Способ идентификации @ -уробилина Советский патент 1983 года по МПК G01N33/48 

со

00 01

ьэ

Изобретение относится к медицине а именно к исследовани о биологических веществ, и предназначено для определения О-уробилина в биологических жидкостях.

Известен способ идентификации D-уробилина с помощью электрофореза пробы биологической жидкости 1.

Однако этот способ трудоемок, длителен в исполнении (затраты времни до 24 ч)., не дает возможности ПРОВОДИТЬ массовые обследования. мало специфичен в отношении D-уроблиновой фракции.

Известен способ опоеделения О -убилина на основе использования реак ции с хлорным железом 2.

Однако осуществление известного способа требует достаточно много времени (до 2,5 ч;, а также определенного количества химических реакти ВОВ, что ограничивает возможность массового обследования больных.

Целью изобретения является сокращение времени исследования.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу идентификации D - уробилина в биологической жидкости, пробу жидкости помещают в кварцевую кювету, облучают ультрафиолетовым светом (УФ) в диапазоне 300385 им и по флуоресценции в красной или оранжевой Области идентифицируют D-уробилин.

Способ осуществляют следующим образом.

Берут 2,5 мл биологической жидкое ти (сыворотка крови, моча ),помещают ее в кварцевую кювету, облучают ультрафиолетовым светом в диапазоне 300-385 нм 1 мин и оценивают с помощью флюориметра любой марки. Может быть использована и визуальная оценка в затемненной камере.

При регистрации красной и оранжевой флуоресценции определяют наличие D -уробилина. Оранжево-красное свечение свидетельствует о высокой концентрацииD-уробилина. При отсутствии D -уробилина наблюдается зеленая флуоресценция.

Пример. Больная 57 лет. Первоначальный диагноз - вирусный гепатит. Болезнь протекает остро: высокая желтуха, боли в животе, тошнота, рвота, зуд. Диагноз вирусного

гепатита снят, поставлен диагноз рак головки поджелудочной железы.

Для подтверждения диагноза больной проводят диагностику noD Уробилину предложенным способом. У больной берут 2,5 мл мо.чи, помещают в кварцевую кювету на пути ультрафиолетового света с длиной волны 300385 нм в течение 1 мин. Визугшьно регистрируют оранжево-красную флуоресценцию, что указывает на наличие большого количестваD-уробилина у больной, и подтверждает диагноз. Правильность поставленного диагноза подтверждается мезобиливиолиновой реакций, с помощью которой и определяется точное содержаниеD-уробилина в моче и которое, в данном случае, равняется 40%.

П р и м е р 2 . Больной 45. лет, поступил в терапевтическую клинику с неясным диагнозом. Состояние средней тяжести, жалуется на отсутствие аппетита, плохой сон. Других жалоб не предъявляет..

Произведено клиническое и лабораторное обследование. Состояние сердечно-сосудистой системы, легких желудка, почек в норме. Больному назначают лабораторное исследование среди которых исследование наличия D-уробилина в биологических жидкостях. Исследование проводят в лаборатории кафедры инфекционных болезней. У больного берут из локтевой вены 7 мл крови; 2,5 сы:воротки крови .помещают в кварцевую кювету на пути ультрафиолетового света с длиной волны 300-385 нм в течение 1 йи Визуально регистрируют красную флуоресценцию, что указывает на наличие D-уробилина у больного. Дополнительно проводят мезобиливиолиновую реакцию, результаты которой подтверждают наличие)- уробилина в количестве 75%. На основании данных и дополнительных клинических исследований ставят диагноз - первичный рак печени.

Предлагаемым способом проведено 620 исследований биологических жидкостей Ссыворотки крови и мочи ) на О уробилин.

Результаты индикации D-уробилина в биологических жидкостях представлены в таблице.

СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ D-УРОБИЛИНА в биологической жидкости, отличающийся тем, что, с целью сокращения времени-исследования, пробу жидкости помещают в кварцевую кювету, облучают ультрафиолетовым светом в диапазоне 300-385 им. и по флуоресценции в красной или оранжевой области идентифицируют .0-уробилин. г

Больные опухолевыми желтухами .

285

285 3 . 10138 У 50 больных опухолевыми желтухами было определено повышенное содержание данной фракции по красной и оранжевой флуоресценции,У всех больных надежность способа была подтверждена мезобиливиолиновой. реак-5 цией. Сыворотка крови доноров, так же как и сыворотка крови больных вирусными гепатитами,. не содержащая О-уробилина, флуоресцировала зеленым цветом.10 Время определенияD-уробилина по предлагаемому способу 20 мин, 2 по сравнению с 2 у по известному способу. Отпадает необходимость в химических реактивах. Для его выполнения достаточно иметь источник УФоблучения и флуориметр любой маркИ| а при отсутствии последнего возможна визуальная оценка в затаи1ненной камере. Простота,-экономичность, скорость позволяют применять предложенный способ для быстрого и надежного определения D-уробилиновой фракции как в стационаре, так и в амбулаторных условиях.