Способ внутрикожного введения ППД-туберкулина для птиц при аллергической диагностике паратуберкулеза крупного и мелкого рогатого скота Российский патент 2023 года по МПК A61D7/00 

Изобретение относится к ветеринарии, в частности аллергической диагностике паратуберкулеза крупного и мелкого рогатого скота, и может быть использовано в широкой ветеринарной практике при проведении профилактических и оздоровительных мероприятий в благополучных и неблагополучных по паратуберкулезу хозяйствах.

Паратуберкулез - хроническая инфекционная болезнь, в основном жвачных животных, чаще всего протекающая латентно, характеризующаяся поражением кишечника и мезентериальных лимфатических узлов и как следствие - сопровождающаяся расстройством работы желудочно-кишечного тракта (диареей), потерей продуктивности, прогрессирующим истощением - вплоть до летального исхода.

Паратуберкулез крупного рогатого скота впервые был описан A. Johne, L. Frothingham в 1895 году, как особая форма туберкулеза кишечника, вызываемая ослабленным возбудителем туберкулеза бычьего или птичьего видов.

В 1902 году Мс. Fadylan назвал эту болезнь в честь первого автора - болезнью Йоне.

В. Bang (1906) после того, как не смог выделить возбудителя болезни и заразить морских свинок и кроликов патологическим материалом от больной коровы, назвал болезнь - хронический псевдотуберкулезный энтерит.

В 1912 году T.W. Twort, Y.Z. Ingram выделили возбудителя из подвздошной кишки больной коровы и назвали его Mycobacterium enteridischronicae bovis. В дальнейшем - возбудитель заболевания был квалифицирован как Mycobacterium paratuberculosis, а болезнь названа паратуберкулезом. После исследований с применением молекулярно-генетических методов было доказано, что гены М. avium и М. paratuberculosis на 99% гомологичны. Впоследствии, по предложению M.F. Thorel et al. (1990), возбудитель паратуберкулеза стали считать подвидом микобактерий птичьего вида - Micobacterium avium subspecies paratuberculosis (MAP).

В настоящее время паратуберкулез остается одной из недостаточно изученных, сложно контролируемых инфекций. Инкубационный период длится от 6 месяцев до 15 лет, возможны случаи самоизлечения, т.е. клиническая картина может не проявиться в течение всей жизни животного. При этом латентно больные животные могут стать носителями микобактерий, и периодически выделяя возбудителя во внешнюю среду, создавать условия для распространения паратуберкулеза в стаде.

Некоторые авторы сравнивают проблему паратуберкулеза с «верхушкой айсберга» (айсберг-эффект), когда на один клинический случай приходятся десятки случаев инфицированных животных в латентной форме [Н.П. Овдиенко и соавт., 2007; А.И. Завгородный и соавт. 2010; А.Х. Найманов и соавт., 2012, 2014, 2020].

Микобактерий паратуберкулеза «вездесущи» в окружающей внешней среде, их обнаруживают в кишечнике, фекалиях, молоке, крови крупного рогатого скота. Тем не менее выявить MAP у животных во внешней среде достаточно сложно, так как они не могут быть идентифицированы при бактериоскопии, а только молекулярно-генетическими методами [А. Wiczniewska et. al., 2002; R. Greenstein, 2003; В.И. Литвинов и соавт., 2008].

При паратуберкулезе нет высокоэффективных методов диагностики, лечения и вакцинопрофилактики. Большим препятствием в разработке эффективных методов диагностики является отсутствие биологической модели для воспроизведения болезни. Многочисленные попытки воспроизвести паратуберкулез у мелких животных не увенчались успехом.

По мнению многих исследователей ни один из существующих методов диагностики паратуберкулеза не обладает 100% эффективностью, поэтому рекомендуется применять комплексный подход к диагностике паратуберкулеза крупного рогатого скота [J. Larson, 2002].

В соответствии 28 издания «Кодекса здоровья наземных животных МЭБ» от 2019 года при паратуберкулезе нет рекомендуемых тестов, а в качестве альтернативных тестов предлагается внутрикожная туберкулиновая проба и иммуноферментный анализ.

В «скрытости» инфекции, низкой чувствительности и специфичности методов диагностики, сложности выделения, культивирования и идентификации возбудителя, в отсутствии возможности воспроизведения болезни на лабораторных животных заключаются основные сложности в установлении диагноза на паратуберкулез.

