ЛЕЧЕНИЕ ПОБОЧНЫХ ЭФФЕКТОВ, ВЫЗВАННЫХ АТИПИЧНЫМИ АНТИПСИХОТИКАМИ Российский патент 2023 года по МПК A61K33/242 A61K47/54 A61K47/62 A61P3/04 A61P3/10 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

1. Настоящее изобретение относится к области антипсихотических препаратов, в частности к кластерам золота (AuCs), связанным с лигандами, композициям, включающим связанные с лигандами AuCs, и способам, использующим связанные с лигандами AuCs и композиции для предотвращения, подавления, снижения и/или устранения побочных эффектов, вызванных типичными антипсихотиками.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

2. Атипичные антипсихотики - это антипсихотики второго поколения, которые в настоящее время используются для лечения различных психических заболеваний, включая шизофрению, биполярное расстройство, депрессию и аутизм. Несмотря на документально подтвержденную эффективность и низкий риск развития экстрапирамидных симптомов, атипичные антипсихотики обычно ассоциируются с различными побочными эффектами, включая ожирение, характеризующееся чрезмерным увеличением массы тела, нарушение липидного обмена и нарушение обмена глюкозы. Пациенты, принимающие, например, оланзапин или клозапин, имеют самый высокий риск увеличения массы тела. Быстрое прогрессирование увеличения массы тела позволяет предположить, что в основе метаболического синдрома, вызываемого атипичными антипсихотиками, лежит отдельная этиология.

3. К сожалению, механизмы, лежащие в основе различных побочных эффектов, таких как увеличение массы тела и метаболические нарушения, вызываемые атипичными антипсихотиками второго поколения, остаются практически неизвестными, несмотря на проведенные обширные исследования.

4. Оланзапин имеет высокую степень связывания с многочисленными рецепторами нейротрансмиттеров, включая дофамин D₂, серотонин 5-НТ_2А и 5-НТ_2С, гистаминовые H₁-рецепторы и мускариновые M₁ и М₃-рецепторы. Для решения проблемы увеличения веса, вызванного оланзапином, были предприняты многочисленные фармакологические вспомогательные методы лечения. Например, совместное лечение оланзапином и бетагистином (агонист H₁R и антагонист H₃R) значительно уменьшило увеличение веса, вызванное оланзапином (Lian et al. Preventing Olanzapine-induced weight gain using betahistine: a study in a rat model with chronic olanzapine treatment. PLoS One. 2014, 9(8): е104160). Дополнительные примеры включают антагонист мускариновых ацетилхолиновых рецепторов M1 подтипа телензепин для лечения вызванного оланзапином увеличения веса (WO 2011/011238 А1), агонист дофамина прамипексол для предотвращения или уменьшения увеличения веса и связанного с ним метаболического синдрома у пациентов, получающих атипичные антипсихотические препараты, включая клозапин, оланзапин, кветиапин и рисперидон (WO 2009/059418 А1), и антагонисты гистаминовых Н₂-рецепторов, выбранные из группы, состоящей из низатидина, фамодитина, циметидина и ранитидина (US 2003/0096808 А1). Однако результаты применения этих агонистов или антагонистов являются неубедительными или противоречивыми.

5. Сохраняется необходимость в разработке более эффективных стратегий противодействия побочным эффектам, вызываемым антипсихотическими препаратами второго поколения, такими как оланзапин и клозапин.

РАСКРЫТИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

6. Настоящее изобретение предусматривает применение кластеров золота, связанных с лигандами, для лечения побочных эффектов, вызванных атипичным антипсихотиком у субъекта.

7. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения для лечения побочных эффектов, вызванных атипичным антипсихотиком у субъекта, применяется кластер золота, связанный с лигандом, где кластер золота, связанный с лигандом, включает золотое ядро и лиганд, связанный с золотым ядром. В некоторых вариантах осуществления изобретения атипичный антипсихотик выбирают из группы, состоящей из оланзапина, клозапина, рисперидона и кветиапина.

8. В некоторых вариантах применения для лечения золотое ядро имеет диаметр в интервале 0,5-3 нм. В некоторых вариантах осуществления изобретения золотое ядро имеет диаметр в интервале 0,5-2,6 нм.

9. В некоторых вариантах применения для лечения лиганд представляет собой выбранный из группы, состоящей из L-цистеина и его производных, D-цистеина и его производных, цистеинсодержащих олигопептидов и их производных и других тиолсодержащих соединений.

10. В некоторых вариантах применения для лечения L-цистеин и его производные выбирают из группы, состоящей из L-цистеина, N-изобутирил-L-цистеина (L-NIBC) и N-ацетил-L-цистеина (L-NAC), а D-цистеин и его производные выбирают из группы, состоящей из D-цистеина, N-изобутирил-D-цистеина (D-NIBC) и N-ацетил-D-цистеина (D-NAC).

11. В некоторых вариантах применения для лечения цистеинсодержащие олигопептиды и их производные представляют собой цистеинсодержащие дипептиды, цистеинсодержащие трипептиды или цистеинсодержащие тетрапептиды.

12. В некоторых вариантах применения для лечения цистеинсодержащие дипептиды выбирают из группы, состоящей из L(D)-цистеин-L(D)-аргинин дипептида (CR), L(D)-арганин-L(D)-цистеин дипептида (RC), L(D)-гистидин-L(D)-цистеин дипептида (НС) и L(D)-цистеин-L(D)-гистидин дипептида (СН).

13. В некоторых вариантах применения для лечения цистеинсодержащие трипептиды выбирают из группы, состоящей из глицин-L(D)-цистеин-L(D)-аргининового трипептида (GCR), L(D)-пролин-L(D)-цистеин-L(D)-аргинин трипептида (PCR), L(D)-лизин-L(D)-цистеин-L(D)-пролин трипептида (КСР) и L(D)-глутатиона (GSH).

14. В некоторых вариантах применения для лечения цистеинсодержащие тетрапептиды выбирают из группы, состоящей из глицин-L(D)-серин-L(D)-цистеин-L(D)-аргининового тетрапептида (GSCR) и глицин-L(D)-цистеин-L(D)-серин-L(D)-аргининового тетрапептида (GCSR).

15. В некоторых вариантах применения для лечения другие тиолсодержащие соединения выбирают из группы, состоящей из 1-[(2S)-2-метил-3-тиол-1-оксопропил]-L(D)-пролина, тиогликолевой кислоты, меркаптоэтанола, тиофенола, D-3-троловола, N-(2-меркаптопропионил)-глицина, додецилмеркаптана, 2-аминоэтанэтиола (CSH), 3-меркаптопропионовой кислоты (МРА) и 4-меркаптобеновой кислоты (р-МВА).

16. Цели и преимущества настоящего изобретения станут очевидны из следующего подробного описания предпочтительных вариантов его осуществления в сочетании с сопроводительными чертежами.

ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

17. Предпочтительные варианты осуществления в соответствии с настоящим изобретением далее будут раскрыты со ссылкой на фигуры, на которых ссылочные цифры обозначают конкретные элементы.

18. На фиг. 1 представлены ультрафиолетово-видимые (УФ) спектры, изображения полученные с помощью просвечивающего электронного микроскопа (ТЕМ) и диаграммы распределения частиц по размерам, модифицированных лигандом L-NIBC наночастиц золота (L-NIBC-AuNPs) с различными размерами частиц.

