Способ лечения с использованием антитела против CCL24 Российский патент 2024 года по МПК A61K39/395 C07K16/24 A61P1/16 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

[1] Настоящее изобретение в целом относится к применению моноклонального антитела против CCL24 для лечения фиброзных воспалительных заболеваний у людей.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[2] Неалкогольная жировая болезнь печени (НАЖБП) является наиболее распространенным хроническим заболеванием печени в мире, поражающим до 30% взрослого населения и от 70 до 80% индивидуумов, страдающих ожирением и диабетом (Chalasani et al. 2012). НАЖБП охватывает гистологический спектр, варьирующийся от простого стеатоза до неалкогольного стеатогепатита (НАСГ), последний из которых может иметь различную степень тяжести фиброза. Хотя у многих индивидуумов с простым стеатозом не развивается более тяжелое заболевание, НАСГ может прогрессировать как до цирроза печени, так и до терминальной стадии заболевания печени. НАСГ является второй по значимости этиологией заболевания печени среди взрослых, ожидающих трансплантации печени в Соединенных Штатах, и, согласно прогнозам, станет наиболее распространенным показанием для трансплантации печени к 2020 году (Wong et al. 2015). Кроме того, НАСГ является новым фактором риска развития диабета 2 типа, сердечно-сосудистых заболеваний и терминальной стадии заболевания почек (Chalasani et al. 2012, Musso et al. 2014).

[3] Первичный склерозирующий холангит (ПСХ) представляет собой редкое хроническое холестатическое заболевание печени, характеризующееся прогрессирующим воспалением, фиброзом и разрушением внутрипеченочных и внепеченочных желчных протоков без какой-либо идентифицируемой причины. Прогрессирование заболевания ПСХ может варьироваться, но обычно начинается в портальных трактах; фиброз и соответствующие воспалительные ответные реакции вызывают прогрессирующее распространение фиброзного состояния. До настоящего времени ни одно лечение, за исключением трансплантации печени, не связано с улучшением клинического исхода.

[4] Системный склероз (SSc) представляет собой системное заболевание соединительной ткани. Характеристики системного склероза включают основные вазомоторные нарушения; фиброз; последующую атрофию кожи, подкожной ткани, мышц и внутренних органов (например, пищеварительного тракта, легких, сердца, почек, ЦНС (центральной нернвой системы)) и иммунологические нарушения. SSc представляет собой сложное ревматологическое аутоиммунное заболевание, при котором воспаление, фиброз и васкулопатия имеют несколько общих патогенных путей, которые приводят к повреждению кожи и внутренних органов.

[5] CCL24 представляет собой хемокин, который способствует миграции клеток и регулирует воспалительную и фиброзную активность через комплекс CCR3. CCL24 продуцируется несколькими типами клеток, и его рецептор CCR3 присутствует на эозинофилах, Т-клетках, моноцитах и фибробластах. CM-101 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело против CCL24.

[6] В данной области техники сохраняется потребность в улучшенных способах лечения фиброзных воспалительных заболеваний, таких как неалкогольный стеатогепатит (НАСГ), первичный склерозирующий холангит (ПСХ) и системный склероз (SSc).

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[7] Настоящее изобретение в целом относится к дозировке и времени введения моноклонального антитела против CCL24 для лечения фиброзных воспалительных заболеваний у субъектов-людей.

[8] В одном аспекте настоящее изобретение относится к способам лечения фиброзного воспалительного заболевания у субъекта-человека, включающим введение эффективного количества моноклонального антитела против CCL24. Настоящее изобретение также относится к моноклональному антителу против CCL24 для применения в способах лечения фиброзного воспалительного заболевания у субъекта-человека, причем указанный способ включает введение эффективного количества указанного моноклонального антитела против CCL24 субъекту-человеку. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 содержит: вариабельную область тяжелой цепи, содержащую: a) определяющую комплементарность область VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 1; b) определяющую комплементарность область VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 2; и c) определяющую комплементарность область VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 3; и вариабельную область легкой цепи, содержащую: d) определяющую комплементарность область VK CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 4; e) определяющую комплементарность область VK CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 5; и f) определяющую комплементарность область VK CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 6. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой гуманизированное или человеческое антитело. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 95% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 7. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 содержит тяжелую цепь, имеющую по меньшей мере 95% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 11. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую по меньшей мере 95% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 8. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 содержит легкую цепь, имеющую по меньшей мере 95% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 12. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую 100% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 7. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 содержит тяжелую цепь, имеющую 100% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 11. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую 100% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 8. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 содержит легкую цепь, имеющую 100% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 12. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 содержит тяжелую цепь согласно SEQ ID NO: 11 и легкую цепь согласно SEQ ID NO: 12.

[9] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в дозе от около 0,75 до около 20 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в дозе около 10 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в дозе около 10 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в дозе около 5 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в дозе около 2,5 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят подкожно. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят внутривенно. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в одну-четыре недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в две недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в три недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в четыре недели. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию в сыворотке моноклонального антитела против CCL24 от около 10 до около 1000 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию в сыворотке моноклонального антитела против CCL24 от около 60 до около 90 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию в сыворотке моноклонального антитела против CCL24 от около 70 до около 300 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 достигает стационарной концентрации в сыворотке после трех введений.

[10] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в течение по меньшей мере четырех недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в течение по меньшей мере 15 недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в течение по меньшей мере 24 недель. В некоторых вариантах осуществления период полужизни моноклонального антитела против CCL24 составляет около 10-30 дней. В некоторых вариантах осуществления период полужизни моноклонального антитела против CCL24 составляет около 17 дней. В некоторых вариантах осуществления период полужизни моноклонального антитела против CCL24 составляет около 19 дней. В некоторых вариантах осуществления фиброзное воспалительное заболевание, которое подвергают лечению способом согласно настоящему изобретению, представляет собой неалкогольный стеатогепатит (НАСГ). В некоторых вариантах осуществления фиброзное воспалительное заболевание, которое подвергают лечению способом согласно настоящему изобретению, представляет собой первичный склерозирующий холангит (ПСХ). В некоторых вариантах осуществления фиброзное воспалительное заболевание, которое подвергают лечению способом согласно настоящему изобретению, представляет собой системный склероз (SSC).

[11] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке на 4 день после введения до по меньшей мере 150% от исходного общего уровня CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 улучшает состояние печени субъекта по оценке одного или более циркулирующих маркеров фиброза. В некоторых вариантах осуществления один или более циркулирующих маркеров фиброза выбраны из группы, состоящей из плазменной аланинаминотрансферазы (ALT), щелочной фосфатазы (ALP), аспартатаминотрансферазы (AST), PRO-C3, PRO-C4, PRO-C5, C3M, цитокератина 18 (CK18), аминотерминального пропептида проколлагена типа III (PIIINP), гиалуроновой кислоты (HA), тканевого ингибитора металлопротеиназ 1 (TIMP-1), тканевого ингибитора металлопротеиназ 2 (TIMP-2), тромбоцитарного фактора роста (PDGF) (например, PDGF АА, содержащего две альфа-субъединицы), γ-глутамилтрансферазы (GGT), билирубина, C-реактивного белка (CRP), скорости оседания эритроцитов (ESR) и прокальцитонина (PCT). В некоторых вариантах осуществления один или более циркулирующих маркеров фиброза измеряют с помощью анализа крови на генерализованный фиброз печени (ELF). В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 уменьшает уровень тканевого ингибитора металлопротеиназ 1 (TIMP-1) в сыворотке на по меньшей мере 10% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 уменьшает уровень тканевого ингибитора металлопротеиназ 2 (TIMP-2) в сыворотке на по меньшей мере 5% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 уменьшает уровень PDGF AA в сыворотке на по меньшей мере 5% или по меньшей мере 10% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 улучшает состояние печени по оценке одного или более методов визуальной диагностики. В некоторых вариантах осуществления один или более методов визуальной диагностики включают определение протонной плотности жировой фракции по данным магнитно-резонансной визуализации (MRI-PDFF), эластографию печени и/или FibroScan. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 уменьшает содержание жира в печени субъекта на по меньшей мере 15% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 уменьшает эластичность печени на по меньшей мере 0,5 кПа по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24, как измерено с помощью FibroScan. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 улучшает состояние печени по оценке одного или более тестов на функцию ферментов печени. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 уменьшает уровень γ-глутамилтрансферазы (GGT) на по меньшей мере 20% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 уменьшает уровень аланинаминотрансферазы (ALT) на по меньшей мере 10% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 не вызывает дозолимитирующей токсичности. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 не вызывает возникновения реакции в месте инъекции. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 не вызывает тяжелого или серьезного нежелательного явления (AE). В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 не увеличивает уровень триглицеридов (TG), липопротеина низкой плотности (LDL) и/или холестерина в крови субъекта.

[12] В одном аспекте настоящее изобретение относится к способам лечения неалкогольного стеатогепатита (НАСГ) у субъекта-человека, включающим введение эффективного количества моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 содержит тяжелую цепь согласно SEQ ID NO: 11 и легкую цепь согласно SEQ ID NO: 12. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в дозе около 2,5 мг/кг, около 5 мг/кг или около 10 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в дозе около 5 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят подкожно. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в две недели. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию в сыворотке моноклонального антитела против CCL24 от около 60 до около 90 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 достигает стационарной концентрации в сыворотке после 3 введений. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в течение по меньшей мере 14 недель. В некоторых вариантах осуществления период полужизни моноклонального антитела против CCL24 составляет около 16 дней. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке на 4 день после введения до по меньшей мере 150% от исходного общего уровня CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 улучшает состояние печени субъекта по оценке одного или более циркулирующих маркеров фиброза. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 уменьшает содержание жира в печени субъекта по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24, как измерено с помощью MRI-PDFF. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 уменьшает эластичность печени по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24, как измерено с помощью FibroScan.

[13] В одном аспекте настоящее изобретение относится к способам лечения первичного склерозирующего холангита (ПСХ) у субъекта-человека, включающим введение эффективного количества моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 содержит тяжелую цепь согласно SEQ ID NO: 11 и легкую цепь согласно SEQ ID NO: 12. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в дозе около 5 мг/кг, около 10 мг/кг или около 20 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в дозе около 10 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят внутривенно. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в три недели. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию в сыворотке моноклонального антитела против CCL24 от около 70 до около 300 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 достигает стационарной концентрации в сыворотке после 3 введений. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в течение по меньшей мере 12 недель. В некоторых вариантах осуществления период полужизни моноклонального антитела против CCL24 составляет около 19 дней. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 снижает уровень стационарной концентрации в сыворотке CCL24 по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 улучшает состояние печени субъекта по оценке одного или более циркулирующих маркеров фиброза. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 снижает уровень циркулирующей щелочной фосфатазы (ALP) по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 снижает оценку генерализованного фиброза печени (ELF) по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 снижает уровень циркулирующего PRO-C3, PRO-C4, C3M и/или PRO-C5 по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 уменьшает эластичность печени по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24, как измерено с помощью FibroScan.

[14] В одном аспекте настоящее изобретение относится к способам лечения системного склероза (SSc) у субъекта-человека, включающим введение эффективного количества моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 содержит тяжелую цепь согласно SEQ ID NO: 11 и легкую цепь согласно SEQ ID NO: 12. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в дозе около 2,5-10 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят внутривенно. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в две, три или четыре недели. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию в сыворотке моноклонального антитела против CCL24 от около 70 до около 300 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 достигает стационарной концентрации в сыворотке после 3 введений. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в течение по меньшей мере 24 недель. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке на 4 день после введения до по меньшей мере 150% от исходного общего уровня CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 улучшает оценку комбинированного индекса ответа при системном склерозе (CRISS) у субъекта по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 снижает уровень одного или более циркулирующих маркеров фиброза по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 улучшает легочную функцию субъекта по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24.

[15] В одном аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим от около 1 до около 500 мг/мл моноклонального антитела против CCL24, содержащего тяжелую цепь согласно SEQ ID NO: 11 и легкую цепь согласно SEQ ID NO: 12. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит от около 100 до около 250 мг/мл моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит около 175 мг/мл моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит от около 5 до около 20 мг/мл моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит около 10 мг/мл моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит гистидиновый буфер, необязательно в концентрации около 10 мМ. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит буфер на основе фосфата натрия или калия, необязательно в концентрации около 10 мМ. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит аргинин, необязательно в концентрации от около 30 до около 200 мМ или необязательно в концентрации около 150 мМ. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит глутаминовую кислоту, необязательно в концентрации от около 30 до около 200 мМ или необязательно в концентрации около 150 мМ. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит сорбитол, необязательно в количестве около 4%. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит глицин, необязательно в концентрации от около 10 до около 100 мМ или необязательно в концентрации около 40 мМ. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит полисорбат, необязательно полисорбат-80, необязательно в количестве около 0,02% или около 0,01%. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет рН от 5 до 8. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет рН от 6 до 7, необязательно 6,1 или 6,3. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция поставляется в форме стандартной дозы, имеющей объем заполнения от около 0,2 до около 2 мл или от около 5 до около 20 мл.

[16] В одном аспекте настоящее изобретение относится к способам лечения неалкогольного стеатогепатита (НАСГ) у субъекта-человека, включающим введение эффективного количества фармацевтической композиции по настоящему изобретению.

[17] В одном аспекте настоящее изобретение относится к способам лечения первичного склерозирующего холангита (ПСХ) у субъекта-человека, включающим введение эффективного количества фармацевтической композиции по настоящему изобретению.

[18] В одном аспекте настоящее изобретение относится к способам лечения системного склероза (SSc) у субъекта-человека, включающим введение эффективного количества фармацевтической композиции по настоящему изобретению. В некоторых вариантах осуществления стадия введения включает подкожное введение. В некоторых вариантах осуществления стадия введения включает внутривенное введение.

[19] В одном аспекте настоящее изобретение относится к наборам, содержащим фармацевтическую композицию согласно настоящему изобретению и инструкции по применению.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

[20] На фиг. 1 показаны данные средних концентраций CM-101 в сыворотке относительно времени, полулогарифмическая шкала после однократного внутривенного (IV) введения.

[21] На фиг. 2 показаны данные средних концентраций CM-101 в сыворотке относительно времени, полулогарифмическая шкала. После однократного внутривенного или подкожного (SC) введения 5 мг/кг.

[22] На фиг. 3 показаны данные средних концентраций CM-101 в сыворотке относительно времени, полулогарифмическая шкала в течение 5 введений 2,5 мг/кг CM-101 внутривенно один раз в 3 недели.

[23] На фиг. 4 показаны смоделированное и наблюдаемое воздействие CM-101 после повторного подкожного введения 2,5 мг/кг у людей с использованием различных схем дозирования. Концентрации в сыворотке относительно времени, линейная шкала.

[24] На фиг. 5 показано смоделированное воздействие CM-101 после повторного подкожного введения 5 мг/кг у людей с использованием различных схем дозирования. Концентрации в сыворотке относительно времени, линейная шкала.

[25] На фиг. 6A-6E показано кратное изменение общих уровней CCL24 у здоровых добровольцев, получавших однократную возрастающую дозу CM-101 по сравнению с плацебо. На фиг. 6A показана когорта 1 - введение 0,75 мг/кг CM-101 по сравнению с плацебо. На фиг. 6B показана когорта 2 - введение 2,5 мг/кг CM-101 по сравнению с плацебо. На фиг. 6C показана когорта 3 - введение 5 мг/кг CM-101 по сравнению с плацебо. На фиг. 6D показана когорта 4 - введение 10 мг/кг CM-101 по сравнению с плацебо. На фиг. 6E показаны плацебо, когорта 2, 3 и 4.

[26] На фиг. 7 показано кратное изменение общих уровней CCL24 у здоровых добровольцев, получавших однократную инъекцию 5 мг/кг CM-101 подкожно по сравнению с плацебо. Общие уровни CCL24 представлены как изменение относительно исходного уровня (в процентах).

[27] На фиг. 8 показано кратное изменение общих уровней CCL24 у здоровых добровольцев, получавших однократную дозу 5 мг/кг CM-101 с применением внутривенного или подкожного введения. Однократное введение 5 мг/кг CM-101 осуществлялось путем либо инфузии (внутривенно), либо инъекции (подкожно). Общие уровни CCL24 представлены как изменение относительно исходного уровня (в процентах).

[28] На фиг. 9 показана корреляция ФК-ФД (фармакокинетика-фармакодинамика) у здоровых добровольцев, получавших однократную подкожную 5 мг/кг дозу CM-101. Однократное введение 5 мг/кг CM-101 осуществляли путем инъекции (подкожно). Уровни CM-101, нанесенные на правую ось Y, измеряли с помощью валидированного анализа. Общие уровни CCL24 представлены в виде изменения относительно исходного уровня (в процентах), нанесенного на левую ось Y.

[29] На фиг. 10 показана фармакокинетика CM-101 у пациентов с НАЖБП, получавших пять повторных доз 2,5 мг/кг внутривенно или 5 мг/кг подкожно CM101. На графике представлены уровни CM-101 (мкг/мл) в сыворотке в зависимости от времени (дней).

[30] На фиг. 11 показаны уровни маркеров оборота коллагена у пациентов с НАЖБП, получавших CM101 или плацебо. На графике представлено относительное изменение относительно исходного уровня (%) для каждого из маркеров оборота коллагена: Pro-C3, Pro-C4 и C3M. Результаты показаны для пациентов, у которых исходная эластография (измеренная с помощью FibroScan) составляла более 4 кПа (n=10 CM-101; n=3 плацебо).

[31] На фиг. 12 показаны уровни сывороточных биомаркеров фиброза у пациентов с НАЖБП, получавших CM101 или плацебо. На графике представлено относительное изменение относительно исходного уровня (%) для каждого из сывороточных биомаркеров фиброза: TIMP-1, TIMP-2 и PDGF AA. Результаты показаны для пациентов, у которых исходная эластография (измеренная с помощью FibroScan) составляла более 4 кПа (n=10 CM-101; n=3 плацебо).

[32] На фиг. 13 показана эластография у пациентов с НАЖБП, получавших CM101 или плацебо. На графике представлена эластичность печени (относительное изменение относительно исходного уровня (%)). Результаты показаны для пациентов, у которых исходная эластография (измеренная с помощью FibroScan) составляла более 4 кПа (n=10 CM-101; n=3 плацебо).

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[33] Как описано в настоящем документе, фиброзные воспалительные заболевания, такие как неалкогольный стеатогепатит (НАСГ), первичный склерозирующий холангит (PSC) и системный склероз (SSc), можно лечить путем подкожного или внутривенного введения моноклонального антитела против CCL24. В одном аспекте настоящее изобретение относится к дозам, путям и схемам введения моноклонального антитела против CCL24 (например, CM-101), которые могут эффективно модулировать передачу сигналов CCL24 у субъекта-человека, имеющего фиброзное воспалительное заболевание, и достигать благоприятных клинических результатов, измеренных с помощью одного или более тестов, как описано в настоящем документе. Также раскрыты фармакокинетика и фармакодинамика моноклонального антитела против CCL24 (например, CM-101) в соответствии с такими введениями, которые приводят к желательным клиническим результатам.

