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 145, 146 или 147;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 148 или 149; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 150; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 241;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 242; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 243;
или
s) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 151, 152 или 153;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 154 или 155; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 156; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 244;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 245; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 246;
или
t) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 157, 158 или 159;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 160 или 161; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 162; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 247;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 248; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 249;
или
u) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 163, 164 или 165;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 166 или 167; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 168; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 250;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 251; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 252;
или
v) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 169, 170 или 171;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 172 или 173; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 174; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 253;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 254; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 255;
или
w) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 175, 176 или 177;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 178 или 179; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 180; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 256;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 257; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 258;
или
x) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 181, 182 или 183;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 184 или 185; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 186; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 259;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 260; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 261;
или
y) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 187, 188 или 189;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 190 или 191; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 192; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 262;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 263; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 264;
или
z) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 332, 333 или 334;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 335 или 336; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 337; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 464;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 465; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 466;
или
aa) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 338, 339 или 340;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 341 или 342; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 343; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 467;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 468; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 469;
или
ab) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 344, 345 или 346;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 347 или 348; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 349; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 470;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 471; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 472;
или
ac) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 350, 351 или 352;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 353 или 354; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 355; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 473;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 474; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 475;
или
ad) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 356, 357 или 358;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 359 или 360; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 361; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 476;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 477; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 478;
или
ae) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 362, 363 или 364;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 365 или 366; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 367; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 479;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 480; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 481;
или
af) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 368, 369 или 370;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 371 или 372; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 373; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 482;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 483; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 484;
или
ag) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 374, 375 или 376;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 377 или 378; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 379; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 485;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 486; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 487;
или
ah) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 380, 381 или 382;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 383 или 384; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 385; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 488;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 489; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 490;
или
ai) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 386, 387 или 388;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 389 или 390; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 391; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 491;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 492; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 493;
или
aj) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 392, 393 или 394;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 395 или 396; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 397; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 494;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 495; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 496;
или
ak) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 398, 399 или 400;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 401 или 402; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 403; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 497;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 498; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 499;
или
al) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 404, 405 или 406;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 407 или 408; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 409; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 500;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 501; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 502;
или
am) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 410, 411 или 412;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 413 или 414; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 415; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 503;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 504; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 505;
или
аn) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 416, 417 или 418;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 419 или 420; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательности SEQ ID NO: 421; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 506;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 507; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 508;
или
ao) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 422, 423 или 424;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 425 или 426; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 427; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 509;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 510; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 511;
или
ap) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 434, 435 или 436;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 437 или 438; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 439; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 515;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 516; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 517;
или
aq) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 440, 441 или 442;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 443 или 444; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 445; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 518;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 519; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 520;
или
ar) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 446, 447 или 448;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 449 или 450; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 451; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 521;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 522; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 523;
или
as) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 452, 453 или 454;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 455 или 456; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 457; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 524;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 525; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 526;
или
at) область VH, содержащую
(i) CDR1 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 458, 459 или 460;
(ii) CDR2 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 461 или 462; и
(iii) CDR3 VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 463; и
область VL, содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 527;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 528; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 529.
2. Выделенное антитело, которое специфически связывается с кластером дифференциации 70 (CD70), где антитело содержит:
a) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 18; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 17; или
b) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 321; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 320; или
c) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 2; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 1; или
d) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 4; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 3; или
e) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 6; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 5; или
f) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 8; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 7; или
g) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 10; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 9; или
h) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 12; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 11; или
i) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 14; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 13; или
j) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 16; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 15; или
k) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 20; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 19; или
l) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 22; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 21; или
m) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 24; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 23; или
n) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 26; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 25; или
o) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 28; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 27; или
p) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 30; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 29; или
q) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 32; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 31; или
r) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 34; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 33; или
s) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 36; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 35; или
t) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 38; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 37; или
u) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 40; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 39; или
v) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 42; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 41; или
w) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 44; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 43; или
x) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 46; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 45; или
y) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 48; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 47; или
z) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 289; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 288; или
aa) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 291; или
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 290; или
ab) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 293; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 292; или
aс) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 295; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 294; или
ad) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 297; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 296; или
ae) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 299; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 298; или
af) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 301; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 300; или
ag) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 303; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 302; или
ah) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 305; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 304; или
ai) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 307; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 306; или
aj) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 309; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 308; или
ak) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 311; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 310; или
al) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 313; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 312; или
am) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 315; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 314; или
аn) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 317; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 316; или
ao) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 319; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 318; или
ap) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 323; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 322; или
aq) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 325; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 324; или
ar) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 327; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 326; или
as) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 329; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 328; или
at) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 331; и
область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 330.