19. На фиг. 2 показаны ультрафиолетово-видимые спектры (УФ), изображения полученные с помощью ТЕМ и диаграммы распределения частиц по размерам, связанных лигандом L-NIBC кластеров золота (L-NIBC-AuCs) с различными размерами частиц.

20. На фиг. 3 показаны инфракрасные области спектра L-NIBC-AuCs с различными размерами частиц.

21. На фиг. 4 показаны УФ-видимые области спектра, инфракрасные области спектра, изображения полученные с помощью ТЕМ и диаграммы распределения частиц по размерам, связанных CR-лигандом кластеров золота (CR-AuCs).

22. На фиг. 5 показаны УФ-видимые области спектра, инфракрасные области спектра, изображения полученные с помощью ТЕМ и диаграммы распределения частиц по размерам, связанных RC-лигандом кластеров золота (RC-AuCs).

23. На фиг. 6 показаны УФ-видимые области спектра, инфракрасные области спектра, изображения полученные с помощью ТЕМ и диаграммы распределения частиц по размерам, связанных лигандом 1-[(2S)-2-метил-3-тиол-1-оксопропил]-L-пролина (т.е. Сар) кластеров золота (Cap-AuCs).

24. На фиг. 7 показаны УФ-видимые области спектра, инфракрасные области спектра, изображения полученные с помощью ТЕМ и диаграммы распределения частиц по размерам, связанных лигандом GSH кластеров золота (GSH-AuCs).

25. На фиг. 8 показаны УФ-видимые области спектра, инфракрасные области спектра, изображения полученные с помощью ТЕМ и диаграммы распределения частиц по размерам, связанных лигандом D-NIBC кластеров золота (D-NIBC-AuCs).

26. На фиг. 9 показаны УФ-видимые области спектра, инфракрасные области спектра, изображения полученные с помощью ТЕМ и диаграммы распределения частиц по размерам, связанных лигандом L-цистеином кластеров золота (L-Cys-AuCs).

27. На фиг. 10 показаны УФ-видимые области спектра, инфракрасные области спектра, изображения полученные с помощью ТЕМ и диаграммы распределения частиц по размерам, связанных лигандом 2-аминоэтанэтиолом (CSH-AuCs).

28. На фиг. 11 показаны УФ-видимые области спектра, инфракрасные области спектра, изображения полученные с помощью ТЕМ и диаграммы распределения частиц по размерам, связанных лигандом 3-меркаптопропионовой кислоты (MPA-AuCs).

29. На фиг. 12 показаны УФ-видимые области спектра, инфракрасные области спектра, изображения полученные с помощью ТЕМ и диаграммы распределения частиц по размерам, связанных лигандом 4-меркаптобензойной кислоты (p-MBA-AuCs).

30. На фиг. 13 показаны (А) кривые метаболизма глюкозы в крови и (В) площадь под кривой глюкозы в крови (AUG) в каждой группе крыс. CON: группа отрицательного контроля; OLZ: группа контроля модели оланзапина; OLZ+A1H: группа введения OLZ+A1 в высокой дозе; OLZ+A1L: группа введения OLZ+A1 в низкой дозе; OLZ+A2H: группа введения OLZ+A2 в высокой дозе; группа введения OLZ+A2L: OLZ+A2 в низкой дозе; группа введения OLZ+A3H: OLZ+A3 в высокой дозе; группа введения OLZ+A3L: OLZ+A3 в низкой дозе; группа введения OLZ+B: OLA+B в высокой дозе; *: Р<0.05; **: Р<0.01.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

31. Следующее подробное описание некоторых вариантов осуществления изобретения даст возможность лучше понять настоящее изобретение.

32. В настоящей заявке, где имеются ссылки на публикации, сведения, раскрытые в этих публикациях, включены в настоящую заявку посредством ссылки во всей их полноте для более полного описания уровня техники, к которому относится настоящее изобретение.

33. В настоящем документе «введение» означает пероральное («ро») введение, введение в виде суппозитория, местный контакт, внутривенное («iv»), внутрибрюшинное («ip»), внутримышечное («im»), интралезиональное, интраназальное или подкожное («sc») введение, или имплантацию субъекту устройства замедленного высвобождения, например, мини-осмотического насоса или эродируемого имплантата. Введение осуществляется любым способом, включая парентеральный и трансмукозальный (например, оральный, назальный, вагинальный, ректальный или трансдермальный). Парентеральное введение включает, например, внутривенное, внутримышечное, внутриартериальное, внутрикожное, подкожное, внутрибрюшинное, внутрижелудочковое и внутричерепное. Другие способы доставки включают, но не ограничиваются ими, использование липосомальных составов, внутривенную инфузию, трансдермальные пластыри и т.д.

34. Термины «системное введение» и «систематически вводимый» относятся к способу введения соединения или композиции млекопитающему таким образом, что соединение или композиция доставляется к участкам тела, включая целевой участок фармацевтического действия, через систему кровообращения. Системное введение включает, но не ограничивается, пероральное, интраназальное, ректальное и парентеральное (т.е. введение не через пищеварительный тракт, например, внутримышечное, внутривенное, внутриартериальное, трансдермальное и подкожное) введение, с оговоркой, что в настоящем документе системное введение не включает прямое введение в область мозга иными способами, чем через систему кровообращения, например, интратекальное введение и внутричерепное введение.

35. В настоящем документе термины «лечащий» и «лечение» означают задержку начала, замедление или ослабление прогрессирования, облегчение или предотвращение заболевания или состояния, к которому применяется данный термин, или одного или нескольких симптомов такого заболевания или состояния. Примером показателя в данном случае является увеличение массы тела. В зависимости от пациента, лечение может привести к снижению увеличения веса на 5%, 10%, 15%, 20%, 25% или более, например, по сравнению с увеличением веса у того же или другого пациента или средним увеличением веса в популяции пациентов, получающих антипсихотик без лечения в течение того же или аналогичного периода времени. У некоторых пациентов лечение может привести к обратному развитию вызванного антипсихотиком увеличения веса, то есть может привести к потере веса. Например, некоторые пациенты при лечении могут потерять 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 50%, 75% или 100% от вызванного антипсихотиком увеличения веса, например, вернуться к весу, который поддерживался до приема антипсихотика без лечения.

36. Термины «пациент», «субъект» или «индивидуум» взаимозаменяемо относятся к млекопитающему, например, человеку или нечеловеческому млекопитающему, включая приматов (например, макак, пан-троглодитов, понго), одомашненных млекопитающих (например, кошачьи, собачьи), сельскохозяйственных млекопитающих (например, бычьих, яичных, свиных, лошадиных) и лабораторных млекопитающих или грызунов (например, крыс, мышиных, зайцеобразных, хомяков, морских свинок).

37. Термин «побочные эффекты, вызванные атипичными антипсихотиками» относится к любому из известных побочных эффектов, включая ожирение, характеризующееся навязчивым увеличением массы тела, нарушение липидного обмена и нарушение метаболизма глюкозы. Термин «вызванное антипсихотиками увеличение веса» относится к побочному эффекту увеличения веса, который испытывают пациенты, проходящие терапию атипичным антипсихотиком. Атипичные антипсихотики включают оланзапин, клозапин, рисперидон и кветиапин.