[34] В одном аспекте настоящее изобретение относится к способам лечения фиброзного воспалительного заболевания у субъекта-человека, включающим введение эффективного количества моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к моноклональному антителу против CCL24 или его фармацевтической композиции для применения в лечении фиброзных воспалительных заболеваний.

[35] В некоторых вариантах осуществления фиброзные воспалительные заболевания выбраны из группы, состоящей из неалкогольных жировых болезней печени (НАЖБП), холестаза, внутрипеченочных холестатических заболеваний печени, гепатита (например, алкогольного гепатита), цирроза печени и системного склероза (SSc). В некоторых вариантах осуществления указанная НАЖБП представляет собой неалкогольную жировую печень (НАЖБ) или неалкогольный стеатогепатит (НАСГ). В некоторых вариантах осуществления указанная патология печени представляет собой гепатоцеллюлярную карциному, возникающую в результате НАСГ. В некоторых вариантах осуществления указанное внутрипеченочное холестатическое заболевание печени представляет собой первичный склерозирующий холангит (ПСХ) или первичный билиарный цирроз (ПБЦ). В некоторых вариантах осуществления указанная патология печени представляет собой холангиокарциному, возникающую в результате ПСХ.

[36] В некоторых вариантах осуществления фиброзное воспалительное заболевание представляет собой неалкогольный стеатогепатит (НАСГ). В некоторых вариантах осуществления фиброзное воспалительное заболевание представляет собой первичный склерозирующий холангит (ПСХ). В некоторых вариантах осуществления фиброзное воспалительное заболевание представляет собой системный склероз (SSC).

[37] В одном аспекте изобретение относится к антителу против CCL24 или фармацевтической композиции, следовательно, для применения в:

a) снижении повышенного уровня ферментов печени в сыворотке при поражении печени;

b) уменьшении поражения печени, некроза или фиброза;

c) ослаблении перехода звездчатых клеток печени (HSC) в миофибробласты; и/или

d) снижении или ингибировании активации CCR3 в клетке.

[38] В некоторых вариантах осуществления антитело против CCL24 может представлять собой моноклональное антитело. В некоторых вариантах осуществления антитело против CCL24 может представлять собой химерное антитело, человеческое антитело, гуманизированное антитело или их антигенсвязывающий фрагмент, выбранный из группы, состоящей из Fv, одноцепочечного Fv (scFv), вариабельной области тяжелой цепи, способной связывать антиген, вариабельной области легкой цепи, способной связывать антиген, Fab, F(ab)2' и любой их комбинации. Антитела против CCL24 описаны в, например, WO 2010/086854, WO 2015/132790 и WO 2018/163185, полное содержание которых включено в настоящий документ посредством ссылки.

[39] В некоторых вариантах осуществления антитело против CCL24 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело CM-101, как описано в данном документе.

Моноклональное антитело против CCL24

[40] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, причем указанное антитело содержит:

вариабельную область тяжелой цепи, содержащую:

а) определяющую комплементарность область VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 1;

b) определяющую комплементарность область VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 2; и

с) определяющую комплементарность область VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 3; и

вариабельную область легкой цепи, содержащую:

d) определяющую комплементарность область VK CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 4;

e) определяющую комплементарность область VK CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 5; и

f) определяющую комплементарность область VK CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 6.

[41] В соответствии с изобретением VH CDR1 содержит аминокислотную последовательность NSGMN, обозначенную как SEQ ID NO: 1; VH CDR2 содержит аминокислотную последовательность WINTYNGEPTYTDDFKG, обозначенную как SEQ ID NO: 2, VH CDR3 содержит аминокислотную последовательность HSYGSSYAMDN, обозначенную как SEQ ID NO: 3; VK CDR1 содержит аминокислотную последовательность KASQSVDYDGDSYMN, обозначенную как SEQ ID NO: 4; VK CDR2 содержит аминокислотную последовательность VASNLKS, обозначенную как SEQ ID NO: 5; и VK CDR3 содержит аминокислотную последовательность QQSNEEPWT, обозначенную как SEQ ID NO: 6. В одном конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к моноклональному антителу против CCL24 или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему определяющую комплементарность область VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность HSYGSSYAMDN, обозначенную как SEQ ID NO: 3, для применения в лечении патологий печени.

[42] Вышеуказанные CDR последовательности CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 и CDRL3, обозначенные как SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5 и SEQ ID NO: 6, соответственно, также представлены в контексте их соответствующих последовательностей тяжелых и легких цепей.

[43] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи SEQ ID NO: 7:

QIQLVQSGPELKKPGASVKVSCRASGYPFTNSGMNWVKQAPGKGLKWMGWINTYNGEPTYTDDFKGRFAFSLETSASTAYLQINNLRNEDTATYFCASHSYGSSYAMDNWGQGTSVTVSS.

[44] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область легкой цепи SEQ ID NO: 8:

DIVLTQSPDSLAVSLGERATINCKASQSVDYDGDSYMNWYQQKPGQPPKLLIYVASNLKSGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSNEEPWTFG GGTKVEIK.

[45] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 содержит вариабельную область тяжелой цепи SEQ ID NO: 7 и вариабельную область легкой цепи SEQ ID NO: 8.

[46] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 согласно изобретению представляет собой гуманизированное моноклональное антитело, содержащее вариабельную область тяжелой цепи, обозначенную как SEQ ID NO: 7, с делецией и/или заменой 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 остатков на своем N- и/или C-конце, и/или вариабельную область легкой цепи, обозначенную как SEQ ID NO: 8, с делецией и/или заменой 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 остатков на своем N- и/или C-конце. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или 100% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 7, и/или вариабельную область легкой цепи, имеющую по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или 100% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 8.

[47] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 согласно изобретению представляет собой гуманизированное моноклональное антитело, содержащее шесть последовательностей CDR, обозначенных как SEQ ID NO: 1-6, и вариабельную область тяжелой цепи, имеющую по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или 100% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 7, и/или вариабельную область легкой цепи, имеющую по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или 100% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 8.

[48] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к моноклональному антителу против CCL24, которое связывает тот же эпитоп, что и антитело, содержащее:

(a) CDR1 тяжелой цепи, содержащую NSGMN (SEQ ID NO: 1), CDR2 тяжелой цепи, содержащую WINTYNGEPTYTDDFKG (SEQ ID NO: 2), и CDR3 тяжелой цепи, содержащую HSYGSSYAMDN (SEQ ID NO: 3); и

(b) CDR1 легкой цепи, содержащую KASQSVDYDGDSYMN (SEQ ID NO: 4), CDR2 легкой цепи, содержащую VASNLKS (SEQ ID NO: 5), и CDR3 легкой цепи, содержащую QQSNEEPWT (SEQ ID NO: 6).

[49] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 для применения согласно изобретению представляет собой гуманизированное моноклональное антитело, причем указанное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, кодируемую последовательностью нуклеиновой кислоты согласно SEQ ID NO: 9, и вариабельную область легкой цепи, кодируемую последовательностью нуклеиновой кислоты согласно SEQ ID NO: 10. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 содержит вариабельную область тяжелой цепи, кодируемую нуклеиновой кислотой, имеющей по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или 100% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 9, и/или вариабельную область легкой цепи, кодируемую нуклеиновой кислотой, имеющей по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или 100% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 10.

[50] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 для применения согласно изобретению представляет собой гуманизированное моноклональное антитело под названием CM-101, причем указанное антитело содержит тяжелую цепь согласно SEQ ID NO: 11 и легкую цепь согласно SEQ ID NO: 12:

QIQLVQSGPELKKPGASVKVSCRASGYPFTNSGMNWVKQAPGKGLKWMGWINTYNGEPTYTDDFKGRFAFSLETSASTAYLQINNLRNEDTATYFCASHSYGSSYAMDNWGQGTSVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK

(SEQ ID NO: 11)

DIVLTQSPDSLAVSLGERATINCKASQSVDYDGDSYMNWYQQKPGQPPKLLIYVASNLKSGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSNEEPWTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

(SEQ ID NO: 12)

[51] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 согласно изобретению представляет собой гуманизированное моноклональное антитело, содержащее тяжелую цепь, обозначенную как SEQ ID NO: 11, с вариацией аминокислот 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 остатков, и/или легкую цепь, обозначенную как SEQ ID NO: 12, с вариацией аминокислот 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 остатков. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 содержит тяжелую цепь, имеющую по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или 100% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 11, и/или легкую цепь, имеющую по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или 100% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 12.

[52] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным терапевтическим агентом. В некоторых вариантах осуществления указанный по меньшей мере один дополнительный терапевтический агент выбран из группы, состоящей из химиотерапевтических средств, цитокинов, пептидов, антител и антибиотиков. В некоторых вариантах осуществления указанный дополнительный терапевтический агент включает, но не ограничивается, агонисты фарнезоидного X-рецептора (FXR) (например, кафестол, хенодезоксихолевая кислота, обетихолевая кислота, фексарамин), агонисты рецептора, активируемого пероксисомным пролифератором (PPAR), моноклональные антитела против хемокина или цитокина, малые молекулы, которые ингибируют хемокиновые или цитокиновые функции, противовоспалительные и противофиброзные агенты, включая стероиды и растворимые белковые противовоспалительные агенты. В некоторых вариантах осуществления дополнительный терапевтический агент представляет собой дополнительное антитело. В некоторых вариантах осуществления указанный по меньшей мере один дополнительный терапевтический агент выбран из группы, состоящей из агонистов фарнезоидного X-рецептора (FXR), агонистов рецептора, активируемого пероксисомным пролифератором (PPAR), моноклональных антител против хемокина или цитокина, малых молекул, противовоспалительных агентов, противофиброзных агентов и стероидов. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 или фармацевтическую композицию, следовательно, вводят до, одновременно или после введения указанного по меньшей мере одного дополнительного терапевтического агента. В некоторых вариантах осуществления указанная фармацевтическая композиция дополнительно содержит по меньшей мере один дополнительный терапевтический агент.

[53] В некоторых вариантах осуществления антитело согласно изобретению является моноклональным антителом. Термин «моноклональное антитело», «моноклональные антитела» или «mAb», как определено в настоящем документе, относится к популяции по существу гомогенных антител, то есть отдельные антитела, составляющие популяцию, являются идентичными, за исключением возможно встречающихся в природе мутаций, которые могут присутствовать в незначительных количествах. Моноклональные антитела направлены против одного антигенного сайта.

[54] Иллюстративная структурная единица антитела включает тетрамер, как известно в данной области техники. Каждый тетрамер состоит из двух идентичных пар полипептидных цепей, каждая пара имеет одну «легкую цепь» и одну «тяжелую цепь». N-конец каждой цепи определяет вариабельную область от около 100 до 110 или более аминокислот, в первую очередь отвечающих за распознавание антигена (или эпитопа).

[55] Таким образом, термины «вариабельная область тяжелой цепи» (VH) и «вариабельная область легкой цепи» (VL) относятся к этим тяжелым и легким цепям, соответственно. Более конкретно, вариабельная область подразделяется на гипервариабельную и каркасную (FR) области. Гипервариабельные области имеют высокое соотношение различных аминокислот в заданном положении по сравнению с наиболее распространенной аминокислотой в этом положении. Четыре FR области, которые имеют более стабильные аминокислотные последовательности, разделяют гипервариабельные области. Гипервариабельные области непосредственно контактируют с частью поверхности антигена. По этой причине гипервариабельные области в настоящем документе называют «определяющими комплементарность областями» или «CDR».

[56] От N-конца до С-конца, как легкие, так и тяжелые цепи содержат домены FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 и FR4. CDR главным образом ответственны за связывание антигена с эпитопом. CDR каждой цепи обычно обозначают как CDR1, CDR2 и CDR3, пронумерованные последовательно, начиная с N-конца, и также обычно определяются указанием цепи, в которой находится конкретная CDR.

[57] Таким образом, определяющие комплементарность области CDRH1, CDRH2 и CDRH3 относятся к трем определяющим комплементарность областям, начиная с N-конца тяжелой цепи антитела, и определяющие комплементарность области CDRL1, CDRL2 и CDRL3 относятся к трем определяющим комплементарность областям, начиная с N-конца легкой цепи антитела. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой химерное антитело, человеческое антитело, гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.

[58] Термин «химерные» антитела, как определено в настоящем документе, относится к антителам, в которых часть тяжелой и/или легкой цепи получена от конкретного вида, а остальная часть цепи(-ей) получена от другого вида.

[59] Термин «гуманизированные» антитела традиционно относится к формам антител нечеловеческого происхождения (например, мышиных), которые содержат каркас иммуноглобулина человека с минимальными последовательностями, полученными из иммуноглобулина нечеловеческого происхождения, в CDR и необязательно в дополнительных соответствующих положениях. По большей части гуманизированные антитела представляют собой иммуноглобулины человека (реципиентное антитело), в которых остатки из гипервариабельной области реципиента заменены остатками из гипервариабельной области нечеловеческого вида (донорское антитело), такого как мыши, крысы, кролики или нечеловеческие приматы, имеющими желаемую специфичность, аффинность и активность. В некоторых вариантах осуществления гуманизированные антитела по настоящему изобретению получали с использованием технологии Composite Human Antibodies™, что минимизирует иммуногенность антител у пациентов. В этой технологии гуманизации в качестве акцепторов для определяющих комплементарность областей (CDR) исходных антител используют несколько сегментов последовательности, полученных из вариабельных (V) областей неродственных человеческих антител. Благодаря тщательному отбору сегментов человеческой последовательности и применению инструментов in silico, избегают присутствия CD4+ Т-клеточных эпитопов, поэтому риск иммуногенности снижается по сравнению со стандартными гуманизированными антителами при сохранении аффинности и специфичности антител.

[60] Термин «человеческое антитело» в данном контексте относится к антителу, которое обладает аминокислотной последовательностью, соответствующей последовательности антитела, продуцируемого человеком, и/или которое было получено с использованием любого из способов получения человеческих антител, известных в данной области техники. Это определение конкретно исключает гуманизированное антитело, которое содержит антигенсвязывающие остатки нечеловеческого происхождения.

[61] Для получения больших количеств антитела (химерного, гуманизированного, полностью гуманизированного или человеческого) может быть получена стабильная клеточная линия, экспрессирующая антитело, путем трансфекции клеток (например, клеток CHO (клетки яичника китайского хомячка)) вектором экспрессии Ig, содержащим как тяжелые, так и легкие цепи антитела. Затем антитела могут быть получены в современной одноразовой биореакторной системе. Антитела могут быть очищены до клинической степени с использованием хорошо известных способов очистки моноклональных антител. Затем могут быть выбраны и расширены клоны, продуцирующие антитела против CCL24, на основании уровней антител в супернатанте, как протестировано любым способом, известным в данной области техники, например, специфическим в отношении CCL24 анализом ELISA (иммуноферментный анализ), как подробно описано в настоящем документе ниже. Главный банк клеток, разработанный для конкретного клона, может служить в качестве исходного растительного материала для всех серий клинической чистоты.

[62] Настоящее изобретение также охватывает варианты вариабельных областей тяжелой и легкой цепи. Варианты могут включать мутации в определяющих комплементарность областях тяжелой и легкой цепей, которые не изменяют активность антител, описанных в настоящем документе, или в каркасной области.

[63] Под термином «вариант» подразумеваются последовательности аминокислот или нуклеотидов, отличные от последовательностей, конкретно указанных в настоящем документе, в которых один или более аминокислотных остатков или нуклеотидов удалены, заменены или добавлены.

[64] Варианты охватывают различные аминокислотные замены. Аминокислотная «замена» является результатом замены одной аминокислоты другой аминокислотой, которая имеет схожие или различные структурные и/или химические свойства. Аминокислотные замены могут быть сделаны на основе сходства полярности, заряда, растворимости, гидрофобности, гидрофильности и/или амфипатической природы соответствующих остатков.

[65] Как правило, варианты охватывают консервативные аминокислотные замены. Таблицы консервативных замен, представляющие функционально схожие аминокислоты, хорошо известны в данной области техники. Например, неполярные (гидрофобные) аминокислоты включают аланин, лейцин, изолейцин, валин, пролин, фенилаланин, триптофан и метионин; полярные нейтральные аминокислоты включают глицин, серин, треонин, цистеин, тирозин, аспарагин и глутамин; положительно заряженные (основные) аминокислоты включают аргинин, лизин и гистидин; и отрицательно заряженные (кислотные) аминокислоты включают аспарагиновую кислоту и глутаминовую кислоту.

[66] Каждая из следующих восьми групп содержит другие иллюстративные аминокислоты, которые являются консервативными заменами друг для друга:

1) Аланин (A), Глицин (G);

2) Аспарагиновая кислота (D), Глутаминовая кислота (E);

3) Аспарагин (N), Глутамин (Q);

4) Аргинин (R), Лизин (K);

5) Изолейцин (I), Лейцин (L), Метионин (M), Валин (V);

6) Фенилаланин (F), Тирозин (Y), Триптофан (W);

7) Серин (S), Треонин (T); и

8) Цистеин (C), Метионин (M).

Консервативные замены нуклеиновых кислот представляют собой замены нуклеиновых кислот, приводящие к консервативным аминокислотным заменам, как определено выше.

[67] Варианты в соответствии с изобретением также охватывают замены неполярных аминокислот на полярные и наоборот.

[68] В данном контексте термин «аминокислота» или «аминокислотный остаток» относится к встречающимся в природе и синтетическим аминокислотам, а также аналогам аминокислот и миметикам аминокислот, которые функционируют аналогично встречающимся в природе аминокислотам.

[69] Вариантные последовательности относятся к аминокислотным или нуклеотидным последовательностям, которые могут характеризоваться процентом идентичности их аминокислотных или нуклеотидных последовательностей с аминокислотными или нуклеотидными последовательностями, описанными в настоящем документе (например, аминокислотными или нуклеотидными последовательностями тяжелых и легких цепей антител, описанных в настоящем документе).

[70] В некоторых вариантах осуществления вариантные последовательности, как определено в настоящем документе, относятся к нуклеотидными последовательностям, которые кодируют вариабельные области тяжелой и легкой цепи, каждая из которых имеет последовательность нуклеотидов с по меньшей мере 70% или 75% идентичностью последовательности, около 80% или 85% идентичностью последовательности, около 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью последовательности по сравнению с последовательностями вариабельных областей тяжелой и легкой цепи, описанными в настоящем документе.