Важно отметить, что в последние годы ведутся острые дискуссии о роли возбудителя паратуберкулеза в болезни Крона у человека, проявляющегося поражением желудочно-кишечного тракта, рвотой и диареей. Так, одни авторы считают М. avium sups, paratuberculosis причиной болезни Крона у человека. Другие авторы не находят очевидных доказательств и связи между возбудителем паратуберкулеза и болезнью Крона.

Единого мнения о наличии связи между болезнью Крона у человека и паратуберкулеза животных не было достигнуто Европейской комиссией здравоохранения и Научным комитетом по охране здоровья животных (2000 г.), на 10 международном симпозиуме по паратуберкулезу в США (2009 г.) [Thorel et al., 1990; В.И. Литвинов и соавт., 2008; А.И. Завгородний и соавт., 2010; А.Х. Найманов и соавт., 2014, 2020].

В настоящее время паратуберкулез крупного рогатого скота регистрируют во многих странах мира. По данным ООН, болезнь признана серьезной проблемой современности со значительными экономическими последствиями. Экономический ущерб слагается из снижения продукции животноводства, потери молочной продуктивности, истощения, бесплодия, выбраковки или гибели больных животных. Паратуберкулез остается менее изученной инфекцией, чем все другие известные хронические болезни.

В соответствии действующего «Наставления по диагностике паратуберкулеза животных», утвержденного Департаментом ветеринарии МСХ РФ 05.04.2001 г., исследования на паратуберкулез в благополучных хозяйствах проводят при обнаружении животных, вызывающих подозрение на заболевание, а в неблагополучных хозяйствах - для выявления больных животных.

Аллергические исследования крупного рогатого скота проводят внутрикожной пробой с ППД туберкулином для птиц. Для внутрикожного введения туберкулина используют безыгольные инъекторы или шприцы с бегунком вместительностью 1-2 мл и иглы для внутрикожных инъекций. Раствор ППД-туберкулина в дозе 2500 ТЕ в 0,2 мл растворителя вводят животным (кроме быков) внутрикожно в середине шеи, быкам - в подхвостовую складку.

Учет и оценку реакции проводят через 72 часа, при этом у каждого животного прощупывают место введения туберкулина. При обнаружении припухлости измеряют кутиметром толщину кожной складки в месте инъекции и определяют величину ее утолщения в миллиметрах сравнением с толщиной складки неизмененной кожи вблизи места введения туберкулина.

Овцам и козам раствор ППД-туберкулина вводят в дозе 5000 ТЕ в 0,2 мл растворителя только шприцом с бегунком вместимостью 1-2 мл и иглами для внутрикожных инъекций в толщу нижнего века, отступая от его края на 1,5-2 см. Учет и оценку реакции проводят через 48 часов, при этом у каждого животного прощупывают место введения туберкулина и сравнивают веки левого и правого глаза.

Считается, что аллергический метод исследования имеет важное значение в целях выявления паратуберкулеза у крупного рогатого скота в скрытой (латентной) стадии заболевания.

Со времени открытия туберкулина, как диагностического средства, было предложено много способов его применения. Так вначале использовался подкожный метод, затем накожный, воздействие на слизистые оболочки (на слизистую оболочку носа - ринореакция, мочеиспускательного канала - уретрореакция, глазной метод, пальпебральный метод, вагинальный метод, назальный метод внутрикожный метод, внутривенный метод и т.д.).

Однако в ветеринарной практике нашли применение, главным образом, глазной, пальпебральный, внутривенный и внутрикожный методы введения туберкулина.

Для объективной оценки диагностической ценности и возможности применения в широкой ветеринарной практике необходимо указать все положительные и отрицательные качества этих методов диагностики.

Глазная проба (офтальмопроба) - слабочувствительная, трудоемкая и длительная (требуется 6-7 дней для выполнения). Учет реакции необходимо проводить неоднократно, каждые 3 часа, т.е. через 3, 6, 9, 12 и 24 ч после первого введения и через 3, 6, 9 и 12 ч после повторного введения аллергена.