38. Оланзапин и клозапин характеризуются как неселективные антагонисты ацетилхолин-мускариновых рецепторов (Ach-M).

39. Химическое наименование оланзапина представляет собой 2-метил-4-(4-метил-1-пиперазинил)-10Н-тиено[2,3-b][1,5]бензодиазепин. Молекулярной формулой является C₁₇H₂₀N₄S, что соответствует молекулярной массе 312,44. Оланзапин относится к тиенобензодиазепинам. Химическая структура выглядит следующим образом:

40. Химическое наименование клозапина представляет собой 8-хлор-11-(4-метил-1-пиперазинил)-5Н-дибензо(b,е)(1,4)диазепин. Молекулярной формулой является C₁₈H₁₉ClN₄, что соответствует молекулярной массе 326,8. Химическая структура имеет следующий вид:

41. Кластеры золота (AuCs) - это особая форма золота, существующая между атомами золота и наночастицами золота. AuCs имеют размер менее 3 нм и состоят всего из нескольких сотен атомов золота, что приводит к разрушению гранецентрированной кубической структуры золотых наночастиц. В результате AuCs демонстрируют молекулоподобные дискретные электронные структуры с четко выраженным зазором HOMO-LUMO в отличие от непрерывных или квазинепрерывных энергетических уровней наночастиц золота. Это приводит к исчезновению эффекта поверхностного плазмонного резонанса и соответствующей полосы поглощения плазмонного резонанса (520±20 нм) в УФ-vis спектре, которой обладают обычные наночастицы золота.

42. Настоящее изобретение предусматривает AuC, связанный с лигандом.

43. В некоторых вариантах осуществления изобретения AuC, связанный с лигандом, включает лиганд и золотое ядро, где лиганд связан с золотым ядром. Присоединение лиганда к золотому ядру означает, что лиганд образует стабильные в растворе комплексные соединения с золотым ядром посредством ковалентной связи, водородной связи, электростатической силы, гидрофобной силы, силы Ван-дер-Ваальса и т.д. В некоторых вариантах осуществления изобретения диаметр золотого ядра находится в интервале 0,5-3 нм. В некоторых вариантах осуществления изобретения диаметр золотого ядра находится в интервале 0,5-2,6 нм.

44. В некоторых вариантах осуществления изобретения лиганд AuC, связанного с лигандом, представляет собой тиолсодержащее соединение или олигопептид. В некоторых вариантах осуществления изобретения лиганд присоединяется к золотому ядру с образованием AuC, связанного с лигандом, через связь Au-S.

45. В некоторых вариантах осуществления изобретения лиганд представляет собой, но не ограничивается, L-цистеин, D-цистеин или производное цистеина. В некоторых вариантах осуществления изобретения производное цистеина представляет собой L-изобутирил-L-цистеин (L-NIBC), N-изобутирил-D-цистеин (D-NIBC), N-ацетил-L-цистеин (L-NAC) или N-ацетил-D-цистеин (D-NAC).

46. В некоторых вариантах осуществления изобретения лиганд представляет собой, но не ограничивается, цистеинсодержащий олигопептид и его производные. В некоторых вариантах осуществления изобретения цистеинсодержащий олигопептид представляет собой цистеинсодержащий дипептид. В некоторых вариантах осуществления изобретения цистеинсодержащий дипептид представляет собой L(D)-цистеин-L(D)-аргинин дипептид (CR), L(D)-аргинин-L(D)-цистеин дипептид (RC) или L(D)-цистеин-L-гистидин дипептид (СН). В некоторых вариантах осуществления изобретения цистеинсодержащий олигопептид представляет собой цистеинсодержащий трипептид. В некоторых вариантах осуществления изобретения цистеинсодержащий трипептид представляет собой глицин-L(D)-цистеин-L(D)-аргинин трипептид (GCR), L(D)-пролин-L(D)-цистеин-L(D)-аргинин трипептид (PCR) или L(D)-глутатион (GSH). В некоторых вариантах осуществления изобретения цистеинсодержащий олигопептид представляет собой цистеинсодержащий тетрапептид. В некоторых вариантах осуществления изобретения цистеинсодержащий тетрапептид представляет собой глицин-L(D)-серин-L(D)-цистеин-L(D)-аргинин тетрапептид (GSCR) или глжщн-L(D)-цистеин-L(D)-серин-L(D)-аргинин тетрапептид (GCSR).

47. В некоторых вариантах осуществления изобретения лиганд представляет собой тиолсодержащее соединение. В некоторых вариантах осуществления изобретения тиолсодержащее соединение представляет собой 1-[(2S)-2-метил-3-тиол-1-оксопропил]-Д(В)-пролин, тиогликолевую кислоту, меркаптоэтанол, тиофенол, D-3-троловол, додецилмеркаптан, 2-аминоэтанэтиол (CSH), 3-меркаптопропионовую кислоту (МРА) или 4-меркаптобеновую кислоту (р-МВА).

48. Настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию для лечения субъекта с побочными действиями, вызванными атипичным антипсихотиком, включая оланзапин, клозапин, рисперидон и кветиапин. В некоторых вариантах осуществления субъект является человеком. В некоторых вариантах осуществления субъектом является домашнее животное, например, собака.

49. В некоторых вариантах осуществления изобретения фармацевтическая композиция включает AuC, связанный с лигандом, как раскрыто выше, и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество. В некоторых вариантах осуществления изобретения вспомогательное вещество представляет собой фосфатно-буферный раствор или физиологический солевой раствор.

50. Настоящее изобретение предусматривает применение раскрытых выше AuCs, связанных с лигандом, для производства лекарственного средства для лечения субъекта с побочными действиями, вызванными атипичным антипсихотиком, включая оланзапин, клозапин, рисперидон и кветиапин.

51. Настоящее изобретение предусматривает применение раскрытых выше AuCs, связанных с лигандом, для лечения субъекта с побочными эффектами, вызванными атипичным антипсихотиком, включая оланзапин, клозапин, рисперидон и кветиапин, или способ лечения субъекта с побочными эффектами, вызванными атипичным антипсихотиком, включая оланзапин, клозапин, рисперидон и кветиапин, с использованием раскрытых выше AuCs, связанных с лигандом. В некоторых вариантах осуществления изобретения способ лечения включает введение субъекту фармацевтически эффективного количества AuCs, связанного с лигандом. Фармацевтически эффективное количество может быть определено с помощью обычных исследований in vivo.

52. В некоторых вариантах осуществления изобретения атипичный антипсихотический препарат и AuCs, связанные с лигандом, могут вводиться совместно. В некоторых вариантах осуществления изобретения атипичный антипсихотический препарат и AuCs, связанные с лигандом, могут вводиться отдельно одним и тем же или разными способами.

53. Следующие примеры приведены исключительно для иллюстрации основных принципов настоящего изобретения; они никоим образом не ограничивают объем настоящего изобретения.