[71] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к иммуноконъюгатам, содержащим моноклональное антитело против CCL24, как описано в настоящем документе, и дополнительный терапевтический агент, как определено в настоящем документе ниже.

Фиброзные воспалительные заболевания

[72] В одном аспекте изобретение относится к способам профилактики, лечения или облегчения фиброзных воспалительных заболеваний, включающим введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества моноклонального антитела против CCL24 или фармацевтической композиции согласно изобретению. В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к моноклональному антителу против CCL24 или фармацевтической композиции, следовательно, для применения в способе профилактики, лечения или облегчения фиброзного воспалительного заболевания, как описано в данном документе.

[73] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способам лечения первичного склерозирующего холангита (ПСХ) у субъекта-человека, включающим введение эффективного количества моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[74] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способам лечения неалкогольного стеатогепатита (НАСГ) у субъекта-человека, включающим введение эффективного количества моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[75] В некоторых варинтах осуществления настоящее изобретение относится к способам лечения системного склероза (SSc) у субъекта-человека, включающим введение эффективного количества моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[76] Также предложены способы снижения повышенных сывороточных уровней ферментов печени (например, ALT, AST, щелочной фосфатазы и билирубина), включающие введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции согласно настоящему описанию. Также предложены способы уменьшения повреждения печени, воспаления или фиброза, включающие введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции в соответствии с изобретением. Также предложены способы ослабления перехода звездчатых клеток печени (HSC) в миофибробласты, включающие введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции согласно изобретению. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[77] «Эффективное количество» моноклонального антитела против CCL24 согласно настоящему изобретению или фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению определяют с учетом таких соображений, чтобы оно было достаточным для лечения, остановки или по меньшей мере уменьшения или облегчения по меньшей мере одного клинического симптома медицинского состояния.

Лечение фиброзных воспалительных заболеваний

[78] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке по сравнению с исходным общим уровнем CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке до по меньшей мере 125%, по меньшей мере 150%, по меньшей мере 200%, по меньшей мере 250%, по меньшей мере 300%, по меньшей мере 350%, по меньшей мере 400%, по меньшей мере 450% или по меньшей мере 500% от исходного общего уровня CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления увеличение общего уровня CCL24 в сыворотке измеряют через около 8 часов, около 16 часов или около 24 часов после введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления увеличение общего уровня CCL24 в сыворотке измеряют в день 1, день 2, день 3, день 4, день 5, день 6, день 7, день 8, день 9, день 10 или день 11 после введения. В некоторых вариантах осуществления подкожное введение 5 мг/кг моноклонального антитела против CCL24 увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке на 4 день после введения до по меньшей мере 150%, по меньшей мере 175%, по меньшей мере 200%, по меньшей мере 250% или по меньшей мере 300% от исходного общего уровня CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления внутривенное введение 10 мг/кг моноклонального антитела против CCL24 увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке на 4 день после введения до по меньшей мере 150%, по меньшей мере 200%, по меньшей мере 250%, по меньшей мере 300%, по меньшей мере 350%, по меньшей мере 400%, по меньшей мере 450% или по меньшей мере 500% от исходного общего уровня CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления увеличение общего уровня CCL24 в сыворотке измеряют между первым и вторым введением моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[79] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции улучшает состояние печени субъекта по оценке одного или более циркулирующих маркеров фиброза. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает уровень одного или более маркеров фиброза или воспаления по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. Маркеры фиброза или воспаления включают плазменную аланинаминотрансферазу (ALT), щелочную фосфатазу (ALP), аспартатаминотрансферазу (AST), PRO-C3, PRO-C4, C3M (PRO-C3, PRO-C4 и C3M также упоминаются в настоящем документе как маркеры оборота коллагена), PRO-C5, цитокератин 18 (CK18), аминотерминальный пропептид проколлагена типа III (PIIINP), гиалуроновую кислоту (HA), тканевый ингибитор металлопротеиназ 1 (TIMP-1), тканевый ингибитор металлопротеиназ 2 (TIMP-2), тромбоцитарный фактор роста (PDGF) (например, PDGF AA), γ-глутамилтрансферазу (GGT), билирубин, C-реактивный белок (CRP), скорость оседания эритроцитов (ESR) и прокальцитонин (PCT). Уровни в маркерах могут быть протестированы с помощью хорошо известных способов, например, анализа ELISA, или способов, описанных в примерах в настоящем документе.

[80] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень циркулирующей щелочной фосфатазы (ALP) по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень циркулирующей щелочной фосфатазы (ALP) на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90% или более чем на 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень циркулирующей щелочной фосфатазы (ALP) на от около 5% до около 30%, от около 20% до около 50%, от около 40% до около 70% или от около 60% до около 99% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[81] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень γ-глутамилтрансферазы (GGT) по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень γ-глутамилтрансферазы (GGT) на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90% или более чем на 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень γ-глутамилтрансферазы (GGT) на от около 5% до около 30%, от около 20% до около 50%, от около 40% до около 70% или от около 60% до около 99% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень γ-глутамилтрансферазы (GGT) на по меньшей мере 20% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[82] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень аланинаминотрансферазы (ALT) по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень аланинаминотрансферазы (ALT) на по меньшей мере около 1%, по меньшей мере около 2,5%, по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 7,5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 12%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90% или более чем на 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень аланинаминотрансферазы (ALT) на от около 5% до около 20%, от около 10% до около 30%, от около 20% до около 50%, от около 40% до около 70% или от около 60% до около 99% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень аланинаминотрансферазы (ALT) на по меньшей мере 10% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[83] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень циркулирующего PRO-C3 (N-терминальный пропептид коллагена типа III (неопептид)) по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень PRO-C3 на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90% или более чем на 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень PRO-C3 на от около 5% до около 30%, от около 20% до около 50%, от около 40% до около 70% или от около 60% до около 99% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[84] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень циркулирующего PRO-C4 (представляющего собой внутренний эпитоп в домене 7S коллагена типа IV) по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень PRO-C4 на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90% или более чем на 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень PRO-C4 на от около 5% до около 30%, от около 20% до около 50%, от около 40% до около 70% или от около 60% до около 99% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[85] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень циркулирующего C3M (неоэпитоп опосредованного MMP-9 распада коллагена типа III, который отражает воспалительное состояние печени) по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень C3M на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90% или более чем на 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень C3M на от около 5% до около 30%, от около 20% до около 50%, от около 40% до около 70% или от около 60% до около 99% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[86] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень циркулирующего PRO-C5 (пропептид коллагена типа V) по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень PRO-C5 на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90% или более чем на 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень PRO-C5 на от около 5% до около 30%, от около 20% до около 50%, от около 40% до около 70% или от около 60% до около 99% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[87] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает оценку генерализованного фиброза печени (ELF) по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает оценку генерализованного фиброза печени (ELF) на по меньшей мере около 0,1, по меньшей мере около 0,2, по меньшей мере около 0,3, по меньшей мере около 0,5, по меньшей мере около 0,7, по меньшей мере около 1,0, по меньшей мере около 1,5, по меньшей мере около 2, по меньшей мере около 3, по меньшей мере около 4, по меньшей мере около 5 или более чем 5 по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. Анализ на генерализованный фиброз печени (ELF) представляет собой неинвазивный анализ крови, который измеряет три прямых маркера фиброза: гиалуроновую кислоту (HA), аминотерминальный пропептид проколлагена типа III (PIIINP) и тканевый ингибитор матриксной металлопротеиназы 1 (TIMP-1). Анализ на ELF, в сочетании с другими лабораторными и клиническими данными, может быть использован для оценки риска прогрессирования до цирроза и LRE (явление со стороны печени) у пациентов с хроническим заболеванием печени. В некоторых вариантах осуществления оценка ELF менее 7,7 указывает на отсутствие фиброза или легкий фиброз, оценка ELF от 7,7 до 9,8 указывает на умеренный фиброз, оценка ELF от 9,8 до 11,3 указывает на тяжелый фиброз, и оценка ELF равная 11,3 или больше указывает на цирроз.

[88] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает оценку генерализованного фиброза печени (ELF) на по меньшей мере 0,1, по меньшей мере 0,2, по меньшей мере 0,3, по меньшей мере 0,5, по меньшей мере 0,7, по меньшей мере 0,8, по меньшей мере 1,0, по меньшей мере 1,2, по меньшей мере 1,5, по меньшей мере 2,0, по меньшей мере 2,5, по меньшей мере 3,0, по меньшей мере 3,5, по меньшей мере 4,0, по меньшей мере 5,0, по меньшей мере 6,0, по меньшей мере 7,0, по меньшей мере 8,0 или по меньшей мере 9,0 по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает оценку генерализованного фиброза печени (ELF) на от около 0,1 до около 1, от около 0,5 до около 1,5, от около 1,0 до около 3,0, от около 1,5 до около 4,0 или от около 2,0 до около 6,0 по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает оценку генерализованного фиброза печени (ELF) до менее чем 11,5, менее чем 11,0, менее чем 10,5, менее чем 10,0, менее чем 9,5, менее чем 9,0, менее чем 8,5, менее чем 8,0, менее чем 7,5 или менее чем 7,0. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[89] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции улучшает состояние печени по оценке одного или более методов визуальной диагностики. В некоторых вариантах осуществления метод визуальной диагностики представляет собой эластографию печени. В некоторых вариантах осуществления метод визуальной диагностики представляет собой ультразвуковую эластографию, такую как FibroScan. В некоторых вариантах осуществления метод визуальной диагностики представляет собой магнитно-резонансную визуализацию. В некоторых вариантах осуществления метод визуальной диагностики представляет собой определение протонной плотности жировой фракции по данным магнитно-резонансной визуализации (MRI-PDFF). В некоторых вариантах осуществления состояние печени представляет собой содержание жира в печени. В некоторых вариантах осуществления содержание жира в печени измеряют с помощью MRI-PDFF, FibroScan или других методов эластографии печени и/или методов визуальной диагностики.

[90] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень содержания жира в печени по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень содержания жира в печени на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90% или более чем на 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень содержания жира в печени на от около 5% до около 20%, от около 10% до около 30%, от около 20% до около 50%, от около 40% до около 70% или от около 60% до около 99% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101. В некоторых вариантах осуществления содержание жира в печени оценивают с помощью магнитно-резонансной визуализации, такой как MRI-PDFF. В некоторых вариантах осуществления содержание жира в печени измеряют с помощью оценки CAP (контролируемый параметр затухания) FibroScan.

[91] FibroScan позволяет получить результат фиброза, который представляет собой измерение количества рубцов в печени. FibroScan измеряет рубцевание, измеряя эластичность печени. Результат фиброза измеряется в килопаскалях (кПа). В некоторых вариантах осуществления диапазон от 2 до 7 кПа указывает на отсутствие рубцов в печени или легкое рубцевание в печени, диапазон от 7,5 до 10 кПа указывает на умеренное рубцевание в печени, диапазон от 10 до 14 кПа указывает на тяжелое рубцевание в печени, и диапазон 14 кПа или выше указывает на распространенное рубцевание в печени (цирроз). FibroScan также позволяет получить оценку CAP, которая представляет собой измерение изменения жира или содержания жира в печени. Оценка CAP измеряется в децибелах на метр (дБ/м). Как правило, она варьируется от 100 до 400 дБ/м.

[92] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает эластичность печени по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления эластичность печени измеряют с помощью FibroScan. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает эластичность печени, как измерено с помощью результата фиброза FibroScan, на по меньшей мере 0,1 кПа, по меньшей мере 0,2 кПа, по меньшей мере 0,3 кПа, по меньшей мере 0,5 кПа, по меньшей мере 0,7 кПа, по меньшей мере 1,0 кПа, по меньшей мере 1,2 кПа, по меньшей мере 1,5 кПа, по меньшей мере 2,0 кПа, по меньшей мере 2,5 кПа, по меньшей мере 3,0 кПа, по меньшей мере 3,5 кПа, по меньшей мере 4,0 кПа, по меньшей мере 5,0 кПа, по меньшей мере 6,0 кПа, по меньшей мере 8,0 кПа, по меньшей мере 10 кПа, по меньшей мере 15 кПа, по меньшей мере 20 кПа, по меньшей мере 25 кПа или по меньшей мере 30 кПа по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает эластичность печени, как измерено с помощью результата фиброза FibroScan, на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90% или более чем на 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[93] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает оценку CAP, как измерено с помощью FibroScan, на по меньшей мере 5 дБ/м, по меньшей мере 10 дБ/м, по меньшей мере 15 дБ/м, по меньшей мере 20 дБ/м, по меньшей мере 30 дБ/м, по меньшей мере 40 дБ/м, по меньшей мере 50 дБ/м, по меньшей мере 60 дБ/м, по меньшей мере 80 дБ/м, по меньшей мере 100 дБ/м, по меньшей мере 120 дБ/м, по меньшей мере 150 дБ/м или по меньшей мере 200 дБ/м по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает оценку CAP, как измерено с помощью FibroScan, на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60% или по меньшей мере около 70% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[94] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает уровень тканевого ингибитора металлопротеиназ 1 (TIMP-1) в сыворотке по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень тканевого ингибитора металлопротеиназ 1 (TIMP-1) в сыворотке на по меньшей мере около 1%, по меньшей мере около 2%, по меньшей мере около 3%, по меньшей мере около 4%, по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 6%, по меньшей мере около 7%, по меньшей мере около 8%, по меньшей мере около 9%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 11%, по меньшей мере около 12%, по меньшей мере около 13%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 17%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 35%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80% или по меньшей мере около 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает уровень тканевого ингибитора металлопротеиназ 1 (TIMP-1) в сыворотке на по меньшей мере около 10% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[95] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает уровень тканевого ингибитора металлопротеиназ 2 (TIMP-2) в сыворотке по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает уровень тканевого ингибитора металлопротеиназ 2 (TIMP-2) в сыворотке на по меньшей мере около 1%, по меньшей мере около 2%, по меньшей мере около 3%, по меньшей мере около 4%, по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 6%, по меньшей мере около 7%, по меньшей мере около 8%, по меньшей мере около 9%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 11%, по меньшей мере около 12%, по меньшей мере около 13%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 17%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 35%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80% или по меньшей мере около 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает уровень тканевого ингибитора металлопротеиназ 2 (TIMP-2) в сыворотке на по меньшей мере около 5% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[96] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень тромбоцитарного фактора роста (PDGF), например PDGF AA, в сыворотке по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень PDGF в сыворотке на по меньшей мере около 1%, по меньшей мере около 2%, по меньшей мере около 3%, по меньшей мере около 4%, по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 6%, по меньшей мере около 7%, по меньшей мере около 8%, по меньшей мере около 9%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 11%, по меньшей мере около 12%, по меньшей мере около 13%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 17%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 35%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80% или по меньшей мере около 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает уровень PDGF AA в сыворотке на по меньшей мере около 5% или по меньшей мере около 10% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[97] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает оценку активности НАЖБП (оценка NAS), как измерено с помощью биопсии печени, на по меньшей мере 1 пункт, по меньшей мере 2 пункта, по меньшей мере 3 пункта, по меньшей мере 4 пункта, по меньшей мере 5 пунктов, по меньшей мере 6 пунктов, по меньшей мере 7 пунктов по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает оценку NAS, как измерено с помощью биопсии печени, на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60% или по меньшей мере около 70% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[98] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает оценку фиброза, как измерено с помощью биопсии печени, на по меньшей мере 1 пункт, по меньшей мере 2 пункта, по меньшей мере 3 пункта, по меньшей мере 4 пункта по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает оценку фиброза, как измерено с помощью биопсии печени, на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60% или по меньшей мере около 70% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[99] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции улучшает оценку комбинированного индекса ответа при системном склерозе (CRISS) у субъекта. Расчет CRISS представляет собой 2-этапный процесс для использования в клиническом исследовании и описан в Khanna et. al., Arthritis Rheumatol. 2016 Feb;68(2):299-311. В некоторых вариантах осуществления субъекты, для которых прогнозируемая вероятность составляет больше или равно 0,60, рассматриваются как улучшенные, в то время как субъекты, для которых прогнозируемая вероятность составляет меньше 0,60, рассматриваются как неулучшенные. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции приводит к средней оценке по шкале CRISS, составляющей около 0,1, около 0,2, около 0,1, около 0,3, около 0,4, около 0,5, около 0,6, около 0,7, около 0,8, около 0,9 или около 1,0. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции приводит к средней оценке по шкале CRISS, составляющей по меньшей мере 0,1, по меньшей мере 0,2, по меньшей мере 0,1, по меньшей мере 0,3, по меньшей мере 0,4, по меньшей мере 0,5, по меньшей мере 0,6, по меньшей мере 0,7, по меньшей мере 0,8, по меньшей мере 0,9 или по меньшей мере 1,0. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или фармацевтической композиции улучшает легочную функцию субъекта по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24 субъектам, страдающим системным склерозом (SSc). В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[100] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции улучшает легочную функцию субъекта по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции улучшает легочную функцию субъекта на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90%, по меньшей мере около 100%, по меньшей мере около 150% или по меньшей мере около 200% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. Легочная функция может быть оценена путем определения любого из многочисленных измерений, таких как резервный объем выдоха (ERV), форсированная жизненная емкость (FVC), объем форсированного выдоха (LEV) (например, LEV за одну секунду, FEV1), отношение FEV1/FEV, скорость форсированного выдоха от 25 до 75% и максимальная произвольная вентиляция (MVV), пиковая скорость выдоха (PEF), медленная жизненная емкость (SVC). Общие объемы легких включают общую емкость легких (TEC), жизненную емкость (VC),), остаточный объем (RV) и функциональную остаточную емкость (FRC). В некоторых вариантах осуществления субъект страдает системным склерозом (SSc). В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

Лечение неалкогольного стеатогепатита (НАСГ)

[101] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способам лечения неалкогольного стеатогепатита (НАСГ) у субъекта-человека, включающим введение эффективного количества моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101. В некоторых вариантах осуществления применение моноклонального антитела против CCL24 для лечения неалкогольного стеатогепатита (НАСГ) вызывает один или более эффектов у субъекта-человека, как описано ниже.