Внутривенная проба - слабочувствительная и наиболее трудоемкая, так как требуется хорошая фиксация животного, введение в яремную вену большой дозы туберкулина, неоднократное измерение температуры тела животного до введения и после введения аллергена через 3, 6 и 9 ч. То есть эту пробу невозможно использовать для массовых исследований животных.

Внутрикожная проба - наиболее чувствительная и приемлемая для проведения массовых аллергических исследований при микобактериальных хронических инфекциях (туберкулез и праратуберкулез). Кроме того, массовое и повсеместное применение безыгольных инъекторов для внутрикожного введения аллергенов значительно облегчает и ускоряет проведение аллергических исследований. Основной известный недостаток внутрикожной туберкулиновой пробы - выявление неспецифических аллергических реакций.

Пальпебральная проба - по чувствительности уступает внутрикожной пробе, но намного превосходит глазную и внутривенную пробы. Некоторые авторы считают, что пальпебральная проба имеет преимущества, так как объединяет в себе все виды аллергического воздействия, свойственные подкожной и глазной туберкулиновым пробам. К недостаткам этой пробы относится необходимость фиксации головы животного при введении аллергена. К преимуществам - отсутствие необходимости выстрижки в месте введения аллергенов и фиксации животных при учете реакции.

Следует отметить, что сравнительное изучение различных методов введения туберкулинов показало, что внутрикожный метод является более надежным, удобным и эффективным при аллергической диагностике микобактериальных инфекций. Внутрикожная проба стала основным методом туберкулинизации животных во всех странах мира.

При внутрикожном введении туберкулина имеет значение и место введения аллергена. Так, многими авторами было показано, что не все участки организма обладают одинаковой реактивной способностью, чувствительностью и специфичностью, причем у животных разных видов это выражено по-разному. Впоследствии были установлены более или менее чувствительные участки кожи, что зависело от толщины кожи, строения, густоты лимфатических и кровеносных сосудов и количества нервных окончаний. Поэтому авторы предлагали наилучшие (на их взгляд) места для внутрикожного введения туберкулина крупному рогатому скоту. Так, А. My сею, В. Манту (1908) предложили подхвостовую складку, П. Ремер, К. Жозеф (1909) - кожу средней трети шеи, Г.В. Пашев (1956) - кожу наружной поверхности уха, В.И. Лебедев (1959) - область подгрудка, И.А. Измайлов, А.И. Протасов (1960) - надколенную складку или кожу вымени. В дальнейшем исследованиями многих авторов было установлено, что наиболее чувствительным и удобным местом для внутрикожного введения туберкулина у крупного рогатого скота является область средней трети шеи.

Поэтому в последние годы практически во всех странах мира, в том числе и в нашей стране, оптимальным местом внутрикожного введения туберкулина крупному рогатому скоту считается средняя треть шеи.

Уровень техники

Известны следующие аналоги:

- Пальпебральное введение туберкулина мелкому рогатому скоту. ППД-туберкулин для птиц вводят овцам и козам только шприцем с бегунком вместимостью 1-2 мл и иглами для внутрикожных инъекций в толщу нижнего века, отступая от его края на 1,5-2 см. Место инъекции предварительно выстригают, дезинфицируют 70% этиловым спиртом. Учет и оценку реакции проводят через 48 часов, при этом у каждого животного прощупывают место введения туберкулина и сравнивают веки левого и правого глаза. Реагирующими считают животных с образованием ощутимой припухлости в месте введения аллергена [Наставление по диагностике паратуберкулеза (паратуберкулезного энтерита) у животных утверждено Министерство сельского хозяйства РФ Департамент Ветеринарии от 05.04.2001 г. №13-5-02\0050].

- Внутрикожное введение туберкулина крупному рогатому скоту. ППД-туберкулин для птиц вводят животным (кроме быков) внутрикожно в середине шеи, быкам - в подхвостовую складку. В месте инъекции волосы выстригают, кожу дезинфицируют 70% этиловым спиртом. Для внутрикожного введения туберкулина используют безыгольные инъекторы или шприцы с бегунком вместимостью 1-2 мл и иглы для внутрикожных инъекций. Учет и оценку реакции проводят через 72 часа, при этом у каждого животного прощупывают место введения туберкулина. При обнаружении припухлости измеряют кутиметром толщину кожной складки в месте инъекции и определяют величину ее утолщения в миллиметрах сравнением с толщиной кожной складки неизменной кожи вблизи места введения туберкулина. Реагирующими считают животных при утолщении кожной складки на 6 мм и более [Наставление по диагностике паратуберкулеза (паратуберкулезного энтерита) у животных утверждено Министерство сельского хозяйства РФ Департамент Ветеринарии от 05.04.2001 г. №13-5-02\0050]. Эту разработку мы берем за прототип

Следует указать, что каждый из этих утвержденных методов диагностики паратуберкулеза животных имеет свойственные ему определенные недостатки.