54. Примеры

55. 1. Получение AuCs, связанных с лигандом

56. 1.1 Растворить HAuCl₄ в метаноле, воде, этаноле, н-пропаноле или этилацетате для получения раствора А, в котором концентрация HAuCl₄ составляет 0,01~0,03М;

57. 1.2 Растворить лиганд в растворителе для получения раствора В, в котором концентрация лиганда составляет 0,01~0,18М; лиганд включает, но не ограничивается, L-цистеин, D-цистеин и другие производные цистеина, такие как L-изобутирил-L-цистеин (L-NIBC), N-изобутирил-D-цистеин (D-NIBC), N-ацетил-L-цистеин (L-NAC) и N-ацетил-D-цистеин (D-NAC), цистеинсодержащие олигопептиды и их производные, включая, но не ограничиваясь, дипептиды, трипептид, тетрапептид и другие пептиды, содержащие цистеин, такие как L(D)-цистеин-L(D)-аргинин дипептид (CR), L(D)-аргинин-L(D)-цистеин дипептид (RC), L(D)-цистеин-L(D)-гистидин (СН), глицин-L(D)-цистеин-L(D)-аргинин трипептид (GCR), L(D)-пролин-L(D)-пистеин-L(D)-аргинин трипептид (PCR), L(D)-глутатион (GSH), глипин-L(D)-серин-L(D)-цистеин-L(D)-аргинин тетрапептид (GSCR) и глицин-L(D)-цистеин-L(D)-серин-L(D)-аргинин тетрапептид (GCSR), и другие тиолсодержащие соединения, такие как одно или более из 1-[(2S)-2-метил-3-тиол-1-оксопропил]-L(D)-пролина, тиогликолевой кислоты, меркаптоэтанола, тиофенола, В-3-троловола, додецилмеркаптана, 2-аминоэтанэтиола (CSH), 3-меркаптопропионовой кислоты (МРА) и 4-меркаптобеновой кислоты (р-МВА); растворитель представляет собой один или более из метанола, этилацетата, воды, этанола, н-пропанола, пентана, муравьиной кислоты, уксусной кислоты, диэтилового эфира, ацетона, анизола, 1-пропанола, 2-пропанола, 1-бутанола, 2-бутанола, пентанола, бутилацетата, трибутилметилового эфира, изопропилацетата, диметилсульфоксида, этилформиата, изобутилацетата, метилацетата, 2-метил-1-пропанола и пропилацетата;

58. 1.3 Смешать раствор А и раствор В таким образом, чтобы мольное соотношение между HAuCl₄ и лигандом составляло 1:(0,01-100), перемешать их в ледяной бане в течение 0,1~48 ч, добавить 0,025~0,8М раствора водного NaBH₄, этанола или метанола, продолжить перемешивание в ледяной водяной бане и проводить реакцию в течение 0,1~12 ч. Мольное соотношение между NaBH₄ и лигандом составляет 1:(0,01-100);

59. 1.4 Используя ультрафильтрационные трубки MWCO 3K-30K, провести центрифугирование реакционного раствора при 8000-17500 об/мин по градиенту в течение 10~100 мин. после окончания реакции для получения осадка AuCs, связанного с лигандом, с различным средним размером частиц. Апертура фильтрационных мембран для ультрафильтрационных трубок с различными MWCO непосредственно определяет размер AuCs, связанных с лигандом, которые могут пройти через мембраны. Этот этап может быть по желанию опущен;

60. 1.5 Растворить осадок AuCs, связанный с лигандом, в различных средних размерах частиц, полученных на этапе (1.4), в воде, поместить его в диализный мешок и диализировать в воде при комнатной температуре в течение 1~7 дней;

61. 1.6 После диализа провести сублимационную сушку AuCs, связанного с лигандом, в течение 12~24 ч для получения порошкообразного или флокулирующего вещества, т.е. AuCs, связанного с лигандом.

62. Как было обнаружено, размер частиц порошкообразного или флокулянтного вещества, полученного вышеописанным способом, составляет менее 3 нм (в целом распределяется в пределах 0,5-2,6 нм). Отсутствует очевидный пик поглощения при 520 нм. Установлено, что полученный порошок или флок является AuCs, связанным с лигандом.

63. 2. Получение и описание AuCs, связанных с различными лигандами

64. 2.1 Получение AuCs, связанных с L-NIBC, т.е. L-NIBC-AuCs

65. На примере лиганда L-NIBC подробно описано получение и конфирмация AuCs, связанных с лигандом L-NIBC.

66. 2.1.1 Взвесить 1,00 г HAuCl₄ и растворить его в 100 мл метанола для получения 0,03 М раствора А;

67. 2.1.2 Взвесить 0,57 г L-NIBC и растворить его в 100 мл ледяной уксусной кислоты (уксусной кислоты) для получения 0,03М раствора В;

68. 2.1.3 Отмерить 1 мл раствора А, смешать его с 0,5 мл, 1 мл, 2 мл, 3 мл, 4 мл или 5 мл раствора В соответственно (т.е. мольное соотношение между HAuCl₄ и L-NIBC составляет 1:0,5, 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5 соответственно), провести реакцию в ледяной бане при перемешивании в течение 2 ч, быстро добавить 1 мл только что полученного 0,03 М (приготовленного путем взвешивания 11,3 мг NaBH₄ и растворения его в 10 мл этанола) раствора NaBH₄ этанола, когда раствор из ярко-желтого станет бесцветным, продолжать реакцию в течение 30 мин после того, как раствор станет темно-коричневым, и добавить 10 мл ацетона для завершения реакции.

69. 2.1.4 После завершения реакции реакционный раствор подвергают градиентному центрифугированию для получения порошка L-NIBC-AuCs с различными размерами частиц. Конкретный способ: После завершения реакции реакционный раствор перенести в ультрафильтрационную пробирку с MWCO 30K и объемом 50 мл, центрифугировать при 10000 об/мин в течение 20 мин, а ретентат во внутренней пробирке растворить в сверхчистой воде для получения порошка с размером частиц около 2,6 нм. Затем смешанный раствор во внешней пробирке перенести в ультрафильтрационную пробирку объемом 50 мл с MWCO 10K и центрифугировать при 13000 об/мин в течение 30 мин. Ретентат во внутренней пробирке растворить в сверхчистой воде для получения порошка с размером частиц около 1,8 нм. Затем смешанный раствор во внешней пробирке перенести в ультрафильтрационную пробирку объемом 50 мл с MWCO 3K и центрифугировать при 17500 об/мин в течение 40 мин. Ретентат во внутренней пробирке растворить в сверхчистой воде для получения порошка с размером частиц около 1,1 нм.

70. 2.1.5 Осадить порошок трех различных размеров частиц, полученных градиентным центрифугированием, удалить растворитель соответственно, сырой продукт высушить N₂, растворить в 5 мл сверхчистой воды, поместить в диализный мешок (MWCO составляет 3KDa), поместить диализный мешок в 2 л сверхчистой воды, менять воду каждые два дня, диализировать в течение 7 дней, высушить замораживанием и сохранить для дальнейшего использования.

71. 2.2 Описание L-NIBC-AuCs

72. Эксперимент по определению характеристик был проведен для полученного выше порошка (L-NIBC-AuCs). В качестве контроля использовались модифицированные лигандом L-NIBC наночастицы золота (L-NIBC-AuNPs). Способ получения наночастиц золота с лигандом L-NIBC относится к ссылке (W. Yan, L. Xu, С.Xu, W. Ma, H. Kuang, L. Wang and N. A. Kotov, Journal of the American Chemical Society 2012, 134, 15114; X. Yuan, B. Zhang, Z. Luo, Q. Yao, D. T. Leong, N. Yan and J. Xie, Angewandte Chemie International Edition 2014, 53, 4623).