[102] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке по сравнению с исходным общим уровнем CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке до по меньшей мере 125%, по меньшей мере 150%, по меньшей мере 200%, по меньшей мере 250%, по меньшей мере 300%, по меньшей мере 350%, по меньшей мере 400%, по меньшей мере 450% или по меньшей мере 500% от исходного общего уровня CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления увеличение общего уровня CCL24 в сыворотке измеряют через около 8 часов, около 16 часов или около 24 часов после введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления увеличение общего уровня CCL24 в сыворотке измеряют в день 1, день 2, день 3, день 4, день 5, день 6, день 7, день 8, день 9, день 10 или день 11 после введения. В некоторых вариантах осуществления подкожное введение 5 мг/кг моноклонального антитела против CCL24 увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке на 4 день после введения до по меньшей мере 150%, по меньшей мере 175%, по меньшей мере 200%, по меньшей мере 250% или по меньшей мере 300% от исходного общего уровня CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления внутривенное введение 10 мг/кг моноклонального антитела против CCL24 увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке на 4 день после введения до по меньшей мере 150%, по меньшей мере 200%, по меньшей мере 250%, по меньшей мере 300%, по меньшей мере 350%, по меньшей мере 400%, по меньшей мере 450% или по меньшей мере 500% от исходного общего уровня CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления увеличение общего уровня CCL24 в сыворотке измеряют между первым и вторым введением моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[103] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции улучшает состояние печени субъекта по оценке одного или более циркулирующих маркеров фиброза. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает уровень одного или более маркеров фиброза или воспаления по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. Маркеры фиброза или воспаления включают плазменную аланинаминотрансферазу (ALT), щелочную фосфатазу (ALP), аспартатаминотрансферазу (AST), PRO-C3, PRO-C4, PRO-C5, C3M, цитокератин 18 (CK18), аминотерминальный пропептид проколлагена типа III (PIIINP), гиалуроновую кислоту (HA), тканевый ингибитор металлопротеиназ 1 (TIMP-1), тканевый ингибитор металлопротеиназ 2 (TIMP-2), тромбоцитарнный фактор роста (PDGF), например PDGF AA, γ-глутамилтрансферазу (GGT), билирубин, C-реактивный белок (CRP), скорость оседания эритроцитов (ESR) и прокальцитонин (PCT). Уровни в маркерах могут быть протестированы с помощью хорошо известных способов, например, анализа ELISA, или способов, описанных в примерах в настоящем документе.

[104] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции улучшает состояние печени по оценке одного или более методов визуальной диагностики. В некоторых вариантах осуществления метод визуальной диагностики представляет собой эластографию печени. В некоторых вариантах осуществления метод визуальной диагностики представляет собой ультразвуковую эластографию, такую как FibroScan. В некоторых вариантах осуществления метод визуальной диагностики представляет собой магнитно-резонансную визуализацию. В некоторых вариантах осуществления метод визуальной диагностики представляет собой определение протонной плотности жировой фракции по данным магнитно-резонансной визуализации (MRI-PDFF). В некоторых вариантах осуществления состояние печени представляет собой содержание жира в печени. В некоторых вариантах осуществления содержание жира в печени измеряют с помощью MRI-PDFF, FibroScan или других методов эластографии печени и/или методов визуальной диагностики.

[105] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень содержания жира в печени по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень содержания жира в печени на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90% или более чем на 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень содержания жира в печени на от около 5% до около 20%, от около 10% до около 30%, от около 20% до около 50%, от около 40% до около 70% или от около 60% до около 99% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101. В некоторых вариантах осуществления содержание жира в печени оценивают с помощью магнитно-резонансной визуализации, такой как MRI-PDFF. В некоторых вариантах осуществления содержание жира в печени измеряют с помощью оценки CAP FibroScan.

[106] FibroScan позволяет получить результат фиброза, который представляет собой измерение количества рубцов в печени. FibroScan измеряет рубцевание, измеряя эластичность печени. Результат фиброза измеряется в килопаскалях (кПа). В некоторых вариантах осуществления диапазон от 2 до 7 кПа указывает на отсутствие рубцов в печени или легкое рубцевание в печени, диапазон от 7,5 до 10 кПа указывает на умеренное рубцевание в печени, диапазон от 10 до 14 кПа указывает на тяжелое рубцевание в печени, и диапазон 14 кПа или выше указывает на распространенное рубцевание в печени (цирроз). FibroScan также позволяет получить оценку CAP, которая представляет собой измерение изменения жира или содержания жира в печени. Оценка CAP измеряется в децибелах на метр (дБ/м). Как правило, она варьируется от 100 до 400 дБ/м.

[107] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает эластичность печени по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления эластичность печени измеряют с помощью FibroScan. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает эластичность печени, как измерено с помощью результата фиброза FibroScan, на по меньшей мере 0,1 кПа, по меньшей мере 0,2 кПа, по меньшей мере 0,3 кПа, по меньшей мере 0,5 кПа, по меньшей мере 0,7 кПа, по меньшей мере 1,0 кПа, по меньшей мере 1,2 кПа, по меньшей мере 1,5 кПа, по меньшей мере 2,0 кПа, по меньшей мере 2,5 кПа, по меньшей мере 3,0 кПа, по меньшей мере 3,5 кПа, по меньшей мере 4,0 кПа, по меньшей мере 5,0 кПа, по меньшей мере 6,0 кПа, по меньшей мере 8,0 кПа, по меньшей мере 10 кПа, по меньшей мере 15 кПа, по меньшей мере 20 кПа, по меньшей мере 25 кПа или по меньшей мере 30 кПа по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает эластичность печени, как измерено с помощью результата фиброза FibroScan, на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90% или более чем на 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[108] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает оценку CAP, как измерено с помощью FibroScan, на по меньшей мере 5 дБ/м, по меньшей мере 10 дБ/м, по меньшей мере 15 дБ/м, по меньшей мере 20 дБ/м, по меньшей мере 30 дБ/м, по меньшей мере 40 дБ/м, по меньшей мере 50 дБ/м, по меньшей мере 60 дБ/м, по меньшей мере 80 дБ/м, по меньшей мере 100 дБ/м, по меньшей мере 120 дБ/м, по меньшей мере 150 дБ/м или по меньшей мере 200 дБ/м по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает оценку CAP, как измерено с помощью FibroScan, на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60% или по меньшей мере около 70% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[109] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает оценку активности НАЖБП (оценка NAS), как измерено с помощью биопсии печени, на по меньшей мере 1 пункт, по меньшей мере 2 пункта, по меньшей мере 3 пункта, по меньшей мере 4 пункта, по меньшей мере 5 пунктов, по меньшей мере 6 пунктов, по меньшей мере 7 пунктов по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает оценку NAS, как измерено с помощью биопсии печени, на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60% или по меньшей мере около 70% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[110] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает оценку фиброза, как измерено с помощью биопсии печени, на по меньшей мере 1 пункт, по меньшей мере 2 пункта, по меньшей мере 3 пункта, по меньшей мере 4 пункта по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает оценку фиброза, как измерено с помощью биопсии печени, на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60% или по меньшей мере около 70% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

Лечение первичного склерозирующего холангита (ПСХ)

[111] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способам лечения первичного склерозирующего холангита (ПСХ) у субъекта-человека, включающим введение эффективного количества моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101. В некоторых вариантах осуществления применение моноклонального антитела против CCL24 для лечения первичного склерозирующего холангита (ПСХ) вызывает один или более эффектов у субъекта-человека, как описано ниже.

[112] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке по сравнению с исходным общим уровнем CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке до по меньшей мере 150%, по меньшей мере 200%, по меньшей мере 250%, по меньшей мере 300%, по меньшей мере 350%, по меньшей мере 400%, по меньшей мере 450% или по меньшей мере 500% от исходного общего уровня CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления увеличение общего уровня CCL24 в сыворотке измеряют через около 8 часов, около 16 часов или около 24 часов после введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления увеличение общего уровня CCL24 в сыворотке измеряют в день 1, день 2, день 3, день 4, день 5, день 6, день 7, день 8, день 9, день 10 или день 11 после введения. В некоторых вариантах осуществления подкожное введение 5 мг/кг моноклонального антитела против CCL24 увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке на 4 день после введения до по меньшей мере 150%, по меньшей мере 175%, по меньшей мере 200%, по меньшей мере 250% или по меньшей мере 300% от исходного общего уровня CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления внутривенное введение 10 мг/кг моноклонального антитела против CCL24 увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке на 4 день после введения до по меньшей мере 150%, по меньшей мере 200%, по меньшей мере 250%, по меньшей мере 300%, по меньшей мере 350%, по меньшей мере 400%, по меньшей мере 450% или по меньшей мере 500% от исходного общего уровня CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления увеличение общего уровня CCL24 в сыворотке измеряют между первым и вторым введением моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[113] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции улучшает состояние печени субъекта по оценке одного или более циркулирующих маркеров фиброза. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает уровень одного или более маркеров фиброза или воспаления по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. Маркеры фиброза или воспаления включают плазменную аланинаминотрансферазу (ALT), щелочную фосфатазу (ALP), аспартатаминотрансферазу (AST), PRO-C3, PRO-C4, PRO-C5, C3M, цитокератин 18 (CK18), аминотерминальный пропептид проколлагена типа III (PIIINP), гиалуроновую кислоту (HA), тканевый ингибитор металлопротеиназ 1 (TIMP-1), тканевый ингибитор металлопротеиназ 2 (TIMP-2), тромбоцитарный фактор роста (PDGF), например PDGF AA, γ-глутамилтрансферазу (GGT), билирубин, C-реактивный белок (CRP), скорость оседания эритроцитов (ESR) и прокальцитонин (PCT). Уровни в маркерах могут быть протестированы с помощью хорошо известных способов, например, анализа ELISA, или способов, описанных в примерах в настоящем документе.

[114] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень циркулирующей щелочной фосфатазы (ALP) по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень циркулирующей щелочной фосфатазы (ALP) на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90% или более чем на 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень циркулирующей щелочной фосфатазы (ALP) на от около 5% до около 30%, от около 20% до около 50%, от около 40% до около 70% или от около 60% до около 99% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[115] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает оценку генерализованного фиброза печени (ELF) по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает оценку генерализованного фиброза печени (ELF) на по меньшей мере около 0,1, по меньшей мере около 0,2, по меньшей мере около 0,3, по меньшей мере около 0,5, по меньшей мере около 0,7, по меньшей мере около 1,0, по меньшей мере около 1,5, по меньшей мере около 2, по меньшей мере около 3, по меньшей мере около 4, по меньшей мере около 5 или более чем 5 по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. Анализ на генерализованный фиброз печени (ELF) представляет собой неинвазивный анализ крови, который измеряет три прямых маркера фиброза: гиалуроновую кислоту (HA), аминотерминальный пропептид проколлагена типа III (PIIINP) и тканевый ингибитор матриксной металлопротеиназы 1 (TIMP-1). Анализ на ELF, в сочетании с другими лабораторными и клиническими данными, может быть использован для оценки риска прогрессирования до цирроза и LRE у пациентов с хроническим заболеванием печени. В некоторых вариантах осуществления оценка ELF менее 7,7 указывает на отсутствие фиброза или легкий фиброз, оценка ELF от 7,7 до 9,8 указывает на умеренный фиброз, оценка ELF от 9,8 до 11,3 указывает на тяжелый фиброз, и оценка ELF равная 11,3 или более указывает на цирроз.

[116] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает оценку генерализованного фиброза печени (ELF) на по меньшей мере 0,1, по меньшей мере 0,2, по меньшей мере 0,3, по меньшей мере 0,5, по меньшей мере 0,7, по меньшей мере 0,8, по меньшей мере 1,0, по меньшей мере 1,2, по меньшей мере 1,5, по меньшей мере 2,0, по меньшей мере 2,5, по меньшей мере 3,0, по меньшей мере 3,5, по меньшей мере 4,0, по меньшей мере 5,0, по меньшей мере 6,0, по меньшей мере 7,0, по меньшей мере 8,0 или по меньшей мере 9,0 по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает оценку генерализованного фиброза печени (ELF) на от около 0,1 до около 1, от около 0,5 до около 1,5, от около 1,0 до около 3,0, от около 1,5 до около 4,0 или от около 2,0 до около 6,0 по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает оценку генерализованного фиброза печени (ELF) до менее чем 11,5, менее чем 11,0, менее чем 10,5, менее чем 10,0, менее чем 9,5, менее чем 9,0, менее чем 8,5, менее чем 8,0, менее чем 7,5 или менее чем 7,0. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[117] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень циркулирующего PRO-C3 (пропептида коллагена типа III) по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень PRO-C3 на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90% или более чем на 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень PRO-C3 на от около 5% до около 30%, от около 20% до около 50%, от около 40% до около 70% или от около 60% до около 99% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[118] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень циркулирующего PRO-C4 по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень PRO-C4 на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90% или более чем на 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень PRO-C4 на от около 5% до около 30%, от около 20% до около 50%, от около 40% до около 70% или от около 60% до около 99% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[119] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень циркулирующего C3M по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень C3M на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90% или более чем на 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень C3M на от около 5% до около 30%, от около 20% до около 50%, от около 40% до около 70% или от около 60% до около 99% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[120] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень циркулирующего PRO-C5 (пропептид коллагена типа V) по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень PRO-C5 на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90% или более чем на 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает уровень PRO-C5 на от около 5% до около 30%, от около 20% до около 50%, от около 40% до около 70% или от около 60% до около 99% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[121] FibroScan позволяет получить результат фиброза, который представляет собой измерение количества рубцов в печени. FibroScan измеряет рубцевание, измеряя эластичность печени. Результат фиброза измеряется в килопаскалях (кПа). В некоторых вариантах осуществления диапазон от 2 до 7 кПа указывает на отсутствие рубцов в печени или легкое рубцевание в печени, диапазон от 7,5 до 10 кПа указывает на умеренное рубцевание в печени, диапазон от 10 до 14 кПа указывает на тяжелое рубцевание в печени, и диапазон 14 кПа или выше указывает на распространенное рубцевание в печени (цирроз). FibroScan также позволяет получить оценку CAP, которая представляет собой измерение изменения жира или содержания жира в печени. Оценка CAP измеряется в децибелах на метр (дБ/м). Как правило, она варьируется от 100 до 400 дБ/м.

[122] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает эластичность печени по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления эластичность печени измеряют с помощью FibroScan. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает эластичность печени, как измерено с помощью результата фиброза FibroScan, на по меньшей мере 0,1 кПа, по меньшей мере 0,2 кПа, по меньшей мере 0,3 кПа, по меньшей мере 0,5 кПа, по меньшей мере 0,7 кПа, по меньшей мере 1,0 кПа, по меньшей мере 1,2 кПа, по меньшей мере 1,5 кПа, по меньшей мере 2,0 кПа, по меньшей мере 2,5 кПа, по меньшей мере 3,0 кПа, по меньшей мере 3,5 кПа, по меньшей мере 4,0 кПа, по меньшей мере 5,0 кПа, по меньшей мере 6,0 кПа, по меньшей мере 8,0 кПа, по меньшей мере 10 кПа, по меньшей мере 15 кПа, по меньшей мере 20 кПа, по меньшей мере 25 кПа или по меньшей мере 30 кПа по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает эластичность печени, как измерено с помощью результата фиброза FibroScan, на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90% или более чем на 90% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[123] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает оценку CAP, как измерено с помощью FibroScan, на по меньшей мере 5 дБ/м, по меньшей мере 10 дБ/м, по меньшей мере 15 дБ/м, по меньшей мере 20 дБ/м, по меньшей мере 30 дБ/м, по меньшей мере 40 дБ/м, по меньшей мере 50 дБ/м, по меньшей мере 60 дБ/м, по меньшей мере 80 дБ/м, по меньшей мере 100 дБ/м, по меньшей мере 120 дБ/м, по меньшей мере 150 дБ/м или по меньшей мере 200 дБ/м по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает оценку CAP, как измерено с помощью FibroScan, на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60% или по меньшей мере около 70% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[124] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции снижает гистологическое повреждение, как измерено с помощью биопсии печени, по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает гистологическое повреждение печени, как измерено с помощью биопсии печени, на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60% или по меньшей мере около 70% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

Лечение системного склероза (SSc)

[125] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способам лечения системного склероза (SSc) у субъекта-человека, включающим введение эффективного количества моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101. В некоторых вариантах осуществления применение моноклонального антитела против CCL24 для лечения системного склероза (SSc) вызывает один или более эффектов у субъекта-человека, как описано ниже.

[126] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции улучшает оценку комбинированного индекса ответа при системном склерозе (CRISS) у субъекта. Расчет CRISS представляет собой 2-этапный процесс для использования в клиническом исследовании и описан в Khanna et. al., Arthritis Rheumatol. 2016 Feb;68(2):299-311. В некоторых вариантах осуществления субъекты, для которых прогнозируемая вероятность составляет больше или равно 0,60, рассматриваются как улучшенные, в то время как субъекты, для которых прогнозируемая вероятность составляет меньше 0,60, рассматриваются как неулучшенные. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции приводит к средней оценке по шкале CRISS, составляющей около 0,1, около 0,2, около 0,1, около 0,3, около 0,4, около 0,5, около 0,6, около 0,7, около 0,8, около 0,9 или около 1,0. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции приводит к средней оценке по шкале CRISS, составляющей по меньшей мере 0,1, по меньшей мере 0,2, по меньшей мере 0,1, по меньшей мере 0,3, по меньшей мере 0,4, по меньшей мере 0,5, по меньшей мере 0,6, по меньшей мере 0,7, по меньшей мере 0,8, по меньшей мере 0,9 или по меньшей мере 1,0. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или фармацевтической композиции улучшает легочную функцию субъекта по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24 субъектам, страдающим системным склерозом (SSc). В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[127] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции улучшает толщину кожи субъекта по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции улучшает толщину кожи, подлежащую оценке с использованием модифицированной шкалы Роднана (mRss), субъекта на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90%, по меньшей мере около 100% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24.