- Внутрикожная туберкулиновая проба в области средней трети шеи. Основной недостаток - при внутрикожном введении ППД-туберкулина для птиц выявляется значительное количество реагирующих животных (с увеличением кожной складки на 3-5 мм), сенсибилизированных близкородственными атипичными микобактериями. Поэтому в соответствии Наставления по диагностике паратуберкулеза животных от 2001 г. в целях сокращения количества реагирующих животных с неспецифическими реакциями ППД-туберкулин для птиц внутрикожно вводят в меньшей дозе (2500 ТЕ), а при учете и оценке реакции за положительную считают реакцию в виде увеличения кожной складки на 6 мм и более.

- Пальпебральная проба в области нижнего века. Основной недостаток -сложность подкожного и внутрикожного введения ППД туберкулина для птиц шприцом с иглой в область нижнего века крупному рогатому скоту. Невозможность использования безыгольного инъектора для внутрикожного введения туберкулина из-за возможного травмирования глаза в месте введения аллергена.

В связи с указанным, нами поставлена задача - установить наиболее оптимальное место введения и изучить возможность внутрикожного введения аллергена безыгольным инъектором при аллергической диагностике паратуберкулеза крупного рогатого скота, овец и коз.

Технической проблемой является необходимость ускорение и облегчение проведения аллергических исследований при паратуберкулезе крупного и мелкого рогатого скота, расширение арсенала способов внутрикожного введения ППД-туберкулина для птиц при аллергической диагностике паратуберкулеза крупного и мелкого рогатого скота.

Раскрытие сущности изобретения

Техническим результатом изобретения является ускорение и облегчение проведения аллергических исследований при паратуберкулезе крупного и мелкого рогатого скота, расширение арсенала способов внутрикожного введения ППД-туберкулина для птиц при аллергической диагностике паратуберкулеза крупного и мелкого рогатого скота.

Повышение эффективности аллергической пробы с ППД туберкулином для птиц при диагностике паратуберкулеза крупного и мелкого рогатого скота, способствует увеличению производительности и облегчению труда ветеринарных специалистов при внутрикожном введении аллергена безыгольным инъектором в толщу кожи в области скуловой кости под орбитой глаза. При проведении аллергических исследований необходима фиксация головы животного также, как и при подкожном или внутрикожном ведении туберкулина в нижнее веко шприцом с иглой с той разницей, что внутрикожное введение аллергена в толщу кожи скуловой кости безыгольным инъектором проводится точно, быстро, безболезненно для животного и безопасно для глаза исследуемого животного.

Для внутрикожного введения туберкулина безыгольным инъектором необходимо одной рукой нащупать скуловую кость, второй рукой прижать вплотную перпендикулярно сопло насадки инъектора к участку кожи и нажать на спусковую кнопку инъектора. При правильном внутрикожном введении в месте введения аллергена образуется папула (горошина) диаметром примерно 8 мм. Учет и оценку аллергических реакций определяют через 72 часа после введения аллергена. Оценку реакции проводят визуально методом сравнения кожи области скуловой ниже орбиты глаза (в месте введения туберкулина) и области глаза с другой стороны (без введения туберкулина). Животных считают реагирующими на туберкулин при образовании хорошо заметной припухлости в месте введения препарата (Фигура 1).

Заявленное изобретение отличается от прототипа тем, что внутрикожное введение аллергена проводится безыгольным инъектором в толщу кожи в области скуловой кости под орбитой глаза головы животного. В этой области у кожи хорошая иннервация и много кровеносных сосудов по сравнению с кожей в области средней трети шеи (Фигура 2).