3. Нуклеиновая кислота, кодирующая антитело по любому из пп.1, 2.
4. Вектор для экспрессии нуклеиновой кислоты, содержащий нуклеиновую кислоту по п.3.
5. Клетка-хозяин для экспрессии нуклеиновой кислоты по п.3, где клетка-хозяин содержит нуклеиновую кислоту по п.3 или вектор по п.4.
6. Применение антитела по любому из пп.1, 2 в качестве лекарственного средства для лечения рака, связанного с CD70, выбранного из группы, состоящей из почечно-клеточной карциномы, глиобластомы, глиомы, такой как глиома низкой степени злокачественности, неходжкинской лимфомы (НХЛ), болезни Ходжкина (БХ), макроглобулинемии Вальденстрема, острого миелоидного лейкоза, множественной миеломы, диффузной крупноклеточной лимфомы, фолликулярной лимфомы или немелкоклеточного рака легкого.
7. Фармацевтическая композиция для лечения рака, связанного с CD70, выбранного из группы, состоящей из почечно-клеточной карциномы, глиобластомы, глиомы, такой как глиома низкой степени злокачественности, неходжкинской лимфомы (НХЛ), болезни Ходжкина (БХ), макроглобулинемии Вальденстрема, острого миелоидного лейкоза, множественной миеломы, диффузной крупноклеточной лимфомы, фолликулярной лимфомы или немелкоклеточного рака легкого, где композиция содержит эффективное количество антитела по любому из пп.1, 2.
8. Способ лечения состояния, связанного со злокачественными клетками, экспрессирующими CD70, у пациента, где способ включает введение пациенту антитела по любому из пп.1, 2 или фармацевтической композиции по п.7.
9. Способ по п.8, где состояние представляет собой рак.
10. Способ по п.9, где рак представляет собой CD70-родственный рак, выбранный из группы, состоящей из почечно-клеточной карциномы, глиобластомы, глиомы, такой как глиома низкой степени злокачественности, неходжкинская лимфома (НХЛ), болезнь Ходжкина (БХ), макроглобулинемия Вальденстрема, острый миелоидный лейкоз, множественная миелома, диффузная крупноклеточная лимфома, фолликулярная лимфома или немелкоклеточный рак легкого.
11. Способ ингибирования роста или прогрессирования опухоли у пациента со злокачественными клетками, экспрессирующими CD70, где способ включает введение пациенту эффективного количества фармацевтической композиции по п.7.
12. Способ ингибирования метастазирования злокачественных клеток, экспрессирующих CD70, у пациента, где способ включает введение пациенту эффективного количества фармацевтической композиции по п.7.
13. Способ индукции регрессии опухоли у пациента со злокачественными клетками, экспрессирующими CD70, где способ включает введение пациенту эффективного количества фармацевтической композиции по п.7.
14. Способ получения антитела, которое специфически связывается с кластером дифференцировки 70 (CD70), где способ включает
культивирование клетки-хозяина по п.5 в условиях, которые приводят к получению антитела, и
выделение антитела из клетки-хозяина или культуры.
15. Биспецифическое антитело, которое специфически связывается с кластером дифференцировки 70 (CD70),
где биспецифическое антитело представляет собой полноразмерное антитело, содержащее
первый вариабельный домен биспецифического антитела, специфически связывающийся с антигеном-мишенью, и
второй вариабельный домен антитела биспецифического антитела, способный рекрутировать активность иммунной эффекторной клетки человека путем специфического связывания с эффекторным антигеном, расположенным на иммунной эффекторной клетке человека,
где первый вариабельный домен антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH) по п.2 и
вариабельную область легкой цепи (VL) по п.2.
16. Биспецифическое антитело, которое специфически связывается с кластером дифференцировки 70 (CD70),
где биспецифическое антитело представляет собой полноразмерное антитело, содержащее
первый вариабельный домен биспецифического антитела, специфически связывающийся с антигеном-мишенью, и
второй вариабельный домен антитела биспецифического антитела, способный рекрутировать активность иммунной эффекторной клетки человека путем специфического связывания с эффекторным антигеном, расположенным на иммунной эффекторной клетке человека,
где первый вариабельный домен антитела содержит область VH и область VL антитела по п.1.