[128] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции улучшает легочную функцию субъекта по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции улучшает легочную функцию субъекта на по меньшей мере около 5%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 70%, по меньшей мере около 80%, по меньшей мере около 90%, по меньшей мере около 100%, по меньшей мере около 150% или по меньшей мере около 200% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. Легочная функция может быть оценена путем определения любого из многочисленных измерений, таких как резервный объем выдоха (ERV), форсированная жизненная емкость (FVC), объем форсированного выдоха (LEV) (например, LEV за одну секунду, FEV1), отношение FEV1/FEV, скорость форсированного выдоха от 25 до 75% и максимальная произвольная вентиляция (MVV), пиковая скорость выдоха (PEF), медленная жизненная емкость (SVC). Общие объемы легких включают общую емкость легких (TEC), жизненную емкость (VC),), остаточный объем (RV) и функциональную остаточную емкость (FRC). В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[129] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке по сравнению с исходным общим уровнем CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке до по меньшей мере 150%, по меньшей мере 200%, по меньшей мере 250%, по меньшей мере 300%, по меньшей мере 350%, по меньшей мере 400%, по меньшей мере 450% или по меньшей мере 500% от исходного общего уровня CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления увеличение общего уровня CCL24 в сыворотке измеряют через около 8 часов, около 16 часов или около 24 часов после введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления увеличение общего уровня CCL24 в сыворотке измеряют в день 1, день 2, день 3, день 4, день 5, день 6, день 7, день 8, день 9, день 10 или день 11 после введения. В некоторых вариантах осуществления подкожное введение 5 мг/кг моноклонального антитела против CCL24 увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке на 4 день после введения до по меньшей мере 150%, по меньшей мере 175%, по меньшей мере 200%, по меньшей мере 250% или по меньшей мере 300% от исходного общего уровня CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления внутривенное введение 10 мг/кг моноклонального антитела против CCL24 увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке на 4 день после введения до по меньшей мере 150%, по меньшей мере 200%, по меньшей мере 250%, по меньшей мере 300%, по меньшей мере 350%, по меньшей мере 400%, по меньшей мере 450% или по меньшей мере 500% от исходного общего уровня CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления увеличение общего уровня CCL24 в сыворотке измеряют между первым и вторым введением моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[130] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции улучшает состояние печени субъекта по оценке одного или более циркулирующих маркеров фиброза. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции уменьшает уровень одного или более маркеров фиброза или воспаления по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. PRO-C3, PRO-C4, PRO-C5, C3M, цитокератин 18 (CK18), аминотерминальный пропептид проколлагена типа III (PIIINP), гиалуроновая кислота (HA), тканевый ингибитор металлопротеиназ 1 (TIMP-1), тканевый ингибитор металлопротеиназ 2 (TIMP-2), тромбоцитарный фактор роста (PDGF), например PDGF AA, γ-глутамилтрансфераза (GGT), билирубин, C-реактивный белок (CRP), скорость оседания эритроцитов (ESR) и прокальцитонин (PCT). Уровни в маркерах могут быть протестированы с помощью хорошо известных способов, например, анализа ELISA, или способов, описанных в примерах в настоящем документе.

Безопасность

[131] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции в соответствии с одной или более дозами и/или одной или более схемами, как описано в настоящем документе, не вызывает дозолимитирующей токсичности. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции не вызывает возникновения реакции в месте инъекции. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции не вызывает тяжелого или серьезного нежелательного явления (AE). В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[132] В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции субъекту не увеличивает уровень триглицеридов (TG), липопротеина низкой плотности (LDL) и/или холестерина в крови субъекта. В некоторых вариантах осуществления введение моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции субъекту снижает уровень триглицеридов (TG), липопротеина низкой плотности (LDL) и/или холестерина в крови субъекта на менее чем 5%, менее чем 10%, менее чем 15%, менее чем 20%, менее чем 30%, менее чем 40%, менее чем 50%, менее чем 75% или менее чем 100% по сравнению с исходным уровнем до введения моноклонального антитела против CCL24. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

Доза введения

[133] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 (например, CM-101) вводят в заданной дозе. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 0,1 до около 100 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет более 100 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 1 до около 100 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 1 до около 20 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 10 до около 30 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 20 до около 40 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 30 до около 50 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 40 до около 60 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 50 до около 70 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 60 до около 80 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 70 до около 90 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 80 до около 100 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 0,1 до около 1 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 0,5 до около 3 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 1 до около 6 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 3 до около 8 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 5 до около 10 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 7 до около 12 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 9 до около 14 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 11 до около 16 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 13 до около 18 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 15 до около 20 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет от около 15 до около 20 мг/кг.

[134] В некоторых вариантах осуществления доза составляет около 0,1 мг/кг, около 0,25 мг/кг, около 0,5 мг/кг, около 0,75 мг/кг, около 1 мг/кг, около 1,5 мг/кг или около 2 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет около 2,5 мг/кг, около 3 мг/кг, около 3,5 мг/кг, около 4 мг/кг, около 4,5 мг/кг, около 5 мг/кг, около 5,5 мг/кг, около 6 мг/кг, около 6,5 мг/кг, около 7 мг/кг, около 7,5 мг/кг, около 8 мг/кг, около 8,5 мг/кг, около 9 мг/кг, около 9,5 мг/кг или около 10 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет около 11 мг/кг, около 12 мг/кг, около 13 мг/кг, около 14 мг/кг, около 15 мг/кг, около 16 мг/кг, около 17 мг/кг, около 18 мг/кг, около 19 мг/кг, около 20 мг/кг, около 21 мг/кг, около 22 мг/кг, около 23 мг/кг, около 24 мг/кг, около 25 мг/кг, около 26 мг/кг, около 27 мг/кг, около 28 мг/кг, около 29 мг/кг или около 30 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет около 30 мг/кг, около 40 мг/кг, около 50 мг/кг, около 60 мг/кг, около 70 мг/кг, около 80 мг/кг, около 90 мг/кг или около 100 мг/кг.

[135] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 (например, CM-101) вводят внутривенно в заданной дозе. В некоторых вариантах осуществления доза составляет около 0,75 мг/кг, около 2,5 мг/кг, около 5 мг/кг, около 10 мг/кг, около 15 мг/кг или около 20 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет около 0,75 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет около 2,5 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет около 5 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет около 10 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет около 15 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет около 20 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления внутривенное введение моноклонального антитела против CCL24 (например, CM-101) предназначено для лечения первичного склерозирующего холангита (ПСХ)

[136] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 (например, CM-101) вводят подкожно в заданной дозе. В некоторых вариантах осуществления доза составляет около 0,75 мг/кг, около 2,5 мг/кг, около 5 мг/кг или около 10 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет около 0,75 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет около 2,5 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет около 5 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления доза составляет около 10 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления подкожное введение моноклонального антитела против CCL24 (например, CM-101) предназначено для лечения неалкогольного стеатогепатита (НАСГ).

Схема введения

[137] Введение в соответствии с настоящим изобретением может осуществляться любым из следующих способов: пероральное введение, внутривенная, внутримышечная, внутрибрюшинная, интратекальная или подкожная инъекция; интраректальное введение; интраназальное введение, глазное введение или местное введение.

[138] В некоторых вариантах осуществления введение в соответствии с настоящим изобретением осуществляют внутривенно. В некоторых вариантах осуществления введение в соответствии с настоящим изобретением осуществляют подкожно.

[139] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 (например, CM-101) вводят один раз в одну-десять недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в одну-пять недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в одну-четыре недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в одну-три недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в одну-две недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в две-десять недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в две-пять недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в две-четыре недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в две-три недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в три-десять недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в три-пять недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в три-четыре недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в четыре-десять недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в четыре-пять недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз каждые около 1, около 2, около 3, около 4, около 5, около 6, около 7, около 8, около 9, около 10 недель или более 10 недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз каждые около 1, около 2, около 3, около 4, около 5, около 6, около 7, около 8, около 9, около 10, около 11, около 12 или около 13 дней.

[140] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 (например, CM-101) вводят внутривенно в соответствии с заданной частотой введения. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в одну-две недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в одну-три недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в две-три недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в две-четыре недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в три-четыре недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в три-пять недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз каждые около 1, около 2, около 3, около 4, около 5, около 6, около 7, около 8, около 9 или около 10 недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз каждые около 7, около 8, около 9, около 10, около 11, около 12 или около 13 дней. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз каждые около двух недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз каждые около трех недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз каждые около четырех недель.

[141] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 (например, CM-101) вводят подкожно в соответствии с заданной частотой введения. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в одну-две недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в одну-три недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в две-три недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в две-четыре недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в три-четыре недели. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в три-пять недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз каждые около 1, около 2, около 3, около 4, около 5, около 6, около 7, около 8, около 9 или около 10 недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз каждые около 1, около 2, около 3, около 4, около 5, около 6, около 7, около 8, около 9, около 10, около 11, около 12 или около 13 дней. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз каждые около двух недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз каждые около трех недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз каждые около четырех недель.

[142] В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 (например, CM-101) вводят в соответствии с частотой введения, описанной в настоящем документе, в течение некоторого времени. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в течение по меньшей мере 4, по меньшей мере 6, по меньшей мере 8, по меньшей мере 10, по меньшей мере 12, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 18, по меньшей мере 20 или по меньшей мере 24 недель. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в течение по меньшей мере 1, по меньшей мере 2, по меньшей мере 4, по меньшей мере 6, по меньшей мере 9 или по меньшей мере 12 месяцев. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 вводят в течение от около 4 до около 8, от около 6 до около 12, от около 8 до около 16, от около 10 до около 20, от около 15 до около 30 или от около 20 до около 40 недель.

Фармакокинетика CM-101

[143] В некоторых вариантах осуществления CM-101 вводят в соответствии со схемой введения, описанной в настоящем документе, для сохранения стационарной концентрации в сыворотке CM-101 у субъекта. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 1 до около 5000 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 10 до около 2000 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 1 до около 300 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 100 до около 500 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 200 до около 800 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 300 до около 1000 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 400 до около 2000 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 500 до около 5000 мкг/мл.

[144] В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 10 до около 500 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 20 до около 400 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 30 до около 300 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 40 до около 200 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 50 до около 100 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 60 до около 90 мкг/мл.

[145] В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 10 до около 1000 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 20 до около 800 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 40 до около 600 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 50 до около 500 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 60 до около 400 мкг/мл. В некоторых вариантах осуществления субъект сохраняет стационарную концентрацию CM-101 в сыворотке от около 70 до около 300 мкг/мл.

[146] В некоторых вариантах осуществления CM-101 достигает стационарной концентрации в сыворотке, как описано в настоящем документе, после от около 1 до около 10 введений. В некоторых вариантах осуществления CM-101 достигает стационарной концентрации в сыворотке, как описано в настоящем документе, после от около 1 до около 4, от около 2 до около 5, от около 3 до около 6, от около 4 до около 8 или от около 5 до около 10 введений. В некоторых вариантах осуществления CM-101 достигает стационарной концентрации в сыворотке, как описано в настоящем документе, после от около 1 до около 3, от около 2 до около 4, от около 3 до около 5, от около 4 до около 6 или от около 5 до около 7 введений. В некоторых вариантах осуществления CM-101 достигает стационарной концентрации в сыворотке, как описано в настоящем документе, после от около 1 до около 2, от около 2 до около 3, от около 3 до около 4, от около 4 до около 5, от около 5 до около 6 или от около 6 до около 7 введений. В некоторых вариантах осуществления CM-101 достигает стационарной концентрации в сыворотке, как описано в настоящем документе, после около 1, около 2, около 3, около 4, около 5, около 6, около 7 или около 8 введений. В некоторых вариантах осуществления CM-101 достигает стационарной концентрации в сыворотке, как описано в настоящем документе, после около двух введений. В некоторых вариантах осуществления CM-101 достигает стационарной концентрации в сыворотке, как описано в настоящем документе, после около трех введений. В некоторых вариантах осуществления CM-101 достигает стационарной концентрации в сыворотке, как описано в настоящем документе, после около четырех введений.

[147] В некоторых вариантах осуществления период полужизни CM-101 после способа введения, дозы введения и/или схемы введения, как описано в настоящем документе, составляет от 5 до 40 дней. В некоторых вариантах осуществления период полужизни CM-101 составляет около 10-30 дней. В некоторых вариантах осуществления период полужизни CM-101 составляет от около 5 до около 15, от около 10 до около 20, от около 15 до около 25 или от около 20 до около 30 дней. В некоторых вариантах осуществления период полужизни CM-101 составляет от около 10 до около 15, от около 15 до около 20, от около 20 до около 25 или от около 25 до около 30 дней. В некоторых вариантах осуществления период полужизни CM-101 составляет около 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 или 30 дней. В некоторых вариантах осуществления период полужизни CM-101 составляет около 15 дней. В некоторых вариантах осуществления период полужизни CM-101 составляет около 16 дней. В некоторых вариантах осуществления период полужизни CM-101 составляет около 17 дней. В некоторых вариантах осуществления период полужизни CM-101 составляет около 18 дней. В некоторых вариантах осуществления период полужизни CM-101 составляет около 19 дней. В некоторых вариантах осуществления период полужизни CM-101 составляет около 20 дней. В некоторых вариантах осуществления период полужизни CM-101 составляет около 21 дня.

Фармацевтическая композиция и набор

[148] В одном аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей в качестве активного ингредиента моноклональное антитело против CCL24, как описано в настоящем документе, и фармацевтически приемлемый носитель, эксципиент или разбавитель. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит моноклональное антитело против CCL24 и буферный агент, агент, который регулирует осмолярность композиции, и необязательно один или более фармацевтически приемлемых носителей, эксципиентов и/или разбавителей. В некоторых вариантах осуществления моноклональное антитело против CCL24 представляет собой CM-101.

[149] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция согласно изобретению дополнительно содержит дополнительный терапевтический агент. Неограничивающие примеры дополнительных терапевтических агентов включают агонисты FXR (фарнезоидный рецептор Х), агонисты PPAR (рецептор, активируемый пролифератором пероксисом), моноклональные антитела против хемокина или цитокина или любую малую молекулу, белок или пептид, которые ингибируют активность хемокина или цитокина, противовоспалительные агенты, включая стероиды, и противофиброзные агенты.

[150] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция CM-101 содержит от около 1 до около 500 мг/мл CM-101. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит от около 100 до около 250 мг/мл CM-101. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция CM-101 содержит более 100 мг/мл, более 125 мг/мл, более 150 мг/мл, более 175 мг/мл, более 200 мг/мл, более 225 мг/мл или более 250 мг/мл CM-101. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция CM-101 содержит от около 100 до около 150 мг/мл, от около 150 до около 200 мг/мл или от около 200 до около 250 мг/мл CM-101. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция CM-101 содержит около 100 мг/мл, около 125 мг/мл, около 150 мг/мл, около 175 мг/мл, около 200 мг/мл, около 225 мг/мл или около 250 мг/мл CM-101. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция CM-101 содержит около 175 мг/мл CM-101.

[151] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит один или более ингредиентов, выбранных из группы, состоящей из гистидина, фосфата, аргинина, глутаминовой кислоты, сорбитола, полисорбата и хлорида натрия.

[152] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит гистидин. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит гистидин в концентрации от около 1 до около 100 мМ. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит гистидин в концентрации около 10 мМ. В некоторых вариантах осуществления гистидин представляет собой L-гистидин.

[153] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит фосфат. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит фосфат в концентрации от около 1 до около 100 мМ. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит фосфат в концентрации около 10 мМ. В некоторых вариантах осуществления фосфат представляет собой фосфат калия.

[154] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит аргинин. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит аргинин в концентрации от около 30 до около 200 мМ. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит аргинин в концентрации около 150 мМ.

[155] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит глутаминовую кислоту. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит глутаминовую кислоту в концентрации от около 30 до около 200 мМ. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит глутаминовую кислоту в концентрации около 150 мМ.

[156] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит сорбитол. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит сорбитол в концентрации от около 1 до около 5%. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит сорбитол в концентрации около 3%.

[157] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит полисорбат. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит полисорбат в концентрации от около 0,005 до около 0,05%. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит полисорбат в концентрации около 0,02%. В некоторых вариантах осуществления полисорбат представляет собой полисорбат-80.

[158] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит хлорид натрия. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит хлорид натрия в концентрации от около 50 до около 150 мМ. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит хлорид натрия в концентрации около 80 мМ.

[159] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет рН от около 5 до около 8. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет рН от около 6 до около 7. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет рН от около 5,5 до около 6,5. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет рН 5,5, 5,6, 5,7, 5,8, 5,9, 6,0, 6,1, 6,2, 6,3, 6,4 или 6,5. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет рН 6,1.

[160] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит около 175 мг/мл CM-101, около 10 мМ L-гистидина, около 150 мМ аргинина, около 150 мМ глутаминовой кислоты, около 0,02% (масс./об.) полисорбата 80 и имеет рН около 6,1. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция предназначена для подкожного введения. В некоторых вариантах осуществления один флакон фармацевтической композиции содержит объем заполнения около 0,62 мл и/или объем извлечения 0,5 мл. В некоторых вариантах осуществления вязкость фармацевтической композиции составляет около 12,25 мПа×с при 20°C.

[161] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция CM-101 содержит от около 1 до около 150 мг/мл CM-101. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит от около 5 до около 50 мг/мл CM-101. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция CM-101 содержит от около 5 до около 20 мг/мл, от около 20 до около 50 мг/мл или от около 50 до около 100 мг/мл CM-101. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция CM-101 содержит около 1 мг/мл, около 2,5 мг/мл, около 5 мг/мл, около 7,5 мг/мл, около 10 мг/мл, около 15 мг/мл, около 20 мг/мл, около 30 мг/мл или около 50 мг/мл CM-101. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция CM-101 содержит около 10 мг/мл CM-101.

[162] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит гистидин. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит гистидин в концентрации от около 1 до около 100 мМ. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит гистидин в концентрации около 10 мМ. В некоторых вариантах осуществления гистидин представляет собой L-гистидин.

[163] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит фосфат. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит фосфат в концентрации от около 1 до около 100 мМ. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит фосфат в концентрации около 10 мМ. В некоторых вариантах осуществления фосфат представляет собой фосфат калия.

[164] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит глицин. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит глицин в концентрации от около 10 до около 200 мМ. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит глицин в концентрации около 40 мМ.

[165] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит сорбитол. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит сорбитол в концентрации от около 1 до около 7%. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит сорбитол в концентрации около 4%.

[166] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит полисорбат. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит полисорбат в концентрации от около 0,005 до около 0,05%. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит полисорбат в концентрации около 0,01%. В некоторых вариантах осуществления полисорбат представляет собой полисорбат-80.

[167] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет рН от около 5 до около 8. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет рН от около 6 до около 7. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет рН от около 5,5 до около 6,5. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет рН 5,5, 5,6, 5,7, 5,8, 5,9, 6,0, 6,1, 6,2, 6,3, 6,4, 6,5, 6,6, 6,7 или 6,8. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет рН 6,3.

[168] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит около 10 мг/мл CM-101, около 10 мМ L-гистидина, около 40 мМ глицина, около 4% (масс./об.) сорбитола, около 0,01% (масс./об.) полисорбата 80 и имеет рН около 6,3. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция предназначена для внутривенного введения. В некоторых вариантах осуществления один флакон фармацевтической композиции содержит объем заполнения около 10,2 мл или около 10,3 мл и/или объем извлечения около 10 мл.