К преимуществам нового способа относится:

- При внутрикожном введении туберкулина в кожу скуловой кости нет необходимости проводить выстригание шерсти и дезинфекцию кожи 70% этиловым спиртом в месте введения аллергена, так как в этом участке головы животного шерсть короткая, гладкая и чистая кожа.

- При учете и оценке реакции нет необходимости прощупывать место внутрикожного введения туберкулина у каждого животного и измерять толщину кожной складки кутиметром, так как кожа в этой области плотно прилегает к скуловой кости, и как следствие этого - образовавшаяся припухлость в месте введения аллергена хорошо видна визуально.

- Внутрикожное введение аллергена в кожу скуловой кости объединяет чувствительность и эффективность внутрикожной пробы в области средней трети шеи и специфичность пальпебральной туберкулиновой пробы, так как по сообщения некоторых авторов на пальпебральную пробу выявляются только единицы животных с неспецифическими реакциями.

- Предложенный способ прост в исполнении, более информативен в сравнении с прототипом и главное - может использоваться в широкой ветеринарной практике как дополнительный диагностический тест при паратуберкулезе крупного рогатого скота и как основной тест при аллергической диагностике паратуберкулеза овец и коз.

Следует указать, что в настоящее время аллергическую диагностику паратуберкулеза у овец и коз проводят методом пальпебральной туберкулиновой пробы. При этом раствор ППД-туберкулина для птиц вводят только шприцом с бегунком вместимостью 1-2 мл и иглами для внутрикожных инъекций в толщу нижнего века, отступая от его края на 1,5-2 см.

Осуществление изобретения

Пример 1. Исследования крупного рогатого скота в учхозе «Июльское» Боткинского района Удмуртской республики. Исследования проводили в целях установления диагноза при подозрении на паратуберкулез (при бактериоскопическом исследовании в фекалиях двух коров были обнаружены кислотоустойчивые микобактерий, а при бактериологическом исследовании патматериала от этих убитых с диагностической целью коров выделена культура кислотоустойчивых микобактерий, которые были определены как возбудитель паратуберкулеза (экспертиза №298/23-24 Удмуртского диагностического центра).

В связи со сложностью установления диагноза на паратуберкулез дальнейшие исследования проводили комиссионно совместно с сотрудниками лаборатории хронических инфекций ВИЭВ.

Аллергические исследования проводили методом внутрикожного введения ППД-туберкулина в кожу средней трети шеи и в область кожи скуловой кости под орбитой глаза. Внутрикожное введение туберкулина проводили безыгольным инъектором.

Для внутрикожного введения туберкулина безыгольным инъектором необходимо одной рукой нащупать скуловую кость, второй рукой прижать вплотную перпендикулярно сопло насадки инъектора к участку кожи и нажать на спусковую кнопку инъектора. При правильном внутрикожном введении в месте введения аллергена образуется папула (горошина)диаметром примерно 8 мм. Учет и оценку аллергических реакций определяют через 72 часа после введения аллергена. Оценку реакции проводят визуально методом сравнения кожи области скуловой ниже орбиты глаза (в месте введения туберкулина) и области глаза с другой стороны (без введения туберкулина). Животных считают реагирующими на туберкулин при образовании хорошо заметной припухлости в месте введения препарата.

В животноводческом комплексе №2 было исследовано 285 голов крупного рогатого скота. При учете аллергических реакций через 72 часа после введения аллергенов реагирующих животных не выявили (в местах внутрикожного введения туберкулина в область средней трети шеи и в область скуловой кости).

В дальнейшем при проведении всех клинических, серологических и бактериологических исследований было сделано заключение - «Поголовье крупного рогатого скота учхоза «Июльское» благополучно по парату беркулезу.

Пример 2. Исследования крупного рогатого скота в ООО «Агрис» Сычевского района Смоленской области. Исследования проводили в целях уточнения диагноза на паратуберкулез.