73. 2.2.1 Наблюдение морфологии с помощью просвечивающего электронного микроскопа (ТЕМ)

74. Тестовые порошки (образец L-NIBC-AuCs и образец L-NIBC-AuNPs) были растворены в сверхчистой воде до 2 мг/л в качестве образцов, а затем тестовые образцы были подготовлены методом висячей капли. Более конкретно, 5 мкл образцов капали на ультратонкую углеродную пленку, испаряли естественным образом до исчезновения капли воды, а затем наблюдали морфологию образцов с помощью полевой эмиссионной ТЕМ высокого разрешения JEM-2100F STEM/EDS.

75. Четыре ТЕМ изображения L-NIBC-AuNPs показаны на панелях В, Е, Н и K на фиг. 1; три ТЕМ изображения L-NIBC-AuCs показаны на панелях В, Е и Н на фиг. 2.

76. Изображения на фиг. 2 показывают, что каждый из образцов L-NIBC-AuCs имеет однородный размер частиц и хорошую дисперсность, а средний диаметр L-NIBC-AuCs (относится к диаметру золотого ядра) составляет 1,1 нм, 1,8 нм и 2,6 нм, соответственно, в хорошем соответствии с результатами на панелях С, F и I на фиг. 2. Для сравнения, образцы L-NIBC-AuNPs имеют больший размер частиц. Их средний диаметр (относится к диаметру золотого ядра) составляет 3,6 нм, 6,0 нм, 10,1 нм и 18,2 нм, соответственно, в хорошем соответствии с результатами на панелях С, F, I и L на фиг. 1.

77. 2.2.2 Ультрафиолетовые (УФ)-видимые (vis) спектры поглощения

78. Тестовые порошки (образец L-NIBC-AuCs и образец L-NIBC-AuNPs) растворяли в сверхчистой воде до концентрации 10 мг⋅л^-1, и спектры поглощения УФ-vis измеряли при комнатной температуре. Диапазон сканирования составлял 190-1100 нм, ячейка для образца представляла собой стандартную кварцевую кювету с оптическим путем 1 см, а контрольная ячейка была заполнена сверхчистой водой.

79. УФ-vis спектры поглощения четырех образцов L-NIBC-AuNPs с различными размерами показаны на панелях A, D, G и J на фиг. 1, а статистическое распределение размера частиц показано на панелях С, F, I и L на фиг. 1; УФ-vis спектры поглощения трех образцов L-NIBC-AuCs с различными размерами показаны на панелях A, D и G на фиг. 2, а статистическое распределение размера частиц показано на панелях С, F и I на фиг. 2.

80. Фиг. 1 показывает, что благодаря эффекту поверхностного плазмона L-NIBC-AuNPs имели пик поглощения при длине волны около 520 нм. Положение пика поглощения зависит от размера частиц. Когда размер частиц составляет 3,6 нм, УФ пик поглощения появляется при 516 нм; когда размер частиц составляет 6,0 нм, УФ пик поглощения появляется при 517 нм; когда размер частиц составляет 10,1 нм, УФ пик поглощения появляется при 520 нм, а когда размер частиц составляет 18,2 нм, пик поглощения появляется при 523 нм. Ни один из четырех образцов не имеет пика поглощения выше 560 нм.

81. Фиг. 2 показывает, что в УФ спектрах поглощения трех образцов L-NIBC-AuCs с различными размерами частиц, пик поглощения поверхностного плазмонного эффекта при 520 нм исчез, а два очевидных пика поглощения появились выше 560 нм, и положения пиков поглощения немного изменялись в зависимости от размеров частиц AuCs. Это объясняется тем, что AuCs проявляет молекулоподобные свойства из-за распада гранецентрированной кубической структуры, что приводит к разрыву плотности состояний AuCs, расщеплению энергетического уровня, исчезновению эффекта плазмонного резонанса и появлению нового пика поглощения в длинноволновом направлении. Можно сделать вывод, что все три образца порошка с различными размерами частиц, полученные выше, представляют собой AuCs, связанный с лигандом.

82. 2.2.3 Инфракрасная спектроскопия с преобразованием Фурье

83. Инфракрасные спектры были измерены на инфракрасном спектрометре с преобразованием Фурье VERTEX80V фирмы Bruker в режиме полного отражения в твердом порошке в высоком вакууме. Диапазон сканирования 4000-400 см^-1 с количеством сканирований 64. Взяв для примера образцы L-NIBC-AuCs, испытательные образцы представляли собой сухой порошок L-NIBC-AuCs с тремя различными размерами частиц, а контрольный образец представлял собой чистый порошок L-NIBC. Результаты показаны на фиг. 3.

84. На фиг. 3 показан инфракрасный спектр L-NIBC-AuCs с различными размерами частиц. По сравнению с чистым L-NIBC (кривая внизу), S-H растягивающие колебания L-NIBC-AuCs с различными размерами частиц полностью исчезли при 2500-2600 см^-1, в то время как другие характеристические пики L-NIBC все еще наблюдались, показывая, что молекулы L-NIBC были успешно связаны с поверхностью AuCs через связь Au-S. На фигуре также видно, что инфракрасный спектр AuCs, связанных с лигандом, не зависит от их размера.

85. AuCs, связанные с другими лигандами, были получены способом, аналогичным описанному выше, за исключением того, что растворитель раствора В, соотношение подачи между HAuCl₄ и лигандом, время реакции и количество добавленного NaBH₄ были слегка скорректированы. Например: когда в качестве лиганда используют L-пистеин, D-цистеин, N-изобутирил-L-цистеин (L-NIBC) или N-изобутирил-D-цистеин (D-NIBC), в качестве растворителя выбирают уксусную кислоту; когда в качестве лиганда используют дипептид CR, дипептид RC или 1-[(2S)-2-метил-3-тиол-1-оксопропил]-L-пролин, в качестве растворителя выбирают воду, и так далее, и тому подобное; другие стадии аналогичны, поэтому дальнейшие детали здесь не приводятся.

86. В данном изобретении вышеописанным способом была подготовлена и получена серия AuCs, связанных с лигандом. Лиганды и параметры процесса получения показаны в таблице 1.

87.

88. Образцы, перечисленные в Таблице 1, подтверждены вышеуказанными способами. Характеристики девяти различных AuCs, связанных с лигандом, показаны на фиг. 4 (CR-AuCs), на фиг. 5 (RC-AuCs), на фиг. 6 (Cap-AuCs) (Сар обозначает 1-[(2S)-2-метил-3-тиол-1-оксопропил]-L-пролин), на фиг. 7 (GSH-AuCs), на фиг. 8 (D-NIBC-AuCs), на фиг. 9 (L-Cys-AuCs), на фиг. 10 (CSH-AuCs), на фиг. 11 (MPA-AuCs) и на фиг. 12 (p-MBA-AuCs). На фиг. 4 - фиг. 12 показаны УФ-спектры (панель А), ИК-спектры (панель В), TEL-изображения (панель С) и распределение частиц по размерам (панель D).