[169] Настоящее изобретение также относится к набору, содержащему фармацевтическую композицию, содержащую моноклональное антитело против CCL24. В некоторых вариантах осуществления набор дополнительно содержит инструкции по применению. В некоторых вариантах осуществления набор выполнен с возможностью лечения и/или предотвращения фиброзного воспалительного заболевания у субъекта. В некоторых вариантах осуществления набор дополнительно содержит устройство для введения фармацевтической композиции. Настоящее изобретение не ограничено типом устройства, используемого для введения фармацевтической композиции. Действительно, предполагается, что различные устройства пригодны для использования в наборе, включая, но не ограничиваясь, аппликатор для кожи, шприц и/или инфузионное устройство.

Определения

[170] Термины «CCL24» или «эотаксин-2» используются взаимозаменяемо и относятся к «хемокиновому (мотив C-C) лиганду 24», цитокину, принадлежащему к семейству хемокинов CC, который в организме человека кодируется геном CCL24 человека и расположен на хромосоме 7 человека. CCL24 взаимодействует с хемокиновым рецептором CCR3. Активность CCL24 включает индукцию хемотаксиса в эозинофилах, базофилах, Т-лимфоцитах и нейтрофилах, а также индукцию ангиогенных и миграционных реакций в эндотелиальных и гладкомышечных клетках.

[171] Термин «фармацевтически приемлемый носитель, экципиент или разбавитель» включает любые и все растворители, дисперсионные среды, покрытия, антибактериальные и противогрибковые агенты и тому подобное, как известно в данной области техники. Носитель может представлять собой растворитель или дисперсионную среду, содержащую, например, воду, этанол, полиол (например, глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль и т.п.), их пригодные смеси и растительные масла. Каждый носитель должен быть как фармацевтически, так и физиологически приемлемым с точки зрения совместимости с другими ингредиентами и не причинять вреда субъекту. В терапевтических композициях возможно применение любых общепринятых сред или агента, за исключением случаев, когда они несовместимы с активным ингредиентом.

[172] Под термином «профилактика», как определено в настоящем документе, подразумевается обеспечение «превентивного лечения» или «профилактического лечения», а именно действия в защитной манере, для защиты против или предотвращения появления симптома заболевания или начала или прогрессирования заболевания. В некоторых вариантах осуществления «профилактическое лечение» на основе терапевтического агента вводят до начала заболевания.

[173] Следует понимать, что термины «лечить», «лечение» или их формы, используемые в настоящем документе, означают уменьшение, предотвращение, излечение, реверсию, уменьшение, ослабление, облегчение, минимизацию, подавление или прекращение пагубных эффектов заболевания или состояния или задержку появления одного или более клинических показаний заболеваний печени, как определено в настоящем документе.

[174] Термин «иммуноконъюгат», как определено в настоящем документе, относится к антителу или любому его антигенсвязывающему фрагменту согласно изобретению, конъюгированному (связанному или присоединенному) с дополнительным агентом. Иммуноконъюгаты могут быть получены любым способом, известным специалисту в данной области техники, например, путем перекрестного связывания дополнительного агента с антителом согласно изобретению или с помощью способов рекомбинантной ДНК.

[175] Термин «около» означает количество, уровень, значение, число, частоту, процент, величину, размер, долю, массу или длину, которые варьируются в приемлемых уровнях в данной области техники. В некоторых вариантах осуществления такое изменение может составлять до 30, 25, 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1% от эталонного количества, уровня, значения, числа, частоты, процента, величины, размера, доли, масса или длины. При использовании термина «около» в сочетании с диапазоном числовых значений он модифицирует указанный диапазон путем расширения верхних и нижних границ относительно приведенных численных значений.

ПРИМЕРЫ

Пример 1: Фаза 1 - фармакокинетика внутривенного (IV) введения здоровым добровольцам

[176] ФК (фармакокинетический) анализ исследования фазы 1 проводили для оценки фармакокинетики CM-101 после однократной внутривенной инфузии 0,75, 2,5, 5 и 10 мг/кг CM-101 у здоровых добровольцев. Количественное определение CM-101 в образцах плазмы проводили с использованием валидированного анализа на основе ELISA. Нижний предел количественного определения (LLOQ) CM-101 в анализируемых образцах составил 87,5 нг/мл. Фармакокинетический анализ проводили с использованием программного обеспечения PK Solver 2.0, которое было валидировано в отношении программного обеспечения SAS® версии 9.4 (SAS Institute, Кэри, Северная Каролина, США) и STATA SE версии 13.0 (STATA Corporation, Техас, США).

[177] После внутривенной инфузии здоровым добровольцам CM-101 демонстрировал двухфазную кривую концентрации в сыворотке в зависимости от времени (быстрая фаза распределения и медленная фаза выведения) (фиг. 1). ФК CM-101, по-видимому, является дозопропорциональной, и значения ФК параметров, полученные в ходе некомпартментного и компартментного анализа данных по концентрации CM-101 в зависимости от времени, приведены в таблице 1.

[178] CM-101 имеет стационарный объем распределения около 80 мл/кг и конечный объем распределения около 80-90 мл/кг. Клиренс CM-101 составляет около 2,9-3,2 мл/кг/д. Мишень-опосредованное распределение лекарственного средства (TMDD) или присутствие антител к лекарственному средству (нейтрализующих антител) не было очевидно на анализируемых кривых концентрации в зависимости от времени для CM-101, которые демонстрировали линейный терминальный наклон без очевидной кинетики TMDD или других зависимых от концентрации изменений кинетики выведения. Конечный период полужизни CM-101 составляет около 19 дней.

Таблица 1. Средние фармакокинетические параметры CM-101, вводимого внутривенно здоровым добровольцам, на основании некомпартментного фармакокинетического анализа. Параметр Единица измерения 0,75 мг/кг
среднее 0,75 мг/кг
SD (стандартное отклонение) 0,75 мг/кг
%CV (коэффициент вариации) C_max (максимальная концентрация) мкг/мл 18,3 3,1 17,2 T_max (время достижения максимальной концентрации) д 0,083 0,063 75,8 AUC_0-t мкг×д/мл 190 29 15,4 AUC_0-∞ мкг×д/мл 242 49 20,2 AUC_0-t/0-∞ - 0,791 0,042 5,3 AUMC_0-∞ мкг×д²/мл 6274 2218 35,3 MRT (среднее время удержания) д 25,4 3,6 14,4 конечная К 1/д 0,0374 0,0036 9,6 t_1/2 (период полужизни) д 18,7 2,0 11,0 V_z (объём распределения в конечной фазе выведения) мл/кг 85,0 11,6 13,7 V_ss (объём распределения в стационарном состоянии) мл/кг 79,7 10,5 13,2 CL мл/кг/д 3,19 0,61 19,2 C_max/D кг/мл 0,0244 0,0042 17,2 AUC_0-∞/D кг×д/мл 0,323 0,065 20,2

Параметр Единица измерения 2,5 мг/кг
среднее 2,5 мг/кг
SD 2,5 мг/кг
%CV C_max мкг/мл 64,6 4,4 6,8 T_max д 0,083 0,065 77,5 AUC_0-t мкг×д/мл 708 77 10,9 AUC_0-∞ мкг×д/мл 905 185 20,4 AUC_0-t/0-∞ - 0,795 0,075 9,4 AUMC_0-∞ мкг×д²/мл 23848 10787 45,2 MRT д 25,3 6,2 24,7 конечная К 1/д 0,0377 0,0091 24 t_1/2 д 19,3 4,8 24,7 V_z мл/кг 76,5 5,4 7,0 V_ss мл/кг 69,3 4,5 6,6 CL мл/кг/д 2,85 0,55 19,4 C_max/D кг/мл 0,0259 0,0018 6,8 AUC_0-∞/D кг×д/мл 0,362 0,074 20,4

Параметр Единица измерения 5 мг/кг
среднее 5 мг/кг
SD 5 мг/кг
%CV C_max мкг/мл 100,8 10,4 10,4 T_max д 0,153 0,193 126,4 AUC_0-t мкг×д/мл 1231 166 13,5 AUC_0-∞ мкг×д/мл 1573 279 17,7 AUC_0-t/0-∞ - 0,789 0,059 7,5 AUMC_0-∞ мкг×д²/мл 41614 15926 38,3 MRT д 25,9 5,4 20,9 конечная К 1/д 0,0365 0,0064 17,4 t_1/2 д 19,6 4,1 21,1 V_z мл/кг 90,8 16,9 18,6 V_ss мл/кг 82,9 13,4 16,1 CL мл/кг/д 3,27 0,66 20,2 C_max/D кг/мл 0,0202 0,0021 10,4 AUC_0-∞/D кг×д/мл 0,315 0,056 17,7

Параметр Единица измерения 10 мг/кг
среднее 10 мг/кг
SD 10 мг/кг
%CV C_max мкг/мл 206,6 28,4 13,7 T_max д 0,090 0,061 67,9 AUC_0-t мкг×д/мл 2506 324 12,9 AUC_0-∞ мкг×д/мл 3199 368 11,5 AUC_0-t/0-∞ - 0,784 0,059 7,5 AUMC_0-∞ мкг×д²/мл 84870 21703 25,6 MRT д 26,4 4,9 18,7 конечная К 1/д 0,0369 0,0076 20,6 t_1/2 д 19,5 4,3 22,2 V_z мл/кг 88,4 18,4 20,8 V_ss мл/кг 83,1 15,5 18,7 CL мл/кг/д 3,16 0,36 11,5 C_max/D кг/мл 0,0207 0,0028 13,7 AUC_0-∞/D кг×д/мл 0,320 0,037 11,5

Параметр Значение P C_max NC T_max 0,920 AUC_0-t NC AUC_0-∞ NC AUC_0-t/0-∞ NC AUMC_0-∞ NC MRT 0,956 конечная К 0,998 t_1/2 0,998 V_z 0,270 V_ss 0,085 CL 0,723 C_max/D 0,015^a AUC_0-∞/D 0,723

Значение P - для непараметрического ANOVA теста Краскела-Уоллиса

NC - не рассчитано (для параметров с дозозависимыми значениями, в лекарственных средствах с линейной фармакокинетикой)

a - статистически значимые различия между группами 2,5 мг/кг по сравнению с 5 мг/кг идентифицировали с использованием пост-теста Данна.

Пример 2: Фаза 1 - фармакокинетика подкожного (SC) введения здоровым добровольцам

[179] ФК анализ исследования фазы 1 проводили для оценки фармакокинетики CM-101 после однократной подкожной инъекции 5 мг/кг CM-101 здоровым добровольцам. Количественное определение CM-101 в образцах плазмы проводили с использованием той же методики, которая использовалась для внутривенного введения фазы 1 здоровым добровольцам.

[180] Значения фармакокинетических параметров, полученные при некомпартментном анализе данных по концентрации CM-101 в зависимости от времени, приведены в таблице 2, и CM-101 имеет кажущийся стационарный объем распределения около 134 мл/кг и конечный объем распределения около 131 мл/кг. Конечный период полужизни CM-101 составляет около 20,8 дней, и кажущийся клиренс составляет около 4,5 мл/кг/д.

[181] Сравнение фармакокинетических данных для 5 мг/кг CM-101 при внутривенном и подкожном введении указывает на последовательное фармакокинетическое поведение CM-101 в этих исследованиях (фиг. 2). На основании значений AUC (площадь под кривой «концентрация-время») в исследованиях внутривенного и подкожного введения абсолютная биодоступность CM-101 после подкожной инъекции составила около 75%.

Таблица 2. Средние фармакокинетические параметры 5 мг/кг CM-101, вводимого здоровым добровольцам, на основании некомпартментного фармакокинетического анализа. Параметр Единица измерения V101 V103 V104 V105 V106 V107 среднее SD %CV C_max мкг/мл 31,2 30,2 37,7 37,0 39,8 42,3 36,4 4,8 13 T_max д 3,0 6,0 3,0 3,0 6,0 6,0 4,5 1,6 37 AUC_0-t мкг×д/мл 711 683 926 820 1029 938 851 137 16 AUC_0-∞ мкг×д/мл 854 915 1361 1101 1547 1180 1160 264 23 AUC_0-t/0-∞ - 0,83 0,75 0,68 0,74 0,66 0,79 0,74 0,06 9 AUMC_0-∞ мкг×д²/мл 20181 27479 48839 33100 58792 30904 36549 14421 39 MRT д 23,6 30,0 35,9 30,1 38,0 26,2 30,6 5,5 18 конечная К 1/д 0,0451 0,0339 0,0283 0,0328 0,0267 0,0401 0,0345 0,0070 20 t_1/2 д 15,4 20,5 24,5 21,1 25,9 17,3 20,8 4,0 19 V_ss/F мл/кг 138,3 164,3 131,9 136,4 122,8 111,0 134,1 17,9 13 V_z/F мл/кг 129,7 161,4 129,7 138,4 120,8 105,7 131,0 18,6 14 CL/F мл/кг/д 5,85 5,47 3,67 4,54 3,23 4,24 4,50 1,01 22

Пример 3: Фаза 1b - фармакокинетика повторного внутривенного введения 2,5 мг/кг у пациентов с НАЖБП

[182] Для оценки фармакокинетики CM-101 после многократной внутривенной инфузии 2,5 мг/кг CM-101 у пациентов с НАЖБП проводили ФК анализ данных завершенной когорты с дозой 2,5 мг/кг в рамках продолжающегося исследования фазы 1b. Количественное определение CM-101 в образцах плазмы проводили с использованием той же методики, которая использовалась для внутривенного и подкожного введения фазы 1 здоровым добровольцам.

[183] Форма кривых зависимости концентрации CM-101 в сыворотке от времени у отдельных пациентов была аналогичной, со стабильными минимальными (дни 20, 41, 62, 83, 104) и пиковыми (дни 0 и 83) концентрациями CM-101 (повторные внутривенные инфузии 2,5 мг/кг CM-101 в течение около 1 часа, с 3-недельными интервалами) (фиг. 3).

[184] В этой популяции пациентов с НАЖБП CM-101, по-видимому, демонстрировал двуфазное фармакокинетическое поведение, которое было соответствующим образом описано с использованием классической двухкомпартментной фармакокинетической модели. Кинетически полученная форма кривых зависимости концентрации в сыворотке от времени, по-видимому, указывает на кинетику постепенного распределения CM-101 в организме (в течение около 4,5 дней; 4 периода полужизни альфа; таблица 3) и гораздо более медленную кинетику выведения (в течение 81 дня; 4 периода полужизни бета; таблица 3).

[185] Антитело CM-101 имеет стационарный объем распределения (объем центрального компартмента) около 45,8 мл/кг, объем периферического компартмента около 108 мл/кг и конечный объем распределения около 119 мл/кг (таблица 3).

[186] Клиренс CM-101 составляет около 4,27 мл/кг/д (таблица 3). Мишень-опосредованное распределение лекарственного средства (TMDD) или присутствие антител к лекарственному средству (нейтрализующих антител) не было очевидно на анализируемых кривых зависимости концентрации от времени для CM-101, которые не показали очевидных зависимых от концентрации изменений кинетики выведения или изменений минимальных уровней при повторных введениях.

Таблица 3. Фармакокинетические параметры CM-101 после пяти внутривенных введений 2,5 мг/кг Q3W (раз в 3 недели) Параметр Единицы измерения 2,5 мг/кг внутривенно пять введений раз в 3 недели Среднее SD %CV A мкг/мл 0,0143 0,0011 7 B мкг/мл 0,00763 0,00094 12 Альфа 1/д 0,615 0,013 2 Бета 1/д 0,0355 0,0068 19 t_1/2 Альфа д 1,13 0,02 2 t_1/2 Бета д 20,3 4,8 23 V₁ мл/кг 45,8 3,9 8 V₂ мл/кг 62,4 6,2 10 V_ss мл/кг 108,2 10,0 9 V_z мл/кг 119,4 12,2 10 CL мл/кг/д 4,27 1,05 25 * рассчитано из выхода MONOLIX с помощью инструмента Convert.xls

Пример 4: Моделирование фармакокинетики CM-101 с внутривенным введением

[187] Используя данные о воздействии из исследований, проведенных на людях (исследование фазы I с однократным внутривенным и подкожным введением до 10 мг/кг, а также повторное введение дозы 2,5 мг/кг с внутривенным введением), выполняли различные моделирования с использованием комбинаций доступных данных для оценки ожидаемых уровней концентрации при внутривенном введении CM-101, вводимого один раз в 3 недели в дозе 10 мг/кг (таблица 4). Во всех трех моделях (с использованием различных составов доступных данных) ожидаемые средние концентрации CM-101 варьировались от 117 до 150 мкг/мл, и максимальные прогнозируемые значения варьировались от 290 до 295 мкг/мл.

Таблица 4. Фармакокинетические моделирования концентрации CM-101 после восьми введений 10 мг/кг внутривенно раз в три недели Данные, используемые в ФК моделировании Исследования внутривенного и подкожного однократного введения Исследование многократного внутривенного введения Исследования внутривенного и подкожного однократного введения и исследование многократного внутривенного введения Моделируемые концентрации CM-101 мкг/мл,
Среднее
(Мин; Макс) Моделируемые концентрации CM-101 мкг/мл,
Среднее
(Мин; Макс) Моделируемые концентрации CM-101 мкг/мл,
Среднее
(Мин; Макс) внутривенно, 10 мг/кг раз в три недели
для 8 введений 150
(90; 295) 117
(71; 290) 147
(87; 293)

Пример 5: Моделирование фармакокинетики CM-101 с подкожным введением

[188] Используя данные о воздействии из исследований, проведенных на людях (исследование фазы I с однократным внутривенным и подкожным введением до 10 мг/кг, а также повторное введение дозы 2,5 мг/кг с внутривенным введением), выполняли различные моделирования с использованием комбинаций доступных данных для оценки ожидаемых уровней концентрации при подкожном введении CM-101, вводимого один раз в 1-4 недели в дозе 2,5 или 5 мг/кг (таблица 5). В обеих моделях (с использованием различных составов доступных данных) ожидаемые средние концентрации CM-101 составляли 78-79 мкг/мл и максимальные прогнозируемые значения составляли 87-88 мкг/мл.

[189] Моделирование пролонгированной повторной дозы CM-101 при 2,5 мг/кг CM-101 раз в три недели показало средние прогнозируемые пиковые концентрации CM-101 73,5 мкг/мл, что коррелирует со средним прогнозируемым воздействием при повторной дозе 5 мг/кг и уже было признано безопасным для пациентов.