Вначале поголовье крупного рогатого скота (661 голова) исследовали методом внутрикожной туберкулиновой пробы с ППД-туберкулином для птиц. Аллерген вводили каждому животному безыгольным инъектором в область средней трети шеи. При учете реакции через 72 часа после введения аллергенов выявили 26 реагирующих животных. Через месяц всех реагирующих коров переисследовали внутрикожной пробой с ППД-туберкулином для птиц методом введения безыгольным инъектором в область кожи скуловой кости под орбитой глаза. При учете аллергических реакций через 72 часа после введения аллергена в область скуловой кости реагирующих животных не выявили. При диагностическом убое 6 ранее реагировавших на туберкулин коров характерных для паратуберкулеза изменений не обнаружили ни в одном случае. При бактериологическом исследовании патматериала (посев на обычные и специальные среды с добавлением фактора роста - микобактина проб тонкого отдела кишечника, илеоцекальной заслонки и лимфатических узлов) от 6 подозреваемых в заражении паратуберкулезом коров возбудитель паратуберкулеза не выделили. Выделили культуру атипичных микобактерий 4 группы по классификации Раньена.

В дальнейшем при проведении всего комплекса клинических, серологических и бактериологических исследований с целью уточнения диагноза - паратуберкулез среди поголовья крупного рогатого скота ООО «Агрис» был исключен.

В данном примере установлена большая специфичность аллергических исследований при внутрикожном введении ППД-туберкулина для птиц безыгольным инъектором в область кожи скуловой кости под глазом.

Пример 3. Исследования в неблагополучном по паратуберкулезу крупного рогатого скота СПК «Нива» Юкаменского района Удмуртской республики.

На одной ферме этого хозяйства были временно изолированы 51 корова, которые при серологическом исследовании дали положительные результаты по РСК. В соответствии Наставления по диагностике паратуберкулеза животных от 2001 года от этих коров были взяты пробы крови для повторных серологических исследований в РСК. Также их исследовали аллергической внутрикожной пробой с ППД-туберкулином для птиц и новым аллергеном Параавиумом. Аллергены вводили безыгольным инъектором в область средней трети шеи справа и слева. Провели диагностический убой 8 реагирующих и нереагирующих на туберкулин коров. Анализ серологических, аллергических и патологоанатомических исследований показал, что из 51 положительно реагировавших на серологические исследования коров только в двух случаях (3,9%) получен положительный результат на внутрикожную пробу с ППД-туберкулином для птиц и Параавиумом. При диагностическом убое и патологоанатомическом осмотре 8 убитых коров, неоднократно положительно реагировавших на серологические исследования, характерные для паратуберкулеза изменения обнаружены только у двух коров, реагировавших на внутрикожную пробу с ППД-туберкулином для птиц и Параавиумом.

На этом примере подтверждается большая диагностическая ценность аллергических исследований в сравнении с серологическими исследованиями. Кроме того, проводить аллергические исследования гораздо легче, быстрее, показательнее и главное - доступнее для практикующих ветеринарных специалистов.

На другой ферме неблагополучного по паратуберкулезу хозяйства СПК «Нива» провели сравнительное изучение внутрикожной пробы с помощью безыгольного инъектора в области средней трети шеи и в области скуловой кости. Исследования провели на 38 коровах. ППД-туберкулин для птиц вводили каждой корове одновременно в область средней трети шеи и в область скуловой кости под глазом. При учете аллергических реакций через 72 часа после введения аллергенов выявили двух коров, реагировавших на оба введения, то есть результаты исследований оказались равноценными.

Пример 4. Исследования экспериментально зараженных различными видами микобактерий овец и коз.

В первом эксперименте в Вышневолоцком филиале ВИЭВ о. Лисий были заражены 25 овец: 5 - М. bovis, 5 - М. avium, 5 - М. paratuberculosis, 5 - М. kansasii, 5 - контрольная группа животных. Аллергические исследования животных проводили с использованием безыгольных инъекторов. При этом в область скуловой кости правого глаза вводили внутрикожно ППД-туберкулин для млекопитающих, а в область левого глаза - ППД-туберкулин для птиц.

При учете и оценке результатов исследований 5 зараженных М. bovis овец положительно реагировали на ППД для млекопитающих, 4 - на ППД для птиц. Из 5 зараженных М. avium овец - 3 реагировали положительно на внутрикожное введение ППД для млекопитающих, 5 - реагировали положительно на ППД для птиц.

Из 5 зараженных М. paratuberculosis овец 1 положительно реагировала на внутрикожное введение ППД для млекопитающих, 3 реагировали положительно на ППД для птиц.