17. Биспецифическое антитело по п.15, где второй вариабельный домен антитела специфически связывается с эффекторным антигеном CD3.
18. Биспецифическое антитело по п.15, где второй вариабельный домен антитела содержит
a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую
(i) VH-комплементарную определяющую область одну (CDR1), содержащую последовательность SEQ ID NO: 267, 268 или 269;
(ii) VH CDR2, содержащую последовательность SEQ ID NO: 270 или 271; и
(iii) VH CDR3, содержащую последовательность SEQ ID NO: 272; и/или
b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую
(i) CDR1 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 273;
(ii) CDR2 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 274; и
(iii) CDR3 VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 275.
19. Биспецифическое антитело по п.18, где как первый, так и второй вариабельные домены биспецифического антитела содержат аминокислотные модификации в положениях 223, 225 и 228 в шарнирной области и в положении 409 или 368, согласно схеме нумерации EU, в области CH3 IgG2 человека, содержащей последовательность SEQ ID NO: 279.
20. Биспецифическое антитело по п.19, содержащее аминокислотную модификацию в одном или более положениях 265, 330 и 331 IgG2 человека.
21. Нуклеиновая кислота, кодирующая биспецифическое антитело по любому из пп.15-20.
22. Вектор для экспрессии нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеиновую кислоту по п.21.
23. Клетка-хозяин для экспрессии нуклеиновой кислоты по п.21, где клетка-хозяин содержит нуклеиновую кислоту по п.21 или вектор по п.22.
24. Применение антитела по любому из пп.15-20 в качестве лекарственного средства для лечения рака, связанного с CD70, выбранного из группы, состоящей из почечно-клеточной карциномы, глиобластомы, глиомы, такой как глиома низкой степени злокачественности, неходжкинской лимфомы (НХЛ), болезни Ходжкина (БХ), макроглобулинемии Вальденстрема, острого миелоидного лейкоза, множественной миеломы, диффузной крупноклеточной лимфомы, фолликулярной лимфомы или немелкоклеточного рака легкого.
25. Фармацевтическая композиция для лечения состояния, связанного со злокачественными клетками, экспрессирующими CD70, содержащая эффективное количество антитела по любому из пп.15-20.
26. Способ лечения состояния, связанного со злокачественными клетками, экспрессирующими CD70, у пациента, где способ включает введение пациенту эффективного количества антитела по любому из пп.15-20 или фармацевтической композиции по п.25.
27. Способ по п.26, где состояние представляет собой рак.
28. Способ по п.27, где рак представляет собой рак, связанный с CD70, выбранный из группы, состоящей из почечно-клеточной карциномы, глиобластомы, глиомы, такой как глиома низкой степени злокачественности, неходжкинской лимфомы (НХЛ), болезни Ходжкина (БХ), макроглобулинемии Вальденстрема, острого миелоидного лейкоза, множественной миеломы, диффузной крупноклеточной лимфомы, фолликулярной лимфомы или немелкоклеточного рака легкого.
29. Способ ингибирования роста или прогрессирования опухоли у пациента со злокачественными клетками, экспрессирующими CD70, где способ включает введение пациенту эффективного количества фармацевтической композиции по п.25.
30. Способ ингибирования метастазирования злокачественных клеток, экспрессирующих CD70, у пациента, где способ включает введение пациенту эффективного количества фармацевтической композиции по п.25.
31. Способ индукции регрессии опухоли у пациента со злокачественными клетками, экспрессирующими CD70, где способ включает введение пациенту эффективного количества фармацевтической композиции по п.25.
32. Способ получения биспецифического антитела, которое специфически связывается с кластером дифференцировки 70 (CD70), где способ включает культивирование клетки-хозяина по п.23 в условиях, которые приводят к получению антитела, и выделение антитела из клетки-хозяина или культуры.
| ПРИБОР К ТКАЦКОМУ СТАНКУ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПЕРЕМЕЩЕНИЯ И ПОСАДКИ ЧЕЛНОКА В ЧЕЛНОЧНОЙ КОРОБКЕ | 1934 |
|
SU39695A1 |
| US 7521048 B2, 21.04.2009 | |||
| US 2009028872 A1, 29.01.2009 | |||
| WO 2006044643 A2, 27.04.2006 | |||
| АНТИТЕЛА ПРОТИВ CD70 | 2012 |
|
RU2604196C2 |