[190] На фиг. 4 и 5 изображено моделирование концентрации CM-101 в сыворотке с течением времени для различных смоделированных доз подкожного введения. Прогнозируемое воздействие CM-101 после 24 повторных (Q1W (раз в неделю), Q2W (раз в две недели), Q3W (раз в три недели), Q4W (раз в четыре недели)) введений 2,5 или 5 мг/кг CM-101 подкожно достигало концентрации 80 и 160 мкг/мл в стационарном состоянии, соответственно

Таблица 5: Фармакокинетическое моделирование концентрации CM-101 после десяти введений 5 мг/кг подкожно раз в две недели Данные, используемые в ФК моделировании Исследования внутривенного и подкожного однократного введения Исследования внутривенного и подкожного однократного введения и исследование многократного внутривенного введения Моделируемые концентрации CM-101
мкг/мл,
Среднее
(Мин; Макс) Моделируемые концентрации CM-101
мкг/мл,
Среднее
(Мин; Макс) подкожное, 5 мг/кг раз в 2 недели
для 10 введений 79
(64, 88) 78
(64, 87)

Пример 6: Лечение ПСХ

[191] Данное исследование представляет собой рандомизированное, двойное слепое, плацебо-контролируемое исследование фазы 2a, направленное на оценку безопасности и эффективности CM-101 у взрослых субъектов с ПСХ крупных протоков в качестве преобладающего заболевания. Участвующие субъекты представляют собой субъектов с уровнем щелочной фосфатазы (ALP) в сыворотке по меньшей мере в 1,5 раза превышающим верхнюю границу нормы (× 1,5 ВГН). Субъекты с сопутствующим ВЗК (воспалительное заболевание кишечника) могут быть включены в исследование до тех пор, пока их заболевание является стабильным (определено как оценка по частичной шкале Мейо, равная или 3 меньше, для пациентов с язвенным колитом (ЯК) или CDAI (индекс активности болезни Крона) меньше 150 для пациентов с болезнью Крона (БК)), и если отсутствует дисплазия высокой степени злокачественности при биопсии толстой кишки в течение 18 месяцев после рандомизации или колэктомии в анамнезе (в любое время). До 45 субъектов рандомизировали для получения 10 мг/кг CM-101 или плацебо в соотношении 2:1. Рандомизацию стратифицировали на основе продолжающегося лечения урсодезоксихолевой кислотой (UDCA). Субъекты получали исследуемый препарат один раз в 3 недели в общей сложности 5 введений, в результате чего общий охват составил 15 недель. Предлагаемый дизайн исследования, продолжительность лечения и популяция пациентов являются адекватными для исследования фазы 2a при ПСХ, в котором в качестве первичных конечных точек оцениваются изменения ALP и оценок по шкале ELF.

[192] Выбранная доза для предлагаемого исследования составляет 10 мг/кг, введение осуществляют внутривенно один раз в 3 недели, введение CM-101 в соответствии с выбранной дозой и схемой введения демонстрирует клиническую пользу и безопасность у пациентов с ПСХ.

Пример 7: Лечение НАСГ

[193] Данное исследование представляет собой рандомизированное, двойное слепое, плацебо-контролируемое исследование фазы 2a, направленное на оценку безопасности и эффективности CM-101 у взрослых субъектов с НАСГ в качестве преобладающего заболевания. До 40 субъектов рандомизировали для получения 5 мг/кг CM-101 (n=25) или плацебо (n=15). Участвующие субъекты получали 8 введений CM-101 или соответствующего плацебо раз в 2 недели, обеспечивая охват лечения 17 недель. Предлагаемый дизайн исследования, продолжительность лечения и популяция пациентов являются адекватными для исследования фазы 2a при НАСГ, в котором в качестве первичных конечных точек оценивается безопасность.

[194] Выбранная доза для предлагаемого исследования составляет 5 мг/кг, введение осуществляют подкожно один раз в 2 недели, введение CM-101 в соответствии с выбранной дозой и схемой введения демонстрирует клиническую пользу и безопасность у пациентов с НАСГ.

Пример 8: Исследование фазы I с однократным внутривенным введением у здоровых добровольцев

[195] Это одноцентровое, рандомизированное, двойное слепое, плацебо-контролируемое, однодозовое исследование с повышением дозы у здоровых добровольцев было разработано для оценки безопасности, переносимости и фармакокинетики однократной внутривенной дозы CM-101 у 32 здоровых добровольцев мужского пола. Исследование включало четыре (4) группы повышения дозы, по восемь (8) субъектов в каждой, период последующего наблюдения для каждого субъекта составляло 42 дня. Тестируемые дозы составляли 0,75, 2,5, 5 и 10 мг/кг. В каждой группе дозирования субъектов рандомизировали в соотношении 3:1 для получения однократной внутривенной инфузии CM-101 (n=6) или соответствующего плацебо (n=2).

[196] В исследовании фазы I с однократным введением здоровые добровольцы проходили скрининг в течение 28 дней до введения лекарственного средства. Исследование включало 4 группы с повышающейся дозой по 8 субъектов в каждой. Первоначальная доза CM-101 составляла 0,75 мг/кг с последующим введением однократных доз 2,5, 5 и 10 мг/кг следующим группам.

[197] В каждой группе дозирования субъектов рандомизировали в соотношении 3:1 для получения однократной внутривенной инфузии CM-101 (n=6) или плацебо (n=2). По соображениям безопасности во всех группах дозирования сначала вводили дозу первым двум субъектам (один получал активное лекарственное средство и один получал плацебо в слепом режиме), а затем остальной группе (введение остальной группе дозирования осуществляли по меньшей мере через 14 дней после введения дозы первым двум пациентам).

[198] Каждый субъект получал внутривенную инфузию исследуемого лекарственного средства или плацебо утром дня дозирования (день 1). Субъекты оставались под медицинским наблюдением в отделении фазы I в течение около 24 часов после введения дозы и проходили оценку безопасности, ФК и ФД. За 42-дневный период последующего наблюдения проводили семь дополнительных амбулаторных визитов последующего наблюдения.

[199] В общей сложности 32 субъекта включали в исследование и рандомизировали в 4 группы лечения (0,75 мг/кг, 2,5 мг/кг, 5,0 мг/кг, 10 мг/кг) и 8 субъектов относились к группе плацебо. Все 32 субъекта завершили исследование в соответствии с планом.

[200] Образцы крови для оценки уровней hs-CRP отбирали перед введением дозы и в дни 7 и 35. Уровни hs-CRP находились в пределах нормального диапазона, и никаких изменений с течением времени обнаружено не было.

Пример 9: Исследование фазы I с однократным подкожным введением у здоровых добровольцев

[201] Это одноцентровое рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое однодозовое исследование у здоровых добровольцев проводили в соответствии с дизайном, аналогичным исследованию IV SAD (протокол CM-101-I-001). В исследовании оценивали безопасность, переносимость и фармакокинетику однократной подкожной дозы CM-101 у здоровых добровольцев мужского пола. В дозе 5 мг/кг CM-101 субъектов рандомизировали в соотношении 3:1 для получения однократной подкожной инъекции CM-101 (n=6) или соответствующего плацебо (n=2).

[202] В исследовании фазы I с однократным введением здоровые добровольцы проходили скрининг в течение 28 дней до введения лекарственного средства. Исследование включало оценку одной группы дозирования. Субъектов рандомизировали в соотношении 3:1 для получения однократной подкожной инъекции 5 мг/кг CM-101 (n=6) или соответствующего плацебо (n=2).

[203] Каждый субъект получал подкожную инъекцию исследуемого лекарственного средства или плацебо утром дня дозирования (день 1). Субъекты оставались под медицинским наблюдением в отделении фазы I в течение около 24 часов после введения дозы и проходили оценку безопасности, ФК и ФД. За 42-дневный период последующего наблюдения проводили семь дополнительных амбулаторных визитов последующего наблюдения.

[204] В общей сложности 8 субъектов включали в исследование и рандомизировали для получения 5,0 мг/кг CM-101 в виде подкожной инъекции (n=6) или плацебо (n=2). Все 8 субъектов завершили исследование в соответствии с планом.

Пример 10: Исследование MAD (исследование действия многократных возрастающих доз) фазы Ib, внутривенное/подкожное введение пациентам с НАЖБП

[205] Данное исследование включает оценку двух уровней дозы. Первый уровень дозы 2,5 мг/кг CM-101 вводили в виде внутривенных инфузий, за которым следовал второй уровень дозы 5 мг/кг CM-101, который вводили в виде медленных подкожных инъекций. Оба уровня дозы включают 5 введений лекарственного средства в течение 12 недель (Q3W), обеспечивая 15 недель охвата лечением. В обоих уровнях доз субъектов рандомизировали в соотношении 3:1 для получения CM-101 (n=6) (2,5 мг/кг внутривенно или 5 мг/кг подкожно) или соответствующего плацебо (n=2).

[206] В этом исследовании авторы изобретения представляют промежуточные данные по безопасности уже завершенной группы дозирования 2,5 мг/кг, получавшей внутривенную инфузию.

Исходные характеристики и демографические данные для субъектов

[207] Восемь участвующих субъектов включали двух (2) женщин и шесть (6) мужчин. Основными результатами анамнеза были заболевания, связанные с популяцией НАЖБП

Пример 11: Композиция CM-101

[208] Первоначальное исследование возможности применения композиций с высокой дозой привело к получению концентрации CM101 больше 150 мг/мл в растворах гистидинового и фосфатного буфера (pH 6,1-6,9), содержащих различные количества аргинина и глутаминовой кислоты вместе с сорбитолом или хлоридом натрия. Для всех композиций наблюдали однофазные, прозрачные, свободнотекучие, светло-желтые растворы. Осмоляльность растворов варьировалась от 306 до 365 мОсм. Важно отметить, что уровни вязкости были довольно низкими для композиций с высокими дозами и варьировались от 6,4 до 10,7 мПа×с, где более низкие значения обнаруживали в композициях, содержащих хлорид натрия, в отличие от сорбитола в качестве регулятора тоничности. Композиции с фосфатным буфером, как правило, имеют несколько более низкую чистоту, чем соответствующие композиции с гистидиновым буфером, по результатам Э-ВЭЖХ (эксклюзионная ВЭЖХ). Несколько более низкие значения мутности наблюдались при низком рН (рН 6,1) в отличие от рН 6,5 и выше. В исследовании окончательного выбора композиции оценивали четыре композиции CM101 в концентрации 175 мг/мл в композициях с гистидиновым буфером. После двенадцати недель хранения при минус 70°C, 2-8°C и 25°C уровни чистоты в соответствии с Э-ВЭЖХ соответствуют значениям t=0 для всех композиций. Расчет скорости образования примесей, как определено на основании данных Э-ВЭЖХ, показал, что предлагаемая стабильность раствора была рассчитана как около 3800 дней - или около более 10 лет - в композиции CM101 с рН 6,1, которая содержала 150 мМ аргинина и 150 мМ глутаминовой кислоты. В анализах на основании катионообменной ВЭЖХ (CEX-HPLC) было обнаружено явное предпочтение в отношении стабильности для композиций с pH 5,8 и 6,0 ADU-1604 по сравнению с композициями с более высоким pH. Расчет скорости образования примесей, как определено на основании данных катионообменной ВЭЖХ, показал, что предлагаемый раствор имеет около 600 дней - или около 1,7 года - в комопозиции CM101 с рН 6,1, содержащей 150 мМ аргинина и 150 мМ глутаминовой кислоты, до достижения 95% исходной чистоты образца. Следует отметить, что формальный предел для вариантов не был установлен, и это необходимо будет соотнести с данными по активности, а также установить приемлемый предел изменений в заряженных видах. Относительные значения активности находились в пределах вариабельности анализа (20%) для каждой композиции, подвергнутой воздействию температуры (минус 70°C, 2-8°C, 25°C), а также условий замораживания-оттаивания и встряхивания. Четких тенденций или изменений активности не наблюдалось. В целом, композиция CM101 с 10 мМ гистидина, 150 мМ аргинина, 150 мМ глутаминовой кислоты, 0,02% PS80 (полисорбат-80), pH 6,1 обеспечивает оптимальную стабильность. В таблице 6 показаны композиции, протестированные в исследовании.

Таблица 6: Тестирования композиций CM-101 Номер композиции pH Аргинин (мМ) Глутаминовая кислота (мМ) Сорбитол (%) NaCl (мМ) 0,01% PS80 10 мМ Гистидин №1 6,1 150 150 + №2 6,5 55 55 3 + №3 6,7 55 55 3 + №4 6,5 55 55 80 + №5 6,9 55 55 80 + 10 мМ Фосфат калия №6 6,1 150 150 + №7 6,5 55 55 3 + №8 6,7 30 30 4 + №9 6,5 55 55 90 + №10 6,9 55 55 90 + Контрольная композиция №11 6,3 10 мМ гистидин, 4% сорбитол, 40 мМ глицин, 0,01% PS80, pH 6,3

Пример 12: Фармакодинамическая оценка общих уровней CCL24 в сыворотке после лечения CM-101 в клиническом исследовании фазы 1B (когорта 1)

[209] Дизайн исследования: Целью данного исследования является оценка фармакодинамических свойств CM-101 путем оценки общего уровня CCL24 в сыворотке у пациентов с НАЖБП после пяти внутривенных введений CM-101 по сравнению с группой, получавшей плацебо. Восемь стабильных субъектов с НАЖБП, которые в целом находятся в хорошем состоянии здоровья, подвергали скринингу в течение периода до 28 дней до введения лекарственного средства. Исследование включало пять инфузий 2,5 мг/кг CM-101 один раз в три недели, что равнялось 15 неделям охвата лекарственным средством, и последующий 21 день наблюдения за безопасностью. Субъектов рандомизировали в соотношении 3:1 для получения пяти внутривенных инфузий CM-101 (n=6) или плацебо (n=2).

[210] Обработка образца: Образец крови объемом 15 мл отбирали в день дозирования 1 (TRT1) и во все оставшиеся дни дозирования (TRT 2-5) в момент времени перед введением дозы. Дополнительный образец крови объемом 5 мл отбирали через 2 часа после введения дозы для определения фармакодинамических параметров. Образцы крови объемом 15 мл также отбирали во время визитов 1 и 2 последующего наблюдения (визит 7/окончание лечения (EOT) и визит 8/окончание исследования (EOS)). Сразу после взятия образца пробирку осторожно переворачивали на 180° и назад, 5-6 раз. Образцы оставляли для свертывания в вертикальном положении не менее 30 минут, но не более 2 часов. Образцы центрифугировали в течение 15 минут при 1000×g при комнатной температуре (18-25°C). Образцы сыворотки из каждой временной точки отбирали аликвотами с помощью одноразовой пипетки в криофлаконы объемом 2×2 мл с по меньшей мере 0,5 мл в первом криофлаконе, и остальная часть во втором криофлаконе. Образцы помечали специальной этикеткой, содержащей следующие данные:

[211] Измерение общих уровней CCL24 человека: уровни CCL24 в образцах сыворотки тестировали после исследования возможности применения и валидации. Общий CCL24 измеряли в следующие моменты времени: до введения дозы и через 2 часа после введения дозы для визитов 2-5 лечения, а также визитов EOT и EOS.

[212] Результаты:

[213] Пациентам с НАЖБП вводили 2,5 мг/кг CM-101 или соответствующее плацебо с использованием внутривенной инфузии каждые 3 недели в течение 5 последовательных обработок. Для оценки целевого взаимодействия антитела CM-101 с его мишенью CCL24, авторы изобретения измеряли уровни CCL24 в кровотоке. Общие уровни CCL24, которые представляют уровни как свободного CCL24, так и CM-101-связанного CCL24, оценивали в моменты времени до и после введения лекарственного средства.

[214] Взаимодействие с антителом приводит к секвестрации хемокина из внутрисосудистого пространства с образованием комплексов антитело-мишень и индуцирует повышенные общие уровни хемокина в кровотоке. Образование этих комплексов блокирует активность хемокинов, что приводит к снижению передачи сигналов и ингибированию его эффектов. Эти комплексы следуют кинетическому паттерну антитела, и затем устраняются/выводятся из кровотока, снижая доступность мишени. При многократных введениях формируется новое равновесие целевой продукции и комплексной чистоты, диктующее снижение доступности мишени для биологической активности.

[215] Обработка CM-101 приводила к повышению уровней CCL24 в кровотоке, оцениваемому с помощью валидированного анализа ELISA, который распознает как свободный CCL24, так и комплексы CM-101-CCL24 (т.е. общий уровень CCL24). В каждом введении CM-101 величина увеличения новообразованных комплексов в кровотоке пропорциональна доступному свободному CCL24.

Пример 13: Фармакодинамическая оценка в клиническом исследовании фазы 1 общих уровней CCL24 в сыворотке после лечения CM101

[216] Дизайн исследования: Целью данного исследования является оценка фармакодинамических свойств CM-101 путем оценки общего уровня CCL24 в сыворотке у здоровых пациентов после однократного внутривенного введения CM-101 по сравнению с группой, получавшей плацебо. 32 здоровых добровольца подвергали скринингу в течение 28 дней до введения лекарственного средства. Исследование включало 4 группы с повышающейся дозой по 8 субъектов в каждой. Первоначальная доза CM-101 составляла 0,75 мг/кг с последующим внутривенным введением однократных доз 2,5, 5 и 10 мг/кг следующим группам. В каждой группе дозирования субъектов рандомизировали в соотношении 3:1 для получения однократной внутривенной инфузии CM-101 (n=6) или плацебо (n=2). В общей сложности 24 субъекта получали лекарственное средство (6 на когорту) и 8 субъектов получали плацебо.

[217] Обработка образцов: образцы крови (20 мл) отбирали в следующие моменты времени: в день дозирования: до введения дозы, через 1 час, 8 часов и 24 часа после окончания инфузии (все образцы крови после инфузии отбирали в течение ±10 минут от назначенной временной точки), а также в день 4, день 7, день 11, день 14 и день 21, день 35 и день 42. Сразу после взятия образца пробирку осторожно переворачивали на 180° и назад, 5-6 раз. Образцы оставляли для свертывания в вертикальном положении не менее 30 минут, но не более 2 часов. Образцы центрифугировали в течение 15 минут при 1000×g при комнатной температуре (18-25°C).

[218] Временные точки эксперимента: до введения дозы; 8 часов; день 4; день 11; день 21; день 35; день 42

[219] Измерение общих уровней CCL24 человека: уровни CCL24 в образцах сыворотки тестировали после исследования возможности применения и валидации. Общий CCL24 измеряли в следующие моменты времени: до введения дозы, 8 часов, 4 дня, 11 дней, 21 день, 35 дней и 42 дня. Среднее значение процентного изменения рассчитывали отдельно для каждой группы дозирования: 0,75, 2,5, 5 и 10 мг/кг и для добровольцев, получавших плацебо.