89. Результаты показывают, что диаметры AuCs, связанных с различными лигандами, полученные из таблицы 1, все меньше 3 нм. Ультрафиолетовые спектры также показывают исчезновение пика при 520±20 нм и появление пика поглощения в других положениях. Положение пика поглощения может меняться в зависимости от лигандов и размеров частиц, а также структуры. В некоторых ситуациях пик поглощения отсутствует, в основном из-за образования смесей AuCs с различными размерами и структурами частиц или некоторых специальных AuCs, которые перемещают положение пика поглощения за пределы УФ-визуального спектра. Между тем, инфракрасные спектры с преобразованием Фурье также показывают исчезновение инфракрасного пика поглощения тиола лиганда (между пунктирными линиями на панели В на фиг. 4-8), в то время как другие инфракрасные характеристические пики сохраняются, предполагая, что все молекулы лиганда были успешно связаны с атомами золота для образования AuCs, связанных с лигандом, и в настоящем изобретении были успешно получены AuCs, связанные с лигандами, перечисленными в таблице 1.

90. 3. Исследования на животных

91. 3.1 Образцы для исследования

92. А1: кластеры золота, связанные с лигандом L-NIBC (L-NIBC-AuCs), распределение по размерам в интервале 0,5-3 нм.

93. А2: кластеры золота, связанные с лигандом L-ацетил-L-цистеином (L-NAC-AuCs), распределение по размерам в интервале 0,5-3 нм.

94. A3: кластеры золота, связанные с лигандом L-цистеин (L-Cys-AuCs), распределение по размерам в интервале 0,5-3 нм.

95. А4: кластеры золота, связанные с лигандом 2-аминоэтанэтиолом (CSH-AuCs), распределение по размерам в интервале 0,5-3 нм.

96. А5: кластеры золота, связанные с лигандом 3-меркаптопропионовой кислоты (МРА-AuCs), распределение по размерам в диапазоне 0,5-3 нм.

97. А6: кластеры золота, связанные с лигандом 4-меркаптобензойной кислоты (р-МВА-AuCs), распределение по размерам в интервале 0,5-3 нм.

98. В: наночастицы золота, связанные с L-NIBC (L-NIBC-AuNPs), распределение по размерам в диапазоне 5-9 нм.

99. Все тестовые образцы были приготовлены в соответствии с описанным выше способом с небольшими изменениями, и их качество было охарактеризовано с помощью описанных выше способов.

100. 3.2 Создание модели побочных эффектов, вызванных оланзапином, и изучение ингибирующего действия различных AuCs, связанных с лигандами, на вызванное оланзапином увеличение веса и действие дозировки

101. Сто сорок четыре (144) самки крыс SPF породы Sprague Dawley (8-10 недель) были приобретены в Центре экспериментальных животных компании SiPeifu (Beijing) Biotechnology Со. Все крысы содержались в барьерной среде, температура контролировалась на уровне 22±2°С, а интервал между днем и ночью составлял 12 часов, 7:00-19:00 - день, 19:00-7:00 следующего дня - ночь. После одной недели адаптивного кормления крыс случайным образом разделили на 12 групп (n=12/группа, следя за тем, чтобы средняя масса тела и потребление пищи в каждой группе крыс были практически одинаковыми): группы отрицательного контроля (CON, группа 1), группа контроля модели оланзапина (OLZ, группа 2), группа высокой дозы оланзапина+А1 (OLZ+A1H, группа 3), группа низкой дозы оланзапина+А1 (OLZ+A1L, группа 4), группа высокой дозы оланзапина+А2 (OLZ+A2H группа 5), группа низкой дозы оланзапина+А2 (OLZ+A2L, группа 6), группа высокой дозы оланзапина+А3 (OLZ+A3H, группа 7), группа низкой дозы оланзапина+А3 (OLZ+A3L, группа 8), группа высокой дозы оланзапина+А4 (OLZ+A4H, группа 9), группа высокой дозы оланзапина+А5 (OLZ+A5H, группа 10), группа высокой дозы оланзапина+А6 (OLZ+A6H группа 11) и группа высокой дозы оланзапина+В (OLZ+B, группа 12). Группам 2-12 крыс перорально давали оланзапин (1 мг/кг, трд (три раза в день), временные точки введения: 7:00, 15:00 и 23:00), а группа отрицательного контроля (группа 1) получала равное количество плацебо, служившего контролем, где оланзапин перорально вводился крысам в виде гранул, изготовленных из 0,3 г корма (смешанного с 24,3% казеина, 34,3% кукурузного крахмала, 34,36% сахарозы и 6,98% желатина). Плацебо - это эквивалентное количество пищевых таблеток без оланзапина. Начиная с первого дня приема оланзапина (или плацебо), группам оланзапин+препарат высокой дозы внутрибрюшинно вводили препарат A1, А2, A3, А4, А5, А6 или В (20 мг/кг, один раз в день), а группам оланзапин+препарат низкой дозы внутрибрюшинно вводили препарат A1, А2 или A3 (10 мг/кг, один раз в день). Группе отрицательного контроля и группе контроля модели оланзапина в качестве контроля внутрибрюшинно вводили одинаковое количество физиологического раствора. Такой же режим введения препарата осуществлялся в течение 21 последовательного дня. Кормление животных измерялось каждые 24 часа, а вес животных измерялся каждые 48 часов для наблюдения за ингибирующим эффектом различных доз AuCs на вызванное оланзапином увеличение веса.

102. 3.3 Исследование переносимости глюкозы

103. На 21-й день после введения препарата все крысы голодали в течение 16 ч. Образцы крови были взяты из хвостовой вены крыс, и значение глюкозы крови натощак (0 ч) крыс было измерено с помощью глюкометра (Johnson & Johnson One Touch Ultra, Johnson & Johnson (China) Medical Equipment Co, Ltd.), и соответствующая доза раствора глюкозы вводилась внутрибрюшинно (1 г/кг), значения глюкозы в крови измерялись через 30 минут, 60 минут, 90 минут и 120 минут после введения раствора глюкозы, и рассчитывалась площадь под кривой (AUC) для каждой мыши.

104. 3.4 Эвтаназия крыс и сбор тканей

105. После последнего введения препарата крыс усыпляли 7% хлоралгидратом. После забора образцов крови из сердца, печени, мезентериальной, периренальной и периовариальной тканей их собирали, взвешивали и хранили при -80°С.

106. 3.5 Статистика и анализ данных

107. Статистический анализ всех данных проводился с использованием статистического программного обеспечения SPSS 22.0. Все данные выражены как среднее±SEM, а статистическая разница определяется как Р<0,05.

108. 3.6 Результаты исследований

109. 3.6.1 Введение препарата кластера золота значительно снижало увеличение веса крыс и потребление пищи, вызванное оланзапином.