Из 5 зараженных М. kansasii овец 3 положительно реагировали на внутрикожное введение ППД для млекопитающих, 4 положительно реагировали на ППД для птиц.

У 5 животных контрольной группы реагирующих на туберкулины животных не выявили.

Полученные результаты исследований показывают, что экспериментально зараженные различными видами микобактерий овцы реагируют на внутрикожное введение аллергенов безыгольным инъектором в кожу области скуловой кости.

Во втором эксперименте в Вышневолоцком филиале ВИЭВ о. Лисий были заражены 20 коз: 5 коз - М. bovis, 5 коз - М. avium, 5 - М. paratuberculosis, 5 - контрольная группа животных. Зараженных различными видами микобактерий коз исследовали симультанной пробой одновременным внутрикожным введением ППД-туберкулина для млекопитающих и ППД-туберкулина для птиц.

Аллергены вводили безыгольным инъектором в кожу области скуловой кости: под правым глазом - ППД для млекопитающих, под левым глазом - ППД для птиц.

При учете и оценке результатов исследований 5 зараженных М. bovis коз реагировали на внутрикожное введение ППД для млекопитающих и ППД для птиц. Интенсивность проявления аллергических реакций была более выражена на ППД для млекопитающих.

Все 5 зараженных М. avium коз также реагировали на внутрикожное введение аллергенов. Тем не менее интенсивность проявления аллергических реакций на ППД для млекопитающих была меньше, чем на ППД для птиц.

Из 5 зараженных М. paratuberculosis коз 2 реагировали положительно на ППД для млекопитающих, 4 - на ППД для птиц. Интенсивность проявления аллергических реакций была больше выражена на ППД для птиц.

Из 5 животных контрольной группы реагирующих на туберкулины животных не выявили.

Обобщая результаты исследований экспериментально зараженных коз, следует указать, что аллергические реакции на внутрикожное введение туберкулинов были наибольшей интенсивности у зараженных М. bovis и М. avium коз.

На основании проведенных исследований овец и коз можно сделать заключение, что экспериментально зараженные различными видами микобактерий животные реагируют на внутрикожное введение аллергенов в кожу области скуловой кости безыгольным инъектором (Фигура 3).

Краткое описание чертежей

Фиг. 1 - Припухлость в месте введения туберкулина.

Фиг. 2 - Иннервация и кровеносные сосуды головы коровы.

Фиг. 3 - Положительная реакция у козы.

Изобретение относится к ветеринарии, в частности аллергической диагностике паратуберкулеза крупного и мелкого рогатого скота, и может быть использовано в широкой ветеринарной практике при проведении профилактических и оздоровительных мероприятий в благополучных и неблагополучных по паратуберкулезу хозяйствах. Предложен способ внутрикожного введения ППД-туберкулина для птиц при аллергической диагностике паратуберкулеза крупного и мелкого рогатого скота, включающий введение внутрикожно ППД-туберкулина для птиц, учет и оценку результатов исследования, отличающийся тем, что ППД-туберкулин для птиц вводят безыгольным инъектором в область кожи скуловой кости под орбитой глаза головы животного, а учет и оценку результатов исследований проводят визуально путем сравнения состояния кожи - наличие образования припухлости в месте введения аллергена относительно кожи в области скуловой кости другого глаза, образование видимой припухлости в месте внутрикожного введения туберкулина считают положительной реакцией. Изобретение позволяет ускорить и облегчить проведение аллергических исследований при паратуберкулезе крупного и мелкого рогатого скота, расширить арсенал способов внутрикожного введения ППД-туберкулина для птиц при аллергической диагностике паратуберкулеза крупного и мелкого рогатого скота. 3 ил., 3 пр.

Способ внутрикожного введения ППД-туберкулина для птиц при аллергической диагностике паратуберкулеза крупного и мелкого рогатого скота, включающий введение внутрикожно ППД-туберкулина для птиц, учет и оценку результатов исследования, отличающийся тем, что ППД-туберкулин для птиц вводят безыгольным инъектором в область кожи скуловой кости под орбитой глаза головы животного, а учет и оценку результатов исследований проводят визуально путем сравнения состояния кожи - наличие образования припухлости в месте введения аллергена относительно кожи в области скуловой кости другого глаза, образование видимой припухлости в месте внутрикожного введения туберкулина считают положительной реакцией.