[220] Результаты:

[221] Во время исследования CM-101 вводили в четырех повышающихся дозах: 0,75, 2,5, 5 и 10 мг/кг. Каждая когорта включала 6 субъектов, получавших лекарственное средство, и 2 субъекта, получавших плацебо. В общей сложности 24 субъекта получали однократное введение лекарственного средства (6 на когорту) и 8 субъектов получали плацебо. Общие уровни CCL24 представляют уровни как свободного CCL24, так и CM-101-связанного CCL24. Оценка уровней для общих уровней CCL24 в различные моменты времени до и после введения лекарственного средства выявила значительное дозозависимое увеличение общих уровней CCL24 из-за связывания CM-101 с CCL24 в кровотоке и его секвестрации из внутрисосудистого пространства. Общие уровни CCL24 достигали пика через 8 часов, затем постепенно снижались до последней испытанной временной точки (день 42). Общие уровни CCL24 достигли среднего пика (изменения относительно исходного уровня) повышения через 8 часов, который был дозозависимым у субъектов, получавших 0,75, 2,5, 5 и 10 мг/кг, соответственно (фиг. 6A-6E).

Пример 14: Оценка фармакодинамики общих уровней CCL24 в сыворотке после подкожного введения CM-101

[222] Дизайн исследования: Целью данного исследования является оценка фармакодинамических свойств CM-101 путем оценки общего уровня CCL24 в сыворотке у здоровых субъектов после однократного подкожного введения CM-101 по сравнению с группой, получавшей плацебо. 8 здоровых добровольца проходили скрининг в течение 28 дней до введения лекарственного средства. Исследование включало одну группу дозирования из 8 субъектов. Доза CM-101 составляла 5 мг/кг при подкожном введении. Субъектов рандомизировали в соотношении 3:1 для получения однократной подкожной инъекции CM-101 (n=6) или плацебо (n=2).

[223] Обработка образцов: Отбор образцов цельной крови выполняли в трех 5 мл (всего 15 мл) пробирках для отделения сыворотки (SST) (без добавок) в следующие моменты времени: до введения дозы, 24 часа, 4 дня, 7 дней, 11 дней, 14 дней, 21 день, 35 дней, 42 дня. Сразу после взятия образца пробирку осторожно переворачивали на 180° и назад, 5-6 раз. Образцы оставляли для свертывания в вертикальном положении не менее 30 минут, но не более 2 часов. Образцы центрифугировали в течение 15 минут при 1000×g при комнатной температуре (18-25°C). Образцы сыворотки из каждой временной точки отбирали аликвотами с помощью одноразовой пипетки в криофлаконы объемом 2×2 мл с по меньшей мере 0,5 мл в первом криофлаконе, и остальная часть во втором криофлаконе.

[224] Временные точки эксперимента: до введения дозы; 24 часа; день 4; день 7; день 11; день 14; день 21; день 35; день 42.

[225] Измерение общих уровней CCL24 человека: уровни CCL24 в образцах сыворотки тестировали после восстановления параметров валидации и КК (контроля качества) в следующие моменты времени: до введения дозы, 24 часа, день 4, день 7, день 11, день 14, день 21, день 35 и день 42.

[226] Общие уровни CCL24 рассчитывали как изменение относительно исходного уровня (до введения дозы) для каждого индивидуума.

[227] РЕЗУЛЬТАТЫ:

[228] Во время исследования здоровым добровольцам вводили однократную инъекцию 5 мг/кг CM-101. Каждая когорта включала 6 субъектов, получавших лекарственное средство, и 2 субъекта, получавших плацебо. Общие уровни CCL24 представляют уровни как свободного CCL24, так и CM-101-связанного CCL24. Оценка уровней для общих уровней CCL24 в различные моменты времени до и после введения лекарственного средства выявила значительное увеличение уровней CCL24, отражающее связывание CM-101 с CCL24 в кровотоке. Общие уровни CCL24 (фиг. 7) достигали максимальной концентрации через четыре дня после обработки. Постепенное снижение общих уровней CCL24 наблюдалось со дня 7 до последней временной точки, протестированной на день 42. У здоровых добровольцев, получавших плацебо, общие уровни CCL24 в сыворотке оставались стабильными в ходе исследования.

[229] CM-101 доступен в двух различных композициях, позволяющих как внутривенное (IV), так и подкожное (SC) введение. На основании данных, собранных в предыдущем клиническом исследовании фазы 1 с использованием IV лекарственной композиции (CM-101-I-001), авторы изобретения смогли сравнить общие уровни CCL24 в сыворотке у здоровых добровольцев, которым вводили либо 5 мг/кг CM-101 путем инфузии (IV лекарственная композиция), либо путем инъекции (SC лекарственная композиция) (фиг. 8 и 9). При внутривенном введении общий CCL24 увеличивался очень быстро, в течение нескольких часов после введения дозы, с последующим постепенным снижением CCL24 с течением времени (в зависимости от ФК профиля). При подкожном введении повышение общего уровня CCL24 было более постепенным, достигая пика через 4-7 дней после введения дозы, который оставался стабильным до дня 11 с последующим постепенным снижением (в зависимости от ФК). При сравнении площади под кривой (AUC) для обоих введений авторы изобретения обнаружили очень схожую картину между связыванием с мишенью и биодоступностью при подкожном введении по сравнению с внутривенным введением, что в основном связано с быстрым увеличением при внутривенном введении по сравнению с умеренным увеличением при подкожном введении (таблица 7). В таблице показан расчет средней AUC у 6 здоровых добровольцев, получавших 5 мг/кг CM-101 путем внутривенного или подкожного введения.

Таблица 7: Сравнение AUC общих уровней CCL24 у здоровых добровольцев, получавших однократную дозу 5 мг/кг CM-101 путем внутривенного (IV) или подкожного (SC) введения. CM-101 5 мг/кг SC CM-101 5 мг/кг IV Исходный уровень 0 0 Общая площадь 181760 239894 Стандартная ошибка 10022 15588 95% доверительный интервал от 162118 до 201402 от 209341 до 270447

Пример 15: CM-101 демонстрирует снижение уровня биомаркеров фиброза в сыворотке в рандомизированном, контролируемом многодозовом исследовании фазы 1b у пациентов с НАЖБП

[229] [229] Способы: В этом контролируемом рандомизированном двойном слепом одноцентровом исследовании фазы 1b оценивали безопасность, переносимость, ФК, антитела к лекарственному средству и экспериментальную фармакодинамику многократных введений CM-101 у 16 пациентов с НАЖБП с нормальными ферментами печени (см. пример 10 выше). Средний возраст получавших лечение субъектов составил 49,5±10,8 лет (56% мужчин) с аналогичными демографическими и лабораторными параметрами в исследуемых группах. Пациенты получали пять введений CM-101 (каждые 3 недели) 2,5 мг/кг внутривенно (6 относительно 2 случаев соответствующего плацебо) или 5 мг/кг подкожно (6 относительно 2) и после лечения наблюдались 42 дня, с анализом неинвазивных фиброзных параметров и ФК. А именно, образцы сыворотки анализировали на маркеры оборота коллагена (Pro-C3, Pro-C4, C3M) и биомаркеры фиброза (TIMP-1, TIMP-2, PDGF AA) с использованием мультиплекса (Millipore). Фармакокинетику (ФК) измеряли с помощью ELISA для уровней CM-101 в сыворотке. Эластографию предварительно получали с использованием Fibroscan.

[230] [230] Результаты:

[231] [231] Было обнаружено, что пять повторных введений CM-101 безопасны и хорошо переносятся с точки зрения как доз, так и режимов введения. Все зарегистрированные нежелательные явления были легкой или умеренной степени тяжести (о тяжелых нежелательных явлениях (SAE) не сообщалось). Одно SAE, не связанное с приемом лекарственного средства, было зарегистрировано в группе, получавшей подкожную дозу (менингиома), что привело к досрочному прекращению приема лекарственного средства пациентом. Реакций в месте инъекции при подкожном и внутривенном введении зарегистрировано не было.

[232] [232] После лечения было показано дозопропорциональное увеличение уровней CM-101 в сыворотке (Фиг. 10).

[233] [233] Кроме того, после обработки CM-101 (с любой дозой) было отмечено снижение биомаркеров оборота коллагена и фиброза. Данные для обеих доз были объединены, и каждое изменение маркера относительно исходного уровня (%) представлено в виде медианного значения ± IQR (вероятное отклонение).

Как показано на фигуре 11, лечение CM-101 приводило к снижению Pro-C3 (-4,5%), Pro-C4 (-11,8%) и C3M (-4,7%) по сравнению с отсутствием изменений или незначительным повышением в группе, получавшей плацебо. Аналогичным образом, как показано на Фигуре 12, TIMP-1, TIMP-2 и PDGF AA были снижены на 10,5%, 4,4% и 10,6% соответственно, в то время как группа плацебо сохраняла аналогичную картину незначительного повышения. Как показано на фиг. 13, данные FibroScan коррелируют с эффектом на биомаркеры со средним снижением эластичности печени на 14,1%.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> ChemomAb Ltd.

<120> Способ лечения с использованием антитела против CCL24

<130> 300443

<150> US 63/013,793

<151> 2020-04-22

<160> 12

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> человеческое

<400> 1

Asn Ser Gly Met Asn

1 5

<210> 2

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> человеческое

<400> 2

Trp Ile Asn Thr Tyr Asn Gly Glu Pro Thr Tyr Thr Asp Asp Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 3

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> человеческое

<400> 3

His Ser Tyr Gly Ser Ser Tyr Ala Met Asp Asn

1 5 10

<210> 4

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> человеческое

<400> 4

Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp Gly Asp Ser Tyr Met Asn

1 5 10 15

<210> 5

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> человеческое

<400> 5

Val Ala Ser Asn Leu Lys Ser

1 5

<210> 6

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> человеческое

<400> 6

Gln Gln Ser Asn Glu Glu Pro Trp Thr

1 5

<210> 7

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> человеческое

<400> 7

Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Arg Ala Ser Gly Tyr Pro Phe Thr Asn Ser

20 25 30

Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Asn Gly Glu Pro Thr Tyr Thr Asp Asp Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Ile Asn Asn Leu Arg Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Ser His Ser Tyr Gly Ser Ser Tyr Ala Met Asp Asn Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 8

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> человеческое

<400> 8

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp

20 25 30

Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Val Ala Ser Asn Leu Lys Ser Gly Ile Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn

85 90 95

Glu Glu Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 9

<211> 360

<212> ДНК

<213> человеческое

<400> 9

cagattcagc tggtgcagtc cggccctgag ctgaagaaac ctggcgcctc cgtgaaggtg 60

tcctgcagag cttccggcta ccccttcacc aactccggca tgaactgggt caagcaggcc 120

cctggcaagg gcctgaagtg gatgggctgg atcaacacct acaacggcga gcccacctac 180

accgacgact tcaagggcag attcgccttc tccctggaaa cctccgcctc caccgcctac 240

ctgcagatca acaacctgcg gaacgaggac accgccacct acttttgcgc ctcccactcc 300

tacggctcca gctacgccat ggacaattgg ggccagggca cctccgtgac cgtgtctagc 360

<210> 10

<211> 333

<212> ДНК

<213> человеческое

<400> 10

gatatcgtgc tgacccagtc ccctgactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagagccacc 60

atcaactgca aggcctccca gtccgtggac tacgacggcg actcctacat gaactggtat 120

cagcagaagc ccggccagcc ccccaagctg ctgatctacg tggcctccaa cctgaagtcc 180

ggcatccctg ccagattctc cggctctggc tctggcaccg actttaccct gaccatctcc 240

agcctgcagc ccgaggactt cgccacctac tactgccagc agtccaacga ggaaccctgg 300

acctttggcg gaggcaccaa ggtggaaatc aag 333

<210> 11

<211> 450

<212> БЕЛОК

<213> человеческое

<400> 11

Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Arg Ala Ser Gly Tyr Pro Phe Thr Asn Ser

20 25 30

Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Asn Gly Glu Pro Thr Tyr Thr Asp Asp Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Ile Asn Asn Leu Arg Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Ser His Ser Tyr Gly Ser Ser Tyr Ala Met Asp Asn Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp

210 215 220

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly

225 230 235 240

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

245 250 255

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu

260 265 270

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His

275 280 285

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg

290 295 300

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys

305 310 315 320

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu

325 330 335

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

340 345 350

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

355 360 365

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

370 375 380

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

385 390 395 400

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

405 410 415

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

420 425 430

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

435 440 445

Gly Lys

450

<210> 12

<211> 218

<212> БЕЛОК

<213> человеческое

<400> 12

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp

20 25 30

Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Val Ala Ser Asn Leu Lys Ser Gly Ile Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn

85 90 95

Glu Glu Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg

100 105 110

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln

115 120 125

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr

130 135 140

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser

145 150 155 160

Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr

165 170 175

Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys

180 185 190

His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro

195 200 205

Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<---

Группа изобретений относится к способу лечения первичного склерозирующего холангита (ПСХ) у субъекта-человека. Способ предусматривает введение гуманизированного моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции субъекту-человеку в дозе 10 мг/кг или 20 мг/кг. Моноклональное антитело против CCL24 содержит тяжелую цепь в соответствии с SEQ ID NO: 11 и легкую цепь в соответствии с SEQ ID NO: 12. Фармацевтическая композиция для лечения ПСХ содержит от 1 до 500 мг/мл указанного моноклонального антитела против CCL24. Также предложен набор для лечения ПСХ. Изобретения обеспечивают клиническую пользу и безопасность у пациентов с ПСХ, приводя к увеличению общего уровня CCL24 в сыворотке по сравнению с исходным общим уровнем CCL24 и к уменьшению уровней одного или более маркеров фиброза или воспаления по сравнению с их исходным уровнем. 5 н. и 27 з.п. ф-лы, 13 ил., 7 табл., 15 пр.

1. Способ лечения первичного склерозирующего холангита (ПСХ) у субъекта-человека, включающий введение эффективного количества гуманизированного моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции, где моноклональное антитело против CCL24 содержит тяжелую цепь в соответствии с SEQ ID NO: 11 и легкую цепь в соответствии с SEQ ID NO: 12, и указанное моноклональное антитело против CCL24 вводят в дозе 10 мг/кг или 20 мг/кг.

2. Применение гуманизированного моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции в способе лечения первичного склерозирующего холангита (ПСХ) у субъекта-человека, где указанный способ включает введение эффективного количества указанного моноклонального антитела против CCL24 или его фармацевтической композиции субъекту-человеку, где моноклональное антитело против CCL24 содержит тяжелую цепь, имеющую 100% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 11, и легкую цепь, имеющую 100% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 12, и указанное моноклональное антитело против CCL24 вводят в дозе 10 мг/кг или 20 мг/кг.

3. Способ или применение по любому из пп. 1, 2, где моноклональное антитело против CCL24 вводят подкожно.

4. Способ или применение по любому из пп. 1, 2, где моноклональное антитело против CCL24 вводят внутривенно.

5. Способ или применение по любому из пп. 1-4, где моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в одну-четыре недели.

6. Способ или применение по п. 5, где моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в две недели.

7. Способ или применение по п. 5, где моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в три недели.

8. Способ или применение по п. 5, где моноклональное антитело против CCL24 вводят один раз в четыре недели.

9. Способ или применение по любому из пп. 1-8, где моноклональное антитело против CCL24 вводят в течение по меньшей мере четырех недель.

10. Способ или применение по п. 9, где моноклональное антитело против CCL24 вводят в течение по меньшей мере 15 недель.

11. Способ или применение по п. 9, где моноклональное антитело против CCL24 вводят в течение по меньшей мере 24 недель.

12. Способ или применение по любому из пп. 1-11, где введение моноклонального антитела против CCL24 увеличивает общий уровень CCL24 в сыворотке на 4 день после введения до по меньшей мере 150% от исходного общего уровня CCL24 в сыворотке до введения моноклонального антитела против CCL24.

13. Способ или применение по любому из пп. 1-12, где указанный способ дополнительно включает стадию оценки уровня одного или более циркулирующих маркеров фиброза для определения улучшения состояния печени субъекта.

14. Способ или применение по п. 13, где один или более циркулирующих маркеров фиброза выбраны из группы, состоящей из плазменной аланинаминотрансферазы (ALT), щелочной фосфатазы (ALP), аспартатаминотрансферазы (AST), PRO-C3, PRO-C4, PRO-C5, C3M, цитокератина 18 (CK18), аминотерминального пропептида проколлагена типа III (PIIINP), гиалуроновой кислоты (HA), тканевого ингибитора металлопротеиназ 1 (TIMP-1), тромбоцитарного фактора роста (PDGF), тканевого ингибитора металлопротеиназ 2 (TIMP-2), γ-глутамилтрансферазы (GGT), билирубина, C-реактивного белка (CRP), скорости оседания эритроцитов (ESR) и прокальцитонина (PCT).

15. Способ или применение по п. 13 или 14, где один или более циркулирующих маркеров фиброза измеряют с помощью анализа крови на генерализованный фиброз печени (ELF).

16. Фармацевтическая композиция для лечения первичного склерозирующего холангита (ПСХ), содержащая от 1 до 500 мг/мл моноклонального антитела против CCL24, содержащего тяжелую цепь согласно SEQ ID NO: 11 и легкую цепь согласно SEQ ID NO: 12.

17. Фармацевтическая композиция по п. 16, содержащая от 100 до 250 мг/мл моноклонального антитела против CCL24.

18. Фармацевтическая композиция по п. 17, содержащая 175 мг/мл моноклонального антитела против CCL24.

19. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 16-18, содержащая гистидиновый буфер, необязательно в концентрации 10 мМ.

20. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 16-19, содержащая буфер на основе фосфата натрия или калия, необязательно в концентрации 10 мМ.

21. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 16-20, дополнительно содержащая аргинин, необязательно в концентрации от 30 до 200 мМ или необязательно в концентрации 150 мМ.

22. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 16-21, дополнительно содержащая глутаминовую кислоту, необязательно в концентрации от 30 до 200 мМ или необязательно в концентрации 150 мМ.

23. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 16-22, дополнительно содержащая сорбитол, необязательно в количестве 4%.

24. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 16-23, дополнительно содержащая глицин, необязательно в концентрации от 10 до 100 мМ или необязательно в концентрации 40 мМ.

25. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 16-24, дополнительно содержащая полисорбат, необязательно полисорбат-80, необязательно в количестве 0,02% или 0,01%.

26. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 16-25, имеющая pH от 5 до 8.

27. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 16-25, имеющая pH от 6 до 7, необязательно 6,1 или 6,3.

28. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 16-27, где фармацевтическая композиция поставляется в форме стандартной дозы, имеющей объем заполнения от 0,2 до 2 мл или от 5 до 20 мл.

29. Способ лечения первичного склерозирующего холангита (ПСХ) у субъекта-человека, включающий введение эффективного количества фармацевтической композиции по любому из пп. 16-28.

30. Способ по п. 29, где стадия введения включает подкожное введение.

31. Способ по п. 29, где стадия введения включает внутривенное введение.

32. Набор для лечения первичного склерозирующего холангита (ПСХ), содержащий фармацевтическую композицию по любому из пп. 16-28 и инструкции по применению.