110. В таблице 2 показаны изменения массы тела крыс в группе отрицательного контроля, контрольной группе модели оланзапина, группах высоких и низких доз трех AuC (A1, А2 и A3) и группе высоких доз AuNP. Как показано в таблице 2, начальная масса тела (НМТ) всех групп крыс была практически одинаковой (245,48 г - 247,86 г). После 21 дня приема препарата конечная масса тела (КМТ) контрольной группы модели оланзапина была значительно выше, чем у группы отрицательного контроля (Р<0,01), что свидетельствует об успешном создании модели. По сравнению с контрольной группой модели оланзапина, вес групп с высокой дозой препарата кластера золота (OLZ+A1H, OLZ+A2H и OLZ+A3H) был значительно ниже (оба Р<0,05), а вес групп с низкой дозой препарата кластера золота (OLZ+A1L, OLZ+A2L и OLZ+A3L) был явно ниже. В то же время, по сравнению с группой отрицательного контроля, конечный прирост массы тела (КПМТ, т.е. разница между конечной массой тела и начальной массой тела) в группе контроля модели оланзапина был существенно увеличен (Р<0.01); по сравнению с контрольной группой модели оланзапина, конечный прирост массы тела (КПМТ) в группах с высокой дозой кластера золота (OLZ+A1H, OLZ+A2H и OLZ+A3H) был существенно снижен (оба Р<0,01), а конечный прирост массы тела (КПМТ) в группах с низкой дозой кластера золота (OLZ+A1L, OLZ+A2L и OLZ+A3L) также был существенно снижен (оба Р<0,05). Три другие группы препаратов с высокой дозой золота (OLZ+A4H, OLZ+A5H и OLZ+A6H) показали аналогичные результаты. Однако, по сравнению с контрольной группой модели оланзапина, конечная масса тела (КМТ) и конечный прирост массы тела (КПМТ) в группе препаратов с наночастицами золота в высокой дозе (OLZ+B) не были значительно снижены (Р>0,05).

111.

112. В таблице 2, НМТ: начальная масса тела; КМТ: конечная масса тела; ПМТ: прирост массы тела; CON: группа отрицательного контроля; OLZ: группа контроля модели оланзапина; OLZ+A1H: группа приема OLZ+A1 в высокой дозе; OLZ+A1L: группа приема OLZ+A1 в низкой дозе; OLZ+A2H: группа приема OLZ+A2 в высокой дозе; OLZ+A2L: группа приема OLZ+A2 в низкой дозе; OLZ+A3H: группа приема OLZ+A3 в высокой дозе; OLZ+A3L: группа приема OLZ+A3 в низкой дозе; OLZ+B: группа приема OLZ+B в высокой дозе; *: Р<0.05, OLZ против CON; **: Р<0,01, OLZ против CON; #: Р<0,05, каждая группа введения против OLZ; ##: Р<0,01, каждая группа введения против OLZ.

113. 3.6.2 Прием препарата кластера золота значительно снижал вызванное оланзапином увеличение брыжеечного жира

114. Вызванное оланзапином увеличение веса может привести к жировой болезни печени. В таблице 3 показаны изменения массы печени и брыжеечного жира крыс в отрицательной контрольной группе, контрольной группе модели оланзапина, группах с высокой и низкой дозой трех AuCs (A1, А2 и A3) и группе с высокой дозой AuNP. Как показано в таблице 3, по сравнению с отрицательной контрольной группой, в контрольной группе модели оланзапина масса печени увеличилась, но существенной разницы не было (Р>0,05). По сравнению с контрольной группой модели оланзапина, различные группы доз трех препаратов кластера золота могут уменьшить массу печени, а группа низкой дозы А1 и группа высокой дозы A3 показали значительную разницу (Р<0,05). Среди периферических жиров, по сравнению с группой отрицательного контроля, в группе контроля модели оланзапина значительно увеличилось накопление кишечного жира (Р<0,05). По сравнению с модельной контрольной группой оланзапина, как высокие, так и низкие дозы A1, А2 и A3 показали дозозависимое снижение вызванного оланзапином увеличения околокишечного жира (наибольший коэффициент потери веса достигал 32%). Три другие группы препаратов с высокой дозировкой кластера золота (OLZ+A4H, OLZ+A5H и OLZ+A6H) показали аналогичные результаты. Таким образом, препараты кластера золота могут явно уменьшить увеличение жира, вызванное оланзапином, и демонстрируют определенную зависимость от дозировки. Однако в группе с высокой дозировкой наночастиц золота значительных изменений не наблюдалось, что указывает на неэффективность наночастиц золота.

115.

116. В таблице 3, CON: группа отрицательного контроля; OLZ: группа контроля модели оланзапина; OLZ+A1H: группа приема OLZ+A1 в высокой дозе; OLZ+A1L: группа приема OLZ+A1 в низкой дозе; OLZ+A2H: группа приема OLZ+A2 в высокой дозе; OLZ+A2L: группа приема OLZ+А2 в низкой дозе; OLZ+А3Н: группа приема OLZ+A3 в высокой дозе; OLZ+A3L: группа приема OLZ+A3 в низкой дозе; OLZ+В: группа приема OLZ+В в высокой дозе; *: Р<0.05, OLZ против CON; #: Р<0.05, каждая группа введения против OLZ; ##: Р<0.01, каждая группа введения против OLZ.

117. 3.6.3 Прием препаратов кластера золота значительно сокращал повышение уровня глюкозы в крови, вызванное оланзапином

118. На фиг. 13 показаны кривые метаболизма глюкозы в крови и площадь под кривой глюкозы в крови (AUG) крыс в группе отрицательного контроля, контрольной группе модели оланзапина, группах с высокой и низкой дозой трех AuCs (A1, А2 и A3) и группе с высокой дозой AuNP.

119. Данное исследование показало, что контрольная группа модели оланзапина и различные группы введения препарата не оказывали существенного влияния на уровень глюкозы крови натощак (Р>0,05). Однако, по сравнению с группой отрицательного контроля, после введения глюкозы уровень глюкозы в крови крыс контрольной группы модели оланзапина значительно увеличился через 30 минут (Р<0,01) и 120 минут (Р<0,05) после внутрибрюшинного введения глюкозы, с 7,54±0,26 ммоль/л и 6,11±0,12 ммоль/л были увеличены до 9,16±0,48 ммоль/л и 6,79±0,32 ммоль/л, соответственно (фиг. 13А). Площадь под кривой глюкозы крови (AUG) значительно увеличилась с 766,83±15,05 ммоль/мин до 845,07±37,88 ммоль/мин (Р<0,05, фиг. 13В). Приведенные выше результаты свидетельствуют о значительном влиянии приема оланзапина на нарушение метаболизма глюкозы у животных.

120. По сравнению с контрольной группой модели оланзапина, уровень глюкозы в крови в группах трех препаратов кластера золота (A1, А2 и A3) был значительно снижен, особенно в группах высоких доз. Уровень глюкозы в крови крыс в трех группах высоких доз значительно снизился через 30 минут (оба Р<0,01), 60 минут (оба Р<0,01) и 120 минут (оба Р<0,01) после введения глюкозы, и уровень глюкозы в крови был близок к уровню глюкозы в группе отрицательного контроля (фиг. 13А). Если взять в качестве примера А1, то значения глюкозы в крови в эти три временные точки снизились с 9,16±0,48 ммоль/л, 6,79±0,32 ммоль/л и 6,30±0,33 ммоль/л в контрольной группе с оланзапином до 7,7±0,15 ммоль/л, 5,74±0,18 ммоль/л и 5,53±0,14 ммоль/л соответственно (фиг. 13А). Кроме того, площадь под кривой глюкозы крови (AUG) при приеме трех высокодозированных препаратов кластера золота также была значительно ниже, чем в контрольной группе с моделью оланзапина (оба показателя Р<0,01, фиг. 13В). Если взять в качестве примера препарат A1 (OLZ+А1Н), то значение AUG снизилось с 845,07±37,88 ммоль/мин в контрольной группе модели оланзапина (OLZ) до 743,50±13,04 ммоль/мин. Глюкоза крови крыс в трех группах с низкой дозировкой препаратов кластера золота также заметно снижалась в разные моменты времени, но обе группы показали значительные различия только через 30 минут (Р<0,05). Три другие группы высокодозовых препаратов кластера золота (OLZ+A4H, OLZ+A5H и OLZ+A6H) показали аналогичные результаты. Это показывает, что препараты кластера золота могут улучшить нарушение метаболизма глюкозы в крови, вызванное оланзапином дозозависимым образом.

121. Однако введение наночастиц золота (В) не привело к значительному снижению концентрации глюкозы в крови (фиг. 13А) или площади под кривой глюкозы в крови (AUG) (фиг. 13В) в различные периоды времени. Следовательно, он не оказывает улучшающего эффекта на нарушение обмена глюкозы в крови, вызванное оланзапином.

122. Таким образом, длительный прием кластеров золота может значительно уменьшить увеличение веса и увеличение жировой массы, вызванные оланзапином, и значительно улучшить нарушения обмена липидов и глюкозы, вызванные оланзапином, что создает основу для последующих исследований и разработки кластеров золота в качестве лекарств для уменьшения побочных эффектов, вызванных антипсихотическими препаратами второго поколения. Однако наночастицы золота не обладают подобными эффектами и не могут быть использованы в качестве лекарств для лечения ожирения, вызванного оланзапином.

123. Другие размеры L-Cys-AuCs, L-NAC-AuCs, L-NIBC-AuCs, CSH-AuCs, MPA-AuCs и p-MBA-AuCs, а также другие AuCs, связанные с лигандом, с различными размерами также имеют подобное действие, но это действие варьируется в определенных пределах. Они не будут подробно описаны здесь.

124. Хотя настоящее изобретение было описано со ссылкой на конкретные варианты осуществления, следует понимать, что эти варианты являются иллюстративными и не ограничивают объем изобретения. Альтернативные варианты осуществления настоящего изобретения будут очевидными для тех, кто обладает обычными навыками в области, к которой относится настоящее изобретение. Такие альтернативные варианты осуществления изобретения считаются включенными в объем настоящего изобретения. Соответственно, объем настоящего изобретения определяется прилагаемой формулой изобретения и подтверждается приведенным выше описанием.

Изобретение относится к области медицины, а именно к применению кластеров золота, связанных с лигандами, для лечения побочных эффектов, вызванных атипичным антипсихотиком у субъекта. Предлагается применение кластера золота, связанного с лигандом, для лечения побочных эффектов, вызванных атипичным антипсихотиком у субъекта, где кластер золота, связанный с лигандом, содержит: золотое ядро, которое имеет диаметр менее 3 нм; и лиганд, связанный с золотым ядром, где лиганд представляет собой выбранный из группы, состоящей из L-цистеина и его производных, D-цистеина и его производных, цистеинсодержащих олигопептидов и их производных и других тиолсодержащих соединений. При этом L-цистеин и его производные выбирают из группы, состоящей из L-цистеина, N-изобутирил-L-цистеина (L-NIBC) и N-ацетил-L-цистеина (L-NAC); D-цистеин и его производные выбирают из группы, состоящей из D-цистеина, N-изобутирил-D-цистеина (D-NIBC) и N-ацетил-D-цистеина (D-NAC); цистеинсодержащие олигопептиды и их производные представляют собой цистеинсодержащие дипептиды, цистеинсодержащие трипептиды или цистеинсодержащие тетрапептиды; и другие тиолсодержащие соединения выбирают из группы, состоящей из 1-[(2S)-2-метил-3-тиол-1-оксопропил]-L(D)-пролина, тиогликолевой кислоты, меркаптоэтанола, тиофенола, D-3-троловола, N-(2-меркаптопропионил)-глицина, додецилмеркаптана, 2-аминоэтанэтиола (CSH), 3-меркаптопропионовой кислоты (MPA) и 4-меркаптобеновой кислоты (p-MBA). Использование изобретения позволяет в значительной степени ослаблять побочные эффекты, вызываемые атипичными антипсихотиками. 6 з.п. ф-лы, 13 ил., 3 табл., 3 пр.

1. Применение кластера золота, связанного с лигандом, для лечения побочных эффектов, вызванных атипичным антипсихотиком у субъекта, где кластер золота, связанный с лигандом, содержит:

золотое ядро; и

лиганд, связанный с золотым ядром;

где золотое ядро имеет диаметр менее 3 нм;

лиганд представляет собой выбранный из группы, состоящей из L-цистеина и его производных, D-цистеина и его производных, цистеинсодержащих олигопептидов и их производных и других тиолсодержащих соединений;

L-цистеин и его производные выбирают из группы, состоящей из L-цистеина, N-изобутирил-L-цистеина (L-NIBC) и N-ацетил-L-цистеина (L-NAC);

D-цистеин и его производные выбирают из группы, состоящей из D-цистеина, N-изобутирил-D-цистеина (D-NIBC) и N-ацетил-D-цистеина (D-NAC);

цистеинсодержащие олигопептиды и их производные представляют собой цистеинсодержащие дипептиды, цистеинсодержащие трипептиды или цистеинсодержащие тетрапептиды; и

другие тиолсодержащие соединения выбирают из группы, состоящей из 1-[(2S)-2-метил-3-тиол-1-оксопропил]-L(D)-пролина, тиогликолевой кислоты, меркаптоэтанола, тиофенола, D-3-троловола, N-(2-меркаптопропионил)-глицина, додецилмеркаптана, 2-аминоэтанэтиола (CSH), 3-меркаптопропионовой кислоты (MPA) и 4-меркаптобеновой кислоты (p-MBA).

2. Применение по пункту 1, где золотое ядро имеет диаметр в интервале 0,5-3 нм.

3. Применение по пункту 1, где золотое ядро имеет диаметр в интервале 0,5-2,6 нм.

4. Применение по пункту 1, где цистеинсодержащие дипептиды выбирают из группы, состоящей из L(D)-цистеин-L(D)-аргинин дипептида (CR), L(D)-аргинин-L(D)-цистеин дипептида (RC), L(D)-гистидин-L(D)-цистеин дипептида (HC) и L(D)-цистеин-L(D)-гистидин дипептида (CH).

5. Применение по пункту 1, где цистеинсодержащие трипептиды выбирают из группы, состоящей из глицин-L(D)-цистеин-L(D)-аргинин трипептида (GCR), L(D)-пролин-L(D)-цистеин-L(D)-аргинин трипептида (PCR), L(D)-лизин-L(D)-цистеин-L(D)-пролин трипептида (KCP) и L(D) -глутатиона (GSH).

6. Применение по пункту 1, где цистеинсодержащие тетрапептиды выбирают из группы, состоящей из глицин-L(D)-серин-L(D)-цистеин-L(D)-аргининового тетрапептида (GSCR) и глицин-L(D)-цистеин-L(D)-серин-L(D)-аргининового тетрапептида (GCSR).

7. Применение по п. 1, где атипичный антипсихотик выбирают из группы, состоящей из оланзапина, клозапина, рисперидона и кветиапина.